CN115531245A - 一种抗炎修复纳米组合物及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种抗炎修复纳米组合物，按照质量百分包括：1～30％脂肪酸酰胺、0.1～10％神经酰胺E、0.1～20％磷脂、0.05～8％甾醇、1～20％乳化剂、5～40％多元醇和余量的水；神经酰胺E、磷脂和甾醇的摩尔比为0.9～1.1∶0.9～1.1∶0.9～1.1。本发明的一种抗炎修复纳米组合物提高了活性成分的经皮渗透量，延长了活性成分在皮肤中的滞留时间和作用时间，提升抗炎修复功效。同时脂质囊泡还能提高脂肪酸酰胺的溶解性，且能直接添加到护肤品中，解决了其难以应用的问题。

Description

一种抗炎修复纳米组合物及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及护肤品技术领域，尤其涉及一种抗炎修复纳米组合物及其制备方法和应用。
背景技术
皮肤长期暴露于多种外界环境因素，包括紫外线辐射，蓝光辐射，污染颗粒及烟雾，热损伤等。同时现代化的生活方式，如高糖高热量的饮食结构，以及压力，睡眠不足等，都造成了皮肤对各种外源及内源性暴露原的应激性改变。随之而来的皮肤敏感性问题，在人群中呈逐渐增加的趋势。敏感性皮肤的成因，主要包括皮肤屏障功能障碍，神经感觉功能障碍和血管高反应性。多种介质和受体参与敏感性皮肤的调控，如组胺、神经激肽1(NK1)受体、瞬时受体电位离子通道(如TRPV1，TRPA1)，蛋白酶活化受体2(PAR2)等。其中TRPV1 是敏感性皮肤中表现刺痛、灼烧的关键，也参与瘙痒过程。TRPV1可被低pH(< 5.9)、热度(>42℃)、以及与痛觉相关的因素(如辣椒素)等激活。
内源性脂肪酸酰胺类，包含花生四烯酸乙醇胺、油酰乙醇胺和棕榈酰乙醇酰胺，是大麻素受体(CB1和CB2)的内源性配体。研究最为广泛的是棕榈酰乙醇酰胺，具有免疫调节的作用，可以抑制肥大细胞脱颗粒，抑制组胺及5-羟色胺(5-HT)的释放，激活CB1和CB2，阻断TRPV1离子通道。将这类成分应用于皮肤护理品，其作用靶点明确，单一成分既能同时作用于多个通路和多靶点，从而解决皮肤炎症、痛感、灼烧感、和瘙痒等多种皮肤敏感的问题。
然而，皮肤中的脂肪酸酰胺水解酶(FAAH)，作为一种整合膜蛋白，负责这几种内源性脂肪酸酰胺的水解并密切参与其调节。因为FAAH的降解，限制了皮肤外用脂肪酸酰胺类成分在皮肤深层的生物利用度。尽管现有使用脂质体技术能解决透皮吸收和应用的情况，但未考虑脂质壁材与角质层细胞间质成分之间的关联，也未考虑脂质壁材成分比例对递送和修复效果的影响，导致现有技术未能达到最佳效果。
皮肤角质层中的关键脂质由神经酰胺、甾醇和游离脂肪酸组成。这三类生理性脂质是否完整，以及其含量比例是否合适，共同决定了皮肤屏障的完整性。三者不合理的比例或使用不完整，甚至造成屏障修复的延迟。这三类生理性脂质以接近等摩尔比例使用时，最接近皮肤的生理性脂质，有助于修复皮肤屏障功能。因此，以接近等摩尔比例构建的神经酰胺、甾醇和磷脂作为脂质壁材，与人皮肤生理性脂质的亲和力最佳，在递送活性成分的同时，也能兼顾对皮肤表皮屏障及深层细胞的多重修复。
发明内容
本发明的目的在于提供一种抗炎修复纳米组合物及其制备方法和应用，以解决上述技术问题。
为实现上述目的，本发明所述的一种抗炎修复纳米组合物，按照质量百分包括：1～30％脂肪酸酰胺、0.1～10％神经酰胺E、0.1～20％磷脂、0.05～8％甾醇、 1～20％乳化剂、5～40％多元醇和余量的水；
所述神经酰胺E、磷脂和甾醇的摩尔比为0.9～1.1：0.9～1.1：0.9～1.1。
优选的，神经酰胺E、磷脂和甾醇的摩尔比为1:1:1。
进一步地，所述脂肪酸酰胺包括棕榈酰乙醇酰胺、花生四烯酸乙醇胺、油酰乙醇胺中的一种或多种。
进一步地，所述甾醇包括胆甾醇、麦角甾醇、植物甾醇中的一种或多种；
进一步地，所述磷脂包括大豆卵磷脂、氢化卵磷脂、二硬脂酰磷脂酰胆碱、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷脂酰胆碱中的一种或多种。
进一步地，所述乳化剂包括月桂酰乳酰乳酸钠、十六烷基葡糖苷、辛基葡糖苷、聚甘油-10油酸酯、聚甘油-10肉豆蔻酸酯、聚甘油-4油酸酯、聚甘油-6 聚蓖麻醇酸酯、聚氧乙烯氢化蓖麻油、聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯、PEG-10野大豆甾醇、PEG-10甘油硬脂酸酯、PEG-8辛酸/癸酸甘油酯类中的一种或多种；
进一步地，所述多元醇包括山梨(糖)醇、丙二醇、1，2-戊二醇、丁二醇、 1，2-己二醇、1，3-丙二醇、双丙甘醇、甘油、PEG-200、辛基十二醇中的一种或多种。
优选的，所述抗炎修复纳米组合物的粒径为100～1000nm，Zeta电位为-60～0 mV。
另一方面，上述的抗炎修复纳米组合物的制备方法包括如下步骤：
步骤一：将脂肪酸酰胺、神经酰胺E、磷脂、甾醇与多元醇混合后加热溶解得到脂质溶液；
步骤二：将乳化剂与水混合后，得到水相；
步骤三：将水相与脂质溶液混合乳化后微米化处理，得到微米级分散体；
步骤四：将微米级分散体进行纳米化处理，得到抗炎修复纳米组合物。
进一步地，所述混合乳化的方式包括：在搅拌条件下将脂质溶液滴加至水相中。
进一步地，所述微米化处理为高速剪切乳化，所述高速剪切乳化的转速为 4000～16000rpm，时间为1～10min。
进一步地，所述纳米化处理为高压均质处理或高速微射流处理；
优选的，所述高压均质处理的压力为300～1600bar，温度为20～70℃，循环次数为1～10次；
优选的，所述高压微射流处理的压力为4000～18000psi，温度为20～70℃，循环次数为1～10次。
此外，本发明还提供了上述抗炎修复纳米组合物在化妆品中的应用。
所述化妆品包括但不限于膏霜、乳液、精华和精华水。利用本发明所述抗炎修复纳米组合物制备抗炎、修复等功效的化妆品时，可直接将所上述抗炎修复纳米组合物添加到化妆品基质中，使用方便，优选的，所述纳米组合物在化妆品中添加的质量百分含量为0.1～30％。
本发明提供的抗炎修复纳米组合物机理和有益效果如下：
本发明将脂肪酸酰胺负载于神经酰胺E、甾醇和磷脂构建的纳米级脂质囊泡中，纳米级脂质囊泡仿皮肤角质层细胞间质中的生理性脂质结构，优选的摩尔比为1：1：1；因此更加贴近人体皮肤，生物相容性更优，构成的脂质通道，能促进活性成分透过角质层进入皮肤深层，提高活性成分的经皮渗透量，延长活性成分在皮肤中的滞留时间和作用时间，提升抗炎修复功效。同时脂质囊泡还能提高脂肪酸酰胺的溶解性，且能直接添加到护肤品中，解决了其难以应用的问题。
本发明脂肪酸酰胺包括棕榈酰胺乙醇胺、花生四烯酸乙醇胺、油酰乙醇胺，其抗炎修复机理为：
棕榈酰胺乙醇胺，油酰乙醇胺，花生四烯酸乙醇胺都属于核转录因子激动剂的一类，已被证实可与细胞核的核受体(过氧化物酶体增殖物激活受体α， PPAR-α)结合，并通过抑制NF-kB通路发挥抗炎的作用。不仅通过大麻素受体(CB1和CB2)，且对大麻素样G偶联受体GPR55和GPR119具有亲和力，对于多种慢性疼痛和炎症相关的生物学功能产生影响。
此外，神经酰胺E化学名为鲸蜡基-PG羟乙基棕榈酰胺，属于类神经酰胺，是细胞间脂质神经酰胺类似物蛋白的一种神经酰胺，能促进细胞的新陈代谢，促使角质蛋白有规律的再生，增强表皮细胞的屏障作用，提高皮肤的保水能力。
附图说明
图1为实施例1制备的抗炎修复纳米组合物的微观形貌图。
图2为HaCaT细胞修复试验-细胞迁移试验结果图。
图3为HSF细胞修复试验-细胞迁移试验结果图。
图4为激光共聚焦显微镜观察游离RhoB渗透猪皮的测试结果。
图5为激光共聚焦显微镜观察RhoB纳米载体渗透猪皮的测试结果。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。除非另外定义，此处使用的技术术语或者科学术语应当为本发明所属领域内具有一般技能的人士所理解的通常意义。本文中使用的“包括”等类似的词语意指出现该词前面的元件或者物件涵盖出现在该词后面列举的元件或者物件及其等同，而不排除其他元件或者物件。
针对现有技术存在的问题，本发明的实施例提供了一种抗炎修复纳米组合物。
以下实施例制备的抗炎修复纳米组合物的粒径、Zeta电位均采用ZetasizerNano-ZS90激光粒度仪检测。
实施例1
一种抗炎修复纳米组合物的制备方法如下：
步骤一：按质量百分比将1％神经酰胺E、10％棕榈酰胺乙醇胺、1.27％氢化卵磷脂、0.65％胆甾醇、5％甘油、5％1，3-丙二醇、5％1，2-戊二醇、5％辛基十二醇混合，60℃水浴加热溶解，得到脂质溶液备用；
步骤二：将10％聚氧乙烯氢化蓖麻油、2％聚甘油-10油酸酯、3％聚甘油-10 肉豆蔻酸酯加入52.08％纯化水中，60℃水浴加热溶解，得到水相备用；
步骤三：将脂质溶液以9滴/秒的速度加入水相中，并在60℃、500rpm转速下不断搅拌，混合后，在7000rpm的转速下高速剪切乳化3min，得到微米级分散体；
步骤四：将微米级分散体在60℃、800bar的条件下进行高压均质，循环3 次，冷却至室温，得到抗炎修复纳米组合物。
对上述抗炎修复纳米组合物的粒径、Zeta电位进行检测，粒径为300.5nm， Zeta电位为-21.3mV。
实施例2：
一种抗炎修复纳米组合物的制备方法如下：
步骤一：按质量百分比将5％神经酰胺E、30％花生四烯酸乙醇胺、6.25％大豆卵磷脂、3.25％胆甾醇、10％山梨(糖)醇、15％1，2-己二醇、5％辛基十二醇混合，70℃水浴加热溶解，得到脂质溶液备用；
步骤二：将10％月桂酰乳酰乳酸钠、10％十六烷基葡糖苷加入5.5％纯化水中，70℃水浴加热溶解，得到水相备用；
步骤三：将脂质溶液以3滴/秒的速度加入水相中，并在70℃、1000rpm转速下不断搅拌，混合后，在16000rpm的转速下高速剪切乳化10min，得到微米级分散体；
步骤四：将微米级分散体在70℃、1600bar的条件下进行高压均质，循环 10次，冷却至室温，得到抗炎修复纳米组合物。
对上述抗炎修复纳米组合物的粒径、Zeta电位进行检测，粒径为685.3nm， Zeta电位为-57.3mV。
实施例3：
一种抗炎修复纳米组合物的制备方法如下：
步骤一：按质量百分比将0.1％神经酰胺E、1％棕榈酰胺乙醇胺、0.132％二硬脂酰磷脂酰胆碱、0.065％胆甾醇、5％辛基十二醇混合，65℃水浴加热溶解，得到脂质溶液备用；
步骤二：将1％聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯加入92.703％纯化水中，65℃水浴加热溶解，得到水相备用；
步骤三：将脂质溶液以4滴/秒的速度加入水相中，并在65℃、800rpm转速下不断搅拌，混合后，在14000rpm的转速下高速剪切乳化8min，得到微米级分散体；
步骤四：将微米级分散体在65℃、1400bar的条件下进行高压均质，循环7 次，冷却至室温，得到抗炎修复纳米组合物。
对上述抗炎修复纳米组合物的粒径、Zeta电位进行检测，粒径为357.1nm， Zeta电位为-50.4mV。
实施例4：
一种抗炎修复纳米组合物的制备方法如下：
步骤一：按质量百分比将2％神经酰胺E、20％油酰乙醇胺、2.46％二棕榈酰磷脂酰胆碱、1.3％胆甾醇、10％双丙甘醇、15％辛基十二醇混合，60℃水浴加热溶解，得到脂质溶液备用；
步骤二：将2％聚甘油-6聚蓖麻醇酸酯、10％聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯加入37.24％纯化水中，60℃水浴加热溶解，得到水相备用；
步骤三：将脂质溶液以5滴/秒的速度加入水相中，并在60℃、600rpm转速下不断搅拌，混合后，在12000rpm的转速下高速剪切乳化7min，得到微米级分散体；
步骤四：将微米级分散体在60℃、1200bar的条件下进行高压均质，循环8 次，冷却至室温，得到抗炎修复纳米组合物。
对上述抗炎修复纳米组合物的粒径、Zeta电位进行检测，粒径为575.6nm， Zeta电位为-43.6mV。
实施例5：
一种抗炎修复纳米组合物的制备方法如下：
步骤一：按质量百分比将3％神经酰胺E、15％棕榈酰胺乙醇胺、3.39％二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱、1.95％胆甾醇、20％PEG-200、10％辛基十二醇、10％1，2- 戊二醇混合，40℃水浴加热溶解，得到脂质溶液备用；
步骤二：将5％PEG-10野大豆甾醇、5％PEG-10甘油硬脂酸酯加入26.66％纯化水中，40℃水浴加热溶解，得到水相备用；
步骤三：将脂质溶液以6滴/秒的速度加入水相中，并在40℃、700rpm转速下不断搅拌，混合后，在10000rpm的转速下高速剪切乳化6min，得到微米级分散体；
步骤四：将微米级分散体在40℃、1000bar的条件下进行高压均质，循环5 次，冷却至室温，得到抗炎修复纳米组合物。
对上述抗炎修复纳米组合物的粒径、Zeta电位进行检测，粒径为714.3nm， Zeta电位为-36.6mV。
实施例6：
一种抗炎修复纳米组合物的制备方法如下：
步骤一：按质量百分比将10％神经酰胺E、10％棕榈酰胺乙醇胺、12.5％大豆卵磷脂、6.6％麦角甾醇、10％1，2-戊二醇、10％1，2-己二醇混合，50℃水浴加热溶解，得到脂质溶液备用；
步骤二：将4％PEG-8辛酸/癸酸甘油酯类、4％聚甘油-10油酸酯加入32.9％纯化水中，50℃水浴加热溶解，得到水相备用；
步骤三：将脂质溶液以7滴/秒的速度加入水相中，并在50℃、500rpm转速下不断搅拌，混合后，在8000rpm的转速下高速剪切乳化5min，得到微米级分散体；
步骤四：将微米级分散体在50℃、600bar的条件下进行高压均质，循环6 次，冷却至室温，得到抗炎修复纳米组合物。
对上述抗炎修复纳米组合物的粒径、Zeta电位进行检测，粒径为426.7nm， Zeta电位为-24.4mV。
实施例7：
一种抗炎修复纳米组合物的制备方法如下：
步骤一：按质量百分比将8％神经酰胺E、25％棕榈酰胺乙醇胺、10.16％氢化卵磷脂、5.52％植物甾醇、10％丙二醇、15％1，2-戊二醇、10％丁二醇混合， 30℃水浴加热溶解，得到脂质溶液备用；
步骤二：将8％辛基葡糖苷、8％聚甘油-4油酸酯加入0.32％纯化水中，30℃水浴加热溶解，得到水相备用；
步骤三：将脂质溶液以8滴/秒的速度加入水相中，并在30℃、400rpm转速下不断搅拌，混合后，在6000rpm的转速下高速剪切乳化4min，得到微米级分散体；
步骤四：将微米级分散体在30℃、8000psi的条件下进行高速微射流处理，循环4次，冷却至室温，得到抗炎修复纳米组合物。
对上述抗炎修复纳米组合物的粒径、Zeta电位进行检测，粒径为287.4nm， Zeta电位为-17.4mV。
实施例8：
一种抗炎修复纳米组合物的制备方法如下：
步骤一：按质量百分比将0.5％神经酰胺E、5％棕榈酰胺乙醇胺、0.635％氢化卵磷脂、0.325％胆甾醇、5％1，2-戊二醇、5％甘油混合，20℃水浴加热溶解，得到脂质溶液备用；
步骤二：将5％聚氧乙烯氢化蓖麻油加入78.54％纯化水中，20℃水浴加热溶解，得到水相备用；
步骤三：将脂质溶液以10滴/秒的速度加入水相中，并在20℃、300rpm转速下不断搅拌，混合后，在4000rpm的转速下高速剪切乳化1min，得到微米级分散体；
步骤四：将微米级分散体在20℃、300bar的条件下进行高压均质，循环1 次，冷却至室温，得到抗炎修复纳米组合物。
对上述抗炎修复纳米组合物的粒径、Zeta电位进行检测，粒径为140.6nm， Zeta电位为-5.7mV。
测试例1
透视电镜实验
采用透射电镜(TEM)观察实施例一制备的抗炎修复纳米组合物的微观形貌。取适量新制备的抗炎修复纳米组合物并稀释至适当浓度，滴至300目铜网表面，吸附20min后用滤纸从边缘小心吸去多余液体，并加入1滴1％磷钨酸溶液，5min后用滤纸吸去铜网表面磷钨酸，放置至自然晾干后将此铜网置透射电子显微镜下观察并拍照，得到抗炎修复纳米组合物的微观形貌见图1。
由图1可看出，抗炎修复纳米组合物在透射电镜下呈较为规整的球形，且粒径大小均一，未见明显的载体聚集现象。
测试例2
包封率及载药量
使用超滤离心法测定抗炎修复纳米组合物的包封率，实施例一制备的纳米组合物稀释5倍后取0.4mL置于超滤离心管(截留分子量3.5kDa)中，经5000 r/min离心15min后收集滤液，利用HPLC法测定其包埋的脂肪酸酰胺的含量，即为游离的脂肪酸酰胺含量WF。
另取0.4mL稀释后的纳米组合物，加入乙腈破乳，离心后测定上清中脂肪酸酰胺的含量，即为总脂肪酸酰胺含量WT。按下式计算此类抗炎修复纳米组合物的载药量(Drugloading efficiency，DLE)和包封率(Encapsulation efficiency， EE)：
Figure RE-GDA0003940685060000111
Figure RE-GDA0003940685060000112
WT：总脂肪酸酰胺含量，WF：游离脂肪酸酰胺的含量，WL代表脂质含量 (除去水)。
经HPLC检测，此类抗炎修复纳米组合物中活性成分脂肪酸酰胺的包封率为93.7±0.6％，载药量为11.7±0.4％。
测试例3
稳定性试验
将实施例1～8制备得到的纳米组合物置于密闭容器中，在常温、4℃、45℃以及10℃紫外线辐照(光照度为4000lux)的条件下各放置3个月，检查样品在贮存前后各条件下的外观，测试纳米组合物在贮存前后各条件下的粒径、Zeta电位，综合评价纳米组合物的稳定性。具体检测结果如表1所示。
表1实施例1～8抗炎修复纳米组合物稳定性结果
Figure RE-GDA0003940685060000113
Figure RE-GDA0003940685060000121
Figure RE-GDA0003940685060000131
由表1可以看出，本发明制备的抗炎修复纳米组合物粒径在100～1000nm， Zeta电位为-60～0mV之间，满足实际应用要求。纳米组合物在常温、4℃、45℃以及10℃紫外线辐照(光照度为4000lux)的条件下各放置3个月粒径、Zeta电位未发生显著性变化，外观未出现析出、分层等现象，尤其在活性成分浓度高的情况下仍然较稳定，仍然满足实际应用需求。因此，本发明提供的抗炎修复纳米组合物具有良好的稳定性。
测试例4
人体皮肤斑贴试验
测试样品：将实施例1制备的抗炎修复纳米组合物与对比例1空白霜剂复配，制得含纳米组合物质量百分含量为10％的纳米霜剂；对比例1为空白霜剂。
对比例1
制备空白霜剂：
步骤一：将5％甘油、5％1，3-丙二醇、5％1，2-戊二醇、5％辛基十二醇混合，60℃水浴加热溶解，得到脂质溶液备用；
步骤二：将10％聚氧乙烯氢化蓖麻油、2％聚甘油-10油酸酯、3％聚甘油-10 肉豆蔻酸酯加入52.08％纯化水中，60℃水浴加热溶解，得到水相备用；
步骤三：将脂质溶液以9滴/秒的速度加入水相中，并在60℃、500rpm转速下不断搅拌，混合后，在7000rpm的转速下高速剪切乳化3min，得到微米级分散体；
步骤四：将微米级分散体在60℃、800bar的条件下进行高压均质，循环3 次，冷却至室温，搅拌均匀即得空白霜剂。
选取30名年龄在25～45岁、皮肤健康的志愿者做人体皮肤斑贴试验，其中男16人，女16人。选用合格的斑试器，以封闭型斑贴试验方法，将测试样品约0.020g～0.025g置于斑试器内，外用医用胶带贴敷于志愿者手臂内侧，24小时后去除斑试器，分别于去除斑试器后0.5、24、48小时观察皮肤反应，按《化妆品安全技术规范》(2015年版)中皮肤反应分级标准记录其结果。测试结果见表2。
表2测试样品人体皮肤封闭型斑贴试验结果
Figure RE-GDA0003940685060000141
人体皮肤封闭型斑贴试验结果显示，30人中0例出现阳性反应，根据《化妆品安全技术规范》(2015年版)中规定，该受试物对本批次受试者皮肤未引起不良反应。
测试例5
体外细胞修复试验-细胞迁移试验
收集对数生长期细胞，调整人角质形成细胞(HaCaT)细胞密度为5×105 个/mL，人皮肤成纤维细胞(HSF)细胞密度为2×105个/mL，接种于6孔板中，培养过夜。用1mL微量枪头在细胞生长的中央区域划线，去除中央部分，用PBS冲洗划掉的部分，显微镜拍照，观察给药前的划痕宽度(0h)。加入不含血清的DMEM培养基，分别加入活性浓度为2μg/mL的游离棕榈酰胺乙醇胺、以及按实施例一制备的抗炎修复纳米组合物。在培养箱中孵育24h，弃掉上清培养液，用显微镜观察划痕宽度(24h)，并拍照。通过观察等时间内细胞迁移的速度来评价细胞修复的能力。结果如图2和图3所示。
细胞迁移实验结果：
与空白对照组比较，游离棕榈酰胺乙醇胺、抗炎修复纳米组合物对HaCaT 细胞(图2)和HSF细胞(图3)迁移能力增强，划痕宽度变小，其中纳米组合物组划痕宽度最小，说明纳米组合物对细胞迁移能力最强，修复能力亦最强。
测试例6
激光共聚焦显微镜观察皮肤渗透结果
采用垂直式Franz扩散池法进行离体猪皮的透皮实验。将皮肤固定于接收室和供给室之间，取游离罗丹明B(RhoB)、RhoB纳米载体(RhoB纳米载体组是按照实施例一的制备方法制备的纳米组合物，其RhoB替代了棕榈酰胺乙醇胺) 复配精华各1g于供给室中，其他均以生理盐水为接收液，37℃下搅拌扩散。2h后轻轻擦去皮肤上的残留样品，取下目标区域内的皮肤，再次冲洗皮肤，彻底清洁后擦干残余水分。将样品冷冻切片，通过激光共聚焦显微镜观察切片，挑选有代表性的区域拍照。
图4和图5分别为激光共聚焦显微镜观察游离RhoB和RhoB纳米载体 (本发明的脂质体壁材)渗透猪皮的测试。渗透2小时后，游离活性物RhoB仅停留皮肤表皮，且荧光强度弱，而包裹RhoB的纳米脂质体载体在皮肤中荧光强度明显强于游离RhoB。
虽然在上文中详细说明了本发明的实施方式，但是对于本领域的技术人员来说显而易见的是，能够对这些实施方式进行各种修改和变化。但是，应理解，这种修改和变化都属于权利要求书中所述的本发明的范围和精神之内。而且，在此说明的本发明可有其它的实施方式，并且可通过多种方式实施或实现。

Claims (10)

1.一种抗炎修复纳米组合物，其特征在于，按照质量百分包括：1～30％脂肪酸酰胺、0.1～10％神经酰胺E、0.1～20％磷脂、0.05～8％甾醇、1～20％乳化剂、5～40％多元醇和余量的水；
神经酰胺E、磷脂和甾醇的摩尔比为0.9～1.1∶0.9～1.1∶0.9～1.1。
2.根据权利要求1所述的一种抗炎修复纳米组合物，其特征在于，所述脂肪酸酰胺包括棕榈酰乙醇酰胺、花生四烯酸乙醇胺、油酰乙醇胺中的一种或多种。
3.根据权利要求1所述的一种抗炎修复纳米组合物，其特征在于，所述甾醇包括胆甾醇、麦角甾醇、植物甾醇中的一种或多种。
4.根据权利要求1所述的一种抗炎修复纳米组合物，其特征在于，所述磷脂包括大豆卵磷脂、氢化卵磷脂、二硬脂酰磷脂酰胆碱、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷脂酰胆碱中的一种或多种。
5.根据权利要求1所述的一种抗炎修复纳米组合物，其特征在于，所述乳化剂包括月桂酰乳酰乳酸钠、十六烷基葡糖苷、辛基葡糖苷、聚甘油-10油酸酯、聚甘油-10肉豆蔻酸酯、聚甘油-4油酸酯、聚甘油-6聚蓖麻醇酸酯、聚氧乙烯氢化蓖麻油、聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯、PEG-10野大豆甾醇、PEG-10甘油硬脂酸酯、PEG-8辛酸/癸酸甘油酯类中的一种或多种。
6.根据权利要求1所述的一种抗炎修复纳米组合物，其特征在于，所述多元醇包括山梨(糖)醇、丙二醇、1，2-戊二醇、丁二醇、1，2-己二醇、1，3-丙二醇、双丙甘醇、甘油、PEG-200、辛基十二醇中的一种或多种。
7.根据权利要求1所述的一种抗炎修复纳米组合物，其特征在于，所述抗炎修复纳米组合物的粒径为100～1000nm，Zeta电位为-60～0mV。
8.一种抗炎修复纳米组合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
步骤一：将脂肪酸酰胺、神经酰胺E、磷脂、甾醇与多元醇混合后加热溶解得到脂质溶液；
步骤二：将乳化剂与水混合后，得到水相；
步骤三：将水相与脂质溶液混合乳化后微米化处理，得到微米级分散体；
步骤四：将微米级分散体进行纳米化处理，得到抗炎修复纳米组合物。
9.根据权利要求8所述的一种抗炎修复纳米组合物的制备方法，其特征在于，至少包括以下任意一项技术特征：
技术特征a：所述混合乳化的方式包括：在搅拌条件下将脂质溶液滴加至水相中；
技术特征b：所述微米化处理为高速剪切乳化，所述高速剪切乳化的转速为4000～16000rpm，时间为1～10min；
技术特征c：所述纳米化处理为高压均质处理或高速微射流处理；高压均质处理的压力为300～1600bar，温度为20～70℃，循环次数为1～10次；高压微射流处理的压力为4000～18000psi，温度为20～70℃，循环次数为1～10次。
10.一种抗炎修复纳米组合物在化妆品中的应用。
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