CN115572754A - 一种评价食药用菌液体菌种活力的方法 - Google Patents
一种评价食药用菌液体菌种活力的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN115572754A CN115572754A CN202211227253.3A CN202211227253A CN115572754A CN 115572754 A CN115572754 A CN 115572754A CN 202211227253 A CN202211227253 A CN 202211227253A CN 115572754 A CN115572754 A CN 115572754A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- liquid
- edible
- strain
- liquid strain
- activity
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 239000007788 liquid Substances 0.000 title claims abstract description 77
- 241000233866 Fungi Species 0.000 title claims abstract description 34
- 230000000694 effects Effects 0.000 title claims abstract description 28
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 14
- 230000009467 reduction Effects 0.000 claims abstract description 24
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims abstract description 21
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims abstract description 11
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims abstract description 8
- 238000007865 diluting Methods 0.000 claims abstract description 8
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims abstract description 6
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims abstract description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 5
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 5
- WRUGWIBCXHJTDG-UHFFFAOYSA-L magnesium sulfate heptahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.O.[Mg+2].[O-]S([O-])(=O)=O WRUGWIBCXHJTDG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 5
- 229940061634 magnesium sulfate heptahydrate Drugs 0.000 claims description 5
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K potassium phosphate Substances [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 5
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 2
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 claims description 2
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 2
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 235000019797 dipotassium phosphate Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 claims description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 5
- 230000008859 change Effects 0.000 abstract description 2
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 abstract description 2
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 12
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 8
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 8
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 8
- 240000008397 Ganoderma lucidum Species 0.000 description 7
- 235000001637 Ganoderma lucidum Nutrition 0.000 description 7
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 6
- 241001313737 Dictyophora echinovolvata Species 0.000 description 4
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 3
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 3
- GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M potassium dihydrogen phosphate Chemical compound [K+].OP(O)([O-])=O GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 3
- 241000390476 Ganoderma lingzhi Species 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 2
- 241001313710 Dictyophora indusiata Species 0.000 description 1
- 241000222336 Ganoderma Species 0.000 description 1
- 244000252132 Pleurotus eryngii Species 0.000 description 1
- 235000001681 Pleurotus eryngii Nutrition 0.000 description 1
- 241000318836 Pleurotus nebrodensis Species 0.000 description 1
- 239000012996 alamarblue reagent Substances 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 238000011850 initial investigation Methods 0.000 description 1
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/02—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
- C12Q1/04—Determining presence or kind of microorganism; Use of selective media for testing antibiotics or bacteriocides; Compositions containing a chemical indicator therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/02—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
- C12Q1/04—Determining presence or kind of microorganism; Use of selective media for testing antibiotics or bacteriocides; Compositions containing a chemical indicator therefor
- C12Q1/045—Culture media therefor
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
- G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
- G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
- G01N21/6486—Measuring fluorescence of biological material, e.g. DNA, RNA, cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/645—Fungi ; Processes using fungi
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Zoology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明提供了一种评价食药用菌液态菌种活力的方法，该方法包括如下步骤：(1)食药用菌液体菌种预处理：将食药用菌液体菌种进行匀浆处理，得到分散均匀的液体菌种；取匀浆后液体菌种，用培养基稀释，得到液体菌种稀释液；(2)向液体菌种稀释液中加入浓度为10mg/mL阿尔玛蓝试剂，混合均匀，于摇床中26℃，150rpm条件下避光孵育30min后，采用荧光分光光度计进行荧光值F590的测定并进行Alamar Blue还原率的计算。本发明提供的评价食药用菌液态菌种活力的方法，可以快速且有效的检测出液态菌种的活力表征问题，在实际生产过程中可以快速检测实时反应菌株活力的变化，为食药用菌的液体菌种化可持续生产提供了保障。
Description
技术领域
本发明涉及食药用菌领域，具体的说涉及一种评价食药用菌液体菌种活力的方法。
背景技术
食药用菌含有丰富的生物活性物质，在人类的健康、疾病治疗中有着重要贡献和意义。液体菌种是食药用菌生长及材料获取主要方式之一，是食药用菌产业化发展的大趋势。液体菌种的活力是保证食药用菌材料质量的基础和前提，食药用菌液体菌种活力与其代谢活性密切相关，但目前缺乏高效、快速的食药用菌液体菌种活力的评价方法，因此制约着食药用菌产业的可持续高质量发展。
目前，据文献报道(①刘海娟等，白灵菇液体发酵菌种培养终点初探[J].食用菌，2022,44(01):13-16+23。②李德天。杏鲍菇液体菌种生产技术参数优化及菌丝活力变化的研究[D].东北农业大学，2021.DOI:10.27010/d.cnki.gdbnu.2021.000818。③朱海峰。黑木耳液体菌种老化评价指标的研究[D].东北农业大学，2021.DOI:10.27010/d.cnki.gdbnu.2021.000564。④花纪。药用真菌裸脚菇和灵芝营养需求及其液体菌种制备工艺研究[D].江西农业大学，2019.DOI:10.27177/d.cnki.gjxnu.2019.000412.)关于食药用菌液体菌种的活力评价主要依据液体菌种对底物的利用率、目标产物产量、酶的活性等指标来间接评价液体菌种在某些方面的活力，无法较为全面地直接反映液体菌种的整体代谢活力。此外，在食药用菌等大型真菌中存在定量困难等问题，使得液体菌种活力更难被表征。
因此，需要开发一种有效全面的评价液体菌种的方法。
发明内容
本发明的目的在于提供一种评价食药用菌液态菌种活力的方法，该方法包括如下步骤：
(1)食药用菌液体菌种预处理：将食药用菌液体菌种进行匀浆处理，得到分散均匀的液体菌种；取匀浆后液体菌种，用培养基稀释，得到液体菌种稀释液；
(2)向液体菌种稀释液中加入浓度为10mg/mL阿尔玛蓝试剂(Alamar Blue)，混合均匀，于摇床中26℃，150rpm条件下避光孵育30min后，采用荧光分光光度计进行荧光值F590的测定并进行Alamar Blue还原率的计算；
其中，Alamar Blue还原率(％)＝(实验组F590-阴性对照组F590)/(阳性对照F590-阴性对照组F590)×100
其中，F590为590nm波长荧光；阴性对照为培养基；阳性对照为10mg/mL AlamarBlue。
其中步骤(1)中对液体菌种进行匀浆处理的条件为：Waring-Blender型匀浆机，低速8000r/min匀浆10-30s，间歇5s，重复操作3次；取一定湿重匀浆后的液体菌种，用培养基稀释，得到液体菌种稀释液，液体菌种与培养基的重量体积比为：0.5-50g液体菌种/1000ml培养基；其中培养基的配方如下(单位g/L)：葡萄糖10-50、酵母浸粉2-10、磷酸氢二钾1-8、七水硫酸镁1-8，余量为水；
其中步骤(2)中阿尔玛蓝试剂的配制：采用PBS缓冲液配制浓度为10mg/mL阿尔玛蓝试剂，现用现配放于4℃保存。
本发明提供的评价食药用菌液体菌种活力的方法的创新点：
本发明的食药用菌液态菌种的活力测定方法，可以快速且有效的检测出液态菌种的活力表征问题，在实际生产过程中可以快速检测实时反应菌株活力的变化，为食药用菌的液体菌种化可持续生产提供了保障。
具体实施方式
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明讲授的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。
实施例1
灵芝菌株：Ganoderma lingzhi GZ36(由上海市农业科学院食用菌研究所提供和保藏，保藏编号GZ36)。
将活化后的灵芝菌株的菌丝体转入摇瓶培养。其中，摇瓶、用于稀释及发酵罐的培养基配方如下：(单位g/L)：葡萄糖14.5、酵母粉8.5、磷酸二氢钾1.5、七水硫酸镁1.5；余量为水，121℃灭菌30min冷却后使用；
将液体菌种进行匀浆处理，得到分散均匀的液体菌种；所述匀浆处理采用低速8000r/min匀浆10s，间歇5s，重复操作3次；
取湿重0.5g匀浆后的液体菌种，用培养基稀释至100mL，得到液体菌种稀释液；
加入1mL浓度为10mg/mL阿尔玛蓝试剂，混合均匀，于摇床中26℃，150rpm条件下避光孵育30min后，采用荧光分光光度计进行荧光值(F590)的测定并进行Alamar Blue还原率的计算，以Alamar Blue还原率来表征液体菌种的活力。其中，Alamar Blue还原率(％)＝(实验组F590-阴性对照组F590)/(100％还原型阳性对照F590-阴性对照组F590)×100
注：F590＝590nm波长荧光，阴性对照：培养基；阳性对照：10mg/mL Alamar Blue
在灵芝菌株培养的过程中，我们定义底物利用率大于等于90％时，Alamar Blue还原率大于等于500％时，菌株活力较好，且还原率越高，菌株活力越好。灵芝GZ36液体菌种活力，如表1结果所示，Alamar Blue还原率均大于500％，说明菌株活力很好。且在不同发酵规模条件下，液体菌种底物利用率为93％-95％时，不同Alamar Blue还原率的液体菌种所需发酵时间不同，活力较高的液体菌种，在相同底物利用率的情况下所用的时间较少。
实施例2
灵芝菌株：Ganoderma lingzhi G0023(由上海市农业科学院食用菌研究所提供和保藏，保藏号G0023)。
将活化后的灵芝菌株的菌丝体转入摇瓶培养。其中，摇瓶、稀释及发酵罐培养基配方如下，单位(g/L)：葡萄糖14.5、酵母粉8.5、磷酸二氢钾1.5、七水硫酸镁1.5，余量为水；121℃灭菌30min冷却后使用；
将液体菌种进行匀浆处理，得到分散均匀的液体菌种；所述匀浆处理采用低速8000r/min匀浆10s，间歇5s，重复操作3次；
取湿重0.5g匀浆后的液体菌种，用培养基稀释至100mL，得到液体菌种稀释液；
加入1mL浓度为10mg/mL阿尔玛蓝试剂，混合均匀，于摇床中26℃，150rpm条件下避光孵育30min后，采用荧光分光光度计进行荧光值(F590)的测定并进行Alamar Blue还原率的计算，以Alamar Blue还原率来表征液体菌种的活力。其中，Alamar Blue还原率(％)＝(实验组F590-阴性对照组F590)/(100％还原型阳性对照F590-阴性对照组F590)×100
注：F590＝590nm波长荧光，阴性对照：液体培养基；阳性对照：10mg/mL AlamarBlue。
在灵芝菌株培养的过程中，我们定义底物利用率大于等于90％时，Alamar Blue还原率大于等于500％时，菌株活力较好，且还原率越高，菌株活力越好。灵芝G0023液体菌种活力，如表1结果所示，250mL发酵规模培养10天，Alamar Blue还原率为550.05％，说明菌株活力较好。
实施例3
棘托竹荪：Dictyophora indusiata ZS03(由上海市农业科学院食用菌研究所提供和保藏，保藏号ZS03)。
将活化后的棘托竹荪菌株的菌丝体转入摇瓶培养。其中，摇瓶、稀释及发酵罐培养基配方如下，单位(g/L)：葡萄糖14.5、酵母粉8.5、磷酸二氢钾1.5、七水硫酸镁1.5，余量为水；121℃灭菌30min冷却后使用；
将液体菌种进行匀浆处理，得到分散均匀的液体菌种；所述匀浆处理采用低速匀浆10s，间歇5s，重复操作3次；
取湿重0.5g匀浆后的液体菌种，用培养基稀释至100mL，得到液体菌种稀释液；
加入1mL浓度为10mg/mL阿尔玛蓝试剂，混合均匀，于摇床中26℃，150rpm条件下避光孵育30min后，采用荧光分光光度计进行荧光值(F590)的测定并进行Alamar Blue还原率的计算，以Alamar Blue还原率来表征液体菌种的活力。其中，Alamar Blue还原率(％)＝(实验组F590-阴性对照组F590)/(100％还原型阳性对照F590-阴性对照组F590)×100
注：F590＝590nm波长荧光，阴性对照：培养基；阳性对照：10mg/mL Alamar Blue。
在棘托竹荪菌株培养的过程中，我们定义底物利用率大于等于80％时，AlamarBlue还原率大于等于300％时，菌株活力较好，且还原率越高，菌株活力越好。棘托竹荪液体菌种活力，如表1结果所示，Alamar Blue还原率为457.07％，250mL发酵规模培养25天，底物利用率为80.05％，说明该菌株活力较好。
表1实施例1-3中Alamar Blue还原率
Claims (2)
1.一种评价食药用菌液态菌种活力的方法，其特征在于该方法包括如下步骤：
(1)食药用菌液体菌种预处理：将食药用菌液体菌种进行匀浆处理，得到分散均匀的液体菌种；取匀浆后液体菌种，用培养基稀释，得到液体菌种稀释液；
(2)向液体菌种稀释液中加入浓度为10mg/mL阿尔玛蓝试剂，混合均匀，于摇床中26℃，150rpm条件下避光孵育30min后，采用荧光分光光度计进行荧光值F590的测定并进行Alamar Blue还原率的计算。
2.根据权利要求1所述的评价食药用菌液态菌种活力的方法，
其中步骤(1)中对液体菌种进行匀浆处理的条件为：Waring-Blender型匀浆机，低速8000r/min匀浆10-30s，间歇5s，重复操作3次；取一定湿重匀浆后的液体菌种，用培养基稀释，得到液体菌种稀释液，液体菌种与培养基的重量体积比为：0.5-50g液体菌种/1000ml培养基；其中培养基的配方如下：葡萄糖10-50、酵母浸粉2-10、磷酸氢二钾1-8、七水硫酸镁1-8，余量为水，单位g/L。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202211227253.3A CN115572754A (zh) | 2022-10-09 | 2022-10-09 | 一种评价食药用菌液体菌种活力的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202211227253.3A CN115572754A (zh) | 2022-10-09 | 2022-10-09 | 一种评价食药用菌液体菌种活力的方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN115572754A true CN115572754A (zh) | 2023-01-06 |
Family
ID=84585264
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202211227253.3A Pending CN115572754A (zh) | 2022-10-09 | 2022-10-09 | 一种评价食药用菌液体菌种活力的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN115572754A (zh) |
Citations (18)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1778899A (zh) * | 2004-11-19 | 2006-05-31 | 上海中科伍佰豪生物工程有限公司 | 高通量哺乳动物细胞培养基优化方法 |
| CN101377495A (zh) * | 2008-09-11 | 2009-03-04 | 郑州安图绿科生物工程有限公司 | 一种结核分枝杆菌快速药敏检测试剂盒及其检测方法 |
| CN101864367A (zh) * | 2010-03-12 | 2010-10-20 | 中国科学院微生物研究所 | 一种制备粉拟青霉素的方法及其专用菌株 |
| CN102972205A (zh) * | 2012-12-10 | 2013-03-20 | 杨凌芝君生物科技有限责任公司 | 一种食用菌和药用菌固体菌种液化的方法及其使用方法 |
| CN103130550A (zh) * | 2013-03-20 | 2013-06-05 | 上海市农业科学院 | 一种桑黄菌丝体的培养基及培养方法 |
| WO2014101857A1 (zh) * | 2012-12-31 | 2014-07-03 | 厦门金达威集团股份有限公司 | 一种固料培养裂殖壶菌液体发酵生产dha的方法 |
| CN106636299A (zh) * | 2016-12-27 | 2017-05-10 | 扬州大学 | 一种食用菌液体菌种细菌污染检测方法 |
| CN107937329A (zh) * | 2017-11-21 | 2018-04-20 | 石家庄学院 | 一种提高液体菌种活力的方法 |
| CN108611282A (zh) * | 2018-05-16 | 2018-10-02 | 江苏师范大学 | 一株肉座菌目真菌、其胞外多糖的制备方法和应用 |
| CN108624561A (zh) * | 2018-05-26 | 2018-10-09 | 复旦大学 | 原代肿瘤细胞培养基、培养方法以及应用 |
| CN109370923A (zh) * | 2018-12-18 | 2019-02-22 | 福建农林大学 | 一种维持金针菇菌种活力的方法 |
| WO2019095437A1 (zh) * | 2017-11-17 | 2019-05-23 | 江南大学 | 一种液体静置培养食药用真菌的方法 |
| CN110122187A (zh) * | 2019-06-14 | 2019-08-16 | 福建农林大学 | 一种以银耳菌糠为基料的食药用菌液化菌种的制备方法 |
| CN111751345A (zh) * | 2020-07-08 | 2020-10-09 | 深圳海关动植物检验检疫技术中心 | 一种苜蓿黄萎病菌活性检测方法 |
| CN111826416A (zh) * | 2020-07-13 | 2020-10-27 | 浙江寿仙谷植物药研究院有限公司 | 一种基于体外肿瘤细胞培养模型的灵芝质量评价方法 |
| CN112779207A (zh) * | 2021-03-24 | 2021-05-11 | 上海市农业科学院 | 一种液态发酵专用灵芝菌株的复壮方法 |
| CN114028279A (zh) * | 2021-10-26 | 2022-02-11 | 上海应用技术大学 | 一种灵芝自乳化油脂发酵液、发酵方法和应用 |
| CN114503873A (zh) * | 2020-11-16 | 2022-05-17 | 上海国森生物科技有限公司 | 一种双孢蘑菇液体菌种还原菌种及其栽培方法 |
-
2022
- 2022-10-09 CN CN202211227253.3A patent/CN115572754A/zh active Pending
Patent Citations (18)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1778899A (zh) * | 2004-11-19 | 2006-05-31 | 上海中科伍佰豪生物工程有限公司 | 高通量哺乳动物细胞培养基优化方法 |
| CN101377495A (zh) * | 2008-09-11 | 2009-03-04 | 郑州安图绿科生物工程有限公司 | 一种结核分枝杆菌快速药敏检测试剂盒及其检测方法 |
| CN101864367A (zh) * | 2010-03-12 | 2010-10-20 | 中国科学院微生物研究所 | 一种制备粉拟青霉素的方法及其专用菌株 |
| CN102972205A (zh) * | 2012-12-10 | 2013-03-20 | 杨凌芝君生物科技有限责任公司 | 一种食用菌和药用菌固体菌种液化的方法及其使用方法 |
| WO2014101857A1 (zh) * | 2012-12-31 | 2014-07-03 | 厦门金达威集团股份有限公司 | 一种固料培养裂殖壶菌液体发酵生产dha的方法 |
| CN103130550A (zh) * | 2013-03-20 | 2013-06-05 | 上海市农业科学院 | 一种桑黄菌丝体的培养基及培养方法 |
| CN106636299A (zh) * | 2016-12-27 | 2017-05-10 | 扬州大学 | 一种食用菌液体菌种细菌污染检测方法 |
| WO2019095437A1 (zh) * | 2017-11-17 | 2019-05-23 | 江南大学 | 一种液体静置培养食药用真菌的方法 |
| CN107937329A (zh) * | 2017-11-21 | 2018-04-20 | 石家庄学院 | 一种提高液体菌种活力的方法 |
| CN108611282A (zh) * | 2018-05-16 | 2018-10-02 | 江苏师范大学 | 一株肉座菌目真菌、其胞外多糖的制备方法和应用 |
| CN108624561A (zh) * | 2018-05-26 | 2018-10-09 | 复旦大学 | 原代肿瘤细胞培养基、培养方法以及应用 |
| CN109370923A (zh) * | 2018-12-18 | 2019-02-22 | 福建农林大学 | 一种维持金针菇菌种活力的方法 |
| CN110122187A (zh) * | 2019-06-14 | 2019-08-16 | 福建农林大学 | 一种以银耳菌糠为基料的食药用菌液化菌种的制备方法 |
| CN111751345A (zh) * | 2020-07-08 | 2020-10-09 | 深圳海关动植物检验检疫技术中心 | 一种苜蓿黄萎病菌活性检测方法 |
| CN111826416A (zh) * | 2020-07-13 | 2020-10-27 | 浙江寿仙谷植物药研究院有限公司 | 一种基于体外肿瘤细胞培养模型的灵芝质量评价方法 |
| CN114503873A (zh) * | 2020-11-16 | 2022-05-17 | 上海国森生物科技有限公司 | 一种双孢蘑菇液体菌种还原菌种及其栽培方法 |
| CN112779207A (zh) * | 2021-03-24 | 2021-05-11 | 上海市农业科学院 | 一种液态发酵专用灵芝菌株的复壮方法 |
| CN114028279A (zh) * | 2021-10-26 | 2022-02-11 | 上海应用技术大学 | 一种灵芝自乳化油脂发酵液、发酵方法和应用 |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| 曲德辉;杨焱;张赫男;冯杰;张忠;颜梦秋;唐传红;: "桑黄菌株活力评价及优良菌株筛选", 菌物学报, no. 10, 31 December 2016 (2016-12-31) * |
| 白丽: "Alamar Blue-B13细胞株生物法测定IL-5水平", 免疫学杂志, no. 1, 31 December 2003 (2003-12-31) * |
| 郑梅琴;陆宇;王彬;付雷;: "Alamar blue法检测药物细胞内抗结核活性的研究", 中国抗生素杂志, no. 06, 25 June 2011 (2011-06-25) * |
| 陆宇;王彬;郑梅琴;赵伟杰;李;: "应用Alamar Blue和MTT测定抗结核药物最低抑菌浓度的研究", 中国防痨杂志, no. 06, 10 December 2007 (2007-12-10) * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN108220175B (zh) | 酿酒酵母高密度培养方法及其pH调控方法 | |
| CN109055444A (zh) | 一种黑曲霉种子连续培养及其生产柠檬酸的方法 | |
| CN101906453B (zh) | 一种制备乳酸链球菌素的发酵方法 | |
| CN105028992B (zh) | 一种生物活性钙及其制备方法和应用 | |
| CN104996543B (zh) | 一种改良型水产品生物保鲜剂，其制备方法及用途 | |
| CN103820339B (zh) | 一种提高木薯渣蛋白水平的脱水固态组合菌剂及其制作方法 | |
| CN104311348A (zh) | 改良的杏鲍菇液体发酵培养基以及利用其培养杏鲍菇液体菌种的方法 | |
| CN105385607A (zh) | 一种香菇液体深层发酵培养基配方及发酵工艺 | |
| CN104557211B (zh) | 香菇液化专用菌种培养基及相应的培养法 | |
| CN111040982B (zh) | 一种酿酒酵母促进剂及其制备方法和应用 | |
| CN113317248A (zh) | 一种生物絮团养殖微藻强化方法及其在对虾养殖中的应用 | |
| CN104789635B (zh) | 一种黑曲霉麸曲孢子活力的评价方法 | |
| CN105925495B (zh) | 一种高活性粉状毕赤酵母菌粉及其制备方法 | |
| CN105454422A (zh) | 一种新型开菲尔发酵剂的制备方法及应用 | |
| CN115572754A (zh) | 一种评价食药用菌液体菌种活力的方法 | |
| CN104620852B (zh) | 菇类液化菌种培养法 | |
| CN104557315B (zh) | 秀珍菇液化专用菌种培养基及相应的培养法 | |
| CN102783557B (zh) | 一种白酒酒糟生产菌体饲料的方法 | |
| CN109055284B (zh) | 一种酿酒用海洋产酸菌株及其应用 | |
| CN105385608A (zh) | 一种香菇液体菌种深层发酵工艺 | |
| CN104541983A (zh) | 海鲜菇液化专用菌种培养基及相应的培养法 | |
| Canteri et al. | Submerged liquid culture for production of biomass and spores of Penicillium | |
| CN103215312B (zh) | 真菌固体发酵培养基 | |
| CN105200116A (zh) | 一种快速测定复合微生物菌剂中多粘类芽孢杆菌含量的方法 | |
| CN105018389B (zh) | 一种芽孢杆菌Bacillus sp. CAMT22370及其应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |