CN115015435B - 一种消毒剂中n-乙酰基己内酰胺的检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及成分分析领域，具体是一种消毒剂中N‑乙酰基己内酰胺的检测方法。本发明所述检测方法包括：采用HPLC对消毒剂进行检测；所述HPLC的色谱条件为：色谱柱为C18色谱柱；流动相为乙腈水溶液，所述乙腈和水的体积比为60～95:5～40。所述检测方法的标准曲线相关系数R为0.999698；多次测量的峰面积相对标准偏差(RSD)为1.58％；稳定性试验中的峰面积RSD为1.38％；回收率试验中的平均回收率为102.62％；结果符合GB/T27404‑2008《实验室质量控制规范》的要求，证明该方法线性关系良好，精密度和稳定性高，能够准确测量消毒剂中的N‑乙酰基己内酰胺含量。
Description
技术领域
本发明涉及检测领域，具体是一种消毒剂中N-乙酰基己内酰胺的检测方法。
背景技术
N-乙酰基己内酰胺，别名N-乙酰己内酰胺。是一种重要的精细化工产品,分子式C8H13NO2，沸点为134～135℃，具有刺激性。主要用作己内酰胺阴离子聚合的催化剂和促进剂，可加快聚合速度，提高聚合物的冲击强度、制造超高分子量的尼龙-6；还用作织物漂白促进剂和重要的有机合成中间体，如某些药物合成的中间体。
近几年，N-乙酰基己内酰胺因为其稳定性强，活化效率高，已在消毒剂系列中应用，所述消毒剂是能够用于杀灭传播媒介上的微生物使其达消毒或灭菌要求的制剂。它能与其他消毒剂原料活化反应，快速生成可以消毒灭菌的成分，可用于食品消毒剂、医疗器械消毒剂、内镜消毒剂，效果极佳，但目前很难控制N-乙酰基己内酰胺在消毒剂成分中的含量，这对消毒环境非常的不友好，无法满足消毒产品的正常使用。
准确测量N-乙酰基己内酰胺对其使用具有较佳的指导意义，但目前没有对N-乙酰基己内酰胺的便利的检测方法。
发明内容
有鉴于此，本发明所要解决的技术问题在于提供一种消毒剂中N-乙酰基己内酰胺的检测方法，本发明提供的检测方法可以准确检测消毒剂中N-乙酰基己内酰胺的含量。
本发明提供了一种消毒剂中N-乙酰基己内酰胺的检测方法，包括：
采用HPLC对消毒剂进行检测；
所述HPLC的色谱条件为：色谱柱为C18色谱柱；
流动相为乙腈水溶液，
所述乙腈和水的体积比为60～95:5～40。
本发明采用HPLC对消毒剂中的N-乙酰基己内酰胺进行检测，所述HPLC以一定比例的乙腈水溶液为HPLC的流动相。在本发明的某些实施例中，所述乙腈和水的体积比为60～95:5～40，优选为70～90:10～30，最优选为75:25。
在本发明的某些实施例中，采用四元泵控制所述HPLC的流动相的流速。在一个实施例中，所述四元泵为四元高压梯度泵。在一个实施例中，所述流动相的流速为0.5～1.5mL/min，优选为1mL/min。
本发明采用C18色谱柱作为HPLC的色谱柱。在本发明的某些实施例中，所述色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，具体为以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的反相色谱柱。在一个实施例中，所述色谱柱为ZORBAX C18色谱柱或Waters SunFire C18色谱柱，规格为5μm，4.6×250mm。
在本发明的某些实施例中，所述色谱柱的柱温为20～50℃，优选为30℃。
在本发明的某些实施例中，所述HPLC进行检测时的进样量为0.1～20μL，优选为0.1～1μL，更优选为0.5μL。
在本发明的某些实施例中，所述HPLC采用二极管阵列检测器在一定的检测波长下对N-乙酰基己内酰胺进行检测。在一个实施例中，所述二极管阵列检测器为DAD二极管阵列检测器。在一个实施例中，所述HPLC的检测波长为200～400nm，优选为200～220nm，更优选为220nm。
具体而言，本发明提供的消毒剂中N-乙酰基己内酰胺的检测方法包括以下步骤：
对消毒剂进行预处理；
建立N-乙酰基己内酰胺的标准曲线；
采用HPLC对进行预处理后的消毒剂进行检测；
所述HPLC的色谱条件和上述一样，不再赘述。
本发明首先对消毒剂进行预处理。具体而言，将所述消毒剂用乙腈或甲醇配制成消毒剂储备液。在本发明的某些实施例中，量取消毒剂0.1mL后，用乙腈或甲醇定容至50mL，得到消毒剂储备液。在一个实施例中，精密量取消毒剂0.1mL，置于50mL容量瓶中，加入乙腈或甲醇约30mL进行超声溶解提取，振摇3分钟，用乙腈或甲醇定容至50mL，摇匀，滤过，得到消毒剂储备液。在一个实施例中，所述消毒剂为固体试剂，精密称取所述固体试剂0.1g，研细，置于50mL容量瓶中，加乙腈或甲醇30mL，超声处理10分钟，冷却至室温，用乙腈或甲醇稀释定容至50mL，摇匀并过滤得到消毒剂储备液。
本发明对消毒剂进行预处理后，建立N-乙酰基己内酰胺的标准曲线。具体而言，所述建立N-乙酰基己内酰胺的标准曲线具体包括：将N-乙酰基己内酰胺对照品用乙腈或甲醇配制成不同浓度的溶液，按照上述色谱条件进行HPLC检测，根据浓度和所测得的峰面积绘制标准曲线。在本发明的某些实施例中，将N-乙酰基己内酰胺对照品用乙腈或甲醇溶解后，再量取相应成梯度的量，配制为梯度的不同浓度的溶液，按照上述色谱条件进行HPLC检测，根据浓度和所测得的峰面积绘制标准曲线。在一个实施例中，精密量取N-乙酰基己内酰胺对照品0.1mL，置于50mL容量瓶中，用乙腈或甲醇超声溶解提取并定容至50mL，摇匀，得到N-乙酰基己内酰胺对照品溶液；从所述对照品溶液中再精密量取1mL、2mL、3mL、4mL和5mL溶液，分别置于50mL容量瓶中，用乙腈或甲醇定容，配制成浓度为0.04μL/mL、0.08μL/mL、0.12μL/mL、0.16μL/mL和0.20μL/mL的溶液，按照上述色谱条件进行HPLC检测，根据浓度和所测得的峰面积绘制标准曲线。在一个实施例中，所述HPLC的标准曲线线性范围为0.01～0.30μL/mL，优选为0.01～0.25μL/mL。
本发明建立了N-乙酰基己内酰胺的标准曲线后，采用HPLC对上述进行预处理后的消毒剂进行检测。具体而言，将消毒剂进行预处理得到消毒剂储备液后，将所述消毒剂储备液用乙腈或甲醇配制成待测样品，采用HPLC对所述待测样品进行检测。在一个实施例中，将预处理后得到的消毒剂储备液精密量取3mL，用乙腈或甲醇定容至50mL，再通过0.22μm滤膜过滤后，得到待测样品，采用HPLC对所述待测样品进行检测。
本发明所述检测方法根据高效液相色谱图中的保留时间对消毒剂中的N-乙酰基己内酰胺进行定性分析，具体是将消毒剂的高效液相色谱图与N-乙酰基己内酰胺对照品的高效液相色谱图进行对比，相对保留时间相近的样品峰，即误差范围在0.2％以内的样品峰，即初步认为是相应的N-乙酰基己内酰胺样品峰。
本发明将消毒剂中的N-乙酰基己内酰胺按照外标法根据峰面积进行定量分析，外标法计算含量时一般采用相应的对照品，在相应的对照品难以获得的情况下，也可以用容易获得的结构类似物作为参考对照品测定相对含量；具体而言，将消毒剂的高效液相色谱图中N-乙酰基己内酰胺样品峰的相对保留时间内的峰面积代入上述根据N-乙酰基己内酰胺对照品得到的标准曲线中，计算得到样品N-乙酰基己内酰胺含量。
本发明提供了一种消毒剂中N-乙酰基己内酰胺的检测方法，包括：采用HPLC对消毒剂进行检测；所述HPLC的色谱条件为：色谱柱为C18色谱柱；流动相为乙腈水溶液，所述乙腈和水的体积比为60～95:5～40。本发明提供的检测方法的标准曲线相关系数R为0.999698；多次测量的峰面积相对标准偏差(RSD)为1.58％；稳定性试验中的峰面积RSD为1.38％；回收率试验中的平均回收率为102.62％；上述结果均符合GB/T27404-2008《实验室质量控制规范》的要求，证明该检测方法科学有效，线性关系良好，精密度和稳定性高，能够准确测量消毒剂中的N-乙酰基己内酰胺含量。
附图说明
图1为浓度为0.12μL/mL的N-乙酰基己内酰胺对照品待测溶液的高效液相色谱图；
图2为空白溶液的高效液相色谱图；
图3为N-乙酰基己内酰胺的标准曲线图；
图4为N-乙酰基己内酰胺对照品的高效液相色谱图；
图5为干扰品的高效液相色谱图；
图6为N-乙酰基己内酰胺原材料样品待测溶液的高效液相色谱图；
图7为某市售消毒剂待测溶液的高效液相色谱图；
图8为某市售消毒剂的含量测定图。
具体实施方式
本发明公开了一种消毒剂中N-乙酰基己内酰胺的检测方法。本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。
以下结合实施例对本发明进行进一步阐述：
实施例1
1、仪器、试剂和样品
Agilent 1260Infinity II高效液相色谱仪，DAD检测器，四元高压梯度泵；色谱柱为ZORBAX C18(5μm，4.6×250mm)；乙腈为色谱纯。
2、色谱条件
流动相：体积比为75:25的乙腈和水；
检测波长：220nm；
流动相的流速：1.0mL/min；
进样量：0.5μL；
柱温：30℃；
样品预处理采用乙腈超声溶解取样。
3、溶液制备
(1)N-乙酰基己内酰胺对照品储备液的制备
精密量取N-乙酰基己内酰胺对照品0.1mL，置于50mL容量瓶中，用乙腈溶解并稀释至刻度，摇匀，混合均匀，作为N-乙酰基己内酰胺对照品储备液。
(2)N-乙酰基己内酰胺对照品待测溶液的制备
从上述N-乙酰基己内酰胺对照品储备液中精密量取续滤液3mL，用乙腈定容置于50mL容量瓶中，再通过0.22μm滤膜过滤后，得到浓度为0.12μL/mL的N-乙酰基己内酰胺对照品待测溶液，注入高效液相色谱进样瓶，做好标记。
(3)标准曲线绘制所需对照品待测溶液的制备
从上述N-乙酰基己内酰胺对照品储备液中精密量取1mL、2mL、3mL、4mL、5mL溶液，分别用乙腈定容并置于50mL容量瓶中，配制得到浓度为0.04μL/mL、0.08μL/mL、0.12μL/mL、0.16μL/mL、0.20μL/mL的标准曲线绘制所需待测溶液，分别注入高效液相色谱进样瓶，做好标记。
4、方法学验证
(1)方法空白实验
按照上述色谱条件对上述对照品待测溶液进行HPLC检测，得到浓度为0.12μL/mL的N-乙酰基己内酰胺对照品待测溶液的高效液相色谱图，如图1所示，图1为浓度为0.12μL/mL的N-乙酰基己内酰胺对照品待测溶液的高效液相色谱图。
不称取样品，按上述溶液制备的方法处理空白溶液。按照上述色谱条件进行HPLC检测，得到空白溶液的高效液相色谱图，如图2所示，图2为空白溶液的高效液相色谱图。
将空白溶液的高效液相色谱图与浓度为0.12μL/mL的N-乙酰基己内酰胺对照品待测溶液的高效液相色谱图的出峰时间对比。空白溶液在N-乙酰基己内酰胺的出峰时间处均无吸收峰，表明空白溶液对测定结果基本无干扰。
(2)线性范围确认
(a)试验数据
采用上述色谱条件对上述各个浓度的标准曲线绘制所需对照品待测溶液分别进行HPLC检测，试验数据如表1所示：
表1实施例1分析方法的线性关系
按照表1的数据，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准工作曲线，如图3所示，图3为N-乙酰基己内酰胺的标准曲线图。
线性评价：N-乙酰基己内酰胺的残余STD为40.89079，相关系数R为0.999698，所以用该方法测定N-乙酰基己内酰胺在浓度0.04μL/mL至0.2μL/mL之间，呈现良好的线性，符合GB/T27404-2008《实验室质量控制规范》的要求，即GB/T27404-2008要求相关系数R≥0.99。
(3)检出限和定量限
分析方法的定量限和检出限由信噪比(S/N)计算。
当信噪比(S/N)为3时，N-乙酰基己内酰胺检出限为0.0059μL/mL，得到方法的N-乙酰基己内酰胺检出限为0.0059μL/mL。
当信噪比(S/N)为10时，N-乙酰基己内酰胺定量限为0.01967μL/mL，得到方法的N-乙酰基己内酰胺定量限为0.01967μL/mL。
(4)精密度试验
(a)试验方法：
将上述浓度为0.12μL/mL的N-乙酰基己内酰胺对照品待测溶液按上述色谱条件重复测定6次，计算其峰面积RSD(％)。
(b)试验数据：
精密度试验的试验数据如表2所示：
表2实施例1分析方法的精密度
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | RSD％ |
| 2471.763 | 2486.998 | 2496.433 | 2398.156 | 2508.756 | 2478.053 | 1.58％ |
(c)试验结论：
上述浓度为0.12μL/mL的N-乙酰基己内酰胺对照品待测溶液重复测定6次峰面积的RSD(％)为1.58％，表明该方法有较好的精密度，符合GB/T27404-2008《实验室质量控制规范》的要求，即GB/T27404-2008要求精密度RSD＜3.8％。
(5)稳定性试验
(a)试验方法：
将上述浓度为0.12μL/mL的N-乙酰基己内酰胺对照品待测溶液分别在室温下放置0h、2h、4h、6h、8h、10h后，按上述色谱条件进行测定峰面积，计算其RSD(％)。
(b)试验数据：
稳定性试验的试验数据如表3所示：
表3实施例1分析方法的稳定性
| 0 | 2 | 4 | 6 | 8 | 10 | RSD％ |
| 2488.763 | 2486.998 | 2496.433 | 2528.156 | 2508.756 | 2578.053 | 1.38％ |
(c)试验结论：
上述浓度为0.12μL/mL的N-乙酰基己内酰胺对照品待测溶液分别在室温下放置0h、2h、4h、6h、8h、10h后，RSD(％)为1.38％，表明N-乙酰基己内酰胺对照品溶液在室温下10小时内的稳定性良好。
(6)回收率试验
(a)试验方法：
加标：精密量取约0.1mL含有N-乙酰基己内酰胺的原材料样品9份，置于50mL容量瓶中，分成3组，每组3份，各组分别精密量取并加入N-乙酰己内酰胺含量≥99％的N-乙酰基己内酰胺标准品0.1mL、0.2mL、0.3mL，用乙腈溶解并稀释至刻度，摇匀，混合均匀，然后分别精密量取1mL，分别用乙腈定容置于50mL容量瓶中，再通过0.22μm滤膜过滤后，按本实施例的色谱条件进行HPLC测定。回收率试验的试验数据如表4所示：
表4实施例1分析方法的回收率
测得加入量＝加标样品测得量-样品测得量；
回收率(％)＝测得加入量/理论加入量。
(b)试验结论：
N-乙酰基己内酰胺平均回收率为：102.62％，相对标准偏差(RSD)为1.21％，符合GB/T27404-2008《实验室质量控制规范》的要求，即GB/T27404-2008要求回收率为95～105％。
(7)干扰性试验
(a)精密量取浓度为0.0536μL/mL的N-乙酰基己内酰胺对照品3mL，置于50mL容量瓶中定容，再通过0.22μm滤膜过滤后，注入高效液相色谱进样瓶，做好标记，按照色谱条件进行检测，得到该对照品的高效液相色谱图，如图4所示，图4为N-乙酰基己内酰胺对照品的高效液相色谱图。
(b)精确称取0.1g己内酰胺，置于50mL容量瓶中定容。再从50mL定容溶液精密量取3mL，同时精密量取浓度为0.0536μL/mL的N-乙酰基己内酰胺对照品3mL，置于50mL容量瓶中定容，再通过0.22μm滤膜过滤后，注入高效液相色谱进样瓶，做好标记，按照色谱条件进行检测，得到该干扰品的高效液相色谱图，如图5所示，图5为干扰品的高效液相色谱图。
(c)试验结论：
对比图4和图5可知，在本实施例的色谱条件下，N-乙酰基己内酰胺与己内酰胺等酰胺类化合物可以实现基线分离，不会干扰N-乙酰基己内酰胺的检测，表明此方法可以更好的区分N-乙酰基己内酰胺与己内酰胺的检测。
(8)结论
对本实施例的分析方法进行了空白、线性关系、检出限、定量限、精密度、稳定性、回收率、干扰性等试验，结果均符合GB/T27404-2008《实验室质量控制规范》的要求，证明含量测定方法科学有效，能对消毒剂中的N-乙酰基己内酰胺含量起到质量控制的目的。
实施例2
1、仪器、试剂和样品
和实施例1相同。
2、色谱条件
和实施例1相同。
3、溶液制备
(1)N-乙酰基己内酰胺原材料样品储备液的制备
精密量取N-乙酰基己内酰胺原材料样品0.1mL，置于50mL容量瓶中，加乙腈约30mL，振摇3min，用乙腈稀释至刻度，摇匀，滤过，作为N-乙酰基己内酰胺原材料样品储备液。
(2)N-乙酰基己内酰胺原材料样品待测溶液的制备
从上述N-乙酰基己内酰胺原材料样品储备液中精密量取续滤液3mL，用乙腈定容置于50mL容量瓶中，再通过0.22μm滤膜过滤后，得到N-乙酰基己内酰胺原材料样品待测溶液，注入高效液相色谱进样瓶，做好标记。
4、HPLC检测
按照本实施例的色谱条件对上述原材料样品待测溶液进行检测，得到该原材料样品待测溶液的高效液相色谱图，如图6所示，图6为N-乙酰基己内酰胺原材料样品待测溶液的高效液相色谱图。
将所得的N-乙酰基己内酰胺原材料样品待测溶液的高效液相色谱图和对照品溶液的高效液相色谱图进行比较，样品相对保留时间相近(误差范围0.2％)的组分即初步认为是相应的N-乙酰基己内酰胺，再将N-乙酰基己内酰胺原材料样品待测溶液的高效液相色谱图中该相对保留时间内的化合物峰面积代入标准曲线，计算出原材料样品中N-乙酰基己内酰胺的含量。计算结果得出98.61％。
实施例3
1、仪器、试剂和样品
和实施例1相同。
2、色谱条件
和实施例1相同。
3、溶液制备
(1)某市售消毒剂储备液的制备
精密量取某市售消毒剂0.1mL，置于50mL容量瓶中，加乙腈约30mL，振摇3min，用乙腈稀释至刻度，摇匀，滤过，作为某市售消毒剂储备液。
(2)某市售消毒剂待测溶液的制备
从上述储备液中精密量取续滤液3mL，用乙腈定容置于50mL容量瓶中，再通过0.22μm滤膜过滤后，得到某市售消毒剂待测溶液，注入高效液相色谱进样瓶，做好标记。
4、HPLC检测
按照本实施例的色谱条件对上述某市售消毒剂待测溶液进行检测，得到该待测溶液的高效液相色谱图，如图7所示，图7为某市售消毒剂待测溶液的高效液相色谱图。
将所得的某市售消毒剂待测溶液的高效液相色谱图和对照品溶液的高效液相色谱图进行比较，样品相对保留时间相近(误差范围0.2％)的组分即初步认为是相应的N-乙酰基己内酰胺，再将某市售消毒剂待测溶液的高效液相色谱图中该相对保留时间内的化合物峰面积代入标准曲线，计算出样品N-乙酰基己内酰胺含量。如图8所示，图8为某市售消毒剂的含量测定图，计算结果得出某市售消毒剂中N-乙酰基己内酰胺含量为48.32％。
对比例1
1、仪器、试剂和样品
Agilent 1260Infinity II高效液相色谱仪，DAD检测器，四元高压梯度泵；色谱柱为Waters SunFire C18(5μm，4.6×250mm)；乙腈为色谱纯；
2、色谱条件
流动相：体积比为10:90的乙腈和水；
检测波长：210nm；
流动相的流速：1.0mL/min；
进样量：20μL；
柱温：30℃；
样品预处理采用乙腈超声溶解取样。
3、溶液制备
(1)N-乙酰基己内酰胺对照品溶液的制备
(a)N-乙酰基己内酰胺对照品储备液的制备
精密量取N-乙酰基己内酰胺对照品0.1mL，置于50mL容量瓶中，用乙腈溶解并稀释至刻度，摇匀，混合均匀，作为N-乙酰基己内酰胺对照品储备液。
(b)N-乙酰基己内酰胺对照品待测溶液的制备
从上述储备液中精密量取续滤液3mL，用乙腈定容置于50mL容量瓶中，配制得到浓度为0.12μL/mL的N-乙酰基己内酰胺对照品待测溶液，再通过0.22μm滤膜过滤后，注入高效液相色谱进样瓶，做好标记。
(c)本对比例标准曲线绘制所需对照品待测溶液的制备
从本对比例的N-乙酰基己内酰胺对照品储备液中精密量取1mL、2mL、3mL、4mL、5mL溶液，分别用乙腈定容并置于50mL容量瓶中，配制得到浓度为0.04μL/mL、0.08μL/mL、0.12μL/mL、0.16μL/mL、0.20μL/mL的本对比例标准曲线绘制所需对照品待测溶液，分别注入高效液相色谱进样瓶，做好标记。
(2)某市售消毒剂溶液的制备
(a)某市售消毒剂储备液的制备
精密量取某市售消毒剂0.1mL，置于50mL容量瓶中，加乙腈约30mL，振摇3min，用乙腈稀释至刻度，摇匀，滤过，作为本对比例的某市售消毒剂储备液。
(b)某市售消毒剂待测溶液的制备
从上述某市售消毒剂储备液中精密量取续滤液3mL，用乙腈定容置于50mL容量瓶中，配制得到某市售消毒剂待测溶液，再通过0.22μm滤膜过滤后，注入高效液相色谱进样瓶，做好标记。
4、方法学验证
(1)线性范围确认
采用本对比例的色谱条件对上述各个浓度的本对比例标准曲线绘制所需对照品待测溶液分别进行HPLC检测，试验数据如表5所示：
表5对比例1的分析方法的线性关系
按照表5的数据，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，进行线性分析并绘制标准工作曲线，得到线性评价如下：N-乙酰基己内酰胺的相关系数R为0.537069，所以用该方法测定N-乙酰基己内酰胺在浓度0.04μL/mL至0.2μL/mL之间。
(2)检出限和定量限
分析方法的定量限和检出限由信噪比(S/N)计算。
当信噪比(S/N)为3时，N-乙酰基己内酰胺检出限为0.09918μL/mL，得到方法的N-乙酰基己内酰胺检出限为0.09918μL/mL。
当信噪比(S/N)为10时，N-乙酰基己内酰胺定量限为0.3306μL/mL，得到方法的N-乙酰基己内酰胺定量限为0.3306μL/mL。
(3)精密度实验
(a)试验方法：
将本对比例的浓度为0.12μL/mL的N-乙酰基己内酰胺对照品待测溶液按本对比例的色谱条件重复测定6次，计算其峰面积RSD(％)。
(b)试验数据：
表6对比例1分析方法的精密度
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | RSD％ |
| 593.403 | 516.658 | 495.63 | 603.525 | 619.752 | 478.786 | 10.14％ |
(c)试验结论：
本对比例的N-乙酰基己内酰胺对照品待测溶液重复测定6次峰面积的RSD(％)为10.14％，不符合GB/T27404-2008《实验室质量控制规范》的要求，即GB/T27404-2008要求精密度RSD＜3.8％。
(4)结论
将本对比例与实施例1的方法学验证结果进行对比，实施例1的试验结果测量精度更加准确，浓度测量范围更广，浓度检测下限更低。
5、HPLC检测
将本对比例的对照品待测溶液和某市售消毒剂待测溶液按照本对比例的色谱条件进行检测，得到各自的高效液相色谱图。将样品的高效液相色谱图和对照品的高效液相色谱图进行比较，样品相对保留时间相近(误差范围0.2％)的组分即初步认为是相应的N-乙酰基己内酰胺。再将样品溶液高效液相色谱图中相对保留时间内化合物峰面积代入标准曲线，计算出样品N-乙酰基己内酰胺含量。
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
Claims (3)
1.一种消毒剂中N-乙酰基己内酰胺的检测方法，包括：
将0.1 mL的消毒剂用乙腈定容至50 mL，得到消毒剂储备液；从得到的所述消毒剂储备液中取续滤液3 mL用乙腈定容至50 mL，再通过0.22 μm滤膜过滤后，得到待测样品，采用HPLC对所述待测样品进行检测；
所述HPLC的色谱条件为：色谱柱为ZORBAX C18色谱柱；
流动相为乙腈水溶液，所述乙腈水溶液中乙腈和水的体积比为75:25；
所述HPLC的标准曲线线性范围为0.01~0.30 μL/mL；
所述HPLC的检测波长为220 nm；
所述色谱柱的柱温为30℃。
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述流动相的流速为0.5~1.5 mL/min。
3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述HPLC进行检测时的进样量为0.1~20 μL。
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