CN115089615B - 一种鼻腔微生态抑菌修复凝胶及制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种鼻腔微生态抑菌修复凝胶，按质量百分比由以下物料组成：去离子水40‑56％、海藻糖4‑8％、玻尿酸0.1‑0.6％、1、3丁二醇5‑10％、甘油2.4‑4％、羟丙基甲基纤维素0.8‑1.5％、水杨酸0.8‑1.5％，NL‑50保湿因子6‑8％，成纤维细胞条件培养液15‑30％，薄荷清凉剂0.1‑0.2％，以上物料质量百分比之和为100％。本发明还公开了鼻腔微生态抑菌修复凝胶的制备方法和应用。本发明清除鼻黏膜表面或粘膜下的支原体、细菌和真菌的数量，同时修复受损的鼻粘膜，即利用成纤维细胞条件培养液补充胶原等ECM，重建微生态环境，旨在解决现在过敏性鼻炎治疗效果不理想的问题。
Description
技术领域
本发明属于医疗卫生技术领域，具体涉及一种鼻腔微生态抑菌修复凝胶，本发明还涉及一种鼻腔微生态抑菌修复凝胶的制备方法和应用。
背景技术
过敏性鼻炎(allergic rhinitis)是鼻炎中最常见的类型，近十年来过敏性鼻炎患病率明显增加，大约影响到全球10％～25％的人群。在亚洲11个国家进行的调查显示，调查人群中成人AR患病率达到10％～30％，儿童为10～46％。我国AR的患病率近年来也有显著增加。尽管AR不会危及生命，但会影响生活质量，造成个人及社会的严重经济负担，儿童会因此影响学习成绩，严重者出现阻塞性睡眠呼吸障碍，甚至影响到颌面部发育。因此有效的治疗和预防措施就很重要。
目前理论认为，遗传和环境因素被认为是AR的病因学因素，特应性体质的人群若反复接触环境中致敏的变应原后就会发生AR。通俗的讲，就是正常的鼻黏膜，由于接触了致敏原的刺激后致敏，而变得敏感了，即鼻黏膜在发病起始阶段是正常的。这是目前主流的过敏性鼻炎的致病机理。
在从事成纤维细胞大量体外扩增的过程中，发现过敏性鼻炎患者在行鼻孔缩小术切除皮肤进行原代细胞培养时，无法获得大量扩增，传1-2代细胞就传不下去，与其它患者不同。进一步研究发现，只有在使用支原体清除剂时，AR患者的鼻孔缩小术的皮肤培养出来的成纤维细胞才能获得和其它患者皮肤培养出的细胞一样的倍增能力。因此研究提出：过敏性鼻炎患者是由于鼻粘膜皮肤感染了支原体，处于一种亚急性的炎症状态，这时候当遇到刺激物刺激时，就表现出来鼻痒、鼻塞、流涕等症状。即过敏性鼻炎在这个意义上被定义为感染性疾病，而不是变态反应性疾病，只不过这个感染比较特殊-----支原体。
支原体是在1898年发现的，又称人形支原体，是一种无细胞壁、介于独立生活和细胞内寄生生活间的最小型原核生物。其大小介于细菌和病毒之间。它感染细胞后，一般细胞在显微镜下没有明显的变化，随之时间的延长细胞出现变形、死亡，无法传代下去。医学研究中仅在培养皿、75cm2或者175cm培养瓶中培养细胞，是看不出支原体对细胞的影响的。只有在细胞移植临床应用中，达到108这个数量级出现肉眼可见的临床效果时，需要用到细胞工厂来培养时，如果因污染，支原体对细胞的影响才显现出来。正式由于其感染的隐匿性，临床上不容易觉察到，忽略了其作为致病菌的可能性。正式由于对过敏性鼻炎患者行鼻孔缩小术切除皮肤粘膜培养成纤维细胞时，才发现了支原体的存在。
从上述阐述中，过敏性鼻炎是首先支原体感染了正常鼻腔粘膜，处于亚急性的炎症状态，这时候再接触各种刺激物，出现了鼻炎症状。现有观点认为过敏性鼻炎是变态反应性疾病，因此需要激素来进行治疗。研究认为过敏性鼻炎是支原体这种特殊微生物引发的感染性疾病，清除或降低支原体浓度这是治疗首要解决的问题，绝对不能使用激素。当然，过敏性鼻炎在支原体感染的基础上，也会继发细菌、真菌等其他微生物的感染，自然也在清除之列。
仅应该认识到杀灭支原体的重要性，同时应该认识到重建修复受损鼻腔粘膜的重要性，那么就需要很好的修复材料。
人成纤维细胞条件培养液(Human Fibroblast Conditioned Medium)是随着细胞生物技术诞生一种新的生物材料。皮肤真皮作为结缔组织，包括细胞和非细胞两部分组成。非细胞部分即细胞外基质(ECM，ExrtaCellular Matrix)，主要包括胶原纤维(Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白)和弹性纤维、纤维粘连蛋白等。细胞成分主要是成纤维细胞，是生成真皮ECM中所有组分、维持ECM微环境稳定、参与ECM的更新和重建。体外扩增的细胞产生大量的培养上清液即成纤维细胞条件培养液。这其中除了含有上述ECM外，还含有碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、表皮生长因子(EGF)、转化生长因子-β(TGF-β)等生长因子。因此将成纤维细胞条件培养液加入凝胶中，将对受损的粘膜起到很好的修复作用。现有理论下使用激素，将会削弱鼻黏膜，让粘膜变薄，这与研究是相悖的。
发明内容
本发明的目的是提供一种鼻腔微生态抑菌修复凝胶，目的在于清除鼻黏膜表面或粘膜下的支原体、细菌和真菌的数量，同时修复受损的鼻粘膜，即利用成纤维细胞条件培养液补充胶原等ECM，重建微生态环境，旨在解决现在过敏性鼻炎治疗效果不理想的问题。
本发明的另一目的是提供一种鼻腔微生态抑菌修复凝胶的制备方法。
本发明的第三个的是提供一种鼻腔微生态抑菌修复凝胶的应用。
本发明所采用的第一技术方案是，鼻腔微生态抑菌修复凝胶，按质量百分比由以下物料组成：去离子水40-56％、海藻糖4-8％、玻尿酸0.1-0.6％、1、3丁二醇5-10％、甘油2.4-4％、羟丙基甲基纤维素0.8-1.5％、水杨酸0.8-1.5％，NL-50保湿因子6-8％，成纤维细胞条件培养液15-30％，薄荷清凉剂0.1-0.2％，以上物料质量百分比之和为100％。
本发明第一技术方案的特点还在于，
成纤维细胞条件培养液制备方法如下：
S1.传代人皮肤成纤维细胞至第4代，在细胞工厂进行体外扩增；
S2.细胞培养采用为8％胎牛血清+专用成纤维培养基；或者使用无血清间充质细胞培养基进行培养；
S3.待铺满覆盖率≥90％收集无菌的成纤维细胞上清液；
S4.将S3中收集的细胞上清液收集汇总后按100毫升上清液加入注射用活性炭1克，搅拌6～10分钟，依次经0.45um、0.22um微孔滤膜进行过滤，除色及异味澄清淡黄色、透明液体，按每1000毫升上清液加入40毫升戊二醇，进行防腐，即为成纤维细胞条件培养液，加入最终原料中使用。
本发明所采用的第二技术方案是，鼻腔微生态抑菌修复凝胶的制备方法，具体按照以下步骤实施：
步骤1、将去离子水、海藻糖、玻尿酸、1、3丁二醇、甘油充分混合，搅拌，煮沸；
步骤2、静止冷却后，边加入羟丙基甲基纤维素边搅拌；
步骤3、加入水杨酸搅拌溶解；
步骤4、加入NL-50保湿因子继续搅拌；
步骤5、加入成纤维细胞条件培养液，薄荷清凉剂继续搅拌；
步骤6、静置后，继续搅拌；
步骤7、静置后过滤，分装至鼻腔给药器后，铝箔袋包装，进行25KGray的辐照灭菌。
本发明第二技术方案的特点还在于，
步骤1中在60～100℃的温度下煮沸20～60分钟。
步骤2中静止冷却至20-30℃，搅拌速度为每分钟搅拌1000～5000转，搅拌时长为0.5～1.5小时。
步骤3中水杨酸浓度为0.5～1.5％，搅拌时间为5～15分钟。
步骤4中搅拌时间为10～30分钟；所述步骤5中调节PH值为5-6；
步骤6中静置10～14小时后，以1000～5000转每分钟的转速搅拌0.5～1.5小时；
步骤7中静置10～50分钟后以30目不锈钢筛过滤。
本发明所采用的第三技术方案是，一种鼻腔微生态抑菌修复凝胶，用于清除鼻腔支原体感染及其他微生物。
本发明的有益效果是，一种鼻腔微生态抑菌修复凝胶，清除鼻黏膜的“减少支原体、细菌和真菌的数量，发挥抑菌作用，又通过补充ECM起到修复受损的鼻黏膜，二者携手共同重建微生态环境。本发明的材料与现有的材料相比，突出强调了对支原体的首当其冲的杀灭作用，加入新型的生物材料---成纤维细胞条件培养液，对受损鼻黏膜进行修复。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明进行详细说明。
本发明鼻腔微生态抑菌修复凝胶，按质量百分比由以下物料组成：去离子水40-56％、海藻糖4-8％、玻尿酸0.1-0.6％、1、3丁二醇5-10％、甘油2.4-4％、羟丙基甲基纤维素0.8-1.5％、水杨酸0.8-1.5％，NL-50保湿因子6-8％，成纤维细胞条件培养液15-30％，薄荷清凉剂0.1-0.2％，以上物料质量百分比之和为100％。
成纤维细胞条件培养液制备方法如下：
S1.传代人皮肤成纤维细胞至第4代，在细胞工厂进行体外扩增；
S2.细胞培养采用为8％胎牛血清+专用成纤维培养基；或者使用无血清间充质细胞培养基进行培养；
S3.待铺满覆盖率≥90％收集无菌的成纤维细胞上清液；
S4.将S3中收集的细胞上清液收集汇总后按100毫升上清液加入注射用活性炭1克，搅拌6～10分钟，依次经0.45um、0.22um微孔滤膜进行过滤，除色及异味澄清淡黄色、透明液体，按每1000毫升上清液加入40毫升戊二醇，进行防腐，即为成纤维细胞条件培养液，加入最终原料中使用。
鼻腔微生态抑菌修复凝胶的制备方法，具体按照以下步骤实施：
步骤1、将去离子水、海藻糖、玻尿酸、1、3丁二醇、甘油充分混合，搅拌，煮沸；步骤1中在60～100℃的温度下煮沸20～60分钟。
步骤2、静止冷却后，边加入羟丙基甲基纤维素边搅拌；步骤2中静止冷却至20-30℃，搅拌速度为每分钟搅拌1000～5000转，搅拌时长为0.5～1.5小时。
步骤3、加入水杨酸搅拌溶解；步骤3中水杨酸浓度为0.5～1.5％，搅拌时间为5～15分钟。
步骤4、加入NL-50保湿因子继续搅拌；步骤4中搅拌时间为10～30分钟；所述步骤5中调节PH值为5-6；
步骤5、加入成纤维细胞条件培养液，薄荷清凉剂继续搅拌；
步骤6、静置后，继续搅拌；步骤6中静置10～14小时后，以1000～5000转每分钟的转速搅拌0.5～1.5小时；
步骤7、静置后过滤，分装至鼻腔给药器后，铝箔袋包装，进行25KGray的辐照灭菌。步骤7中静置10～50分钟后以30目不锈钢筛过滤。
本发明一种鼻腔微生态抑菌修复凝胶，用于清除鼻腔支原体感染及其他微生物。
实施例1
本发明鼻腔微生态抑菌修复凝胶，按质量百分比由以下物料组成：去离子水45.8％、海藻糖4％、玻尿酸0.1％、1、3丁二醇10％、甘油2.4％、羟丙基甲基纤维素0.8％、水杨酸0.8％，NL-50保湿因子6％，成纤维细胞条件培养液30％，薄荷清凉剂0.1％，以上物料质量百分比之和为100％。
成纤维细胞条件培养液制备方法如下：
S1.传代人皮肤成纤维细胞至第4代，在细胞工厂进行体外扩增；
S2.细胞培养采用为8％胎牛血清+专用成纤维培养基；或者使用无血清间充质细胞培养基进行培养；
S3.待铺满覆盖率≥90％收集无菌的成纤维细胞上清液；
S4.将S3中收集的细胞上清液收集汇总后按100毫升上清液加入注射用活性炭1克，搅拌6分钟，依次经0.45um、0.22um微孔滤膜进行过滤，除色及异味澄清淡黄色、透明液体，按每1000毫升上清液加入40毫升戊二醇，进行防腐，即为成纤维细胞条件培养液，加入最终原料中使用。
鼻腔微生态抑菌修复凝胶的制备方法，具体按照以下步骤实施：
步骤1、将去离子水、海藻糖、玻尿酸、1、3丁二醇、甘油充分混合，搅拌，煮沸；步骤1中在60℃的温度下煮沸20分钟。
步骤2、静止冷却后，边加入羟丙基甲基纤维素边搅拌；步骤2中静止冷却至20℃，搅拌速度为每分钟搅拌1000转，搅拌时长为0.5小时。
步骤3、加入水杨酸搅拌溶解；步骤3中水杨酸浓度为0.5％，搅拌时间为5分钟。
步骤4、加入NL-50保湿因子继续搅拌；步骤4中搅拌时间为10分钟；所述步骤5中调节PH值为5；
步骤5、加入成纤维细胞条件培养液，薄荷清凉剂继续搅拌；
步骤6、静置后，继续搅拌；步骤6中静置10小时后，以1000转每分钟的转速搅拌0.5小时；
步骤7、静置后过滤，分装至鼻腔给药器后，铝箔袋包装，进行25KGray的辐照灭菌。步骤7中静置10分钟后以30目不锈钢筛过滤。
实施例2
本发明鼻腔微生态抑菌修复凝胶，按质量百分比由以下物料组成：去离子水40％、海藻糖8％、玻尿酸0.6％、1、3丁二醇10％、甘油4％、羟丙基甲基纤维素1.5％、水杨酸1.5％，NL-50保湿因子8％，成纤维细胞条件培养液26.2％，薄荷清凉剂0.2％，以上物料质量百分比之和为100％。
成纤维细胞条件培养液制备方法如下：
S1.传代人皮肤成纤维细胞至第4代，在细胞工厂进行体外扩增；
S2.细胞培养采用为8％胎牛血清+专用成纤维培养基；或者使用无血清间充质细胞培养基进行培养；
S3.待铺满覆盖率≥90％收集无菌的成纤维细胞上清液；
S4.将S3中收集的细胞上清液收集汇总后按100毫升上清液加入注射用活性炭1克，搅拌10分钟，依次经0.45um、0.22um微孔滤膜进行过滤，除色及异味澄清淡黄色、透明液体，按每1000毫升上清液加入40毫升戊二醇，进行防腐，即为成纤维细胞条件培养液，加入最终原料中使用。
鼻腔微生态抑菌修复凝胶的制备方法，具体按照以下步骤实施：
步骤1、将去离子水、海藻糖、玻尿酸、1、3丁二醇、甘油充分混合，搅拌，煮沸；步骤1中在100℃的温度下煮沸60分钟。
步骤2、静止冷却后，边加入羟丙基甲基纤维素边搅拌；步骤2中静止冷却至30℃，搅拌速度为每分钟搅拌5000转，搅拌时长为1.5小时。
步骤3、加入水杨酸搅拌溶解；步骤3中水杨酸浓度为1.5％，搅拌时间为15分钟。
步骤4、加入NL-50保湿因子继续搅拌；步骤4中搅拌时间为30分钟；步骤5中调节PH值为6；
步骤5、加入成纤维细胞条件培养液，薄荷清凉剂继续搅拌；
步骤6、静置后，继续搅拌；步骤6中静置14小时后，以5000转每分钟的转速搅拌1.5小时；
步骤7、静置后过滤，分装至鼻腔给药器后，铝箔袋包装，进行25KGray的辐照灭菌。步骤7中静置50分钟后以30目不锈钢筛过滤。
实施例3
本发明鼻腔微生态抑菌修复凝胶，按质量百分比由以下物料组成：去离子水50％、海藻糖6％、玻尿酸0.4％、1、3丁二醇7％、甘油3％、羟丙基甲基纤维素1％、水杨酸1％，NL-50保湿因子7％，成纤维细胞条件培养液24.45％，薄荷清凉剂0.15％，以上物料质量百分比之和为100％。
成纤维细胞条件培养液制备方法如下：
S1.传代人皮肤成纤维细胞至第4代，在细胞工厂进行体外扩增；
S2.细胞培养采用为8％胎牛血清+专用成纤维培养基；或者使用无血清间充质细胞培养基进行培养；
S3.待铺满覆盖率≥90％收集无菌的成纤维细胞上清液；
S4.将S3中收集的细胞上清液收集汇总后按100毫升上清液加入注射用活性炭1克，搅拌8分钟，依次经0.45um、0.22um微孔滤膜进行过滤，除色及异味澄清淡黄色、透明液体，按每1000毫升上清液加入40毫升戊二醇，进行防腐，即为成纤维细胞条件培养液，加入最终原料中使用。
鼻腔微生态抑菌修复凝胶的制备方法，具体按照以下步骤实施：
步骤1、将去离子水、海藻糖、玻尿酸、1、3丁二醇、甘油充分混合，搅拌，煮沸；步骤1中在80℃的温度下煮沸40分钟。
步骤2、静止冷却后，边加入羟丙基甲基纤维素边搅拌；步骤2中静止冷却至25℃，搅拌速度为每分钟搅拌3000转，搅拌时长为1小时。
步骤3、加入水杨酸搅拌溶解；步骤3中水杨酸浓度为1％，搅拌时间为10分钟。
步骤4、加入NL-50保湿因子继续搅拌；步骤4中搅拌时间为20分钟；所述步骤5中调节PH值为5.5；
步骤5、加入成纤维细胞条件培养液，薄荷清凉剂继续搅拌；
步骤6、静置后，继续搅拌；步骤6中静置12小时后，以3000转每分钟的转速搅拌1小时；
步骤7、静置后过滤，分装至鼻腔给药器后，铝箔袋包装，进行25KGray的辐照灭菌。步骤7中静置30分钟后以30目不锈钢筛过滤。
临床实验
邀请150例受试者，年龄4-15岁青少年，男76例，女74例，均未采用过任何激素类药物治疗过。符合我国《中国变应性鼻炎诊断和治疗指南》2022年修订版中的过敏性鼻炎诊断，无药物过敏史，能耐受喷药时刺激性，知情同意本研究。分别使用实施例1、实施例2、实施例3制备的鼻腔微生态抑菌修复凝胶进行治疗。每日3次，喷涂于鼻腔内膜及鼻孔周围。4周后进行治疗前后临床症状积分评估。
临床症状积分评判标准：分别于就诊时、治疗后(治疗后4周)对患儿的鼻塞、鼻痒、流涕、喷嚏症状进行评分，每种症状总分0-10分。
0分：无明显临床症状；。
1～3分：轻度临床症状
4～7分：中度临床症状
8～10分：重度临床症状
临床症状积分结果见表1：
表1实施例1、2、3组效果评估
综上，实施例3为最佳施例。
上面结合具体实施例对本发明进行了示例性描述，显然本发明具体实现并不受上述方式的限制，只要采用了本发明的方法构思和技术方案进行的各种改进，或未经改进直接应用于其他场合，均在本发明的保护范围之内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。
一、支原体抑菌凝胶分析检测报告：
样品名称：鼻腔微生态抑菌修复凝胶
样品规格和批号：20ML/20210605
生产日期：2021-06-05
接样日期：2021-06-25
检测完成日期：2021-07-30
检测依据和方法：消毒技术规范2.1.1.7 2.1.1.9
检测项目：支原体抑制试验
检测报告：
(一)、环境条件：温度：25±3℃，湿度：65±5％RH
(二)、测试步骤：1.试验用菌株：滑液支原体(CVCC2960).2.用无菌吸管吸取0.5ml的液体培养基，滴入安瓿管内，轻轻振荡，使冻干菌体溶解呈悬浮状。吸取全部菌体悬浮液，移植于2支的培养基试管中；取培养后的菌液，按照5％比例传3代，取生长稳定的菌液作为待测菌液，按5％比例接种培养基，置37℃培养箱中培养，培养54h(54h后接种滴度为1.0*108cfu/ml)。3.取培养物1ml，加人等量样品，摇匀，在25℃左右下作用到规定时间，10分钟后取样品进行存活菌的检测，试验重复⒉次。4.测取0.5ml样品接种于4.5ml液体培养基中，每个样品接种三管，置37℃培养7-14天后观察培养基颜色变化(pH下降0.5值)。判定支原体的生长，并于培养的第3-14天，分别从每个接种管中取出0.25ml，取样液接种进行活菌计数培养，计算杀灭对数值。试验重复3次。
(三)、检测结果：细菌灭杀试验经3次重复试验，在试验温度为20℃恒温条件下，对支原体灭杀结果，如表2所示。
表2细菌灭杀试验
(四)、结果讨论：试验后，在试验温度为20℃恒温条件下，样品制剂处理浓度0.2％，作用10min，样品杀灭有效。
二、杀菌性能试验检验报告
样品名称：鼻腔微生态抑菌修复凝胶
检验项目：杀菌性能试验
接样日期：2021-12-14
检测完成日期：2022-01-08
(一)、器材
1.样品名称：鼻腔微生态抑菌修复凝胶。
2.试验菌株名称：大肠杆菌(8099)第10代、金黄色葡萄球菌(ATCC 6538)第10代、白色念珠菌(ATCC 10231)第10代。
3.仪器设备：电热恒温培养箱A-020,生物安全柜A-044,电子天平D-092.
(二)、方法
1.检验依据：GB 15979-2002《一次性使用卫生用品卫生标准》附录CC3.
2.样品配制：原样品。
3.检验环境温度：23℃,相对湿度：53％.
(三)、结果
1.细菌中和剂鉴定成分：D/E中和肉汤，结果列于表3。
2.真菌中和剂鉴定成分：D/E中和肉汤，结果列于表4。
3.杀菌性能试验结果列于表5。
(四)、结论
该样品作用浓度原样品，作用时间2min,对大肠杆菌，金黄色葡萄球菌，白色念珠菌的杀菌率＞90％,根据GB15979-2002《一次性使用卫生用品卫生标准》判定该样品具有杀菌作用，符合Q/SJSEJS001-2021《抗菌凝胶》的要求。
表3细菌中和剂鉴定试验结果
表4真菌中和剂鉴定试验结果
表5杀菌性能测试结果
续表5杀菌性能测试结果
三、激素含量检验报告：
样品名称：鼻腔微生态抑菌修复凝胶
样品状态：正常
样品性状：微黄色透明液体
检验项目：激素含量检测
检验结果：如表6所示。
表6鼻腔微生态凝胶检验报告
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检验结论：所检项目符合《化妆品安全技术规范》(2015年版)标准要求。
四、急性吸入毒性试验检验报告：
样品名称：鼻腔微生态抑菌修复凝胶
接样日期：2021-09-02
检测完成日期：2021-09-29
(一)、器材
1.样品名称：鼻腔微生态抑菌修复凝胶。
2.试验动物信息：昆明小鼠，购于辽宁长生生物科技股份有限公司(SCXK(辽)2021-0001),合格证号：210726210101034683.饲养在西安国联质量检测技术股份有限公司(实验动物使用许可证号：SYXK(陕)2021-009)屏障系统，温度：22.6℃-24.2℃,相对湿度：60.7％-69.6％.饲料来源：鼠生长饲料购于江苏协同医药生物工程有限责任公司(许可证号：苏饲证(2019)01008),合格证号：120210716039。
3.仪器设备名称：D-022、D-023电子天平，D-008全身雾化暴露给药系统，一次性注射器，灌胃针。
(二)、方法
1.检测依据：《消毒技术规范》(卫生部2002年版)2.3.2。
2.样品配制方法：原样品。
3.检验方法：实验采用动式染毒法，取动物18.8-21.8g,连续不断地将12.8mL鼻腔微生态凝胶均匀不断地送入染毒柜，并排出等量的染毒气体，维持相对稳定的染毒浓度。一次吸入性染毒2h.采用限量法：剂量设计为10000mg/m3.给予20只动物，雌雄各半。
4.观察指标：连续观察14天，于第1天，第7天，第14天记录动物体重，实验期间观察动物症状和死亡情况。
(三)、结果
受试动物在染毒后14天观察期内未见任何中毒症状和死亡情况，且各性别动物体重呈增长趋势。观察期满后处死动物进行剖检，未发现器官及组织有异常。结果见表7、8。
表7受试动物临床症状及死亡情况汇总数据
表8受试动物体重汇总数据
(四)、结论：
该样品对昆明小鼠的急性吸入LCso>10000mg/m3体重，根据《消毒技术规范》(卫生部2002年版)2.3.2判定，属实际无毒，符合Q/SJSEJS 001-2021《抗菌凝胶》的要求。
五、微生物指标检验报告
样品名称：鼻腔微生态抑菌修复凝胶
检验项目：微生物指标
接样日期：2021-12-14
检测完成日期：2021-12-21
(一)、器材
1.样品名称：鼻腔微生态抑菌修复凝胶。
2.仪器设备：电热恒温培养箱YQF-049,生物安全柜YQF-186,生化培养箱YQF-176,电子天平
YQF-165,霉菌培养箱YQF-062。
(二)、方法
1.检验依据：GB 15979-2002《一次性使用卫生用品卫生标准》附录B.2.检验环境温度：21℃,相对湿度：52％。
(三)、结果
该样品的微生物指标测定结果列于表9。
表9微生物指标测定结果
(四)、结论：
该样品的细菌菌落总数、真菌菌落总数均＜20cfu/g，大肠菌群、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、溶血性链球菌均未检出，符合Q/SJSEJS 001-2021《抗菌凝胶》的要求。
六、感官检验报告：
样品名称：鼻腔微生态抑菌修复凝胶
接样日期：2021-12-14
检测完成日期：2021-12-31
(一)、器材
样品名称：鼻腔微生态抑菌修复凝胶。
(二)、方法
1.检验依据：Q/SJSEJS 001-2021《抗菌凝胶》。
2.检验环境温度：23℃,相对湿度：49％。
(三)、结果
该样品的感官指标结果列于表10.
表10感官指标测定结果
(四)、结论：
该样品外观为淡黄色透明液体，剧透芳香气味，无肉眼可见外来杂质，符合Q/SJSEJS 001-2021《抗菌凝胶》要求。
七、pH值检验报告：
样品名称：鼻腔微生态抑菌修复凝胶
检验项目：pH值
接样日期：2021-12-14
检测完成日期：2021-12-31
(一)、器材
1.样品名称：鼻腔微生态抑菌修复凝胶。2.仪器设备：电子天平A-066,PH计A-036.
(二)、方法
1.检验依据：《消毒技术规范》(卫生部2002年版)2.2.1.4.2.检验环境温度：23℃,相对湿度：49％.
(三)、结果
该样品pH值结果列于表11.
表11 pH值测定结果
(四)、结论：
该样品pH值(25℃)为5.06，符合Q/SJSEJS 001-2021《抗菌凝胶》要求。
八、重金属检测检验报告
样品名称：鼻腔微生态抑菌修复凝胶
检验项目：铅、砷、汞
接样日期：2021-12-14
检测完成日期：2021-12-27
(一)、器材
1.样品名称：鼻腔微生态抑菌修复凝胶。
2.仪器设备：原子吸收分光光度计E-011,原子荧光分光光度计E-016,分析天平A-066。
(二)、方法
1.检验依据：《化妆品安全技术规范》(2015年版)第四章1.2、1.3、1.4.2.检验温度：23℃,相对湿度：45％.
(三)、结果
该样品铅、砷、汞的检测结果列于表12.
表12铅、砷、汞指标测定结果
(四)、结论：
该样品的铅、砷、汞均未检出，符合Q/SJSEJS 001-2021《抗菌凝胶》要求。
九、抗生素检验报告
样品名称：鼻腔微生态抑菌修复凝胶
检验项目：抗生素
收样日期：2019-07-12
检测日期：2019-07-19
检验结果如表13所示：
表13抗生素检测
检出限：盐酸美满霉素检出限是50mg/kg；二水土霉素检出限是1mg/kg:盐酸四环素检出限是1mg/kg:盐酸金霉素检出限是1mg/kg:盐酸多西环素检出限是1mg/kg:氧霉素检出限是1mg/kg；甲硝唑检出限是50mg/kg。
检测结论：所检项目全部符合《化妆品安全技术规范》2015年版法规的相关要求。
Claims (2)
1.一种凝胶在制备鼻腔微生态抑菌修复制品中的用途，其特征在于，所述凝胶按质量百分比由以下物料组成：去离子水40-56％、海藻糖4-8％、玻尿酸0.1-0.6％、1、3丁二醇5-10％、甘油2.4-4％、羟丙基甲基纤维素0.8-1.5％、水杨酸0.8-1.5％，NL-50保湿因子6-8％，成纤维细胞条件培养液15-30％，薄荷清凉剂0.1-0.2％，以上物料质量百分比之和为100％；
所述成纤维细胞条件培养液制备方法如下：
S1.传代人皮肤成纤维细胞至第4代，在细胞工厂进行体外扩增；
S2.细胞培养采用为8％胎牛血清+专用成纤维培养基；或者使用无血清间充质细胞培养基进行培养；
S3.待铺满覆盖率≥90％收集无菌的成纤维细胞上清液；
S4.将S3中收集的细胞上清液收集汇总后按100毫升上清液加入注射用活性炭1克，搅拌6～10分钟，依次经0.45um、0.22um微孔滤膜进行过滤，除色及异味澄清淡黄色、透明液体，按每1000毫升上清液加入40毫升戊二醇，进行防腐，即为成纤维细胞条件培养液，加入最终原料中使用。
2.一种如权利要求1中所述的凝胶的制备方法，其特征在于，按照以下步骤实施：
步骤1、将去离子水、海藻糖、玻尿酸、1、3丁二醇、甘油充分混合，搅拌，煮沸；所述步骤1中在60～100℃的温度下煮沸20～60分钟；
步骤2、静止冷却后，边加入羟丙基甲基纤维素边搅拌；所述步骤2中静止冷却至20-30℃，搅拌速度为每分钟搅拌1000～5000转，搅拌时长为0.5～1.5小时；
步骤3、加入水杨酸搅拌溶解；所述步骤3中水杨酸浓度为0.5～1.5％，搅拌时间为5～15分钟；
步骤4、加入NL-50保湿因子继续搅拌；所述步骤4中搅拌时间为10～30分钟；
步骤5、加入成纤维细胞条件培养液，薄荷清凉剂继续搅拌；所述步骤5中调节pH值为5-6；
步骤6、静置后，继续搅拌；所述步骤6中静置10～14小时后，以1000～5000转每分钟的转速搅拌0.5～1.5小时；
步骤7、静置后过滤，分装至鼻腔给药器后，铝箔袋包装，进行25KGray的辐照灭菌，所述步骤7中静置10～50分钟后以30目不锈钢筛过滤。
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| KR20120013154A (ko) * | 2010-08-04 | 2012-02-14 | 이서현 | 감염방지용 비강(鼻腔) 삽입물 |
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| Nasal Fibroblast Conditioned Medium Promotes Cell Attachment and Migration of Human Respiratory Epithelium;ROHAINA CHE MAN等;Sains Malaysiana;第49卷(第2期);第429-437页 * |
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