CN115702921A - 一种用于预防肝癌的中药组合物及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种用于治疗肝癌的中药组合物，所述中药组合物包括：沙参，麦冬，党参，黄芪，白花蛇舌草，七叶一枝花，白术，茯苓，当归，熟地黄。本发明还提供了所述中药组合物的制备方法及其制药用途。实验证明，本发明的中药组合物对肝癌、特别是肝细胞癌具有明显的预防作用。

Description

一种用于预防肝癌的中药组合物及其应用

技术领域

本发明属于制药技术领域。具体而言，本发明涉及一种预防肝癌的中药组合物及其制备方法和制药用途。

背景技术

肝癌是我国常见的恶性肿瘤之一，临床上根据组织学类型将肝癌分为肝细胞癌、胆管细胞癌和混合性肝癌，其中肝细胞癌(HCC)最为多见，约占原发性肝癌的90％以上，是原发性肝癌的最主要类型。

肝细胞癌具有高发病率、起病隐匿等特点，在我国的发病率和死亡率一直居高不下，且死亡人数呈上升趋势，是我国一项重大的健康问题，严重降低患者的生活质量，影响居民的生命健康，造成巨大的社会及经济负担。在肝细胞癌早期，手术切除是最佳治疗手段，但由于医疗环境及患者防患意识薄弱等原因，疾病发现时往往已处于中晚期，此时手术切除疗效有限，诸如肝动脉化疗栓塞(TACE)等其他治疗手段也可能有疾病复发及转移等风险。

肝癌前病变是近年来研究比较广泛的领域，简言之是指肝组织癌变前所发生的一系列变化，其发生发展受多种因素的调控，包括环境因素、基因突变、信号通路及其所调控的细胞因子等，是一个多因素、多步骤、多途径的病变过程。一般认为，肝癌前病变尚可存在逆转的可能性，因此被认为是预防及治疗HCC的理想时期。

本领域仍然存在对肝细胞癌、特别是在肝癌前病变阶段发挥预防作用的新型药物的需求，以帮助实现肝癌的早期有效治疗。

发明内容

针对上述技术问题，本发明人从探讨肝癌的发病及病理机制出发，经过大量研究和实验，提出了一种新的药物，该药物为纯中药复方制剂，能够通过阻断肝癌前病变来预防肝癌、特别是预防肝细胞癌的发生。

具体而言，本发明的技术方案如下：

一方面，本发明提供了一种用于预防肝癌的中药组合物，所述中药组合物的原料药包括：沙参，麦冬，党参，黄芪，白花蛇舌草，七叶一枝花，白术，茯苓，当归，熟地黄。

优选地，所述肝癌为肝细胞癌。

在本发明中，所述预防肝癌包括预防肝癌的发生；优选地，所述预防肝癌发生为预防肝硬化发展为肝癌。

优选地，以重量份数计，所述中药组合物的原料药包括：沙参9至15 份，麦冬9至20份，党参12至30份，黄芪12至40份，白花蛇舌草20至40份，七叶一枝花6至15份，白术6至20份，茯苓10至15份，当归6 至12份，熟地黄9至15份。

更优选地，以重量份数计，所述中药组合物的原料药包括：沙参12至 15份，麦冬12至15份，党参15至18份，黄芪15至18份，白花蛇舌草 30至40份，七叶一枝花12至15份，白术18至21份，茯苓12至15份，当归9至12份，熟地黄12至15份。

根据本发明的具体实施方式，以重量份数计，所述中药组合物的原料药包括：沙参15份，麦冬15份，党参15份，黄芪15份，白花蛇舌草30份，七叶一枝花15份，白术20份，茯苓15份，当归9份，熟地黄15份。

例如，以g为单位，本发明提供的中药组合物的原料药可以包括：沙参 15g，麦冬15g，党参15g，黄芪15g，白花蛇舌草30g，七叶一枝花15g、白术20g、茯苓15g、当归9g、熟地黄15g。

优选地，本发明的中药组合物由以上重量份数计的原料药制成。

在临床上，本发明的中药组合物可以经中药领域常规制药方法简单加工后作为药物使用。例如，本发明的中药组合物可以加工成药物制剂，如片剂、胶囊剂、散剂或颗粒剂等。在优选的实施方案中，可以选择汤剂作为本处方的剂型。例如可以将本发明中药组合物的各原料药直接水煎，作为汤剂使用。

因此，本发明的中药组合物可以由包括以下步骤的制备方法制得：按比例称取各原料药，加水煎煮后取煎煮液。优选地，所述制备方法还可包括在煎煮前浸泡原料药；和/或，在煎煮后过滤和/或浓缩煎煮液。

优选地，所述方法包括：按比例称取各原料药，先加水浸泡原料药，然后进行煎煮，其中加水量为浸泡后淹没原料药2-3cm，或者加水量为与原料药的8-12:1、优选10:1的体积(ml)重量(g)比，煎煮得到体积为所加水体积的 1/3至1/5、优选1/4的煎煮液。

根据本发明的具体实施方式，按比例称取各原料药，加水量与药量比约为10:1。例如，以g为单位，本发明提供的中药组合物的原料药总重量164g (沙参15g，麦冬15g，党参15g，黄芪15g，白花蛇舌草30g，七叶一枝花 15g、白术20g、茯苓15g、当归9g、熟地黄15g)，加水约1600ml，浸泡30min，武火煎煮10min后改文火煎煮30min，平均分为两份，每份约200ml，分早晚两次服用。也可分两次煎煮，即第一次煎煮加水1200ml，浸泡30min后，大火煎煮10分钟后改文火煎煮20min；第二次煎煮加水400ml，大火煎煮5 分钟后改文火煎煮15min，将两次煎煮药物混匀，平均分为两份，每份约 200ml，分早晚两次服用。

因此，另一方面，本发明提供了一种用于预防肝癌的中药组合物的制备方法，所述方法包括：按比例称取本发明提供的所述中药组合物的各原料药，加水煎煮后取煎煮液。优选地，所述制备方法还可包括在煎煮前浸泡原料药；和/或，在煎煮后过滤和/或浓缩煎煮液。

优选地，所述方法包括：按比例称取各原料药，先加水浸泡原料药，然后进行煎煮，其中加水量为浸泡后淹没原料药2-3cm，或者加水量为与原料药的8-12:1、优选10:1的体积(ml)重量(g)比，煎煮得到体积为所加水体积的 1/3至1/5、优选1/4的煎煮液。

根据本发明的具体实施方式，按比例称取各原料药，加水量与药量比约为10:1。例如，以g为单位，本发明提供的中药组合物的原料药总重量164g (沙参15g，麦冬15g，党参15g，黄芪15g，白花蛇舌草30g，七叶一枝花 15g、白术20g、茯苓15g、当归9g、熟地黄15g)，加水约1600ml，浸泡30min，武火煎煮10min后改文火煎煮30min，平均分为两份，每份约200ml，分早晚两次服用。也可分两次煎煮，即第一次煎煮加水1200ml，浸泡30min后，大火煎煮10分钟后改文火煎煮20min；第二次煎煮加水400ml，大火煎煮5 分钟后改文火煎煮15min，将两次煎煮药物混匀，平均分为两份，每份约 200ml，分早晚两次服用。

又一方面，本发明还提供所述中药组合物在制备用于预防肝癌发生的药物中的用途。优选地，所述肝癌为肝细胞癌。优选地，所述预防肝癌为预防肝癌发生；更优选地，所述预防肝癌发生为预防肝硬化发展为肝癌。

综上，本发明提供了一种疗效确切的纯中药制剂，与本领域现有药物相比，本发明的药物具有以下优点：

本发明中药组合物的原料药由沙参、麦冬、党参、黄芪、白术、茯苓、当归、熟地黄、白花蛇舌草等中药组成，其中沙参、麦冬养阴生津，党参、黄芪健脾益气、固护正气，白术、茯苓益气除湿，当归、熟地黄养肝肾之阴，白花蛇舌草解毒散结，全方共奏益气养阴、凉血解毒之功效。

不受任何理论限制，本发明的中药组合物可通过阻断肝癌前病变来发挥对肝癌发生或发展的预防作用。

本发明中构建了大鼠肝癌前病变模型，通过在肝癌前病变模型的模型组、中药组合物干预组以及对照组之间进行比较，来研究本发明的中药组合物是否对肝癌前病变具有阻断、抑制作用，并由此具有肝癌预防效果。

肝癌前病变的发生伴随着肝卵圆细胞的大量增殖。肝卵圆细胞是机体内具有双向分化特性的肝干细胞，特征为：细胞核为卵圆形，直径为10微米左右，具有高核质比且有极强的增殖能力。目前认为肝卵圆细胞的主要功能是修复及参与肝脏的再生，即当机体受到炎症损伤或肝细胞的增殖受到抑制时，肝卵圆细胞便会大量增生，向肝细胞分化，以完成对肝脏的修复。但是，在异常刺激持续存在时，肝卵圆细胞将有可能转化为具有向癌细胞趋势发展的癌前病变细胞。以此为特征的特殊阶段即为肝癌前病变期，此阶段内尚无明显的细胞形态及结节性病灶改变，但是已经初现雏形，在形态结构、表面标志等方面已逐渐趋向于肝癌细胞。

OV6和CD34两种蛋白为肝卵圆细胞的标志物，肝卵圆细胞的增生或增殖过程中伴有OV6和CD34的高表达。实验证明，在所建立的大鼠肝癌前病变模型的中药组合物干预组中，肝卵圆细胞和肝细胞的OV6和CD34表达均明显减弱，证明本发明的中药组合物可以明显减少肝卵圆细胞，由此对肝癌前病变发挥阻断作用。

此外，肝细胞癌的发生发展涉及包括Wnt通路在内的多种信号通路，研究表明，经典Wnt通路异常在HCC的发生发展中具有重要意义，并已知在肝癌前病变中被异常激活。以Wnt通路中的Wnt1及其上游蛋白β-catenin为标志物，在肝癌前病变模型的不同处理组以及对照组之间比较两种蛋白的表达，证明中药组合物干预组与对照组没有组间统计学差异，而模型组与对照组则具有组间统计学差异，由此证明本发明的中药组合物对Wnt通路具有调控作用。

更重要地，临床研究发现，将本发明的中药组合物应用于肝硬化出现甲胎蛋白异常的人群(这是肝癌发生的高危人群)，服用本发明中药组合物的中药组1年肝癌发生率为13.86％，远远低于西医组的29.33％，差异具有统计意义(P＝0.023)，表明该方具有良好的临床治疗效果。

附图说明

以下，结合附图来详细说明本发明的实施方案，其中：

图1显示了不同组的肝组织细胞形态结构，其中1A：对照组大鼠肝组织(HE×200)，1B：对照组大鼠肝组织(HE×400)；1C：干预组大鼠肝组织(HE×200)，1D：干预组大鼠肝组织(HE×400)；1E：模型组大鼠肝组织(HE×200)，1F：模型组大鼠肝组织(HE×400)。

图2显示了不同组的免疫组织化学染色检测结果，其中2A：模型组大鼠肝组织OV6(IHC×200)，2B：干预组大鼠肝组织OV6(IHC×200)，2C：对照组大鼠肝组织OV6(IHC×200)；2D：模型组大鼠肝组织CD34 (IHC×200)，2E：干预组大鼠肝组织CD34(IHC×200)，2F：对照组大鼠肝组织CD34(IHC×200)。

图3显示了

2.5可见光双染色检测的原位杂交染色流程图。

图4显示了不同组的

2.5可见光双染色检测结果，其中4A：模型组Wnt1及β-catenin的mRNA表达情况(a)(ISH×400)，4B：模型组Wnt1及β-catenin的mRNA表达情况(b)(ISH×400)；4C：对照组Wnt1 及β-catenin的mRNA表达情况(a)(ISH×400)，4D：对照组Wnt1及β -catenin的mRNA表达情况(b)(ISH×400)；4E：干预组Wnt1及β-catenin的mRNA表达情况(a)(ISH×400)，4F：干预组Wnt1及β-catenin的mRNA 表达情况(b)(ISH×400)。

图5显示了不同组的免疫组织化学染色检测结果，其中5A：模型组大鼠肝组织Wnt1(IHC×200)，5B：对照组大鼠肝组织Wnt1(IHC×200)，5C：干预组大鼠肝组织Wnt1(IHC×200)；5D：模型组大鼠肝组织β-catenin(IHC×200)，5E：对照组大鼠肝组织β-catenin(IHC×200)，5F：干预组大鼠肝组织β-catenin(IHC×200)。

图6显示了不同治疗组的患者的一年肝癌发生率。

具体实施方式

以下参照具体的实施例来说明本发明。本领域技术人员能够理解，这些实施例仅用于说明本发明，其不以任何方式限制本发明的范围。

下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的药材原料、试剂材料等，如无特殊说明，均为市售购买产品。

实施例1本发明药物组合物对肝癌前病变的阻断作用

1实验动物

清洁级雄性6周龄SD大鼠，体重150±10g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司。饲养于中日友好医院国家二级实验动物中心，饲养环境、实验动物、饲料、饮用水均无菌，环境温度20℃-25℃，湿度50％-60％。

2实验方法

2.1实验分组

30只大鼠随机分为3组：模型组(10只)；正常对照组(10只)；药物干预组(10只)。

药物：沙参120g、麦冬120g、党参120g、黄芪120g、白花蛇舌草240g、七叶一枝花120g、白术160g、茯苓120g、当归72g、熟地黄120g。全方药物重量之和为1312g。加水6000ml左右浸泡30min，武火煎煮20min改文火煎煮40min，过滤浓缩至770ml备用。

2.2实验程序

参考Solt-Farber模式(Solt D,Farber E.New principle for the analysis ofchemical arcinogenesi s.[J]Nature.1976.263(5579):701-703)进行。模型组、药物干预组大鼠以0.15g/L二乙酰氨基芴(2-acetaminofluorene，2-AAF)灌胃1周，1周末按经典术式行2/3肝大部分切除术，手术3天后继续以0.15g/L 的2-AAF灌胃4周，5周末实验结束。并且，模型组、药物干预组于造模同时开始灌胃给药，其中另外药物干预组的中药给药分别于上午8时与下午 5时每日灌胃两次，每次1mL，按照每只大鼠体重约为200g计算，等效浓度约为人的6.25倍(成人60kg，给中药164g)，大鼠给药量为3.4g/只/天，给药浓度为1.7g/mL，切肝后3天暂停给药，此后继续给药至实验结束；正常对照组常规饲养，并以等量生理盐水灌胃。

2.3肝脏处理

于第5周末，禁食24h后用1％戊巴比妥麻醉大鼠，迅速摘取残留肝脏, 称重，在每只大鼠肝脏相对固定部位迅速摘取肝组织，固定于4％甲醛中用于石蜡包埋。

2.4检测方法

2.4.1 HE染色病理切片的的制作

组织处理(脱水、透明、包埋及切片)—>脱蜡及水化—>染苏木素(苏木素5分钟、分化、返蓝)—>染伊红(伊红5分钟)—>脱水、透明及封片—>镜下读片并记录结果。

2.4.2免疫组织化学染色

脱蜡及水化—>内源性过氧化物阻断(3％H₂O₂ 10分钟)—>高压热修复抗原—>滴加一抗(4℃过夜)—>滴加二抗(室温30分钟)—>DAB显色—> 苏木精复染—>脱水、透明及封片—>镜下读片并记录结果。

结果判定：

应用医学图像分析系统，在200倍放大倍数下，每实验组计数6张造模成功的大鼠肝组织切片，每张切片随机观察5个视野，再计数30个视野中棕黄色阳性表达颗粒的积分光密度值。

2.5统计学方法

应用SPSS 20.0专用统计软件进行统计学分析。各组数据以均数±标准差表示(±S)，采用单因素方差分析(One Way ANOVA)，P<0.05表示差异具有显著性意义。

3结果

3.1肝组织细胞形态结构

3.1.1正常对照组大鼠肝脏形态正常，肝脏为红褐色，表面平滑，有光泽,质地柔软。光镜下可见肝细胞排列整齐，呈多角形或圆形，多为单核，核嗜碱性，位于细胞中央，胞质微嗜酸性，以中央静脉为中心放射状排列为肝索，汇管区结构明显(图1中1A、1B)。

3.1.2药物干预组大鼠肝脏形态较正常对照组无明显变化，表面平滑有光泽，质地柔软，偶见肝脏肿大，轻度充血。光镜下可见肝小叶结构基本完整，汇管区附近可见少量卵圆细胞增生，其体积比正常肝细胞小，核大深染，嗜碱性，核仁明显，胞浆少，核质比高(图1中1C、1D)。

3.1.3模型组大鼠肝脏可见肿大，质硬，色泽尚无明显变化，偶见肝脏有轻度充血及小出血点。光镜下，可观测到肝组织结构紊乱，可见假小叶，部分肝细胞呈气球样变，可见核大深染，偶见核分裂象，呈非典型增生改变；同时见大量卵圆细胞及炎性细胞以汇管区为中心向肝小叶内生长；卵圆细胞呈圆形或椭圆形，体积小于正常肝细胞，核大，核仁明显，嗜碱性，胞质少(图1中1E、1F)。

3.2免疫组织化学染色检测结果

3.2.1 OV6

镜下可见模型组在汇管区附近呈现片状黄棕色阳性区域，为胞质着色(图2中2A)。干预组阳性区域的范围及着色深度均明显减轻(图2中2B)。对照组则呈阴性(图2中2C)。图像分析及统计学处理结果显示，与模型组比较，干预组OV6表达明显下降(t＝3.632，P＝0.005)(表1)。

表1不同组别大鼠肝组织中OV6免疫组化染色情况

组别	例数	积分光密度
			模型组	6	22729.53±7812.89
对照组	6	阴性
			干预组	6	9067.65±4884.15**

注：与模型组比较，*表示P＜0.05，**表示P＜0.01

3.2.2 CD34

镜下可见模型组在汇管区附近呈深棕色着色，也可散在分布于肝小叶内，为肝细胞或卵圆细胞胞质着色(图2中2D)。干预组阳性范围及着色深度均有不同程度减轻(图2中2E)。对照组为阴性表达(图2中2F)。图像分析及统计学处理结果显示，与模型组比较，干预组CD34表达明显下降(t＝2.891，P＝0.030)(表2)。

表2不同组别大鼠肝组织中CD34免疫组化染色情况

组别	例数	积分光密度
			模型组	6	23555.21±14743.52
对照组	6	阴性
			干预组	6	5613.45±3022.24**

注：与模型组比较，*表示P＜0.05，**表示P＜0.01

如上，通过成功构建大鼠肝癌前病变模型，观察到了肝癌前病变的病理特征，包括肝卵圆细胞增生及OV6和CD34的阳性表达等。实验证明，在使用本发明的中药组合物干预后，肝卵圆细胞减少，且OV6和CD34的表达均减弱，说明该药物干预可以通过调控肝卵圆细胞对肝癌前病变发挥阻断作用。

实施例2本发明的中药组合物对经典Wnt的调控作用

采用实施例1中建立的大鼠肝癌前病变模型与动物分组处理方式，本实施例进一步通过对Wnt通路关键分子进行mRNA及蛋白的检测，比较其在不同组大鼠肝组织中的表达差异，以分析本发明的中药组合物对经典Wnt通路的调控作用。

1实验方法

1.1

2.5可见光双染色检测

使用美国ACD公司的

2.5预处理试剂盒、

2.5处理试剂盒和HybEZ^TM杂交系统110VAC，流程图见图3。

1.2免疫组织化学染色

按照试剂说明及预实验调整抗体至最适浓度，Wnt1一抗(ab85060，美国Abcam公司)及β-catenin一抗(ab32572，美国Abcam公司)的最适浓度均为1:200。具体实验操作同实施例1。

1.3实验结果判读

1.3.1 mRNA检测结果判读：

放大40X倍时，没有染色或者每10个细胞有小于1个信号点，得0分；在20-40X放大倍数下可见1-3个信号点/细胞，得1分；在20-40X放大倍数下可见4-10个信号点/细胞，且几乎没有簇状信号，得2分；在20X放大倍数下可见大于10个信号点/细胞，且小于10％的阳性细胞具有簇状信号，得 3分；在20X放大倍数下可见大于10个信号点/细胞，且多于10％的阳性细胞具有簇状信号，得4分。

1.3.2免疫组化结果判读：

同实施例1。

1.4统计学方法

同实施例1。

2结果

2.1

2.5可见光双染技术检测Wnt1及β-catenin的mRNA表达水平

2.1.1 Wnt1

mRNA分子被染色为红色，在模型组内可见一定程度表达，400倍视野内可见阳性细胞内有数条mRNA分子被染成阳性，多位于汇管区附近，成点状的红色信号，表达于胞浆及胞膜上，可与被染成绿色的β-catenin同时表达于相同细胞及附近位置，根据实验说明提供的半定量分析方法，得出模型组的评分为1到3分(图4中4A)；对照组内绝大多数无法观测到阳性染色，得分为0到1分(图4中4C)；药物干预组部分切片可见少量阳性mRNA 分子，在400倍视野下可见阳性细胞内有0到3条mRNA分子被染成阳性，评分为0到1分(图4中4E)。三组内均可见到Wnt1与β-catenin同时着色于相近区域。

非参数检验发现，模型组与对照组间有统计学差异(检验统计量为 8.917，P＝0.002)；模型组与药物干预组间有统计学差异(检验统计量为5.833， P＝0.045)；对照组与药物干预组间无统计学差异(检验统计量为3.083， P＝0.290)(见表3)。

表3不同组别大鼠肝组织中Wnt1原位杂交染色情况

注：与模型组比较，*表示P＜0.05，**表示P＜0.01

2.1.2β-catenin

mRNA分子被染色为绿色，在模型组内可见一定程度表达，但总体表达相对于Wnt1mRNA更高，400倍视野下可观测到阳性细胞内有大于10条阳性mRNA分子，但大多数阳性细胞内没有成簇状的染色信号，多位于汇管区或中央静脉附近，分布在胞浆及胞膜上，可与Wnt1同时表达于相同位置或临近区域，评分为2到4分(图4中4B)；在对照组偶尔可观测到极少量mRNA分子呈阳性，大多数切片呈阴性，得分为0到1分(图4中4D)；在药物干预组，大多数切片可观测到每个阳性细胞内有4到10个阳性染色颗粒，也可观察到1到3个阳性信号，评分为1到2分(图4中4F)。

非参数检验发现，模型组与对照组间有统计学差异(检验统计量为 11.167，P＝0.001)；模型组与药物干预组间无统计学差异(检验统计量为 5.333，P＝0.074)；对照组与药物干预组间无统计学差异(检验统计量为5.833，P＝0.051)(见表4)。

表4不同组别大鼠肝组织中β-catenin原位杂交染色情况

注：与模型组比较，*表示P＜0.05，**表示P＜0.01

2.2免疫组化染色检测Wnt1及β-catenin的蛋白表达水平

2.2.1 Wnt1

模型组可见大量肝细胞及卵圆细胞的胞浆及胞膜被染成棕黄色，位于汇管区附近，也可散在分布于肝组织，可观察到阳性细胞的细胞核较正常肝细胞大且色深，细胞体积较小，胞质相对较少(图5中5A)；对照组阳性细胞极少或呈阴性(图5中5B)。干预组可见少量细胞阳性，位于汇管区附近(图5中5C)。方差分析表明三组间存在差异(F＝33.70，P＜0.001)，两两比较发现，干预组及对照组间差异不明显(P＝0.063)，组间均有显著差异(P＜0.001)(见表5)。

表5不同组别大鼠肝组织中Wnt1免疫组化染色情况

组别	例数	积分光密度
			模型组	6	18499.95±5098.58
对照组	6	4943.77±816.42**
			干预组	6	5851.96±2002.90**

注：与模型组比较，*表示P＜0.05，**表示P＜0.01

2.2.2β-catenin

模型组可见大量阳性区域位于细胞质及细胞膜，位于汇管区附近，也可散在分布于肝组织(图5中5D)。对照组阳性细胞极少或呈阴性(图5中5E)。干预组可见阳性区域相对减少，依然集中于汇管区附近(图5中5F)。统计学分析表明模型组与干预组及对照组间有差异(F＝228.10，P＜0.001)，模型组与对照组及干预组间差异均有显著差异(P＜0.001)，组间有统计学差异(P＝0.043)(见表6)。

表6不同组别大鼠肝组织中β-catenin免疫组化染色情况

组别	例数	积分光密度
			模型组	6	27449.01±2775.57
对照组	6	2600.69±1438.03**
			干预组	6	5993.25±1583.51**

注：与模型组比较，*表示P＜0.05，**表示P＜0.01

实施例3本发明的中药组合物的临床药效学试验

据文献报道，甲胎蛋白异常是肝硬化患者发生肝癌的高危因素，1年肝癌发生率约为30％左右。纳入北京地坛医院中西医结合中心的肝硬化合并甲胎蛋白异常患者241例，将患者按照是否应用本处方分为中药组166例，西药组75例。患者基线特征见表7。

两组患者分别给药，其中西药组给予临床常规的抗肝硬化、抗病毒、保肝治疗等，中药组在此基础上加用本处方，具体方药如下：沙参15g，麦冬 15g，党参15g，黄芪15g，白花蛇舌草30g，七叶一枝花15g，白术20g，茯苓15g，当归9g，熟地黄15g。加水约1600ml，浸泡30min，武火煎煮10min 后改文火煎煮30min，平均分为两份，每份约200ml，分早晚两次服用。

比较两组患者随访48周时的肝癌发生率，发现中药组患者肝癌的1年发生率为13.86％，远远低于西医组的29.33％，差异具有统计意义(P＝0.023)，表明该方具有良好的临床治疗效果(图6)。

表7患者基线特征

变量	中药组(166例)	西药组(75例)	统计值	P
					性别			1.210	0.226
男	115	46
					女	51	29
年龄	54.36±10.89	57.12±11.35	1.801	0.073
					Cr(umol/L)	66.00(39.00,119.90)	63.80(37.10,107.00)	0.622	0.534
ALT(U/L)	33.35(6.70,340.30)	30.60(6.50,271.40)	1.141	0.254
					AST(U/L)	39.05(15.70,455.00)	36.30(15.90,243.20)	1.543	0.123
TB(umol/L)	20.70(4.80,351.70)	18.50(7.00,360.50)	1.665	0.096
					DB(umol/L)	8.85(1.80,280.20)	8.10(1.30,274.30)	1.331	0.183
ALB(g/L)	40.30(20.30,53.20)	40.00(23.80,49.20)	0.728	0.466
					AFP(ng/ml)	13.00(1.50,1323.80)	10.10(2.00,997.10)	1.314	0.189

以上对本发明具体实施方式的描述并不限制本发明，本领域技术人员可以根据本发明作出各种改变或变形，只要不脱离本发明的精神，均应属于本发明所附权利要求的范围。

Claims (10)

1.一种用于预防肝癌的中药组合物，所述中药组合物的原料药包括：沙参，麦冬，党参，黄芪，白花蛇舌草，七叶一枝花，白术，茯苓，当归，熟地黄。

2.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，所述肝癌为肝细胞癌。

3.根据权利要求1或2所述的中药组合物，其特征在于，以重量份数计，所述中药组合物的原料药包括：沙参9至15份，麦冬9至20份，党参12至30份，黄芪12至40份，白花蛇舌草20至40份，七叶一枝花6至15份，白术6至20份，茯苓10至15份，当归6至12份，熟地黄9至15份。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的中药组合物，其特征在于，以重量份数计，所述中药组合物的原料药包括：沙参12至15份，麦冬12至15份，党参15至18份，黄芪15至18份，白花蛇舌草30至40份，七叶一枝花12至15份，白术18至21份，茯苓12至15份，当归9至12份，熟地黄12至15份；

优选地，以重量份数计，所述中药组合物的原料药包括：沙参15份，麦冬15份，党参15份，黄芪15份，白花蛇舌草30份，七叶一枝花15份，白术20份，茯苓15份，当归9份，熟地黄15份。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的中药组合物，其特征在于，所述中药组合物为片剂、胶囊剂、散剂、颗粒剂或汤剂。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的中药组合物，其特征在于，所述中药组合物由包括以下步骤的制备方法制得：按比例称取各原料药，加水煎煮后取煎煮液；

优选地，所述制备方法还包括：在煎煮前浸泡原料药；和/或，在煎煮后过滤和/或浓缩煎煮液。

7.权利要求1至6中任一项所述的中药组合物的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：

按比例称取所述中药组合物的各原料药，加水煎煮后取煎煮液。

8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述制备方法还可包括在煎煮前浸泡原料药；和/或，在煎煮后过滤和/或浓缩煎煮液。

9.根据权利要求1至6中任一项所述的中药组合物在制备用于预防肝癌的药物中的用途。

10.根据权利要求9所述的用途，其特征在于，所述肝癌为肝细胞癌；

优选地，所述预防肝癌包括预防肝癌发生；

更优选地，所述预防肝癌发生为预防肝硬化发展为肝癌。

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