CN115624566B - 一种腹膜透析液及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本申请公开了一种腹膜透析液及其制备方法和应用，属于腹膜透析技术领域。本申请腹膜透析液包括溶解于水中的聚乙二醇‑聚乙烯醇接枝共聚物4～20 w/v%，以及腹膜透析中可接受的电解质。本申请腹膜透析液选用聚乙二醇‑聚乙烯醇接枝共聚物作为胶体渗透剂并与电解质复配，一方面使该腹膜透析液的热稳定性高、细胞相容性好和持续超滤能力强，尤其长时间留腹后对肌酐、尿素的清除效果显著；另一方面能够保证该腹膜透析液在灭菌和储存过程中不产生有害的葡萄糖降解产物，有效保护腹膜。

Description

一种腹膜透析液及其制备方法和应用

技术领域

本申请属于腹膜透析技术领域，尤其涉及一种腹膜透析液及其制备方法和应用。

背景技术

腹膜透析治疗是将腹膜作为半透膜、腹膜透析液作为媒介，通过弥散、对流和超滤作用，腹膜毛细血管腔内的血液与透析液进行广泛的物质交换，以达到补充机体所需物质，同时清除体内代谢产物和毒物，纠正水电解质紊乱、酸碱平衡失调的目的，从而达到肾脏疾病替代治疗目的。腹膜透析液是腹膜透析治疗中不可或缺的部分，主要由渗透剂、缓冲剂和电解质组成，其中，渗透剂主要分为小分子量的晶体渗透剂和大分子量的胶体渗透剂。但是，晶体渗透剂如葡萄糖因吸收、代谢以及其与腹膜环境生物不相容等问题，容易引起腹膜结构改变，影响腹膜透析疗效甚至导致腹膜透析失败。

目前，艾考糊精腹膜透析液已经应用于临床，该腹膜透析液是以艾考糊精作为胶体渗透剂，不仅能够延长超滤时间，而且还具有改善代谢、保护残余肾功能、维持血压以及体液控制等疗效，临床应用证实可维持净超滤达12h，特别适用于高腹膜转运及糖尿病患者。

但是，含有艾考糊精的腹膜透析液存在明显缺陷：一是艾考糊精腹膜透析液可能造成试纸法检测血糖结果假性升高，误导过量使用胰岛素，严重时甚至危及生命；二是艾考糊精作为一种支链水溶性葡萄糖聚合物，其在高温灭菌过程中可能会产生有毒的葡萄糖降解产物，从而导致腹膜纤维化，影响腹膜功能。

发明内容

本申请的目的在于提供一种腹膜透析液及其制备方法和应用，旨在解决含有艾考糊精的腹膜透析液可能导致试纸法检测血糖结果假性升高，以及可能产生有毒葡萄糖降解产物的技术问题。

为了实现上述目的，本申请实施例的技术方案是：

本申请实施例的第一方面提供了一种腹膜透析液，该腹膜透析液包括溶解于水中的聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物4～20w/v%，以及腹膜透析中可接受的电解质。

在第一方面优选的实现方式中，该腹膜透析液包括溶解于水中的聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物6～10w/v%，以及腹膜透析中可接受的电解质。

在第一方面优选的实现方式中，所述电解质选自氯化钙、氯化镁、氯化钠和氯化钾中的至少一种。

在第一方面优选的实现方式中，所述电解质包括氯化钠0.5～0.6w/v%、氯化钙0.01～0.03w/v%和氯化镁0.004～0.006w/v%。

在第一方面优选的实现方式中，该腹膜透析液还包括腹膜透析中可接受的缓冲剂。

在第一方面优选的实现方式中，所述缓冲剂选自碳酸氢盐、乳酸盐、丙酮酸盐、乙酸盐、柠檬酸盐中的至少一种。

在第一方面优选的实现方式中，所述缓冲剂为乳酸钠0.4～0.5w/v%。

在第一方面优选的实现方式中，所述聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物的分子量为20~80kDa。

在第一方面优选的实现方式中，所述腹膜透析液的胶体直径为4～20nm。

本申请实施例的第二方面提供了上述腹膜透析液的制备方法，该制备方法包括以下步骤：

按照本申请实施例第一方面提供的所述腹膜透析液的配方组分及比例将各组分原料溶解于水中并搅拌混合后灭菌处理，得到腹膜透析液。

在第二方面优选的实现方式中，所述搅拌混合分为两个阶段：

第一阶段的搅拌速度为800～1500rpm，时间为20～40min；

第二阶段的搅拌速度为200～400rpm，时间为5～10min。

本申请实施例的第三方面提供了本申请实施例第一方面提供的所述腹膜透析液和/或第二方面所述制备方法制备成的腹膜透析液在制备腹膜透析药剂中的应用。

与现有技术相比，本申请实施例的优点或有益效果至少包括：

1）本申请实施例第一方面提供的腹膜透析液，通过聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物作为胶体渗透剂并与电解质复配，一方面基于聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物水溶液的pH值可稳定在6.00 ± 0.05的特性，加入乳酸钠、碳酸氢钠等缓冲剂后，直接灭菌便可得到中性pH的腹膜透析液，从而避免现有技术下需要先在较低pH下灭菌再中和的繁琐流程，实现了制备流程的简化，而且中性pH的腹膜透析液可以保留残余肾功能、保护腹膜功能、抑制包裹性腹膜硬化发展、改善灌入痛以及降低腹膜炎发生率等；另一方面基于聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物具有较高的热稳定性，因此该腹膜透析液在高温灭菌过程中不会产生有毒的降解产物，能有效保护腹膜功能；第三方面，能够使腹膜透析液具有优良的细胞相容性和优异的持续超滤能力，尤其长时间留腹后对肌酐、尿素的清除效果显著；第四方面，通过在聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物与电解质复配的基础上，严格控制各组分原料的浓度使得该腹膜透析液的热稳定性、细胞相容性和持续超滤能力优于临床上使用的葡萄糖腹膜透析液和艾考糊精腹膜透析液。

2）本申请实施例第二方面提供的腹膜透析液的制备方法能够使得各配方组分混合均匀，各组分充分溶解于水中并使得聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物能够形成分散均匀的纳米颗粒，从而制备得到均匀稳定的腹膜透析液。聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物与电解质复配，为腹膜透析液长期提供稳定渗透压的同时赋予其优异的针对电解质紊乱的纠正效果。

3）本申请实施例第三方面提供的腹膜透析液在腹膜透析中的应用，基于本申请腹膜透析液具有较高的热稳定性、优良的细胞相容性和优异的持续超滤能力，因而本申请腹膜渗透液在作为腹膜透析药剂的应用中能够长期提供稳定的渗透压，从而使得腹膜透析治疗效果更好。

附图说明

为了更清楚地说明本申请实施例的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍。显而易见地，下面描述中的附图仅是本申请中记载的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物在高压蒸汽灭菌前后的GPC谱图；

图2为本申请实施例1～6和对比例1～3制备的腹膜透析液的细胞相容性表征图；

图3为本申请实施例1～4和对比例1～3制备的腹膜透析液的4h超滤量图；

图4为本申请实施例1～4和对比例1～3制备的腹膜透析液的16h超滤量图；

图5为本申请实施例1～4和对比例1～3制备的腹膜透析液留腹16h后透出液中肌酐的含量图；

图6为本申请实施例1～4和对比例1～3制备的腹膜透析液留腹16h后透出液中尿素的含量图。

具体实施方式

下面将结合本申请实施例中的附图，对本申请实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例是本申请的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本申请中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本申请保护的范围。

在本实施例以下描述中，术语“和/或”用于描述关联对象的关联关系，表示可以存在三种关系，例如，A和/或B，可以表示：单独存在A，单独存在B和同时存在A和B的情况。其中A，B可以是单数或者复数。字符“/”一般表示前后关联对象是一种“或”的关系。

在本实施例以下描述中，术语“至少一个”是指一个或者多个，“多个”是指两个或两个以上。“以下至少一项(个)”或其类似表达是指的这些项中的任意组合，包括单项(个)或复数项(个)的任意组合。例如，“a，b或c中的至少一项(个)”，或，“a，b和c中的至少一项(个)”，均可以表示：a，b，c，a-b(即a和b)，a-c，b-c，或a-b-c，其中a，b，c分别可以是单个，也可以是多个。

本领域技术人员应当理解，在本申请实施例以下描述中，序号的先后并不意味着执行顺序的先后，部分或全部步骤可以并行执行或先后执行，各过程的执行顺序应以其功能和内在逻辑确定，而不应对本申请实施例的实施过程构成任何限定。

在本申请实施例中使用的术语是仅仅出于描述特定实施例的目的，而非旨在限制本申请。在本申请实施例和所附权利要求书中所使用的单数形式的“一种”和“该”也旨在包括多数形式，除非上下文清楚地表示其他含义。

第一方面，本申请实施例提供了一种腹膜透析液，该腹膜透析液包括溶解于水中的聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物4～20w/v%，以及腹膜透析中可接受的电解质。其中，水优选为无菌水，例如蒸馏水或去离子水，以保证透析治疗的安全。

该腹膜透析液选用聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物作为胶体渗透剂并与电解质复配，一方面基于聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物水溶液的pH值可稳定在6.00±0.05的特性，加入乳酸钠、碳酸氢钠等缓冲剂后，直接灭菌便可得到中性pH的腹膜透析液，从而避免现有技术下需要先在较低pH下灭菌再中和的繁琐流程，实现了制备流程的简化，而且中性pH的腹膜透析液可以保留残余肾功能、保护腹膜功能、抑制包裹性腹膜硬化发展、改善灌入痛、降低腹膜炎发生率等；另一方面基于聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物具有较高的热稳定性，因此腹膜透析液在高温灭菌过程中不会产生有毒的降解产物，有效保护腹膜功能；第三方面，能够使得腹膜透析液具有优良的细胞相容性和优异的持续超滤能力，尤其长时间留腹后对肌酐、尿素的清除效果显著；第四方面，通过在聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物与电解质复配的基础上，严格控制各组分原料的浓度使得该腹膜透析液的热稳定性、细胞相容性和持续超滤能力优于临床上常用的葡萄糖腹膜透析液和艾考糊精腹膜透析液。

结合第一方面，该腹膜透析液中的聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物的含量优选为6～10w/v%，有利于提高腹膜透析液的细胞相容性、超滤效果以及肌酐尿素清除能力。

结合第一方面，所述电解质选自氯化钙、氯化镁、氯化钠和氯化钾中的至少一种。例如，可以选择为氯化钠0.5～0.6w/v%、氯化钙0.01～0.03w/v%和氯化镁0.004～0.006w/v%，从而能够使腹膜透析液与人体内环境相接近，防止造成人体内环境紊乱。

结合第一方面，该腹膜透析液还包括腹膜透析中可接受的缓冲剂，从而能够使得腹膜透析液进入人体后快速平衡酸碱，避免发生机体紊乱。其中，所述缓冲剂优选为乳酸钠0.4～0.5w/v%，能够相适应人体内环境，避免出现不良反应。当然，对于严重乳酸酸中毒的患者，所述缓冲剂优选为碳酸氢钠。

结合第一方面，所述聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物的分子量优选为20~80 kDa，胶体直径优选为4～20nm，防止胶体直径过小而通过腹膜孔壁被人体吸收，从而不能长时间维持渗透压。

需要说明的是，本申请实施例100 mL腹膜透析液的原料组分示例性地为：

聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物4g、氯化钠0.535g、氯化钙0.0257 g、氯化镁0.00508g、乳酸钠0.448g、无菌水适量；

或者

聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物6g、氯化钠0.535g、氯化钙0.0257 g、氯化镁0.00508g、乳酸钠0.448g、无菌水适量；

或者

聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物8g、氯化钠0.535g、氯化钙0.0257 g、氯化镁0.00508g、乳酸钠0.448g、无菌水适量；

或者

聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物10g、氯化钠0.535g、氯化钙0.0257 g、氯化镁0.00508g、乳酸钠0.448g、无菌水适量。

第二方面，本申请实施例提供了上述腹膜透析液的制备方法，该制备方法包括以下步骤：

按照本申请实施例第一方面提供的所述腹膜透析液的配方组分及比例将各组分原料溶解于水中并搅拌混合后灭菌处理，得到腹膜透析液。

需要说明的是，本申请实施例的制备方法具体是将聚乙二醇-聚乙烯醇分批次加入到水中并搅拌溶解，然后加入电解质以及缓冲剂混合均匀。其中，所述水的温度优选为60～90℃，加速溶解的同时保证溶解度。

该制备方法能够使得各配方组分混合均匀，各组分充分溶解于水中并使得聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物能够在水中形成分散均匀的纳米颗粒，从而制备得到均匀稳定的腹膜透析液。聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物与电解质以及缓冲剂相互协同，为腹膜透析液长期提供稳定渗透压的同时赋予其优异的针对电解质紊乱和酸碱失衡的纠正效果。

结合第二方面，所述搅拌混合优选分为两个阶段，其中，第一阶段的搅拌速度为800～1500rpm，时间为20～40min；第二阶段的搅拌速度为200～400rpm，时间为5～10min，保证聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物能够形成分散均匀的纳米颗粒。

第三方面，本申请实施例提供了上述腹膜透析液在腹膜透析中的应用，基于本申请的腹膜透析液具有较高的热稳定性、优良的细胞相容性和优异的持续超滤能力，因而本申请腹膜渗透液在作为腹膜透析药剂的应用中能够长期提供稳定的渗透压，从而使得腹膜透析治疗效果更好。

下面将结合具体实施例对本申请的技术方案作进一步地阐述。

实施例1

本实施例1提供了4%的聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物腹膜透析液的制备方法，具体包括：

S101：将4g聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物搅拌溶解在50mL的无菌水中，获得聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物水溶液，其中，所述无菌水的温度为60-90℃；

S102：将0.535g氯化钠、0.0257g氯化钙、0.00508g氯化镁和0.448g乳酸钠加入到步骤S101制备的所述聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物水溶液并搅拌溶解，然后转移到100mL的容量瓶中加入无菌水定容到100mL，获得4%的聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物腹膜透析液初品；

S103：将步骤S102制备的所述4%的聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物腹膜透析液初品经121℃的高压蒸汽灭菌30min，即得4%的聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物腹膜透析液。

实施例2

本实施例2提供了6%的聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物腹膜透析液的制备方法，具体包括：

S101：将6g聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物搅拌溶解在50mL的无菌水中，获得聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物水溶液，其中，所述无菌水的温度为60-90℃；

S102：将0.535g氯化钠、0.0257g氯化钙、0.00508g氯化镁和0.448g乳酸钠加入到步骤S101制备的所述聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物水溶液并搅拌溶解，然后转移到100mL的容量瓶中加入无菌水定容到100mL，获得6%的聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物腹膜透析液初品；

S103：将步骤S102制备的所述6%的聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物腹膜透析液初品经121℃的高压蒸汽灭菌30min，即得6%的聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物腹膜透析液。

实施例3

本实施例3提供了8%的聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物腹膜透析液的制备方法，具体包括：

S101：将8g聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物搅拌溶解在50mL的无菌水中，获得聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物水溶液，其中，所述无菌水的温度为60-90℃；

S102：将0.535g氯化钠、0.0257g氯化钙、0.00508g氯化镁和0.448g乳酸钠加入到步骤S101制备的所述聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物水溶液并搅拌溶解，然后转移到100mL的容量瓶中加入无菌水定容到100mL，获得8%的聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物腹膜透析液初品；

S103：将步骤S102制备的所述8%的聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物腹膜透析液初品经121℃的高压蒸汽灭菌30min，即得8%的聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物腹膜透析液。

实施例4

本实施例4提供了10%的聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物腹膜透析液的制备方法，具体包括：

S101：将10g聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物搅拌溶解在50mL的无菌水中，获得聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物水溶液，其中，所述无菌水的温度为60-90℃；

S102：将0.535g氯化钠、0.0257g氯化钙、0.00508g氯化镁和0.448g乳酸钠加入到步骤S101制备的所述聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物水溶液并搅拌溶解，然后转移到100mL的容量瓶中加入无菌水定容到100mL，获得10%的聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物腹膜透析液初品；

S103：将步骤S102制备的所述10%的聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物腹膜透析液初品经121℃的高压蒸汽灭菌30min，即得10%的聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物腹膜透析液。

实施例5

本实施例5提供了15%的聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物腹膜透析液的制备方法，具体包括：

S101：将15g聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物搅拌溶解在50mL的无菌水中，获得聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物水溶液，其中，所述无菌水的温度为60-90℃；

S102：将0.535g氯化钠、0.0257g氯化钙、0.00508g氯化镁和0.448g乳酸钠加入到步骤S101制备的所述聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物水溶液并搅拌溶解，然后转移到100mL的容量瓶中加入无菌水定容到100mL，获得15%的聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物腹膜透析液初品；

S103：将步骤S102制备的所述15%的聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物腹膜透析液初品经121℃的高压蒸汽灭菌30min，即得15%的聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物腹膜透析液。

实施例6

本实施例6提供了20%的聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物腹膜透析液的制备方法，具体包括：

S101：将20g聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物搅拌溶解在50mL的无菌水中，获得聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物水溶液，其中，所述无菌水的温度为60-90℃；

S102：将0.535g氯化钠、0.0257g氯化钙、0.00508g氯化镁和0.448g乳酸钠加入到步骤S101制备的所述聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物水溶液并搅拌溶解，然后转移到100mL的容量瓶中加入无菌水定容到100mL，获得20%的聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物腹膜透析液初品；

S103：将步骤S102制备的所述20%的聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物腹膜透析液初品经121℃的高压蒸汽灭菌30min，即得20%的聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物腹膜透析液。

为了验证本申请实施例制备的聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物腹膜透析液的技术效果，本申请还设置了对比例1、对比例2和对比例3，并表征了实施例1～6制备的聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物腹膜透析液和对比例1～3的腹膜透析液的性能。其中，对比例1～3的腹膜透析液具体如下：

对比例1

市售百特低钙腹膜透析液（乳酸盐-G1.5%），每100mL溶液包括：1.5g葡萄糖、0.538g氯化钠、0.0183g氯化钙、0.0051g氯化镁和0.448g乳酸钠。

对比例2

市售百特低钙腹膜透析液（乳酸盐-G4.25%），每100mL溶液包括：4.25g葡萄糖、0.538g氯化钠、0.0183g氯化钙、0.0051g氯化镁和0.448g乳酸钠。

对比例3

市售百特艾考糊精腹膜透析液，每100mL溶液包括：7.5g艾考糊精、0.535 g氯化钠、0.0257g氯化钙、0.00508g氯化镁和0.448g乳酸钠。

性能测试项目如下：

1.热稳定性表征

配置3mg/mL的聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物水溶液，在高压蒸汽灭菌前后分别进行GPC表征，结果为图1所示。其中，图1为聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物在高压蒸汽灭菌前后的GPC谱图。

根据图1可以看出，经121℃的高压蒸汽灭菌30min后，聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物的分子量无明显变化，说明聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物的热稳定性良好。

2.pH值表征

对实施例1～6制备的聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物腹膜透析液采用pH计测量pH值，结果显示各腹膜透析液的pH值为6.00±0.05，说明聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物腹膜透析液pH值非常稳定且为中性，更有利于保护腹膜。

3.渗透压表征

将实施例1-6制备的聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物腹膜透析液和对比例1的低钙腹膜透析液（乳酸盐-G1.5%）、对比例2的低钙腹膜透析液（乳酸盐-G4.25%）和对比例3的艾考糊精腹膜透析液进行渗透压测试，表征方法如下：

本实验采用冰点渗透压仪测试腹膜透析液的渗透压。系统启动，等待约2min，上冷却系统有冰晶形成。将50μL的样品移入洁净干燥的测试管中，将测试管放在测试架上，将高热敏电阻探头浸没在样品溶液中，点击运行按钮，压低测试管架确定测定位置，下冷却系统立即冷却测试管，开始自动结晶，等待热敏电阻探头测得结冰平衡期的数值，保存渗透压值，测量结束。测量结果为表1所示。

表1 不同腹膜透析液的渗透压

根据表1可以看出：随着聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物浓度的增加，聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物腹膜透析液的渗透压逐渐增加。临床常用的腹膜透析液中，低钙腹膜透析液（乳酸盐-G4.25%）的渗透压最高，实测值为480mOsmol/L。

4.细胞相容性试验

将实施例1～6制备的聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物腹膜透析液和对比例1的低钙腹膜透析液（乳酸盐-G1.5%）、对比例2的低钙腹膜透析液（乳酸盐-G4.25%）、对比例3的艾考糊精腹膜透析液进行细胞相容性表征，表征方法如下：

将状态良好的腹膜间皮细胞（HMrSV5）细胞铺于96孔板，每孔2000个细胞，每组样品设置4个平行复孔，37℃恒温箱中培养24h；待细胞贴壁后，将完全培养基与新型腹膜透析液以1:1的方式配置工作液，con组用完全培养基与无血清培养基1:1配置，每孔100μL，放置37℃恒温箱中培养24h、48h、72h；到培养终点，用无血清培养基配置CCK8工作液（CCK8:培养基=1:10），加进去后反应1h，用酶标仪在450nm波长下测定吸光度。检测结果为图2所示。其中，图2为本申请实施例1～6和对比例1～3制备的腹膜透析液的细胞相容性表征图。

根据图2可以看出：实施例1～4制备的聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物腹膜透析液的细胞相容性优异，均优于对比例2的低钙腹膜透析液（乳酸盐-G4.25%）及对比例3中的艾考糊精腹膜透析液；实施例5和实施例6制备的聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物腹膜透析液因为聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物浓度过高，导致细胞相容性变差，但仍然优于对比例2中的低钙腹膜透析液（乳酸盐-G4.25%）。

5.超滤功能评价

将实施例1～4制备的聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物腹膜透析液和对比例1的低钙腹膜透析液（乳酸盐-G1.5%）、对比例2的低钙腹膜透析液（乳酸盐-G4.25%）、对比例3的艾考糊精腹膜透析液进行超滤功能表征，表征方法如下：

5.1超滤量的实验方法

用异氟醚麻醉大鼠，酒精擦拭腹部下侧，将30mL预热的透析液注入腹膜腔。大鼠在手术后醒来，并可以自由获取食物和自来水。透析液在腹膜内停留4h或16h后麻醉大鼠，剪开腹壁，量取腹腔液体，再用棉球收集腹腔内未倒出的液体并计量。不同腹膜透析液的4h超滤量、16h超滤量如图3和图4所示。其中，图3为本申请实施例1～4和对比例1～3制备的腹膜透析液的4h超滤量图；图4为本申请实施例1～4和对比例1～3制备的腹膜透析液的16h超滤量图。

超滤量根据下式计算：

超滤量=(棉球吸水后质量-棉球质量)/透出液密度+腹腔透出量-腹腔注射量

根据图3至图4可以看出：与对比例3（艾考糊精腹膜透析液）相比，实施例2～4的4h、16h超滤量均要优于对比例3。虽然，对比例2（4.25%葡萄糖腹膜透析液）的4h超滤量最高，但高浓度葡萄糖的生物相容性差而容易导致腹膜功能改变甚至超滤失败，并且对比例2因利用小分子葡萄糖作为渗透剂，容易被人体吸收，所以16h超滤量要明显低于聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物腹膜透析液。

5.2肌酐、尿素的检测方法

取透出液1mL，静置1小时后，3500rpm离心10min，分离出上层清液备用；通过全自动生化分析仪上样测定肌酐、尿素的含量。其结果为图5至图6所示。其中，图5为留腹16h后的透出液中肌酐（CRE）的含量；图6为留腹16h后的透出液中尿素（BUN）的含量。

根据图5至图6可以看出：实施例2～4的肌酐、尿素清除能力均要优于对比例1～3，尤其实施例4表现最为优异。

综合上述，本申请实施例的聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物腹膜透析液具有优良的细胞相容性和优异的超滤效果。

本说明书中的各个实施方式采用递进的方式描述，各个实施方式之间相同或相似的部分可互相参见，每个实施方式重点说明的都是与其他实施方式的不同之处。

以上实施例仅用以说明本申请的技术方案，而非对本申请限制；尽管参照前述实施例对本申请进行了详细的说明，本领域普通技术人员应当理解：其依然可以对前述实施例记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本申请技术方案的范围。

Claims (4)

1.一种腹膜透析液，其特征在于，包括溶解于水中的聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物6～10w/v%、氯化钠0.5～0.6w/v%、氯化钙0.01～0.03w/v%、氯化镁0.004～0.006w/v%和乳酸钠0.4～0.5w/v%；

其中，所述聚乙二醇-聚乙烯醇接枝共聚物的分子量为20~80kDa。

2.根据权利要求1所述的腹膜透析液，其特征在于，所述腹膜透析液的胶体直径为4～20nm。

3.一种根据权利要求1或2所述腹膜透析液腹膜透析液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

按照所述腹膜透析液的配方组分及比例将各组分原料溶解于水中并搅拌混合后灭菌处理，得到腹膜透析液。

4.一种根据权利要求1或2所述腹膜透析液和/或权利要求3所述制备方法制备成的腹膜透析液在制备腹膜透析药剂中的应用。

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