CN104058996A - 抗丙型肝炎病毒化合物及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提出了一种抗丙型肝炎病毒化合物及其制备方法和应用。该化合物为式1所示化合物或式1所示化合物的立体异构体、几何异构体、互变异构体，其中，R1和R2分别独立地选自氢、甲酰基、苯甲酰基以及C1-C3直链或支链烷基，并且R1和R2不同时为氢。该化合物具有较好的脂溶性和理化性质，从而可以显著提高生物利用度和体内药效。
Description
技术领域
本发明属于药物化学和药物治疗学领域，具体而言，本发明涉及一种抗丙型肝炎病毒化合物及其制备方法和应用。
背景技术
丙型肝炎(丙肝)是由丙肝病毒(HCV)引起的，以肝脏损害为主的一组全身性传染病。HCV对人类的威胁不仅仅是因为其高患病率，还因为持续性HCV感染的潜在严重并发症。这种慢性疾病可导致肝硬化、肝癌等晚期肝病。近些年来，HCV生物学的快速进展使人们对HCV的感染和复制有了突破性认识，对于抗HCV药物的研究与开发产生了重要影响。通过干预与HCV复制有关的宿主细胞蛋白进行抗HCV的研究受到普遍关注，并取得众多突破。经研究发现，亲环素(cyclophilin，CyP)涉及HCV生命周期的各个阶段，其中亲环素A(CypA)对于HCV复制是必不可少的，主要是通过与HCV的非结构蛋白NS5A蛋白相互作用来发挥其功能。
CyP是一个保守的蛋白质家族，从低等原核生物到哺乳动物都有这类蛋白。该组蛋白的共同特征是具有肽脯氨酰顺反异构酶(Peptidyl proline cis/trans isomerase，PPIase)活性。依据相对分子质量以及亚细胞定位等特征，目前已知的人亲环素家族有CypA、CypB、CypC、CypD等16种成员。人亲环素A(hCypA)是其中最重要的，也是研究最广泛的一种，它由165个氨基酸组成，相对分子质量18000，约占细胞蛋白总量的0.1％-0.4％，主要位于胞质内。除了作为环孢菌素A的体内结合蛋白，hCypA还能结合蛋白质并加速它们的折叠、装配和转运，起分子伴侣(chaperone)的作用。CypA包含八股反平行β片层，这些β片层组成一个桶状结构，在桶的上下口各有一段8螺旋将桶的两端封闭，CypA的配体结合口袋则位于该桶状结构的侧面，主要由两个大的亚口袋组成：亚口袋A和亚口袋B。亚口袋A主要由Thr71、Gly74、Asn102、Ala103、Thr107、Gly109、Ser110和Gln11等残基组成，它们大部分为亲水性残基；亚口袋B为一深的疏水性凹槽，主要由Phe60、Met61、Phel13和Leu122等残基组成。
多项研究已经证实，CypA疏水口袋区的PPlase活性在参与HCV RNA复制和蛋白表达过程中起到了至关重要的作用。该酶能通过结合并催化脯氨酸肽键的顺反异构化来加速体内蛋白质的折叠或改变蛋白质构象，保证HCV复制复合体的正确组装及功能，从而发挥分子伴侣的功能。HCV NS5A蛋白是CypA的主要配体，CypA对NS5A中脯氨酸肽键的异构体化在HCV复制过程中起到重要作用，而CypA的PPIase抑制剂可通过破坏CypA-NS5A的相互作用达到抑制病毒复制的作用。
因此，开发能够抑制CypA的PPIase活性的小分子，可以起到靶向抗HCV复制的作用，发挥优良的抗丙肝病毒效果。专利号为ZL200910050646.X的发明专利中公开了一种取代苯甲酰脲类化合物及其制备方法和用途，该化合物如式21所示，其具有优良的CypA抑制效果，代表性化合物为1-(芴-9-基)-3-(2,6-二羟基苯甲酰)脲(如式9所示)，其为CypA强效抑制剂。然而具有式21所示通式的化合物往往溶解性较差，影响其体内生物利用度和体内药效。
因此，现有的具有抗丙肝病毒效果的化合物有待进一步研究。
发明内容
本发明旨在至少在一定程度上解决上述技术问题之一。为此，本发明的一个目的在于提出一种抗丙型肝炎病毒化合物及其制备方法和应用，该化合物具有较好的脂溶性和理化性质，从而可以显著提高生物利用度和体内药效。
在本发明的一个方面，本发明提出了一种化合物，所述化合物为式1所示化合物或式1所示化合物的立体异构体、几何异构体、互变异构体：
其中，R1和R2分别独立地选自氢、甲酰基、苯甲酰基以及C1-C3直链或支链烷基，并且R1和R2不同时为氢。由此，该化合物具有较好的脂溶性和理化性质，从而可以显著提高生物利用度和体内药效。
另外，根据本发明上述实施例的化合物还可以具有如下附加的技术特征：
在本发明的一些实施例中，所述甲酰基和苯甲酰基被C1-C10直链烷基、C1-C10支链烷基或C1-C10环状烷基取代，所述C1-C3直链或支链烷基被羟基或苄氧基取代。
在本发明的一些实施例中，所述R1和R2分别独立地选自氢、乙酰基、丙酰基、正丁酰基、异丁酰基、环丙基甲酰基、正戊酰基、异戊酰基、特戊酰基、正己酰基、环己基甲酰基、正辛酰基、苯甲酰基、羟乙基、2-苄氧基乙基。
在本发明的一些实施例中，所述式1所示化合物具有如下结构式之一：
在本发明的另一个方面，本发明提出了一种药物组合物，包含治疗有效量的一种或多种上述所述的化合物以及药学上可接受的赋形剂、载体或稀释剂。由此，可以有效预防或治疗丙型肝炎。
另外，根据本发明上述实施例的药物组合物还可以具有如下附加的技术特征：
在本发明的一些实施例中，所述药物组合物进一步包括：不同于上述所述的化合物的丙型肝炎治疗剂。
在本发明的一些实施例中，所述丙型肝炎治疗剂为选自α-干扰素、聚乙二醇干扰素、利巴韦林、特拉匹韦、博赛匹韦、司美匹韦和索非布韦的至少之一。
在本发明的一些实施例中，所述药物组合物用于下列至少之一：预防或者治疗丙型肝炎；抑制CypA肽基脯氨酰顺反异构酶；以及抑制HCV病毒的增殖和活性。
在本发明的第三个方面，本发明提出了一种药物联合，包括上述所述的化合物以及α-干扰素、聚乙二醇干扰素、利巴韦林、特拉匹韦、博赛匹韦、司美匹韦和索非布韦中的至少之一。由此，可以进一步有效预防或治疗丙型肝炎。
在本发明的第四个方面，本发明提出了一种制备上述所述的化合物的方法，包括：
1)将式2所示化合物与式3所示化合物接触，以便生成式4所示化合物；
2)将所述式4所示化合物进行水解，以便生成式5所示化合物；
3)将三光气与式6所示化合物接触，以便生成式7所示化合物；
4)将所述式5所示化合物与所述式7所示化合物接触，以便生成式8所示化合物；
5)将所述式8所示化合物进行脱苄基反应，以便生成式9所示化合物；以及
6)将所述式9所示化合物与甲酰氯或甲酸酐或苯甲酰氯接触，以便得到式1所示化合物，其中，所述甲酰氯、甲酸酐和苯甲酰氯被C1-C10直链烷基、C1-C10支链烷基或C1-C10环状烷基取代，
根据本发明实施例的制备化合物的方法可以有效制备得到上述化合物。
另外，根据本发明上述实施例的制备化合物的方法还可以具有如下附加的技术特征：
在本发明的一些实施例中，步骤1)进一步包括：1-1)将所述式2所示化合物和所述式3所示化合物溶解于二甲基亚砜中；1-2)将1-1)得到的混合物在110～130摄氏度搅拌5～10小时；1-3)将1-2)得到的反应液中加入冰水并搅拌30分钟，然后依次抽滤、水洗和干燥，以便得到白色固体；以及1-4)利用乙醇对1-3)得到的所述白色固体进行重结晶，以便获得所述式4所示化合物。
在本发明的一些实施例中，步骤2)进一步包括：2-1)将步骤1)得到的所述式4所示化合物溶于苄醇中，然后加入正四丁基溴化铵、氢氧化钾和水；2-2)将2-1)得到的混合溶液在130～150摄氏度下搅拌12～36小时；以及2-3)将2-2)得到的反应液进行减压蒸馏，并采用硅胶柱层析分离纯化剩余固体，以便获得所述式5所示化合物。
在本发明的一些实施例中，步骤3)进一步包括：3-1)将三光气溶于1，2-二氯乙烷中，并冷却至0～5摄氏度；3-2)将所述式6所示化合物溶于1，2-二氯乙烷中，并将得到的混合物与3-1)得到的反应液进行混合；3-3)对3-2)得到的反应液进行加热回流，当反应液呈无色透明状时，加入三乙胺，并继续回流45分钟；以及3-4)将3-3)得到的回流液进行减压蒸馏，以便获得所述式7所示化合物。
在本发明的一些实施例中，步骤4)进一步包括：4-1)将所述式5所示化合物与所述式7所示化合物进行混合，并加热回流10～20小时；以及4-2)将4-1)所得到的回流液进行减压蒸馏，并采用硅胶柱层析纯化残留物，以便获得所述式8所示化合物。
在本发明的一些实施例中，步骤5)进一步包括：5-1)将所述式8所示化合物与甲醇和四氢呋喃混合溶液进行混合；5-2)向5-1)所得反应液中加入Pd/C，并在30～50摄氏度下通入氢气反应4～6小时，以便析出固体混合物；以及5-3)将5-2)得到的所述固体混合物与四氢呋喃混合，并进行过滤和减压蒸馏，以便获得所述式9所示化合物。
在本发明的一些实施例中，步骤6)进一步包括：6-1)将所述式9所示化合物与无水N,N-二甲基甲酰胺和三乙胺进行混合；6-2)在0摄氏度或20摄氏度条件下向6-1)得到的混合溶液中加入甲酰氯或甲酸酐或苯甲酰氯，继续搅拌15分钟，然后将所得到混合液在40摄氏度下继续反应12～36小时，其中，所述甲酰氯、甲酸酐和苯甲酰氯被C1-C10直链烷基、C1-C10支链烷基或C1-C10环状烷基取代；以及6-3)利用二氯甲烷对6-2)得到的反应液进行萃取、水洗、干燥、浓缩，并采用硅胶柱层析纯化残留物，以便获得所述式1所示化合物。
在本发明的第五个方面，本发明还提出了一种制备化合物的方法，包括：
a)将乙二醇单苄醚与式3所示化合物接触，以便生成式10所示化合物；
b)将所述式10所示化合物进行水解，以便生成式11所示化合物；
c)将三光气与式6所示化合物接触，以便生成式7所示化合物；
d)将所述式11所示化合物与所述式7所示化合物接触，以便生成式12所示化合物；以及
e)将所述式12所示化合物进行脱苄基反应，以便生成式13所示化合物和式14所示化合物，
根据本发明实施例的制备化合物的方法可以有效制备得到上述化合物。
另外，根据本发明上述实施例的制备化合物的方法还可以具有如下附加的技术特征：
在本发明的一些实施例中，步骤a)进一步包括：a-1)将所述式3所示化合物、乙二醇单苄醚与二甲基亚砜和氢化钠混合；a-2)将a-1)得到的混合物在110～130摄氏度搅拌5～10小时；以及a-3)采用二氯甲烷对a-2)得到的反应液进行萃取，然后依次干燥、浓缩，并利用硅胶柱层析纯化残留物，以便获得式10所示化合物。
在本发明的一些实施例中，步骤b)进一步包括：b-1)将步骤a)得到的所述式10所示化合物溶于苄醇中，然后加入正四丁基溴化铵、氢氧化钾和水；b-2)将b-1)得到的混合溶液在130～150摄氏度下搅拌12～36小时；以及b-3)将b-2)得到的反应液进行减压蒸馏，并采用硅胶柱层析分离纯化剩余固体，以便获得所述式11所示化合物。
在本发明的一些实施例中，步骤c)进一步包括：c-1)将三光气溶于1，2-二氯乙烷中，并冷却至0～5摄氏度；c-2)将所述式6所示化合物溶于1，2-二氯乙烷中，并将得到的混合物与c-1)得到的反应液进行混合；c-3)对c-2)得到的反应液进行加热回流，当反应液呈无色透明状时，加入三乙胺，并继续回流45分钟；以及c-4)将c-3)得到的回流液进行减压蒸馏，以便获得所述式7所示化合物。
在本发明的一些实施例中，步骤d)进一步包括：d-1)将所述式5所示化合物与所述式7所示化合物进行混合，并加热回流10～20小时；以及d-2)将d-1)所得到的回流液进行减压蒸馏，并采用硅胶柱层析纯化残留物，以便获得所述式12所示化合物。
在本发明的一些实施例中，步骤e)进一步包括：e-1)将所述式8所示化合物与甲醇和四氢呋喃混合溶液进行混合；e-2)向e-1)所得反应液中加入Pd/C，并在30～50摄氏度下通入氢气反应48小时；以及e-3)将e-2)得到的反应液进行减压蒸馏，并利用硅胶柱层析纯化所得到的残留物，以便获得所述13所示化合物和式14所示化合物。
在本发明的第六个方面，本发明又提出了一种制备化合物的方法，包括：
A)将乙二醇单苄醚与式3所示化合物接触，以便生成式15所示化合物；
B)将所述式15所示化合物与苄醇钠接触，以便生成式16所示化合物；
C)将所述式16所示化合物进行水解，以便生成式17所示化合物；
D)将三光气与式6所示化合物接触，以便生成式7所示化合物；
E)将所述式17所示化合物与所述式7所示化合物接触，以便生成式18所示化合物；以及
F)将所述式18所示化合物进行脱苄基反应，以便生成式19所示化合物和式20所示化合物，
根据本发明实施例的制备化合物的方法可以有效制备得到上述化合物。
另外，根据本发明上述实施例的制备化合物的方法还可以具有如下附加的技术特征：
在本发明的一些实施例中，步骤A)进一步包括：A-1)将所述式3所示化合物、乙二醇单苄醚与二甲基亚砜和氢化钠混合；A-2)将A-1)得到的混合物在110～130摄氏度搅拌5～10小时；以及A-3)采用二氯甲烷对A-2)得到的反应液进行萃取，然后依次干燥、浓缩，并利用硅胶柱层析纯化残留物，以便获得式15所示化合物。
在本发明的一些实施例中，步骤B)进一步包括：B-1)将步骤A)得到的所述式15所示化合物和苄醇钠溶于二甲基亚砜中；B-2)将B-1)得到的混合溶液在110～130摄氏度下搅拌5～10小时；以及B-3)利用二氯甲烷对B-2)得到的反应液进行萃取，并进行干燥和浓缩，然后采用硅胶柱层析分离纯化剩余固体，以便获得所述式16所示化合物。
在本发明的一些实施例中，步骤C)进一步包括：C-1)将步骤B)得到的所述式16所示化合物溶于苄醇中，然后加入正四丁基溴化铵、氢氧化钾和水；C-2)将C-1)得到的混合溶液在130～150摄氏度下搅拌12～36小时；以及C-3)将C-2)得到的反应液进行减压蒸馏，并采用硅胶柱层析分离纯化剩余固体，以便获得所述式17所示化合物。
在本发明的一些实施例中，步骤D)进一步包括：D-1)将三光气溶于1，2-二氯乙烷中，并冷却至0～5摄氏度；D-2)将所述式6所示化合物溶于1，2-二氯乙烷中，并将得到的混合物与c-1)得到的反应液进行混合；D-3)对D-2)得到的反应液进行加热回流，当反应液呈无色透明状时，加入三乙胺，并继续回流45分钟；以及D-4)将D-3)得到的回流液进行减压蒸馏，以便获得所述式7所示化合物。
在本发明的一些实施例中，步骤E)进一步包括：E-1)将所述式17所示化合物与所述式7所示化合物进行混合，并加热回流10～20小时；以及E-2)将E-1)所得到的回流液进行减压蒸馏，并采用硅胶柱层析纯化残留物，以便获得所述式18所示化合物。
在本发明的一些实施例中，步骤F)进一步包括：F-1)将所述式18所示化合物与甲醇和四氢呋喃混合溶液进行混合；F-2)向F-1)所得反应液中加入Pd/C，并在30～50摄氏度下通入氢气反应48小时；以及F-3)将F-2)得到的反应液进行减压蒸馏，并利用硅胶柱层析纯化所得到的残留物，以便获得所述19所示化合物和式20所示化合物。
本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本发明的实践了解到。
具体实施方式
下面详细描述本发明的实施例。下面通过参考附图描述的实施例是示例性的，旨在用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。
在本发明的一个方面，本发明提出了一种化合物。根据本发明的实施例，该脲类化合物可以为式1所示化合物或式1所示化合物的立体异构体、几何异构体、互变异构体。根据本发明的实施例，式1所示化合物中R1和R2可以分别独立地选自氢、甲酰基、苯甲酰基以及C1-C3直链或支链烷基，并且R1和R2不同时为氢。根据本发明的具体实施例，甲酰基和苯甲酰基可以被C1-C10直链烷基、C1-C10支链烷基或C1-C10环状烷基取代，C1-C3直链或支链烷基可以被羟基或苄氧基取代。例如，R1和R2分别独立地选自氢、乙酰基、丙酰基、正丁酰基、异丁酰基、环丙基甲酰基、正戊酰基、异戊酰基、特戊酰基、正己酰基、环己基甲酰基、正辛酰基、苯甲酰基、羟乙基、2-苄氧基乙基。具体的，式1所示化合物可以为具有如下结构式之一：
发明人发现，本发明的化合物相比式21所示通式化合物具有较高的脂溶性，并且本发明脲类化合物本身对CypA的活性抑制很低或者没有抑制，当进入生物体后，水解释放出式9所示化合物而发挥对CypA的抑制作用，解决了直接使用式21所示化合物所造成的生物利用度和体内药效低等问题，从而可以有效预防或治疗丙型肝炎。
在本发明的另一个方面，本发明提出了一种药物组合物。根据本发明的实施例，该药物组合物包含治疗有效量的一种或多种上述的化合物以及药学上可接受的赋形剂、载体或稀释剂。根据本发明的实施例，该药物组合物可以进一步包括不同于上述的化合物的丙型肝炎治疗剂，根据本发明的具体实施例，丙型肝炎治疗剂的具体类型并不受特别限制，根据本发明的具体示例，丙型肝炎治疗剂可以为选自α-干扰素、聚乙二醇干扰素、利巴韦林、特拉匹韦、博赛匹韦、司美匹韦和索非布韦的至少之一。发明人发现，含有上述化合物的药物组合物与以往药物相比具有较高的脂溶性和理化性质，从而可以显著提高生物利用度和体内药效。根据本发明的实施例，该药物组合物可以具有下列至少之一作用：预防或者治疗丙型肝炎；抑制CypA肽基脯氨酰顺反异构酶；以及抑制HCV病毒的增殖和活性。
在本发明的第三个方面，本发明提出了一种药物联合。根据本发明的实施例，该药物联合包括化合物以及α-干扰素、聚乙二醇干扰素、利巴韦林、特拉匹韦、博赛匹韦、司美匹韦和索非布韦中的至少之一。由此，可以起到有效预防或治疗丙型肝炎的功效。
在本发明的第四个方面，本发明提出了一种制备上述化合物的方法。根据本发明的实施例，该方法包括：
1)将式2所示化合物与式3所示化合物发生取代反应，以便生成式4所示化合物：
根据本发明的实施例，步骤1)进一步包括：1-1)将苄醇钠(式2所示化合物)和2,6-二氟苯腈(式3所示化合物)溶解于二甲基亚砜中；1-2)将1-1)得到的混合物快速升温至110～130摄氏度搅拌5～10小时；1-3)将1-2)得到的反应液中冷却至室温并加入冰水搅拌30分钟，析出大量固体，然后依次抽滤、水洗和干燥，从而可以得到白色固体；1-4)利用乙醇对1-3)得到的白色固体进行重结晶，从而可以获得(式4所示化合物)。
2)将式4所示化合物进行水解，以便生成式5所示化合物：
根据本发明的实施例，步骤2)进一步包括：2-1)将步骤1)得到的2，6-二苄氧基苯腈(式4所示化合物)溶于苄醇中，然后加入正四丁基溴化铵、氢氧化钾和水；2-2)将2-1)得到的混合溶液在130～150摄氏度下搅拌12～36小时；2-3)将2-2)得到的反应液进行减压蒸馏除去溶剂，然后采用硅胶柱层析分离纯化剩余固体，从而可以得到粉末状白色固体2,6-二苄氧基苯甲酰胺(式5所示化合物)。
3)将三光气与式6所示化合物进行甲酰化反应，以便生成式7所示化合物：
根据本发明的实施例，步骤3)进一步包括：3-1)将三光气溶于1，2-二氯乙烷中，并采用冰浴冷却至0～5摄氏度；3-2)将芴-9-胺式(6所示化合物)溶于1，2-二氯乙烷中，并将得到的混合物缓慢滴加入3-1)得到的反应液中，然后继续冰浴冷却下搅拌10分钟；3-3)撤去冰浴，待反应液温度恢复至室温，对3-2)得到的反应液进行加热回流，当反应液呈无色透明状时，加入三乙胺，并继续回流45分钟；3-4)将3-3)得到的回流液进行减压蒸馏除去溶剂，然后向残留物中加入甲苯，并进行抽滤，从而可以得到芴-9-异氰酸酯(式7所示化合物)的甲苯溶液。
4)将式5所示化合物与式7所示化合物进行加成反应，以便生成式8所示化合物：
根据本发明的实施例，步骤4)进一步包括：4-1)将式5所示化合物与式7所示化合物的甲苯溶液进行混合，并加热回流10～20小时；4-2)将4-1)所得到的回流液进行减压蒸馏除去溶剂，并采用硅胶柱层析纯化残留物，从而可以获得1-(芴-9-基)-3-(2,6-苄氧基苯甲酰)脲(式8所示化合物)。
5)将式8所示化合物发生脱苄基反应，以便生成式9所示化合物：
根据本发明的实施例，步骤5)进一步包括：5-1)将式8所示化合物用甲醇和四氢呋喃混合溶液进行溶解；5-2)向5-1)所得反应液中加入Pd/C，并在30～50摄氏度下通入氢气反应4～6小时，以便析出固体混合物；5-3)用大量的四氢呋喃将5-2)得到的固体混合物进行溶解，并进行过滤除去Pd/C，然后进行减压蒸馏除去溶剂，从而可以获得1-(芴-9-基)-3-(2,6-羟基苯甲酰)脲(式9所示化合物)。
6)将式9所示化合物与甲酰氯或甲酸酐或苯甲酰氯机型酰化反应，以便得到式1所示化合物：
根据本发明的实施例，步骤6)进一步包括：6-1)将式9所示化合物加之无水N,N-二甲基甲酰胺中，并加入三乙胺后搅拌至全部溶解；6-2)在0摄氏度或20摄氏度条件下向6-1)得到的混合溶液中加入甲酰氯或甲酸酐或苯甲酰氯，继续搅拌15分钟，然后将所得到混合液在40摄氏度下继续反应12～36小时，其中，甲酰氯、甲酸酐和苯甲酰氯被C1-C10直链烷基、C1-C10支链烷基或C1-C10环状烷基取代；6-3)利用二氯甲烷对6-2)得到的反应液进行萃取、水洗、干燥、浓缩，并采用硅胶柱层析纯化残留物，以便获得所述式1所示化合物。
根据本发明的实施例，制备化合物的方法可以用下列方程式表示：
在本发明的第五个方面，本发明还提出了一种制备化合物的方法。根据本发明的实施例，该方法包括：
a)将乙二醇单苄醚与式3所示化合物进行取代反应，以便生成式10所示化合物：
根据本发明的实施例，步骤a)进一步包括：a-1)将乙二醇单苄醚溶于二甲基亚砜中，然后加入氢化钠，在氮气保护下室温搅拌至不再又气泡产生，然后加入2,6-二氟苯腈(式3所示化合物)；a-2)将a-1)得到的混合物快速升温至110～130摄氏度搅拌5～10小时；a-3)将a-2)得到的反应液冷却至室温，然后加入大量的水，接着采用二氯甲烷对其进行萃取，然后依次酯层合并、干燥、浓缩，并利用硅胶柱层析纯化残留物，从而可以获得白色固体2,6-二(β-苄氧基)乙氧基苯腈(式10所示化合物)。
b)将式10所示化合物进行水解，以便生成式11所示化合物：
根据本发明的实施例，步骤b)进一步包括：b-1)将步骤a)得到的式10所示化合物溶于苄醇中，然后加入正四丁基溴化铵、氢氧化钾和水；b-2)将b-1)得到的混合溶液在130～150摄氏度下搅拌12～36小时；b-3)将b-2)得到的反应液进行减压蒸馏除去溶剂，然后采用硅胶柱层析分离纯化剩余固体，从而可以得到粉末状白色固体2,6-二(β-苄氧基)乙氧基苯甲酰胺(式11所示化合物)。
c)将三光气与式6所示化合物进行甲酰化反应，以便生成式7所示化合物：
根据本发明的实施例，步骤c)进一步包括：c-1)将三光气溶于1，2-二氯乙烷中，并采用冰浴冷却至0～5摄氏度；c-2)将芴-9-胺式(6所示化合物)溶于1，2-二氯乙烷中，并将得到的混合物缓慢滴加入c-1)得到的反应液中，然后继续冰浴冷却下搅拌10分钟；c-3)撤去冰浴，待反应液温度恢复至室温，对c-2)得到的反应液进行加热回流，当反应液呈无色透明状时，加入三乙胺，并继续回流45分钟；c-4)将c-3)得到的回流液进行减压蒸馏除去溶剂，然后向残留物中加入甲苯，并进行抽滤，从而可以得到芴-9-异氰酸酯(式7所示化合物)的甲苯溶液。
d)将式11所示化合物与式7所示化合物进行加成反应，以便生成式12所示化合物：
根据本发明的实施例，步骤d)进一步包括：d-1)将式5所示化合物与式7所示化合物的甲苯溶液进行混合，并加热回流10～20小时；d-2)将d-1)所得到的回流液进行减压蒸馏除去溶剂，并采用硅胶柱层析纯化残留物，从而可以得到1-(芴-9-基)-3-(2,6-二(β-苄氧基)乙氧基苯甲酰)脲(式12所示化合物)。
e)将式12所示化合物进行脱苄基反应，以便生成式13所示化合物和式14所示化合物：
根据本发明的实施例，步骤e)进一步包括：e-1)将式8所示化合物用甲醇和四氢呋喃混合溶液进行溶解；e-2)向e-1)所得反应液中加入Pd/C，并在30～50摄氏度下通入氢气反应48小时；e-3)将e-2)得到的反应液进行减压蒸馏除去溶剂，并利用硅胶柱层析纯化所得到的残留物，以便获得1-(芴-9-基)-3-[2-羟乙基-6-(β-苄氧基)乙氧基苯甲酰]脲(13所示化合物)和1-(芴-9-基)-3-(2,6-二羟乙基苯甲酰)脲(式14所示化合物)。
根据本发明的实施例，制备化合物的方法可以用下列方程式表示：
在本发明的第六个方面，本发明又提出了一种制备化合物的方法。根据本发明的实施例，该方法包括：
A)将乙二醇单苄醚与式3所示化合物进行取代反应，以便生成式15所示化合物：
根据本发明的实施例，步骤A)进一步包括：A-1)将乙二醇单苄醚溶于二甲基亚砜中，然后加入氢化钠，在氮气保护下室温搅拌至不再又气泡产生，然后加入2,6-二氟苯腈(式3所示化合物)；A-2)将A-1)得到的混合物快速升温至110～130摄氏度搅拌5～10小时；A-3)将A-2)得到的反应液冷却至室温，然后加入大量的水，接着采用二氯甲烷对其进行萃取，然后依次酯层合并、干燥、浓缩，并利用硅胶柱层析纯化残留物，从而可以获得白色固体2-氟-6-(β-苄氧基)乙氧基苯腈(式15所示化合物)。
B)将式15所示化合物与苄醇钠进行取代反应，以便生成式16所示化合物：
根据本发明的实施例，步骤B)进一步包括：B-1)将步骤A)得到的式15所示化合物和苄醇钠溶于二甲基亚砜中；B-2)将B-1)得到的混合溶液快速升温至110～130摄氏度并搅拌5～10小时；B-3)将反应液冷却至室温，并向反应液中加入大量的水，然后利用二氯甲烷对其进行萃取，并进行酯层合并、干燥和浓缩，然后采用硅胶柱层析分离纯化剩余固体，从而可以得到白的固体2-苄氧基-6-(β-苄氧基)乙氧基苯腈(式16所示化合物)。
C)将式16所示化合物进行水解，以便生成式17所示化合物：
根据本发明的实施例，步骤C)进一步包括：C-1)将步骤B)得到的式16所示化合物溶于苄醇中，然后加入正四丁基溴化铵、氢氧化钾和水；C-2)将C-1)得到的混合溶液在130～150摄氏度下搅拌12～36小时；C-3)将C-2)得到的反应液进行减压蒸馏除去溶剂，然后采用硅胶柱层析分离纯化剩余固体，从而可以获得白色固体2-苄氧基-6-(β-苄氧基)乙氧基苯甲酰胺(式17所示化合物)。
D)将三光气与式6所示化合物接触，以便生成式7所示化合物：
根据本发明的实施例，步骤D)进一步包括：D-1)将三光气溶于1，2-二氯乙烷中，并采用冰浴冷却至0～5摄氏度；D-2)将芴-9-胺式(6所示化合物)溶于1，2-二氯乙烷中，并将得到的混合物缓慢滴加入D-1)得到的反应液中，然后继续冰浴冷却下搅拌10分钟；D-3)撤去冰浴，待反应液温度恢复至室温，对D-2)得到的反应液进行加热回流，当反应液呈无色透明状时，加入三乙胺，并继续回流45分钟；D-4)将D-3)得到的回流液进行减压蒸馏除去溶剂，然后向残留物中加入甲苯，并进行抽滤，从而可以得到芴-9-异氰酸酯(式7所示化合物)的甲苯溶液。
E)将式17所示化合物与式7所示化合物进行加成反应，以便生成式18所示化合物：
根据本发明的实施例，步骤E)进一步包括：E-1)将式17所示化合物与式7所示化合物在甲苯溶液进行混合，并加热回流10～20小时；E-2)将E-1)所得到的回流液进行减压蒸馏除去溶剂，并采用硅胶柱层析纯化残留物，从而可以获得1-(芴-9-基)-3-[2-苄氧基-6-(β-苄氧基)乙氧基苯甲酰]脲(式18所示化合物)。
F)将式18所示化合物进行脱苄基反应，以便生成式19所示化合物和式20所示化合物：
根据本发明的实施例，步骤F)进一步包括：F-1)将式18所示化合物用甲醇和四氢呋喃混合溶液进行溶解；F-2)向F-1)所得反应液中加入Pd/C，并在30～50摄氏度下通入氢气反应48小时；F-3)将F-2)得到的反应液进行减压蒸馏除去溶剂，并利用硅胶柱层析纯化所得到的残留物，以便获得1-(芴-9-基)-3-[2-羟基-6-(β-苄氧基)乙氧基苯甲酰]脲(式19所示化合物)和1-(芴-9-基)-3-(2-羟基-6-羟乙基苯甲酰)脲(式20所示化合物)。
根据本发明的实施例，制备化合物的方法可以用下列方程式表示：
下面参考具体实施例，对本发明进行描述，需要说明的是，这些实施例仅仅是描述性的，而不以任何方式限制本发明。
实施例1
2,6-二苄氧基苯腈(式4所示化合物)的合成
将0.5克苄醇钠溶于10毫升二甲基亚砜中，搅拌下加入2,6-二氟苯腈。快速升温至115℃后继续搅拌8小时。冷却至室温，将100毫升冰水倾入反应液中，继续搅拌30分钟，析出大量固体，抽滤，水洗，干燥，得白色固体2,6-二苄氧基苯腈。
1H-NMR(400Mz,DMSO-d6)δ:5.19(4H,s),6.60(2H,d),7.30-7.35(3H,m),7.38(4H,t),7.45(4H,d)。
实施例2
2,6-二苄氧基苯甲酰胺(式5所示化合物)的合成
将0.4克2,6-二苄氧基苯腈(式4所示化合物)溶于7毫升苄醇中，并加入0.6克氢氧化钾，0.6克正四丁基溴化铵以及0.1毫升水，140℃下搅拌24小时。反应毕，减压蒸除溶剂，残留物用硅胶柱层析纯化，得白色固体2,6-二苄氧基苯甲酰胺。
1H-NMR(400Mz，DMSO-d6)δ：5.15(4H,s)，6.60(2H,d)，7.18-7.48(12H,m),EI-MS m/z333.2(M+),91.1(100％)。
实施例3
1-(芴-9-基)-3-(2,6-二苄氧基苯甲酰)脲(式8所示化合物)的合成
将0.5克三光气溶于3毫升1,2-二氯乙烷中，冰浴搅拌至溶解。将0.25克9-芴胺溶于10毫升1,2-二氯乙烷中，并缓慢滴加至含有三光气的反应液中，反应液呈白色浑浊，继续冰浴搅拌0.5小时后升温至25℃反应1小时，然后加热回流至反应液呈无色透明状，将1毫升三乙胺加入至反应液中继续回流反应0.5小时。减压蒸除溶剂，加入10毫升甲苯过滤。向滤液中加入0.35克2,6-二苄氧基苯甲酰胺(式5所示化合物)，回流反应12小时。减压蒸除溶剂，残留物用硅胶柱层析纯化，得白色固体1-(芴-9-基)-3-(2,6-二苄氧基苯甲酰)脲。
1H-NMR(400Hz,DMSO-d6)δ:5.15(4H,s),6.17(1H,d),6.62(2H,d),7.24-7.37(13H,m),7.62(2H,d),7.73(2H,d),7.88(1H,s),8.72(1H,s)；EI-MS m/z540.1(M+)。
实施例4
1-(芴-9-基)-3-(2,6-二羟基苯甲酰)脲(式9所示化合物)的合成
将0.5克1-(芴-9-基)-3-(2,6-二苄氧基苯甲酰)脲(式8所示化合物)溶于30毫升四氢呋喃和30毫升甲醇的混合溶液中，加入0.1克钯碳，在通氢气的条件下40℃搅拌反应4小时，有大量絮状固体析出。反应毕，向反应液中加入1升四氢呋喃至固体完全溶解，过滤除去钯碳，减压蒸干滤液，得白色固体，用20毫升乙醚洗涤，干燥得1-(芴-9-基)-3-(2,6-二羟基苯甲酰)脲。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:11.54(s,2H),10.86(s,1H),8.69(d,J＝8.0Hz,1H),7.89(d,J＝7.5Hz,2H),7.64(d,J＝7.4Hz,2H),7.46(t,J＝7.4Hz,2H),7.37(t,J＝7.4Hz,2H),7.23(t,J＝8.2Hz,1H),6.42(d,J＝8.2Hz,2H),6.00(d,J＝8.0Hz,1H).EI-MS m/z360.1(M+)。
实施例5
1-(芴-9-基)-3-(2,6-二乙酰氧基苯甲酰)脲(化合物1的一种(I-1))的制备
将0.3克1-(芴-9-基)-3-(2,6-二羟基苯甲酰)脲(式9所示化合物)溶于5毫升N,N-二甲基甲酰胺中，加入0.46毫升三乙胺，搅拌至完全溶解，向反应液中加入0.31毫升乙酸酐，室温反应12小时。反应毕，向反应液中加入100毫升水，用二氯甲烷萃取3次，酯层合并，浓缩，水洗后加入无水硫酸钠干燥，除去干燥剂后用硅胶柱层析纯化，得白色固体化合物(1-1)。
mp191-194℃；1H NMR(400MHz,Acetone-d6))δ:8.64(s,1H),7.86(d,J＝7.5Hz,2H),7.69(d,J＝7.5Hz,2H),7.56(t,J＝8.3Hz,1H),7.46(t,J＝7.4Hz,2H),7.38(t,J＝7.2Hz,2H),7.18(t,J＝8.7Hz,2H),6.10(d,J＝8.1Hz,1H),2.24(s,6H)；ESI-MS m/z445.0[M+H]+；HRMS(ESI)m/z calcd C25H20N2O6[M+Na]+467.1219,found467.1214。
实施例6
1-(芴-9-基)-3-(2,6-二丙酰氧基苯甲酰)脲(化合物1的一种(1-2))的制备
将0.3克1-(芴-9-基)-3-(2,6-二羟基苯甲酰)脲(式9所示化合物)溶于5毫升N,N-二甲基甲酰胺中，加入0.46毫升三乙胺，搅拌至完全溶解，向反应液中加入0.31毫升丙酸酐，室温反应12小时。反应毕，向反应液中加入100毫升水，用二氯甲烷萃取3次，酯层合并，浓缩，水洗后加入无水硫酸钠干燥，除去干燥剂后用硅胶柱层析纯化，得白色固体化合物(1-2)。
mp165-167℃；1H NMR(400MHz,Acetone-d6)δ:9.89(s,1H),8.67(s,1H),7.87(d,J＝7.6Hz,2H),7.68(d,J＝7.5Hz,2H),7.58(t,J＝8.3Hz,1H),7.48(t,J＝7.3Hz,2H),7.43-7.35(m,2H),7.20(d,J＝8.3Hz,2H),6.11(d,J＝8.1Hz,1H),2.59(q,J＝7.5Hz,4H),1.18(t,J＝7.5Hz,6H)；EI-MS m/z472.2(M+)；165.1(100％)；HRMS(ESI)m/z calcd C27H24N2O6[M+Na]+495.1532,found495.1527。
实施例7
1-(芴-9-基)-3-(2,6-二正丁酰氧基苯甲酰)脲(化合物1的一种(1-3))的制备
将0.3克1-(芴-9-基)-3-(2,6-二羟基苯甲酰)脲(式9所示化合物)溶于5毫升N,N-二甲基甲酰胺中，加入0.46毫升三乙胺，搅拌至完全溶解，向反应液中加入0.31毫升正丁酸酐，室温反应12小时。反应毕，向反应液中加入100毫升水，用二氯甲烷萃取3次，酯层合并，浓缩，水洗后加入无水硫酸钠干燥，除去干燥剂后用硅胶柱层析纯化，得白色固体化合物(1-3)。
mp186-188℃；1H NMR(400MHz,Acetone-d6)δ：9.90(s,1H),8.68(s,1H),7.86(d,J＝7.5Hz,2H),7.67(d,J＝7.5Hz,2H),7.56(t,J＝8.3Hz,1H),7.47(t,J＝7.3Hz,2H),7.38(td,J＝7.5,1.0Hz,2H),7.18(d,J＝8.3Hz,2H),6.10(d,J＝8.1Hz,1H),2.53(t,J＝7.3Hz,4H),1.78-1.62(m,4H),0.96(t,J＝7.4Hz,6H)；EI-MS m/z500.2(M+)；165.1(100％)；HRMS(ESI)m/z calcd C29H28N2O6[M+Na]+523.1845,found523.1840。
实施例8
1-(芴-9-基)-3-(2,6-二异丁酰氧基苯甲酰)脲(化合物1的一种(1-4))的制备
将0.3克1-(芴-9-基)-3-(2,6-二羟基苯甲酰)脲(式9所示化合物)溶于5毫升N,N-二甲基甲酰胺中，加入0.46毫升三乙胺，搅拌至完全溶解，向反应液中加入0.31毫升正异酸酐，室温反应12小时。反应毕，向反应液中加入100毫升水，用二氯甲烷萃取3次，酯层合并，浓缩，水洗后加入无水硫酸钠干燥，除去干燥剂后用硅胶柱层析纯化，得白色固体化合物(1-4)。
mp149-158℃；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.48(d,J＝8.5Hz,1H),7.92(s,1H),7.72(d,J＝7.5Hz,2H),7.56(d,J＝7.5Hz,2H),7.49(t,J＝8.3Hz,1H),7.42(t,J＝7.5Hz,2H),7.30(t,J＝7.5Hz,2H),7.06(d,J＝8.3Hz,2H),6.14(d,J＝8.6Hz,1H),2.87-2.73(m,2H),1.28(d,J＝7.0Hz,12H)；HRMS(ESI)m/z calcd C29H28N2O6[M+Na]+523.1845,found523.1840。
实施例9
1-(芴-9-基)-3-(2,6-二环丙基甲酰氧基苯甲酰)脲(化合物1的一种(1-5))的制备
将0.3克1-(芴-9-基)-3-(2,6-二羟基苯甲酰)脲(式9所示化合物)溶于5毫升N,N-二甲基甲酰胺中，加入0.46毫升三乙胺，搅拌至完全溶解，向反应液中加入0.31毫升环丙基甲酰氯，室温反应12小时。反应毕，向反应液中加入100毫升水，用二氯甲烷萃取3次，酯层合并，浓缩，水洗后加入无水硫酸钠干燥，除去干燥剂后用硅胶柱层析纯化，得白色固体化合物(1-5)。
mp183-186℃；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.50(d,J＝8.0Hz,1H),7.92(s,1H),7.73(d,J＝7.5Hz,2H),7.65(d,J＝7.5Hz,2H),7.49(t,J＝8.2Hz,1H),7.43(t,J＝7.4Hz,2H),7.33(t,J＝7.5Hz,2H),7.08(d,J＝8.2Hz,2H),6.17(d,J＝8.7Hz,1H),1.84(td,J＝7.8,4.1Hz,2H),1.21-1.13(m,4H),1.08-0.99(m,4H)；EI-MS m/z496.2(M+)；165.1(100％)；HRMS(ESI)m/z calcd C29H24N2O6[M+Na]+519.1532,found519.1523。
实施例10
1-(芴-9-基)-3-(2,6-二正戊酰氧基苯甲酰)脲(化合物1的一种(1-6))的制备
将0.3克1-(芴-9-基)-3-(2,6-二羟基苯甲酰)脲(式9所示化合物)溶于5毫升N,N-二甲基甲酰胺中，加入0.46毫升三乙胺，搅拌至完全溶解，向反应液中加入0.31毫升正戊酸酐，室温反应12小时。反应毕，向反应液中加入100毫升水，用二氯甲烷萃取3次，酯层合并，浓缩，水洗后加入无水硫酸钠干燥，除去干燥剂后用硅胶柱层析纯化，得白色固体化合物(1-6)。
mp172-174℃；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.47(d,J＝8.3Hz,1H),8.01(s,1H),7.72(d,J＝7.5Hz,2H),7.62(d,J＝7.5Hz,2H),7.49(t,J＝8.2Hz,1H),7.42(t,J＝7.5Hz,2H),7.31(t,J＝7.4Hz,2H),7.07(d,J＝8.2Hz,2H),6.13(d,J＝8.4Hz,1H),2.55(t,J＝7.5Hz,4H),1.75-1.63(m,4H),1.38(tt,J＝11.3,5.8Hz,4H),0.91(t,J＝7.3Hz,6H)；EI-MS m/z528.2(M+)；165.1(100％)；HRMS(ESI)m/z calcd C31H32N2O6[M+Na]+551.2158,found551.2153。
实施例11
1-(芴-9-基)-3-(2,6-二异戊酰氧基苯甲酰)脲(化合物1的一种(1-7))的制备
将0.3克1-(芴-9-基)-3-(2,6-二羟基苯甲酰)脲(式9所示化合物)溶于5毫升N,N-二甲基甲酰胺中，加入0.46毫升三乙胺，搅拌至完全溶解，向反应液中加入0.31毫升异戊酸酐，室温反应12小时。反应毕，向反应液中加入100毫升水，用二氯甲烷萃取3次，酯层合并，浓缩，水洗后加入无水硫酸钠干燥，除去干燥剂后用硅胶柱层析纯化，得白色固体化合物(1-7)。
mp163-166℃；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.46(d,J＝8.1Hz,1H),7.92(s,1H),7.72(d,J＝7.4Hz,2H),7.60(d,J＝7.5Hz,2H),7.50(t,J＝8.4Hz,1H),7.42(t,J＝7.5Hz,2H),7.31(t,J＝7.4Hz,2H),7.06(d,J＝8.3Hz,2H),6.13(d,J＝8.3Hz,1H),2.43(d,J＝7.1Hz,4H),2.18(dt,J＝13.7,6.9Hz,2H),1.00(d,J＝6.6Hz,12H)；EI-MSm/z528.2(M+)；165.1(100％)；HRMS(ESI)m/z calcd C31H32N2O6[M+Na]+551.2158,found551.2153。
实施例12
1-(芴-9-基)-3-(2,6-二特戊酰氧基苯甲酰)脲(化合物1的一种(1-8))的制备
将0.3克1-(芴-9-基)-3-(2,6-二羟基苯甲酰)脲(式9所示化合物)溶于5毫升N,N-二甲基甲酰胺中，加入0.46毫升三乙胺，搅拌至完全溶解，向反应液中加入0.31毫升特戊酸酐，室温反应12小时。反应毕，向反应液中加入100毫升水，用二氯甲烷萃取3次，酯层合并，浓缩，水洗后加入无水硫酸钠干燥，除去干燥剂后用硅胶柱层析纯化，得白色固体化合物(1-8)。
mp202-205℃；1HNMR(400MHz,CDCl3)δ:8.55(d,J＝8.9Hz,1H),7.71(d,J＝7.5Hz,2H),7.50(t,J＝7.6Hz,2H),7.49-7.37(m,3H),7.28(dd,J＝14.4,6.9Hz,2H),7.04(d,J＝8.3Hz,2H),6.13(d,J＝8.7Hz,1H),1.32(s,18H)；EI-MS m/z528.2(M+)；165.1(100％)；HRMS(ESI)m/z calcd C31H32N2O6[M+Na]+551.2158,found551.2153.
实施例13
1-(芴-9-基)-3-(2,6-二正己酰氧基苯甲酰)脲(化合物1的一种(1-9))的制备
将0.3克1-(芴-9-基)-3-(2,6-二羟基苯甲酰)脲(式9所示化合物)溶于5毫升N,N-二甲基甲酰胺中，加入0.46毫升三乙胺，搅拌至完全溶解，向反应液中加入0.31毫升正己酸酐，室温反应12小时。反应毕，向反应液中加入100毫升水，用二氯甲烷萃取3次，酯层合并，浓缩，水洗后加入无水硫酸钠干燥，除去干燥剂后用硅胶柱层析纯化，得白色固体化合物(1-9)。
mp162-165℃；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.46(d,J＝8.0Hz,1H),7.93(s,1H),7.72(d,J＝7.6Hz,2H),7.62(d,J＝7.4Hz,2H),7.50(t,J＝8.2Hz,1H),7.42(t,J＝7.4Hz,2H),7.31(dd,J＝14.1,6.7Hz,2H),7.07(d,J＝8.3Hz,2H),6.14(d,J＝8.2Hz,1H),2.54(t,J＝7.6Hz,4H),1.69(dd,J＝14.6,7.2Hz,4H),1.30(dd,J＝20.4,5.5Hz,8H),0.88(t,J＝6.8Hz,6H)；EI-MS m/z556.3(M+)；165.1(100％)；HRMS(ESI)m/z calcd C33H36N2O6[M+Na]+579.2471,found579.2466.
实施例14
1-(芴-9-基)-3-(2,6-二环己基甲酰氧基苯甲酰)脲(化合物1的一种(1-10))的制备
将0.3克1-(芴-9-基)-3-(2,6-二羟基苯甲酰)脲(式9所示化合物)溶于5毫升N,N-二甲基甲酰胺中，加入0.46毫升三乙胺，搅拌至完全溶解，向反应液中加入0.31毫升环己基甲酰氯，室温反应12小时。反应毕，向反应液中加入100毫升水，用二氯甲烷萃取3次，酯层合并，浓缩，水洗后加入无水硫酸钠干燥，除去干燥剂后用硅胶柱层析纯化，得白色固体化合物(1-10)。
mp193-196℃；1H NMR(400MHz,Acetone-d6)δ:9.92(s,1H),8.73(d,J＝8.5Hz,1H),7.87(d,J＝7.5Hz,2H),7.65(d,J＝7.5Hz,2H),7.55(t,J＝8.3Hz,1H),7.47(t,J＝7.4Hz,2H),7.38(t,J＝7.4Hz,2H),7.16(d,J＝8.3Hz,2H),6.11(d,J＝8.2Hz,1H),2.59(tt,J＝10.9,3.6Hz,2H),2.00(d,J＝10.5Hz,4H),1.83-1.62(m,6H),1.51(dd,J＝24.6,13.6Hz,4H),1.44-1.24(m,6H)；HRMS(ESI)m/z calcd C35H36N2O6[M+H]+518.2652,found581.2648。
实施例15
1-(芴-9-基)-3-(26-二正辛酰氧基苯甲酰)脲(化合物1的一种(1-11))的制备
将0.3克1-(芴-9-基)-3-(2,6-二羟基苯甲酰)脲(式9所示化合物)溶于5毫升N,N-二甲基甲酰胺中，加入0.46毫升三乙胺，搅拌至完全溶解，向反应液中加入0.31毫升正辛酸酐，室温反应12小时。反应毕，向反应液中加入100毫升水，用二氯甲烷萃取3次，酯层合并，浓缩，水洗后加入无水硫酸钠干燥，除去干燥剂后用硅胶柱层析纯化，得白色固体化合物(1-11)。
mp152-153℃；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.48(d,J＝8.3Hz,1H),8.17(s,1H),7.71(t,J＝8.3Hz,2H),7.61(d,J＝7.5Hz,2H),7.51-7.45(m,1H),7.42(t,J＝7.5Hz,2H),7.31(t,J＝7.5Hz,2H),7.07(d,J＝8.3Hz,2H),6.12(d,J＝8.4Hz,1H),2.54(t,J＝7.6Hz,4H),1.77-1.63(m,4H),1.34-1.17(m,16H),0.87(t,J＝6.3Hz,6H)；HRMS(ESI)m/z calcd C37H44N2O6[M+H]+613.3278,found613.3267。
实施例16
1-(芴-9-基)-3-(2,6-二苯甲酰氧基苯甲酰)脲(化合物1的一种(1-12))的制备
将0.3克1-(芴-9-基)-3-(2,6-二羟基苯甲酰)脲(式9所示化合物)溶于5毫升N,N-二甲基甲酰胺中，加入0.46毫升三乙胺，搅拌至完全溶解，向反应液中加入0.31毫升苯甲酰氯，室温反应12小时。反应毕，向反应液中加入100毫升水，用二氯甲烷萃取3次，酯层合并，浓缩，水洗后加入无水硫酸钠干燥，除去干燥剂后用硅胶柱层析纯化，得白色固体化合物(1-12)。
mp211-213℃；1H NMR(400MHz,Acetone-d6)δ:10.33(s,1H),8.54(d,J＝7.0Hz,1H),8.18(d,J＝8.2Hz,4H),7.84-7.68(m,5H),7.62(t,J＝7.7Hz,4H),7.48(d,J＝8.3Hz,2H),7.37(t,J＝7.5Hz,2H),7.31(d,J＝7.4Hz,2H),7.21(t,J＝7.4Hz,2H),5.96(d,J＝8.3Hz,1H)；EI-MS m/z568.2(M+)；105.0(100％)；HRMS(ESI)m/z calcd C35H24N2O6[M+Na]+591.1532,found591.1523.
实施例17
1-(芴-9-基)-3-(2-羟基-6-乙酰氧基苯甲酰)脲(化合物1的一种(1-13))的制备
将0.18克1-(芴-9-基)-3-(2,6-二羟基苯甲酰)脲(式9所示化合物)溶于5毫升N,N-二甲基甲酰胺中，加入0.069毫升三乙胺，搅拌至完全溶解，在-20℃条件下边搅拌边向反应液中滴加0.042毫升乙酸酐，滴毕，继续搅拌15分钟，然后室温反应12小时，再升温至40℃反应24小时。反应毕，向反应液中加入100毫升水，用二氯甲烷萃取3次，酯层合并，浓缩，水洗后加入无水硫酸钠干燥，除去干燥剂后用硅胶柱层析纯化，得白色固体化合物(1-13)。
mp215-225℃；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:10.84(s,1H),10.45(s,1H),8.69(s,1H),7.89(d,J＝7.5Hz,2H),7.62(t,J＝7.5Hz,2H),7.46(t,J＝7.4Hz,2H),7.37(t,J＝7.4Hz,2H),7.27(t,J＝8.2Hz,1H),6.80(d,J＝8.3Hz,1H),6.63(d,J＝8.0Hz,1H),5.97(d,J＝7.9Hz,1H),2.13(s,3H)；ESI-MS m/z401.0[M-H]-；HRMS(ESI)m/z calcd C23H18N2O5[M-H]-401.1137,found401.1143.
实施例18
1-(芴-9-基)-3-(2-羟基-6-丙酰氧基苯甲酰)脲(化合物1的一种(1-14))的制备
将0.18克1-(芴-9-基)-3-(2,6-二羟基苯甲酰)脲(式9所示化合物)溶于5毫升N,N-二甲基甲酰胺中，加入0.069毫升三乙胺，搅拌至完全溶解，在-20℃条件下边搅拌边向反应液中滴加0.042毫升丙酸酐，滴毕，继续搅拌15分钟，然后室温反应12小时，再升温至40℃反应24小时。反应毕，向反应液中加入100毫升水，用二氯甲烷萃取3次，酯层合并，浓缩，水洗后加入无水硫酸钠干燥，除去干燥剂后用硅胶柱层析纯化，得白色固体化合物(1-14)。
mp206-216℃；1H NMR(400MHz,Acetone-d6)δ:9.72(s,1H),8.71(d,J＝8.1Hz,1H),7.86(d,J＝7.5Hz,2H),7.70(d,J＝7.4Hz,2H),7.46(t,J＝7.4Hz,2H),7.43-7.34(m,3H),6.89(d,J＝8.4Hz,1H),6.75(d,J＝8.1Hz,1H),6.11(d,J＝8.1Hz,1H),2.60(q,J＝7.5Hz,2H),1.23-1.12(m,3H)；ESI-MS m/z415.0[M-H]-；HRMS(ESI)m/z calcd C24H20N2O5[M-H]-415.1294,found415.1299.
实施例19
1-(芴-9-基)-3-(2-羟基-6-正丁酰氧基苯甲酰)脲(化合物1的一种(1-15))的制备
将0.18克1-(芴-9-基)-3-(2,6-二羟基苯甲酰)脲(式9所示化合物)溶于5毫升N,N-二甲基甲酰胺中，加入0.069毫升三乙胺，搅拌至完全溶解，在-20℃条件下边搅拌边向反应液中滴加0.042毫升正丁酸酐，滴毕，继续搅拌15分钟，然后室温反应12小时，再升温至40℃反应24小时。反应毕，向反应液中加入100毫升水，用二氯甲烷萃取3次，酯层合并，浓缩，水洗后加入无水硫酸钠干燥，除去干燥剂后用硅胶柱层析纯化，得白色固体化合物(1-15)。
mp204-210℃；1H NMR(400MHz,Acetone-d6)δ:8.71(s,1H),7.87(d,J＝7.5Hz,2H),7.71(d,J＝7.5Hz,2H),7.47(t,J＝7.4Hz,2H),7.44-7.36(m,3H),6.91(d,J＝7.7Hz,1H),6.75(d,J＝7.9Hz,1H),6.12(d,J＝8.2Hz,1H),2.56(t,J＝7.3Hz,2H),1.76-1.64(m,2H),0.96(t,J＝7.4Hz,3H)；ESI-MS m/z429.1[M-H]-；HRMS(ESI)m/z calcd C25H22N2O5[M-H]-429.1450,found429.1456.
实施例20
1-(芴-9-基)-3-(2-羟基-6-异丁酰氧基苯甲酰)脲(化合物1的一种(1-16))的制备
将0.18克1-(芴-9-基)-3-(2,6-二羟基苯甲酰)脲(式9所示化合物)溶于5毫升N,N-二甲基甲酰胺中，加入0.069毫升三乙胺，搅拌至完全溶解，在-20℃条件下边搅拌边向反应液中滴加0.042毫升异丁酸酐，滴毕，继续搅拌15分钟，然后室温反应12小时，再升温至40℃反应24小时。反应毕，向反应液中加入100毫升水，用二氯甲烷萃取3次，酯层合并，浓缩，水洗后加入无水硫酸钠干燥，除去干燥剂后用硅胶柱层析纯化，得白色固体化合物(1-16)。
mp195-200℃；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:11.54(s,1H),9.39(s,1H),8.49(d,J＝8.1Hz,1H),7.73(d,J＝7.5Hz,2H),7.65(d,J＝7.4Hz,2H),7.47-7.40(m,3H),7.34(t,J＝7.3Hz,2H),6.89(d,J＝9.0Hz,1H),6.65(d,J＝8.0Hz,1H),6.16(d,J＝8.4Hz,1H),3.04(dt,J＝14.0,7.1Hz,1H),1.47(d,J＝7.0Hz,6H)；ESI-MS m/z429.1[M-H]-；HRMS(ESI)m/z calcdC25H22N2O5[M-H]-429.1450,found429.1456.
实施例21
1-(芴-9-基)-3-(2-羟基-6-环丙基甲酰氧基苯甲酰)脲(化合物1的一种(1-17))的制备
将0.18克1-(芴-9-基)-3-(2,6-二羟基苯甲酰)脲(式9所示化合物)溶于5毫升N,N-二甲基甲酰胺中，加入0.069毫升三乙胺，搅拌至完全溶解，在-20℃条件下边搅拌边向反应液中滴加0.042毫升环丙基甲酰氯，滴毕，继续搅拌15分钟，然后室温反应12小时，再升温至40℃反应24小时。反应毕，向反应液中加入100毫升水，用二氯甲烷萃取3次，酯层合并，浓缩，水洗后加入无水硫酸钠干燥，除去干燥剂后用硅胶柱层析纯化，得白色固体化合物(1-17)。
mp194-199℃；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:10.85(s,1H),10.36(s,1H),8.71(s,1H),7.90(d,J＝7.6Hz,2H),7.61(d,J＝7.5Hz,2H),7.47(t,J＝7.4Hz,2H),7.38(t,J＝7.5Hz,2H),7.25(t,J＝8.2Hz,1H),6.79(d,J＝8.2Hz,1H),6.63(d,J＝8.2Hz,1H),6.00(d,J＝8.1Hz,1H),1.75(d,J＝4.8Hz,1H),0.99-0.83(m,4H)；EI-MS m/z428.1(M+)；165.1(100％)；HRMS(EI)m/z calcd C25H20N2O5(M+)428.1372,found428.1373.
实施例22
1-(芴-9-基)-3-(2-羟基-6-正戊酰氧基苯甲酰)脲(化合物1的一种(1-18))的制备
将0.18克1-(芴-9-基)-3-(2,6-二羟基苯甲酰)脲(式9所示化合物)溶于5毫升N,N-二甲基甲酰胺中，加入0.069毫升三乙胺，搅拌至完全溶解，在-20℃条件下边搅拌边向反应液中滴加0.042毫升正戊酸酐，滴毕，继续搅拌15分钟，然后室温反应12小时，再升温至40℃反应24小时。反应毕，向反应液中加入100毫升水，用二氯甲烷萃取3次，酯层合并，浓缩，水洗后加入无水硫酸钠干燥，除去干燥剂后用硅胶柱层析纯化，得白色固体化合物(1-18)。
mp193-199℃；1H NMR(400MHz,Acetone-d6)δ:8.73(d,J＝6.2Hz,1H),7.86(d,J＝7.6Hz,2H),7.70(d,J＝7.5Hz,2H),7.46(t,J＝7.6Hz,2H),7.43-7.35(m,3H),6.89(d,J＝8.3Hz,1H),6.73(d,J＝8.1Hz,1H),6.11(d,J＝8.1Hz,1H),2.57(t,J＝7.4Hz,2H),1.64(dt,J＝15.2,7.5Hz,2H),1.37(dq,J＝14.7,7.4Hz,2H),0.86(t,J＝7.4Hz,3H)；ESI-MS m/z443.0[M-H]-；HRMS(ESI)m/z calcd C26H24N2O5[M-H]-443.1607,found443.1612.
实施例23
1-(芴-9-基)-3-(2-羟基-6-异戊酰氧基苯甲酰)脲(化合物1的一种(1-19))的制备
将0.18克1-(芴-9-基)-3-(2,6-二羟基苯甲酰)脲(式9所示化合物)溶于5毫升N,N-二甲基甲酰胺中，加入0.069毫升三乙胺，搅拌至完全溶解，在-20℃条件下边搅拌边向反应液中滴加0.042毫升异戊酸酐，滴毕，继续搅拌15分钟，然后室温反应12小时，再升温至40℃反应24小时。反应毕，向反应液中加入100毫升水，用二氯甲烷萃取3次，酯层合并，浓缩，水洗后加入无水硫酸钠干燥，除去干燥剂后用硅胶柱层析纯化，得白色固体化合物(1-19)。
mp208-231℃；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:10.91(s,1H),10.37(s,1H),8.71(s,1H),7.89(d,J＝7.5Hz,2H),7.59(d,J＝7.4Hz,2H),7.46(t,J＝7.5Hz,2H),7.37(t,J＝7.2Hz,2H),7.26(t,J＝8.2Hz,1H),6.79(d,J＝8.2Hz,1H),6.61(d,J＝7.9Hz,1H),5.98(d,J＝8.0Hz,1H),2.30(d,J＝7.1Hz,2H),1.95(dt,J＝13.5,6.9Hz,1H),0.83(d,J＝6.6Hz,6H)；EI-MSm/z444.2(M+)；165.1(100％)；HRMS(EI)m/z calcd C26H24N2O5(M+)444.1685,found444.1682.
实施例24
1-(芴-9-基)-3-(2-羟基-6-特戊酰氧基苯甲酰)脲(化合物1的一种(1-20))的制备
将0.18克1-(芴-9-基)-3-(2,6-二羟基苯甲酰)脲(式9所示化合物)溶于5毫升N,N-二甲基甲酰胺中，加入0.069毫升三乙胺，搅拌至完全溶解，在-20℃条件下边搅拌边向反应液中滴加0.042毫升特戊酸酐，滴毕，继续搅拌15分钟，然后室温反应12小时，再升温至40℃反应24小时。反应毕，向反应液中加入100毫升水，用二氯甲烷萃取3次，酯层合并，浓缩，水洗后加入无水硫酸钠干燥，除去干燥剂后用硅胶柱层析纯化，得白色固体化合物(1-20)。
mp187-189℃；1H NMR(400MHz,Acetone-d6)δ:9.71(s,1H),8.76(s,1H),7.86(d,J＝7.5Hz,2H),7.68(d,J＝7.4Hz,2H),7.46(t,J＝7.4Hz,2H),7.37(dd,J＝13.2,7.3Hz,3H),6.87(d,J＝8.2Hz,1H),6.69(d,J＝8.1Hz,1H),6.11(d,J＝7.9Hz,1H),1.31(s,9H)；ESI-MSm/z443.0[M-H]-；HRMS(ESI)m/z calcd C26H24N2O5[M-H]-443.1607,found443.1612.
实施例25
1-(芴-9-基)-3-(2-羟基-6-正己酰氧基苯甲酰)脲(化合物1的一种(1-21))的制备
将0.18克1-(芴-9-基)-3-(2,6-二羟基苯甲酰)脲(式9所示化合物)溶于5毫升N,N-二甲基甲酰胺中，加入0.069毫升三乙胺，搅拌至完全溶解，在-20℃条件下边搅拌边向反应液中滴加0.042毫升正己酸酐，滴毕，继续搅拌15分钟，然后室温反应12小时，再升温至40℃反应24小时。反应毕，向反应液中加入100毫升水，用二氯甲烷萃取3次，酯层合并，浓缩，水洗后加入无水硫酸钠干燥，除去干燥剂后用硅胶柱层析纯化，得白色固体化合物(1-21)。
mp200-222℃；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:11.09(s,1H),10.42(s,1H),8.73(s,1H),7.89(d,J＝7.5Hz,2H),7.60(d,J＝7.4Hz,2H),7.46(t,J＝7.3Hz,2H),7.36(t,J＝7.3Hz,2H),7.25(t,J＝8.2Hz,1H),6.77(d,J＝8.3Hz,1H),6.57(d,J＝8.0Hz,1H),5.98(d,J＝7.8Hz,1H),2.39(t,J＝7.4Hz,2H),1.48(dd,J＝14.6,7.3Hz,2H),1.22-1.03(m,4H),0.72(t,J＝7.0Hz,3H).；ESI-MS m/z457.0[M-H]-；HRMS(ESI)m/z calcd C27H26N2O5[M-H]-457.1763,found457.1769.
实施例26
1-(芴-9-基)-3-(2-羟基-6-环己基甲酰氧基苯甲酰)脲(化合物1的一种(1-22))的制备
将0.18克1-(芴-9-基)-3-(2,6-二羟基苯甲酰)脲(式9所示化合物)溶于5毫升N,N-二甲基甲酰胺中，加入0.069毫升三乙胺，搅拌至完全溶解，在-20℃条件下边搅拌边向反应液中滴加0.042毫升环己基甲酰氯，滴毕，继续搅拌15分钟，然后室温反应12小时，再升温至40℃反应24小时。反应毕，向反应液中加入100毫升水，用二氯甲烷萃取3次，酯层合并，浓缩，水洗后加入无水硫酸钠干燥，除去干燥剂后用硅胶柱层析纯化，得白色固体化合物(1-22)。
mp190-199℃；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:10.92(s,1H),10.33(s,1H),8.74(s,1H),7.89(d,J＝7.5Hz,2H),7.57(d,J＝7.4Hz,2H),7.46(t,J＝7.4Hz,2H),7.36(t,J＝7.4Hz,2H),7.25(t,J＝8.2Hz,1H),6.79(d,J＝8.3Hz,1H),6.60(d,J＝8.1Hz,1H),5.99(d,J＝8.0Hz,1H),2.46(dd,J＝8.9,5.4Hz,1H),1.83(d,J＝12.3Hz,2H),1.59(d,J＝11.1Hz,3H),1.40-1.02(m,5H)；EI-MS m/z470.2(M+)；180.1(100％)；HRMS(EI)m/z calcd C28H26N2O5(M+)470.1842,found470.1844.
实施例27
1-(芴-9-基)-3-(2-羟基-6-正辛酰氧基苯甲酰)脲(化合物1的一种(1-23))的制备
将0.18克1-(芴-9-基)-3-(2,6-二羟基苯甲酰)脲(式9所示化合物)溶于5毫升N,N-二甲基甲酰胺中，加入0.069毫升三乙胺，搅拌至完全溶解，在-20℃条件下边搅拌边向反应液中滴加0.042毫升正辛酸酐，滴毕，继续搅拌15分钟，然后室温反应12小时，再升温至40℃反应24小时。反应毕，向反应液中加入100毫升水，用二氯甲烷萃取3次，酯层合并，浓缩，水洗后加入无水硫酸钠干燥，除去干燥剂后用硅胶柱层析纯化，得白色固体化合物(1-23)。
mp184-189℃；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:11.56(s,1H),9.45(s,1H),8.48(d,J＝8.4Hz,1H),7.73(d,J＝7.6Hz,2H),7.65(d,J＝7.5Hz,2H),7.43(dd,J＝12.1,4.8Hz,3H),7.34(t,J＝7.5Hz,2H),6.89(d,J＝8.4Hz,1H),6.69(d,J＝8.1Hz,1H),6.16(d,J＝8.4Hz,1H),2.81(t,J＝7.4Hz,2H),1.85(dt,J＝15.1,7.4Hz,2H),1.53-1.28(m,8H),0.91(t,J＝6.8Hz,3H)；EI-MS m/z486.2(M+)；165.1(100％)；HRMS(EI)m/z calcd C29H30N2O5(M+)486.2155,found486.2157.
实施例28
1-(芴-9-基)-3-(2-羟基-6-苯甲酰氧基苯甲酰)脲(化合物1的一种(1-24))的制备
将0.18克1-(芴-9-基)-3-(2,6-二羟基苯甲酰)脲(式9所示化合物)溶于5毫升N,N-二甲基甲酰胺中，加入0.069毫升三乙胺，搅拌至完全溶解，在-20℃条件下边搅拌边向反应液中滴加0.042毫升苯甲酰氯，滴毕，继续搅拌15分钟，然后室温反应12小时，再升温至40℃反应24小时。反应毕，向反应液中加入100毫升水，用二氯甲烷萃取3次，酯层合并，浓缩，水洗后加入无水硫酸钠干燥，除去干燥剂后用硅胶柱层析纯化，得白色固体化合物(1-24)。
mp211-214℃；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:11.07(s,1H),10.45(s,1H),8.61(s,1H),8.01(d,J＝7.4Hz,2H),7.85(t,J＝7.7Hz,2H),7.78(t,J＝7.4Hz,1H),7.58(t,J＝7.7Hz,2H),7.40(dd,J＝14.5,7.0Hz,2H),7.38-7.30(m,3H),7.26(t,J＝7.4Hz,2H),6.84(t,J＝8.9Hz,2H),5.91(d,J＝8.2Hz,1H)；ESI-MS m/z463.0[M-H]-；HRMS(ESI)m/z calcd C28H20N2O5[M-H]-463.1294,found463.1299.
实施例29
2,6-二(β-苄氧基)乙氧基苯腈(式10所示化合物)的制备
将1.698克乙二醇单苄醚(1.6毫升)溶于5毫升二甲基亚砜中，加入0.446克60％氢化钠，氮气保护下室温搅拌至不再有气泡生产，向反应液中加入0.47克2,6-二氟苯腈，快速升温至130℃后搅拌10小时。冷却至室温，向反应液中加入大量的水，用二氯甲烷萃取三次，酯层合并，干燥，浓缩，残留物用硅胶柱层析纯化，得白色固体2,6-二(β-苄氧基)乙氧基苯腈。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:7.49-7.21(m,12H),6.54(d,J＝8.5Hz,1H),4.67(s,2H),4.56(s,2H),4.23(t,J＝4.8Hz,2H),3.88(t,J＝4.8Hz,2H),3.81-3.71(m,2H),3.66-3.53(m,2H).
实施例30
2,6-二(β-苄氧基)乙氧基苯甲酰胺(式11所示化合物)的制备
将1.62克2,6-二(β-苄氧基)乙氧基苯腈(式10所示化合物)溶于10毫升苄醇中，加入1克正四丁基溴化铵、4克氢氧化钾和2毫升水，140℃下搅拌24h。冷却至室温，向反应液中加入大量的水，用二氯甲烷萃取三次，酯层合并，干燥，浓缩，残留物用硅胶柱层析纯化，得白色固体2,6-二(β-苄氧基)乙氧基苯甲酰胺。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:7.36-7.19(m,11H),6.57(d,J＝8.4Hz,2H),6.07(s,1H),5.70(s,1H),4.59(s,4H),4.18(t,J＝4.9Hz,4H),3.82(t,J＝4.9Hz,4H)；EI-MS m/z422.2(M+).
实施例31
2-氟-6-(β-苄氧基)乙氧基苯腈(式15所示化合物)的制备
将0.96克乙二醇单苄醚(0.9毫升)溶于5毫升二甲基亚砜中，加入0.156克60％氢化钠，氮气保护下室温搅拌至不再有气泡生产，向反应液中加入0.47克2,6-二氟苯腈，快速升温至130℃后搅拌10小时。冷却至室温，向反应液中加入大量的水，用二氯甲烷萃取三次，酯层合并，干燥，浓缩，残留物用硅胶柱层析纯化，得白色固体2-氟-6-(β-苄氧基)乙氧基苯腈。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:7.54-7.44(m,1H),7.44-7.25(m,5H),6.80(dt,J＝8.4,3.8Hz,2H),4.68(s,2H),4.33-4.25(m,2H),3.94-3.87(m,2H).
实施例32
2-苄氧基-6-(β-苄氧基)乙氧基苯腈(式16所示化合物)的制备
将0.56克2-氟-6-(β-苄氧基)乙氧基苯腈(式15所示化合物)和0.48克苄醇钠溶于10毫升二甲基亚砜中，快速升温至130℃后搅拌10小时。冷却至室温，向反应液中加入大量的水，用二氯甲烷萃取三次，酯层合并，干燥，浓缩，残留物用硅胶柱层析纯化，得白色固体2-苄氧基-6-(β-苄氧基)乙氧基苯腈。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:7.42-7.15(m,11H),6.49(t,J＝8.3Hz,2H),5.12(s,2H),4.59(s,2H),4.16(t,J＝4.8Hz,2H),3.85-3.78(m,2H).
实施例33
2-苄氧基-6-(β-苄氧基)乙氧基苯甲酰胺(式17所示化合物)的制备
将0.36克2-苄氧基-6-(β-苄氧基)乙氧基苯腈(式16所示化合物)溶于3毫升苄醇中，加入0.25克正四丁基溴化铵、1克氢氧化钾和0.25毫升水，140℃下搅拌24h。冷却至室温，向反应液中加入大量的水，用二氯甲烷萃取三次，酯层合并，干燥，浓缩，残留物用硅胶柱层析纯化，得白色固体2-苄氧基-6-(β-苄氧基)乙氧基苯甲酰胺。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:7.44(d,J＝7.3Hz,2H),7.39-7.27(m,8H),7.23(t,J＝8.4Hz,1H),6.61(dd,J＝14.2,8.4Hz,2H),5.14(s,2H),4.61(s,2H),4.21(t,J＝4.8Hz,2H),3.84(t,J＝4.8Hz,2H)；EI-MS m/z377.2(M+).
实施例34
1-(芴-9-基)-3-[2,6-二(β-苄氧基)乙氧基苯甲酰]脲(化合物1的一种(1-25)的制备
将0.5克三光气溶于3毫升1,2-二氯乙烷中，冰浴搅拌至溶解。将0.25克9-芴胺溶于10毫升1,2-二氯乙烷中，并缓慢滴加至含有三光气的反应液中，反应液呈白色浑浊，继续冰浴搅拌0.5小时后升温至25℃反应1小时，然后加热回流至反应液呈无色透明状，将1毫升三乙胺加入至反应液中继续回流反应0.5小时。减压蒸除溶剂，加入10毫升甲苯过滤。向滤液中加入0.35克2,6-二(β-苄氧基)乙氧基苯甲酰胺(式11所示化合物)，回流反应12小时。减压蒸除溶剂，残留物用硅胶柱层析纯化，得白色固体1-(芴-9-基)-3-[2,6-二(β-苄氧基)乙氧基苯甲酰]脲。
mp143-145℃；1H NMR(400MHz,Acetone-d6)δ:9.77(s,1H),8.94(d,J＝6.8Hz,1H),7.82(d,J＝7.6Hz,2H),7.58(d,J＝7.5Hz,2H),7.41(t,J＝7.5Hz,2H),7.37-7.19(m,13H),6.74(d,J＝8.4Hz,2H),6.10(d,J＝8.1Hz,1H),4.62(s,4H),4.28-4.19(m,4H),3.87-3.77(m,4H)；EI-MS m/z628.2(M+)；91.0(100％)；HRMS(EI)m/z calcd C39H36N2O6(M+)628.2573,found628.2571.
实施例35
1-(芴-9-基)-3-[2-苄氧基-6-(β-苄氧基)乙氧基苯甲酰]脲(式18所示化合物)的制备
将0.5克三光气溶于3毫升1,2-二氯乙烷中，冰浴搅拌至溶解。将0.25克9-芴胺溶于10毫升1,2-二氯乙烷中，并缓慢滴加至含有三光气的反应液中，反应液呈白色浑浊，继续冰浴搅拌0.5小时后升温至25℃反应1小时，然后加热回流至反应液呈无色透明状，将1毫升三乙胺加入至反应液中继续回流反应0.5小时。减压蒸除溶剂，加入10毫升甲苯过滤。向滤液中加入0.35克2-苄氧基-6-(β-苄氧基)乙氧基苯甲酰胺(式17所示化合物)，回流反应12小时。减压蒸除溶剂，残留物用硅胶柱层析纯化，得白色固体1-(芴-9-基)-3-[2-苄氧基-6-(β-苄氧基)乙氧基苯甲酰]脲。
EI-MS m/z584.2(M+).
实施例36
1-(芴-9-基)-3-[2-(β-羟基)乙氧基-6-(β-苄氧基)乙氧基苯甲酰]脲(1-26)及1-(芴-9-基)-3-[2,6-二(β-羟基)乙氧基苯甲酰]脲(1-27)的制备
将0.5克1-(芴-9-基)-3-[2,6-二(β-苄氧基)乙氧基苯甲酰]脲(1-25)溶于30毫升四氢呋喃和30毫升甲醇的混合溶液中，加入0.2克钯碳，在通氢气的条件下40℃搅拌反应2天。反应毕，减压蒸干溶液，用硅胶柱层析纯化分别得到白色固体1-(芴-9-基)-3-[2-(β-羟基)乙氧基-6-(β-苄氧基)乙氧基苯甲酰]脲(1-26)，
mp161-163℃；1H NMR(400MHz,Acetone-d6)δ:9.77(s,1H),8.88(d,J＝7.5Hz,1H),7.84(d,J＝7.6Hz,2H),7.66(dd,J＝7.5,0.7Hz,2H),7.44(t,J＝7.5Hz,2H),7.38-7.17(m,8H),6.74(dd,J＝8.3,6.0Hz,2H),6.11(d,J＝8.0Hz,1H),4.61(s,2H),4.28-4.21(m,2H),4.19-4.11(m,2H),3.93-3.86(m,1H),3.81(ddd,J＝19.2,10.6,7.0Hz,4H)；EI-MS m/z538.2(M+)；180.1(100％)；HRMS(EI)m/z calcd C32H30N2O6(M+)538.2104,found538.2105.
及1-(芴-9-基)-3-[2,6-二(β-羟基)乙氧基苯甲酰]脲(1-27)。
mp158-163℃；1H NMR(400MHz,Acetone-d6)δ:9.82(s,1H),8.83(d,J＝7.7Hz,1H),7.87(d,J＝7.5Hz,2H),7.74(d,J＝7.5Hz,2H),7.47(t,J＝7.3Hz,2H),7.43-7.32(m,3H),6.77(d,J＝8.4Hz,2H),6.12(d,J＝8.0Hz,1H),4.21-4.15(m,4H),3.96(t,J＝5.9Hz,2H),3.82(dd,J＝10.2,5.4Hz,4H)；EI-MS m/z448.2(M+)；180.1(100％)；HRMS(EI)m/z calcdC25H24N2O6(M+)448.1634,found448.1635.
实施例37
1-(芴-9-基)-3-[2-羟基-6-(β-苄氧基)乙氧基苯甲酰]脲(1-28)及和1-(芴-9-基)-3-[2-羟基-6-(β-羟基)乙氧基苯甲酰]脲(1-29)的制备
将0.5克1-(芴-9-基)-3-[2-苄氧基-6-(β-苄氧基)乙氧基苯甲酰]脲(式18所示化合物)溶于30毫升四氢呋喃和30毫升甲醇的混合溶液中，加入0.2克钯碳，在通氢气的条件下40℃搅拌反应2天，。反应毕，减压蒸干溶液，用硅胶柱层析纯化分别得到白色固体1-(芴-9-基)-3-[2-羟基-6-(β-苄氧基)乙氧基苯甲酰]脲(1-28)，
mp153-155℃；1H NMR(400MHz,Acetone-d6)δ:12.23(s,1H),10.78(s,1H),8.64(d,J＝7.6Hz,1H),7.86(d,J＝7.5Hz,2H),7.70(d,J＝7.5Hz,2H),7.53-7.41(m,5H),7.41-7.28(m,5H),6.69(d,J＝8.4Hz,1H),6.58(d,J＝8.4Hz,1H),6.13(d,J＝8.1Hz,1H),4.79(s,2H),4.52-4.44(m,2H),4.07-3.99(m,2H)；ESI-MS m/z493.1[M-H]-；HRMS(ESI)m/z calcdC30H26N2O5[M-H]-493.1763,found493.1769.
及1-(芴-9-基)-3-[2-羟基-6-(β-羟基)乙氧基苯甲酰]脲(1-29)。
mp208-213℃；1H NMR(400MHz,Acetone-d6)δ:12.16(s,1H),10.84(s,1H),8.62(d,J＝7.8Hz,1H),7.86(d,J＝7.5Hz,2H),7.71(d,J＝7.4Hz,2H),7.42(ddd,J＝30.3,12.8,7.3Hz,5H),6.71(d,J＝8.3Hz,1H),6.58(d,J＝8.4Hz,1H),6.10(d,J＝8.1Hz,1H),4.43-4.36(m,2H),4.29(t,J＝5.0Hz,1H),4.09(dd,J＝9.4,4.8Hz,2H)；ESI-MS m/z403.0[M-H]-；HRMS(ESI)m/z calcd C23H20N2O5[M-H]-403.1294,found403.1299.
评价：
1、分别对实施例所得的1-1～1-29化合物的对CypA肽基脯氨酰顺反异构酶百分抑制活性、半数有效抑制浓度(IC50)及HCV病毒半数有效抑制浓度(EC50)进行测定；
2、对实施例所得到的1-23化合物在体外生理条件下稳定性、大鼠体内代谢进行测试；
3、评价指标和测试方法：
A、1-1～1-29化合物的对CypA肽基脯氨酰顺反异构酶百分抑制活性及半数有效抑制浓度(IC50)进行检测：
1)CypA蛋白表达和的纯化
将构建好的质粒PET15b-CypA转入大肠杆菌BL21中得到表达工程菌，将工程菌培养于含100μg/ml氨苄青霉素的10ml LB培养基中培养过夜(蛋白胨10g/L,酵母提取物5g/L，氯化钠10g/L)。然后按1:100转接入1L含氨苄青霉素的新鲜LB培养基中，于37℃下220转/分培养。当OD600达到约0.8时，加入IPTG(异丙基β-D硫代半乳糖苷，1M溶液)至终浓度0.5mM，同时将温度降到25℃培养5小时进行蛋白的诱导表达。4000转/分离心30分钟收集菌体，收集好后放于-80℃超低温冰箱保存过夜。将菌体用20ml的结合缓冲液(20mMTris-Cl，0.5M氯化钠，5M咪唑，pH8.0)悬起，将悬浮液冰浴上超声波破碎(300W,工作30分钟，一次5秒，中间间隔10秒)。破碎后得到的细胞匀将在4℃以10000转/分离心30分钟，保留上清液。之后该蛋白粗体液注入预先用结合缓冲液和10倍柱体积的清洗缓冲液(20mM Tris-Cl，0.5M氯化钠，60M咪唑，pH8.0)冲洗树脂，除去与树脂有非特异性吸附的杂蛋白，最后用洗脱缓冲液(20mM Tris-Cl，0.5M氯化钠，100M咪唑，pH8.0)10ml洗脱树脂，收集洗脱的hCypA。用SDS-PAGE检测蛋白的分子量和纯度。透析好的蛋白可进行酶活测定。
2)1-1～1-29化合物对CypA肽基脯氨酰顺反异构酶百分抑制活性进行检测：
依据标准糜蛋白偶联实验(Biochemistry1991,30(25):6127-6134)，测定目标物的肽基脯氨酸顺反异构酶(PPIase)活性。整个实验在恒温4℃下进行，酶作用底物为N-Suc-Ala-Ala-cis-Pro-Phe-pNA，用含有400mM LiCl的四氢呋喃溶解成3.8mM的母液。α-糜蛋白溶解到1mM的HCl溶液中，配成3mg/mL的母液。首先向519μL反应缓冲液(20mMTris-HCl，50mM NaCl，pH7.8)中加入30μL hCypA蛋白母液(终浓度10μg/mL)和待测化合物的DMSO溶液(终浓度10μM)，在冰上预冷，将它们加到石英杯中，再加入15μL糜蛋白酶，最后加入12μL底物起始反应。4℃下380nM处通过U-2010分光光度计每个0.1秒检测光吸收强度的变化并收集数据，1分钟之后，反应结束。每个反应重复3次。利用反应前6秒的线性增长的斜率(K)来表示CypA酶的活力大小。用下列公式得出待测化合物在10μM下百分抑制率，计算公式为：
(阳性对照组K值-实验组K值)/(阳性对照组K值-阴性对照组K值)×100％
其中，阳性对照组K值为加入CsA所测值，阴性对照组K值为等量的DMSO所测值。
3)1-1～1-29化合物对CypA肽基脯氨酰顺反异构酶百分抑制活性检测结果：
表1 1-1～1-29化合物对CypA肽基脯氨酰顺反异构酶百分抑制活性检测结果
4)1-1～1-29化合物对CypA半数有效抑制浓度(IC50)的测定
选取10μM抑制率在40％以上的化合物测IC50，选择合适的化合物浓度梯度，实验方法和体系如前述。根据化合物在不同浓度下对CypA酶活的反应速率K，计算化合物在不同浓度下对CypA酶活的抑制率，使用Sigmoidal公式用origin软件进行拟合得到化合物的IC50值，结果见表2。
表2 1-1～1-29化合物对CypA半数有效抑制浓度(IC50)的测定结果
由表2可以看出，本发明具有结构通式1的化合物在体外对CypA的酶活抑制IC50值相较于其原药分子(式9所示化合物)(IC500.032μM)有大幅的升高，表明本发明的化合物在体外对CypA的酶活抑制作用较其原药分子有大幅度降低(至少降低62倍以上)，说明本发明实施例的化合物对CypA没有抑制活性或者抑制活性很低，由此可以认为本发明实施例的化合物为CypA抑制剂前药分子。
B、1-1～1-29化合物对HCV病毒半数有效抑制浓度的测定
1)带有luciferase报告基因的HCV病毒复制子细胞模型以及活病毒株JFH-1模型构建
HCV病毒复制子细胞模型中的H77-1a，JFH1-2a，Con1-1b的亚复制子基因组来自于美国Apath LLC，该质粒通过体外转录的方式获得RNA(ambion的T7MEGAscript Kit)，然后通过电转的方式，将基因组转入Huh7.5.1细胞系，用含有G418的完全培养基筛选，在两周后含有HCV病毒亚基因组的细胞能够被筛选出来，这些细胞系传代培养以备进一步实验。
细胞培养的带有Luciferase报告基因的HCV活病毒株(JFH-1病毒株，2a型)为本实验室在JFH-1病毒原始株的基础上改造而来，在JFH-1病毒基因组的NS5A蛋白的399位点上插入了一个Renilla luciferase报告基因，JFH-1病毒原始株来自于美国Apath LLC，Luciferase报告基因的表达可以代表病毒JFH-1的增殖水平。
2)实验方法
以环孢素A(CsA)和CypA抑制剂原型抑制剂(式9所示化合物)为阳性对照药，分别考查不同浓度本发明化合物、CsA以及II-1的体外对抗丙肝病毒(HCV)增殖的抑制率，具体方法如下：
1、将环孢素A(CsA)、CypA抑制剂原型抑制剂II-1与本发明化合物用纯的DMSO配制成10mg/mL的储液放于-30℃保存；
2、检测药物的体外对抗丙肝病毒(HCV)增殖的抑制率：
在HCV亚复制子细胞系上的药效检测
第一天：
在96孔板内，将H77-1a，JFH1-2a，Con1-1b的亚复制子细胞系按照每孔1.5×104细胞铺板，培养基为含有10％FBS的完全培养基(含有1μM的非必需氨基酸与10mM的Hepes)，体积为100μL，37℃细胞培养箱内过夜培养。
第二天：
首先用含有0.5％DMSO，10％FBS的完全培养基将药物按照4倍梯度浓度稀释，初始药物浓度为20μg/mL，共六个梯度，药物浓度分别为20μg/mL，5μg/mL，1.25μg/mL，0.31μg/mL，0.08μg/mL，0.02μg/mL。将96孔板内的培养基吸出，然后将这种带有药物培养基按照每孔100μL的量与细胞孵育37℃培养48小时，对照细胞加入0.5％DMSO的完全培养基。
第四天：
在药物孵育48小时后，吸取上清，加入含有luciferase化学底物的裂解液，按照Rellia-Glo Luciferase Assay System说明书，检测luciferase读值。
在HCV活病毒JFH-1感染系统上的药效检测：
第一天：
在96孔板内，将Huh7.5.1按照每孔1.5×104细胞铺板，培养基为含有10％FBS的完全培养基(含有1μM的非必需氨基酸与10mM的Hepes)，体积为100μL，37℃细胞培养箱内过夜培养。
第二天：
首先用含有0.5％DMSO，10％FBS的完全培养基将带有Luciferase报告基因的JFH-1病毒按照1:10稀释(病毒滴度控制在感染Huh7.5.1之后48小时的检测读值在每孔5*104Rluc～1*105Rluc)，然后将药物用这种含有JFH-1病毒的培养基按照4倍梯度浓度稀释，初始药物浓度为20μg/mL，共六个梯度，药物浓度分别为20μg/mL，5μg/mL，1.25μg/mL，0.31μg/mL，0.08μg/mL，0.02μg/ml。将96孔板内的培养基吸出，然后将这种带有药物与病毒的培养基按照每孔100μL的量与Huh7.5.1细胞孵育37℃培养48小时，对照细胞加入0.5％DMSO的完全培养基。
第四天：
在药物与病毒共孵育48小时后，吸取病毒上清，加入含有luciferase化学底物的裂解液，按照Rellia-Glo Luciferase Assay System说明书，检测luciferase读值。
3、将药物在不同浓度处理含有HCV病毒基因组的Huh7.5.1细胞的luciferase读值输入Graphpad Prism5软件，按照非线性回归方法，计算每个药物的EC50读值，具体结果见表3。
表3 1-1～1-29化合物对HCV抑制EC50值(单位：μg/mL)
由表3可以看出，本发明具有结构通式1的化合物在体外对三种HCV病毒亚复制子和一种活病毒的增殖都具有很强的抑制效果。其中，大部分本发明化合物的抗HCV效果都强于阳性对照药CsA。表明，对式9所示化合物进行前药化修饰后所得的本发明化合物抗HCV病毒亚复制子活性与原型化合物(式9)基本相当，但抗HCV活病毒活性有显著提高，化合物1-23相比原型化合物(式9)提高了近3倍。由此说明本发明实施例的化合物相比原型化合物(式9)的理化性质有所改善，增加了透过细胞膜的效果。
C、1-23化合物在体外生理条件下稳定性测定
取1毫克1-23化合物完全溶于6毫升DMSO中，冰浴下向该1-23化合物的DMSO溶液中加入6毫升PBS缓冲液(0.048g NaCl，0.0012g KCl，0.022g Na2HPO4·12H2O，0.0014gKH2HPO4，pH7.4)。将该溶液置于水浴恒温震荡器中于37.5℃下孵育，震荡器转速为170-180转/分。0-4小时之间每0.5小时取样一次，4-12小时之间每1小时取样一次，每次取样80微升，再从中取15微升进行液相分析，液相流动相条件：
色谱柱：BECKMAN ULTRASPHERE C18ODS(dp5μ4.6mm×25cm)；
流动相：甲醇:水＝70:30；检测波长：254nm
流速：0.5ml/min；进样量：15μL；分析时间：30min；柱温：室温。
以0h I-23在PBS溶液的含量作为参照标准，用下列公式计算得出各时间点I-23在PBS溶液中的相对百分含量，计算公式为：
(各时间1-23的液相峰面积值)/(0h1-23的液相峰面积值)×100％。
表4 1-23化合物在生理条件下稳定性测试结果
由表4可以看出，在模拟的生理条件下，经过12小时的孵育，排除实验误差的影响，化合物1-23仍可以保持着近乎百分之百的含量，说明化合物1-23具有足够的稳定性，由此可以认为是一类理想的前药分子。
D、1-23化合物在大鼠体内代谢检测
1)大鼠试验
对3只由中山大学动物中心提供(Certificate No.SCXK20110029)的雄性SD大鼠(200±20g)进行静脉注射给药，给药量为2mg/kg的1-23化合物。
大鼠给药前，称取4mg1-23溶于100μl二甲基乙酰胺，加入900μl蓖麻油混匀，用生理盐水稀释并定容至10ml，配成浓度为0.4mg/ml的I-23溶液，给药体积为5ml/kg。
大鼠给药后，按不同时间点(0、5、15、30、45min、1、2、3、5、8、12及24h)，在乙醚轻度麻醉下从眼静脉窦采血，采血量为0.2ml左右。血样收集于事先加入肝素的试管中，离心制备血浆，并按50μL分装成两份，于-20℃冻存直至分析。室温解冻后，加入200μL的MeOH(含有内标化合物(式22所示)，浓度33.28ng/ml)沉淀，涡旋5min，14800rpm离心10min后吸取上清液50μL，用于LC/MS/MS分析。检测方法如下：
色谱柱：Thermo BDS HypersilTMC18(2.1×50mm,5μm)；
流动相：A：水(含0.04‰甲酸)；B：甲醇；
流速：0.4ml/min；进样量：5μL；分析时间：5min；柱温：室温。
梯度洗脱见表5
表5 梯度洗脱条件
内标化合物结构如下：
液相-质谱联用分析系统(LC/MS/MS)由Agilent1260色谱系统及Agilent6460TripleQuad三级四极杆质谱检测器经ESI离子源连接而成，系统工作软件为Agilent MassHunter工作站。质谱检测条件选用负离子ESI源，选择MRM工作模式进行二级质谱分析。具体质谱检测工作参数见表6：
表6 质谱工作参数
2)标准曲线制作及药动学参数的计算
向大鼠空白血浆样品中加入原型化合物(式9)和1-23化合物标准溶液(6.6、22.5μg/ml)，配成标示浓度为1320、4500ng/ml的标准血浆样品，随后用空白血浆依次等倍稀释得一系列的标准血浆样品，即原型化合物系列浓度为0.44、1.76、8.8、44、264、1320ng/ml，1-23系列浓度为2.4、6.0、30.0、150.0、900.0、4500.0ng/ml。取各浓度血浆样品50μL，用200μL MeOH提取血浆样品(其提取方法同上)，之后进行LC/MS/MS分析。
以原型化合物和1-23与内标化合物(式22)的峰面积之比(Y)对其在标准血浆样品中的浓度之比(X)进行线性回归，并分别以1/X2为权重系数(Weighting factor)，计算相关回归方程，并通过WinNonlin软件(美国Pharsight公司)用非房室模型方法处理计算1-23化合物和原型化合物的血浆药动学参数。
3)血浆样品分析结果
表7 静脉注射给药1-23化合物后各时间点1-23及其代谢物原型化合物血药浓度(ng/ml)
其中BLQ表示低于定量下限；*Rat2为部分药物注射到皮下，导致血药浓度测定不准确，未纳入血药浓度平均值及SD值的计算。
表8 静脉注射I-23给药后的大鼠血浆药动学参数(用非房室模型分析)
AUC(0→24h)：血药浓度时间曲线下面积(从0到24h)；AUC(0-∞)：血药浓度时间曲线下面积(从0到无穷大时间)；t1/2：消除半衰期；MRT：平均滞留时间。—：由于部分数据低于LLOQ导致参数无法计算；*Rat2部分药物注射到皮下，导致血药浓度测定不准确，未纳入药动学参数平均值及其SD值的计算。
通过对表7及表8分析可以得出，静脉注射给药1-23后，可在血浆中同时测定到了1-23及其代谢物原型化合物，其中体内静脉给药的AUCII-1/1-23约为60.1，很明显能说明在体内1-23能迅速转化为原型化合物，并在体循环中主要是以原型化合物的形式存在，说明1-23是原型化合物的前药分子。
结论：本发明的化合物分子结构较为简单，制备工艺简洁，生产成本低。在体外CypA酶抑制活性测试中，与原型化合物相比，基本丧失了CypA酶抑制活性。体外模拟的生理条件下，12小时内，本发明化合物性质稳定，而在大鼠体内，则迅速代谢转化为原型化合物。这些性质综合判定本发明化合物符合前药类化合物的定义。进一步的体外抗HCV病毒亚复制子和活病毒测试，均显示本发明化合物保持或优于原型化合物的抗HCV病毒效果。因此，本发明化合物有望开发为新的抗HCV前药类药物。
在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不一定指的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任何的一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。
尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在不脱离本发明的原理和宗旨的情况下在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。
Claims (29)
1.一种化合物，其特征在于，所述化合物为式1所示化合物或式1所示化合物的立体异构体、几何异构体、互变异构体：
其中，
R1和R2分别独立地选自氢、甲酰基、苯甲酰基以及C1-C3直链或支链烷基，并且R1和R2不同时为氢。
2.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，所述甲酰基和苯甲酰基被C1-C10直链烷基、C1-C10支链烷基或C1-C10环状烷基取代，所述C1-C3直链或支链烷基被羟基或苄氧基取代。
3.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，所述R1和R2分别独立地选自氢、乙酰基、丙酰基、正丁酰基、异丁酰基、环丙基甲酰基、正戊酰基、异戊酰基、特戊酰基、正己酰基、环己基甲酰基、正辛酰基、苯甲酰基、羟乙基、2-苄氧基乙基。
4.根据权利要求3所述的化合物，其特征在于，所述式1所示化合物具有如下结构式之一：
5.一种药物组合物，其特征在于，包含治疗有效量的一种或多种权利要求1～4任一项所述的化合物以及药学上可接受的赋形剂、载体或稀释剂。
6.根据权利要求5所述的药物组合物，其特征在于，进一步包括：不同于权利要求1-4任一项所述的化合物的丙型肝炎治疗剂。
7.根据权利要求6所述的药物组合物，其特征在于，所述丙型肝炎治疗剂为选自α-干扰素、聚乙二醇干扰素、利巴韦林、特拉匹韦、博赛匹韦、司美匹韦和索非布韦的至少之一。
8.根据权利要求5所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物用于下列至少之一：
预防或者治疗丙型肝炎；
抑制CypA肽基脯氨酰顺反异构酶；以及
抑制HCV病毒的增殖和活性。
9.一种药物联合，其特征在于，包括权利要求1-4任一项所述的化合物以及α-干扰素、聚乙二醇干扰素、利巴韦林、特拉匹韦、博赛匹韦、司美匹韦和索非布韦中的至少之一。
10.一种制备权利要求1-4任一项所述的化合物的方法，其特征在于，包括：
1)将式2所示化合物与式3所示化合物接触，以便生成式4所示化合物；
2)将所述式4所示化合物进行水解，以便生成式5所示化合物；
3)将三光气与式6所示化合物接触，以便生成式7所示化合物；
4)将所述式5所示化合物与所述式7所示化合物接触，以便生成式8所示化合物；
5)将所述式8所示化合物进行脱苄基反应，以便生成式9所示化合物；以及
6)将所述式9所示化合物与甲酰氯或甲酸酐或苯甲酰氯接触，以便得到式1所示化合物，其中，所述甲酰氯、甲酸酐和苯甲酰氯被C1-C10直链烷基、C1-C10支链烷基或C1-C10环状烷基取代，
11.根据权利要求10所述的方法，其特征在于，步骤1)进一步包括：
1-1)将所述式2所示化合物和所述式3所示化合物溶解于二甲基亚砜中；
1-2)将1-1)得到的混合物在110～130摄氏度搅拌5～10小时；
1-3)将1-2)得到的反应液中加入冰水并搅拌30分钟，然后依次抽滤、水洗和干燥，以便得到白色固体；以及
1-4)利用乙醇对1-3)得到的所述白色固体进行重结晶，以便获得所述式4所示化合物。
12.根据权利要求10所述的方法，其特征在于，步骤2)进一步包括：
2-1)将步骤1)得到的所述式4所示化合物溶于苄醇中，然后加入正四丁基溴化铵、氢氧化钾和水；
2-2)将2-1)得到的混合溶液在130～150摄氏度下搅拌12～36小时；以及
2-3)将2-2)得到的反应液进行减压蒸馏，并采用硅胶柱层析分离纯化剩余固体，以便获得所述式5所示化合物。
13.根据权利要求10所述的方法，其特征在于，步骤3)进一步包括：
3-1)将三光气溶于1，2-二氯乙烷中，并冷却至0～5摄氏度；
3-2)将所述式6所示化合物溶于1，2-二氯乙烷中，并将得到的混合物与3-1)得到的反应液进行混合；
3-3)对3-2)得到的反应液进行加热回流，当反应液呈无色透明状时，加入三乙胺，并继续回流45分钟；以及
3-4)将3-3)得到的回流液进行减压蒸馏，以便获得所述式7所示化合物。
14.根据权利要求10所述的方法，其特征在于，步骤4)进一步包括：
4-1)将所述式5所示化合物与所述式7所示化合物进行混合，并加热回流10～20小时；以及
4-2)将4-1)所得到的回流液进行减压蒸馏，并采用硅胶柱层析纯化残留物，以便获得所述式8所示化合物。
15.根据权利要求10所述的方法，其特征在于，步骤5)进一步包括：
5-1)将所述式8所示化合物与甲醇和四氢呋喃混合溶液进行混合；
5-2)向5-1)所得反应液中加入Pd/C，并在30～50摄氏度下通入氢气反应4～6小时，以便析出固体混合物；以及
5-3)将5-2)得到的所述固体混合物与四氢呋喃混合，并进行过滤和减压蒸馏，以便获得所述式9所示化合物。
16.根据权利要求10所述的方法，其特征在于，步骤6)进一步包括：
6-1)将所述式9所示化合物与无水N,N-二甲基甲酰胺和三乙胺进行混合；
6-2)在0摄氏度或20摄氏度条件下向6-1)得到的混合溶液中加入甲酰氯或甲酸酐或苯甲酰氯，继续搅拌15分钟，然后将所得到混合液在40摄氏度下继续反应12～36小时，其中，所述甲酰氯、甲酸酐和苯甲酰氯被C1-C10直链烷基、C1-C10支链烷基或C1-C10环状烷基取代；以及
6-3)利用二氯甲烷对6-2)得到的反应液进行萃取、水洗、干燥、浓缩，并采用硅胶柱层析纯化残留物，以便获得所述式1所示化合物。
17.一种制备权利要求1-4任一项所述的化合物的方法，其特征在于，包括：
a)将乙二醇单苄醚与式3所示化合物接触，以便生成式10所示化合物；
b)将所述式10所示化合物进行水解，以便生成式11所示化合物；
c)将三光气与式6所示化合物接触，以便生成式7所示化合物；
d)将所述式11所示化合物与所述式7所示化合物接触，以便生成式12所示化合物；以及
e)将所述式12所示化合物进行脱苄基反应，以便生成式13所示化合物和式14所示化合物，
18.根据权利要求17所述的方法，其特征在于，步骤a)进一步包括：
a-1)将所述式3所示化合物、乙二醇单苄醚与二甲基亚砜和氢化钠混合；
a-2)将a-1)得到的混合物在110～130摄氏度搅拌5～10小时；以及
a-3)采用二氯甲烷对a-2)得到的反应液进行萃取，然后依次干燥、浓缩，并利用硅胶柱层析纯化残留物，以便获得式10所示化合物。
19.根据权利要求17所述的方法，其特征在于，步骤b)进一步包括：
b-1)将步骤a)得到的所述式10所示化合物溶于苄醇中，然后加入正四丁基溴化铵、氢氧化钾和水；
b-2)将b-1)得到的混合溶液在130～150摄氏度下搅拌12～36小时；以及
b-3)将b-2)得到的反应液进行减压蒸馏，并采用硅胶柱层析分离纯化剩余固体，以便获得所述式11所示化合物。
20.根据权利要求17所述的方法，其特征在于，步骤c)进一步包括：
c-1)将三光气溶于1，2-二氯乙烷中，并冷却至0～5摄氏度；
c-2)将所述式6所示化合物溶于1，2-二氯乙烷中，并将得到的混合物与c-1)得到的反应液进行混合；
c-3)对c-2)得到的反应液进行加热回流，当反应液呈无色透明状时，加入三乙胺，并继续回流45分钟；以及
c-4)将c-3)得到的回流液进行减压蒸馏，以便获得所述式7所示化合物。
21.根据权利要求17所述的方法，其特征在于，步骤d)进一步包括：
d-1)将所述式5所示化合物与所述式7所示化合物进行混合，并加热回流10～20小时；以及
d-2)将d-1)所得到的回流液进行减压蒸馏，并采用硅胶柱层析纯化残留物，以便获得所述式12所示化合物。
22.根据权利要求17所述的方法，其特征在于，步骤e)进一步包括：
e-1)将所述式8所示化合物与甲醇和四氢呋喃混合溶液进行混合；
e-2)向e-1)所得反应液中加入Pd/C，并在30～50摄氏度下通入氢气反应48小时；以及
e-3)将e-2)得到的反应液进行减压蒸馏，并利用硅胶柱层析纯化所得到的残留物，以便获得所述13所示化合物和式14所示化合物。
23.一种制备权利要求1-4任一项所述的化合物的方法，其特征在于，包括：
A)将乙二醇单苄醚与式3所示化合物接触，以便生成式15所示化合物；
B)将所述式15所示化合物与苄醇钠接触，以便生成式16所示化合物；
C)将所述式16所示化合物进行水解，以便生成式17所示化合物；
D)将三光气与式6所示化合物接触，以便生成式7所示化合物；
E)将所述式17所示化合物与所述式7所示化合物接触，以便生成式18所示化合物；以及
F)将所述式18所示化合物进行脱苄基反应，以便生成式19所示化合物和式20所示化合物，
24.根据权利要求23所述的方法，其特征在于，步骤A)进一步包括：
A-1)将所述式3所示化合物、乙二醇单苄醚与二甲基亚砜和氢化钠混合；
A-2)将A-1)得到的混合物在110～130摄氏度搅拌5～10小时；以及
A-3)采用二氯甲烷对A-2)得到的反应液进行萃取，然后依次干燥、浓缩，并利用硅胶柱层析纯化残留物，以便获得式15所示化合物。
25.根据权利要求23所述的方法，其特征在于，步骤B)进一步包括：
B-1)将步骤A)得到的所述式15所示化合物和苄醇钠溶于二甲基亚砜中；
B-2)将B-1)得到的混合溶液在110～130摄氏度下搅拌5～10小时；以及
B-3)利用二氯甲烷对B-2)得到的反应液进行萃取，并进行干燥和浓缩，然后采用硅胶柱层析分离纯化剩余固体，以便获得所述式16所示化合物。
26.根据权利要求23所述的方法，其特征在于，步骤C)进一步包括：
C-1)将步骤B)得到的所述式16所示化合物溶于苄醇中，然后加入正四丁基溴化铵、氢氧化钾和水；
C-2)将C-1)得到的混合溶液在130～150摄氏度下搅拌12～36小时；以及
C-3)将C-2)得到的反应液进行减压蒸馏，并采用硅胶柱层析分离纯化剩余固体，以便获得所述式17所示化合物。
27.根据权利要求23所述的方法，其特征在于，步骤D)进一步包括：
D-1)将三光气溶于1，2-二氯乙烷中，并冷却至0～5摄氏度；
D-2)将所述式6所示化合物溶于1，2-二氯乙烷中，并将得到的混合物与c-1)得到的反应液进行混合；
D-3)对D-2)得到的反应液进行加热回流，当反应液呈无色透明状时，加入三乙胺，并继续回流45分钟；以及
D-4)将D-3)得到的回流液进行减压蒸馏，以便获得所述式7所示化合物。
28.根据权利要求23所述的方法，其特征在于，步骤E)进一步包括：
E-1)将所述式17所示化合物与所述式7所示化合物进行混合，并加热回流10～20小时；以及
E-2)将E-1)所得到的回流液进行减压蒸馏，并采用硅胶柱层析纯化残留物，以便获得所述式18所示化合物。
29.根据权利要求23所述的方法，其特征在于，步骤F)进一步包括：
F-1)将所述式18所示化合物与甲醇和四氢呋喃混合溶液进行混合；
F-2)向F-1)所得反应液中加入Pd/C，并在30～50摄氏度下通入氢气反应48小时；以及
F-3)将F-2)得到的反应液进行减压蒸馏，并利用硅胶柱层析纯化所得到的残留物，以便获得所述19所示化合物和式20所示化合物。
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