CN114982968A - 一种利用复合菌种制备的蜂蜜荷花酵素及制备方法与应用 - Google Patents
一种利用复合菌种制备的蜂蜜荷花酵素及制备方法与应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN114982968A CN114982968A CN202210507954.6A CN202210507954A CN114982968A CN 114982968 A CN114982968 A CN 114982968A CN 202210507954 A CN202210507954 A CN 202210507954A CN 114982968 A CN114982968 A CN 114982968A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- fermentation
- lotus
- honey
- ferment
- enzyme
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 240000002853 Nelumbo nucifera Species 0.000 title claims abstract description 47
- 235000006508 Nelumbo nucifera Nutrition 0.000 title claims abstract description 47
- 235000006510 Nelumbo pentapetala Nutrition 0.000 title claims abstract description 47
- 235000012907 honey Nutrition 0.000 title claims abstract description 44
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 title claims abstract description 41
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 title claims abstract description 41
- 239000002131 composite material Substances 0.000 title claims abstract description 34
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 10
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims abstract description 101
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims abstract description 93
- 240000001046 Lactobacillus acidophilus Species 0.000 claims abstract description 17
- 235000013956 Lactobacillus acidophilus Nutrition 0.000 claims abstract description 17
- 229940039695 lactobacillus acidophilus Drugs 0.000 claims abstract description 17
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 claims abstract description 16
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 claims abstract description 16
- 241000193159 Hathewaya histolytica Species 0.000 claims abstract description 16
- 244000199866 Lactobacillus casei Species 0.000 claims abstract description 16
- 235000013958 Lactobacillus casei Nutrition 0.000 claims abstract description 16
- 229940017800 lactobacillus casei Drugs 0.000 claims abstract description 16
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 claims abstract description 8
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 50
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 21
- 241000228245 Aspergillus niger Species 0.000 claims description 15
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 11
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 10
- 238000010564 aerobic fermentation Methods 0.000 claims description 9
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 7
- 229910021642 ultra pure water Inorganic materials 0.000 claims description 7
- 239000012498 ultrapure water Substances 0.000 claims description 7
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 claims description 5
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 claims description 5
- 238000004537 pulping Methods 0.000 claims description 5
- 239000002068 microbial inoculum Substances 0.000 claims description 4
- 238000005273 aeration Methods 0.000 claims description 3
- 235000021554 flavoured beverage Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000021568 protein beverage Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000013616 tea Nutrition 0.000 claims description 2
- 241000894007 species Species 0.000 claims 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 14
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 abstract description 11
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 10
- 239000002994 raw material Substances 0.000 abstract description 10
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 7
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 abstract description 6
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 abstract description 5
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 abstract description 5
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 abstract description 5
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 abstract description 5
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 abstract description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 abstract description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 abstract description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 abstract 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 abstract 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 abstract 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 38
- 239000000047 product Substances 0.000 description 20
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 19
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 11
- 230000008569 process Effects 0.000 description 11
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 9
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 9
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 7
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 6
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 5
- 108010059820 Polygalacturonase Proteins 0.000 description 5
- 102000004139 alpha-Amylases Human genes 0.000 description 5
- 108090000637 alpha-Amylases Proteins 0.000 description 5
- 229940024171 alpha-amylase Drugs 0.000 description 5
- 108010093305 exopolygalacturonase Proteins 0.000 description 5
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 5
- 108010059892 Cellulase Proteins 0.000 description 4
- 229940106157 cellulase Drugs 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 235000019614 sour taste Nutrition 0.000 description 3
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 3
- 235000019605 sweet taste sensations Nutrition 0.000 description 3
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 3
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 3
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 3
- 108090000145 Bacillolysin Proteins 0.000 description 2
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 240000006024 Lactobacillus plantarum Species 0.000 description 2
- 235000013965 Lactobacillus plantarum Nutrition 0.000 description 2
- 102000035092 Neutral proteases Human genes 0.000 description 2
- 108091005507 Neutral proteases Proteins 0.000 description 2
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 2
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 2
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 2
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 2
- 229940072205 lactobacillus plantarum Drugs 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 2
- 238000009423 ventilation Methods 0.000 description 2
- FYGDTMLNYKFZSV-URKRLVJHSA-N (2s,3r,4s,5s,6r)-2-[(2r,4r,5r,6s)-4,5-dihydroxy-2-(hydroxymethyl)-6-[(2r,4r,5r,6s)-4,5,6-trihydroxy-2-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]oxyoxan-3-yl]oxy-6-(hydroxymethyl)oxane-3,4,5-triol Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1[C@@H](CO)O[C@@H](OC2[C@H](O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]2O)CO)[C@H](O)[C@H]1O FYGDTMLNYKFZSV-URKRLVJHSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 239000004382 Amylase Substances 0.000 description 1
- 108010065511 Amylases Proteins 0.000 description 1
- 102000013142 Amylases Human genes 0.000 description 1
- 229920002498 Beta-glucan Polymers 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 description 1
- AYRXSINWFIIFAE-SCLMCMATSA-N Isomaltose Natural products OC[C@H]1O[C@H](OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O AYRXSINWFIIFAE-SCLMCMATSA-N 0.000 description 1
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 1
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 1
- 208000005374 Poisoning Diseases 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 235000019418 amylase Nutrition 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 235000021329 brown rice Nutrition 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 230000001516 effect on protein Effects 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 1
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 description 1
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 description 1
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 229910001385 heavy metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- JEIPFZHSYJVQDO-UHFFFAOYSA-N iron(III) oxide Inorganic materials O=[Fe]O[Fe]=O JEIPFZHSYJVQDO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DLRVVLDZNNYCBX-RTPHMHGBSA-N isomaltose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O1 DLRVVLDZNNYCBX-RTPHMHGBSA-N 0.000 description 1
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 description 1
- 229940068140 lactobacillus bifidus Drugs 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000009629 microbiological culture Methods 0.000 description 1
- 239000002366 mineral element Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000447 pesticide residue Substances 0.000 description 1
- 235000017807 phytochemicals Nutrition 0.000 description 1
- 229930000223 plant secondary metabolite Natural products 0.000 description 1
- 231100000572 poisoning Toxicity 0.000 description 1
- 230000000607 poisoning effect Effects 0.000 description 1
- 150000008442 polyphenolic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 235000013824 polyphenols Nutrition 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 description 1
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 1
- 239000004576 sand Substances 0.000 description 1
- 238000007789 sealing Methods 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 229940126680 traditional chinese medicines Drugs 0.000 description 1
- 241001148471 unidentified anaerobic bacterium Species 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 235000021419 vinegar Nutrition 0.000 description 1
- 239000000052 vinegar Substances 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/135—Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L2/00—Non-alcoholic beverages; Dry compositions or concentrates therefor; Their preparation
- A23L2/38—Other non-alcoholic beverages
- A23L2/382—Other non-alcoholic beverages fermented
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L21/00—Marmalades, jams, jellies or the like; Products from apiculture; Preparation or treatment thereof
- A23L21/20—Products from apiculture, e.g. royal jelly or pollen; Substitutes therefor
- A23L21/25—Honey; Honey substitutes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/11—Lactobacillus
- A23V2400/113—Acidophilus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/11—Lactobacillus
- A23V2400/125—Casei
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02W—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES RELATED TO WASTEWATER TREATMENT OR WASTE MANAGEMENT
- Y02W30/00—Technologies for solid waste management
- Y02W30/40—Bio-organic fraction processing; Production of fertilisers from the organic fraction of waste or refuse
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Mycology (AREA)
- Non-Alcoholic Beverages (AREA)
- Preparation Of Fruits And Vegetables (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
本发明属于生物发酵技术领域，具体涉及一种利用复合菌种制备的蜂蜜荷花酵素及制备方法与应用。本发明提供的蜂蜜荷花酵素在发酵过程中添加枯草芽孢杆菌、溶组织梭菌、嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌等组成的复合菌种，经发酵罐发酵后，产生含有乳酸、氨基酸及葡萄糖等多种营养物质的酵素。而且，本发明同时以荷花与蜂蜜作为发酵原料，最终制成的酵素具有止血消瘀、祛湿等功效，且蜂蜜的加入有效改善了酵素的风味，易于使用，可用于制备酵素饮料。
Description
技术领域
本发明属于生物发酵技术领域，具体涉及一种利用复合菌种制备的蜂蜜荷花酵素及制备方法与应用。
背景技术
我国工业和信息化部发布的轻工行业标准《酵素产品分类导则》将酵素定义为，以动物、植物、菌类等为原料，添加或不添加辅料，经微生物发酵制得的含有特定生物活性成分的产品。其生物活性成分包含来自植物原料和微生物所提供的各种营养素和天然植物中的植物类功能性化学成分（phytochemicals），以及发酵生成的一些生理活性物质，包括氨基酸、肽类、维生素、多糖、多酚类、黄酮类、醇类、酯类、酶类、矿物元素、有机酸和各种益生菌。
常见的水果、蔬菜、糙米、菌类、植物、药食同源中药等均可作为酵素发酵的原料。酵素生产工艺的特点是：为防止杂菌生长和产生酒精，可加入酿造米醋及较高浓度的异麦芽糖、白糖或红糖等；发酵周期比较长，一般为几个月至2年等。也有采用二次发酵工艺，即经过后熟工艺得到酵素产品。随着可作为酵素原料的物质逐渐增多，最终制成的酵素产品也出现了越来越多的问题。主要包括以下几种问题：由于器具消毒不彻底、发酵过程密封不严等，造成毒杂菌的污染；复合发酵菌的代谢过程易受外界环境的影响，代谢产物不可控；原料的成分复杂，在发酵过程中毒副产物的生成；菌种长期使用后，有可能异变成有毒菌株，影响产品质量等。其次，化学性危害主要包括在一些发酵产品的原材料的处理中，部分化学物质不易完全去除，包括化学试剂、重金属离子和农药残留等。在制备工艺中还存在着一些潜在的物理性毒害，主要包括在加工工艺中误入砂石、毛发、以及铁质锈迹残留等。
基于此，中国专利申请CN105105119A公开了一种基于接种菌种进行发酵制备水果酵素的方法，在原有的工艺条件下添加有益菌种，使微生物酵素朝着设计的方向发展，不再局限于酵素原料的选择，能最大限度的提高微生物酵素的抗氧化活性和酶活力；添加改性菌种后，酵素的各项指标的变化规律以及所产生的影响，都能在实验过程中呈现，但是这种方法涉及自然发酵过程，容易滋生各种细菌，且发酵时间高达1个月，极易导致菌种变异。
类似地，中国专利CN103931983B公开了一种蜂蜜酵素产品及其制备方法，通过先在蜂蜜中加入果胶酶处理，然后经过三梯式发酵，在600公斤压力的匀质机中进行匀质后即可获得；然而，该种方法在制备蜂蜜酵素时，共进行三次发酵，时长大于2个月，且同样加入了青春双岐乳杆菌、植物乳杆菌及嗜酸乳杆菌等多种菌种，最终达到增强人体免疫力、抗氧化延衰老的效果，但是2个月的时间足以使菌种变异，影响发酵过程产生的营养物质的量，而且，三次发酵，大大增加了细菌感染的概率。
综上可知，现有技术在制备酵素的过程中仍然存在菌种使用时间过长导致变异，发酵过程中容易被杂菌污染等各种问题。
发明内容
针对现有技术普遍存在的问题，本发明提供了一种利用复合菌种发酵制备蜂蜜荷花酵素的方法。本发明提供的酵素饮料发酵时间短，不会导致细菌变异，且感染细菌的几率低，同时，以荷花与蜂蜜作为发酵原料，最终制成的酵素具有止血消瘀、祛湿等功效，且蜂蜜的加入有效改善了酵素的风味，易于使用，可用于制备酵素饮料。
为了达到上述目的，本发明采用的技术方案为：
一种利用复合菌种发酵制备蜂蜜荷花酵素的方法，包括如下步骤：
S1、于无菌条件下，将荷花洗净剪碎，打成浆，然后向其中加入蜂蜜和超纯水，混合均匀，制备成发酵底物；
S2、将步骤S1制得的发酵底物置于发酵罐中，添加总体积0.5‰~0.8‰的黑曲霉菌，进行有氧发酵16~20h，获得初级发酵产物；
S3、向步骤S2获得的初级发酵产物中加入总体积6‰~10‰的复合菌种，进行厌氧发酵20~23天，收集发酵液，置于50~55℃下处理1~2h，即得。
现有技术中，在利用发酵制备酵素的过程中，多是通过多层次发酵，以获得营养物质丰富的酵素，发酵时间一般在1-2个月，甚至更久，这样虽然有助于充分发酵，但是这种方法多适于无菌发酵，否则会引起菌种变异。发明人在对酵素的研究过程中，以荷花和蜂蜜为原料，经过多次试验验证，发现在不添加酶制剂的基础上，添加微量的黑曲霉菌，经过发酵，产生纤维素酶、α-淀粉酶、果胶酶等多种酶类，其中的纤维素酶及果胶酶可用于酶解荷花细胞的细胞壁，避免了单独添加酶制剂对发酵产生的不良影响，如产生甲醇、酶解蛋白质等营养物质。而发酵产生的淀粉酶可以加快果胶酶与纤维素酶的酶解消化过程，有效缩短了处理时间，避免了菌种变异。
在研究过程中，发明人发现先利用黑曲霉菌进行有氧发酵，再进行无氧发酵，可以避免其他细菌的污染，而且，无氧环境中，黑曲霉菌无法存活，无需担心黑曲霉菌过量发酵，产生大量酶，对酵素产品造成不良影响。整个发酵过程均保持无菌环境，为了防止微量细菌的加入，发明人在发酵结束后，在50~55℃下处理1~2h，该温度是发明人经过多次研究筛选出来的，在不影响酵素中营养物质的前提下，可以清除细菌，避免污染酵素，保证酵素产品的安全性。
优选地，步骤S1中蜂蜜的加入量为荷花重量的1/3，超纯水的加入量为荷花重量的3-5倍，所述混合均匀为于300~500rpm转速下搅拌20~30min。
优选地，步骤S1所述的混合均匀为于步骤S1所述的混合均匀为于300~500rpm转速下搅拌20~30min。
优选地，步骤S2所述黑曲霉菌保藏于中国药学微生物菌种保藏管理中心，菌株编号为CPCC 800010，使用时加水稀释成5~8×107cfu/mL。
优选地，步骤S2所述有氧发酵条件为调节pH值至6.5~7.0，温度为28~30℃，转速100~200rpm，通气量控制在0.05~0.15VVm。
优选地，步骤S3所述的复合菌种由枯草芽孢杆菌、溶组织梭菌、嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌按体积比8~15：1~3：2~5：3~8组成。
枯草芽孢杆菌经发酵产生α-淀粉酶、中性蛋白酶、β-葡聚糖等，溶组织梭菌不发酵糖，但是对蛋白质有强烈的分解作用，嗜酸乳杆菌与干酪乳杆菌均属于乳杆菌属，为革兰氏阳性菌，发酵过程中会产生乳酸、乳糖等多种营养物质；这4种菌均为厌氧菌，在无氧环境下可以正常发酵；发明人在对无氧发酵菌种的研究过程中发现，枯草芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌与干酪乳杆菌的加入，加上蜂蜜中大量糖类的存在，可以为发酵提供大量的营养支持，而微量的嗜酸乳杆菌在发酵过程中，优先分解α-淀粉酶，将其分解成小分子量的氨基酸，发明人进一步研究发现，将枯草芽孢杆菌、溶组织梭菌按一定的重量比混合时，正好可以使溶组织梭菌将α-淀粉酶分解完成，又不影响其他酶活性；而中性蛋白酶在特定的pH条件下，可以起到催化作用，进一步加快了发酵速度，减少了细菌污染的几率。
优选地，步骤S3所述的复合菌种由枯草芽孢杆菌、溶组织梭菌、嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌按体积比11：2：3：6组成。
优选地，步骤S3所述的厌氧发酵过程为于密闭环境下，维持pH值为6.0~6.5，30~35℃，400~600Pa，200~300rpm转速下发酵。
本发明还提供了一种所述的方法制备得到的蜂蜜荷花酵素。
本发明还提供了一种所述的蜂蜜荷花酵素在制备饮料中的应用。
优选地，所述饮料包括蛋白饮料、茶饮料、风味饮料。
与现有技术相比，本发明提供的利用复合菌种发酵制备蜂蜜荷花酵素的方法具有如下优势：
（1）本发明提供的方法，先进行有氧发酵，再进行厌氧发酵，并经高温杀菌制得，有效避免了细菌对生成酵素的污染；
（2）本发明提供的方法，先用黑曲霉菌发酵产生果胶酶及纤维素酶，去除细胞壁，然后加入复合菌种，为发酵提供大量的营养物质，有效缩短了发酵时间，防止菌种变异；
（3）本发明提供的方法，严格控制各过程的发酵条件，有利于发酵完全，且整个过程简单，用时短，降低了生产成本。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步解释，但是应当注意的是，以下实施例仅用以解释本发明，而不能用来限制本发明，所有与本发明相同或相近的技术方案均在本发明的保护范围之内。本实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域常规技术方法和仪器说明书内容进行操作；所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。
所述枯草芽孢杆菌的编号为Bio-72808，用纯化水稀释至1.0~2.0×108cfu/mL，所述溶组织梭菌的菌株号为CMCC 64801，用纯化水稀释至4.0~5.5×107cfu/mL，所述嗜酸乳杆菌编号为Bio-67309，用纯化水稀释至7.0~8.0×107cfu/mL，所述干酪乳杆菌编号为Bio-52948，用纯化水稀释至6.5~7.5×107cfu/mL，保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心。
实施例1 一种利用复合菌种发酵制备蜂蜜荷花酵素的方法
所述利用复合菌种发酵制备蜂蜜荷花酵素的方法，包括如下步骤：
S1、于无菌条件下，将荷花洗净剪碎，打成浆，然后向其中加入1/3荷花重量的蜂蜜，荷花3倍量的超纯水，于300rpm转速下搅拌20min，直至混合均匀，制备成发酵底物；
S2、将步骤S1制得的发酵底物置于发酵罐中，添加总体积0.5‰的黑曲霉菌，黑曲霉菌经纯化水稀释成5×107cfu/mL，发酵条件设置为pH值6.5，温度28℃，转速100rpm，通气量控制在0.05VVm，进行有氧发酵16h，获得初级发酵产物；
S3、将枯草芽孢杆菌用纯化水稀释至1.0×108cfu/mL，将溶组织梭菌用纯化水稀释至4.0×107cfu/mL，将嗜酸乳杆菌用纯化水稀释至7.0×107cfu/mL，将干酪乳杆菌用纯化水稀释至6.5×107cfu/mL，然后将枯草芽孢杆菌、溶组织梭菌、嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌按体积比8：1：2：3混合制成复合菌种，然后向步骤S2获得的初级发酵产物中加入总体积6‰的复合菌种，设置发酵条件为于密闭环境下，维持pH值为6.0，30℃，400Pa，200rpm转速下发酵，发酵至不产生气体为止，发酵时间20天，收集发酵液，置于50℃下处理1h，即得。经检测，酵素中含有丰富的营养物质，包括乳酸、氨基酸及多种糖类，且口感酸甜，风味佳。
实施例2 一种利用复合菌种发酵制备蜂蜜荷花酵素的方法
所述利用复合菌种发酵制备蜂蜜荷花酵素的方法，包括如下步骤：
S1、于无菌条件下，将荷花洗净剪碎，打成浆，然后向其中加入1/3荷花重量的蜂蜜，荷花5倍量的超纯水，于500rpm转速下搅拌30min直至混合均匀，制备成发酵底物；
S2、将步骤S1制得的发酵底物置于发酵罐中，添加总体积0.8‰的黑曲霉菌，黑曲霉菌经纯化水稀释至8×107cfu/mL，发酵条件设置为pH值至7.0，温度为30℃，转速200rpm，通气量控制在0.15VVm，进行有氧发酵20h，获得初级发酵产物；
S3、将枯草芽孢杆菌用纯化水稀释至2.0×108cfu/mL，将溶组织梭菌用纯化水稀释至5.5×107cfu/mL，将嗜酸乳杆菌用纯化水稀释至8.0×107cfu/mL，将干酪乳杆菌用纯化水稀释至7.5×107cfu/mL，然后将枯草芽孢杆菌、溶组织梭菌、嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌按体积比15：3：5：8混合制成复合菌种，然后向步骤S2获得的初级发酵产物中加入总体积10‰的复合菌种，设置发酵条件为pH值为6.5，35℃，600Pa，300rpm转速下进行厌氧发酵，发酵至不产生气体为止，发酵时间23天，收集发酵液，置于55℃下处理2h，即得。经检测，酵素中含有丰富的营养物质，包括乳酸、氨基酸及多种糖类，且口感酸甜，风味佳。
实施例3 一种利用复合菌种发酵制备蜂蜜荷花酵素的方法
所述利用复合菌种发酵制备蜂蜜荷花酵素的方法，包括如下步骤：
S1、于无菌条件下，将荷花洗净剪碎，打成浆，然后向其中加入1/3荷花重量的蜂蜜，荷花4倍量的超纯水，于400rpm转速下搅拌25min直至混合均匀，制备成发酵底物；
S2、将步骤S1制得的发酵底物置于发酵罐中，添加总体积0.7‰的黑曲霉菌，黑曲霉菌经纯化水稀释至6.5×107cfu/mL，发酵条件设置为pH值至6.8，温度为29℃，转速150rpm，通气量控制在0.10VVm，进行有氧发酵18h，获得初级发酵产物；
S3、将枯草芽孢杆菌用纯化水稀释至1.5×108cfu/mL，将溶组织梭菌用纯化水稀释至4.8×107cfu/mL，将嗜酸乳杆菌用纯化水稀释至7.5×107cfu/mL，将干酪乳杆菌用纯化水稀释至7.0×107cfu/mL，然后将枯草芽孢杆菌、溶组织梭菌、嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌按体积比11：2：3：6混合制成复合菌种，向步骤S2获得的初级发酵产物中加入总体积8‰的复合菌种，进行厌氧发酵，发酵至不产生气体为止，发酵时间21天，收集发酵液，置于53℃下处理1.5h，即得。经检测，酵素中含有丰富的营养物质，包括乳酸、氨基酸及多种糖类，且口感酸甜，风味佳。
对比例1 一种利用复合菌种发酵制备蜂蜜荷花酵素的方法
所述利用复合菌种发酵制备蜂蜜荷花酵素的方法与实施例3类似；
与实施例1的区别在于，对比例1中将复合菌种替换为由枯草芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌按体积比11：3：6混合制成，在步骤S3中进行厌氧发酵，发酵至不产生气体为止，发酵时间25天。
对比例2 一种利用复合菌种发酵制备蜂蜜荷花酵素的方法
所述利用复合菌种发酵制备蜂蜜荷花酵素的方法与实施例3类似；
与实施例1的区别在于，对比例2中将复合菌种的干酪乳杆菌替换为植物乳杆菌，其他条件不变，在步骤S3中进行厌氧发酵，发酵至不产生气体为止，发酵时间24.5天。
对比例3 一种利用复合菌种发酵制备蜂蜜荷花酵素的方法
所述利用复合菌种发酵制备蜂蜜荷花酵素的方法与实施例3类似；
与实施例1的区别在于，对比例3中的步骤S2收获发酵液后，置于45℃下处理2.5h。
试验例1 发酵时间对比
1.试验方法：统计分别以实施例1-3及对比例1-2所述利用复合菌种发酵制备蜂蜜荷花酵素的方法成功获得蜂蜜荷花酵素的总时间；
2.试验结果：具体结果如表1所示
表1 不同试验方法获得酵素的总时间对比
由上述表1可知，与对比例组相比，本发明实施例1-3制备发酵的总时间明显降低，这正好证明了本发明技术方案的完整性。
试验例2 酵素中细菌含量测定
1.试验样品：实施例1-3及对比例1-3所述方法制得的荷花蜂蜜酵素；
2.试验方法：按照GB4789.2-2016食品安全国家标准测定酵素中菌落总数，按照GB4789.3-2016大肠菌群计数测定大肠杆菌的数量，按照GB 4789.15-2016（选择霉菌和酵母平板计数法）测定霉菌的菌落数。
3.试验结果：具体试验结果如表2所示。
表2 不同方法获得的酵素中菌落数统计
由上述表2可知，与对比例1-2组相比，本发明实施例组的菌落数较低，这是由于发酵时间较低，导致被细菌感染的概率降低导致的，而对比例3组在降低后续酵素处理温度，延长处理时间的基础上，与实施例组相比，其细菌含量仍然升高，证明本申请制得的酵素在本发明所述温度下达到最佳杀菌效果。
上述实施例仅例示性说明本发明的原理及其功效，而非用于限制本发明。任何熟悉此技术的人士皆可在不违背本发明的精神及范畴下，对上述实施例进行修饰或改变。因此，举凡所属技术领域中具有通常知识者在未脱离本发明所揭示的精神与技术思想下所完成的一切等效修饰或改变，仍应由本发明的权利要求所涵盖。
Claims (10)
1.一种利用复合菌种发酵制备蜂蜜荷花酵素的方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1、于无菌条件下，将荷花洗净剪碎，打成浆，然后向其中加入蜂蜜和超纯水，混合均匀，制备成发酵底物；
S2、将步骤S1制得的发酵底物置于发酵罐中，添加总体积0.5‰~0.8‰的黑曲霉菌，进行有氧发酵16~20h，获得初级发酵产物；
S3、向步骤S2获得的初级发酵产物中加入总体积6‰~10‰的复合菌种，进行厌氧发酵20~23天，收集发酵液，置于50~55℃下处理1~2h，即得。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤S1中蜂蜜的加入量为荷花重量的1/3，超纯水的加入量为荷花重量的3-5倍，所述混合均匀为于300~500rpm转速下搅拌20~30min。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤S2所述黑曲霉菌保藏于中国药学微生物菌种保藏管理中心，菌株编号为CPCC 800010，使用时加水稀释成5~8×107cfu/mL。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤S2所述有氧发酵条件为调节pH值至6.5~7.0，温度为28~30℃，转速100~200rpm，通气量控制在0.05~0.15VVm。
5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤S3所述的复合菌种由枯草芽孢杆菌、溶组织梭菌、嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌按体积比8~15：1~3：2~5：3~8组成。
6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤S3所述的复合菌种由枯草芽孢杆菌、溶组织梭菌、嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌按体积比11：2：3：6组成。
7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤S3所述的厌氧发酵过程为于密闭环境下，维持pH值为6.0~6.5，30~35℃，400~600Pa，200~300rpm转速下发酵。
8.一种如权利要求1-7任一所述的方法制备得到的蜂蜜荷花酵素。
9.一种权利要求8所述的蜂蜜荷花酵素在制备饮料中的应用。
10.如权利要求9所述的应用，其特征在于，所述饮料包括蛋白饮料、茶饮料、风味饮料。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210507954.6A CN114982968A (zh) | 2022-05-11 | 2022-05-11 | 一种利用复合菌种制备的蜂蜜荷花酵素及制备方法与应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210507954.6A CN114982968A (zh) | 2022-05-11 | 2022-05-11 | 一种利用复合菌种制备的蜂蜜荷花酵素及制备方法与应用 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN114982968A true CN114982968A (zh) | 2022-09-02 |
Family
ID=83025355
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202210507954.6A Pending CN114982968A (zh) | 2022-05-11 | 2022-05-11 | 一种利用复合菌种制备的蜂蜜荷花酵素及制备方法与应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN114982968A (zh) |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1410524A (zh) * | 2002-11-15 | 2003-04-16 | 葛同勋 | 以鲜花为主要原料制备酒的方法 |
| CN102406062A (zh) * | 2011-11-17 | 2012-04-11 | 合肥市科茂隆生物工程有限公司 | 一种益生菌异步发酵中草药制备饲用抗生素替代物的方法 |
| CN105146642A (zh) * | 2015-03-23 | 2015-12-16 | 江南大学 | 一种用蜜源菌发酵制备果蔬蜂蜜酵素饮料的方法 |
| WO2020144207A1 (en) * | 2019-01-10 | 2020-07-16 | Evonik Operations Gmbh | Fermentation broths and their use |
| AU2020103265A4 (en) * | 2020-11-05 | 2021-01-14 | Nanjing Forestry University | Preparation method of ferment with high-activity ingredients |
-
2022
- 2022-05-11 CN CN202210507954.6A patent/CN114982968A/zh active Pending
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1410524A (zh) * | 2002-11-15 | 2003-04-16 | 葛同勋 | 以鲜花为主要原料制备酒的方法 |
| CN102406062A (zh) * | 2011-11-17 | 2012-04-11 | 合肥市科茂隆生物工程有限公司 | 一种益生菌异步发酵中草药制备饲用抗生素替代物的方法 |
| CN105146642A (zh) * | 2015-03-23 | 2015-12-16 | 江南大学 | 一种用蜜源菌发酵制备果蔬蜂蜜酵素饮料的方法 |
| WO2020144207A1 (en) * | 2019-01-10 | 2020-07-16 | Evonik Operations Gmbh | Fermentation broths and their use |
| AU2020103265A4 (en) * | 2020-11-05 | 2021-01-14 | Nanjing Forestry University | Preparation method of ferment with high-activity ingredients |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN101270329B (zh) | 液态深层发酵生产高浓度果醋制备方法 | |
| CN105394645A (zh) | 一种自制水果酵素的方法 | |
| CN103013861B (zh) | 枯草芽孢杆菌hjda32菌株及其所产细菌素的制备方法 | |
| CN103205376A (zh) | 一株适用于发酵饲料的植物乳杆菌及其应用 | |
| Isitua et al. | Novel method of wine production from banana (Musa acuminata) and pineapple (Ananas comosus) wastes | |
| CN107801938B (zh) | 一种槟榔的生物软化方法 | |
| CN114621836B (zh) | 黄酒酒曲及其制备方法 | |
| CN114107403B (zh) | 一种微生物群落发酵石榴皮联产鞣花酸和生物饲料的方法 | |
| CN103045487B (zh) | 一株生产柠檬酸的菌株及其发酵生产柠檬酸的方法 | |
| CN104651109B (zh) | 一种香蕉风味啤酒的发酵方法 | |
| CN111733086B (zh) | 一种米曲霉及其在酱油酿造中的应用 | |
| CN111607621A (zh) | 一种产玫瑰花香的酵母及其在灵武长枣酵素中的应用 | |
| CN106035985A (zh) | 一种混菌液态发酵黄酒加工废弃物生产单细胞蛋白的方法 | |
| CN107118885B (zh) | 一种利用耐乙醇片球菌生产含gaba发酵酒的方法 | |
| CN108813045A (zh) | 一种果蔬酵素蜂蜜柠檬茶的制备方法 | |
| CN114982968A (zh) | 一种利用复合菌种制备的蜂蜜荷花酵素及制备方法与应用 | |
| CN104513752A (zh) | 一种封窖皮泥的养护方法 | |
| CN108239616A (zh) | 一株屎肠球菌菌株及其在酸浆豆腐加工中的应用 | |
| CN103103062A (zh) | 复合益生菌制备桑葚营养饮料方法 | |
| CN110951654A (zh) | 一种植物乳杆菌增殖剂及其应用 | |
| CN111513318A (zh) | 一种龙眼酵素的制备方法 | |
| KR20020093690A (ko) | 벌꿀음료 제조 | |
| CN109536349B (zh) | 一种功能草莓果酒的制备方法 | |
| CN115181708B (zh) | 高产γ-氨基丁酸的耐酸型植物乳杆菌及其应用 | |
| CN117179238B (zh) | 一种低豆腥无蔗糖大豆乳清蛋白发酵乳的制备方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20220902 |
|
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |