CN115141119B - 一种鸟氨酸衍生物及其制备方法、钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物及制备和应用 - Google Patents

一种鸟氨酸衍生物及其制备方法、钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物及制备和应用 Download PDF

Info

Publication number
CN115141119B
CN115141119B CN202210884234.1A CN202210884234A CN115141119B CN 115141119 B CN115141119 B CN 115141119B CN 202210884234 A CN202210884234 A CN 202210884234A CN 115141119 B CN115141119 B CN 115141119B
Authority
CN
China
Prior art keywords
ornithine
complex
gadobenate dimeglumine
reaction
derivative
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202210884234.1A
Other languages
English (en)
Other versions
CN115141119A (zh
Inventor
王玉记
李宏军
贾任博
刘子涵
卢玉
朱迪
阿依江
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Capital Medical University
Original Assignee
Capital Medical University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Capital Medical University filed Critical Capital Medical University
Priority to CN202210884234.1A priority Critical patent/CN115141119B/zh
Publication of CN115141119A publication Critical patent/CN115141119A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN115141119B publication Critical patent/CN115141119B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C257/00—Compounds containing carboxyl groups, the doubly-bound oxygen atom of a carboxyl group being replaced by a doubly-bound nitrogen atom, this nitrogen atom not being further bound to an oxygen atom, e.g. imino-ethers, amidines
    • C07C257/10—Compounds containing carboxyl groups, the doubly-bound oxygen atom of a carboxyl group being replaced by a doubly-bound nitrogen atom, this nitrogen atom not being further bound to an oxygen atom, e.g. imino-ethers, amidines with replacement of the other oxygen atom of the carboxyl group by nitrogen atoms, e.g. amidines
    • C07C257/14—Compounds containing carboxyl groups, the doubly-bound oxygen atom of a carboxyl group being replaced by a doubly-bound nitrogen atom, this nitrogen atom not being further bound to an oxygen atom, e.g. imino-ethers, amidines with replacement of the other oxygen atom of the carboxyl group by nitrogen atoms, e.g. amidines having carbon atoms of amidino groups bound to acyclic carbon atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K49/00—Preparations for testing in vivo
    • A61K49/0002—General or multifunctional contrast agents, e.g. chelated agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C215/00—Compounds containing amino and hydroxy groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C215/02—Compounds containing amino and hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having hydroxy groups and amino groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton
    • C07C215/04—Compounds containing amino and hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having hydroxy groups and amino groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being saturated
    • C07C215/06—Compounds containing amino and hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having hydroxy groups and amino groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being saturated and acyclic
    • C07C215/10—Compounds containing amino and hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having hydroxy groups and amino groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being saturated and acyclic with one amino group and at least two hydroxy groups bound to the carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F5/00—Compounds containing elements of Groups 3 or 13 of the Periodic Table
    • C07F5/003—Compounds containing elements of Groups 3 or 13 of the Periodic Table without C-Metal linkages
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups

Landscapes

  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Abstract

本发明属于药物合成技术领域，具体涉及一种鸟氨酸衍生物及其制备方法和应用、钆贝葡胺‑鸟氨酸类络合物，所述鸟氨酸衍生物具有式I所示结构。本发明提供的鸟氨酸衍生物作为PAD4抑制剂使用时，毒性小，副作用小。

Description

一种鸟氨酸衍生物及其制备方法、钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物 及制备和应用
技术领域
本发明属于药物合成的技术领域，具体涉及一种鸟氨酸衍生物及其制备方法和应用、钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物及制备和应用。
背景技术
肽酰基精氨酸脱亚胺酶4(PAD4)作为一种转录共调节剂，可催化蛋白质中特定精氨酸残基向瓜氨酸的钙依赖性转化。在癌症中，PAD4不仅是抑癌蛋白p53的转录共抑制因子，还参与介导恶性肿瘤的形成。由于其在细胞信号传导途径和疾病发病机理中的调控作用，PAD4已成为多种疾病的潜在治疗靶标。因此，PAD4抑制剂的开发变得非常重要。
目前，可以作为PAD4抑制剂的化合物(例如：铂基类化合物)在使用过程中，普遍存在毒性大、副作用强的问题。
发明内容
有鉴于此，本发明提供了一种鸟氨酸衍生物及其制备方法和应用、钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物及制备和应用。本发明提供的鸟氨酸衍生物作为PAD4抑制剂使用时，毒性小、副作用小。
为了实现以上目的，本发明提供了一种鸟氨酸衍生物，具有式I所示结构：
本发明还提供了上述所述的鸟氨酸衍生物的制备方法，包括以下步骤：
将Boc-鸟氨酸(Z)、1-羟基苯并三氮唑、环己基碳二亚胺和非质子性溶剂混合，得到含Boc-鸟氨酸(Z)反应液；将所述含Boc-鸟氨酸(Z)反应液和苄胺在碱性条件下进行亲核取代反应，得到具有式I-1所示结构的中间物I-1；
将所述中间物I-1和盐酸的乙酸乙酯溶液进行脱Boc反应，得到具有式I-2所示结构的中间物I-2；
将联苯-3-羧酸、1-羟基苯并三氮唑、环己基碳二亚胺和非质子性溶剂混合，得到含联苯-3-羧酸的反应液；将所述含联苯-3-羧酸的反应液和中间物I-2在碱性条件下进行酰胺化反应，得到具有式I-3所示结构的中间物I-3；
将所述中间物I-3溶解，在氢气和催化剂条件下进行氢解反应，得到具有式I-4所示结构的中间物I-4；
将所述中间物I-4、无水甲醇和2-氯乙酰亚胺酸乙酯盐酸盐混合，在碱性条件下，进行取代反应，得到具有式I所示结构的鸟氨酸衍生物；
优选地，所述Boc-鸟氨酸(Z)和苄胺的摩尔比为1:1～1.2；所述亲核取代反应的温度为20～30℃，时间为5～7h。
优选地，所述中间物I-2和联苯-3-羧酸的摩尔比为1:1～1.2。
优选地，所述酰胺化反应的温度为0～4℃，时间为5.5～6.5h。
优选地，所述氢解反应的温度为20～30℃，时间为6～8h。
优选地，所述中间物I-4和2-氯乙酰亚胺酸乙酯盐酸盐的摩尔比为1：1～1.2；所述取代反应的的温度为20～30℃，时间为23～26h。
本发明还提供了一种钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物，具有式II所示结构：
本发明还提供了所述的钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物的制备方法，包括以下步骤：
将鸟氨酸衍生物溶于水，得到鸟氨酸衍生物溶液；
将钆贝葡胺溶液和鸟氨酸衍生物溶液混合，发生络合，得到钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物；
所述鸟氨酸衍生物为上述所述的鸟氨酸衍生物。
本发明还提供了上述所述鸟氨酸衍生物或所述的所述的钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物在制备PAD4抑制剂中的应用。
本发明提供了一种鸟氨酸衍生物，具有式I所示结构，本发明通过联苯-3-羧基修饰鸟氨酸骨架的N端，鸟氨酸骨架的N端与PAD4独有的半胱氨酸残基的侧链之间通过分子间的相互作用紧密堆砌，增强了对PAD4的选择性。因此，本发明提供的鸟氨酸衍生物作为PAD4抑制剂使用时，毒性小、副作用小。
本发明还提供了上述所述鸟氨酸衍生物的制备方法，包括以下步骤：将Boc-鸟氨酸(Z)、1-羟基苯并三氮唑、环己基碳二亚胺和非质子性溶剂混合，得到含Boc-鸟氨酸(Z)反应液；将所述含Boc-鸟氨酸(Z)反应液和苄胺在碱性条件下进行亲核取代反应，得到具有式I-1所示结构的中间物I-1；将所述中间物I-1和盐酸的乙酸乙酯溶液进行脱Boc反应，得到具有式I-2所示结构的中间物I-2；将联苯-3-羧酸、1-羟基苯并三氮唑、环己基碳二亚胺和非质子性溶剂混合，得到含联苯-3-羧酸的反应液；将所述含联苯-3-羧酸的反应液和中间物I-2在碱性条件下进行酰胺化反应，得到具有式I-3所示结构的中间物I-3；将所述中间物I-3溶解，在氢气和催化剂条件下进行氢解反应，得到具有式I-4所示结构的中间物I-4；将中间物I-4、无水甲醇和2-氯乙酰亚胺酸乙酯盐酸盐混合，在碱性条件下，进行取代反应，得到具有式I所示结构的鸟氨酸衍生物。本发明以Boc-鸟氨酸(Z)为原料，通过亲核取代反应、脱Boc反应、酰胺化反应、氢解反应和取代反应制备得到鸟氨酸衍生物，反应过程简单，收率高。
本发明还提供了一种钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物，具有式II所示结构，本发明中所述钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物以钆贝葡胺和所述鸟氨酸类衍生物络合制得，其中钆贝葡胺中钆离子具有造影性能，而鸟氨酸类衍生物对PAD4具有抑制效果，因此，钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物可以达到实时监测抑制效果的作用，扩展了鸟氨酸类衍生物的应用。
附图说明
图1为实施例1中的鸟氨酸衍生物核磁共振氢谱图；
图2为实施例1中的鸟氨酸衍生物质谱检测图；
图3为实施例1所得到的鸟氨酸类络合物的红外吸收光谱测试图；
图4为应用例1所得到的钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物的红外吸收光谱测试图；
图5为应用例1所得到的钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物的分子离子峰图谱；
图6为鸟氨酸类络合物、钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物、鸟氨酸类络合物和钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物物理混合的混合物和钆贝葡胺的紫外可见吸收光谱图；
图7为钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物、钆贝葡胺、鸟氨酸类络合物和钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物物理混合的混合物的电子顺磁共振测试图；
图8为钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物、鸟氨酸类络合物的粒径测试结果图；
图9为鸟氨酸类络合物和钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物对HepG2细胞的三次细胞毒性检测结果图；
图10为钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物对LO2细胞和HepG2细胞的3次细胞毒性检测结果图。
具体实施方式
本发明提供了一种鸟氨酸衍生物，具有式I所示结构：
本发明还提供了上述所述鸟氨酸衍生物的制备方法，包括以下步骤：
将Boc-鸟氨酸(Z)、1-羟基苯并三氮唑、环己基碳二亚胺和非质子性溶剂混合，得到含Boc-鸟氨酸(Z)反应液；将所述含Boc-鸟氨酸(Z)反应液和苄胺在碱性条件下进行亲核取代反应，得到具有式I-1所示结构的中间物I-1；
将所述中间物I-1和盐酸的乙酸乙酯溶液进行脱Boc反应，得到具有式I-2所示结构的中间物I-2；
将联苯-3-羧酸、1-羟基苯并三氮唑、环己基碳二亚胺和非质子性溶剂混合，得到含联苯-3-羧酸的反应液；将所述含联苯-3-羧酸的反应液和中间物I-2在碱性条件下进行酰胺化反应，得到具有式I-3所示结构的中间物I-3；
将所述中间物I-3溶解，在氢气和催化剂条件下进行氢解反应，得到具有式I-4所示结构的中间物I-4；
将所述中间物I-4、无水甲醇和2-氯乙酰亚胺酸乙酯盐酸盐混合，在碱性条件下，进行取代反应，得到具有式I所示结构的鸟氨酸衍生物；
本发明将Boc-鸟氨酸(Z)、1-羟基苯并三氮唑、环己基碳二亚胺和非质子性溶剂混合，得到含Boc-鸟氨酸(Z)反应液；将所述含Boc-鸟氨酸(Z)反应液和苄胺在碱性条件下进行亲核取代反应，得到具有式I-1所示结构的中间物I-1。
在本发明中，所述非质子性溶剂包括四氢呋喃。在本发明中，所述Boc-鸟氨酸(Z)和1-羟基苯并三氮唑的摩尔比优选为1:1.0～1.2，更优选为1:1.1。在本发明中，所述Boc-鸟氨酸(Z)和环己基碳二亚胺的摩尔比优选为1:1.0～1.2；更优选为1:1.1。在本发明中，所述Boc-鸟氨酸(Z)的质量和非质子性溶剂的体积比优选为1～2g：80mL，更优选为1.5～1.9g：80mL。在本发明中，所述Boc-鸟氨酸(Z)和苄胺的摩尔比优选为1:1.0～1.2；更优选为1:1.1。
在本发明中，所述混合优选在冰水浴条件下进行。在本发明中，所述混合的方式优选为搅拌；所述搅拌的转速优选为500～600rpm，更优选为520～550rpm；时间优选为30～40min，更优选为32～36min。
在本发明中，所述亲核取代反应的温度优选为20～30℃，更优选为25℃，时间优选为5～7h，更优选为5.5～6.5h。在本发明中，所述碱性条件的pH值优选为9～10，更优选为9.2～9.5。在本发明中，所述碱性条件由N-甲基吗啉提供。
在本发明中，所述亲核取代反应的反应方程式如下：
所述亲核取代反应后，本发明优选还包括将亲核取代反应所得体系依次进行旋蒸，旋蒸所得固体采用乙酸乙酯复溶后过滤，过滤所得固体依次进行洗涤和干燥。在本发明中，所述洗涤包括依次进行饱和NaHCO3溶液洗涤、饱和NaCl溶液洗涤、饱和KHSO4溶液洗涤、饱和NaCl溶液洗涤、饱和NaHCO3溶液洗涤和饱和NaCl溶液洗涤。在本发明中，所述饱和NaHCO3溶液洗涤、饱和NaCl溶液洗涤、饱和KHSO4溶液洗涤、饱和NaCl溶液洗涤、饱和NaHCO3溶液洗涤和饱和NaCl溶液洗涤的次数均优选为3次。
得到具有式I-1所示结构的中间物I-1后，本发明将所述中间物I-1和盐酸的乙酸乙酯溶液进行脱Boc反应，得到具有式I-2所示结构的中间物I-2。
在本发明中，所述盐酸的乙酸乙酯溶液中盐酸的浓度优选为2～4mol/L，更优选为3mol/L。在本发明中，所述中间物I-1的质量和盐酸的乙酸乙酯溶液的体积比优选为100mg：1～1.2mL，更优选为100mg：1.1mL。
在本发明中，所述脱Boc反应优选在冰水浴的条件下进行。在本发明中，所述脱Boc反应的时间优选为3.5～5h，更优选为4～4.5h。
在本发明中，所述脱Boc反应的反应方程式如下：
所述脱Boc反应后，本发明优选还包括在温水浴下水泵抽干所述脱Boc反应所得体系的溶剂，所得固体用乙酸乙酯溶解后再重复抽干2次。
得到中间物I-2后，本发明将联苯-3-羧酸、1-羟基苯并三氮唑、环己基碳二亚胺和非质子性溶剂混合，得到含联苯-3-羧酸的反应液；将所述含联苯-3-羧酸的反应液和中间物I-2在碱性条件下进行酰胺化反应，得到具有式I-3所示结构的中间物I-3。
在本发明中，所述非质子性溶剂优选包括四氢呋喃。在本发明中，所述联苯-3-羧酸和1-羟基苯并三氮唑的摩尔比优选为1:1～1.2，更优选为1:1.1。在本发明中，所述联苯-3-羧酸和环己基碳二亚胺的摩尔比优选为1:1～1.2，更优选为1:1.1。在本发明中，所述中间物I-2和联苯-3-羧酸的摩尔比优选为1:1～1.2，更优选为1:1.1。在本发明中，所述中间物I-2的质量和非质子性溶剂的体积比优选为0.5～1g：80mL，更优选为0.8～0.9g：80mL。
在本发明中，所述酰胺化反应的碱性条件的pH优选为9～10，更优选为9.5。在本发明中，所述碱性条件优选由N-甲基吗啉提供。在本发明中，所述酰胺化反应的温度优选为0～4℃；时间优选为5.5～6.5h，更优选为6h。
在本发明中，所述酰胺化反应的反应方程式如下：
所述酰胺化反应后，本发明优选还包括将酰胺化反应所得体系进行旋蒸，旋蒸所得固体采用乙酸乙酯复溶后过滤，过滤所得固体依次进行洗涤和干燥，干燥所得到脂层依次进行过滤和硅胶柱层析。在本发明中，所述洗涤依次进行饱和NaHCO3溶液洗涤、饱和NaCl溶液洗涤、饱和KHSO4溶液洗涤、饱和NaCl溶液洗涤、饱和NaHCO3溶液洗涤和饱和NaCl溶液洗涤。在本发明中，所述饱和NaHCO3溶液洗涤、饱和NaCl溶液洗涤、饱和KHSO4溶液洗涤、饱和NaCl溶液洗涤、饱和NaHCO3溶液洗涤和饱和NaCl溶液洗涤的次数均优选为3次。在本发明中，所述硅胶柱层析的洗脱剂优选为甲醇-二氯甲烷体系，所述洗脱优选为梯度洗脱；所述梯度洗脱为依次采用甲醇和二氯甲烷的体积比为1:99、2:98、3:97、15:85的甲醇-二氯甲烷体系进行洗脱。在本发明中，所述中间物I-3处于甲醇和二氯甲烷的体积比为15：85的甲醇-二氯甲烷体系的洗脱液中。
得到中间物I-3后，本发明将所述中间物I-3溶解，在氢气和催化剂条件下进行氢解反应，得到具有式I-4所示结构的中间物I-4。
在本发明中，所述溶解的试剂优选为无水甲醇。在本发明中，所述中间物I-3的质量和溶解的试剂的体积比优选为0.5～1g：20mL，更优选为0.8～0.9g：20mL。在本发明中，所述催化剂优选为钯碳。在本发明中，所述中间物I-3和催化剂的摩尔比优选为1:0.1。
在本发明中，所述氢解反应的温度优选为20～30℃，更优选为25℃；时间优选为6～8h，更优选为6.5～7.5h。在本发明中，所述氢解反应的仪器优选为三通搅拌器。
在本发明中，所述氢解反应的反应方程式如下：
所述氢解反应后，本发明优选还包括将所述氢解反应所得体系依次进行抽滤、旋蒸和硅胶柱层析。
本发明对所述抽滤、旋蒸不作具体限定，采用本领域技术人员熟知的操作即可；在本发明中，所述硅胶柱层析的洗脱剂为甲醇的二氯甲烷溶液，所述洗脱优选为梯度洗脱，所述梯度洗脱优选为依次采用体积浓度为1％、2％、3％、15％的甲醇的二氯甲烷溶液进行洗脱。在本发明中，所述中间物I-4处于15％的甲醇的二氯甲烷溶液所得的洗脱液中。
得到中间物I-4后，本发明将所述中间物I-4、无水甲醇和2-氯乙酰亚胺酸乙酯盐酸盐混合，在碱性条件下，进行取代反应，得到具有式I所示结构的鸟氨酸衍生物。
在本发明中，所述中间物I-4的质量和无水甲醇的体积比优选为0.5～1g：20mL，更优选为0.8～0.9g：20mL。在本发明中，所述中间物I-4和2-氯乙酰亚胺酸乙酯盐酸盐的摩尔比优选为1：1～1.2，更优选为1：1.1。
在本发明中，所述混合优选在冰水浴条件下进行，本发明对所述混合不作具体限定，采用本领域技术人员熟知的操作即可。
在本发明中，所述碱性条件的pH值优选为9～11，更优选为10。在本发明中，所述碱性条件优选由DIPEA试剂提供。在本发明中，所述取代反应的温度优选为20～30℃，更优选为25℃，时间优选为23～26h，更优选为24～25h。
在本发明中，所述取代反应的反应方程式如下：
在本发明中，所述取代反应后，优选还包括将取代反应所得体系依次进行旋蒸和纯化。
在本发明中，所述纯化优选为反相色谱柱层析，所述反相色谱柱柱层析的填料为C18填料，所述反相色谱柱层析的洗脱剂为甲醇-水体系；所述反相色谱柱柱层析的洗脱方式优选为梯度洗脱；所述梯度洗脱优选为分别采用甲醇和水的体积比为1:9、2:8、3:7、10:0的甲醇-水体系进行洗脱，所述鸟氨酸衍生物处于甲醇和水的体积比为3:7的甲醇-水体系所得的洗脱液中。
本发明还提供一种钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物，具有式II所示结构：
本发明还提供了上述所述的钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物的制备方法，包括以下步骤：
将鸟氨酸衍生物溶于水，得到鸟氨酸衍生物溶液；
将钆贝葡胺溶液和鸟氨酸衍生物溶液混合，发生络合，得到钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物。
本发明将鸟氨酸衍生物溶于水，得到鸟氨酸衍生物溶液。
在本发明中，所述鸟氨酸衍生物溶液中鸟氨酸衍生物的质量浓度为1～5‰，更优选为1.19‰。所述钆贝葡胺溶液中钆贝葡胺的质量浓度为50～60％，更优选为52.8％。
得到鸟氨酸衍生物溶液后，本发明将钆贝葡胺溶液和鸟氨酸衍生物溶液混合，发生络合，得到钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物。
在本发明中，所述钆贝葡胺溶液和鸟氨酸衍生物溶液混合的方式优选为将钆贝葡胺溶液滴加至鸟氨酸衍生物溶液中，所述滴加的速度优选为1～5滴/s，更优选为1滴/s。
在本发明中，所述络合的温度优选为20～30℃，更优选为25℃，时间优选为20～40min，更优选为30min。
在本发明中，所述络合后，优选还包括将络合体系进行冻干，所述冻干的温度优选为-40～-50℃，更优选为-45℃。本发明对冻干的时间不作具体限定，冻干至固体即可。
本发明还提供了上述所述鸟氨酸衍生物或所述钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物作为PAD4抑制剂的应用。
下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1
将1.83gBoc-鸟氨酸(Z)、1.133g1-羟基苯并三氮唑、0.743g环己基碳二亚胺和80mLTHF加入茄瓶，然后在冰浴下以转速550rpm搅拌30min，得到含Boc-鸟氨酸(Z)反应液；然后向含Boc-鸟氨酸(Z)反应液中加入0.589g苄胺，用N-甲基吗啉调节pH至10，在25℃条件下进行亲核取代反应6h；将亲核取代反应所得体系依次进行旋蒸，旋蒸所得固体采用乙酸乙酯复溶后过滤，过滤所得固体依次采用饱和NaHCO3溶液、饱和NaCl溶液、饱和KHSO4溶液、饱和NaCl溶液、饱和NaHCO3溶液和饱和NaCl溶液各洗涤3次，然后进行干燥，得到2.07g具有式I-1所示结构的中间物I-1，形貌为白色固体，产率为91.2％。
将所述2g中间物I-1和20mL4mol/L盐酸的乙酸乙酯溶液在冰水浴下进行脱Boc反应4h。在温水浴下水泵抽干脱Boc反应所得体系的溶剂，所得固体用乙酸乙酯溶解后重复抽干2次，得到1.927g具有式I-2所示结构的中间物I-2，形貌为白色固体，产率为100％。
将0.870g联苯-3-羧酸、0.993g1-羟基苯并三氮唑和0.591g环己基碳二亚胺和80mL四氢呋喃加入茄瓶，然后在冰水浴下以转速550rpm搅拌30min，得到含联苯-3-羧酸的反应液；在含联苯-3-羧酸的反应液中加入1.71g中间物I-2进行酰胺化反应，将酰胺化反应所得体系依次进行旋蒸，旋蒸所得固体采用乙酸乙酯复溶后过滤，过滤所得固体依次进行洗涤(所述洗涤依次采用用饱和NaHCO3、饱和NaCl、饱和KHSO4、饱和NaCl、饱和NaHCO3和饱和NaCl各洗涤3次)和干燥，干燥所得脂层依次进行过滤和硅胶柱层析，所述硅胶柱层析的洗脱为依次采用甲醇和二氯甲烷的体积比为1:99、2:98、3:97、15:85的甲醇-二氯甲烷体系进行洗脱，所述中间物I-3处于甲醇和二氯甲烷的体积比为15:85的甲醇-二氯甲烷体系所得的洗脱液中。然后将洗脱液旋蒸，去除溶剂，得到1.31g具有式I-3所示结构的中间物I-3，形貌为白色固体，产率56.0％。
将0.704g中间物I-3溶解于20mL无水甲醇，得到含中间物I-3反应液；然后将含中间物I-3反应液中加入1.375g钯碳，置于三通搅拌器中，三通搅拌器竖直一侧接氢气袋，侧面通口接水泵，将茄瓶中空气抽尽，换成氢气，然后转移到氢解反应通风橱中进行氢解反应，本将所述氢解反应所得体系依次进行抽滤、旋蒸和硅胶柱层析，硅胶柱层析的梯度洗脱优选为依次采用体积浓度为1％、2％、3％和15％的甲醇的二氯甲烷溶液进行洗脱，所述中间物I-4处于15％的甲醇的二氯甲烷溶液所得的洗脱液中，然后，将洗脱液中的溶剂旋蒸去除，得到0.704g中间物I-4，形貌为白色固体，产率为71.7％。
将0.704g中间物I-4溶于20mL无水甲醇，然后在冰水浴条件下向溶解液中加入1.381g2-氯乙酰亚胺酸乙酯盐酸盐，并加入DIPEA调节pH值为10，然后撤去冰水浴，在25℃下进行取代反应24h，将取代反应所得体系依次进行旋蒸和反相色谱柱层析，反相色谱柱层析的填料为C18填料，洗脱为依次采用甲醇和水的体积比为1:9、2:8、3:7、10:0的甲醇-水体系进行洗脱，所述鸟氨酸衍生物处于甲醇和水的体积比为3:7的甲醇-水体系溶液所得的洗脱液中，然后将洗脱液旋蒸去除溶剂，得到0.390g所述鸟氨酸衍生物，形貌为白色固体，产率为47.6％，HPLC监测纯度为87.33％。
本发明对实施例1所得鸟氨酸衍生物进行了核磁共振氢谱检测，检测结果见图1，图谱信息为：1H NMR(300MHz,DMSO)δ10.29(s,1H),9.64(s,1H),9.24(s,1H),[7]8.83(d,J＝7.5Hz,1H),8.68(s,1H),8.26(d,J＝2.2Hz,1H),[16]7.94(d,J＝9.1,1H),7.84(m,1H),7.78(m,2H),7.63–7.41(m,1H),7.29(m,5H),4.56(m,1H),4.44(s,2H),4.31(d,J＝5.9Hz,2H),3.35(m,2H),1.98–1.84(m,2H),1.68(m,2H)。
本发明还对实施例1得到的鸟氨酸衍生物进行了质谱检测，见图2，从图2可知：鸟氨酸衍生物的[M+H+]＝477。
应用例1
将实施例1制备得到的鸟氨酸衍生物11.9mg溶于10mL水，完全溶解后，加入25μL钆贝葡胺溶液进行超声30min，超声所得胶体进行冻干，得到25.0mg钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物，产率为99.6％。
本发明对实施例1和应用例1所得到的鸟氨酸类络合物和钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物进行了红外吸收光谱测试，测试结果分别见图3和图4，从图3～4可知：鸟氨酸衍生物的酰胺键可能与钆形成配位键。
图5为应用例1所得到的钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物的分子离子峰图谱，从图5可知，钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物的[M]＝2010。
本发明对实施例1得到的鸟氨酸类络合物、应用例1所得到的和钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物、鸟氨酸类络合物和钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物物理混合的混合物和钆贝葡胺进行了紫外可见吸收光谱测试，其中物理混合指的是将鸟氨酸类络合物和钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物的粉末混合均匀即可，测试结果见图6，从图6可知：钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物紫外吸收峰蓝移，与物理混合不同。
本发明对应用例1所得到的钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物、钆贝葡胺、鸟氨酸类络合物和钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物物理混合的混合物进行了电子顺磁共振测试，测试结果见图7，从图7可知：钆贝葡胺g＝2.94处有一吸收峰，钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物在g＝3.15处有一吸收峰，可能与晶体场改变有关。
本发明对应用例1所得到的钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物、实施例1制备得到的鸟氨酸衍生物进行了粒径测试，测试结果见图8，从图8可知：钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物的粒径为154.5±17.67nm；鸟氨酸类衍生物的粒径为269.5±34.38nm；钆贝葡胺的粒径为395.3±65.81nm。
本发明对应用例1得到的钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物进行了细胞测试毒性测试，测试方法为：
复苏HepG2肝癌细胞和LO2正常肝细胞两株细胞系，在DMEM培养基(培养基成分含10％胎牛血清和1％青霉素链霉素)培养并传代，培养至第5代细胞，形态稳定。
将HepG2细胞和L02细胞分别以5000个/孔接种于96孔板中，96孔板最外圈用PBS液封，6×10规格中接种细胞后，至于5％CO2、37℃培养箱中过夜，细胞贴壁。
在96孔版中分别以100μM、50.0μM、25.0μM、12.5μM、6.12μM、3.06μM、1.53μM、0.766μM、0.383μM、0μM浓度的鸟氨酸衍生物和钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物进行给药，于孵箱中孵育24h后，每孔加入25μLMTT试剂，4小时候后取出，将孔内液体倒净，每孔加入100μLDMSO，于摇床上震荡15min，使甲瓒结晶完全溶解于DMSO中，然后用酶标仪测定490nm、570nm的吸光度。
本发明中实施例1和应用例1得到的鸟氨酸类络合物和钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物对HepG2细胞的三次细胞毒性检测结果见表1和图9，从图9可知：鸟氨酸衍生物对HepG2细胞的平均IC50＝5.46±0.77μM；钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物对HepG2细胞的平均IC50＝3.28±0.63μM。
表1应用例1和实施例1的3次细胞毒性检测结果统计表
本发明中应用例1得到的钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物对L02细胞和HepG2细胞的3次细胞毒性检测结果见图10和表2，从图10可知：鸟氨酸类络合物对HepG2细胞的平均IC50＝5.46±0.77μM；钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物对HepG2细胞的平均IC50＝3.28±0.63μM。
表2应用例1的3次细胞毒性检测结果统计表
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (3)

1.一种钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物，其特征在于，具有式II所示结构：
式II。
2.权利要求1所述的钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
将鸟氨酸衍生物溶于水，得到鸟氨酸衍生物溶液；
将钆贝葡胺溶液和鸟氨酸衍生物溶液混合，发生络合，得到钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物；
所述鸟氨酸衍生物具有式I所示结构：
式I。
3.权利要求1所述的钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物或权利要求2所述的制备方法制备得到的钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物在制备PAD4抑制剂中的应用。
CN202210884234.1A 2022-07-25 2022-07-25 一种鸟氨酸衍生物及其制备方法、钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物及制备和应用 Active CN115141119B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210884234.1A CN115141119B (zh) 2022-07-25 2022-07-25 一种鸟氨酸衍生物及其制备方法、钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物及制备和应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210884234.1A CN115141119B (zh) 2022-07-25 2022-07-25 一种鸟氨酸衍生物及其制备方法、钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物及制备和应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN115141119A CN115141119A (zh) 2022-10-04
CN115141119B true CN115141119B (zh) 2024-04-19

Family

ID=83414230

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202210884234.1A Active CN115141119B (zh) 2022-07-25 2022-07-25 一种鸟氨酸衍生物及其制备方法、钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物及制备和应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN115141119B (zh)

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103189063A (zh) * 2010-11-01 2013-07-03 宾夕法尼亚州研究基金会 治疗组合物和方法
CN112679535A (zh) * 2021-01-06 2021-04-20 首都医科大学 小分子pad4抑制剂及其制备方法和应用

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103189063A (zh) * 2010-11-01 2013-07-03 宾夕法尼亚州研究基金会 治疗组合物和方法
CN112679535A (zh) * 2021-01-06 2021-04-20 首都医科大学 小分子pad4抑制剂及其制备方法和应用

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Anticancer Peptidylarginine Deiminase (PAD) Inhibitors Regulate the Autophagy Flux and the Mammalian Target of Rapamycin Complex 1 Activity;Wang, Yuji 等;Journal of Biological Chemistry;第287卷(第31期);25941-2595 *
PAD2 Activity Monitored via a Fluorescent Substrate Analog;Sabulski, Mary J.等;Chemical Biology & Drug Design;第86卷(第4期);599-605 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN115141119A (zh) 2022-10-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN107235945A (zh) 一种响应谷胱甘肽杀灭肿瘤细胞的光敏感靶向抗肿瘤前药及其制备方法与应用
CN112552211B (zh) 一种益母草碱衍生物及其在制备预防或治疗缺血性脑血管疾病的药物中的应用
CN115141119B (zh) 一种鸟氨酸衍生物及其制备方法、钆贝葡胺-鸟氨酸类络合物及制备和应用
CN106632574A (zh) 一种化合物、其制备方法及用途
CN112010943B (zh) 一种对Cu2+敏感的有机小分子凝胶化合物及其制备方法与用途
CN111253411B (zh) 一种小檗碱亚油酸缀合物及其制备方法和用途
CN110240631A (zh) 手性异吲哚酮并环六肽衍生物、其制备办法及用途
CN115286687A (zh) 一种基于生物正交反应的细胞内自组装降解剂及其制备方法和应用
CN115385859B (zh) 一种可细胞内自组装的蛋白降解剂及其制备方法和应用
CN109438437A (zh) 一类含噻唑环的抗癌化合物
CN114409721B (zh) 一类含有亲电弹头的五环三萜衍生物、其制备方法和应用
CN108727387A (zh) 依鲁替尼乙酸异丙酯溶剂化合物及其制备方法
CN102531936B (zh) 盐酸赖氨酸三水合物及其制备方法
CN106496542B (zh) 谷胱甘肽敏感的两亲性聚乙二醇-羟基喜树碱偶联物
JPS6342635B2 (zh)
CN104058996A (zh) 抗丙型肝炎病毒化合物及其制备方法和应用
CN106565615A (zh) 一种磺胺多辛衍生物的制备方法
CN115477648A (zh) 一种咔啉衍生物及其制备方法和在制备抗肿瘤药物中应用
CN109553658B (zh) Ang-(1-7)的氮杂多肽类似物、制备方法及应用
CN108794510B (zh) 一种由三芳基甲基自由基与氮氧自由基组成的双自由基化合物及其盐、其制备方法和应用
CN107266407B (zh) 一种响应硝基还原酶杀灭肿瘤细胞的光敏感靶向抗肿瘤前药及其制备方法与应用
CN107365352A (zh) 一种新型含9‑腺嘌呤丙氨酸的三肽化合物及其制备方法和应用
US5061787A (en) Novel spergualin-related compounds and compositions
CN106047959B (zh) α-胰凝乳蛋白酶在合成双吲哚基-二氢吲哚-2-酮类化合物中的应用及方法
CN111362962A (zh) 去甲斑蝥素羧酸四氟苄酯及其合成方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant