CN115192480A

CN115192480A - 一种具有协同增效修复皮肤屏障作用的组合物及其应用

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Publication number: CN115192480A
Application number: CN202211017250.7A
Authority: CN
Inventors: 胡嘉奂; 樊雨梅; 魏春花; 廖峰; 李金華
Original assignee: Shiyin Shanghai Biotechnology Co ltd
Current assignee: Shiyin Shanghai Biotechnology Co ltd
Priority date: 2022-08-23
Filing date: 2022-08-23
Publication date: 2022-10-18
Anticipated expiration: 2042-08-23
Also published as: CN115192480B

Abstract

本发明属于化妆品领域，具体涉及一种具有协同增效修复皮肤屏障作用的组合物及其应用。本发明组合物包括以下重量分数的组分：印加果籽油0.05～10份，神经酰胺0.01～10份。实时荧光定量PCR和经皮电阻试验表明，该组合物能显著上调水通道蛋白3、透明质酸合成酶1、丝聚合蛋白、水闸蛋白1和转谷氨酰胺酶1的基因表达水平，显著提升经皮电阻值且产生了协同作用。利用该组合物应用到化妆品中，能够促进皮肤屏障功能重建。

Description

一种具有协同增效修复皮肤屏障作用的组合物及其应用

技术领域

本发明属于化妆品领域，具体涉及具有协同增效修复皮肤屏障作用的组合物及其在化妆品中的应用。

背景技术

皮肤是人体重要的屏障，能够保护人体免受环境伤害和维持内环境稳态。研究表明，许多皮肤疾病都与皮肤屏障功能受损密切相关，比如银屑病、特应性皮炎、痤疮等。紫外线和可见光的照射、空气污染、气候因素、化学刺激和衰老等都会影响皮肤屏障功能。因此，健康的皮肤屏障对维护皮肤健康的生理状态必不可少。狭义的皮肤屏障通常指角质层的物理性或机械性屏障结构，结构性脂类是构成皮肤物理性屏障结构的重要组分。结构性脂类主要由神经酰胺、脂肪酸和胆固醇构成。结构性脂质的任何变化均会直接影响皮肤屏障结构，导致透皮水分丢失增加，皮肤干燥、脱屑等。

发明内容

本发明的目的在于提供一种具有协同增效修复皮肤屏障作用的组合物。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种具有协同增效修复皮肤屏障作用的组合物，该组合物由印加果籽油和神经酰胺组成，两种成分的重量份比为：1～20:0.5～1。

进一步的，该组合物由印加果籽油和神经酰胺组成，两种成分的重量份比为：1～10:1。

更进一步的，所述印加果籽油和神经酰胺的重量份比为：5:1。

进一步的，所述神经酰胺是指神经酰胺2、神经酰胺3中的一种或两种组合。

具有协同增效修复皮肤屏障作用的组合物在制备修复皮肤化妆品中的应用，采用任一所述的组合物。

一种皮肤屏障修护精华霜，其特征在于包括所述的具有协同增效修复皮肤屏障作用的组合物。

所述的精华霜，包括以下重量百分比的组分：任一所述的具有协同增效修复皮肤屏障作用的组合物1～20重量份，辛酸/癸酸甘油三酯2～20重量份，氢化椰油甘油酯类1～10重量份，碳酸二辛酯1～10重量份，1,2-戊二醇1～15重量份，山嵛醇1～15重量份，生育酚乙酸酯0.1～5重量份，1,2-己二醇0.1～5重量份，尿囊素0.1～5重量份，EDTA二钠0.01～0.9重量份，甘油硬脂酸酯柠檬酸酯1～15重量份，牛油果树果脂1～15重量份，甘油硬脂酸酯1～15重量份，对羟基苯乙酮0.1～1重量份，甘油3～25重量份，1,3-丙二醇3～35重量份，皱波角叉菜提取物0.05～2重量份，聚丙烯酸钠0.05～2重量份，水30-45重量份。

进一步的，所述的精华霜，其特征在于，包括以下重量百分比的组分：权利要求1或2所述的具有协同增效修复皮肤屏障作用的组合物1～10重量份，辛酸/癸酸甘油三酯2～10重量份，氢化椰油甘油酯类2～8重量份，碳酸二辛酯1～5重量份，1,2-戊二醇2～10重量份，山嵛醇1～5重量份，生育酚乙酸酯0.1～1重量份，1,2-己二醇0.1～1重量份，尿囊素0.1～1重量份，EDTA二钠0.01～0.1重量份，甘油硬脂酸酯柠檬酸酯1～5重量份，牛油果树果脂1～5重量份，甘油硬脂酸酯1～5重量份，对羟基苯乙酮0.1～0.5重量份，甘油5～15重量份，1,3-丙二醇5～15重量份，皱波角叉菜提取物0.1～0.5重量份，聚丙烯酸钠0.1～1重量份，水30-45重量份。

所述精华霜的制备方法，包括如下步骤：

S1：按协同增效修复皮肤屏障组合物的成分配比，称量原料，混合均匀，得到协同增效修复皮肤屏障的组合物；

S2：按精华霜的原料配比备料，将1,3-丙二醇、甘油硬脂酸酯、1,2-己二醇、1,2-戊二醇和部分水依次加入主锅中，加热至55-75℃，混合，搅拌分散；

S3：将辛酸/癸酸甘油三酯、氢化椰油甘油酯类、碳酸二辛酯、山嵛醇、甘油硬脂酸酯柠檬酸酯、牛油果树果脂和生育酚乙酸酯依次加入油锅中，加热至50-85℃，混合均匀，搅拌溶解，然后投入至乳化锅中，均质乳化，混合均匀；

S4：将对羟基苯乙酮、皱波角叉菜提取物、尿囊素、EDTA二钠和剩余水依次加入水锅中，加热至50～80℃，充分混合均匀，搅拌溶解，然后投入至乳化锅中，均质乳化，混合均匀；

S5：将协同增效修复皮肤屏障组合物投入至乳化锅中，均质搅拌；

S6：搅拌冷却至33～60℃，将混合分散好的甘油和聚丙烯酸钠投入至主锅，搅拌混合均匀，搅拌冷却至20～40℃，脱泡过滤，制得皮肤屏障修护精华霜。

进一步的，所述精华霜的制备方法，包括如下步骤：

S2：按精华霜的原料配比备料，将1,3-丙二醇、甘油硬脂酸酯、1,2-己二醇、1,2-戊二醇和部分水依次加入主锅中，加热至63-67℃，充分混合均匀，搅拌分散；

S3：将辛酸/癸酸甘油三酯、氢化椰油甘油酯类、碳酸二辛酯、山嵛醇、甘油硬脂酸酯柠檬酸酯、牛油果树果脂和生育酚乙酸酯依次加入油锅中，加热至70-75℃，充分混合均匀，搅拌溶解，然后投入至乳化锅中，均质乳化，混合均匀；

S4：将对羟基苯乙酮、皱波角叉菜提取物、尿囊素、EDTA二钠和剩余水依次加入水锅中，加热至63～67℃，充分混合均匀，搅拌溶解，然后投入至乳化锅中，均质乳化，混合均匀；

S6：搅拌冷却至43～47℃，将混合分散好的甘油和聚丙烯酸钠投入至主锅，搅拌混合均匀，搅拌冷却至28～32℃，脱泡过滤，制得皮肤屏障修护精华霜。

神经酰胺是皮肤中一种重要的生理性脂质，由长链鞘氨醇碱基和脂肪酸组成。神经酰胺不仅参与组成皮肤屏障的构成，也产于信号传导、调节皮肤免疫及细胞周期、分化与凋亡等过程。神经酰胺合成与代谢异常与多种皮肤病密切相关，添加了神经酰胺的护肤品已被用于多种皮肤疾病的辅助治疗。构建皮肤屏障的结构性脂质中，不饱和脂肪酸有别于其他脂质成分，人体不能自然合成。印加果籽油是主要由棕榈酸、硬脂酸、亚油酸和亚麻酸4种脂肪酸组成，不饱和脂肪酸含量为81.18-92.46％，且亚油酸和亚麻酸的总含量占80％以上。

本发明的有益效果如下：

1、本发明制得的一种具有协同增效修复皮肤屏障作用的组合物，能够与皮肤屏障相关蛋白的基因表达水平和经皮电阻，显示出修复皮肤屏障的效果。

2、本发明的一种具有协同增效修复皮肤屏障作用的组合物中含有印加果籽油和神经酰胺两种成分，能够协同增效改善皮肤屏障，优于单一使用印加果籽油或神经酰胺的效果。

3、应用一种具有协同增效修复皮肤屏障作用的组合物在化妆品中，能够有效改善皮肤的经皮水分流失，具有修复皮肤屏障的效果。

附图说明：

图1：不同组合物对表皮屏障功能基因mRNA表达的影响；

图2：不同组合物处理后的相对经皮电阻提升率。

具体实施方式

为了更清楚地说明本发明，下面结合优选实施例对本发明做进一步的说明。本领域技术人员应当理解，下面所具体描述的内容是说明性的而非限制性的，不应以此限制本发明的保护范围。

本发明所述的技术方案，如未特别说明，均为本领域的常规方案；所述试剂或材料，如未特别说明，均来源于商业渠道。

本发明实施例所用的神经酰胺2购自日本TAKASAGO公司，神经酰胺3购自赢创特种化学(上海)有限公司，印加果籽油购自法国GREENTECH公司，乳木果油购自AAK集团。

实施例1

将印加果籽油和神经酰胺按照质量比为5:1混合均匀。

对比例1

仅含有印加果籽油。

对比例2

仅含有神经酰胺。

对比例3

将乳木果油和神经酰胺按照质量比为5:1混合均匀。

实施例2：2RT-qPCR基因测定屏障相关蛋白mRNA相对表达量

将空白对照组、实施例1、对比例1、对比例2和对比例3分别用表皮模型(

批号：ES220607，广东博溪生物科技有限公司)进行测试，测试采用液下全局培养的方式。

1实验方法

1)总RNA提取：培养24小时后，收皮，在1mL Trizol溶液中粉碎均质，转移至无杂核酸和核酸酶的1.5mL的离心管中，加入200μL的氯仿，涡旋，静置1-2min。12000g，4℃，离心10min。吸取上清至新的离心管中，加入等体积的异丙醇。涡旋，12000g，4℃，10min，抽掉上清，加入1mL的75％DEPC(焦碳酸二乙酯)乙醇。9000g，4℃，离心5min。抽掉乙醇，加入50μL的无酶水，用Qubit 3.0进行RNA定量。

2)反转录：RNA调整浓度后，使用反转录试剂与poly(A)引物反转录为cDNA。根据实际要求，将cDNA浓度调整至25ng/μL，取50ng混合所需引物，并进行荧光定量PCR。

3)RT-qPCR测试：以GAPDH作为内参基因进行矫正加样误差，计算丝聚合蛋白(FLG)、水闸蛋白1(CLD)、水通道蛋白3(AQP3)、透明质酸合成酶1(HAS1)、转谷氨酰胺酶1(TGM1)mRNA的表达量(具体方法请参见Roche的FastStart Essential DNA Green Master，第6版，其可从罗氏诊断的官方网站下载获得)。

表1目的基因的PCR引物序列

2实验结果

采用RT-qRCR检测不同组合物对表皮模型中皮肤屏障功能基因的表达变化，结果显示，与空白组相比，单独使用印加果籽油或神经酰胺对表皮模型的AQP3、FLG和HAS1没有显著性的促进作用(P＞0.05)，然而单独使用印加果籽油对TGM1的表达有显著促进作用(P＜0.01)，单独使用印加果籽油或者神经酰胺能够显著促进CLD的表达(P＜0.05)。将印加果籽油或乳木果油与神经酰胺复配后，经过比较发现，组合物对皮肤屏障功能基因FLG、AQP3、TGM1和HAS1的表达均有促进作用，且优于单独使用神经酰胺。更进一步，印加果籽油与神经酰胺的复配优于乳木果油与神经酰胺的复配。总之，印加果籽油与神经酰胺复配优于单独使用印加果籽油或神经酰胺，表现出了一定的协同作用。且印加果籽油与神经酰胺复配优于乳木果油与神经酰胺复配。

实施例3：评估不同组合物对经皮电阻的影响

1实验方法

经皮电阻(TEER)是一种无创测量可用于评估表皮电阻的方法。使用市售的EVOM仪器测试实施例和对比例的经皮电阻。

1)将STX2电极浸入70％乙醇中15分钟进行消毒并用PBS洗涤。

2)将transwell小室去除培养基并放置在24孔板中内外添加0.5mLPBS。

3)将STX2电极置于transwell小室内部和外部隔间。

4)每个样品从不同的位置测量3次电阻并获得平均经皮电阻(ohms)。

2实验结果

不同组合物处理后的相对经皮电阻值提升率如图2所示。与空白对照相比，实施例1和对比例3的相对经皮电阻值提升率较高，分别为2.86％和1.47％。说明实施例1和对比例3的皮肤厚度相对较高，皮肤屏障较强，优于单独使用神经酰胺或印加果籽油。且实施例1优于对比例3，可见在改善皮肤屏障方面，印加果籽油与神经酰胺复配优于乳木果油与神经酰胺复配。

实施例4：为了更好的说明本发明的适用性，将本发明实施例1制备的具有协同增效修复皮肤屏障作用的组合物以5％的添加量添加到面霜中。面霜的制备过程为：

将62g1,3-丙二醇、10g甘油硬脂酸酯、4g1,2-己二醇、40g1,2-戊二醇和150g水依次加入主锅中，加热至63-67℃，充分混合均匀，搅拌分散；

将50g辛酸/癸酸甘油三酯、40g氢化椰油甘油酯类、20g碳酸二辛酯、20g山嵛醇、20g甘油硬脂酸酯柠檬酸酯、20g牛油果树果脂和8g生育酚乙酸酯依次加入油锅中，加热至70-75℃，充分混合均匀，搅拌溶解，然后缓慢投入至乳化锅中，均质乳化，混合均匀；

将4g对羟基苯乙酮、11g皱波角叉菜提取物、11g尿囊素、0.5gEDTA二钠和41.83g水依次加入水锅中，加热至63～67℃，充分混合均匀，搅拌溶解，然后缓慢投入至乳化锅中，均质乳化，混合均匀

S5：将50g协同增效修复皮肤屏障组合物缓慢投入至乳化锅中，均质搅拌；

S6：搅拌冷却至43～47℃，将混合分散好的75g甘油和6g聚丙烯酸钠投入至主锅，搅拌混合均匀，搅拌冷却至28～32℃，脱泡过滤，制得皮肤屏障修护精华霜。

一般贮存稳定性依据GB/T29665-2013进行评价；防腐效力测试，采用国际标准ISO11930：2012(化妆品-微生物学-化妆品产品抗菌防护评定)方法；安全性测试依据《化妆品安全技术规范》(2015年版)的要求采用相应的技术手段，对精华霜中重金属(铅、汞、砷、镉)、风险物质(二甘醇、二恶烷)及微生物安全性实施检测。

一般贮存稳定性检测结果见表2，该精华霜在冻融循环、耐热/耐寒试验中外观、气味、pH值均无明显变化，具有贮存稳定性。

表2精华霜贮存稳定性检测结果

精华霜防腐功效测试结果见表3，结果显示通过ISO11930-2012附录B中表B.1中A标准。

表3防腐功效测试结果

精华霜中重金属(铅、汞、砷、镉)、风险物质(二甘醇、二恶烷)及微生物安全性检测结果见表4、表5。铅、汞、砷及镉均未检出，微生物指标符合标准。

表4精华霜重金属及风险物质检测结果

表5精华霜微生物检测结果

最后说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管申请人参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的宗旨和范围的，均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。

实施例5：屏障修复效果检测

招募35名志愿者(年龄18到65岁的女性；前臂内侧皮肤表面水分流失值＞7g/(m²h))对精华霜的使用效果进行评价。利用皮肤贴片黏贴建立皮肤屏障受损模型评价测试样品(实施例4)使用4h后的修护效果。双前臂内侧两个测试区域(4.0cm×4.0cm)随机设置为测试样品区和空白对照区。测试样品使用前对两个区进行皮肤水分流失量测试(Vapometer，SWL4001，Delfin，芬兰)，之后用皮肤贴片(D-squame，D100，Cuderm，美国)分别进行黏贴至水分流失量在15-20g/(m2h)之间，然后现场由技术人员单次为受试者使用测试样品，在黏贴后立即、产品使用后1h和4h分别进行皮肤水分流失量测试。皮肤水分流失量越小，皮肤屏障功能越好。

共有31名志愿者完成了测试。在测试样品使用前、黏贴后立即、测试样品使用后1h和4h，对前臂内侧2个测试区进行皮肤水分流失量测试，结果见表6。

表6不同时间点测试样品对志愿者皮肤水分流失量的测试结果

应用Dunnett-t检验的方法分析测试样品使用前后的变化，应用t检验的方法进行区域间比较。与黏贴后立即相比，测试样品使用1h和4h后，测试样品区皮肤水分流失量均有显著性改善，分别显著性降低了5.29和5.16(P＜0.05)，同时，空白对照区皮肤水分流失量均有显著性改善，分别显著性降低了3.35和3.47(P＜0.05)。与空白对照区相比，测试样品使用1h和4h后，测试样品区皮肤水分流失量均显著由于空白对照区，可见，含具有协同增效修复皮肤屏障作用组合物的精华霜单次使用4h内就能够修护皮肤屏障功能。

以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于上述实施方式中的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，这些简单变型均属于本发明的保护范围。

另外需要说明的是，在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合，为了避免不必要的重复，本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。

Claims

1.一种具有协同增效修复皮肤屏障作用的组合物，其特征在于：该组合物由印加果籽油和神经酰胺组成，两种成分的重量份比为：1～20:0.5～1。

2.如权利要求1所述的组合物，其特征在于：该组合物由印加果籽油和神经酰胺组成，两种成分的重量份比为：1～10:1。

3.如权利要求1所述的组合物，其特征在于：所述印加果籽油和神经酰胺的重量份比为：5:1。

4.如权利要求1或2所述的组合物，其特征在于，所述神经酰胺是指神经酰胺2、神经酰胺3中的一种或两种组合。

5.具有协同增效修复皮肤屏障作用的组合物在制备修复皮肤化妆品中的应用，其特征在于，采用权利要求1或4任一所述的组合物。

6.一种皮肤屏障修护精华霜，其特征在于包括权利要求1至4任一所述的具有协同增效修复皮肤屏障作用的组合物。

7.根据权利要求6所述的精华霜，其特征在于，包括以下重量百分比的组分：权利要求1至3任一所述的具有协同增效修复皮肤屏障作用的组合物1～20重量份，辛酸/癸酸甘油三酯2～20重量份，氢化椰油甘油酯类1～10重量份，碳酸二辛酯1～10重量份，1,2-戊二醇1～15重量份，山嵛醇1～15重量份，生育酚乙酸酯0.1～5重量份，1,2-己二醇0.1～5重量份，尿囊素0.1～5重量份，EDTA二钠0.01～0.9重量份，甘油硬脂酸酯柠檬酸酯1～15重量份，牛油果树果脂1～15重量份，甘油硬脂酸酯1～15重量份，对羟基苯乙酮0.1～1重量份，甘油3～25重量份，1,3-丙二醇3～35重量份，皱波角叉菜提取物0.05～2重量份，聚丙烯酸钠0.05～2重量份，水30-45重量份。

8.根据权利要求6所述的精华霜，其特征在于，包括以下重量百分比的组分：权利要求1或2所述的具有协同增效修复皮肤屏障作用的组合物1～10重量份，辛酸/癸酸甘油三酯2～10重量份，氢化椰油甘油酯类2～8重量份，碳酸二辛酯1～5重量份，1,2-戊二醇2～10重量份，山嵛醇1～5重量份，生育酚乙酸酯0.1～1重量份，1,2-己二醇0.1～1重量份，尿囊素0.1～1重量份，EDTA二钠0.01～0.1重量份，甘油硬脂酸酯柠檬酸酯1～5重量份，牛油果树果脂1～5重量份，甘油硬脂酸酯1～5重量份，对羟基苯乙酮0.1～0.5重量份，甘油5～15重量份，1,3-丙二醇5～15重量份，皱波角叉菜提取物0.1～0.5重量份，聚丙烯酸钠0.1～1重量份，水30-45重量份。

9.根据权利要求6所述精华霜的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

10.根据权利要求9所述精华霜的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：