CN117180308A

CN117180308A - 一种用于腹膜透析治疗的基础溶液及其制备方法和用途

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Publication number: CN117180308A
Application number: CN202210623259.6A
Authority: CN
Inventors: 周少文; 杨炯; 郭宝才
Original assignee: Fuzhou Dongze Medical Device Co ltd
Current assignee: Fuzhou Dongze Medical Device Co ltd
Priority date: 2022-06-01
Filing date: 2022-06-01
Publication date: 2023-12-08

Abstract

本发明涉及一种用于腹膜透析治疗的腹膜透析液，其具有安全、有效、稳定、pH中性、成本低等特点。本发明还涉及用于所述腹膜透析液的基础溶液，其含有人体生理可接受的电解质(钙离子、镁离子、氯离子、钠离子，钾离子等)和渗透剂成分。

Description

一种用于腹膜透析治疗的基础溶液及其制备方法和用途

发明领域

本发明涉及腹膜透析领域，特别是涉及一种葡萄糖降解产物含量低的腹膜透析液及其基础溶液。

背景技术

Moncrief等人在1976年首次介绍了一种新型简便的腹膜透析(PD)技术，并在2年后将其命名为连续非流动腹膜透析(CAPD)。

目前国内常规商用的腹膜透析溶液(PD溶液)，主要是以高浓度葡萄糖为渗透剂和以乳酸盐为缓冲剂，其中含有钠(125～135mmol/L)、钙(1.25～1.75mmol/L)、镁(0.25～0.75mmol/L)、氯(95～105mmol/L)、乳酸(35～40 mmol/L)和三种浓度的葡萄糖(1.5％、2.5％和4.25％)。不同葡萄糖浓度的 PD溶液可提供不同程度的渗透梯度，以达成超滤。

标准的葡萄糖-乳酸盐PD溶液的pH值为5.0到5.8，在灌注时易引起流入性疼痛，且在高温灭菌过程中葡萄糖容易发生焦糖化，生成高水平的葡萄糖降解产物(GDPs)。GDPs可诱导腹膜间皮细胞凋亡、细胞内过氧化氢及自由基的形成。溶液的低pH、高渗透压和高葡萄糖含量会抑制腹膜白细胞的吞噬功能，损害宿主免疫防御机制。另外，乳酸盐的使用会降低腹膜间皮细胞的代谢及存活率，并降低腹腔白细胞功能，使腹腔对抗微生物入侵的能力减弱。乳酸盐进入全身还可产生低血压、心肌收缩力下降等不良反应。

由于目前的葡萄糖-乳酸盐PD溶液存在高乳酸、高葡萄糖浓度、高渗透性和高水平的葡萄糖降解产物等问题，长期使用易导致进行性腹膜损伤、新生血管形成、腹膜硬化和纤维化等并发症。

为解决乳酸盐对患者身体造成损伤的问题，国内外进行了大量基础和临床研究，开发非乳酸为缓冲剂的腹膜透析溶液。各种生理性的弱酸缓冲对被制备成腹膜透析溶液进行对比。近年来，欧美出现商品化的碳酸氢钠PD溶液，以碳酸氢钠为缓冲剂，但由于碳酸氢根在加热过程中可与钙、镁等金属离子反应生成沉淀，因此目前以碳酸氢钠作为缓冲剂的PD溶液，必须采用多腔室分隔包装形式，即：将含碳酸氢钠的药液和另外含无机盐、渗透剂的药液分别装在不同包装容器内，以一定形式连接，在临床使用前再将二者混合，避免产生沉淀，从而使碳酸氢钠作为缓冲剂的PD溶液成为可能。

为了进一步改善患者的治疗效果及生活质量，开发安全性更高、成本更低的腹膜透析溶液产品具有重要意义。

发明内容

本发明旨在解决上述问题，提供一种腹膜透析液，与目前的葡萄糖-乳酸盐PD溶液相比，能够有效降低透析液中葡萄糖降解产物的含量。

为了达到上述目的，本发明提供了一种腹膜透析液，其由基础溶液和缓冲剂配制而成，其中所述基础溶液含有人体生理可接受的电解质和渗透剂成分，该基础溶液的pH值为3.5～4.0。

在本发明中，腹膜透析(PD)是利用腹膜作为透析膜，把灌入腹腔的透析液与血液分开，浸泡在透析液中的腹膜毛细血管腔内的血液与透析液进行广泛的物质交换，以达到清除体内代谢产物和毒物，纠正水电解质、酸碱平衡失调的目的，主要应用于治疗肾功能衰竭等。

所述“缓冲剂”可以是本领域任意可使用的缓冲剂成分。基础溶液和缓冲剂配制的方式，可以是直接与缓冲剂物质混合配制，也可以是与包含缓冲剂的溶液混合配制。

可选地，所述基础溶液中的渗透剂为葡萄糖。

优选地，所述葡萄糖在透析液中的质量分数为1％～10％，优选为1.5％～ 5％，更优选为1.5％～1.8％、2.4％～3％或4％～5％，最优选为1.59％、1.69％、 2.66％、2.81％、4.52％或4.78％。

为了尽量减少灭菌过程中葡萄糖的降解，降低产品中葡萄糖降解产物的含量。目前本领域的共识是降低溶液体系的pH值至2.8-3.2，可最大限度降低GDPs的产生，在使用时与缓冲剂溶液混合至中性后进行灌注。

本发明腹膜透析液产品中，含葡萄糖的基础溶液pH值为3.5-4.0，同样能够有效减少高温灭菌过程中葡萄糖降解产物的生成，效果与pH值为 2.8-3.2时相当。相对于pH值为2.8-3.2的基础溶液，本发明产品在使用时人体接受度更高，还可减少缓冲剂中用于调节pH部分的用量，可更好地实现不同浓度的腹膜透析液的梯度配制。

所述基础溶液中的电解质包括钙离子、镁离子、氯离子、钠离子、钾离子和磷酸根离子中的一种或多种。

所述腹膜透析液中的电解质浓度与正常血浆中的电解质浓度相近，以保证透析液的正常作用。

可选地，离子浓度以毫摩尔/升(mmol/L)计为：钠离子(90～150)、钙离子(0.5～2.5)、镁离子(0.2～1)、钾离子(0～5)、氯离子(70～140) 和磷酸根离子(0～2)；优选为钠离子(90～130)、钙离子(1.0～2.0)、镁离子(0.2～0.5)、钾离子(0～5)、氯离子(90～130)和磷酸根离子(0～2)；更优选钠离子(95～120)、钙离子(1.2～1.5)、镁离子(0.24～0.3)、钾离子(0～5)、氯离子(95～125)和磷酸根离子(0～2)。

本发明基础溶液中可使用的电解质包括氯化钠、氯化镁、氯化钙、硫酸钠、氯化钾、磷酸二氢钠、磷酸氢钠和磷酸钠中的一种或多种。

在本领域内，腹膜透析液中常用的缓冲剂为弱酸形成的缓冲盐。

可选地，所述缓冲剂为以下弱酸形成的缓冲盐：碳酸、乙酸、乳酸、枸橼酸和丙酮酸。

优选地，所述缓冲剂为碳酸氢盐，优选碳酸氢钠，例如5％的碳酸氢钠注射剂。

碳酸氢钠是机体本身生理性的缓冲物质，可将PD溶液调节至生理性pH 值(7.0-7.4左右)，生物相容性更好，对腹膜间皮细胞和单核细胞、系膜细胞等细胞的活性和功能无明显影响，还可减轻灌液时的疼痛感，患者感觉更良好，。

可选地，所述基础溶液具有以下组成：质量分数为1.5％～1.8％、2.4％～ 3％或4％～5％的葡萄糖、95～120mmol/L的钠离子、1.2～1.5mmol/L的钙离子、0.24～0.3mmol/L的镁离子和95～125mmol/L的氯离子。

在本发明的一个具体实施方式中，所述基础溶液具有以下组成：质量分数为1.59％、2.66％或4.52％的葡萄糖、104mmol/L的钠离子、1.33mmol/L 的钙离子、0.266mmol/L的镁离子和107mmol/L的氯离子。

可选地，所述基础溶液具有以下组成：质量分数为1.5％～1.8％、2.4％～ 3％或4％～5％的葡萄糖、95～120mmol/L的钠离子、1.2～1.5mmol/L的钙离子、0.24～0.3mmol/L的镁离子、95～125mmol/L的氯离子和0.5～1.5 mmol/L的磷酸根离子。

在本发明的一个具体实施方式中，所述基础溶液具有以下组成：质量分数为1.59％、2.66％或4.52％的葡萄糖、104mmol/L的钠离子、1.33mmol/L 的钙离子、0.266mmol/L的镁离子、107mmol/L的氯离子和1.0mmol/L的磷酸根离子。

在本发明的另一个具体实施方式中，所述基础溶液具有以下组成：质量分数为1.69％、2.81％或4.78％的葡萄糖、110mmol/L的钠离子、1.41mmol/L 的钙离子、0.28mmol/L的镁离子、114mmol/L的氯离子和1.0mmol/L的磷酸根离子。

此外，本发明人还开发了非葡萄糖为渗透剂的腹膜透析溶液，使用碳酸氢盐作为渗透剂，因此在保留渗透压的前提下，还可以降低使用葡萄糖带来的问题。

因此，本发明提供了一种腹膜透析液，其由基础溶液和缓冲剂配制而成，其中所述基础溶液含有人体生理可接受的电解质和渗透剂成分，其中所述渗透剂产生300～600mOsm/L的摩尔渗透压，并且不是葡萄糖，并且其中所述缓冲剂为碳酸氢盐。

可选地，所述渗透剂选自甘油、葡聚糖、右旋糖苷、甘露醇或木糖醇。

可选地，所述葡聚糖选自艾考糊精、麦芽糖糊精、环糊精、葡聚糖和壳聚糖。

在本发明的一个具体实施方式中，所述葡聚糖为艾考糊精。

艾考糊精(Icodextrin)是一种淀粉衍生的、支链的水溶性葡萄糖聚合物，平均分子量在13000-19000Da之间。艾考糊精不易被腹膜吸收，可实现15 小时以上的留腹时间，能够大大提高透析效率，提高了透析充分性。与传统的葡萄糖相比，艾考糊精具有更好的超滤能力，特别是具有更长的停留时间和更少的葡萄糖降解产物的产生，可提高治疗的便利性，改善患者容量超负荷和糖脂代谢，降低心血管疾病及死亡风险。

在本发明的一些具体实施方式中，所述渗透剂为艾考糊精或木糖醇。

可选地，所述艾考糊精的质量分数为5％～10％。

在本发明的一个具体实施方式中，所述艾考糊精的质量分数为8％。

可选地，所述木糖醇的质量分数为1％～5％。

在本发明的一个具体实施方式中，所述木糖醇的质量分数为3.2％。

可选地，所述缓冲剂为碳酸氢钠，例如5％的碳酸氢钠注射剂。

所述基础溶液中的包括钙离子、镁离子、氯离子、钠离子、钾离子和磷酸根离子中的一种或多种。

可选地，所述离子浓度以毫摩尔/升(mmol/L)计为：钠离子(90～150)、钙离子(0.5～2.5)、镁离子(0.2～1)、钾离子(0～5)、氯离子(70～140) 和磷酸根离子(0～2)；优选为钠离子(90～130)、钙离子(1.0～2.0)、镁离子(0.2～0.5)、钾离子(0～1)和氯离子(90～130)；更优选为钠离子(95～ 120)、钙离子(1.2～1.5)、镁离子(0.24～0.3)、钾离子(0～1)和氯离子 (95～125)。

可选地，所述基础溶液具有以下组成：质量分数为7～9％的艾考糊精、 95～120mmol/L的钠离子、1.2～2.0mmol/L的钙离子、0.24～1mmol/L的镁离子、95～125mmol/L的氯离子。

在本发明的一个具体实施方式中，所述基础溶液具有以下组成：质量分数为8％的艾考糊精、104mmol/L的钠离子、1.8mmol/L的钙离子、0.8mmol/L 的镁离子、109mmol/L的氯离子。

可选地，所述基础溶液具有以下组成：质量分数为1～5％的木糖醇、95～120mmol/L的钠离子、1.2～1.5mmol/L的钙离子、0.24～0.3mmol/L的镁离子、3.5～4.5mmol/L的钾离子和95～125mmol/L的氯离子。

在本发明的一个具体实施方式中，所述基础溶液具有以下组成：质量分数为3.2％的木糖醇、104mmol/L的钠离子、1.33mmol/L的钙离子、0.266 mmol/L的镁离子、4.0mmol/L的钾离子和107mmol/L的氯离子。

本发明电解质中的磷酸根离子浓度，是指所有含磷酸根的离子总浓度，即磷酸根离子、磷酸氢根离子、磷酸二氢根离子、磷酸的总浓度。

本发明还提供了一种用于腹膜透析液的基础溶液，其含有前述含葡萄糖的腹膜透析液中的人体生理可接受的电解质和渗透剂成分，该基础溶液的 pH值为3.5～4.0。

本发明还提供了制备该基础溶液的方法，包括以下步骤：(1)将电解质和渗透剂溶解于注射用水；(2)除杂；(3)调节pH值至3.5～4.0；(4)高温热压灭菌。

在本发明的具体实施方式中，(2)除杂步骤使用活性炭处理，然后过滤和精滤。

在本发明的具体实施方式中，(3)调节pH值至3.5～4.0使用10％盐酸进行。

在本发明的具体实施方式中，(4)高温热压灭菌累计F0＞8分钟。

本发明还提供了一种用于腹膜透析液的基础溶液，其含有前述不含葡萄糖的腹膜透析液中的人体生理可接受的电解质和渗透剂成分。

本发明还提供了制备该基础溶液的方法，包括以下步骤：(1)将电解质和渗透剂溶解于注射用水；(2)除杂；(3)高温热压灭菌。

在本发明的具体实施方式中，(3)高温热压灭菌累计F0＞8分钟。

本发明还提供了前述两种基础溶液在制备腹膜透析液中的用途。

进一步地，是将基础溶液与缓冲剂混合，得到最终生理pH值的腹膜透析液。

可选地，本发明的基础溶液作为产品单独包装，在使用时再与缓冲剂溶液混合，如可直接与市售的碳酸氢钠注射液搭配使用，可显著降低生产成本。

本发明的基础溶液与缓冲剂溶液混合，可使用能够调节流量大小的多通路设备(本文称“专用APD设备”)进行。

比如，专用APD设备可包括多个用于输送汇入溶液的通道和用于容纳汇入溶液的混合缓冲容器，各通道均设有电磁阀并连接电磁阀驱动模块，电磁阀驱动模块与控制器连接，混合缓冲容器中的溶液受到溶液计量模块的监测。计量模块与控制器连接，控制器根据初始设置值和溶液计量模块的监测值，通过计算并分别对各通道阀的启闭进行控制，使最终混合容器中的溶液为符合设定的治疗用溶液。

可选地，专用APD设备可设置多个A液通道(如A1、A2等)和B液通道(如B1、B2等)，且各通道可设置多个进液端，分别对A1、A2、B1、 B2等通道的通道阀的启闭进行控制，使最终混合缓冲容器中的溶液为符合设定的治疗用溶液，更好地实现治疗用溶液的多样化设计和灵活配制。

本发明所述流量，既可以理解为单位时间内流经通道的流体量，也可以理解为在一定之间内流经通道的流体总量。

本发明的有益效果：

(1)本发明的腹膜透析液的基础溶液pH为3.5-4.0，可有效降低葡萄糖降解产物(GDPs)的产生，产品中GDPs含量极低，安全性高。

(2)本发明腹膜透析液不含乳酸盐，避免了乳酸盐可能带来的安全风险，适用范围更广。

(3)本发明还实现了以艾考糊精为渗透剂、碳酸氢钠缓冲剂的PD溶液，综合了艾考糊精渗透剂和碳酸氢钠缓冲剂的优势，完全避免了葡萄糖和乳酸盐的使用，进一步提高了腹膜透析的有效性和安全性。

(4)试验证明，本发明腹膜透析液对人腹膜间皮细胞(HMrSV5)基本无损伤，腹膜形态、炎症细胞和血管分布与空白对照组相似，说明本发明腹膜透析液可有效控制腹膜间皮细胞异常凋亡、腹膜损伤、腹膜硬化和纤维化等不安全因素，有利于保护PD患者残余肾功能，增加透析充分性，延长PD 技术存活率和患者有效生存时间。

(5)本发明的基础溶液可直接与市售含缓冲剂成分的溶液产品(如碳酸氢钠注射液)搭配使用，无需进行双室双袋包装，解决了当前商品化的基于碳酸氢根离子的中性PD溶液的成本问题，便于长期的存储和运输，保证了透析治疗的安全、有效和经济性；在使用过程中还可灵活调整配制比例，得到不同浓度的治疗用溶液，可针对患者的实际情况进行个性化治疗。

具体实施方式

下面结合对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1

【不同pH调整值的GDPs测定，与市售腹膜透析液G1.5％(乳酸盐) 对比】

将一水合葡萄糖15.94千克、氯化钠6.09千克、二水合氯化钙195克、六水合氯化镁54克加入到200升注射用水中，搅拌溶解后，加入200克注射用活性炭，经过滤、精滤后，加注射用水到1000升容量，加适量10％盐酸调节溶液不同pH情况下(pH 2.0/2.5/3.0/3.5/4.0/4.5/5.0)，再灌装于4升容量的软袋包装中，经热压灭菌且累计F0＞8分钟，即得不同pH值的用于腹膜透析治疗的基础溶液A样品，再加上市售的腹膜透析液G1.5％(乳酸盐)，一共八种样品的最主要的葡萄糖降解产物。

检测上述七种样品及市售的腹膜透析液G1.5％(乳酸盐)，研究和比较指标为上述八种样品的主要葡萄糖降解产物之一5-羟甲基糠醛 (5-hydroxymethyl-furfural，5-HMF)。

检测方法为：精密量取待测溶液适量(约相当于葡萄糖l.0g)，置100ml 量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，照紫外-可见分光光度法，在284nm的波长处测定吸光度。检测结果见表1。

表1

从表1数据可知，当溶液pH值为5时，葡萄糖降解反应产生的5-HMF 较多，在溶液中含量较高，与市售的腹膜透析液G1.5％(乳酸盐)接近；当溶液pH值降低为4.5时，5-HMF含量略有降低，但仍然偏高；当pH值降低至4时，溶液中5-HMF含量显著下降，明显低于市售的腹膜透析液G1.5％ (乳酸盐)。再降低pH值至3.5～2.0，5-HMF含量较稳定，与pH为4时无显著差异。

考虑到人体所能接受的溶液，其pH值不能过低，最终选择溶液pH值在3.5-4.0之间。

实施例2

将一水合葡萄糖15.94千克、氯化钠6.09千克、二水合氯化钙195克、六水合氯化镁54克加入到200升注射用水中，搅拌溶解后，加入200克注射用活性炭，经过滤、精滤后，加注射用水到1000升容量，加适量10％盐酸调节溶液pH为3.5-4.0，再灌装于4升容量的软袋包装中，经热压灭菌且累计F0＞8分钟，即得成品的用于腹膜透析治疗的基础溶液A。

经测量，用于腹膜透析治疗的基础溶液A中含有葡萄糖1.59％，钠离子 104.1毫摩尔/升，钙离子1.328毫摩尔/升，镁离子0.266毫摩尔/升，氯离子 107.3毫摩尔/升。

实施例3

将一水合葡萄糖26.57公斤、氯化钠6.09千克、二水合氯化钙195克、六水合氯化镁54克、二水合磷酸二氢钠178克加入到200升注射用水中，搅拌溶解后，加入300克注射用活性炭，经过滤、精滤后，加注射用水到1000 升容量，加适量10％盐酸调节溶液pH为3.5-4.0，再灌装于4升容量的软袋包装中，经热压灭菌且累计F0＞8分钟，即得成品的用于腹膜透析治疗的基础溶液B。

经测量，用于腹膜透析治疗的基础溶液B中含有葡萄糖2.66％，钠离子 104.2毫摩尔/升，钙离子1.328毫摩尔/升，镁离子0.266毫摩尔/升，氯离子 107.4毫摩尔/升，磷酸根离子1.0毫摩尔/升。

实施例4

将葡聚糖(艾考糊精)80公斤、氯化钠6.9千克、二水合氯化钙273克、六水合氯化镁162克加入到200升注射用水中，搅拌溶解后，加入200克注射用活性炭，经过滤、精滤后，加注射用水到1000升容量，再灌装于2升容量的软袋包装中，经热压灭菌且累计F0＞8分钟，即得成品的用于腹膜透析治疗的基础溶液C。

经测量，用于腹膜透析治疗的基础溶液B中含有葡聚糖(艾考糊精) 8.0％，钠离子104毫摩尔/升，钙离子1.80毫摩尔/升，镁离子0.80毫摩尔/ 升，氯离子109毫摩尔/升。

实施例5

将木糖醇32千克、氯化钠6.09千克、二水合氯化钙195克、六水合氯化镁54克、氯化钾298克加入到400升注射用水中，搅拌溶解后，加入200 克注射用活性炭，经过滤、精滤后，加注射用水到1000升容量，加适量10％盐酸调节溶液pH为3.5-4.0，再灌装于3升容量的软袋包装中，经热压灭菌且累计F0＞8分钟，即得成品的用于腹膜透析治疗的基础溶液D。

经测量，用于腹膜透析治疗的基础溶液D中含有木糖醇3.2％，钠离子 104毫摩尔/升，钙离子1.328毫摩尔/升，镁离子0.266毫摩尔/升，钾离子 4.0毫摩尔/升，氯离子107毫摩尔/升。

实施例6

由于腹膜透析液进行热压灭菌，部分葡萄糖会转化为葡萄糖降解产物 (GDPs)，而这些降解产物是腹膜损伤、腹膜硬化和纤维化的直接相关因素，因此，我们定量检测了以上实施例1-4的用于腹膜透析治疗的基础溶液A、 B、C和D，再加上市售的腹膜透析液G1.5％(乳酸盐)，一共五种样品的葡萄糖降解产物。

检测方法为：通过UHPLC进行分离，使用Waters苯基柱(100×2.1mm， 1.7μm粒径)，流动相为：(A)醋酸铵盐缓冲液(5mM，pH2.8)和(B)甲醇，梯度洗脱条件为：[时间(分钟)/B百分比]：-3.0/10；0.0/10；8.5/25； 10/50；11.0/80，流速为400μL/min。检测器为四极质谱仪MS-MS联用，配备电喷雾电离(ESI)源(正离子模式)，氮气为干燥气体。

研究和比较指标为上述五种样品的主要葡萄糖降解产物，包括：葡萄糖酮(glucosone)、3-脱氧葡糖醛酮(3-deoxyglucosone，3-DG)、3-脱氧半乳糖酮(3-deoxygalactosone，3-DGal)、5-羟甲基糠醛(5-hydroxymethyl-furfural， 5-HMF)、3,4-二脱氧葡萄糖-3-烯(3,4-dideoxyglucosone-3-ene，3,4-DGE)。检测结果列表如下见表2。

表2

注：“N.D.”指未检出，即浓度值低于方法检测限。

表2的结果表明，基础溶液A和B，由于工艺上降低了产品pH值，生物不相容的葡萄糖降解产物含量远低于市售的腹膜透析液G1.5％(乳酸盐)；基础溶液C和D均未使用葡萄糖作为原料，因此生物不相容的葡萄糖降解产物含量极低或未检出。

实施例7

在用于自动化腹膜透析治疗(APD)时，将基础溶液配方A连接在专用 APD设备的A液通道上，并将市售碳酸氢钠溶液制剂(5％的注射剂)连接在专用APD设备的B通道上，在APD设备上设定，按照流量比例A：B＝16:1，通过APD设备的管路系统实现混合，就以即用即配的方式获得基于碳酸氢根离子的中性腹膜透析溶液，此中性腹膜透析溶液即可用于腹膜透析治疗。

经测定，最终获得的中性腹膜透析溶液含有葡萄糖1.50％，钠离子133 毫摩尔/升，钙离子1.25毫摩尔/升，镁离子0.25毫摩尔/升，氯离子101毫摩尔/升，碳酸氢根离子35毫摩尔/升。

实施例8

在用于连续不卧床腹膜透析治疗(CAPD)时，将125ml碳酸氢钠溶液制剂(250ml：2.5％，注射剂)通过输液器，全部注入2000ml的基础溶液配方B中，并通过晃动混合均匀，即得到中性腹膜透析溶液，可通过腹透管路可用于CAPD治疗。

经测定，最终获得的中性腹膜透析溶液含有葡萄糖2.50％，钠离子133 毫摩尔/升，钙离子1.25毫摩尔/升，镁离子0.25毫摩尔/升，氯离子101毫摩尔/升，碳酸氢根离子35毫摩尔/升，磷酸根离子0.94毫摩尔/升。

实施例9

细胞培养分组实验按照培养液不同，分为以下三组：(1)对照组：无血清DMEM培养液；(2)上述实施例6获得基于碳酸氢根离子的中性腹膜透析溶液；(3)市售的腹膜透析液G1.5％(乳酸盐)。三种作为细胞培养液，观察其对人腹膜间皮细胞(HMrSV5)的作用。

人腹膜间皮细胞(HMrSV5)使用含10％小牛血清的DMEM培养液培养，培养箱条件为37℃/5％CO2，换液间隔时间为2天，期间传代细胞。细胞贴壁后，用含1％小牛血清的培养液再培养24小时。将上述细胞制备成细胞悬液，将细胞密度调整为约1×10⁵个/mL，接种到96孔培养板内(每孔100μL 细胞悬液)，置于培养箱中培养96小时，然后再用含1％小牛血清的培养液处理24小时，弃去培养液，PBS清洗，各加入分组的培养液100μL，分别与HMrSV5作用12小时，弃去培养液，PBS清洗，再入5％小牛血清培养液继续培养24小时，每孔均加入四甲基偶氮唑蓝(MTT，100μL)，振荡孵育4小时。将培养液弃去，每孔加入二甲亚砜(DMSO，100μL)，摇匀大概 10分钟，用酶标仪测定各组的平均吸光度值(OD值)，检测波长570nm。

结果见表3：

表3

样品	OD值：aver±δ，n＝3
		对照组	0.253±0.056
实施例6获得中性腹透溶液	0.302±0.024
		市售腹膜透析液G1.5％(乳酸盐)	0.107±0.012

各组培养液与HMrSV5细胞共孵育，MTT法检测各组细胞增殖、评估细胞活力，实施例6获得中性腹透溶液与对照组相比，对人腹膜间皮细胞 (HMrSV5)基本无损伤，而市售腹膜透析液G1.5％(乳酸盐)与HMrSV5 细胞共培养，其OD值明显低于对照组，表明其会显著致HMrSV5细胞损伤。

实施例10

取清洁级SD大鼠24只，雌雄各半，体重范围在(200±50)克之内，根据腹腔注射液体不同，分为3组，每组8只：(1)对照组：0.9％氯化钠注射液；(2)上述实施例6获得基于碳酸氢根离子的中性腹膜透析溶液；(3) 市售的腹膜透析液G1.5％(乳酸盐)；

动物分组后，分别以上述三种液体进行腹腔注射，每日2次，每次注射 20毫升。于腹腔注射后第8周，麻醉处死各组动物，进行组织病理染色观察和免疫组化观察。

组织病理染色方法：取动物壁层腹膜组织，固定后用石蜡进行包埋，切片，使用HE染色，光学镜下观察并计算单位面积血管数量和炎症细胞数；使用Masson染色，光学镜下观察动物腹膜间皮下致密层形态并测量腹膜厚度。

HE染色观察下，对照组动物腹膜表面光滑，可见一层扁平腹膜间皮细胞，间皮下基质薄，基质内见少量炎症细胞和正常血管分布；与对照组相比，实施例6获得中性腹透溶液组动物腹膜形态相似，炎症细胞和血管分布相似；而市售腹膜透析液G1.5％(乳酸盐)组动物腹膜形态有明显改变，间皮细胞脱落，间皮下基质显著增厚，有大量炎症细胞浸润，出现较多新生血管。

Masson染色下进行腹膜厚度测量，结果见表4，市售腹膜透析液G1.5％ (乳酸盐)组动物腹膜厚度显著大于另两组。

表4

免疫组化：使用链霉亲和素-生物素-过氧化物酶复合物技术(SABC法) 进行免疫组化染色，于高倍光学镜下，计数α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)阳性细胞和转化生长因子β1(TGF-β1)阳性细胞的数量，结果见表5。

SABC免疫组化下观察，对照组动物腹膜中α-SMA和TGF-β1均为弱表达；与对照组相比，实施例6获得中性腹透溶液组动物腹膜中α-SMA和TGF-β1的表达有少量升高，但非常有限；但市售腹膜透析液G1.5％(乳酸盐)组动物腹膜中α-SMA和TGF-β1的表达显著增加。

表5

尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。

Claims

1.一种腹膜透析液，其由基础溶液和缓冲剂配制而成，其中所述基础溶液含有人体生理可接受的电解质和渗透剂成分，其特征在于该基础溶液的pH值为3.5～4.0。

2.根据权利要求1所述的腹膜透析液，其中所述渗透剂为葡萄糖；优选地，所述葡萄糖在透析液中的质量分数为1％～10％，优选为1.5％～5％，更优选为1.5％～1.8％、2.4％～3％或4％～5％，最优选为1.59％、1.69％、2.66％、2.81％、4.52％或4.78％。

3.根据权利要求1或2所述的腹膜透析液，其中所述电解质包括钙离子、镁离子、氯离子、钠离子、钾离子和磷酸根离子中的一种或多种；优选地，所述离子浓度以毫摩尔/升(mmol/L)计为：钠离子(90～150)、钙离子(0.5～2.5)、镁离子(0.2～1)、钾离子(0～5)、氯离子(70～140)和磷酸根离子(0～2)；优选为钠离子(90～130)、钙离子(1.0～2.0)、镁离子(0.2～0.5)、钾离子(0～5)、氯离子(90～130)和磷酸根离子(0～2)；更优选钠离子(95～120)、钙离子(1.2～1.5)、镁离子(0.24～0.3)、钾离子(0～5)、氯离子(95～125)和磷酸根离子(0～2)。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的腹膜透析液，其中所述电解质包括氯化钠、氯化镁、氯化钙、硫酸钠、氯化钾、磷酸二氢钠、磷酸氢钠和磷酸钠中的一种或多种。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的腹膜透析液，其中所述缓冲剂为弱酸形成的缓冲盐；优选地，所述缓冲剂为以下弱酸形成的缓冲盐：碳酸、乙酸、乳酸、枸橼酸和丙酮酸。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的腹膜透析液，其中所述缓冲剂为碳酸氢盐，优选碳酸氢钠，例如5％的碳酸氢钠注射剂。

7.根据权利要求1-6中任一项所述的腹膜透析液，其中所述基础溶液具有以下组成：质量分数为1.5％～1.8％、2.4％～3％或4％～5％的葡萄糖、95～120mmol/L的钠离子、1.2～1.5mmol/L的钙离子、0.24～0.3mmol/L的镁离子和95～125mmol/L的氯离子；优选地，所述基础溶液具有以下组成：质量分数为1.59％、2.66％或4.52％的葡萄糖、104mmol/L的钠离子、1.33mmol/L的钙离子、0.266mmol/L的镁离子和107mmol/L的氯离子。

8.根据权利要求1-6中任一项所述的腹膜透析液，其中所述基础溶液具有以下组成：质量分数为1.5％～1.8％、2.4％～3％或4％～5％的葡萄糖、95～120mmol/L的钠离子、1.2～1.5mmol/L的钙离子、0.24～0.3mmol/L的镁离子、95～125mmol/L的氯离子和0.5～1.5mmol/L的磷酸根离子；优选地，质量分数为1.59％、2.66％或4.52％的葡萄糖、104mmol/L的钠离子、1.33mmol/L的钙离子、0.266mmol/L的镁离子、107mmol/L的氯离子和1.0mmol/L的磷酸根离子；优选地，所述基础溶液具有以下组成：质量分数为1.69％、2.81％或4.78％的葡萄糖、110mmol/L的钠离子、1.41mmol/L的钙离子、0.28mmol/L的镁离子、114mmol/L的氯离子和1.0mmol/L的磷酸根离子。

9.一种腹膜透析液，其由基础溶液和缓冲剂配制而成，其中所述基础溶液含有人体生理可接受的电解质和渗透剂成分，其中所述渗透剂产生300～600mOsm/L的摩尔渗透压，并且不是葡萄糖，并且其中所述缓冲剂为碳酸氢盐。

10.根据权利要求9所述的腹膜透析液，其中所述渗透剂选自甘油、葡聚糖、右旋糖苷、甘露醇或木糖醇；优选地，所述葡聚糖选自艾考糊精、麦芽糖糊精、环糊精、葡聚糖和壳聚糖，优选艾考糊精；优选地，所述渗透剂为艾考糊精或木糖醇；优选地，所述艾考糊精的质量分数为5％～10％，优选8％；优选地，所述木糖醇的质量分数为1％～5％，优选3.2％。

11.根据权利要求9或10所述的腹膜透析液，其中所述缓冲剂为碳酸氢钠，例如5％的碳酸氢钠注射剂。

12.根据权利要求9-11中任一项所述的腹膜透析液，其中所述电解质包括钙离子、镁离子、氯离子、钠离子、钾离子和磷酸根离子中的一种或多种；优选地，所述离子浓度以毫摩尔/升(mmol/L)计为：钠离子(90～150)、钙离子(0.5～2.5)、镁离子(0.2～1)、钾离子(0～5)、氯离子(70～140)和磷酸根离子(0～2)；优选为钠离子(90～130)、钙离子(1.0～2.0)、镁离子(0.2～0.5)、钾离子(0～1)和氯离子(90～130)；更优选为钠离子(95～120)、钙离子(1.2～1.5)、镁离子(0.24～0.3)、钾离子(0～1)和氯离子(95～125)。

13.根据权利要求9-12中任一项所述的腹膜透析液，其中所述电解质包括氯化钠、氯化镁、氯化钙、硫酸钠、氯化钾、磷酸二氢钠、磷酸氢钠和磷酸钠中的一种或多种。

14.根据权利要求9-13中任一项所述的腹膜透析液，其中所述基础溶液具有以下组成：质量分数为7～9％的艾考糊精、95～120mmol/L的钠离子、1.2～2.0mmol/L的钙离子、0.24～1mmol/L的镁离子、95～125mmol/L的氯离子；优选地，所述基础溶液具有以下组成：质量分数为8％的艾考糊精、104mmol/L的钠离子、1.8mmol/L的钙离子、0.8mmol/L的镁离子、109mmol/L的氯离子。

15.根据权利要求9-13中任一项所述的腹膜透析液，其中所述基础溶液具有以下组成：质量分数为1～5％的木糖醇、95～120mmol/L的钠离子、1.2～1.5mmol/L的钙离子、0.24～0.3mmol/L的镁离子、3.5～4.5mmol/L的钾离子和95～125mmol/L的氯离子；优选地，所述基础溶液具有以下组成：质量分数为3.2％的木糖醇、104mmol/L的钠离子、1.33mmol/L的钙离子、0.266mmol/L的镁离子、4.0mmol/L的钾离子和107mmol/L的氯离子。

16.一种用于腹膜透析液的基础溶液，其含有权利要求1-4和7-8中任一项的人体生理可接受的电解质和渗透剂成分，其特征在于该基础溶液的pH值为3.5～4.0。

17.一种制备权利要求16的基础溶液的方法，包括以下步骤：(1)将电解质和渗透剂溶解于注射用水；(2)除杂；(3)调节pH值至3.5～4.0；(4)高温热压灭菌。

18.权利要求17的方法，其中(2)除杂步骤使用活性炭处理，然后过滤和精滤。

19.权利要求17的方法，其中(3)调节pH值至3.5～4.0使用10％盐酸进行。

20.权利要求17的方法，其中(4)高温热压灭菌累计F0＞8分钟。

21.一种用于腹膜透析液的基础溶液，其含有权利要求9-10和12-15中任一项的人体生理可接受的电解质和渗透剂成分。

22.一种制备权利要求21的基础溶液的方法，包括以下步骤：(1)将电解质和渗透剂溶解于注射用水；(2)除杂；(3)高温热压灭菌。

23.权利要求22的方法，其中(2)除杂步骤使用活性炭处理，然后过滤和精滤。

24.权利要求22的方法，其中(3)高温热压灭菌累计F0＞8分钟。

25.权利要求16或21所述的基础溶液在制备腹膜透析液中的用途。

26.权利要求25的用途，其中将基础溶液与缓冲剂混合，得到最终生理pH值的腹膜透析液。