CN114949093B - 一种槟榔花提取物的制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种槟榔花提取物的制备方法，包括以下步骤：S1预处理、S2酶解、S3超声波提取、S4醇提、S5脱色处理、S6冷藏，本发明通过控制提取的溶剂、酶解条件、超声条件和醇提条件，各步骤和参数之间协同作用，使得活性成分得到充分的提取，且保留该活性成分的完整性，槟榔花的提取物中槟榔碱的含量的提高率为527‑598％，槟榔次碱含量的提高率为为432‑480％，槟榔多酚含量的提高率为610‑638％。

Description

一种槟榔花提取物的制备方法
技术领域
本发明涉及植物提取技术领域，特别涉及一种槟榔花提取物的制备方法。
背景技术
槟榔花为棕榈科植物槟榔的雄花蕾，干燥的雄花蕾粒大如米而瘦，表面土黄色至淡棕色。气无，味淡，性凉，归胃经，肺经。槟榔花在药用性能上被人们广泛关注，健胃；主治咳嗽，口干，健胃.性寒味，有清热除火，生津止渴，化痰止咳，润肺，养胃之功效，槟榔的果实常用于嚼食，而其花蕾不仅美艳，也同样有着神奇的功效，为芳香健胃、清凉止渴良药。槟榔花作为槟榔的副产物，其中含有较多的营养物质，如多种氨基酸、宏量元素，以及多种微量元素，而槟榔碱、槟榔次碱和槟榔多酚在槟榔花中含量极低，且易于氧化，目前，从槟榔花中提取到的槟榔碱、槟榔次碱和槟榔多酚的方法中，耗时长、含量欠佳。
发明内容
鉴于此，本发明提出一种槟榔花提取物的制备方法，解决上述问题。
本发明的技术方案是这样实现的：一种槟榔花提取物的制备方法：包括以下步骤：
S1、预处理：将采摘后的鲜槟榔花，为花苞期雄花，清洗干净，挑出坏苞、坏瓣，切成1-2cm小段，搅碎；
S2、酶解：将搅碎后的鲜槟榔花加入槟榔花重量8-15倍的水，再加入复合酶，在10-20℃下酶解1-3h，得到酶解液；
S3、超声波提取：将上述酶解液采用超声浸提两次，第一次提取：超声波功率为300-500W，超声波辐照温度为80-100℃，提取时间40-50h；第二次提取：超声波功率为600-700W，超声波辐照温度为110-130℃，提取时间为20-30h，过滤，合并滤液，滤渣备用，合并滤液倒入浓缩罐中，加热，减压浓缩，回收酒精，浓缩至相对密度1.05-1.20，得到水提物；
S4、醇提：将S3得到的滤渣用质量浓度为60-85％的乙醇溶液提取，槟榔花和乙醇溶液的质量体积比g/mL为1:4-10，提取时间40-50h，过滤，浓缩至相对密度1.05-1.20，得到醇提物；
S5、混匀干燥：合并上述水提物和醇提物混匀搅拌10-20min，进行真空冷冻干燥，得到槟榔花提取物。
进一步的，所述S2中复合酶为质量比2-3:1-5:0.3-1.2的甘露聚糖酶、纤维素酶、β-葡聚糖酶。
进一步的，所述S2中复合酶的添加量为槟榔花重量0.005-0.5％。
进一步的，所述S3、S4中减压浓缩温度为50-58℃，真空度-0.06～-0.08Mpa。
进一步的，所述S5中搅拌速率为400-600rpm。
进一步的，所述S5中真空度为40-60Pa。
进一步的，所述S5中真空冷冻干燥温度为-22～-10℃。
进一步的，所述S5中真空冷冻干燥时间为15-22min。
进一步的，一种槟榔花提取物，由一种槟榔花提取物的制备方法制备而成。
进一步的，所述的槟榔花提取物在制备槟榔花口服液中的应用。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
本发明提取方法控制提取的溶剂、酶解条件、超声条件和醇提条件，各步骤和参数之间协同作用，使得活性成分得到充分的提取，且保留该活性成分的完整性，槟榔花的提取物中槟榔碱含量的提高率为527-598％，槟榔次碱含量的提高率为为432-480％，槟榔多酚含量的提高率为610-638％，其中，经甘露聚糖酶能够和纤维素酶、β-葡聚糖酶结合，破坏槟榔花细胞壁使得其有效成分充分的提取，特定的复合酶之间的配比，能达到较好的酶解效果，控制超声温度，在高温下更易于提取槟榔碱、槟榔次碱和槟榔多酚。
具体实施方式
为了更好理解本发明技术内容，下面提供具体实施例，对本发明做进一步的说明。
本发明实施例所用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
本发明实施例所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
实施例1
一种槟榔花提取物的制备方法：包括以下步骤：
S1、预处理：将采摘后的槟榔花清洗干净，挑出坏苞、坏瓣，切成1-2cm小段，搅碎，
S2、酶解：将搅碎后的槟榔花加入槟榔花重量8倍的水，再加入槟榔花重量0.005％的复合酶，所述S2中复合酶为质量比2:1:0.3的甘露聚糖酶、纤维素酶、β-葡聚糖酶，在10℃下酶解1h，得到酶解液；
S3、超声波提取：将上述酶解液采用超声浸提两次，第一次提取：超声波功率为300W，超声波辐照温度为80℃，提取时间40h；第二次提取：超声波功率为600W，超声波辐照温度为110℃，提取时间为20h，过滤，合并滤液，滤渣备用，合并滤液倒入浓缩罐中，加热，减压浓缩，浓缩温度为50℃，真空度-0.06Mpa，回收酒精，浓缩至相对密度1.05，得到水提物；
S4、醇提：将S3得到的滤渣用质量浓度为60％的乙醇溶液提取，槟榔花和乙醇溶液的质量体积比g/mL为1:4，提取时间40h，过滤，浓缩至相对密度1.05，减压浓缩温度为50℃，真空度-0.06Mpa，得到醇提物；
S5、混匀干燥：合并上述水提物和醇提物混匀搅拌10min，搅拌速率为400rpm，真空度为40Pa、温度为-22℃进行真空冷冻干燥15min，得到槟榔花提取物。
实施例2
一种槟榔花提取物的制备方法：包括以下步骤：
S1、预处理：将采摘后的槟榔花清洗干净，挑出坏苞、坏瓣，切成1-2cm小段，搅碎，
S2、酶解：将搅碎后的槟榔花加入槟榔花重量15倍的水，再加入槟榔花重量0.5％的复合酶，所述S2中复合酶为质量比3:5:1.2的甘露聚糖酶、纤维素酶、β-葡聚糖酶，在20℃下酶解3h，得到酶解液；
S3、超声波提取：将上述酶解液采用超声浸提两次，第一次提取：超声波功率为500W，超声波辐照温度为100℃，提取时间50h；第二次提取：超声波功率为700W，超声波辐照温度为130℃，提取时间为30h，过滤，合并滤液，滤渣备用，合并滤液倒入浓缩罐中，加热，减压浓缩，浓缩温度为58℃，真空度-0.08Mpa，回收酒精，浓缩至相对密度1.20，得到水提物；
S4、醇提：将S3得到的滤渣用质量浓度为85％的乙醇溶液提取，槟榔花和乙醇溶液的质量体积比g/mL为1:10，提取时间50h，过滤，浓缩至相对密度1.20，减压浓缩温度为58℃，真空度-0.08Mpa，得到醇提物；
S5、混匀干燥：合并上述水提物和醇提物混匀搅拌20min，搅拌速率为600rpm，真空度为60Pa、温度为-10℃进行真空冷冻干燥22min，得到槟榔花提取物。
实施例3
一种槟榔花提取物的制备方法：包括以下步骤：
S1、预处理：将采摘后的槟榔花清洗干净，挑出坏苞、坏瓣，切成1-2cm小段，搅碎，
S2、酶解：将搅碎后的槟榔花加入槟榔花重量12倍的水，再加入槟榔花重量0.03％的复合酶，所述S2中复合酶为质量比2.5:3:0.7的甘露聚糖酶、纤维素酶、β-葡聚糖酶，在15℃下酶解2h，得到酶解液；
S3、超声波提取：将上述酶解液采用超声浸提两次，第一次提取：超声波功率为400W，超声波辐照温度为90℃，提取时间45h；第二次提取：超声波功率为600W，超声波辐照温度为120℃，提取时间为25h，过滤，合并滤液，滤渣备用，合并滤液倒入浓缩罐中，加热，减压浓缩，浓缩温度为55℃，真空度-0.07Mpa，回收酒精，浓缩至相对密度1.18，得到水提物；
S4、醇提：将S3得到的滤渣用质量浓度为75％的乙醇溶液提取，槟榔花和乙醇溶液的质量体积比g/mL为1:8，提取时间45h，过滤，浓缩至相对密度1.18，减压浓缩温度为55℃，真空度-0.07Mpa，得到醇提物；
S5、混匀干燥：合并上述水提物和醇提物混匀搅拌5min，搅拌速率为500rpm，真空度为50Pa、温度为-16℃进行真空冷冻干燥18min，得到槟榔花提取物。
实施例4
本实施例与实施例3的区别在于，所述复合酶为质量比1:8:0.2的甘露聚糖酶、纤维素酶、β-葡聚糖酶，具体为一种槟榔花提取物的制备方法：包括以下步骤：
S1、预处理：将采摘后的槟榔花清洗干净，挑出坏苞、坏瓣，切成1-2cm小段，搅碎，
S2、酶解：将搅碎后的槟榔花加入槟榔花重量12倍的水，再加入槟榔花重量0.03％的复合酶，所述S2中复合酶为质量比2.5:3:0.7的甘露聚糖酶、纤维素酶、β-葡聚糖酶，在15℃下酶解2h，得到酶解液；
S3、超声波提取：将上述酶解液采用超声浸提两次，第一次提取：超声波功率为400W，超声波辐照温度为90℃，提取时间45h；第二次提取：超声波功率为600W，超声波辐照温度为120℃，提取时间为25h，过滤，合并滤液，滤渣备用，合并滤液倒入浓缩罐中，加热，减压浓缩，浓缩温度为55℃，真空度-0.07Mpa，回收酒精，浓缩至相对密度1.18，得到水提物；
S4、醇提：将S3得到的滤渣用质量浓度为75％的乙醇溶液提取，槟榔花和乙醇溶液的质量体积比g/mL为1:8，提取时间45h，过滤，浓缩至相对密度1.18，减压浓缩温度为55℃，真空度-0.07Mpa，得到醇提物；
S5、混匀干燥：合并上述水提物和醇提物混匀搅拌5min，搅拌速率为500rpm，真空度为50Pa、温度为-16℃进行真空冷冻干燥18min，得到槟榔花提取物。
实施例5
本实施例与实施例3的区别在于，所述S3中超声提取的温度均为38℃，具体为一种槟榔花提取物的制备方法：包括以下步骤：
S1、预处理：将采摘后的槟榔花清洗干净，挑出坏苞、坏瓣，切成1-2cm小段，搅碎，
S2、酶解：将搅碎后的槟榔花加入槟榔花重量12倍的水，再加入槟榔花重量0.03％的复合酶，所述S2中复合酶为质量比2.5:3:0.7的甘露聚糖酶、纤维素酶、β-葡聚糖酶，在15℃下酶解2h，得到酶解液；
S3、超声波提取：将上述酶解液采用超声浸提两次，第一次提取：超声波功率为400W，超声波辐照温度为90℃，提取时间45h；第二次提取：超声波功率为600W，超声波辐照温度为120℃，提取时间为25h，过滤，合并滤液，滤渣备用，合并滤液倒入浓缩罐中，加热，在温度为38℃，真空度-0.010Mpa下减压浓缩，浓缩至相对密度1.18，回收酒精，得到水提物；
S4、醇提：将S3得到的滤渣用质量浓度为75％的乙醇溶液提取，槟榔花和乙醇溶液的质量体积比g/mL为1:8，提取时间45h，过滤，浓缩至相对密度1.18，减压浓缩温度为55℃，真空度-0.07Mpa，得到醇提物；
S5、混匀干燥：合并上述水提物和醇提物混匀搅拌5min，搅拌速率为500rpm，真空度为50Pa、温度为-16℃进行真空冷冻干燥18min，得到槟榔花提取物。
将上述实施例1～5提取得到的槟榔花提取物及其槟榔花雄花测定其槟榔碱、槟榔次碱和槟榔多酚的含量，采用高效液相法测定，计算出槟榔碱、槟榔次碱、槟榔多酚的含量；
高效液相色谱：
色谱柱：NucleosilSA
阳离子交换色谱柱(4.6mm×250mm，Chemicalbook5μm)，
流动相：甲醇-水-磷酸(60:40:0.3，氨试液调pH3.8)，流速1.0mL·min-1，检测波长为212nm，柱温30℃。
测出各含量后，经以下公式算得活性成分的提高率(％)：
活性成分提高率(％)＝(m-M)/M×100，
式中，m为槟榔花提取物的活性成分含量，M为槟榔花雄花活性成分含量，测定结果如下：
由上述结果可知，本发明的槟榔花的提取物中槟榔碱含量的提高率为527-598％，槟榔次碱含量的提高率为为432-480％，槟榔多酚含量的提高率为610-638％，则说明按照本发明的提取方法是的槟榔花中槟榔碱、槟榔次碱和槟榔多酚成分得以释放，同时保证该成分的完整性；实施例3与实施例4比较，限定复合酶之间的配比，能达到较好的酶解效果，从而提高提取效率，实施例3与实施例5比较，在实施例3的温度下提取的槟榔碱、槟榔次碱和槟榔多酚的含量高于实施例5的温度，说明槟榔花中槟榔碱、槟榔次碱和槟榔多酚对高温不敏感，在此温度下提取率更高。上表显示，实施例3提取出的槟榔碱、槟榔次碱和槟榔多酚的含量最高。
将本发明的实施例3提取的结果，对其作出下述对照试验，具体如下：
对比例1
本对比例与实施例3比较，在提取过程中未进行酶解，而是直接进行提取，具体为一种槟榔花提取物的制备方法：包括以下步骤：
S1、预处理：将采摘后的槟榔花清洗干净，挑出坏苞、坏瓣，切成1-2cm小段，搅碎，
S2、超声波提取：将上述槟榔花采用超声浸提两次，第一次提取：超声波功率为400W，超声波辐照温度为90℃，提取时间45h；第二次提取：超声波功率为600W，超声波辐照温度为120℃，提取时间为25h，过滤，合并滤液，滤渣备用，合并滤液倒入浓缩罐中，加热，减压浓缩，浓缩温度为55℃，真空度-0.07Mpa，回收酒精，浓缩至相对密度1.18，得到水提物；
S3、醇提：将S3得到的滤渣用质量浓度为75％的乙醇溶液提取，槟榔花和乙醇溶液的质量体积比g/mL为1:8，提取时间45h，过滤，浓缩至相对密度1.18，减压浓缩温4、混匀干燥：合并上述水提物和醇提物混匀搅拌5min，搅拌速率为500rpm，真空度为50Pa、温度为-16℃进行真空冷冻干燥18min，得到槟榔花提取物。
对比例2
本对比例与实施例3的区别在于，所述复合酶中未加入甘露聚糖酶，具体为一种槟榔花提取物的制备方法：包括以下步骤：
S1、预处理：将采摘后的槟榔花清洗干净，挑出坏苞、坏瓣，切成1-2cm小段，搅碎，
S2、酶解：将搅碎后的槟榔花加入槟榔花重量12倍的水，再加入槟榔花重量0.03％的复合酶，所述S2中复合酶为质量比3:0.7的纤维素酶、β-葡聚糖酶，在15℃下酶解2h，得到酶解液；
S3、超声波提取：将上述酶解液采用超声浸提两次，第一次提取：超声波功率为400W，超声波辐照温度为90℃，提取时间45h；第二次提取：超声波功率为600W，超声波辐照温度为120℃，提取时间为25h，过滤，合并滤液，滤渣备用，合并滤液倒入浓缩罐中，加热，减压浓缩，浓缩温度为55℃，真空度-0.07Mpa，回收酒精，浓缩至相对密度1.18，得到水提物；
S4、醇提：将S3得到的滤渣用质量浓度为75％的乙醇溶液提取，槟榔花和乙醇溶液的质量体积比g/mL为1:8，提取时间45h，过滤，浓缩至相对密度1.18，减压浓缩温度为55℃，真空度-0.07Mpa，得到醇提物；
S5、混匀干燥：合并上述水提物和醇提物混匀搅拌5min，搅拌速率为500rpm，真空度为50Pa、温度为-16℃进行真空冷冻干燥18min，得到槟榔花提取物。
对比例3
本对比例与实施例3的区别在于，未进行醇提，具体为一种槟榔花提取物的制备方法：包括以下步骤：
S1、预处理：将采摘后的槟榔花清洗干净，挑出坏苞、坏瓣，切成1-2cm小段，搅碎，
S2、酶解：将搅碎后的槟榔花加入槟榔花重量12倍的水，再加入槟榔花重量0.03％的复合酶，所述S2中复合酶为质量比2.5:3:0.7的甘露聚糖酶、纤维素酶、β-葡聚糖酶，在15℃下酶解2h，得到酶解液；
S3、超声波提取：将上述酶解液采用超声浸提两次，第一次提取：超声波功率为400W，超声波辐照温度为90℃，提取时间45h；第二次提取：超声波功率为600W，超声波辐照温度为120℃，提取时间为25h，过滤，合并滤液，滤渣备用，合并滤液倒入浓缩罐中，加热，减压浓缩，浓缩温度为55℃，真空度-0.07Mpa，回收酒精，浓缩至相对密度1.18，得到水提物；
S4、混匀干燥：合并上述水提物和醇提物混匀搅拌5min，搅拌速率为500rpm，真空度为50Pa、温度为-16℃进行真空冷冻干燥18min，得到槟榔花提取物。
将上述对比例1～3与实施例3的方法提取的提取物含量提高率进行对比，按照上述公式计算，结果如下：
由上述对比结果可知，实施例3与对比例1比较，复合酶能够将槟榔花中的有效活性成分酶解出来，而更加有效的通过超声辅助水提和醇提，获得含量较高的槟榔碱、槟榔次碱和槟榔多酚；实施例3与对比例2比较，甘露聚糖酶能够和纤维素酶、β-葡聚糖酶结合，破坏槟榔花纤维束、维管束及周围的薄壁细胞使得其有效成分充分的提取；与对比例3比较，醇提能再将槟榔花中溶于醇的槟榔碱提取出来，使得槟榔碱的提取含量更高。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (9)

1.一种槟榔花提取物的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
S1、预处理：将采摘后的鲜槟榔花清洗干净，挑出坏苞、坏瓣，切成1-2cm小段，搅碎；
S2、酶解：将搅碎后的槟榔花加入槟榔花重量8-15倍的水，再加入复合酶，在10-20℃下酶解1-3h，得到酶解液；所述复合酶为质量比2-3:1-5:0.3-1.2的甘露聚糖酶、纤维素酶、β-葡聚糖酶；
S3、超声波提取：将上述酶解液采用超声浸提两次，第一次提取：超声波功率为300-500W，超声波辐照温度为80-100℃，提取时间40-50h；第二次提取：超声波功率为600-700W，超声波辐照温度为110-130℃，提取时间为20-30h，过滤，合并滤液，滤渣备用，合并滤液倒入浓缩罐中，加热，减压浓缩，浓缩至相对密度1.05-1.20，得到水提物；
S4、醇提：将S3得到的滤渣用质量浓度为60-85%的乙醇溶液提取，槟榔花和乙醇溶液的质量体积比g/mL为1:4-10，提取时间40-50h，过滤，减压浓缩至相对密度1.05-1.20，得到醇提物；
S5、混匀干燥：合并上述水提物和醇提物混匀搅拌10-20min，进行真空冷冻干燥，得到槟榔花提取物。
2.如权利要求1所述的一种槟榔花提取物的制备方法，其特征在于：所述S2中复合酶的添加量为槟榔花重量0.005-0.5%。
3.如权利要求1所述的一种槟榔花提取物的制备方法，其特征在于：所述S3、S4中减压浓缩温度为50-58℃，真空度-0.06~-0.08Mpa。
4.如权利要求1所述的一种槟榔花提取物的制备方法，其特征在于：所述S5中搅拌速率为400-600rpm。
5.如权利要求1所述的一种槟榔花提取物的制备方法，其特征在于：所述S5中真空度为40-60Pa。
6.如权利要求1所述的一种槟榔花提取物的制备方法，其特征在于：所述S5中真空冷冻干燥温度为-22~-10℃。
7.如权利要求1所述的一种槟榔花提取物的制备方法，其特征在于：所述S5中真空冷冻干燥时间为15-22min。
8.一种槟榔花提取物，由权利要求1-7任一项所述的一种槟榔花提取物的制备方法制备而成。
9.如权利要求8所述的槟榔花提取物在制备槟榔花口服液中的应用。
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