CN115353993A - 一种微生物秸秆降解菌剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及降解菌剂技术领域，且公开了一种微生物秸秆降解菌剂及其制备方法，本发明制备的施用秸秆降解菌剂能够大幅度的促进秸秆降解速率，对秸秆进行降解后，能够大幅度的增加土壤碱解氮、速效磷、速效钾、有机质养分含量，提高土壤中营养物质含量，从而，能够促进农作物的生长，提高农作物的产量和品质；本发明制备的施用秸秆降解菌剂能够大幅度的促进秸秆降解速率，对秸秆进行降解后，能够大幅度的增加土壤碱解氮、速效磷、速效钾、有机质养分含量，提高土壤中营养物质含量，从而，能够促进农作物的生长，提高农作物的产量和品质。
Description
技术领域
本发明涉及降解菌剂技术领域，具体为一种微生物秸秆降解菌剂。
背景技术
现有技术制备的秸秆降解菌剂的使用受到诸多限制的影响，导致其对秸秆的降解效率较为一般。
基于此，我们提出了一种微生物秸秆降解菌剂，希冀解决现有技术中的不足之处。
发明内容
（一）解决的技术问题
针对现有技术的不足，本发明提供了一种微生物秸秆降解菌剂及其制备方法。
（二）技术方案
为实现上述的目的，本发明提供如下技术方案：
一种微生物秸秆降解菌剂，按重量份计由以下成分制成：固氮螺旋菌30-45份、芽孢杆菌10-13份、酵母菌15-20份、热纤梭菌3-5份、粪堆梭菌3-5份、活化筛选嗜热产丁酸梭菌56-60份、交替假单胞菌1-3份。
作为进一步的技术方案，所述热纤梭菌、粪堆梭菌混合重量份比为1:1。
作为进一步的技术方案，所述活化筛选嗜热产丁酸梭菌制备方法为：
（1）筛选培养基制备：
初筛培养基制备：取葡萄糖10-12％、玉米构树汁2.5-3%、甘油1.5-3％、尿素0.3-0.6％、磷酸氢二钾0.15-0.2％、硫酸镁0.06-0.08％、硫酸亚铁2-3％、谷氨酸钠2-3％，其余为水，添加搅拌机中进行搅拌均匀，得到初筛选培养基；
终筛培养基制备：取葡萄糖12-15％、麦麸粉3.5-5%、甘露醇复合聚-β-羟基丁酸酯2-3％、尿素0.2-0.5％、磷酸氢二钾0.1-0.18％、氯化钙0.05-0.07％、硫酸亚铁1-3％、氯化钠1-3％，其余为水，添加搅拌机中进行搅拌均匀，得到终筛选培养基；
（2）将嗜热产丁酸梭菌先接种到初筛培养基中，进行初次培养3-5天，得到初次培养嗜热产丁酸梭菌；
（3）将初次培养嗜热产丁酸梭菌接种到终筛培养基中，进行终次培养4-6天，得到初次培养嗜热产丁酸梭菌。
作为进一步的技术方案：所述玉米构树汁制备方法为：
（1）将新鲜玉米进行脱粒，得到玉米粒；
（2）将上述得到的玉米粒添加到打浆机中进行打浆处理，打浆转速为2000r/min，打浆时间为30min，得到玉米浆液；
（3）将上述得到玉米浆液进行过滤，去掉滤渣，得到玉米汁；
（4）向玉米汁中添加海藻酸钠，以200r/min转速搅拌30min，得到复合玉米汁；
（5）将构树叶清洗干净，然后进行粉碎，得到构树叶粉料，向构树叶粉料中添加其质量5倍的清水，搅拌40min，然后进行过滤，去除滤渣，得到构树汁；
（6）将复合玉米汁、构树汁添加到搅拌机中进行搅拌，混合均匀后，再进行浓缩，灭菌，得到玉米构树汁。
作为进一步的技术方案，所述玉米汁、海藻酸钠混合质量比为50:1-2；
所述复合玉米汁、构树汁混合质量比为3:1-1.5。
作为进一步的技术方案，所述甘露醇复合聚-β-羟基丁酸酯制备方法为：
将聚-β-羟基丁酸酯添加到乙醇中，调节温度至60℃，保温搅拌35min，得到聚-β-羟基丁酸酯乙醇溶液；
再将甘露醇添加到聚-β-羟基丁酸酯乙醇溶液中，调节温度至55℃，保温搅拌1小时，得到复合溶液；
对复合溶液进行回收乙醇，得到甘露醇复合聚-β-羟基丁酸酯。
作为进一步的技术方案：所述聚-β-羟基丁酸酯、乙醇混合质量比为1:20-30；
所述甘露醇、聚-β-羟基丁酸酯乙醇溶液混合质量比为1:10-15。
作为进一步的技术方案：所述初次培养温度为23-26℃；
终次培养温度为30-35℃。
一种微生物秸秆降解菌剂的制备方法，所述包括以下步骤：
（1）将固氮螺旋菌、芽孢杆菌、酵母菌、热纤梭菌、粪堆梭菌、活化筛选嗜热产丁酸梭菌、交替假单胞菌分别接种在斜面培养基中活化，并在平板中进行纯化，得到对应菌种平板；
（2）将对应菌种平板上的菌种进行分别发酵发酵，发酵温度为25-35℃，发酵时间为10-15d，得到各菌种种子液；
（3）按各重量份进行分别取对应菌种种子液，进行混合复配，得到微生物秸秆降解菌剂。
作为进一步的技术方案：所述各菌种种子液中菌种浓度相同，均为2.35×106cfu/ml。
本发明制备的秸秆降解菌剂中菌种体积小，比表面积大、物质交换速率快，能够通过改变秸秆木质素的结构，使得其变为易降解的小分子量片段，从而提高对秸秆的降解效率。
秸秆降解不同阶段发生作用的微生物不同，因此，本发明通过对菌种进行合理搭配，并且加入了活化筛选嗜热产丁酸梭菌，能够提高各菌种的协同降解作用，通过利用秸秆中可溶性物质进行生长增值，增加腐殖质，加速分解，提高分解效率。
施用本发明制备的秸秆降解菌剂可以显著加快秸秆腐解程度，并提高土壤中营养元素和各种酶的活性，尤其是土壤转化酶、脲酶、多酚氧化酶和纤维素酶的活性得到大幅度的提高，能够促进土壤微生物多样性，有助于土壤微生物群落的活性和多样性的变化，改善土壤品质。
（三）有益效果
与现有技术相比，本发明提供了一种微生物秸秆降解菌剂，具备以下有益效果：
本发明制备的施用秸秆降解菌剂能够大幅度的促进秸秆降解速率，对秸秆进行降解后，能够大幅度的增加土壤碱解氮、速效磷、速效钾、有机质养分含量，提高土壤中营养物质含量，从而，能够促进农作物的生长，提高农作物的产量和品质。
附图说明
图1为对比不同甲基丙烯酸-丁二烯-苯乙烯共聚物添加量对于降解菌剂拉升强度性能影响图；
图2为对比不同羧基丁腈橡胶添加量对于表面粗糙度的影响图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
以下为具体实施例：
实施例1
一种微生物秸秆降解菌剂，按重量份计由以下成分制成：固氮螺旋菌30份、芽孢杆菌10份、酵母菌15份、热纤梭菌3份、粪堆梭菌3份、活化筛选嗜热产丁酸梭菌56份、交替假单胞菌1份。
所述热纤梭菌、粪堆梭菌混合重量份比为1:1。
所述活化筛选嗜热产丁酸梭菌制备方法为：
（1）筛选培养基制备：
初筛培养基制备：取葡萄糖10％、玉米构树汁2.5%、甘油1.5％、尿素0.3％、磷酸氢二钾0.15％、硫酸镁0.06％、硫酸亚铁2％、谷氨酸钠2％，其余为水，添加搅拌机中进行搅拌均匀，得到初筛选培养基；
终筛培养基制备：取葡萄糖12％、麦麸粉3.5%、甘露醇复合聚-β-羟基丁酸酯2％、尿素0.2％、磷酸氢二钾0.1％、氯化钙0.05％、硫酸亚铁1％、氯化钠1％，其余为水，添加搅拌机中进行搅拌均匀，得到终筛选培养基；
（2）将嗜热产丁酸梭菌先接种到初筛培养基中，进行初次培养3天，得到初次培养嗜热产丁酸梭菌；
（3）将初次培养嗜热产丁酸梭菌接种到终筛培养基中，进行终次培养4天，得到初次培养嗜热产丁酸梭菌。
所述玉米构树汁制备方法为：
（1）将新鲜玉米进行脱粒，得到玉米粒；
（2）将上述得到的玉米粒添加到打浆机中进行打浆处理，打浆转速为2000r/min，打浆时间为30min，得到玉米浆液；
（3）将上述得到玉米浆液进行过滤，去掉滤渣，得到玉米汁；
（4）向玉米汁中添加海藻酸钠，以200r/min转速搅拌30min，得到复合玉米汁；
（5）将构树叶清洗干净，然后进行粉碎，得到构树叶粉料，向构树叶粉料中添加其质量5倍的清水，搅拌40min，然后进行过滤，去除滤渣，得到构树汁；
（6）将复合玉米汁、构树汁添加到搅拌机中进行搅拌，混合均匀后，再进行浓缩，灭菌，得到玉米构树汁。
所述玉米汁、海藻酸钠混合质量比为50:1；
所述复合玉米汁、构树汁混合质量比为3:1。
所述甘露醇复合聚-β-羟基丁酸酯制备方法为：
将聚-β-羟基丁酸酯添加到乙醇中，调节温度至60℃，保温搅拌35min，得到聚-β-羟基丁酸酯乙醇溶液；
再将甘露醇添加到聚-β-羟基丁酸酯乙醇溶液中，调节温度至55℃，保温搅拌1小时，得到复合溶液；
对复合溶液进行回收乙醇，得到甘露醇复合聚-β-羟基丁酸酯。
所述聚-β-羟基丁酸酯、乙醇混合质量比为1:20；
所述甘露醇、聚-β-羟基丁酸酯乙醇溶液混合质量比为1:10。
所述初次培养温度为23℃；
终次培养温度为30℃。
一种微生物秸秆降解菌剂的制备方法，所述包括以下步骤：
（1）将固氮螺旋菌、芽孢杆菌、酵母菌、热纤梭菌、粪堆梭菌、活化筛选嗜热产丁酸梭菌、交替假单胞菌分别接种在斜面培养基中活化，并在平板中进行纯化，得到对应菌种平板；
（2）将对应菌种平板上的菌种进行分别发酵发酵，发酵温度为25℃，发酵时间为10d，得到各菌种种子液；
（3）按各重量份进行分别取对应菌种种子液，进行混合复配，得到微生物秸秆降解菌剂。
所述各菌种种子液中菌种浓度相同，均为2.35×106cfu/ml。
实施例2
一种微生物秸秆降解菌剂，按重量份计由以下成分制成：固氮螺旋菌38份、芽孢杆菌12份、酵母菌18份、热纤梭菌4份、粪堆梭菌4份、活化筛选嗜热产丁酸梭菌59份、交替假单胞菌2份。
所述热纤梭菌、粪堆梭菌混合重量份比为1:1。
所述活化筛选嗜热产丁酸梭菌制备方法为：
（1）筛选培养基制备：
初筛培养基制备：取葡萄糖11％、玉米构树汁2.8%、甘油1.9％、尿素0.4％、磷酸氢二钾0.17％、硫酸镁0.07％、硫酸亚铁2.3％、谷氨酸钠2.3％，其余为水，添加搅拌机中进行搅拌均匀，得到初筛选培养基；
终筛培养基制备：取葡萄糖14％、麦麸粉4%、甘露醇复合聚-β-羟基丁酸酯2.6％、尿素0.3％、磷酸氢二钾0.12％、氯化钙0.06％、硫酸亚铁2％、氯化钠2％，其余为水，添加搅拌机中进行搅拌均匀，得到终筛选培养基；
（2）将嗜热产丁酸梭菌先接种到初筛培养基中，进行初次培养4天，得到初次培养嗜热产丁酸梭菌；
（3）将初次培养嗜热产丁酸梭菌接种到终筛培养基中，进行终次培养5天，得到初次培养嗜热产丁酸梭菌。
所述玉米构树汁制备方法为：
（1）将新鲜玉米进行脱粒，得到玉米粒；
（2）将上述得到的玉米粒添加到打浆机中进行打浆处理，打浆转速为2000r/min，打浆时间为30min，得到玉米浆液；
（3）将上述得到玉米浆液进行过滤，去掉滤渣，得到玉米汁；
（4）向玉米汁中添加海藻酸钠，以200r/min转速搅拌30min，得到复合玉米汁；
（5）将构树叶清洗干净，然后进行粉碎，得到构树叶粉料，向构树叶粉料中添加其质量5倍的清水，搅拌40min，然后进行过滤，去除滤渣，得到构树汁；
（6）将复合玉米汁、构树汁添加到搅拌机中进行搅拌，混合均匀后，再进行浓缩，灭菌，得到玉米构树汁。
所述玉米汁、海藻酸钠混合质量比为50:1.5；
所述复合玉米汁、构树汁混合质量比为3:1.2。
所述甘露醇复合聚-β-羟基丁酸酯制备方法为：
将聚-β-羟基丁酸酯添加到乙醇中，调节温度至60℃，保温搅拌35min，得到聚-β-羟基丁酸酯乙醇溶液；
再将甘露醇添加到聚-β-羟基丁酸酯乙醇溶液中，调节温度至55℃，保温搅拌1小时，得到复合溶液；
对复合溶液进行回收乙醇，得到甘露醇复合聚-β-羟基丁酸酯。
所述聚-β-羟基丁酸酯、乙醇混合质量比为1:25；
所述甘露醇、聚-β-羟基丁酸酯乙醇溶液混合质量比为1:12。
所述初次培养温度为24℃；
终次培养温度为33℃。
一种微生物秸秆降解菌剂的制备方法，所述包括以下步骤：
（1）将固氮螺旋菌、芽孢杆菌、酵母菌、热纤梭菌、粪堆梭菌、活化筛选嗜热产丁酸梭菌、交替假单胞菌分别接种在斜面培养基中活化，并在平板中进行纯化，得到对应菌种平板；
（2）将对应菌种平板上的菌种进行分别发酵发酵，发酵温度为28℃，发酵时间为12d，得到各菌种种子液；
（3）按各重量份进行分别取对应菌种种子液，进行混合复配，得到微生物秸秆降解菌剂。
所述各菌种种子液中菌种浓度相同，均为2.35×106cfu/ml。
实施例3
一种微生物秸秆降解菌剂，按重量份计由以下成分制成：固氮螺旋菌45份、芽孢杆菌13份、酵母菌20份、热纤梭菌5份、粪堆梭菌5份、活化筛选嗜热产丁酸梭菌60份、交替假单胞菌3份。
所述热纤梭菌、粪堆梭菌混合重量份比为1:1。
所述活化筛选嗜热产丁酸梭菌制备方法为：
（1）筛选培养基制备：
初筛培养基制备：取葡萄糖12％、玉米构树汁3%、甘油3％、尿素0.6％、磷酸氢二钾0.2％、硫酸镁0.08％、硫酸亚铁3％、谷氨酸钠3％，其余为水，添加搅拌机中进行搅拌均匀，得到初筛选培养基；
终筛培养基制备：取葡萄糖15％、麦麸粉5%、甘露醇复合聚-β-羟基丁酸酯3％、尿素0.5％、磷酸氢二钾0.18％、氯化钙0.07％、硫酸亚铁3％、氯化钠3％，其余为水，添加搅拌机中进行搅拌均匀，得到终筛选培养基；
（2）将嗜热产丁酸梭菌先接种到初筛培养基中，进行初次培养5天，得到初次培养嗜热产丁酸梭菌；
（3）将初次培养嗜热产丁酸梭菌接种到终筛培养基中，进行终次培养6天，得到初次培养嗜热产丁酸梭菌。
所述玉米构树汁制备方法为：
（1）将新鲜玉米进行脱粒，得到玉米粒；
（2）将上述得到的玉米粒添加到打浆机中进行打浆处理，打浆转速为2000r/min，打浆时间为30min，得到玉米浆液；
（3）将上述得到玉米浆液进行过滤，去掉滤渣，得到玉米汁；
（4）向玉米汁中添加海藻酸钠，以200r/min转速搅拌30min，得到复合玉米汁；
（5）将构树叶清洗干净，然后进行粉碎，得到构树叶粉料，向构树叶粉料中添加其质量5倍的清水，搅拌40min，然后进行过滤，去除滤渣，得到构树汁；
（6）将复合玉米汁、构树汁添加到搅拌机中进行搅拌，混合均匀后，再进行浓缩，灭菌，得到玉米构树汁。
所述玉米汁、海藻酸钠混合质量比为50:2；
所述复合玉米汁、构树汁混合质量比为3:1.5。
所述甘露醇复合聚-β-羟基丁酸酯制备方法为：
将聚-β-羟基丁酸酯添加到乙醇中，调节温度至60℃，保温搅拌35min，得到聚-β-羟基丁酸酯乙醇溶液；
再将甘露醇添加到聚-β-羟基丁酸酯乙醇溶液中，调节温度至55℃，保温搅拌1小时，得到复合溶液；
对复合溶液进行回收乙醇，得到甘露醇复合聚-β-羟基丁酸酯。
所述聚-β-羟基丁酸酯、乙醇混合质量比为1:30；
所述甘露醇、聚-β-羟基丁酸酯乙醇溶液混合质量比为1:15。
所述初次培养温度为26℃；
终次培养温度为35℃。
一种微生物秸秆降解菌剂的制备方法，所述包括以下步骤：
（1）将固氮螺旋菌、芽孢杆菌、酵母菌、热纤梭菌、粪堆梭菌、活化筛选嗜热产丁酸梭菌、交替假单胞菌分别接种在斜面培养基中活化，并在平板中进行纯化，得到对应菌种平板；
（2）将对应菌种平板上的菌种进行分别发酵发酵，发酵温度为35℃，发酵时间为15d，得到各菌种种子液；
（3）按各重量份进行分别取对应菌种种子液，进行混合复配，得到微生物秸秆降解菌剂。
所述各菌种种子液中菌种浓度相同，均为2.35×106cfu/ml。
对比例1：与实施例1区别为初筛培养基中不添加玉米构树汁；
对比例2：与实施例1区别为终筛培养基中不添加甘露醇复合聚-β-羟基丁酸酯；
试验：
试验田前茬作物为玉米，土质为沙壤土，土壤碱解氮含量为 24.18 mg/kg、速效磷含量为 4.32 mg/kg、速效钾含量为 41.52 mg/kg、有机质含量为 5.05 g/kg。试验使用玉米秸秆为先玉335（纤维素含量为50.36%，半纤维素含量为 33.59%，木质素含量为9.65%）：
平均分成5块试验田，每一块试验田，以实施例与对比例试样进行使用，施用量为20kg/hm2；
降解率的测定定期将预先埋入土壤的网袋小心取出，晾晒后轻轻抖动其上边的土，然后用清水将秸秆在 150μm筛子中冲洗干净，放入烘箱 80℃烘干至恒重，计算秸秆降解率。
秸秆降解率/%=（W0-W1）/W0×100；
式中：W0表示预埋入的秸秆重（g）；
W1表示取样烘干后剩余秸秆重（g）；
表1
由表1可以看出，本发明制备的降解菌剂具有优异的降解性能，降解效率高，效果好。
玉米产量及籽粒品质测定成熟期每小区随机选取20穗进行考种，进行计算玉米产量。
表2
由表2可以看出，本发明制备的降解菌剂降解后的土壤种植的玉米产量得到明显的增加。
玉米籽粒品质采用FOSS公司生产的红外分析仪测定籽粒品质，包括蛋白质含量、脂肪含量、淀粉含量，3 次重复，取平均值；
表3
由表3可以看出，本发明制备的降解菌剂降解后种植的玉米品质得到明显的提高。
以实施例1为基础试样，对比不同活化筛选嗜热产丁酸梭菌添加量对于降解性能影响，如图1。
以实施例1为基础试样，对比不同活化筛选嗜热产丁酸梭菌添加量对于种植玉米亩产量的影响，如图2。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。
Claims (10)
1.一种微生物秸秆降解菌剂，其特征在于，按重量份计由以下成分制成：固氮螺旋菌30-45份、芽孢杆菌10-13份、酵母菌15-20份、热纤梭菌3-5份、粪堆梭菌3-5份、活化筛选嗜热产丁酸梭菌56-60份、交替假单胞菌1-3份。
2.根据权利要求1所述的一种微生物秸秆降解菌剂，其特征在于，所述热纤梭菌、粪堆梭菌混合重量份比为1:1。
3.根据权利要求1所述的一种微生物秸秆降解菌剂，其特征在于，所述活化筛选嗜热产丁酸梭菌制备方法为：
（1）筛选培养基制备：
初筛培养基制备：取葡萄糖10-12％、玉米构树汁2.5-3%、甘油1.5-3％、尿素0.3-0.6％、磷酸氢二钾0.15-0.2％、硫酸镁0.06-0.08％、硫酸亚铁2-3％、谷氨酸钠2-3％，其余为水，添加搅拌机中进行搅拌均匀，得到初筛选培养基；
终筛培养基制备：取葡萄糖12-15％、麦麸粉3.5-5%、甘露醇复合聚-β-羟基丁酸酯2-3％、尿素0.2-0.5％、磷酸氢二钾0.1-0.18％、氯化钙0.05-0.07％、硫酸亚铁1-3％、氯化钠1-3％，其余为水，添加搅拌机中进行搅拌均匀，得到终筛选培养基；
（2）将嗜热产丁酸梭菌先接种到初筛培养基中，进行初次培养3-5天，得到初次培养嗜热产丁酸梭菌；
（3）将初次培养嗜热产丁酸梭菌接种到终筛培养基中，进行终次培养4-6天，得到初次培养嗜热产丁酸梭菌。
4.根据权利要求3所述的一种微生物秸秆降解菌剂，其特征在于：所述玉米构树汁制备方法为：
（1）将新鲜玉米进行脱粒，得到玉米粒；
（2）将上述得到的玉米粒添加到打浆机中进行打浆处理，打浆转速为2000r/min，打浆时间为30min，得到玉米浆液；
（3）将上述得到玉米浆液进行过滤，去掉滤渣，得到玉米汁；
（4）向玉米汁中添加海藻酸钠，以200r/min转速搅拌30min，得到复合玉米汁；
（5）将构树叶清洗干净，然后进行粉碎，得到构树叶粉料，向构树叶粉料中添加其质量5倍的清水，搅拌40min，然后进行过滤，去除滤渣，得到构树汁；
（6）将复合玉米汁、构树汁添加到搅拌机中进行搅拌，混合均匀后，再进行浓缩，灭菌，得到玉米构树汁。
5.根据权利要求4所述的一种微生物秸秆降解菌剂，其特征在于，所述玉米汁、海藻酸钠混合质量比为50:1-2；
所述复合玉米汁、构树汁混合质量比为3:1-1.5。
6.根据权利要求5所述的一种微生物秸秆降解菌剂，其特征在于，所述甘露醇复合聚-β-羟基丁酸酯制备方法为：
将聚-β-羟基丁酸酯添加到乙醇中，调节温度至60℃，保温搅拌35min，得到聚-β-羟基丁酸酯乙醇溶液；
再将甘露醇添加到聚-β-羟基丁酸酯乙醇溶液中，调节温度至55℃，保温搅拌1小时，得到复合溶液；
对复合溶液进行回收乙醇，得到甘露醇复合聚-β-羟基丁酸酯。
7.根据权利要求6所述的一种微生物秸秆降解菌剂，其特征在于：所述聚-β-羟基丁酸酯、乙醇混合质量比为1:20-30；
所述甘露醇、聚-β-羟基丁酸酯乙醇溶液混合质量比为1:10-15。
8.根据权利要求2所述的一种微生物秸秆降解菌剂，其特征在于：所述初次培养温度为23-26℃；
终次培养温度为30-35℃。
9.根据权利要求1所述的一种微生物秸秆降解菌剂的制备方法，其特征在于：所述包括以下步骤：
（1）将固氮螺旋菌、芽孢杆菌、酵母菌、热纤梭菌、粪堆梭菌、活化筛选嗜热产丁酸梭菌、交替假单胞菌分别接种在斜面培养基中活化，并在平板中进行纯化，得到对应菌种平板；
（2）将对应菌种平板上的菌种进行分别发酵发酵，发酵温度为25-35℃，发酵时间为10-15d，得到各菌种种子液；
（3）按各重量份进行分别取对应菌种种子液，进行混合复配，得到微生物秸秆降解菌剂。
10.根据权利要求9所述的一种微生物秸秆降解菌剂的制备方法，其特征在于：所述各菌种种子液中菌种浓度相同，均为2.35×106cfu/ml。
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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