CN115530288A - 一种改善大口黑鲈糖脂代谢的饲料添加剂及应用 - Google Patents
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Abstract
本发明属于水产养殖饲料领域，公开了一种改善大口黑鲈糖脂代谢的饲料添加剂及应用。所述的饲料添加剂包括酯化后菜籽油、酯化后大豆油、酯化后火龙果茎提取物。本发明原料来源广泛，制备简单，可操作性强。本发明通过不同甾醇酯的合理配比，各功能组分间起协同作用，改善大口黑鲈的糖脂代谢，提高大口黑鲈的健康水平。
Description
技术领域
本发明涉及水产动物养殖技术领域，特别是涉及一种改善大口黑鲈糖脂代谢的饲料添加剂及应用。
背景技术
大口黑鲈(Micropterus salmoides)，俗称加州鲈，原产美国，属鲈形目，太阳鱼科。因具有生长快、养殖周期短、抗病力强、产量高等优点，加之肉质鲜美细嫩、无肌间刺、外形美观，8两以上的规格即深受市场欢迎，非常适合家庭消费。面对市场需求，这几年大口黑鲈养殖规模越来越大。而养殖规模的扩大，离不开配合饲料的推广与应用。大口黑鲈是一种广温肉食性鱼类，同其他肉食性鱼类一样，能够有效地利用饲料中的蛋白质和脂肪作为能量, 而对碳水化合物(简称糖)的利用不高。糖并不是鱼类必需的营养素,摄食完全无糖饲料的鱼类仍然能够存活和生长。饲料中的糖类如淀粉作为一种廉价的能量来源，在水产饲料中可以起到节约蛋白质的作用，不仅能够降低饲料成本，还能减少氮的排放。但在养殖生产中发现投喂配合饲料的大口黑鲈容易发生病害，主要表现症状为肝脏糖原和脂肪积累过多，体脂含量升高。进一步在实验室研究发现，大口黑鲈对糖不耐受，饲料中糖含量过高，是引起这种问题的主要原因之一。但是，为了达到饲料膨化后浮在水面的效果，饲料配方中使用淀粉等糖类是必不可少。因此，如何改善摄食配合饲料的大口黑鲈的糖脂代谢，提高鱼体健康水平，这对大口黑鲈甚至对其他肉食性鱼类养殖产业的正常发展有着重要的意义。
植物甾醇(plant sterol，PS)又称植物固醇，它是一种结构与胆固醇类似但具有多重生理活性的三萜烯。PS是植物细胞的重要组成成分，广泛存在于植物各部位。主要PS种类包括谷甾醇、豆甾醇和菜油甾醇等，但不同植物含有的甾醇种类与含量不尽相同。甾醇的结构大多相似，但因所含不同侧链基团，功能却有所差异。如β-谷甾醇具有抗氧化、抗炎、降低胆固醇、抗肿瘤等功效，对小鼠的研究发现豆甾醇比β-谷甾醇表现出了更好的抗急性结肠炎活性(冯思敏等，2018)。同时，PS的水溶性和油溶性均较差，人和动物机体对PS的吸收率极低。酯化后的甾醇，调节植物甾醇的水溶性，拓宽了其应用领域。而植物甾醇与不同脂肪酸或植物油酯化制得的植物甾醇酯的降血脂效果存在差异(王学敏等，2020)。因此，不同酯化甾醇类间的配比，也是影响其效果表现的重要原因之一。
前期研究发现，饲料中添加30-50mg/kg的总植物甾醇，可以改善大口黑鲈的生长(龚红等，2020)，但未影响到体脂肪沉积。类似的在团头鲂的研究中也发现，添加40mg/kg的总植物甾醇可以促进团头鲂(张严伟等，2012)和罗非鱼(李志华等，2019)的生长，且仅影响到血脂，并未影响到体脂沉积。然而，植物甾醇对鱼类糖代谢影响的研究，未见有报道发表。而从畜禽的报告中可以发现高水平的添加植物甾醇才能有显著的调节糖代谢和脂肪沉积的效果(Nina S Liland等，2013)。如添加10mg总植物甾醇即可改善清远麻鸡的生长(黄志毅等，2019)，添加约25mg总植物甾醇即可改善猪的生长、饲料效率和血脂水平(扶国才等，2009)，但是当饲料添加400mg/kg总植物甾醇，才可以提高产蛋鸡的血糖水平(周春江等，2013)，100-200mg/kg总植物甾醇，可提高哺乳母猪的血糖水平(徐聪等，2014)，而在肥胖人群添加1％的植物甾醇才可以减低体脂沉积(Sheila J Thornton等，2011)。在肉鸭的研究中发现10-40mg/kg的总甾醇添加未影响到生长和肝脏脂肪沉积，但是却引起了胸肌的脂肪含量下降的负面效果(顾菀婷，2007)，这可能与试验动物的种属及植物甾醇不同配比所导致的效果差异有关。
并且，已有市售相关甾醇产品多宣传其对畜禽的促生长、增强免疫力、抗氧化、抗应激、改善肉质和压低肥膘等作用。但是，不同市售产品的效果不一。产生这种问题的可能原因，一方面，不同种类的甾醇存的生理功能差异，如不同种类的植物甾醇因侧链结构差异，在肠道中的吸收率不同，菜油甾醇吸收率要高于β-谷甾醇，而豆甾醇的吸收率比前两者都低(张沙等，2022)；另一方面，如温超等(2012)也已发现而且不同植物甾醇的构成比例不同会对蛋鸡脂类代谢产生不同影响。因而，在改善动物糖代谢作用方面更需要进一步研发针对不同养殖对象，不同功效适宜的甾醇产品。
发明内容
本发明的目的是提供一种改善大口黑鲈糖脂代谢的饲料添加剂，该饲料添加剂可以改善大口黑鲈的糖脂代谢，提高其健康水平。
本发明的另一个目的在于提供了饲料添加剂在制备改善大口黑鲈糖脂代谢的药剂中的应用。
为实现以上目的，本发明采用如下技术方案：
一种改善大口黑鲈糖脂代谢的饲料添加剂，包括：酯化后菜籽油、酯化后大豆油、酯化后火龙果茎提取物按照10-13：1-3：2-4的比例进行。
所述的酯化后菜籽油提取物中的酯化甾醇含量为按照质量百分比计算，总酯化甾醇含量大于等于80％，酯化菜油甾醇占总甾醇的含量大于等于38％，酯化谷甾醇占总甾醇的含量大于等于40％.
所述的酯化后大豆油提取物中的酯化甾醇含量为按照百分比计算，酯化总甾醇含量大于等于80％，酯化菜油甾醇占酯化总甾醇的含量大于等于25％，酯化谷甾醇占总酯化甾醇的含量大于等于36％，酯化豆甾醇占总酯化甾醇的含量大于等于22％。
所述的酯化后火龙果茎提取物中的酯化甾醇含量为按照百分比计算，总酯化甾醇含量大于等于80％，酯化菜油甾醇占总酯化甾醇的含量大于等于20％，酯化谷甾醇占总酯化甾醇的含量大于50％，酯化豆甾醇占总酯化甾醇的含量大于等于15％。
所述的酯化后菜油甾醇、酯化后谷甾醇、酯化后豆甾醇，来源于多不饱和脂肪酸与菜籽油或大豆油或火龙果茎的甾醇提取物通过酯化反应而得获得，酯化反应的方法步骤和参数均按照郭涛等(2011)的研究中获得的最佳方法步骤和参数(郭涛,姜元荣,王勇,等.植物甾醇酯制备方法的研究[J].中国油脂,2011,36(1):53-56.)。
所述的菜籽油、大豆油和火龙果茎甾醇提取物，从菜籽油、大豆油和火龙果茎中提取获得。菜籽油和大豆油中甾醇的提取方法步骤和参数，均按照韦继慷(2002)研究中获得的最佳方法步骤和参数(韦继慷.植物甾醇提取工艺研究[D].浙江大学,2002)。火龙果茎甾醇的提取方法步骤和参数，按照梁博(2009)研究中获得的最佳方法步骤和参数(梁博.火龙果茎中植物甾醇分析与研究[D].华南理工大学,2009)。
以上所述的饲料添加剂，优选的，还包括载体，为膨润土、沸石粉、米糠中的一种或多种。
以上所述的饲料添加剂，优选的，酯化后菜籽油、酯化后大豆油、酯化后火龙果茎提取物的总质量与载体的比例为：12-18：88-82。
本发明的保护内容还包括：上述的制备改善大口黑鲈糖脂代谢的药剂中的应用。
应用过程，是在大口黑鲈饲料的加工过程中，按质量百分比含量，添加0.008-0.045％所述的添加剂，充分混匀即可。
与现有技术相比，本发明具有如下优点：
1.本发明的饲料添加剂采取的是提取物中的甾醇，比单独采用甾醇效果更好，且组分来源更加经济，适合实际养殖业使用。
2.本发明的饲料添加剂特别适用于大口黑鲈的糖脂代谢。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步说明，但本发明不受其限制。本发明所述技术方案，如未特别说明，均为本领域的常规方案，所述试剂或材料，如未特别说明，均来源于商业渠道。
实施例1：
一种改善大口黑鲈糖脂代谢的饲料添加剂，由酯化后菜籽油、酯化后大豆油、酯化后火龙果茎提取物和米糠按照重量份12.08、2.02、3.47和82.43组成，混合后饲料添加剂中酯化菜油甾醇、酯化谷甾醇和酯化豆甾醇的重量比为6：8：1。
将上述组分混合后过80目筛，采用锡箔纸密封避光包装，即得所述添加剂。
所述的酯化后菜籽油提取物中的酯化甾醇含量为按照质量百分比计算，总甾醇含量为 85％，其余为水和菜籽油；酯化后菜籽油提取物中的酯化菜油甾醇占总酯化甾醇的质量百分比的46.07％，酯化谷甾醇占总酯化甾醇的质量百分比的53.93％。
酯化后大豆油提取物中的酯化甾醇含量为按照百分比计算，总甾醇含量为82％，其余为水和大豆油；酯化后大豆油提取物中的酯化菜油甾醇占总酯化甾醇的质量百分比的31.31％，酯化谷甾醇占总酯化甾醇的质量百分比的42.42％，酯化豆甾醇占总酯化甾醇的质量百分比的26.26％。
酯化后火龙果茎提取物中的酯化甾醇含量为按照百分比计算，总甾醇含量为88％，其余为水和火龙果茎油脂。酯化后火龙果茎提取物中的酯化菜油甾醇占总酯化甾醇的质量百分比的25％，酯化谷甾醇占总酯化甾醇的质量百分比的57.29％，酯化豆甾醇占总酯化甾醇的质量百分比的17.71％。
所述的酯化后菜油甾醇、酯化后谷甾醇、酯化后豆甾醇，来源于多不饱和脂肪酸与菜籽油或大豆油或火龙果茎的甾醇提取物通过酯化反应而得获得，酯化反应的方法步骤和参数均按照郭涛等(2011)的研究中获得的最佳方法步骤和参数(郭涛,姜元荣,王勇,等.植物甾醇酯制备方法的研究[J].中国油脂,2011,36(1):53-56.)。
所述的菜籽油、大豆油和火龙果茎甾醇提取物，从菜籽油、大豆油和火龙果茎中提取获得。菜籽油和大豆油中甾醇的提取方法步骤和参数，均按照韦继慷(2002)研究中获得的最佳方法步骤和参数(韦继慷.植物甾醇提取工艺研究[D].浙江大学,2002)。火龙果茎甾醇的提取方法步骤和参数，按照梁博(2009)研究中获得的最佳方法步骤和参数(梁博.火龙果茎中植物甾醇分析与研究[D].华南理工大学,2009)。
实施例2：
一种改善大口黑鲈糖脂代谢的饲料添加剂的应用，其应用过程如下：
为验证实施例1的饲料添加剂的应用效果，采用实施例1配制的饲料添加剂进行大口黑鲈的效果试验。
一共分为四组：
对照组1饲料：为不再外加任何添加剂的商品大口黑鲈饲料。
对照组2饲料：为在商品饲料中添加市售某品牌的植物甾醇产品(总甾醇含量为94％，其中豆甾醇含量为30％，β-谷甾醇含量为49％，菜油甾醇含量为11％)。
对照组3饲料：为添加阳性对照添加剂的饲料。
所述的阳性对照添加剂为单体酯化菜油甾醇6份，酯化谷甾醇8份，酯化豆甾醇1份，加入载体米糠70份，混合后过80目筛制得。该组的饲料添加剂与实施例1制备的饲料添加剂相比，米糠含量一致，三种甾醇的重量比一样，但实施例1中由于有提取物的其他杂质，因此实施例1中总甾醇含量要小于对照组3的总甾醇含量。
对照组4饲料：为添加实施例1制备的饲料添加剂的饲料。
对照组2-4中的饲料添加剂在大口黑鲈商品饲料中的添加比例是0.02％。
每种饲料投喂3个重复，每个重复放鱼40尾(初始体重5.04±0.01g)，表观饱食投喂，每天投喂2次(8：30，17:30)。正式试验8周。
结果发现，由表1可知，虽然生长表现和饲料利用并未表现出显著差异(P＞0.05)，但是，对照组4末体重和特定生长率在数值上最大。与对照组1相比，在商品饲料中添加实施例1制备的添加剂、市售植物甾醇产品(对照组2)和对照组3后，大口黑鲈的生长速度有一定的增加趋势。
表1生长性能和饲料效率
| 组别 | 对照组1 | 对照组2 | 对照组3 | 对照组4 |
| 初体重/g | 5.05±0.02 | 5.02±0.05 | 5.05±0.02 | 5.03±0.01 |
| 末体重/g | 25.98±0.04 | 26.10±0.14 | 26.10±0.39 | 26.22±0.44 |
| 增重率 | 414.54±2.23 | 419.75±4.33 | 416.83±6.07 | 420.90±7.19 |
| 特定生长率/(％/d) | 2.93±0.01 | 2.94±0.02 | 2.90±0.02 | 2.95±0.03 |
| 饲料系数 | 0.75±0.01 | 0.77±0.03 | 0.78±0.02 | 0.76±0.01 |
| 肥满度/(g/cm<sup>3</sup>) | 2.42±0.07 | 2.57±0.06 | 2.56±0.03 | 2.56±0.01 |
| 脏体比/％ | 7.02±0.24 | 7.55±0.21 | 7.53±0.16 | 7.48±0.14 |
| 肝体比/％ | 1.07±0.06 | 1.31±0.06 | 1.29±0.05 | 1.26±0.13 |
注：同一行数字具有不同小写肩标表示差异显著(P＜0.05)。
由表2可知，与对照组1相比，对照组2的全鱼、肌肉和肝脏中的粗脂肪含量未发现显著变化(P＞0.05)，肌肉和肝脏中的糖原含量也未发生变化(P＞0.05)；但是，与对照组1相比，对照组3和对照组4的大口黑鲈体成分中的粗脂肪和糖原含量均发生了不同程度的降低，对照组4的添加剂显著降低了全鱼的粗脂肪含量(P＜0.05)，以及肌肉和肝脏的糖原含量(P＜0.05)，而对照组3的试验鱼显著降低了肝脏的糖原含量(P＜0.05)，而对照组3的全鱼粗脂肪含量和肌肉糖原含量与对照组1无显著差异(P＞0.05)。在肝脏中，对照组3和对照组4的大口黑鲈的肝脏粗脂肪和糖原含量均显著小于对照组2的(P＜0.05)。这些结果表明按照实施例1的配方制备的添加剂改善大口黑鲈糖脂代谢的作用较佳。
表2体成分(％湿重)
注：同一行数字具有不同小写肩标表示差异显著(P＜0.05)。
由表3可以看出，与对照组1相比，对照组2的甘油三酯水平显著升高(P＜0.05)，而对照组3和对照组4的血糖和甘油三酯水平也在显著升高(P＜0.05)，因为血糖的取样时间是饥饿24h后，此时的血糖是肝脏糖原分解所得，表明对照组4实验鱼对肝脏糖原的动员更强，直接表明对照组4的添加剂对大口黑鲈的糖脂代谢作用更强。
表3血清生化指标
注：同一行数字具有不同小写肩标表示差异显著(P＜0.05)。
由表4可知，在血清中，与对照组1相比，仅对照组4的丙二醛水平显著降低(P＜0.05)；与对照组2相比，对照组4的过氧化氢酶活性显著升高(P＜0.05)；而在肝脏中，对照组3 和对照组4的丙二醛含量显著低于对照组1和对照组2的(P＜0.05)，过氧化氢酶活性显著低于对照组2的(P＜0.05)，表明按照实施例1配方制备的添加剂更有利于大口黑鲈的抗氧化活性。
表4血清和肝脏抗氧化指标
注：同一列数字具有不同小写肩标表示差异显著(P＜0.05)。
本效果试验发现饲料中添加实施例1制备的添加剂可对大口黑鲈的生长有一定促进作用，并降低了体脂沉积和糖原沉积，亦未改变肌肉脂肪沉积。虽然实施例1中的甾醇含量少于对照组3的，但实施例1制备的添加剂更能降低体脂和糖原沉积，并可以提高血清抗氧化能力以及降低血清丙二醛含量，说明按照实施例1制备的添加剂除了甾醇本身发挥作用，作为提取物的其他成分也发挥了相应的作用，发挥了产品的良好特性，提升了添加剂产品的利用效果。
实施例3：
为进一步验证实施例1的饲料添加剂的应用效果，采用实施例1配制的饲料添加剂进行动物效果试验。效果试验仍选用大口黑鲈为研究对象。设置3个对照组。其中，
对照组1饲料为以不再外加任何添加剂的商品大口黑鲈饲料。
对照组2饲料为商品大口黑鲈饲料，再添加质量百分比0.02％的外源添加剂1。外源添加剂1按重量份计含酯化菜油甾醇6.97份、酯化谷甾醇8.16份。外源添加剂根据实施例1 的相关数据，按照重量份称取酯化后的菜籽油提取物20份，加入载体米糠80份，混合后过80目筛，制成。
对照组3饲料为商品大口黑鲈饲料，再添加质量百分比0.02％的外源添加剂2。外源添加剂2，根据等比例，按照重量份称取酯化后的菜籽油、大豆油和火龙果茎的甾醇提取物称取10份、10份和10份，加入载体米糠70份，混合后过80目筛，制成。外源添加剂2按重量份计含酯化菜油甾醇7.57份、酯化谷甾醇8.12份、酯化豆甾醇8.45份。
实施例1组饲料为在商品饲料中添加0.02％的按照实施例1配方制成的添加剂。
每种饲料投喂3个重复，每个重复放鱼15尾，正式试验8周。
结果发现，由表5可知，实施例1组的特定生长率与对照组3差异不显著(P＞0.05)，但显著高于对照组1和对照组2(P＜0.05)，表明实施例1中各组分酯化甾醇的比例搭配更适宜试验鱼的生长。
表5生长性能和饲料效率
| 组别 | 对照组1 | 对照组2 | 对照组3 | 实施例1 |
| 初体重/g | 33.40±0.17 | 33.42±0.65 | 33.29±0.26 | 32.76±0.62 |
| 末体重/g | 81.98±1.71 | 81.61±2.35 | 83.28±1.54 | 85.86±1.12 |
| 特定生长率/(％/d) | 1.60±0.05<sup>a</sup> | 1.59±0.04<sup>a</sup> | 1.64±0.02<sup>ab</sup> | 1.72±0.02<sup>b</sup> |
| 饲料系数 | 0.95±0.06 | 0.89±0.04 | 1.05±0.03 | 0.83±0.10 |
注：同一行数字具有不同小写肩标表示差异显著(P＜0.05)。
由表6可见，在全鱼成分中，水分、粗蛋白和灰分各组间无显著差异(P＞0.05)，但实施例1的添加剂组的粗脂肪含量显著低于对照组2的(P＜0.05)，对照组1、对照组2和对照组3差异不显著(P＞0.05)。在肌肉中，水分和粗脂肪含量差异不显著(P＞0.05)，但是与对照组2相比，肌糖原含量显著降低(P＜0.05)。在肝脏中，对照组1对的水分含量显著高于对照组2的(P＜0.05)，而与其他组差异不显著(P＞0.05)，对照组1的粗脂肪和糖原含量最高(P＜0.05)，实施例1组的添加剂最低，与其他组差异显著(P＜0.05)，表明实施例1的添加剂更有利于降低体脂和糖原积累。
表6体成分(％湿重)
注：同一行数字具有不同小写肩标表示差异显著(P＜0.05)。
由表7可见，不同组间仅谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性，以及甘油三酯含量出现显著差异(P＜0.05)。其中，谷丙转氨酶活性在对照组1中最低，对照组2中最高，与其他组差异显著(P＜0.05)；谷草转氨酶活性在实施例1的添加剂最低，又在对照组2中最高，也与其他组差异显著(P＜0.05)。表明对照组2可能对肝脏的健康不利。实施例1组的添加剂的甘油三酯含量最低，显著低于对照组3(P＜0.05)。表明实施例1更有利于脂肪代谢。
表7血清生化指标
| 指标 | 对照组1 | 对照组2 | 对照组3 | 实施例1 |
| 血糖mmol/L | 6.47±0.86 | 5.72±0.48 | 7.59±0.50 | 6.68±0.72 |
| 谷丙转氨酶U/L | 9.00±0.91<sup>a</sup> | 18.72±0.10<sup>c</sup> | 12.51±1.27<sup>b</sup> | 13.76±0.69<sup>b</sup> |
| 谷草转氨酶U/L | 94.81±2.28<sup>b</sup> | 194.85±16.07<sup>c</sup> | 110.46±14.48<sup>b</sup> | 56.30±4.33<sup>a</sup> |
| 总蛋白g/L | 31.66±1.38 | 30.07±0.79 | 33.75±1.37 | 29.76±1.24 |
| 甘油三酯mmol/L | 5.88±0.52<sup>a</sup> | 6.36±0.53<sup>a</sup> | 10.17±0.63<sup>b</sup> | 4.80±0.07<sup>a</sup> |
| 低密度脂蛋白mmol/L | 3.60±0.35 | 3.97±0.39 | 3.86±0.26 | 3.46±0.26 |
| 高密度脂蛋白mmol/L | 5.52±0.30 | 6.12±0.18 | 6.16±0.34 | 5.67±0.35 |
| 总胆固醇mmol/L | 8.50±0.70 | 8.83±0.46 | 10.18±0.54 | 8.61±0.49 |
| 白蛋白g/L | 5.25±0.56 | 5.09±0.39 | 5.55±0.47 | 4.98±0.14 |
注：同一行数字具有不同小写肩标表示差异显著(P＜0.05)。
与对照组2的添加剂(含酯化菜油甾醇和酯化谷甾醇，不含酯化豆甾醇)和对照组3的添加剂(等比混合酯化后的菜籽油、大豆油和火龙果茎的甾醇提取物)相比，本效果试验发现饲料中添加0.02％的实施例1，可对生长有一定的促进作用，并降低了体脂沉积和糖原沉积。更进一步的说明实施例1组的添加剂发挥了产品的良好特性，并发挥了组分间的协同作用，提升了添加剂产品的利用效果。
实施例4：
为更进一步验证实施例1的饲料添加剂的对其它种类鱼的应用效果，采用实施例1配制的饲料添加剂进行动物效果试验。效果试验选用植食性和杂食性代表性鱼类——草鱼(植食性)、鲫鱼(杂食性)为研究对象。
设置2个对照组和2个处理组。
其中，对照组1选择市售草鱼饲料，对照组2选择市售鲫鱼饲料，处理组1在市售草鱼饲料中添加0.02％的实施例1制备的添加剂，处理组2在市售鲫鱼饲料中添加0.02％的实施例1制备的添加剂。每种饲料投喂3个重复，每个重复放鱼20尾，正式试验8周。
由表8可见，草鱼和鲫鱼各组间的生长性能和饲料系数无显著差异(P＞0.05)，但是饲料中添加实施例1制备的添加剂使得草鱼和鲫鱼的末体重特定生长率有增加的趋势，表明实施例1制备的添加剂改善草鱼和鲫鱼生长的作用。
表8生长性能和饲料效率
注：同种鱼一行数字具有不同小写肩标表示差异显著(P＜0.05)。
由表9可见，草鱼和鲫鱼各组间的全鱼体成分、肌肉和肝脏成分并无显著影响(P＞0.05)。
表9体成分(％湿重)
注：同种鱼一行数字具有不同小写肩标表示差异显著(P＜0.05)。
由表10可见，除在草鱼中实施例1的添加可以显著降低血清谷丙转氨酶和谷草转氨酶对的活性(P＜0.05)，表明实施例1制备的添加剂可以改善草鱼肝脏健康外，并未发现对其他指标或者鲫鱼的血清指标有显著影响(P＞0.05)。
表10血清生化指标
注：同种鱼一行数字具有不同小写肩标表示差异显著(P＜0.05)。
本效果试验发现饲料中添加0.02％的实施例1的添加剂，可对草鱼和鲫鱼的生长有一定的促进作用，并对草鱼的肝脏健康有一定的改善作用，但并未对草鱼和鲫鱼的糖脂代谢指标如体脂含量、肌糖原和肝糖原，以及血糖和血脂(甘油三酯和胆固醇)产生显著影响，表明实施例1制备的添加剂更有利于改善大口黑鲈的糖脂代谢。
尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在本发明的范围内对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。
Claims (4)
1.一种改善大口黑鲈糖脂代谢的饲料添加剂，包括：酯化后菜籽油、酯化后大豆油、酯化后火龙果茎提取物按照重量份10-13：1-3：2-4组成；
所述的酯化后菜籽油提取物中的酯化甾醇含量为按照质量百分比计算，总酯化甾醇含量大于等于80%，酯化菜油甾醇占总甾醇的含量大于等于38%，酯化谷甾醇占总甾醇的含量大于等于40%；
所述的酯化后大豆油提取物中的酯化甾醇含量为按照百分比计算，酯化总甾醇含量大于等于80%，酯化菜油甾醇占酯化总甾醇的含量大于等于25%，酯化谷甾醇占总酯化甾醇的含量大于等于36%，酯化豆甾醇占总酯化甾醇的含量大于等于22%；
所述的酯化后火龙果茎提取物中的酯化甾醇含量为按照百分比计算，总酯化甾醇含量大于等于80%，酯化菜油甾醇占总酯化甾醇的含量大于等于20%，酯化谷甾醇占总酯化甾醇的含量大于50%，酯化豆甾醇占总酯化甾醇的含量大于等于15%；
所述的酯化后菜油甾醇、酯化后谷甾醇、酯化后豆甾醇，来源于多不饱和脂肪酸与菜籽油或大豆油或火龙果茎的甾醇提取物通过酯化反应而得获得，酯化反应的方法步骤和参数均按照郭涛等(2011)的研究中获得的最佳方法步骤和参数；
所述的菜籽油、大豆油和火龙果茎甾醇提取物，从菜籽油、大豆油和火龙果茎中提取获得；
菜籽油和大豆油中甾醇的提取方法步骤和参数，均按照韦继慷（2002）研究中获得的最佳方法步骤和参数；火龙果茎甾醇的提取方法步骤和参数，按照梁博（2009）研究中获得的最佳方法步骤和参数。
2.根据权利要求1所述的饲料添加剂，其特征在于：包括载体，所述载体为膨润土、沸石粉、米糠中的一种或多种。
3.根据权利要求2所述的饲料添加剂，其特征在于：酯化后菜籽油、酯化后大豆油、酯化后火龙果茎提取物的总质量与载体的比例为：12-18：88-82。
4.权利要求1所述的饲料添加剂在制备改善大口黑鲈糖脂代谢的药剂中的应用。
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