CN115316501A - 香菇下脚料发酵物作为大口黑鲈饲料添加剂的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了香菇下脚料发酵物作为大口黑鲈饲料添加剂的应用，属于水产养殖技术领域；香菇下脚料发酵物作为饲料添加剂可提高大口黑鲈对植物性蛋白的耐受性，缓解了高植物蛋白饲料诱发的肝脏和肠道炎症反应，可提高大口黑鲈的生长特性及饲料利用率，改善大口黑鲈的肝脏生理情况以及鱼体代谢功能，促进肝脏和肠道健康以及代谢功能，适量添加对鱼体有益、无副作用；本发明采用的香菇下脚料发酵物是一种功能性绿色添加剂，其对环境友好，符合健康生态养殖理念，适合当今水产养殖的发展要求。

Description

香菇下脚料发酵物作为大口黑鲈饲料添加剂的应用

技术领域

本发明属于水产养殖技术领域，具体涉及香菇下脚料发酵物作为大口黑鲈饲料添加剂的应用。

背景技术

香菇素有山珍之王之称，是高蛋白、低脂肪的营养保健食品。香菇中含有多种活性成分物质：活性肽、香菇多糖、双链核糖核酸、5'-乌苷酸和香菇太生等。香菇具有抗病毒、抗氧化、调节机体免疫力等多个方面的积极作用功效。随着人们生活水平提高，对香菇多糖需求不断增加，香菇在加工过程中会产生大量香菇下脚料，尚未能得到有效的利用，造成资源浪费。香菇下脚料发酵物是提取过多糖的香菇子实体，含有丰富的蛋白质、优质的膳食纤维和未被完全提取的香菇多糖。与传统化学药品和抗生素相比，香菇下脚料发酵物作为水产动物饲料添加剂具有很多优势：绿色无污染、安全高效、无药物残留和毒副作用。在当前对水产品安全受到高度关注和实现水产养殖业可持续发展的背景下，研究香菇下脚料发酵物作为水产饲料添加剂在水产养殖中的应用具有重大的意义。

大口黑鲈(Lateolabrax japonicus)属于鲈形目(Perciformes)、太阳鱼科(Centrarchidae)。大口黑鲈是主要养殖的淡水鱼之一，因其实用性强，养殖周期短，肉质鲜美，营养价值高等特点，具有良好的市场前景。在水产动物饲料中，鱼粉具有蛋白含量高、适口性好、抗营养因子少、必需氨基酸组成平衡、微量元素高和维生素种类多等特点，一直被认为是不可替代的优质蛋白源，在饲料配方中所占的比例一直居高不下，近年来，由于鱼粉资源短缺、市场需求大等原因，价格一直处于较高水平，鱼粉的替代一直是国内外学术研究的热点。为降低养殖成本，饲料行业已广泛研究并应用植物蛋白替代鱼粉，然而高植物蛋白饲料不仅会诱发大口黑鲈肝脏和肠道病变，同时还会导致大口黑鲈生长受阻和饲料效率下降。

因此，寻找纯天然绿色无公害饲料添加剂对于大口黑鲈的健康养殖具有重要的意义。

发明内容

为解决现有技术中的上述问题，本发明提供了一种香菇下脚料发酵物作为大口黑鲈饲料添加剂的应用，通过以香菇下脚料发酵物作为饲料添加剂提高了大口黑鲈对植物性蛋白的耐受性，缓解了高植物蛋白饲料诱发的肝脏和肠道炎症反应，具有提高大口黑鲈生长性能、饲料利用率以及改善肝脏和肠道健康的作用。

为实现上述目的，本发明提供了如下技术方案：

本发明提供了香菇下脚料发酵物作为大口黑鲈饲料添加剂的应用。

进一步地，具体为香菇下脚料发酵物作为提高大口黑鲈对植物性蛋白耐受性的饲料添加剂的应用。

进一步地，所述香菇下脚料发酵物添加到大口黑鲈基础饲料中，添加量为所述基础饲料质量的1～5％，优选为2～3％。

香菇下脚料发酵物含有优质的膳食纤维、香菇多糖和多种有益微生物。

香菇下脚料发酵物在饲料中添加量过高会影响大口黑鲈的生长性能、肝脏和肠道结构以及肠道微生物的多样性和丰度，添加量过少达不到效果。

本发明还提供了一种大口黑鲈饲料，包括基础饲料和香菇下脚料发酵物，所述香菇下脚料发酵物为所述基础饲料质量的1～5％；所述基础饲料由以下质量百分比的原料组成：

进一步地，所述维生素和矿物质预混料由维生素预混剂和矿物质预混物按照质量比为1∶1组成；所述维生素预混剂中包括维生素A、维生素D3、维生素E、维生素K3、维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素B12、烟碱酸、泛酸、生物素、维生素C、肌醇、叶酸及沸石粉；所述矿物质预混物中包括甘氨酸-铁、甘氨酸-铜、甘氨酸-锰、甘氨酸-锌、七水硫酸镁、碘酸钙、七水硫酸钴、亚硒酸钠及沸石粉；所述抗氧化剂为乙氧基喹啉；所述氯化胆碱为含量50wt％的粉剂。

更进一步地，所述每公斤维生素预混剂中包括：维生素A 13.5毫克、维生素D30.75毫克、维生素E 800毫克、维生素K3 80毫克、维生素B1 100毫克、维生素B2 100毫克、维生素B6 150毫克、维生素B12 0.5毫克、烟碱酸200毫克、泛酸350毫克、生物素0.5毫克、维生素C 1050毫克、肌醇1200毫克、叶酸50毫克及沸石粉5.90克；每公斤矿物质预混物中包括：甘氨酸-铁1.5克、甘氨酸-铜0.051克、甘氨酸-锰0.3克、甘氨酸-锌0.69克、七水硫酸镁0.81克、碘酸钙0.0051克、七水硫酸钴0.0021克、亚硒酸钠0.0039克及沸石粉6.64克。所述抗氧化剂为乙氧基喹啉；所述氯化胆碱为含量50wt％的粉剂。

本发明同时提供了上述所述的大口黑鲈饲料的制备方法，包括以下步骤：将鱼粉、大豆浓缩蛋白、玉米蛋白粉、豆粕、花生麸和面粉混合，得到混合物A；将啤酒酵母、维生素和矿物质预混料、氯化胆碱、抗氧化剂及磷酸二氢钙混合，得到混合物B；将所述混合物B加入所述混合物A中，之后加入香菇下脚料发酵物，搅拌后加入鱼油和大豆卵磷脂，得到混合物C；然后加水，制成颗粒料，晾干，得到所述大口黑鲈饲料。

进一步地，所述水的加入量为所述混合物C质量的30％。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

香菇下脚料发酵物作为饲料添加剂可提高大口黑鲈对植物性蛋白的耐受性，缓解了高植物蛋白饲料诱发的肝脏和肠道炎症反应，可提高大口黑鲈的生长特性及饲料利用率，改善大口黑鲈的肝脏生理情况以及鱼体代谢功能，促进肝脏和肠道健康以及代谢功能，适量添加对鱼体有益、无副作用；

本发明采用的香菇下脚料发酵物是一种功能性绿色添加剂，其对环境友好，符合健康生态养殖理念，适合当今水产养殖的发展要求。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为饲料中添加香菇下脚料发酵物对大口黑鲈肝脏形态结构的影响；

图2为饲料中添加香菇下脚料发酵物对大口黑鲈肝脏消化酶活性的影响；图中A为对淀粉酶酶活性的影响，B为对脂肪酶酶活性的影响，C为对肝脏胰蛋白酶酶活性的影响；

图3为饲料中添加香菇下脚料发酵物对大口黑鲈肝脏抗氧化能力的影响；图中A为对肝脏总抗氧化力的影响，B为对过氧化氢酶酶活性的影响，C为对丙二醛含量的影响，D为对超氧化物歧化酶酶活性的影响；

图4为饲料中添加香菇下脚料发酵物对大口黑鲈肠道形态结构的影响。

具体实施方式

现详细说明本发明的多种示例性实施方式，该详细说明不应认为是对本发明的限制，而应理解为是对本发明的某些方面、特性和实施方案的更详细的描述。应理解本发明中所述的术语仅仅是为描述特别的实施方式，并非用于限制本发明。

另外，对于本发明中的数值范围，应理解为还具体公开了该范围的上限和下限之间的每个中间值。在任何陈述值或陈述范围内的中间值以及任何其他陈述值或在所述范围内的中间值之间的每个较小的范围也包括在本发明内。这些较小范围的上限和下限可独立地包括或排除在范围内。

除非另有说明，否则本文使用的所有技术和科学术语具有本发明所述领域的常规技术人员通常理解的相同含义。虽然本发明仅描述了优选的方法和材料，但是在本发明的实施或测试中也可以使用与本文所述相似或等同的任何方法和材料。本说明书中提到的所有文献通过引用并入，用以公开和描述与所述文献相关的方法和/或材料。在与任何并入的文献冲突时，以本说明书的内容为准。

在不背离本发明的范围或精神的情况下，可对本发明说明书的具体实施方式做多种改进和变化，这对本领域技术人员而言是显而易见的。由本发明的说明书得到的其他实施方式对技术人员而言是显而易见的。本发明说明书和实施例仅是示例性的。

关于本文中所使用的“包含”、“包括”、“具有”、“含有”等等，均为开放性的用语，即意指包含但不限于。

以下实施例中，所采用的氯化胆碱为购自泰安汉威集团有限公司的氯化胆碱(50wt％)，所采用的大豆浓缩蛋白购自福建长德蛋白科技有限公司，鱼粉购自泰国开发鱼粉企业有限公司，玉米蛋白粉购自中粮生化能源(龙江)有限公司，豆粕购自中粮(东莞)粮油工业有限公司，花生麸购自石家庄复源科技有限公司，面粉为东莞穗丰粮食集团有限公司，啤酒酵母购自深圳市京基智农时代股份有限公司，维生素和矿物质预混料购自深圳市京基智农时代股份有限公司，其由维生素预混剂和矿物质预混物按照质量比为1∶1组成，每公斤维生素预混剂中包括：维生素A 13.5毫克、维生素D3 0.75毫克、维生素E 800毫克、维生素K3 80毫克、维生素B1 100毫克、维生素B2 100毫克、维生素B6 150毫克、维生素B120.5毫克、烟碱酸200毫克、泛酸350毫克、生物素0.5毫克、维生素C 1050毫克、肌醇1200毫克、叶酸50毫克、沸石粉5.90克；每公斤矿物质预混物中包括：甘氨酸-铁1.5克、甘氨酸-铜0.051克、甘氨酸-锰0.3克、甘氨酸-锌0.69克、七水硫酸镁0.81克、碘酸钙0.0051克、七水硫酸钴0.0021克、亚硒酸钠0.0039克、沸石粉6.64克；抗氧化剂为乙氧基喹啉，购自深圳市京基智农时代股份有限公司，香菇下脚料发酵物来自越好生物科技(广州)股份有限公司，其含有的主要成分种类及含量为：水分12.30％，粗灰分5.00％，粗蛋白18.00％，粗脂肪1.80％，粗纤维9.70％，粗多糖3.06％，谷氨酸3.47％；鱼油购自广东高美饲料有限公司，大豆卵磷脂购自东莞路易达孚饲料蛋白有限公司。

实施例1

添加香菇下脚料发酵物的大口黑鲈饲料的制备：

在基础饲料(高植物蛋白饲料)中添加香菇下脚料发酵物制备大口黑鲈饲料，香菇下脚料发酵物设置6个添加量梯度，分别为基础饲料质量的0％、1wt％、2wt％、3wt％、4wt％、5wt％，具体的饲料配方如表1所示。

各组饲料的制备方法为：

(1)将所用原料粉碎过40目筛；

(2)取鱼粉、大豆浓缩蛋白、玉米蛋白粉、豆粕、花生麸、面粉，并混合均匀；

(3)往步骤(2)所得混合物中加入充分混匀的啤酒酵母、维生素和矿物质预混料、氯化胆碱、抗氧化剂、磷酸二氢钙，之后加入香菇下脚料发酵物，并搅拌均匀；

(4)往步骤(3)所得混合物中加入鱼油和大豆卵磷脂，搅拌均匀；

(5)向步骤(4)所得混合物中加入混合物质量30％的水，充分混合，制成颗粒料，晾干，得到大口黑鲈饲料。

表1

表1中，FM、PP、MR1、MR2、MR3、MR3和MR5组分别指对照组、植物蛋白组、植物蛋白组添加1g/kg的香菇下脚料发酵物组、植物蛋白组添加2g/kg的香菇下脚料发酵物组、植物蛋白组添加3g/kg的香菇下脚料发酵物组、植物蛋白组添加4g/kg的香菇下脚料发酵物组、植物蛋白组添加5g/kg的香菇下脚料发酵物组。

效果验证

试验选择健康规格一致的大口黑鲈1120条，平均分为7组，每组4个重复，每个重复40尾鱼，饱食投喂，养殖期为8周。

1、研究饲料中添加香菇下脚料发酵物对大口黑鲈生长性能和饲料利用的影响：

统计各组大口黑鲈的平均初始体质量、养殖8周后的平均终末体质量，计算增重率，增重率/％＝(终末体质量(g)-初始体质量(g))/初始体质量(g)×100％，计算饲料效率(饲料效率/％＝(终末体质量(g)-初始体质量(g))/摄食量(g))，并计算特定生长率(100×(终末体质量(g)-初始体质量(g))/days,)、肥满度(100×终末体质量(g)/体长³)，将各组大口黑鲈解剖后，称量内脏和肝脏的重量，计算各组大口黑鲈的脏体比(内脏重量(g)/终末体质量(g)×100％)和肝体比(肝脏重量(g)/终末体质量(g)×100％)，所得结果如表2所示：

表2饲料添加香菇下脚料发酵物对大口黑鲈生长性能、饲料利用和形态指数的影响

如表2所示，香菇下脚料发酵物饲喂大口黑鲈8周，随着饲料中香菇下脚料发酵物添加量的增加，试验鱼的增重率和特定生长率呈现出先增加后减少的趋势，且均在香菇下脚料发酵物添加量为2％时达到最大值，饲料效率在添加量为3％时达到最大值。同时，由表2还可以看出，饲料中添加香菇下脚料发酵物可以降低大口黑鲈的脏体比。

以上结果表明，饲料中添加2％-3％的香菇下脚料发酵物可以提高大口黑鲈的增重率和饲料效率。

2、研究饲料中添加香菇下脚料发酵物对大口黑鲈肝脏形态结构的影响：

取上述养殖8周后的试验鱼的肝脏做HE染色，结果如图1所示，饲料中添加香菇发酵物均明显影响大口黑鲈肝脏组织结构，可使大口黑鲈肝脏组织结构和功能保持正常，促进健康成长。可见各组肝细胞细胞核明显，细胞界限明显。PP组明显看到炎症细胞浸润、肝血窦间隙明显较宽；1％香菇下脚料发酵物添加水平下，有少量细胞浸润现象；2％香菇下脚料发酵物添加水平下，炎症浸润情况有所改善，比较接近FM组，但是仍能看到某些区域肝血窦中存在炎症细胞；4％香菇下脚料发酵物添加水平下，细胞轮廓界限清晰正常，肝血窦间隙明显，且出现炎症细胞浸润；3％和5％香菇下脚料发酵物添加水平下，细胞与细胞之间的边界清晰可见，肝血窦间隙有所改善，且没出现炎症细胞浸润的情况。

以上结果表明，饲料中添加2％～5％的香菇下脚料发酵物可以改善大口黑鲈的肝脏形态结构，提高大口黑鲈肝脏健康。

3、研究饲料中添加香菇下脚料发酵物对大口黑鲈肝脏消化酶活和抗氧化能力的影响：

取上述养殖8周后的试验鱼的肝脏组织进行消化酶以及抗氧化酶活性测定，结果如图2和图3所示，饲料中添加1％香菇下脚料发酵物组显著提升淀粉酶(AMS)酶活性(图2A)；各添加剂量的脂肪酶(LPS)酶活性无显著差异(P<0.05，图2B)；饲料中添加4％香菇下脚料发酵物时候，肝脏胰蛋白酶(TRY)活性最高(图2C)；饲料中添加2％香菇下脚料发酵物中，其总抗氧化能力(T-AOC)与PP组无显著差异(图3A)，但过氧化氢酶(CAT)活性显著高于其余各组(图3B)。此外，与对照组PP相比，香菇下脚料发酵物添加组的丙二醛(MDA)含量(图3C)以及超氧化物歧化酶(SOD)(图3D)活性均显著下降，且与FM组接近。

以上结果表明，饲料中添加香菇下脚料发酵物能够改善肝脏消化功能和抗氧化能力。

4、研究饲料中添加香菇下脚料发酵物对大口黑鲈肠道形态结构和肠道菌群的影响：

取上述养殖8周后的试验鱼的肠道组织样品做切片和菌群分析，结果如表3～4和图4所示，其中表3和图4为饲料添加香菇下脚料发酵物对大口黑鲈肠道形态的影响，表4为饲料添加香菇下脚料发酵物对大口黑鲈肠道菌群的影响。由表3和图4可见，所有组的绒毛数量无显著差异；5％香菇下脚料发酵物添加组肌层厚度大于PP组；与PP组相比，5％香菇下脚料发酵物添加组杯状细胞数和绒毛长度为各组中最高，其他组间差异不显著(P>0.05)。

如表4所示，Sob、Chao1、ACE数值代表微生物群落的丰富度，其数值大小与微生物丰富度呈正相关；Shannon、Simpson数值代表微生物群落的多样性，其中Simpson指数越小，表示微生物群落多样性越高，Shannon指数越大，微生物群落多样性越高；α-多样性分析表明，饲料中添加4％香菇下脚料发酵物中微生物丰富度显著提升(P<0.05)。

以上结果表明：添加适量的香菇下脚料发酵物对大口黑鲈肠道形态以及微生物丰富度有显著影响。

表3饲料添加香菇下脚料发酵物对大口黑鲈肠道形态的影响

表4饲料添加香菇下脚料发酵物对大口黑鲈肠道菌群的影响

以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明披露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围内。

Claims (7)

1.香菇下脚料发酵物作为大口黑鲈饲料添加剂的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，具体为香菇下脚料发酵物作为提高大口黑鲈对植物性蛋白耐受性的饲料添加剂的应用。

3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述香菇下脚料发酵物添加到大口黑鲈基础饲料中，添加量为所述基础饲料质量的1～5％。

4.一种大口黑鲈饲料，其特征在于，包括基础饲料和香菇下脚料发酵物，所述香菇下脚料发酵物为所述基础饲料质量的1～5％；所述基础饲料由以下质量百分比的原料组成：

5.根据权利要求4所述的大口黑鲈饲料，其特征在于，所述维生素和矿物质预混料由维生素预混剂和矿物质预混物按照质量比为1∶1组成；所述维生素预混剂中包括维生素A、维生素D3、维生素E、维生素K3、维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素B12、烟碱酸、泛酸、生物素、维生素C、肌醇、叶酸及沸石粉；所述矿物质预混物中包括甘氨酸-铁、甘氨酸-铜、甘氨酸-锰、甘氨酸-锌、七水硫酸镁、碘酸钙、七水硫酸钴、亚硒酸钠及沸石粉；所述抗氧化剂为乙氧基喹啉；所述氯化胆碱为含量50wt％的粉剂。

6.权利要求4或5所述的大口黑鲈饲料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将鱼粉、大豆浓缩蛋白、玉米蛋白粉、豆粕、花生麸和面粉混合，得到混合物A；将啤酒酵母、维生素和矿物质预混料、氯化胆碱、抗氧化剂及磷酸二氢钙混合，得到混合物B；将所述混合物B加入所述混合物A中，之后加入香菇下脚料发酵物，搅拌后加入鱼油和大豆卵磷脂，得到混合物C；然后加水，制成颗粒料，晾干，得到所述大口黑鲈饲料。

7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述水的加入量为所述混合物C质量的30％。

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