CN115637193B - 一种化妆品用茶油的精炼工艺 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种化妆品用茶油的精炼工艺，包括以下步骤：1）水化脱胶；2）脱酸；3）脱臭，得到脱臭油和脱臭馏出物；4）脱色；5）分提，得到精炼茶油；6）植物乳杆菌与黄色细杆菌混合发酵：在脱臭馏出物中接种含有植物乳杆菌与黄色细杆菌的混合菌种进行液态发酵，得到发酵产物；7）乙醇提取及浓缩干燥：将发酵产物离心，用无水乙醇提取上层清液、过滤、蒸发浓缩、冷冻干燥，得到茶多酚粉末；8）添加茶多酚粉末：向精炼茶油中添加茶多酚粉末，得到化妆品茶油成品。本发明采用植物乳杆菌和黄色细杆菌混合发酵可有效富集脱臭馏出物中的茶多酚，提高了脱臭馏出物中茶多酚的提取率和化妆品茶油成品中茶多酚的含量。
Description
技术领域
本发明涉及化妆品用茶油制备技术领域，特别涉及一种化妆品用茶油的精炼工艺。
背景技术
油茶，常指山茶属植物中油脂含量较高且具有较高栽培经济价值的一类植物的总称，是制备茶油的原料。茶油是一种优良的疗效性保健营养油脂，具有天然、抗氧化性强和含有的功能性成分丰度的优点。由于茶油具有的上述诸多优点，其在制作化妆品中的应用越来越广泛。
茶多酚是茶油中含有的功能性成分之一，不仅具有杀菌止痒、促进皮肤代谢和提高免疫力的功效，而且具有很好的抗氧化性、抗衰老、抑菌、清除自由基、改善异味等性能，受到很多医疗研究人员和化妆品专家的重视。因此，茶多酚被认为是绿色环保的天然成品，在防晒霜、面霜、护肤水等化妆品领域应用广泛。
化妆品用茶油在制备过程中通常需要将毛茶油进行精炼，以去除毛茶油中的杂质、降低毛茶油中游离脂肪酸的含量、改善毛茶油的颜色以提高茶油的品质。茶油的精炼工艺主要包括脱胶、脱酸、脱色、脱臭和冬化这五个步骤，然而，在茶油精炼过程中会对油脂中的天然活性物质造成极大的损失。
目前，有许多对茶油制作过程中理化性质变化的研究，如：邓龙在《油茶籽油加工过程中理化性质和营养品质的变化》中研究了毛茶油精炼过程不同阶段油茶籽油的理化指标和营养成分的变化，发现毛茶油中茶多酚的含量为54.6985ug/g，而脱臭油中茶多酚含量却仅为25.134ug/g，表明，毛茶油经脱臭处理后会使茶多酚含量损失高达54%，原因在于：在脱臭过程中，茶多酚会随水蒸气的蒸发从油脂中转移至脱臭馏出物中，使油脂中的茶多酚含量降低。
然而，由于茶多酚在脱臭馏出物中的含量非常少，该部分脱臭馏出物中的茶多酚不仅难以被提取出来，而且也极易被研究人员忽视。故而，目前还暂未有对脱臭馏出物中茶多酚提取方法的研究，因此，如何有效将脱臭馏出物中茶多酚提取出来以减少茶多酚在油精炼过程中的损失成为亟待解决的问题。
发明内容
本发明要解决的技术问题是：克服现有技术的不足，提供一种工艺简单，可有效减少茶多酚损失的化妆品用茶油的精炼工艺。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：一种化妆品用茶油的精炼工艺，采用该精炼工艺对毛茶油进行精炼，包括以下步骤：1）水化脱胶；2）脱酸；3）脱臭，得到脱臭油和脱臭馏出物；4）脱色；5）分提，得到精炼茶油；6）植物乳杆菌与黄色细杆菌混合发酵：在脱臭馏出物中接种含有植物乳杆菌与黄色细杆菌的混合菌种进行液态发酵，得到发酵产物；7）乙醇提取及浓缩干燥：将发酵产物进行离心，取离心得到的上层清液用无水乙醇进行提取，过滤后进行蒸发浓缩，再将浓缩物进行冷冻干燥，得到茶多酚粉末；8）添加茶多酚粉末：向精炼茶油中添加茶多酚粉末，充分混合均匀，得到化妆品茶油成品。
进一步，所述步骤1）的具体操作步骤为：将毛茶油加热到55℃~65℃，加入油重4%~6%的水，搅拌30min进行水化，得到脱胶油。
进一步，所述步骤2）的具体操作步骤为：采用碱炼脱酸，向步骤1）处理后得到的脱胶油中加入油重10%~15%的NaOH，超碱量为0.15%~0.25%，碱炼温度为35℃~45℃，碱炼时间为45min，得到脱酸油。
进一步，所述步骤3）的具体操作步骤为：趁热将步骤2）处理后得到的脱酸油送入真空脱臭器内进行真空脱臭处理，温度控制在60℃~65℃，真空度为0.065MPa~0.07MPa，脱臭时间为30min~35min，过滤，得脱臭油及脱臭馏出物。
进一步，所述步骤4）的具体操作步骤为：采用竹炭与活性白土组合成的复合脱色剂对脱臭油进行脱色，复合脱色剂中，竹炭与活性白土的质量比为2:1，脱色剂添加量为3.5%，脱色时间为30min，脱色温度为60℃，过滤后得到脱色油。
进一步，所述步骤5）的具体操作步骤为：将经步骤4）处理后得到的脱色油加热到40℃，然后置于冰箱中，于3℃下冷冻48h后取出，再于4℃下冷冻离心，分离出上层液即为精炼茶油。
进一步，所述步骤6）的具体操作步骤为：
a）制备孢子浓度为10.5×105CFU/mL植物乳杆菌菌悬液以及9.6×105CFU/mL黄色细杆菌菌悬液；
b）将植物乳杆菌菌悬液和黄色细杆菌菌悬液以混合体积比为1：1-1.5进行混合，得到混合菌悬液；
c）将混合菌悬液以接种量为3%-4%接种至脱臭馏出物中，然后置于温度为30℃-40℃下用摇床进行液态发酵24-36h，摇床转速为90rpm~120rpm，得到发酵产物。
优选地，所述步骤b）中植物乳杆菌菌悬液和黄色细杆菌菌悬液以混合体积比为1：1。
优选地，所述步骤c）中混合菌悬液的接种量为4%，液态发酵的温度为35℃，发酵时间为24h，摇床转速为90rpm。
进一步，所述步骤7）的具体操作步骤为：先将发酵产物在转速为10000r/min-15000r/min进行离心处理，取上层澄清液体；上层澄清液体按1:4-6的料液比加入无水乙醇，于温度为60-70℃下恒温水浴浸提40min后过滤；再将过滤后得到的滤液进行浓缩；最后将浓缩物进行冷冻干燥，得到儿茶素发酵粉末。
本发明一种化妆品用茶油的精炼工艺的有益效果：本发明的工艺简单、操作方便，采用植物乳杆菌和黄色细杆菌混合发酵脱色馏出物，经过植物乳酸杆菌和黄色细杆菌的联合发酵处理可有效富集脱臭馏出物中的茶多酚，使脱臭馏出物中的茶多酚被有效提取出来，减少了茶油精炼过程中脱臭馏出物中含有的茶多酚的损失，大大提高了制备的化妆品茶油成品中茶多酚的含量，提高了化妆品茶油抗氧化、抗衰老等护肤功能。
附图说明
图1-为一种化妆品用茶油的精炼工艺的流程图。
具体实施方式
以下结合附图及实施例对本发明作进一步说明，但这些具体实施方案不以任何方式限制本发明的保护范围。
实施例1
一种化妆品用茶油的精炼工艺，采用该精炼工艺对毛茶油进行精炼，包括以下步骤：
1）水化脱胶：将毛茶油加热到60℃，加入油重5%的水，搅拌30min进行水化，得到脱胶油；
2）脱酸：采用碱炼脱酸，向脱胶油中加入油重12%的NaOH，超碱量为0.2%，碱炼温度为40℃，碱炼时间为45min，得到脱酸油；
3）脱臭：趁热将脱酸油送入真空脱臭器内进行真空脱臭处理，温度控制在62℃，真空度为0.068MPa，脱臭时间为325min，过滤，得脱臭油及脱臭馏出物；
4）脱色：采用竹炭与活性白土组合成的复合脱色剂对脱臭油进行脱色，复合脱色剂中，竹炭与活性白土的质量比为2:1，脱色剂添加量为3.5%，脱色时间为30min，脱色温度为60℃，过滤后得到脱色油；
5）分提：将脱色油加热到40℃，然后置于冰箱中，于3℃下冷冻48h后取出，再于4℃下冷冻离心，分离出上层液即为精炼茶油；
6）植物乳杆菌与黄色细杆菌混合发酵：
a）制备孢子浓度为10.5×105CFU/mL植物乳杆菌菌悬液以及9.6×105CFU/mL黄色细杆菌菌悬液：植物乳杆菌活化的具体操作步骤为：将植物乳杆菌接种到MRS培养基（蛋白胨、牛肉膏、酵母粉、葡萄糖、吐温、磷酸氢二钾、乙酸钠、柠檬酸三铵、硫酸镁、硫酸锰、琼脂）中，恒温摇床培养，备用；黄色细杆菌活化的具体操作步骤为：将黄色细杆菌接种到LB培养基（胰蛋白胨、酵母提取物、氯化钠、琼脂）中，恒温摇床培养，备用；
再将活化的植物乳杆菌转接到100mL的MRS液体培养液中，置于37℃培养箱内培养16h，制备得到浓度为10.5×105CFU/mL植物乳杆菌菌悬液；将活化的黄色细杆菌转接到100mL的LB液体培养液中，置于28℃培养箱内培养18h，制备得到浓度为9.6×105CFU/mL黄色细杆菌菌悬液；
b）将植物乳杆菌菌悬液和黄色细杆菌菌悬液以混合体积比为1：1进行混合，得到混合菌悬液；
c）将混合菌悬液以接种量为4%接种至脱臭馏出物中，然后置于温度为35℃下用摇床进行液态发酵24h，摇床转速为90rpm，得到发酵产物；
7）乙醇提取及浓缩干燥：先将发酵产物在转速为12000r/min进行离心处理，取上层澄清液体；上层澄清液体按1:5的料液比加入无水乙醇，于温度为65℃下恒温水浴浸提40min后过滤；再将过滤后得到的滤液进行浓缩；最后将浓缩物进行冷冻干燥，得到儿茶素发酵粉末；
8）添加茶多酚粉末：向精炼茶油中添加茶多酚粉末，充分混合均匀，得到化妆品茶油成品。
实施例2
一种化妆品用茶油的精炼工艺，采用该精炼工艺对毛茶油进行精炼，包括以下步骤：
1）水化脱胶：将毛茶油加热到55℃，加入油重4%的水，搅拌30min进行水化，得到脱胶油；
2）脱酸：采用碱炼脱酸，向脱胶油中加入油重10%的NaOH，超碱量为0.15%，碱炼温度为35℃，碱炼时间为45min，得到脱酸油；
3）脱臭：趁热将脱酸油送入真空脱臭器内进行真空脱臭处理，温度控制在60℃，真空度为0.065MPa，脱臭时间为30min，过滤，得脱臭油及脱臭馏出物；
4）脱色：采用竹炭与活性白土组合成的复合脱色剂对脱臭油进行脱色，复合脱色剂中，竹炭与活性白土的质量比为2:1，脱色剂添加量为3.5%，脱色时间为30min，脱色温度为60℃，过滤后得到脱色油；
5）分提：将脱色油加热到40℃，然后置于冰箱中，于3℃下冷冻48h后取出，再于4℃下冷冻离心，分离出上层液即为精炼茶油；
6）植物乳杆菌与黄色细杆菌混合发酵：
a）制备孢子浓度为10.5×105CFU/mL植物乳杆菌菌悬液以及9.6×105CFU/mL黄色细杆菌菌悬液：植物乳杆菌活化的具体操作步骤为：将植物乳杆菌接种到MRS培养基（蛋白胨、牛肉膏、酵母粉、葡萄糖、吐温、磷酸氢二钾、乙酸钠、柠檬酸三铵、硫酸镁、硫酸锰、琼脂）中，恒温摇床培养，备用；黄色细杆菌活化的具体操作步骤为：将黄色细杆菌接种到LB培养基（胰蛋白胨、酵母提取物、氯化钠、琼脂）中，恒温摇床培养，备用；
再将活化的植物乳杆菌转接到100mL的MRS液体培养液中，置于37℃培养箱内培养16h，制备得到浓度为10.5×105CFU/mL植物乳杆菌菌悬液；将活化的黄色细杆菌转接到100mL的LB液体培养液中，置于28℃培养箱内培养18h，制备得到浓度为9.6×105CFU/mL黄色细杆菌菌悬液；
b）将植物乳杆菌菌悬液和黄色细杆菌菌悬液以混合体积比为1：1进行混合，得到混合菌悬液；
c）将混合菌悬液以接种量为3%接种至脱臭馏出物中，然后置于温度为30℃下用摇床进行液态发酵24h，摇床转速为90rpm，得到发酵产物；
7）乙醇提取及浓缩干燥：先将发酵产物在转速为10000r/min进行离心处理，取上层澄清液体；上层澄清液体按1:4的料液比加入无水乙醇，于温度为60℃下恒温水浴浸提40min后过滤；再将过滤后得到的滤液进行浓缩；最后将浓缩物进行冷冻干燥，得到儿茶素发酵粉末；
8）添加茶多酚粉末：向精炼茶油中添加茶多酚粉末，充分混合均匀，得到化妆品茶油成品。
实施例3
一种化妆品用茶油的精炼工艺，采用该精炼工艺对毛茶油进行精炼，包括以下步骤：
1）水化脱胶：将毛茶油加热到65℃，加入油重6%的水，搅拌30min进行水化，得到脱胶油；
2）脱酸：采用碱炼脱酸，向脱胶油中加入油重15%的NaOH，超碱量为0.25%，碱炼温度为45℃，碱炼时间为45min，得到脱酸油；
3）脱臭：趁热将脱酸油送入真空脱臭器内进行真空脱臭处理，温度控制在65℃，真空度为0.07MPa，脱臭时间为35min，过滤，得脱臭油及脱臭馏出物；
4）脱色：采用竹炭与活性白土组合成的复合脱色剂对脱臭油进行脱色，复合脱色剂中，竹炭与活性白土的质量比为2:1，脱色剂添加量为3.5%，脱色时间为30min，脱色温度为60℃，过滤后得到脱色油；
5）分提：将脱色油加热到40℃，然后置于冰箱中，于3℃下冷冻48h后取出，再于4℃下冷冻离心，分离出上层液即为精炼茶油；
6）植物乳杆菌与黄色细杆菌混合发酵：
a）制备孢子浓度为10.5×105CFU/mL植物乳杆菌菌悬液以及9.6×105CFU/mL黄色细杆菌菌悬液：植物乳杆菌活化的具体操作步骤为：将植物乳杆菌接种到MRS培养基（蛋白胨、牛肉膏、酵母粉、葡萄糖、吐温、磷酸氢二钾、乙酸钠、柠檬酸三铵、硫酸镁、硫酸锰、琼脂）中，恒温摇床培养，备用；黄色细杆菌活化的具体操作步骤为：将黄色细杆菌接种到LB培养基（胰蛋白胨、酵母提取物、氯化钠、琼脂）中，恒温摇床培养，备用；
再将活化的植物乳杆菌转接到100mL的MRS液体培养液中，置于37℃培养箱内培养16h，制备得到浓度为10.5×105CFU/mL植物乳杆菌菌悬液；将活化的黄色细杆菌转接到100mL的LB液体培养液中，置于28℃培养箱内培养18h，制备得到浓度为9.6×105CFU/mL黄色细杆菌菌悬液；
b）将植物乳杆菌菌悬液和黄色细杆菌菌悬液以混合体积比为1：1.5进行混合，得到混合菌悬液；
c）将混合菌悬液以接种量为4%接种至脱臭馏出物中，然后置于温度为40℃下用摇床进行液态发酵36h，摇床转速为120rpm，得到发酵产物；
7）乙醇提取及浓缩干燥：先将发酵产物在转速为15000r/min进行离心处理，取上层澄清液体；上层澄清液体按1: 6的料液比加入无水乙醇，于温度为70℃下恒温水浴浸提40min后过滤；再将过滤后得到的滤液进行浓缩；最后将浓缩物进行冷冻干燥，得到儿茶素发酵粉末；
8）添加茶多酚粉末：向精炼茶油中添加茶多酚粉末，充分混合均匀，得到化妆品茶油成品。
本发明采用实施例1-3的方法精炼毛茶油，对毛茶油、脱臭馏出物、精炼茶油、化妆品茶油成品中茶多酚的含量、脱臭馏出物中茶多酚提取率以及化妆品茶油成品的色泽、酸价和过氧化值进行了测定，其中茶多酚的检测方法参照 邓龙发表的《油茶籽油加工过程中理化性质和营养品质的变化》中的检测方法，色泽、酸价和过氧化值的测定分别参照GB/T22460-2008、GB 5009.229-2016、GB 5009.227-2016，脱臭馏出物中茶多酚提取率=（化妆品茶油成品中茶多酚含量-精炼茶油中茶多酚含量）/脱臭馏出物中茶多酚含量×100%结果如表1所示：
表1实施例1-3中毛茶油、脱臭馏出物、精炼茶油、化妆品茶油成品所含茶多酚的含量、脱臭馏出物中茶多酚提取率以及化妆品茶油成品的色泽、酸价和过氧化值
由上表可知，采用本发明的精炼工艺精炼毛茶油后可有效将脱臭馏出物中的茶多酚提取出来，使脱臭馏出物中茶多酚提取率高达91.6%，大大降低了脱臭馏出物中茶多酚的损失，提高了化妆品茶油成品中茶多酚的含量；且制备的化妆品茶油成品澄清透明、无异味，其酸价、过氧化值均符合化妆品茶油的标准T/SHRH 037-2021。
对比例1
本对比例与实施例1的不同之处在于：不包括步骤6）-8），步骤5）制得的精炼茶油即为化妆品用茶油。
对比例2
本对比例与实施例1的不同之处在于：步骤6）采用单一的植物乳杆菌进行液态发酵，具体操作步骤为：
6）植物乳杆菌与黄色细杆菌混合发酵：
a）制备孢子浓度为10.5×105CFU/mL植物乳杆菌菌悬液：先将植物乳杆菌活化，具体操作步骤为：将植物乳杆菌接种到MRS培养基（蛋白胨、牛肉膏、酵母粉、葡萄糖、吐温、磷酸氢二钾、乙酸钠、柠檬酸三铵、硫酸镁、硫酸锰、琼脂）中，恒温摇床培养，备用；再将活化的植物乳杆菌转接到100mL的MRS液体培养液中，置于37℃培养箱内培养16h，制备得到浓度为10.5×105CFU/mL植物乳杆菌菌悬液；
b）将植物乳杆菌菌悬液以接种量为4%接种至脱臭馏出物中，然后置于温度为40℃下用摇床进行液态发酵36h，摇床转速为120rpm，得到发酵产物。
对比例3
本对比例与实施例1的不同之处在于：步骤6）采用单一的黄色细杆菌进行液态发酵，具体操作步骤为：
a）制备孢子浓度为9.6×105CFU/mL黄色细杆菌菌悬液：先将植物乳杆菌活化，具体操作步骤为：将将黄色细杆菌接种到LB培养基（胰蛋白胨、酵母提取物、氯化钠、琼脂）中，恒温摇床培养，备用；
再将活化的黄色细杆菌转接到100mL的LB液体培养液中，置于28℃培养箱内培养18h，制备得到浓度为9.6×105CFU/mL黄色细杆菌菌悬液；
b）将黄色细杆菌菌悬液以接种量为4%接种至脱臭馏出物中，然后置于温度为35℃下用摇床进行液态发酵24h，摇床转速为90rpm，得到发酵产物。
本发明采用实施例1以及对比例1-3的方法精炼毛茶油，对毛茶油、脱臭馏出物、精炼茶油、化妆品茶油成品中茶多酚的含量、脱臭馏出物中茶多酚提取率进行了测定，结果如表2所示：
表2实施例1和对比例1-3中毛茶油、脱臭馏出物、精炼茶油、化妆品茶油成品所含茶多酚的含量、脱臭馏出物中茶多酚提取率
由上表可知，化妆品茶油成品中茶多酚含量的含量变化趋势为：实施例1＞对比例2＞对比例3＞对比例1，表明，没有对脱臭馏出物中的茶多酚进行提取会大大降低化妆品茶油成品中茶多酚的含量，使该部分茶多酚无法得以有效利用。与实施例1相比，对比例2和对比例3分别采用植物乳杆菌和黄色细杆菌对脱臭馏出物进行液态发酵，只能够将脱臭馏出物中的少部分茶多酚提取出来，其对应的脱臭馏出物中茶多酚的提取率均低于25%，显著小于实施例1，表明，采用单独的植物乳杆菌或者黄色细杆菌进行脱臭馏出物的液态发酵，能够在一定程度上提高化妆品茶油成品中茶多酚含量，但却显著低于采用两种菌联合发酵制备的化妆品茶油成品中茶多酚含量。因此，植物乳杆菌和黄色细杆菌在脱臭馏出物中提取茶多酚的过程中共同协调、相互影响对提高脱臭馏出物中茶多酚提取率发挥了显著的作用，可大大提高化妆品茶油成品中茶多酚的含量。
实验例1 植物乳杆菌菌悬液与黄色细杆菌菌悬液的混合体积比的单因素优化实验
本实验例参照实施例1中步骤6）的方法进行植物乳杆菌和黄色细杆菌的混合发酵，研究不同的植物乳杆菌菌悬液与黄色细杆菌菌悬液的混合体积比（3:1、2:2、1:1、1:1.5、1:2、1:3）对脱臭馏出物中茶多酚提取率和化妆品茶油成品中茶多酚含量的影响，结果如表3所示。
表3植物乳杆菌菌悬液和黄色细杆菌菌悬液的混合体积比对脱臭馏出物中茶多酚提取率和化妆品茶油成品中茶多酚含量的影响
由上表可知，随着植物乳杆菌接种量占比的降低，化妆品茶油成品中茶多酚含量和茶多酚提取率均的呈现先增大后减少的趋势。当混合体积比为1:1-1.5时，对应的茶多酚含量和提取率较大，且最优选的混合体积比为1:1。
实验例2 液态发酵温度的单因素优化实验
本实验例参照实施例1中步骤6）的方法进行植物乳杆菌和黄色细杆菌的混合发酵，研究不同的液态发酵温度（20℃、25℃、30℃、35℃、40℃、45℃）对脱臭馏出物中茶多酚提取率和化妆品茶油成品中茶多酚含量的影响，结果如表4所示。
由上表可知，随着液态发酵温度的提高，化妆品茶油成品中茶多酚含量和茶多酚提取率均的呈现先增大后减少的趋势，原因在于：温度升高，酶活反应速度加快；但温度过高时，酶也容易因为受热而失去活性，最终会使茶多酚含量减少。当发酵温度为30℃-45℃时，对应的茶多酚含量较大，为46.08 mg/kg -47.84 mg/kg，提取率较大，为90.2%-91.6%，且最优选的发酵温度为45℃。
实验例3 混合菌悬液的接种量的单因素优化实验
本实验例参照实施例1中步骤6）的方法进行植物乳杆菌和黄色细杆菌的混合发酵，研究不同的混合菌悬液的接种量（1%、2%、3%、4%、5%）对脱臭馏出物中茶多酚提取率和化妆品茶油成品中茶多酚含量的影响，结果如表5所示。
表5混合菌悬液的接种量对脱臭馏出物中茶多酚提取率和化妆品茶油成品中茶多酚含量的影响
由上表可知，随着接种量的提高，化妆品茶油成品中茶多酚和茶多酚提取率均的呈现增的趋势。当接种量为3%-5%时，对应的茶多酚含量较大，为46.26 mg/kg -47.84 mg/kg，提取率较大，为90.8%-91.6%，当接种量为4%和5%对应的茶多酚含量和提取率没有显著差异，为了充分节约成本，因此，接种量优选的范围为3%-4%，最优选,为3%。
实验例4 液态发酵时间的单因素优化实验
本实验例参照实施例1中步骤6）的方法进行植物乳杆菌和黄色细杆菌的混合发酵，研究不同的液态发酵时间（12h、24h、36h、48h、72h）对脱臭馏出物中茶多酚提取率和化妆品茶油成品中茶多酚含量的影响，结果如表6所示。
由上表可知，随着液态发酵时间的延长，化妆品茶油成品中茶多酚含量和茶多酚提取率均的呈现先增大后减少的趋势，原因在于：发酵时间短，微生物产生酶量相对较少；相反发酵时间过长，培养基所能提供的养分不足以及细胞衰亡，有可能会使产酶的性能下降，影响茶多酚的含量。当发酵时间为24h-36h时，对应的茶多酚含量较大，为46.21 mg/kg-47.84 mg/kg，提取率较大，为90.1%-91.6%，且最优选的发酵时间为24h。
实验例5 摇床转速的单因素优化实验
本实验例参照实施例1中步骤6）的方法进行植物乳杆菌和黄色细杆菌的混合发酵，研究在液态发酵过程中不同摇床转速（70rpm/min、80rpm/min、90rpm/min、100rpm/min、120rpm/min）对脱臭馏出物中茶多酚提取率和化妆品茶油成品中茶多酚含量的影响，结果如表7所示。
由上表可知，随着摇床转速的提高，化妆品茶油成品中茶多酚含量和茶多酚提取率均的呈现先增大后减少的趋势，原因在于：转速越快的同时，微生物与发酵底物接触的面积和频率会增加，从而促进了微生物的发酵，但达到一定饱和值后，发酵的速率将不会有太大的变化。当转速为90rpm/min-120 rpm/min对应的茶多酚含量和提取率较大，且最优选的转速为90rpm/min。
实验例6 正交实验
经单因素试验后，得出最佳的发酵时间、温度、接种量及转速范围，做4因素3水平的正交试验，即L9（34），发酵温度（30℃、35℃、40℃）、摇床转速（80rpm/min、90rpm/min、100rpm/min）、微生物添加量（2%、3%、4%）、发酵时间（24h、36h、48h）。采用表8中的实验参数及参照实施例1的方法精炼毛茶油，对脱臭馏出物中茶多酚提取率和化妆品茶油成品中茶多酚含量的影响，结果如表8所示。
经过正交试验，得出最佳的发酵条件为发酵温度35℃、接种量为4%（1:1）、摇床转速为90rpm/min，发酵时间为24h，在此发酵条件下，成品化妆品茶油中测出的茶多酚含量为47.87mg/kg，脱臭馏出物中茶多酚的提取率高达91.7%。
以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非对本发明作任何形式上的限制，虽然本发明已以较佳实施例揭露如上，然而并非用以限定本发明，任何熟悉本专业的技术人员，在不脱离本发明技术方案范围内，当可利用上述揭示的技术内容作出些许更动或修饰为等同变化的等效实施例，但凡是未脱离本发明技术方案内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与修饰，均仍属于本发明技术方案的范围内。
Claims (5)
1.一种化妆品用茶油的精炼工艺，采用该精炼工艺对毛茶油进行精炼，其特征在于：包括以下步骤：
1）水化脱胶：将毛茶油加热到55℃~65℃，加入油重4%~6%的水，搅拌30min进行水化，得到脱胶油；
2）脱酸：采用碱炼脱酸，向步骤1）处理后得到的脱胶油中加入油重10%~15%的NaOH，超碱量为0.15%~0.25%，碱炼温度为35℃~45℃，碱炼时间为45min，得到脱酸油；
3）脱臭：趁热将步骤2）处理后得到的脱酸油送入真空脱臭器内进行真空脱臭处理，温度控制在60℃~65℃，真空度为0.065MPa~0.07MPa，脱臭时间为30min~35min，过滤，得脱臭油及脱臭馏出物；
4）脱色；
5）分提，得到精炼茶油；
6）植物乳杆菌与黄色细杆菌混合发酵：在脱臭馏出物中接种含有植物乳杆菌与黄色细杆菌的混合菌种进行液态发酵，得到发酵产物；其具体操作步骤为：
a）制备孢子浓度为10.5×105CFU/mL植物乳杆菌菌悬液以及9.6×105 CFU/mL黄色细杆菌菌悬液；
b）将植物乳杆菌菌悬液和黄色细杆菌菌悬液以混合体积比为1：1-1.5进行混合，得到混合菌悬液；
c）将混合菌悬液以接种量为3%-4%接种至脱臭馏出物中，然后置于温度为30℃-40℃下用摇床进行液态发酵24-36h，摇床转速为90rpm~120rpm，得到发酵产物；
7）乙醇提取及浓缩干燥：将发酵产物进行离心，取离心得到的上层清液用无水乙醇进行提取，过滤后进行蒸发浓缩，再将浓缩物进行冷冻干燥，得到茶多酚粉末；其具体操作步骤为：先将发酵产物在转速为10000r/min-15000r/min进行离心处理，取上层澄清液体；上层澄清液体按1:4-6的料液比加入无水乙醇，于温度为60-70℃下恒温水浴浸提40min后过滤；再将过滤后得到的滤液进行浓缩；最后将浓缩物进行冷冻干燥，得到茶多酚粉末；
8）添加茶多酚粉末：向精炼茶油中添加茶多酚粉末，充分混合均匀，得到化妆品茶油成品。
2.如权利要求1所述一种化妆品用茶油的精炼工艺，其特征在于：所述步骤4）的具体操作步骤为：采用竹炭与活性白土组合成的复合脱色剂对脱臭油进行脱色，复合脱色剂中，竹炭与活性白土的质量比为2:1，脱色剂添加量为3.5%，脱色时间为30min，脱色温度为60℃，过滤后得到脱色油。
3.如权利要求1所述一种化妆品用茶油的精炼工艺，其特征在于：所述步骤5）的具体操作步骤为：将经步骤4）处理后得到的脱色油加热到40℃，然后置于冰箱中，于3℃下冷冻48h后取出，再于4℃下冷冻离心，分离出上层液即为精炼茶油。
4.如权利要求1所述一种化妆品用茶油的精炼工艺，其特征在于：所述步骤b）中植物乳杆菌菌悬液和黄色细杆菌菌悬液以混合体积比为1：1。
5.如权利要求1所述一种化妆品用茶油的精炼工艺，其特征在于：所述步骤c）中混合菌悬液的接种量为4%，液态发酵的温度为35℃，发酵时间为24h，摇床转速为90rpm。
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