CN115154376A - 一种凤尾草提取物的提取方法、凤尾草提取物及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开一种凤尾草提取物的提取方法、凤尾草提取物及其应用。该提取方法包括步骤：提供凤尾草和低共熔溶剂；将所述凤尾草进行预处理，得到凤尾草粉末；将所述凤尾草粉末与低共熔溶剂混合，经超声处理后，离心除杂，浓缩，得到凤尾草提取物。本发明采用了超声辅助萃取技术，利用超声波空化，破坏植物细胞壁，有助于细胞内的物质溶出和扩散；又采用了具有无毒性、可生物降解、可回收、易制备的低共熔溶剂为萃取剂。本发明的超声辅助低共熔溶剂提取方法，是一种绿色的萃取分离方法，提高了萃取效率，缩短了萃取时间，降低了有机溶剂的使用，绿色环保。本发明获得的凤尾草提取物具有抗炎、修复等功效，可以直接应用在化妆品领域中。

Description

一种凤尾草提取物的提取方法、凤尾草提取物及其应用
技术领域
本发明涉及植物提取技术领域，尤其涉及一种凤尾草提取物的提取方法、凤尾草提取物及其应用。
背景技术
凤尾草系凤尾蕨科植物凤尾草，另名井栏边草Pteris multifida Polir.的干燥全草，产于华北、中南、华东、华南、西南地区。性寒，味淡、微苦，归大肠、肝、心经。是一种民间广泛使用、历史悠久的中草药。具有清热利湿、抗菌消炎、消肿解毒等功效，治疗痢疾、扁桃体炎、肝炎、糖尿病、抗肿瘤效果。1977年版中国药典提及凤尾草的功能与主治：清湿热解毒、止血、用于痢疾、黄疸、肝炎、胃肠炎、乳腺炎、白带、崩漏、外治外伤出血、烧伤和烫伤。中药部颁标准第5册还收载了含凤尾草的复方制剂尿感宁冲剂(标准编号:WS3-B-0949-91)。
目前，关于凤尾草的提取方式都还是传统方式，对其性质的研究也主要集中在烧伤修复、抗菌抑菌等医药方面，国内外尚未报道凤尾草低共熔溶剂萃取的凤尾草提取物应用于敏感皮肤修复研究。
发明内容
鉴于上述现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种凤尾草提取物的提取方法、凤尾草提取物及其应用，旨在解决传统提取方法以有机溶剂为提取溶剂，溶剂消耗量大，且工艺耗时的问题。
本发明的技术方案如下：
本发明的第一方面，提供一种凤尾草提取物的提取方法，其中，包括步骤：
提供凤尾草和低共熔溶剂；
将所述凤尾草进行预处理，得到凤尾草粉末；
将所述凤尾草粉末与低共熔溶剂混合，经超声处理后，离心除杂，浓缩，得到凤尾草提取物。
可选地，所述将所述凤尾草进行预处理的步骤，具体包括：将凤尾草用水洗净，晾干，然后在50-70℃下干燥10-14h，经粉碎后过40-80目药典筛。
可选地，所述低共熔溶剂的配置方法，包括步骤：将氢键受体与氢键给体按照预设摩尔比混合后，在预设温度、预设转速条件下加热预设时间后，得到所述低共熔溶剂。
可选地，所述氢键受体为甜菜碱，所述氢键给体为1，3-丁二醇、尿素、甘油、1,3-丙二醇、乳酸中的一种或两种；
和/或，所述氢键受体与氢键给体的摩尔比为1:2-1:10。
可选地，所述预设温度为70-90℃，所述预设时间为1-2h，所述预设转速为400-800rpm。
可选地，所述凤尾草粉末与低共熔溶剂的质量体积比为1：20-60。
可选地，所述超声处理的时间为10-25min，所述超声处理的温度为40-60℃，所述超声功率为200-500W。
可选地，所述离心除杂，浓缩的步骤，具体包括：在2000-4000rpm条件下离心得到上清液和残渣，残渣继续利用所述低共熔溶剂萃取2-3次，收集上清液，浓缩。
本发明的第二方面，提供一种凤尾草提取物，其中，采用本发明所述的凤尾草提取物的提取方法提取得到。
本发明的第三方面，提供一种本发明所述的凤尾草提取物在制备具有敏感皮肤修复功效的化妆品中的应用。
有益效果：本发明提供的凤尾草提取物的提取方法，采用了超声辅助萃取技术，利用超声波高速强烈的空化效应，破坏植物细胞，使溶剂渗入到细胞内，不破坏生物活性；又采用了具有无毒性、可生物降解、可回收、易制备的低共熔溶剂为萃取剂。本实施例的超声辅助低共熔溶剂提取方法与传统的提取方法相比，是一种绿色的萃取分离方法，提高了萃取效率，缩短了萃取时间，降低了有机溶剂的使用，绿色环保。本发明获得的凤尾草提取物具有抗炎、修复等功效，可以直接应用在化妆品领域中。
附图说明
图1为针对实施例2基于巨噬细胞细胞毒性检测结果。
图2为针对实施例2基于角质形成细胞细胞毒性检测结果。
图3为针对实施例2进行的细胞划痕效果图。
图4为针对实施例2进行的IL-6炎症因子抑制效果图。
具体实施方式
本发明提供一种凤尾草提取物的提取方法、凤尾草提取物及其应用，为使本发明的目的、技术方案及效果更加清楚、明确，以下对本发明进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
目前凤尾草提取物的提取方法是以有机溶剂为提取溶剂，溶剂消耗量大，且工艺比较耗时长。
因此，寻找经济高效且绿色的提取溶剂具有重要意义。低共熔溶剂是由氢键受体和氢键给体按照一定化学计量比组合成的两组或三组分低共熔混合物，其凝固点显著低于各个组分纯物质的熔点。它具有不易挥发、热稳定性高、无毒性、可生物降解、易制备、低成本等优点，因此，是一种新型的绿色溶剂。
发明人研究发现，采用低共熔溶剂，并结合超声波技术，来提取凤尾草提取物，可以获得良好效果。
基于此，本发明实施例提供一种凤尾草提取物的提取方法，其中，包括步骤：
提供凤尾草和低共熔溶剂；
将所述凤尾草进行预处理，得到凤尾草粉末；
将所述凤尾草粉末与低共熔溶剂混合，经超声处理后，离心除杂，浓缩，得到凤尾草提取物。
本实施例提供的凤尾草提取物的提取方法，采用了超声辅助萃取技术，利用超声波高速强烈的空化效应，破坏植物细胞，使溶剂渗入到细胞内，不破坏生物活性；又采用了具有无毒性、可生物降解、可回收、易制备的低共熔溶剂为萃取剂。本实施例的超声辅助低共熔溶剂提取方法与传统的提取方法相比，是一种绿色的萃取分离方法，提高了萃取效率，缩短了萃取时间，减少了有机溶剂的使用，绿色环保。
在一种实施方式中，所述将所述凤尾草进行预处理的步骤，具体包括：将凤尾草用水洗净，晾干(可以自然晾干)，然后在50-70℃(如60℃)下干燥10-14h(如12h)，经粉碎后过40-80目药典筛。采用该预处理后，将获得的凤尾草粉末进行密封，保存备用。
在一种实施方式中，所述低共熔溶剂的配置方法，包括步骤：将氢键受体与氢键给体按照预设摩尔比混合后，在预设温度、预设转速条件下加热预设时间后，得到所述低共熔溶剂。
在一种实施方式中，所述氢键受体可以为甜菜碱等，所述氢键给体可以为1，3-丁二醇、尿素、甘油、1,3-丙二醇、乳酸等中的一种或两种。
利用甜菜碱，与1，3-丁二醇、尿素、甘油、1,3-丙二醇、乳酸中的一种或两种按照一定的摩尔比组合成低共熔溶剂，这几种溶剂在护肤品领域中也是常用成分，所以经过提取得到的组合物提取物可直接用于护肤品中。
当所述氢键给体选自1，3-丁二醇、尿素、甘油、1,3-丙二醇、乳酸等中的两种(两种氢键给体：氢键给体1和氢键给体2)时，所述低共熔溶剂的配置方法，包括步骤：
取氢键受体与氢键给体1按照预设摩尔比混合后，在预设温度、预设转速条件下加热预设时间后，得到低共熔溶剂1；再取氢键受体与氢键给体2按照预设摩尔比混合后，在预设温度、预设转速条件下加热预设时间后，得到低共熔溶剂2；将低共熔溶剂1和低共熔溶剂2进行混合，得到均一透明的低共熔溶剂，低共熔溶剂直接用作萃取液。
在一种实施方式中，所述氢键受体与氢键给体的摩尔比为1:2-1:10。
在一种实施方式中，所述预设温度为70-90℃(如80℃)，所述预设时间为1-2h，所述预设转速为400-800rpm。在该条件下，可以确保获得均一透明的低共熔溶剂。
在一种实施方式中，所述凤尾草粉末与低共熔溶剂的质量体积比为1：20-60。
在一种实施方式中，所述超声处理的时间为10-25min，所述超声处理的温度为40-60℃，所述超声功率为200-500W。
在一种实施方式中，所述离心除杂，浓缩的步骤，具体包括：在2000-4000rpm条件下离心得到上清液和残渣，残渣继续利用所述低共熔溶剂萃取2-3次，收集上清液，浓缩。其中，所述离心的时间为10-20min(如10min)。
本发明实施例提供一种凤尾草提取物，其中，采用本发明实施例所述的凤尾草提取物的提取方法提取得到。
本发明实施例提供一种如上所述的凤尾草提取物在制备具有敏感皮肤修复功效的化妆品中的应用。
本发明实施例获得的凤尾草提取物具有抗炎、修复等功效，可以直接应用在化妆品领域中。
下面通过具体的实施例对本发明作进一步地说明。
实施例1
将凤尾草用清水洗净，自然晾干，放置烘箱中，在60℃干燥12h，经过粉碎机粉碎后过40目药典筛，得到凤尾草粉末，密封保存，备用。取甜菜碱与尿素按照1:3的摩尔比例混合后，于80℃条件下，400rpm条件下加热1h后，形成均一透明的低共熔溶剂。将凤尾草粉末与制好的低共熔溶剂按照质量体积比1:25混合，在300W超声功率，40℃超声15min后，在3000rpm条件下离心10min，得到上清液和残渣，回收上清液，残渣继续用低共熔溶剂萃取3次，合并上清液，浓缩得到凤尾草提取物。
实施例2
将凤尾草用清水洗净，自然晾干，放置烘箱中，在60℃干燥12h，经过粉碎机粉碎后过40目药典筛，得到凤尾草粉末，密封保存，备用。取甜菜碱与1，3-丁二醇按照1:6的摩尔比例混合后，于80℃条件下，400rpm条件下加热1.5h后，形成均一透明的低共熔溶剂。将凤尾草粉末与制好的低共熔溶剂按照质量体积比1:40混合，在400W超声功率，50℃超声20min后，在3000rpm条件下离心15min，得到上清液和残渣，回收上清液，残渣继续用萃取液萃取3次，合并上清液，浓缩得到凤尾草提取物。
实施例3
将凤尾草用清水洗净，自然晾干，放置烘箱中，在60℃干燥12h，经过粉碎机粉碎后过40目药典筛，得到凤尾草粉末，密封保存，备用。取甜菜碱与1，3-丁二醇按照1:9的摩尔比例混合后，于80℃条件下，400rpm条件下加热2h后，形成均一透明的低共熔溶剂。将凤尾草粉末与制好的低共熔溶剂按照质量体积比1:60混合，在500W超声功率，60℃超声25min后，在3000rpm条件下离心20min，得到上清液和残渣，回收上清液，残渣继续用萃取液萃取3次，合并上清液，浓缩得到凤尾草提取物。
本发明还对凤尾草进行了安全性和功效型评估检测：
实施例4
针对实施例2进行了安全性评估检测：
基于巨噬细胞细胞毒性检测试验，结果如图1所示。从图1可知，实施例2获得的凤尾草提取物基于巨噬细胞，凤尾草提取物在0.3125％浓度范围内未表现出明显的细胞毒性。
基于角质形成细胞细胞毒性检测试验，结果如图2所示。从图2可知，实施例2获得的凤尾草提取物基于角质形成细胞，在0.625％的浓度范围内未表现出明显的细胞毒性。
1、鸡胚绒毛尿囊膜血管试验，结果如下表1所示。
表1、凤尾草提取物对鸡胚绒毛尿囊膜毒性效应实验结果
Figure BDA0003780032070000071
从上表1可以看出，该凤尾草提取物对鸡胎绒毛尿囊膜的RC50:33.52％(95％CI:28.60％-37.1％)，属于无刺激。
实施例5
针对实施例2进行了功效型评估检测：
1、针对实施例2进行了细胞划痕效果测试，结果如图1所示。其中，BC为空白对照组，PC(地塞米松)为阳性对照组。用1-test方法进行统计分析时，BC组、PC组与样品组(即凤尾草提取物)相比，显著性以*表示，P-value<0.05表示为*，P-value<0.01表示为**。
测试结果：
从图1中可以看出，凤尾草提取物有明显的细胞迁移，有一定的修复作用。
2、针对实施例2进行了IL-6炎症因子抑制效果测试，结果如图2所示。其中，BC为空白对照组，NC为阴性对照组，PC(地塞米松)为阳性对照组。用1-test方法进行统计分析时，与BC组相比，显著性以#表示，P-value<0.05表示为#，P-value<0.01表示为##；与NC组相比，显著性以*表示，P-value<0.05表示为*，P-value<0.01表示为**。
测试结果：
与空白对照组相比，阴性对照组的IL-6分泌水平显著升高(P<0.01)，说明本次实验刺激条件有效；
与阴性对照组相比，阳性对照组的IL-6分泌水平显著降低(P<0.01)，说明本次实验阳性对照组有效；
与阴性对照组相比，凤尾草提取物可显著降低IL-6含量。
因此，可以知道凤尾草提取物有显著的抗炎、修复效果。
综上所述，本发明提供一种凤尾草提取物的提取方法、凤尾草提取物及其应用。本发明的凤尾草提取物的提取方法，采用了超声辅助萃取技术，利用超声波空化，破坏植物细胞壁，有助于细胞内的物质溶出和扩散；又采用了具有无毒性、可生物降解、可回收、易制备的低共熔溶剂为萃取剂。本发明的超声辅助低共熔溶剂提取方法与传统的提取方法相比，是一种绿色的萃取分离方法，提高了萃取效率，缩短了萃取时间，降低了有机溶剂的使用，绿色环保。本发明获得的凤尾草提取物具有抗炎、修复等功效，可以直接应用在化妆品领域中。
应当理解的是，本发明的应用不限于上述的举例，对本领域普通技术人员来说，可以根据上述说明加以改进或变换，所有这些改进和变换都应属于本发明所附权利要求的保护范围。

Claims (10)

1.一种凤尾草提取物的提取方法，其特征在于，包括步骤：
提供凤尾草和低共熔溶剂；
将所述凤尾草进行预处理，得到凤尾草粉末；
将所述凤尾草粉末与低共熔溶剂混合，经超声处理后，离心除杂，浓缩，得到凤尾草提取物。
2.根据权利要求1所述的凤尾草提取物的提取方法，其特征在于，所述将所述凤尾草进行预处理的步骤，具体包括：将凤尾草用水洗净，晾干，然后在50-70℃下干燥10-14h，经粉碎后过40-80目药典筛。
3.根据权利要求1所述的凤尾草提取物的提取方法，其特征在于，所述低共熔溶剂的配置方法，包括步骤：将氢键受体与氢键给体按照预设摩尔比混合后，在预设温度、预设转速条件下加热预设时间后，得到所述低共熔溶剂。
4.根据权利要求3所述的凤尾草提取物的提取方法，其特征在于，所述氢键受体为甜菜碱，所述氢键给体为1，3-丁二醇、尿素、甘油、1,3-丙二醇、乳酸中的一种或两种；
和/或，所述氢键受体与氢键给体的摩尔比为1:2-1:10。
5.根据权利要求3所述的凤尾草提取物的提取方法，其特征在于，所述预设温度为70-90℃，所述预设时间为1-2h，所述预设转速为400-800rpm。
6.根据权利要求1所述的凤尾草提取物的提取方法，其特征在于，所述凤尾草粉末与低共熔溶剂的质量体积比为1：20-60。
7.根据权利要求1所述的凤尾草提取物的提取方法，其特征在于，所述超声处理的时间为10-25min，所述超声处理的温度为40-60℃，所述超声功率为200-500W。
8.根据权利要求1所述的凤尾草提取物的提取方法，其特征在于，所述离心除杂，浓缩的步骤，具体包括：在2000-4000rpm条件下离心得到上清液和残渣，残渣继续利用所述低共熔溶剂萃取2-3次，收集上清液，浓缩。
9.一种凤尾草提取物，其特征在于，采用权利要求1-8任一项所述的凤尾草提取物的提取方法提取得到。
10.一种权利要求9所述的凤尾草提取物在制备具有敏感皮肤修复功效的化妆品中的应用。
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