CN114989375A - 一种两亲嵌段聚合物和放化疗纳米增敏剂及其制备方法 - Google Patents

一种两亲嵌段聚合物和放化疗纳米增敏剂及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明属于生物医用高分子材料领域，公开了一种两亲嵌段聚合物和放化疗纳米增敏剂及其制备方法。经过化学改性，使得制备得到的两亲嵌段聚合物具有深度肿瘤穿透、酶响应性药物释放/激活的特性，同时将具有乏氧响应性的化疗前药与两亲嵌段聚合物通过物理包埋自组装得到稳定的高载药率的放化疗纳米增敏剂，其具有电荷反转以及级联响应特性。在影响大多数常规肿瘤个体化疗效的缺氧肿瘤微环境中，本发明所提供的放化疗纳米增敏剂所释放的化疗前药和两亲嵌段聚合物可以有效地使肿瘤细胞对放化疗敏感，可以同时解决药物深度渗透以及克服缺氧脱敏的问题。

Description

一种两亲嵌段聚合物和放化疗纳米增敏剂及其制备方法
技术领域
本发明属于生物医用高分子材料技术领域，具体涉及一种两亲嵌段聚合物和放化疗纳米增敏剂及其制备方法。
背景技术
随着现代社会的人类寿命增长以及环境因素影响，癌症正成为患病率最高以及致死率最高的疾病之一。据权威机构发布的论文显示，仅2020年一年共新增癌症患者就达1929万，死亡人数竟高达996万。目前临床常用的治疗方法是手术切除辅助化学治疗，这是唯一可以治愈的治疗方法。但是并不是所有患者都可以进行手术切除，另外手术切除存在术后并发症、手术切除不彻底以及切除过多造成的创伤性等缺点。对于无法进行手术切除的患者，则只能选择化学治疗和放射性疗法进行治疗。尽管目前临床上多种药物的综合化疗方法和不断研发的新型化疗药物延长了患者的生存期并提高了生存率，但是存在着产生毒副作用以及治疗效果并不显著等缺点，这不仅会减低患者的生存质量同时也限制了临床药物的治疗连续性，最终导致治疗效果有限、副作用过大等现状。
导致大多数癌症患者化疗效果有限的主要原因有两个：第一个原因是人体血液系统的清除系统，其限制了药物到达肿瘤组织的有效浓度；第二个原因是癌症组织存在致密的纤维化细胞间质、间质液产生的内压过高以及毛细管血管网缺失等因素，这阻碍了药物向肿瘤组织的扩散，尤其是大分子的扩散。传统的PEG水溶性纳米药物或者脂质体纳米药物尽管可以有效地避免身体中的清除系统，但是一方面其穿透能力很弱，另外一方面其又很难被癌症细胞吞噬，因此很大程度上限制了它们的疗效。
目前，具有促进渗透特性的智能纳米药物被认为可以克服这些生物屏障，这些药物具有靶向性、响应性并且可以随着环境改变自身理化性质，可以激活药物在肿瘤组织内部的有效被动扩散。这种理化性质的改变不仅可以提高纳米药物在体内的运输效率，同时本身阳离子的特性可以促进其被细胞吞噬以及增加其对肿瘤的渗透。因此，利用理化性质转变同时改变运输效率和渗透作用的新策略被认为是克服化疗治疗有限的解决方案。
另外，癌症内部血管缺失和致密间质导致内部产生乏氧区，乏氧会阻碍放疗治疗的效果，导致癌症患者表现出放疗抗性。目前临床上的解决方法是使用放射增敏剂进行辅助放疗，如吉西他滨、卡培他滨或氟尿嘧啶等。同时结合多个靶向药物和放射增敏剂的个体化放化疗也显示可以延长患者的生存期，增加对不同癌症患者的治疗差异性。此外，纳米技术也应用于放射增敏剂的个体化放化疗研究中，鉴于临床上常用的小分子放射增敏剂药物具有系统毒性，具有更好安全性的纳米放射增敏剂不可避免地成为更具竞争力的选择。然而，目前研究报道的纳米技术无法同时解决药物深度渗透以及能够克服缺氧脱敏的问题。因此，亟需设计一种可以同时解决药物深度渗透以及能够克服缺氧脱敏问题的纳米技术。
发明内容
针对现有技术中的纳米技术无法同时解决药物深度渗透以及能够克服缺氧脱敏的问题，本发明提供了一种两亲嵌段聚合物和放化疗纳米增敏剂及其制备方法，将该放化疗纳米增敏剂用于解决肿瘤个体化治疗所面临的生物屏障和微环境限制。本发明经过化学改性制备得到的两亲嵌段聚合物具有深度肿瘤穿透、酶响应性药物释放/激活的特性以及乏氧响应性，同时将具有乏氧响应性的化疗前药与两亲嵌段聚合物通过物理包埋自组装得到稳定的高载药率放化疗纳米增敏剂，其具有电荷反转以及级联响应特性。在影响大多数常规肿瘤个体化疗效的缺氧肿瘤微环境中，本发明所提供的放化疗纳米增敏剂所释放的化疗前药和两亲嵌段聚合物可以有效地使肿瘤细胞对放化疗敏感。体外细胞实验验证了其在乏氧环境中具有电荷反转、高内吞速率、高细胞生长抑制效果和放疗敏感性，同时在构建的皮下肿瘤模型中，该放化疗纳米增敏剂可以实现显著的肿瘤抑制作用，展示了在放化疗联合个体化治疗领域中的极大应用潜力。
为了实现上述发明目的，本发明的第一方面提供了一种两亲嵌段聚合物，其中，所述两亲嵌段聚合物具有式(1)所示的结构：
Figure BDA0003686044390000021
其中，R1为活性自由基聚合引发基团，R10为H原子或C1-C5的烷基，R11为O原子或N原子，R2为酶响应分子，R3为乏氧响应基团，R30为氧化还原敏感基团，R4为引发剂连接基团，X为酶响应分子键合基团，10≤m≤100，20≤n≤200，m、n均为整数。
在一种优选的实施方式中，所述活性自由基聚合引发基团R1为二硫代酯及其衍生物、三硫代酯及其衍生物、二硫代碳酸酯及其衍生物、二硫代氨基甲酸酯及其衍生物或卤素基团及其衍生物。
在一种优选的实施方式中，所述乏氧响应基团R3为2-硝基咪唑及其衍生物、4-硝基咪唑及其衍生物或5-硝基咪唑及其衍生物。
在一种优选的实施方式中，所述氧化还原敏感基团R30为二硫缩酮键、单硫键、单硒键、二硫键、三硫键或二硒键。
在一种优选的实施方式中，所述酶响应分子R2为γ-谷氨酰转肽酶响应分子、成纤维蛋白酶响应分子、金属蛋白酶响应分子或组织蛋白酶响应分子。
在一种优选的实施方式中，所述酶响应分子键合基团X具有式(3)所示的结构：
Figure BDA0003686044390000031
本发明的第二方面提供了一种放化疗纳米增敏剂，其中，所述放化疗纳米增敏剂含有上述两亲嵌段聚合物和化疗前药，所述两亲嵌段聚合物和化疗前药的质量比为100:(0～100)；所述化疗前药具有式(4)所示的结构：
Figure BDA0003686044390000032
其中，R5为抗癌化疗药物分子。
在一种优选的实施方式中，所述抗癌化疗药物分子R5为紫杉醇、紫杉醇衍生物、阿霉素、表阿霉素、喜树碱、喜树碱衍生物、顺铂类药物、长春碱、长春新碱、多西他赛、吉西他滨、姜黄素或丹酚酸。
本发明的第三方面提供了一种放化疗纳米增敏剂的制备方法，其中，该方法包括以下步骤：
S1：于避光条件下，将上述两亲嵌段聚合物以及化疗前药溶解于有机溶剂I中，得到含两亲嵌段聚合物和化疗前药的溶液；所述化疗前药具有式(4)所示的结构：
Figure BDA0003686044390000041
其中，R5为抗癌化疗药物分子；
S2：将步骤S1所得含两亲嵌段聚合物和化疗前药的溶液加入到有机溶剂II-纯水混合相中进行高速搅拌，得到含放化疗纳米增敏剂的溶液；
S3：将步骤S2所得含放化疗纳米增敏剂的溶液于纯水中进行透析以除去有机溶剂I和有机溶剂II，得到放化疗纳米增敏剂。
本发明的第四方面提供了由上述方法制备得到的放化疗纳米增敏剂。
本发明为了克服肿瘤放化疗个体化治疗过程中的药物递送障碍和放射抗性，构建了一种具有高载药效率、高稳定性和级联响应特性的放化疗纳米增敏剂。通过化学修饰，在两亲嵌段聚合物上同时引入酶响应分子、乏氧响应基团以及氧化还原敏感基团，该聚合物在酶激活过后可以实现电荷转换，实现了有效的内吞作用和转胞吞作用，从而进一步驱动肿瘤深度穿透。在两亲嵌段聚合物上负载的化疗前药因为有甲硝唑的化学修饰，因此其载药率和包封率都比较高，并且可以在癌细胞内被过量酶选择性地激活。此外，在影响大多数常规个体化放化疗效的缺氧肿瘤微环境中，释放的化疗药物和甲硝唑残基可以有效地使肿瘤细胞对放化疗敏感。
附图说明
图1为N3-PEG-CTA的核磁谱图；
图2为MASSCOOH的核磁谱图；
图3为MASSMI的核磁谱图；
图4为PSSM的核磁谱图；
图5为BAP的核磁谱图；
图6为GBAP的核磁图谱；
图7为PSSMG的核磁图谱；
图8为放化疗纳米增敏剂纳米粒子在GSH(10μM、5mM和10mM)响应下CM释放曲线；
图9为放化疗纳米增敏剂纳米粒子在10mM的GSH响应下DLS粒径变化曲线；
图10为放化疗纳米增敏剂纳米粒子在乏氧响应下CM释放曲线；
图11为放化疗纳米增敏剂纳米粒子在乏氧响应下DLS粒径变化曲线；
图12为放化疗纳米增敏剂纳米粒子在GGT酶催化下Zeta电位电荷反转曲线；
图13为放化疗纳米增敏剂纳米粒子在GGT酶催化下细胞内吞量柱状图；
图14(A)为常氧下不同给药实验组和(B)为乏氧下不同给药实验组与BxPC-3细胞作用的MTT细胞生存曲线；
图15为乏氧下不同给药实验组与BxPC-3细胞作用的细胞放疗增敏代表性集落图片；
图16为PSSMG纳米粒子在GGT酶催化下转胞吞作用的共聚焦显微镜图片；
图17为PSSM纳米粒子和PSSMG纳米粒子对肿瘤渗透的3D肿瘤球的共聚焦显微镜图片；
图18为不同给药实验组对皮下BxPC-3胰腺癌皮下肿瘤模型小鼠的联合协同抑瘤曲线。
具体实施方式
以下将通过实施例对本发明进行详细描述。
本发明的第一方面提供了一种两亲嵌段聚合物，其中，所述两亲嵌段聚合物具有式(1)所示的结构：
Figure BDA0003686044390000051
其中，R1为活性自由基聚合引发基团，R10为H原子或C1-C5的烷基，R11为O原子或N原子，R2为酶响应分子，R3为乏氧响应基团，R30为氧化还原敏感基团，R4为引发剂连接基团，X为酶响应分子键合基团，10≤m≤100，20≤n≤200，m、n均为整数。
本发明中，所述活性自由基聚合引发基团R1可以为可逆加成-断裂链转移聚合(RAFT)链转移基团、原子转移自由基聚合(ATRP)链转移基团或其他非自由基聚合的链转移基团中的至少一种。优选地，所述活性自由基聚合引发基团R1可以为二硫代酯及其衍生物、三硫代酯及其衍生物、二硫代碳酸酯及其衍生物、二硫代氨基甲酸酯及其衍生物或卤素基团及其衍生物。在一种具体的实施方式中，所述活性自由基聚合引发基团R1为三硫代酯及其衍生物，其具体结构特别优选如式(1-1)所示：
Figure BDA0003686044390000061
其中，R1-1可以为C1-C20的烷基，优选为C10-C20的烷基，更优选为正十二烷基。
本发明中，所述酶响应分子R2与两亲嵌段聚合物连接的酶切作用位点为上述式(1)所示结构中的氨基，酶切作用过后暴露氨基使两亲嵌段聚合物带正电荷。所述酶响应分子R2优选为γ-谷氨酰转肽酶响应分子、成纤维蛋白酶响应分子、金属蛋白酶响应分子或组织蛋白酶响应分子，更优选为γ-谷氨酰转肽酶响应分子。
本发明中，其中，式(1)中含有具有式(2)所示结构的刺激响应性化学键：
Figure BDA0003686044390000062
式(2)中，R10可以为H原子或C1-C5的烷基，R11可以为O原子或N原子。
本发明中，所述乏氧响应基团R3优选为2-硝基咪唑及其衍生物、4-硝基咪唑及其衍生物或5-硝基咪唑及其衍生物，在一种具体的实施方式中，所述乏氧响应基团R3为甲硝唑，其在乏氧环境下可以被还原，从而具有乏氧响应性。
本发明中，所述氧化还原敏感基团R30优选为二硫缩酮键、单硫键、单硒键、二硫键、三硫键或二硒键，更优选为二硫键，其能够被谷胱甘肽还原，从而具有氧化还原响应性。
在一种具体的实施方式中，本发明所提供的两亲嵌段聚合物具有乏氧响应(甲硝唑)和还原响应(二硫键)的双响应性质。
本发明对所述引发剂连接基团R4为没有特别的限定，只要能够起到连接两亲嵌段聚合物即可。在一种具体的实施方式中，所述引发剂连接基团R4具有式(1-2)所示的结构：
Figure BDA0003686044390000063
本发明中，所述酶响应分子键合基团X为通过(a)酰胺化反应、(b)点击化学和(c)迈克尔加成反应中的至少一种将酶响应分子R2引入到两亲嵌段聚合物上所形成的键合基团，所述酶响应分子键合基团X具有式(3)所示的结构：
Figure BDA0003686044390000071
在一种具体的实施方式中，所述酶响应分子键合基团X为通过(b)点击化学将酶响应分子R2引入到两亲嵌段聚合物上所形成的键合基团。考虑到合成的难易程度，酶响应分子键合基团X特别优选为三氮唑。所述三氮唑的结构如式(3b-1)所示：
Figure BDA0003686044390000072
本发明通过化学改性制备得到的两亲嵌段聚合物具有乏氧响应性、氧化还原响应性以及酶响应性，从而具有深度肿瘤穿透、酶反应性药物释放/激活的特性。
本发明的第二方面提供了一种放化疗纳米增敏剂，其中，含有上述两亲嵌段聚合物和化疗前药，所述两亲嵌段聚合物和化疗前药的质量比为100:(0～100)，如100:0、100:0.1、100:1、100:5、100:10、100:15、100:20、100:30、100:40、100:50、100:60、100:70、100:80、100:90、100:100等。其中，所述化疗前药具有式(4)所示的结构：
Figure BDA0003686044390000073
其中，R5为抗癌化疗药物分子。
优选地，所述抗癌化疗药物分子R5为紫杉醇、紫杉醇衍生物、阿霉素、表阿霉素、喜树碱、喜树碱衍生物、顺铂类药物、长春碱、长春新碱、多西他赛、吉西他滨、姜黄素和丹酚酸中的至少一种。考虑到合成的难易程度，化疗前药的具体实施例包括但不限于为顺铂类药物，顺铂类化疗前药的结构如式(4-1)所示：
Figure BDA0003686044390000081
本发明的第三方面提供了一种放化疗纳米增敏剂的制备方法，其中，该制备方法包括以下步骤：
S1：于避光条件下，将上述两亲嵌段聚合物以及化疗前药溶解于有机溶剂I中，得到含两亲嵌段聚合物和化疗前药的溶液；所述化疗前药具有式(4)所示的结构：
Figure BDA0003686044390000082
其中，R5为抗癌化疗药物分子
S2：将步骤S1中所得含两亲嵌段聚合物和化疗前药的溶液加入到有机溶剂II-纯水混合相中进行高速搅拌，得到含放化疗纳米增敏剂的溶液；
S3：将步骤S2中所得含放化疗纳米增敏剂的溶液于纯水中进行透析以除去有机溶剂I、II，得到放化疗纳米增敏剂。
需要说明的是，在本发明中，为了便于描述，将制备过程中所需的两次有机溶剂称为“有机溶剂I”和“有机溶剂II”的目的仅是为了区别不同对象，而不能理解为指示或暗示其的相对重要性。
本发明对步骤S1中所采用的有机溶剂I没有特别的限制，只要是能够将两亲嵌段聚合物以及化疗前药充分溶解即可，优选地，有机溶剂I的具体实例包括但不限于：DMF和/或DMSO。
本发明对步骤S2中所采用的有机溶剂II没有特别的限制，只要是其与纯水的混合相能够制备得到物理包埋自组装的放化疗纳米增敏剂即可。优选地，有机溶剂II与有机溶剂I为相同的有机溶剂。本发明对步骤S2中所采用的高速搅拌的条件没有特别的限定，优选采用搅拌速率为400～600rpm，例如：400rpm、600rpm、600rpm。搅拌时间为40～80min，例如40min、50min、60min、70min、80min。
本发明对步骤S3中的透析条件没有特别的限制，只要是能够将有溶剂机I、II除净即可。
本发明的第四方面提供了一种由上述方法制备得到的放化疗纳米增敏剂。
制备例
(1)合成叠氮端甲氧基聚乙二醇二硫代正十二烷酯(N3-PEG-CTA)链转移剂
Figure BDA0003686044390000091
(1a)合成小分子引发剂(CTA-COOH)
准确称取(7.3g,130mmol)KOH固体于三颈烧瓶中并加入220mL去离子水溶解，缓慢滴加(24mL,95mmol)正十二硫醇并高速搅拌形成水乳浊液。再准确称取(0.4g,1mmol)Aliqut336(甲基三辛基氯化铵)和(6mL,100mmol)CS2，混匀后缓慢滴加至上述水乳浊液中，滴加完毕后于室温下反应1h。接着于冰盐浴-5℃下缓慢加入(10g,52.45mmol)对甲苯磺酰氯反应2h，之后再于冰浴0℃下反应1h。反应结束后采用布氏漏斗进行过滤，冰水洗涤得黄色固体，进一步采用丙酮进行重结晶，过滤，所得晶体即为中间产物，记为1-a。
准确称取(3.25g)中间产物1-a和(3.25g,11.60mmol)引发剂V501(4,4'-偶氮双(4-氰基戊酸))，加入乙酸乙酯溶解并于90℃下避光加热回流24h。反应结束后对所得溶液进行旋蒸浓缩得到浓缩液，浓缩液以纯乙酸乙酯作为流动相进行硅胶柱过柱纯化，收集合并流动相并进行旋蒸得到黄色固体，记为CTA-COOH。
(1b)合成大分子链转移剂N3-PEG-CTA：
准确称取(2.25g,0.45mmol)叠氮端甲氧基聚乙二醇mPEG5K-N3以及(1.612g,4mmol)CTA-COOH并溶于50mL新鲜除水的二氯甲烷中，依次加入4-二甲氨基吡啶(DMAP)、乙酸乙酯和1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺(EDC)，于室温条件下反应3d。反应结束后采用布氏漏斗进行过滤，收集滤液并旋干溶剂后采用无水乙醚进行重结晶并过滤，将固体产物置于真空烘箱中进行干燥12h得到所需产物，记为N3-PEG-CTA，其核磁谱图见图1。从图1可以看出，得到的产物即为N3-PEG-CTA。
(2)合成具有氧化还原响应的叠氮端甲氧基聚乙二醇二硫代酯(PSSM)
Figure BDA0003686044390000101
(2a)合成单体MASSMI
准确称取(1g,7.68mmol)甲基丙烯酸羟乙酯HEMA、(6.45g,30.72mmol)3,3'-二硫代二丙酸DTDPA和(85.29mg,0.7mmol)DMAP进行混合，加入60mL新鲜除水的THF后并于室温下反应12h，得到反应混合物。接着在0℃冰浴条件下冷却反应混合物1h。将(1.74g,8.44mmol)二环己基碳二亚胺(DCC)溶于20mL新鲜除水的THF后滴入到反应混合物中进行剧烈搅拌，在室温下反应24h。反应结束后采用布氏漏斗进行过滤，收集滤液并进行旋蒸，加入50mL CHCl3溶解后过滤，并采用盐水洗涤三次后，旋转蒸发即得产物，记为MASSCOOH，其核磁谱图见图2。从图2可以看出，得到的产物即为MASSCOOH。
准确称取(7.431g,23mmol)MASSCOOH、(3.944g,23mmol)甲硝唑(MI)和(0.25g,2.3mmol)DMAP进行混合，加入100mL新鲜除水的THF后在室温下反应12h，得到反应混合物。接着在0℃冰浴条件下冷却反应混合物1h。将(5.22g,25.32mmol)DCC溶于20mL新鲜除水的THF后滴入到反应混合物中进行剧烈搅拌，在室温下反应24h。反应结束后采用布氏漏斗进行过滤，收集滤液并进行旋蒸浓缩后进行硅胶柱过柱纯化，收集合并流动相并进行旋蒸得到产物，记为MASSMI，其核磁谱图见图3。从图3可以看出，得到的产物即为MASSMI。
(2b)合成具有氧化还原响应的叠氮端甲氧基聚乙二醇二硫代酯(PSSM)
取一干燥洁净的Schlenk瓶，进行抽真空-充氩气三次，在氩气环境中依次加入准确称量好的(0.2g,0.036mmol)大分子链转移剂N3-PEG-CTA、2mg引发剂V501和(0.6g,1.26mmol)单体MASSMI，用5mL超干DMSO溶剂进行搅拌溶解，反应体系冷冻抽排循环三次，然后在70℃条件下反应24h。反应结束后液氮猝灭反应，采用纯水进行透析除去未反应的单体及杂质，冻干得到产物，记为PSSM，其核磁谱图见图4。从图4可以看出，得到的产物即为PSSM。
(3)合成具有酶响应和氧化还原响应的双响应叠氮端甲氧基聚乙二醇二硫代酯(PSSMG)
(3a)合成GGT酶响应缀合物(GBAP)
Figure BDA0003686044390000111
准确称取(2g,9.85mmol)Boc-L-2-氨基丁酸和(1.78g,10.98mmol)N,N-碳酰二咪唑(CDI)溶解在20mL新鲜除水的二氯甲烷中，并于室温下搅拌2h后加入(0.4g,15mmol)炔丙胺和(3.5mL,24.7mmol)三乙胺，在室温下反应24h。反应结束后分别采用1M HCl(50mL)和饱和NaHCO3水溶液(50mL)进行洗涤三次，收集有机层进行无水Na2SO4干燥后真空蒸发，将所得产物记为BTP。之后将所得产物BTP溶于(v:v＝1:1,8mL)CH2Cl2/TFA(三氟乙酸)溶液中，室温下搅拌过夜后进行旋蒸得到中间产物，记为BAP，其核磁谱图见图5。从图5可以看出，得到的产物即为BAP。
准确称取(0.42g,3.72mmol)BAP和(0.67g,4.14mmol)CDI溶解在20mL新鲜除水的二氯甲烷中，并于室温下搅拌2h后加入(1.3mL,9.32mmol)三乙胺和(1.13g，3.72mmol)boc-Glu-otbu(Boc-L-谷氨酸-1-叔丁酯)，在室温下反应24h，接着分别采用1M HCl(50mL)以及饱和NaHCO3水溶液(50mL)进行洗涤三次，收集有机层进行无水Na2SO4干燥后真空蒸发，将所得产物记为GBTP。之后将所得产物BTP溶于(v:v＝1:1,8mL)CH2Cl2/TFA(三氟乙酸)溶液中，室温下搅拌过夜后进行旋蒸得到中间产物，记为GBAP，其核磁谱图见图6。从图6可以看出，得到的产物即为GBAP。
(3b)合成具有酶响应和氧化还原响应的双响应叠氮端甲氧基聚乙二醇二硫代酯(PSSMG)
Figure BDA0003686044390000121
PSSMG是通过炔基封端的GBAP和叠氮基封端的PSSM经CuAAC点击化学合成。将(0.02g,0.28mmol)GBAP、(0.2g,0.028mmol)PSSM和(80mg,0.028mmo)五甲基二乙烯三胺(PMDETA)以及5mL水加入到25mL的schlenk瓶中，在对体系进行冷冻抽排解冻循环三次之后，在氩气保护下添加(0.055g,0.28mmol)抗坏血酸钠和(0.035g,0.14mmol)硫酸铜五水化物，在室温下反应24h后结束反应，之后将所得溶液用PBS缓冲液透析24h，冻干得到固体产物，记为PSSMG，其核磁谱图见图7。从图7可以看出，得到的产物即为PSSMG。PSSMG聚合物为两亲嵌段聚合物，同时具有酶响应和氧化还原响应的双响应特性。
(4)合成顺铂化疗前药(CM)
Figure BDA0003686044390000122
(4a)合成氧化顺铂(Pt-OH)
准确称取(1g,3.33mmol)顺铂并溶于25mL水中，然后滴加35mL双氧水溶液，在70℃条件下避光反应5h。反应结束后于4℃条件下结晶，采用布氏漏斗进行过滤，所得产物用冰水和冰乙醇分别洗涤，干燥后得到氧化顺铂产物，记为Pt-OH。
(4b)合成羧酸化顺铂(Pt-COOH)
准确称取(0.8g,2.4mmol)Pt-OH并溶于30mL新鲜除水的DMF中，加入(0.24g,2.4mmol)丁二酸酐，在75℃条件下反应12h。反应结束后采用布氏漏斗进行过滤，收集滤液进行旋蒸浓缩后于冰乙醚和丙酮中沉淀重结晶，真空干燥得到羧酸化顺铂，记为Pt-COOH。
(4c)合成顺铂化疗前药(CM)
准确称取(0.5g,1.15mmol)Pt-COOH、(0.197g,1.15mmol)甲硝唑、(0.22g，1.15mmol)EDC和(0.014g，0.015mmol)DMAP并溶于20mL新鲜除水的DMF中，室温下反应24h。反应结束后采用布氏漏斗进行过滤，收集滤液进行旋蒸浓缩得到浓缩液，浓缩液以乙酸乙酯作为流动相进行硅胶柱过柱纯化，收集合并流动相并进行旋蒸得到顺铂化疗前药，记为CM。
(5)合成放化疗纳米增敏剂
准确称取10mg具有酶响应和氧化还原响应的双响应叠氮端甲氧基聚乙二醇二硫代酯PSSMG和5mg顺铂化疗前药CM，将这两者加入1mL DMF中进行充分溶解，得到含两亲嵌段聚合物PSSMG和顺铂化疗前药CM的溶液。随后用注射器吸取1mL含两亲嵌段聚合物PSSMG和顺铂化疗前药CM的溶液，安置在注射泵上，以1mL/h流速注入到9mL混合相(由DMF和十倍体积的纯水组成)当中以500rpm的搅拌速率进行高速搅拌60min得到含物理包埋自组装的放化疗纳米增敏剂的溶液。组装完成后继续搅拌24h，随后将含放化疗纳米增敏剂的溶液转移至MWCO3000 KD的透析袋中，在超纯水中透析以除去DMF有机溶剂。透析结束后，用0.45μm滤膜进行过滤得到纯化的放化疗纳米增敏剂，并放入4℃冰箱冷藏保存。
测试例
(1)GSH响应体外释放
采用渗析法研究了在10μM、5mM和10mM谷胱甘肽(GSH)的浓度下，放化疗纳米增敏剂在20mL(pH＝7.4,0.01M)的PBS缓冲液中的药物释放行为。具体操作步骤如下：将负载有顺铂化疗前药CM的3mL放化疗纳米增敏剂溶液和GSH的MWCO3000KD渗析袋置于20mL(pH＝7.4,0.01M)的PBS缓冲液(吐温80体积浓度为0.5％)中，离心管用锡纸包裹进行避光处理，放入37℃、100r/min恒温摇床中培养24h。在1h、2h、9h、12h、24h、48h和96h时分别进行取样，释放至透析袋外的CM的含量通过HPLC监测，实验结果见图8。通过DLS表征监测高GSH浓度(10mM)环境下放化疗纳米增敏剂纳米粒子的粒径分布，实验结果见图9。每组实验均设定三组平行实验。从图8和图9实验结果可知，本发明所提供的放化疗纳米增敏剂溶液具有GSH反应性药物释放/激活的特性。
(2)乏氧响应释放
采用渗析法研究了在乏氧环境中，放化疗纳米增敏剂在20mL(pH＝7.4,0.01M)的PBS缓冲液中的药物释放行为。具体操作如下：为了模拟体内缺氧环境，对一个三颈烧瓶进行抽真空，并在持续通入氩气的情况下，加入100μM亚硫酸氢钠溶液。将负载有顺铂化疗前药CM的3mL的放化疗纳米增敏剂溶液的MWCO3000KD渗析袋放入三颈烧瓶当中，使用亚硫酸氢钠来模拟体内的缺氧还原环境。三颈烧瓶用锡纸包裹进行避光处理，放入37℃、100r/min恒温摇床中培养24h。在1h、2h、9h、12h、24h、48h和96h时分别进行取样，释放至透析袋外的CM的含量通过HPLC监测，实验结果见图10。通过DLS表征监测乏氧环境下放化疗纳米增敏剂纳米粒子的粒径分布，实验结果见图11。每组实验均设定三组平行实验。从图10和图11实验结果可知，本发明所提供的放化疗纳米增敏剂溶液在乏氧条件下具有CM药物释放/激活的特性。
(3)GGT酶响应电荷反转测定
研究了放化疗纳米增敏剂在谷酰胺转肽酶(GGT酶)的催化下的电荷反转过程。具体操作如下：准确称取2mg放化疗纳米增敏剂溶于1mL(pH＝7.4,10mM)的Hepes缓冲液中，加入10U的GGT酶，放入37℃、100r/min恒温摇床中培养24h。在0h、2h、4h、8h、16h和24h时分别进行取样，通过粒径分析仪表征监测在GGT酶催化环境下放化疗纳米增敏剂纳米粒子的Zeta电位，实验结果见图12。每组实验均设定三组平行实验。从图12实验结果可知，本发明所提供的放化疗纳米增敏剂具有电荷反转特性。
(4)细胞内吞实验
将人胰腺癌细胞(BxPC-3)以每孔105个细胞数均匀铺在六孔板中，设置对照组(NPs)和GGTi组(GGTi组在共培养前24h向细胞中加入1.0×10-5M的GGsTop)，于各组中分别加入含5μg/mL尼罗红的PSSM纳米粒子和5μg/mL尼罗红的PSSMG纳米粒子，对细胞进行孵育，孵育6h后用胰酶消化，用PBS缓冲液洗涤离心两次后再加入500μL PBS缓冲液制备成细胞悬浮液，用细胞流式仪检测其细胞内荧光值，实验结果见图13。从图13实验结果可知，本发明所提供的放化疗纳米增敏剂具有高内吞速率。
(5)MTT细胞毒性实验
将生长状态良好处于对数期的人胰腺癌细胞(BxPC-3)和小鼠胚胎成纤维细胞(NIH-3T3)以5000个/孔的细胞密度加入至96孔板中，弃用孔板外圈孔，改加PBS缓冲液。待观察细胞已经贴壁生长，长满整个培养皿的70％左右，吸走旧培养基，加入100μL稀释好的顺铂化疗前药CM、游离药物顺铂CDDP(指化疗药物顺铂)、载药纳米粒子PSSMCM(指制备例(2)中合成的PSSM进行CM药物负载，即未进行GGT酶响应分子修饰，其制备方法同制备例(5))和载药纳米粒子PSSMGCM(指制备例(3a)合成的PSSMG进行CM药物负载，即制备例(5)中合成得到的放化疗纳米增敏剂)，浓度梯度依次为100μM、64μM、32μM、16μM、8μM、4μM、2μM、1μM和0.5μM，每个浓度均设3个平行组，而后分别将BXPC-3细胞的两组孔板分别在常氧及乏氧培养箱中孵育24h，将NIH-3T3细胞孔板置于常规培养箱中孵育24h。一段时间后，96孔板替换为每孔加入10μL MTT溶液和90μL RPMI-1640培养基，继续孵育4h。之后在每孔加入100μL的Formazan溶解液，适当混匀，在细胞培养箱内再继续孵育待Formazan全部溶解。最后在570nm处测定吸光度，计算细胞存活率，利用公式(1)计算细胞相对存活率：
细胞相对存活率(％)＝(Ax-A0)/(Ac-A0)×100…………………(1)
其中Ax、A0以及Ac分别为实验组、调零组以及阴性对照组吸光度值。
常氧和乏氧下CM、CDDP、PSSMCM和PSSMGCM给药实验组与BxPC-3细胞作用的MTT细胞生存曲线见图14。从图14实验结果可知，本发明所提供的放化疗纳米增敏剂在乏氧环境中具有高细胞生长抑制效果。
(6)细胞放疗增敏实验
(6a)放疗照射参数
采用其电子直线加速器(23Ex,Varian,USA)为照射源。剂量率设定为2Gy/min，机头旋转180°，固定照射面积是15×15cm，将1.5cm剂量补偿器放置在培养板上以消除剂量累积效应。
(6b)具体实验流程
将生长状态良好处于对数期的人胰腺癌细胞(BxPC-3)接种到6孔板中，并分别在乏氧条件下孵育。设置对照组(Ctrl组)、甲硝唑(MI组)以及各实验组中分别加入1.0×10-5MPt当量的顺铂化疗前药CM、游离药物顺铂CDDP、纳米粒子PSSMG和载药纳米粒子PSSMGCM，孵育48h，然后用0Gy、2Gy和4Gy的X射线按照上述条件照射。照射完成后，将六孔板置于冰上，抑制细胞的自我修复功能。低温放置0.5h后，用胰蛋白酶消化细胞，按照每孔1000个细胞接种在六孔板上，然后加入新鲜RPMI-1640培养基继续培养；14天后，用戊二醛(6.0％v/v)固定肉眼可见的细胞群，室温结晶紫(0.5％w/v)染色1h，计数克隆≥50个细胞，实验结果见图15。从图15实验结果可知，本发明所提供的放化疗纳米增敏剂在乏氧环境中具有良好的放疗敏感性。
(7)转胞吞实验
将BxPC-3细胞接种在盖玻片(1)-(3)上并孵育过夜。每个步骤使用两张平行的盖玻片：一张用于Hoechst 33342染色15分钟后的CLSM观察；另一个用于下一步的共同孵化。首先将盖玻片(1)上的细胞分别与尼罗红标记的PSSM(1.0×10-5M)和尼罗红标记的PSSMG(1.0×10-5M)一起孵育6h。此外，含有PSSMG的GGTi组在共培养前24小时向细胞中加入1.0×10-5M的GGsTop。盖玻片(1)上的细胞用PBS缓冲液洗涤3次，然后与盖玻片(2)上的新鲜细胞在新鲜RAPI-1640培养基中孵育10h。然后用PBS缓冲液冲洗盖玻片(2)上的细胞，并与盖玻片(3)上的新鲜细胞在新鲜培养基中再孵育10h，实验结果见图16。从图16实验结果可知，本发明所提供的放化疗纳米增敏剂具有有效的转包吞作用。
(8)肿瘤穿透实验
采用3D肿瘤球实验来验证肿瘤穿透效果，使用
Figure BDA0003686044390000151
96孔悬滴板(3DBiomatrix,Michigan,USA)获得3D肿瘤球。具体操作步骤如下：将40μL生长状态良好处于对数期的人胰腺癌细胞(BxPC-3)以每孔3×105个细胞接种在板中，在37℃下用5％CO2孵育14天，每天更换部分新鲜RPMI-1640培养基。当肿瘤球达到理想大小时，每孔加入1.0×10-5M尼罗红当量的PSSM和PSSMG后孵育4h。孵育后，使用激光共聚焦显微镜在z堆栈扫描模式下拍摄图像。在抑制实验中，3D球体在实验前24h用1.0×10-5M的GGTi预处理，然后在每孔中加入等量的尼罗红标记的PSSMG纳米颗粒，再孵育4h。之后，使用相同的条件在激光共聚焦显微镜下观察3D肿瘤球，实验结果见图17。从图17实验结果可知，本发明所提供的放化疗纳米增敏剂具有深度肿瘤穿透能力。
(9)抑瘤实验
将模型构建好的皮下胰腺癌模型小鼠分为8组(5只/组)，设计实验组分别为：生理盐水Control组、放疗RT组(即不注射任何药物和纳米粒子)、甲硝唑MI组、游离药物顺铂CDDP组、顺铂化疗前药CM组、无载药PSSMG组、载药纳米粒子PSSMCM组和载药纳米粒子PSSMGCM组。通过尾静脉注射给药：药物总浓度为顺铂当量4mg/kg，100μL/只，每隔3天给一次药，注射完24h后进行剂量为3Gy的放疗，给药4次。每3天量取并记录肿瘤的长(L)和宽(W)，以及称量记录小鼠体重，小鼠肿瘤体积按公式(2)计算：
Vn＝1/2LW2……………………(2)
其中Vn为第n天肿瘤体积。相对肿瘤体积比按公式(3)为：
A＝Vn/V0………………………(3)
其中Vn为第n天肿瘤体积，V0为起始给药小鼠肿瘤体积。
从图18实验结果可以看出，本发明所提供的放化疗纳米增敏剂可以实现显著的肿瘤抑制作用，展示了其在放化疗联合个体化治疗领域中的极大应用潜力。
尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在不脱离本发明的原理和宗旨的情况下在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。

Claims (10)

1.一种两亲嵌段聚合物，其特征在于，所述两亲嵌段聚合物具有式(1)所示的结构：
Figure FDA0003686044380000011
其中，R1为活性自由基聚合引发基团，R10为H原子或C1-C5的烷基，R11为O原子或N原子，R2为酶响应分子，R3为乏氧响应基团，R30为氧化还原敏感基团，R4为引发剂连接基团，X为酶响应分子键合基团，10≤m≤100，20≤n≤200，m、n均为整数。
2.根据权利要求1所述的两亲嵌段聚合物，其特征在于，所述活性自由基聚合引发基团R1为二硫代酯及其衍生物、三硫代酯及其衍生物、二硫代碳酸酯及其衍生物、二硫代氨基甲酸酯及其衍生物或卤素基团及其衍生物。
3.根据权利要求1所述的两亲嵌段聚合物，其特征在于，所述乏氧响应基团R3为2-硝基咪唑及其衍生物、4-硝基咪唑及其衍生物或5-硝基咪唑及其衍生物。
4.根据权利要求1所述的两亲嵌段聚合物，其特征在于，所述氧化还原敏感基团R30为二硫缩酮键、单硫键、单硒键、二硫键、三硫键或二硒键。
5.根据权利要求1所述的两亲嵌段聚合物，其特征在于，所述酶响应分子R2为γ-谷氨酰转肽酶响应分子、成纤维蛋白酶响应分子、金属蛋白酶响应分子或组织蛋白酶响应分子。
6.根据权利要求1所述的两亲嵌段聚合物，其特征在于，所述酶响应分子键合基团X具有式(3)所示的结构：
Figure FDA0003686044380000021
7.一种放化疗纳米增敏剂，其特征在于，所述放化疗纳米增敏剂含有权利要求1～6中任意一项所述的两亲嵌段聚合物和化疗前药，所述两亲嵌段聚合物和化疗前药的质量比为100:(0～100)；所述化疗前药具有式(4)所示的结构：
Figure FDA0003686044380000022
其中，R5为抗癌化疗药物分子。
8.根据权利要求7所述的放化疗纳米增敏剂，其特征在于，所述抗癌化疗药物分子R5为紫杉醇、紫杉醇衍生物、阿霉素、表阿霉素、喜树碱、喜树碱衍生物、顺铂类药物、长春碱、长春新碱、多西他赛、吉西他滨、姜黄素或丹酚酸。
9.一种放化疗纳米增敏剂的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：
S1：于避光条件下，将权利要求1～6中任意一项所述的两亲嵌段聚合物以及化疗前药溶解于有机溶剂I中，得到含两亲嵌段聚合物和化疗前药的溶液；所述化疗前药具有式(4)所示的结构：
Figure FDA0003686044380000023
其中，R5为抗癌化疗药物分子；
S2：将步骤S1所得含两亲嵌段聚合物和化疗前药的溶液加入到有机溶剂II-纯水混合相中进行高速搅拌，得到含放化疗纳米增敏剂的溶液；
S3：将步骤S2所得含放化疗纳米增敏剂的溶液于纯水中进行透析以除去有机溶剂I和有机溶剂II，得到放化疗纳米增敏剂。
10.由权利要求9所述的方法制备得到的放化疗纳米增敏剂。
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115806566A (zh) * 2022-12-08 2023-03-17 福州大学 一种用于克服肿瘤氧异质性分布的硝基还原酶激活的多功能分子前药的制备方法及其应用
WO2023237060A1 (zh) * 2022-06-09 2023-12-14 北京化工大学 一种两亲嵌段聚合物和放化疗纳米增敏剂及其制备方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110123785A (zh) * 2019-05-29 2019-08-16 山东大学 一种荷载化疗药物的双敏感型靶向纳米粒制剂及制备方法
CN113801276A (zh) * 2020-06-12 2021-12-17 北京化工大学 一种用于肿瘤放化疗协同治疗的纳米药物及其制备方法和应用
WO2022114736A1 (ko) * 2020-11-27 2022-06-02 주식회사 에스엔바이오사이언스 난용성 캄토테신 화합물을 포함하는 나노 입자를 포함하는 암 치료용 약제학적 조성물 및 이의 병용요법

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109593158B (zh) * 2017-09-30 2021-02-26 浙江大学 一种γ-谷氨酰转肽酶催化水解致电荷翻转的聚合物及其在药物输送领域的应用
CN110694076B (zh) * 2019-09-09 2021-02-09 浙江大学 一种羟基氯喹两亲性聚合物药物前体、制备方法及其应用
CN114989375B (zh) * 2022-06-09 2023-05-26 北京化工大学 一种两亲嵌段聚合物和放化疗纳米增敏剂及其制备方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110123785A (zh) * 2019-05-29 2019-08-16 山东大学 一种荷载化疗药物的双敏感型靶向纳米粒制剂及制备方法
CN113801276A (zh) * 2020-06-12 2021-12-17 北京化工大学 一种用于肿瘤放化疗协同治疗的纳米药物及其制备方法和应用
WO2022114736A1 (ko) * 2020-11-27 2022-06-02 주식회사 에스엔바이오사이언스 난용성 캄토테신 화합물을 포함하는 나노 입자를 포함하는 암 치료용 약제학적 조성물 및 이의 병용요법

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2023237060A1 (zh) * 2022-06-09 2023-12-14 北京化工大学 一种两亲嵌段聚合物和放化疗纳米增敏剂及其制备方法
CN115806566A (zh) * 2022-12-08 2023-03-17 福州大学 一种用于克服肿瘤氧异质性分布的硝基还原酶激活的多功能分子前药的制备方法及其应用

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