CN115363999A - 一种修复并维持皮肤屏障的水分散型组合物及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种修复并维持皮肤屏障的水分散型组合物及其应用。该组合物以氢化磷脂酰胆碱为载体,根据皮肤的基本结构和生化组成,基于皮肤屏障的铁三角因素,设计并制备出一种水分散性组合物,便于化妆品配方的设计和应用。该组合物主要由神经酰胺、印加果籽油、角鲨烷组成。实时荧光定量PCR和经皮电阻试验表明,该组合物能显著上调丝聚合蛋白和角蛋白10的基因表达水平,显著提升经皮电阻值。且角鲨烷、印加果籽油和神经酰胺具有协同修复皮肤屏障增效作用。该组合物应用到化妆品中,能够修复受损皮肤屏障,增强皮肤屏障,缓解皮肤不适。
Description
技术领域
本发明属于化妆品领域,具体涉及一种修复并维持皮肤屏障的水分散型组合物及其应用。
背景技术
皮肤是人体重要的屏障,能够保护人体免受环境伤害和维持内环境稳态。越来越多的证据表明,许多皮肤疾病都与皮肤屏障功能受损密切相关,比如银屑病、特应性皮炎、慢性光化性皮炎、黄褐斑和皮肤鳞状细胞癌等。健康的皮肤屏障对维护皮肤健康的生理状态必不可少。狭义的皮肤屏障通常指角质层的物理性屏障结构,结构性脂类是构成皮肤物理性屏障结构的重要组分。结构性脂类主要由神经酰胺、脂肪酸和胆固醇构成。神经酰胺是细胞间脂质中最主要的成分,对维持皮肤屏障正常功能是必要的。
发明内容
本发明提供一种修复并维持皮肤屏障的水分散型组合物及其制备方法。现有技术往往只通过单因素来修复维持皮肤屏障,比如仿生皮脂和神经酰胺类组合物,本发明创造性地将不饱和脂肪酸、神经酰胺、角鲨烷通过氢化磷脂酰胆碱为载体,设计并制备出了一种水分散性组合物,该组合物基于皮肤屏障的铁三角因素,打通了皮肤屏障修复和维持的三重通路,对皮肤屏障的修复和维持具有良好的效果。另外该组合物具有水分散性,组合物构成精简,不需要额外添加表活,直接加入水相,稳定性好,便于化妆品配方的设计和应用,解决了神经酰胺的溶解性问题。
为实现上述目的,本发明提供了一种修复并维持皮肤屏障的水分散型组合物及制备方法和应用。
本发明的技术方案如下:
一种修复并维持皮肤屏障的水分散型组合物,包含以下组分:神经酰胺0.1~5重量份,印加果籽油1~10重量份,角鲨烷10~50重量份。
进一步的,所述的组合物,包含以下组分:神经酰胺0.1~2重量份,印加果籽油1~5重量份,角鲨烷10~40重量份。
进一步的,所述的组合物,还包含氢化磷脂酰胆碱、1,3-丙二醇、甘草酸二钾和水。
进一步的,所述的组合物,还包含以下组分:神经酰胺,印加果籽油,角鲨烷,氢化磷脂酰胆碱、1,3-丙二醇、甘草酸二钾、水。
更进一步的,所述的组合物,还包含以下组分:以所述修复并维持皮肤屏障的水分散型组合物的总重量为基准计算,神经酰胺0.05~9重量份,印加果籽油0.5~20重量份,角鲨烷5~80重量份,氢化磷脂酰胆碱0.5~20重量份、1,3-丙二醇1~30重量份、甘草酸二钾0.05~20重量份、水20~70重量份;
进一步的,所述的组合物,包含以下组分:神经酰胺0.1~5重量份,印加果籽油1~10重量份,角鲨烷10~50重量份,氢化磷脂酰胆碱1~15重量份、1,3-丙二醇2~15重量份、甘草酸二钾0.1~10重量份、水30~50重量份;
所述的组合物的制备方法为:先将神经酰胺、印加果籽油、角鲨烷、氢化磷脂酰胆碱、1,3-丙二醇,加热搅拌至均一溶液,再加入甘草酸二钾水溶液进行乳化,得到均一乳白色水分散性料液,即得。
修复并维持皮肤屏障的水分散型组合物在制备修复皮肤化妆品中的应用,采用任一所述的组合物,进一步的,所述具有修复皮肤屏障功效组合物占化妆品组合物总重量的2~25%。
一种皮肤屏障修护精华液的制备方法,包括步骤,
S1:按权利要求1或5任一所述的组合物的成分配比,称量原料,混合均匀;
S2:将甘油聚醚-26、丁二醇、聚乙二醇-8、甲基葡糖聚醚-20、聚乙二醇-75、EDTA二钠、对羟基苯乙酮、卡波姆、黄原胶、透明质酸钠、尿囊素和水投入搅拌釜中,加热至60~90℃,搅拌至完全溶解;
S3:将S1制备的组合物投入S2中的料体中,均质2-10min;
S4:待S3的料体降温至45-75℃以下,将精氨酸和1,2-己二醇投入,搅拌均匀;
S5:待S4料体冷却至30-55℃,向料体中投入双-PEG-18甲基醚二甲基硅,脱泡降温至25-45℃,制得皮肤屏障修护精华液。
进一步的,所述的皮肤屏障修护精华液的制备方法,包括步骤,
S1:按权利要求1或5任一所述的组合物的成分配比,称量原料,混合均匀;以10%的添加量添加到精华液中;
S2:将1-8重量份甘油聚醚-26、1-8重量份丁二醇、5-30重量份二醇-8、1-8重量份甲基葡糖聚醚-20、1-8重量份聚乙二醇-75、0.05-2重量份EDTA二钠、0.1-2重量份对羟基苯乙酮、0.05-2重量份卡波姆、0.05-2重量份黄原胶、0.05-2重量份透明质酸钠、0.05-2重量份尿囊素和60-200重量份水投入搅拌釜中,加热至70~80℃,搅拌至完全溶解;
S3:将10-30重量份S1制备的组合物投入S2中的料体中,均质5min;
S4:待S3制得的料体降温至65℃以下,将1-8重量份精氨酸和0.05-2重量份1,2-己二醇投入,搅拌均匀;
S5:待S4制得料体冷却至45℃,向料体中投入3-20重量份双-PEG-18甲基醚二甲基硅,脱泡降温至25-40℃,制得皮肤屏障修护精华液。
构建皮肤屏障的结构性脂质中,不饱和脂肪酸有别于其他脂质成分,人体不能自然合成。印加果籽油的不饱和脂肪酸含量为81.18-92.46%,且亚油酸和亚麻酸的总含量占80%以上。
皮肤水脂膜是皮肤屏障结构的最外层防线。水脂膜中的脂类属于游离性脂类,由皮脂腺细胞以全浆分泌形式分泌。皮脂腺的脂质组成与细胞间脂质区别较大,皮脂的标志性成分是角鲨烯,而角质层脂质的标志性成分是神经酰胺。由于角鲨烯易被卟啉释放的氧自由基氧化为过氧化角鲨烯,容易致粉刺和引起炎症。因此,基于修复和维持皮肤屏障完整的关键铁三角因素——促进皮肤屏障相关蛋白的表达、补充细胞间脂质和游离性脂质,将角鲨烷、印加果籽油和神经酰胺通过氢化磷脂酰胆碱为载体,本发明公开的一种水分散性组合物,对皮肤屏障的修复和维持具有良好的效果。不仅能够解决神经酰胺在油脂中溶解度较低,低温会结晶析出,水分散性极差以及直接添加到化妆品中会很高的析出风险等难题,而且还能增强神经酰胺修复与增强皮肤屏障的效果。
本发明的有益效果如下:
1、本发明制得的一种修复并维持皮肤屏障的水分散型组合物,能够显著提升与皮肤屏障相关蛋白的基因表达水平和经皮电阻,显示出修复皮肤屏障的效果。
2、本发明的一种修复并维持皮肤屏障的水分散型组合物中含有神经酰胺、印加果籽油和角鲨烷三种成分,能够协同增效改善皮肤屏障,优于单一使用神经酰胺、印加果籽油和角鲨烷中任一成分的效果。
3、本发明提供一种修复并维持皮肤屏障的水分散型组合物具有水分散性,组合物构成精简,不需要额外添加表活,直接加入水相,稳定性好,便于化妆品配方的设计和应用,解决了神经酰胺的溶解性问题。
4、应用一种修复并维持皮肤屏障的水分散型组合物在化妆品中,能够有效改善皮肤的经皮水分流失,具有修复皮肤屏障的效果。
附图说明:
图1:不同组合物对表皮屏障功能基因mRNA表达的影响;
图2:不同组合物处理后的相对经皮电阻提升率;
具体实施方式
为了更清楚地说明本发明,下面结合优选实施例对本发明做进一步的说明。本领域技术人员应当理解,下面所具体描述的内容是说明性的而非限制性的,不应以此限制本发明的保护范围。
本发明所述的技术方案,如未特别说明,均为本领域的常规方案;所述试剂或材料,如未特别说明,均来源于商业渠道。
本发明实施例所用的神经酰胺购自赢创特种化学(上海)有限公司,印加果籽油购自法国GREENTECH公司,角鲨烷购自宜春大海龟生命科学有限公司。
实施例1
1)将1g甘草酸二钾加入35g水中,配置成甘草酸二钾水溶液;
2)将1g神经酰胺、5g印加果籽油、40g角鲨烷、8.5g氢化磷脂酰胆碱、9.5g1,3-丙二醇,加热搅拌至均一溶液,在加入甘草酸二钾水溶液进行乳化,得到修复并维持皮肤屏障的水分散型组合物。
实施例2
1)将1g甘草酸二钾加入35g水中,配置成甘草酸二钾水溶液;
2)将0.5g神经酰胺、2.5g印加果籽油、20g角鲨烷、23g水、8.5g氢化磷脂酰胆碱、9.5g1,3-丙二醇,加热搅拌至均一溶液,在加入甘草酸二钾水溶液进行乳化,得到修复并维持皮肤屏障的水分散型组合物。
对比例1
1)将1g甘草酸二钾加入35g水中,配置成甘草酸二钾水溶液;
2)将40g角鲨烷、6g水、8.5g氢化磷脂酰胆碱、9.5g1,3-丙二醇,加热搅拌至均一溶液,在加入甘草酸二钾水溶液进行乳化,得到修复并维持皮肤屏障的水分散型组合物。
对比例2
1)将1g甘草酸二钾加入35g水中,配置成甘草酸二钾水溶液;
2)将5g印加果籽油、41g水、8.5g氢化磷脂酰胆碱、9.5g1,3-丙二醇,加热搅拌至均一溶液,在加入甘草酸二钾水溶液进行乳化,得到修复并维持皮肤屏障的水分散型组合物。
对比例3
1)将1g甘草酸二钾加入35g水中,配置成甘草酸二钾水溶液;
2)将1g神经酰胺、45g水、8.5g氢化磷脂酰胆碱、9.5g1,3-丙二醇,加热搅拌至均一溶液,在加入甘草酸二钾水溶液进行乳化,得到修复并维持皮肤屏障的水分散型组合物。
对比例4
1)将1g甘草酸二钾加入35g水中,配置成甘草酸二钾水溶液;
2)将1g神经酰胺、40g角鲨烷、5g水、8.5g氢化磷脂酰胆碱、9.5g1,3-丙二醇,加热搅拌至均一溶液,在加入甘草酸二钾水溶液进行乳化,得到修复并维持皮肤屏障的水分散型组合物。
对比例5
1)将1g甘草酸二钾加入35g水中,配置成甘草酸二钾水溶液;
2)将1g神经酰胺、5g印加果籽油、40g水、8.5g氢化磷脂酰胆碱、9.5g1,3-丙二醇,加热搅拌至均一溶液,在加入甘草酸二钾水溶液进行乳化,得到修复并维持皮肤屏障的水分散型组合物。
对比例6
1)将1g甘草酸二钾加入35g水中,配置成甘草酸二钾水溶液;
2)将40g角鲨烷、5g印加果籽油、1g水、8.5g氢化磷脂酰胆碱、9.5g1,3-丙二醇,加热搅拌至均一溶液,在加入甘草酸二钾水溶液进行乳化,得到修复并维持皮肤屏障的水分散型组合物。
实施例3
RT-qPCR基因测定屏障相关蛋白mRNA相对表达量
1实验方法
1)总RNA提取:培养24小时后,收皮,在1mL Trizol溶液中粉碎均质,转移至无杂核酸和核酸酶的1.5mL的离心管中,加入200μL的氯仿,涡旋,静置1-2min。12000g,4℃,离心10min。吸取上清至新的离心管中,加入等体积的异丙醇。涡旋,12000g,4℃,10min,抽掉上清,加入1mL的75%DEPC(焦碳酸二乙酯)乙醇。9000g,4℃,离心5min。抽掉乙醇,加入50μL的无酶水,用Qubit 3.0进行RNA定量。
2)反转录:RNA调整浓度后,使用反转录试剂与poly(A)引物反转录为cDNA。根据实际要求,将cDNA浓度调整至25ng/μL,取50ng混合所需引物,并进行荧光定量PCR。
3)RT-qPCR测试:以GAPDH作为内参基因进行矫正加样误差,计算丝聚合蛋白(FLG)和角蛋白10(KRT10)mRNA的表达量(具体方法请参见Roche的FastStart Essential DNAGreen Master,第6版,其可从罗氏诊断的官方网站下载获得)。
表1目的基因的PCR引物序列
*引物名称 | *引物序列(5′--3′) |
FLG-F | TGAAGCCTATGACACCACTGA |
FLG-R | TCCCCTACGCTTTCTTGTCCT |
KRT10-F | ATGTCTGTTCGATACAGCTCAAG |
KRT10-R | CTCCACCAAGGGAGCCTTTG |
2实验结果,见图1
采用RT-qRCR检测不同组合物对表皮模型中皮肤屏障功能基因的表达变化,结果显示,单一使用印加果籽油对表皮模型的FLG的基因表达水平有一定促进作用,而将印加果籽油、角鲨烷、神经酰胺分别组合后,经过比较发现仅印加果籽油、神经酰胺和角鲨烷的组合对表皮模型FLG和KRT10基因的表达同时优于任一单独组分,表现出了一定的协同作用,其余组合物(对比例4、对比例5和和对比例6)的效果与单一组分相比不明显或没效果。
接着对,对印加果籽油、角鲨烷、神经酰胺组合物进行最优组合的研究,结果表明20重量份的角鲨烷、2.5重量份的印加果籽油和0.5重量份的神经酰胺复配时,提升表模型FLG和KRT10基因表达水平效果最佳,与单一组分的效果相比具有显著型差异。综上所述,印加果籽油、神经酰胺、角鲨烷的复配优于单独使用印加果籽油、神经酰胺或角鲨烷,表现出了一定的协同作用。
实施例4评估不同组合物对经皮电阻的影响
1实验方法
经皮电阻(TEER)是一种无创测量可用于评估表皮电阻的方法。使用市售的EVOM仪器测试实施例和对比例的经皮电阻。
1)将STX2电极浸入70%乙醇中15分钟进行消毒并用PBS洗涤。
2)将transwell小室去除培养基并放置在24孔板中内外添加0.5mLPBS。
3)将STX2电极置于transwell小室内部和外部隔间。
4)每个样品从不同的位置测量3次电阻并获得平均经皮电阻(ohms)。
2实验结果:
不同组合物处理后的相对经皮电阻值提升率如图2所示。与空白对照相比,印加果籽油、神经酰胺、角鲨烷单独使用没有展现出经皮电阻值的提升效果,印加果籽油、神经酰胺、角鲨烷两两组合中,仅神经酰胺与印加果籽油对经皮电阻值有提升效果,相对经皮电阻提升了2.86%。然后,印加果籽油、神经酰胺与角鲨烷的组合(实施例1和实施例2)对经皮电阻值的提升效果显著,相对经皮电阻提升率分别为7.87%和24.72%。说明实施例1和实施例2的皮肤厚度相对较高,皮肤屏障较强,优于单独使用神经酰胺、印加果籽油、角鲨烷及三种组分的来高能量组合。
实施例5
为了更好的说明本发明的适用性,本发明实施例1制备的修复并维持皮肤屏障的水分散型组合物以10%的添加量添加到精华液中。精华液的制备过程为:
1)将4g甘油聚醚-26、4g丁二醇、10g聚乙二醇-8、4g甲基葡糖聚醚-20、4g聚乙二醇-75、0.1gEDTA二钠、0.8g对羟基苯乙酮、0.4g卡波姆、0.1g黄原胶、0.1g透明质酸钠、0.2g尿囊素和140.5g水投入搅拌釜中,加热至70~80℃,搅拌至完全溶解;
2)将20g实施例1制备的修复并维持皮肤屏障的水分散型组合物投入1)中的料体中,均质5min;
3)待2)制得的料体降温至65℃以下,将4g精氨酸和0.8g1,2-己二醇投入,搅拌均匀;
4)待3)制得料体冷却至45℃,向料体中投入7g双-PEG-18甲基醚二甲基硅,脱泡降温至35℃,制得皮肤屏障修护精华液。
实施例6屏障修复效果检测
招募35名志愿者(年龄18到65岁的女性;前臂内侧皮肤表面水分流失值>7g/(m2h))对精华液(实施例5制得)的使用效果进行评价。利用皮肤贴片黏贴建立皮肤屏障受损模型评价测试样品使用4h后的修护效果。双前臂内侧两个测试区域(4.0cm×4.0cm)随机设置为测试样品区和空白对照区。测试样品使用前对两个区进行皮肤水分流失量测试(Vapometer,SWL4001,Delfin,芬兰),之后用皮肤贴片(D-squame,D100,Cuderm,美国)分别进行黏贴至水分流失量在15-20g/(m2h)之间,然后现场由技术人员单次为受试者使用测试样品,在黏贴后立即、产品使用后1h和4h分别进行皮肤水分流失量测试。皮肤水分流失量越小,皮肤屏障功能越好。
共有31名志愿者完成了测试。在测试样品使用前、黏贴后立即、测试样品使用后1h和4h,对前臂内侧2个测试区进行皮肤水分流失量测试,结果见表6。
表6不同时间点测试样品对志愿者皮肤水分流失量的测试结果
应用Dunnett-t检验的方法分析测试样品使用前后的变化,应用t检验的方法进行区域间比较。与黏贴后立即相比,测试样品使用1h和4h后,测试样品区皮肤水分流失量均有显著性改善,分别显著性降低了5.20和5.16(P<0.05),同时,空白对照区皮肤水分流失量均有显著性改善,分别显著性降低了3.35和3.47(P<0.05)。与空白对照区相比,测试样品使用1h和4h后,测试样品区皮肤水分流失量均显著由于空白对照区,可见,含修复并维持皮肤屏障的水分散性组合物的精华液单次使用4h内就能够修护皮肤屏障功能。
以上详细描述了本发明的优选实施方式,但是,本发明并不限于上述实施方式中的具体细节,在本发明的技术构思范围内,可以对本发明的技术方案进行多种简单变型,这些简单变型均属于本发明的保护范围。
另外需要说明的是,在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征,在不矛盾的情况下,可以通过任何合适的方式进行组合,为了避免不必要的重复,本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。
Claims (10)
1.一种修复并维持皮肤屏障的水分散型组合物,其特征在于,包含以下组分:神经酰胺0.1~5重量份,印加果籽油1~10重量份,角鲨烷10~50重量份。
2.根据权利要求1所述的组合物,其特征在于,包含以下组分:神经酰胺0.1~2重量份,印加果籽油1~5重量份,角鲨烷10~40重量份。
3.根据权利要求1或2所述的组合物,其特征在于,所述组合物还包含氢化磷脂酰胆碱、1,3-丙二醇、甘草酸二钾和水。
4.根据权利要求3所述的组合物,其特征在于,还包含以下组分:神经酰胺,印加果籽油,角鲨烷,氢化磷脂酰胆碱、1,3-丙二醇、甘草酸二钾、水。
5.根据权利要求4所述的组合物,其特征在于,还包含以下组分:以所述修复并维持皮肤屏障的水分散型组合物的总重量为基准计算,神经酰胺0.05~9重量份,印加果籽油0.5~20重量份,角鲨烷5~80重量份,氢化磷脂酰胆碱0.5~20重量份、1,3-丙二醇1~30重量份、甘草酸二钾0.05~20重量份、水20~70重量份。
6.根据权利要求5所述的组合物,其特征在于,包含以下组分:神经酰胺0.1~5重量份,印加果籽油1~10重量份,角鲨烷10~50重量份,氢化磷脂酰胆碱1~15重量份、1,3-丙二醇2~15重量份、甘草酸二钾0.1~10重量份、水30~50重量份。
7.根据权利要求4所述的组合物的制备方法,其特征在于,先将神经酰胺、印加果籽油、角鲨烷、氢化磷脂酰胆碱、1,3-丙二醇,加热搅拌至均一溶液,再加入甘草酸二钾水溶液进行乳化,得到均一乳白色水分散性料液,即得。
8.修复并维持皮肤屏障的水分散型组合物在制备修复皮肤化妆品中的应用,其特征在于,采用权利要求1或5任一所述的组合物,进一步的,所述具有修复皮肤屏障功效组合物占化妆品组合物总重量的2~25%。
9.一种皮肤屏障修护精华液的制备方法,其特征在于,包括步骤,
S1:按权利要求1或5任一所述的组合物的成分配比,称量原料,混合均匀;
S2:将甘油聚醚-26、丁二醇、聚乙二醇-8、甲基葡糖聚醚-20、聚乙二醇-75、EDTA二钠、对羟基苯乙酮、卡波姆、黄原胶、透明质酸钠、尿囊素和水投入搅拌釜中,加热至60~90℃,搅拌至完全溶解;
S3:将S1制备的组合物投入S2中的料体中,均质2-10min;
S4:待S3的料体降温至45-75℃以下,将精氨酸和1,2-己二醇投入,搅拌均匀;
S5:待S4料体冷却至30-55℃,向料体中投入双-PEG-18甲基醚二甲基硅,脱泡降温至25-45℃,制得皮肤屏障修护精华液。
10.如权利要求9所述的皮肤屏障修护精华液的制备方法,其特征在于,包括步骤,
S1:按权利要求1或5任一所述的组合物的成分配比,称量原料,混合均匀;以10%的添加量添加到精华液中;
S2:将1-8重量份甘油聚醚-26、1-8重量份丁二醇、5-30重量份二醇-8、1-8重量份甲基葡糖聚醚-20、1-8重量份聚乙二醇-75、0.05-2重量份EDTA二钠、0.1-2重量份对羟基苯乙酮、0.05-2重量份卡波姆、0.05-2重量份黄原胶、0.05-2重量份透明质酸钠、0.05-2重量份尿囊素和60-200重量份水投入搅拌釜中,加热至70~80℃,搅拌至完全溶解;
S3:将10-30重量份S1制备的组合物投入S2中的料体中,均质5min;
S4:待S3制得的料体降温至65℃以下,将1-8重量份精氨酸和0.05-2重量份1,2-己二醇投入,搅拌均匀;
S5:待S4制得料体冷却至45℃,向料体中投入3-20重量份双-PEG-18甲基醚二甲基硅,脱泡降温至25-40℃,制得皮肤屏障修护精华液。
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2022
- 2022-08-23 CN CN202211011934.6A patent/CN115363999A/zh active Pending
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