CN114983881B - 一种硇洲马尾藻提取物的提取方法、硇洲马尾藻提取物及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开一种硇洲马尾藻提取物的提取方法、硇洲马尾藻提取物及其应用。该提取方法包括步骤：将硇洲马尾藻进行预处理，得到硇洲马尾藻粉末；将所述硇洲马尾藻粉末与低共熔溶剂混合，经超声处理后，离心除杂，浓缩，得到硇洲马尾藻提取物。本发明采用了超声辅助萃取技术，利用超声波空化，破坏植物细胞壁，有助于细胞内的物质溶出和扩散；又采用了具有无毒性、可生物降解、可回收、易制备的低共熔溶剂为萃取剂。本发明的超声辅助低共熔溶剂提取方法，是一种绿色的萃取分离方法，提高了萃取效率，缩短了萃取时间，减少了有机溶剂的使用，绿色环保。本发明获得的硇洲马尾藻提取物具有抗炎、舒缓肌肤的功效，可以直接应用在化妆品领域中。

Description

一种硇洲马尾藻提取物的提取方法、硇洲马尾藻提取物及其 应用

技术领域

本发明涉及植物提取技术领域，尤其涉及一种硇洲马尾藻提取物的提取方法、硇洲马尾藻提取物及其应用。

背景技术

硇洲马尾藻Sargassum naozhouense Tseng et Lu，俗称黑菜，为褐藻门圆子纲墨角藻目马尾藻科马尾藻属海藻，硇洲马尾藻因具有清热、解喉毒、利尿等多种功效，常被当地居民大量采集食用。马尾藻的营养成分含量随马尾藻的种类、生长海域等不同而有差异。马尾藻中脂肪含量较低，富含褐藻淀粉、褐藻胶、褐藻糖胶、半纤维素和纤维素等。马尾藻是一种海洋植物，既可以入药当做药材食用，也可以作为食材制作美食食用。马尾藻具有抗凝血、抗氧化、抗肿瘤和抗病毒等功效。

目前，关于硇洲马尾藻的提取方式都还是传统方式，传统的提取法都是以有机溶剂为提取溶剂，溶剂消耗量大，且工艺耗时。除此之外，硇洲马尾藻为广东特有的海藻，其在化妆品领域中的应用还暂未发现。

因此，现有技术仍有待于改进和发展。

发明内容

鉴于上述现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种硇洲马尾藻提取物的提取方法、硇洲马尾藻提取物及其应用，旨在解决现有提取方法以有机溶剂为提取溶剂，溶剂消耗量大，且工艺耗时的问题。

本发明的技术方案如下：

本发明的第一方面，提供一种硇洲马尾藻提取物的提取方法，其中，包括步骤：

提供硇洲马尾藻和低共熔溶剂；

将所述硇洲马尾藻进行预处理，得到硇洲马尾藻粉末；

将所述硇洲马尾藻粉末与低共熔溶剂混合，经超声处理后，离心除杂，浓缩，得到硇洲马尾藻提取物。

可选地，所述将所述硇洲马尾藻进行预处理的步骤，具体包括：将硇洲马尾藻去除坏死部分，用水洗净，晾干，然后在40-60℃下干燥12-14h，经粉碎后过40-80目药典筛。

可选地，所述低共熔溶剂的配置方法，包括步骤：将氢键受体与氢键给体按照预设摩尔比混合后，在预设温度、预设转速条件下加热预设时间后，得到所述低共熔溶剂。

可选地，所述氢键受体为甜菜碱，所述氢键给体为1，3-丁二醇、尿素、甘油、1,3-丙二醇、乳酸中的一种或两种；

和/或，所述氢键受体与氢键给体的摩尔比为1:2-1:10。

可选地，所述预设温度为60-90℃，所述预设时间为1-2h，所述预设转速为400-800rpm。

可选地，所述硇洲马尾藻粉末与低共熔溶剂的质量体积比为1：30-70。

可选地，所述超声处理的时间为20-40min，所述超声处理的温度为40-60℃，所述超声功率为200-500W。

可选地，所述离心除杂，浓缩的步骤，具体包括：在2000-3000rpm条件下离心得到上清液和残渣，残渣继续利用所述低共熔溶剂萃取1-3次，收集上清液，浓缩。

本发明的第二方面，提供一种硇洲马尾藻提取物，其中，采用本发明所述的硇洲马尾藻提取物的提取方法提取得到。

本发明的第三方面，提供一种本发明所述的硇洲马尾藻提取物在制备具有敏感皮肤修复功效的化妆品中的应用。

有益效果：本发明提供的硇洲马尾藻提取物的提取方法，采用了超声辅助萃取技术，利用超声波空化，破坏植物细胞壁，有助于细胞内的物质溶出和扩散；又采用了具有无毒性、可生物降解、可回收、易制备的低共熔溶剂为萃取剂。本发明的超声辅助低共熔溶剂提取方法与传统的提取方法相比，是一种绿色的萃取分离方法，提高了萃取效率，缩短了萃取时间，降低了有机溶剂的使用，绿色环保。本发明获得的硇洲马尾藻提取物具有抗炎、舒缓肌肤的功效，可以直接应用在化妆品领域中。

附图说明

图1为针对实施例1进行基于巨噬细胞细胞毒性检测结果。

图2为针对实施例1进行基于角质形成细胞细胞毒性检测结果。

图3为针对实施例1进行的敏感度（TiVi）测试效果图。

图4为针对实施例1进行的TiVi700测试图像。

图5为针对实施例1进行的TNF-α炎症因子抑制效果图。

具体实施方式

本发明提供一种硇洲马尾藻提取物的提取方法、硇洲马尾藻提取物及其应用，为使本发明的目的、技术方案及效果更加清楚、明确，以下对本发明进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

目前天然植物的提取大多采用的方法是冷浸法、温提法、冷浸研磨法、索氏提取法、水提醇法等，传统的提取法都是以有机溶剂为提取溶剂，溶剂消耗量大，且工艺耗时。

因此，寻找经济高效且绿色的提取溶剂具有重要意义。低共熔溶剂是由氢键受体和氢键给体按照一定化学计量比组合成的两组或三组分低共熔混合物，其凝固点显著低于各个组分纯物质的熔点。它具有不易挥发、热稳定性高、无毒性、可生物降解、易制备、低成本等优点，因此，是一种新型的绿色溶剂。

发明人研究发现，采用低共熔溶剂，并结合超声波技术，来提取硇洲马尾藻提取物，可以获得良好效果。

基于此，本发明实施例提供一种硇洲马尾藻提取物的提取方法，其中，包括步骤：

提供硇洲马尾藻和低共熔溶剂；

将所述硇洲马尾藻进行预处理，得到硇洲马尾藻粉末；

将所述硇洲马尾藻粉末与低共熔溶剂混合，经超声处理后，离心除杂，浓缩，得到硇洲马尾藻提取物。

本实施例提供的硇洲马尾藻提取物的提取方法，采用了超声辅助萃取技术，利用超声波空化，破坏植物细胞壁，有助于细胞内的物质溶出和扩散；又采用了具有无毒性、可生物降解、可回收、易制备的低共熔溶剂为萃取剂。本实施例的超声辅助低共熔溶剂提取方法与传统的提取方法相比，是一种绿色的萃取分离方法，提高了萃取效率，缩短了萃取时间，减少了有机溶剂的使用，符合绿色化学的发展要求。

在一种实施方式中，所述将所述硇洲马尾藻进行预处理的步骤，具体包括：将硇洲马尾藻去除坏死部分，用水洗净，晾干（可以自然晾干），然后在40-60℃（如50℃）下干燥12-14h（如13h），经粉碎后过40-80目（如50目）药典筛。采用该预处理后，将获得的硇洲马尾藻粉末进行密封，保存备用。

在一种实施方式中，所述低共熔溶剂的配置方法，包括步骤：将氢键受体与氢键给体按照预设摩尔比混合后，在预设温度、预设转速条件下加热预设时间后，得到所述低共熔溶剂。

在一种实施方式中，所述氢键受体可以为甜菜碱等，所述氢键给体可以为1，3-丁二醇、尿素、甘油、1,3-丙二醇、乳酸等中的一种或两种。

利用甜菜碱，与1，3-丁二醇、尿素、甘油、1,3-丙二醇、乳酸中的一种或两种按照一定的摩尔比组合成低共熔溶剂，这几种溶剂在护肤品领域中也是常用成分，所以经过提取得到的组合物提取物可直接用于护肤品中。

当所述氢键给体选自1，3-丁二醇、尿素、甘油、1,3-丙二醇、乳酸等中的两种（两种氢键给体：氢键给体1和氢键给体2）时，所述低共熔溶剂的配置方法，包括步骤：

取氢键受体与氢键给体1按照预设摩尔比混合后，在预设温度、预设转速条件下加热预设时间后，得到低共熔溶剂1；再取氢键受体与氢键给体2按照预设摩尔比混合后，在预设温度、预设转速条件下加热预设时间后，得到低共熔溶剂2；将低共熔溶剂1和低共熔溶剂2进行混合，得到均一透明的低共熔溶剂，低共熔溶剂直接用作萃取液。

在一种实施方式中，所述氢键受体与氢键给体的摩尔比为1:2-1:10。

在一种实施方式中，所述预设温度为60-90℃，所述预设时间为1-2h，所述预设转速为400-800rpm（如400rpm）。在该条件下，可以确保获得均一透明的低共熔溶剂。

在一种实施方式中，所述硇洲马尾藻粉末与低共熔溶剂的质量体积比为1：30-70。

在一种实施方式中，所述超声处理的时间为20-40min，所述超声处理的温度为40-60℃，所述超声功率为200-500W。

在一种实施方式中，所述离心除杂，浓缩的步骤，具体包括：在2000-3000rpm（如2000rpm）条件下离心得到上清液和残渣，残渣继续利用所述低共熔溶剂萃取1-3次（如2次），收集上清液，浓缩。其中，所述离心的时间为10-20min。

本发明实施例提供一种硇洲马尾藻提取物，其中，采用本发明实施例所述的硇洲马尾藻提取物的提取方法提取得到。

本发明实施例提供一种如上所述的硇洲马尾藻提取物在制备具有敏感皮肤修复功效的化妆品中的应用。

本实施例采用低共熔溶剂与超声辅助手段相结合对硇洲马尾藻进行提取，得到硇洲马尾藻提取物。此提取方法操作简单可控、反应条件温和、活性成分不易破坏、环境友好。得到的硇洲马尾藻提取物不用去除溶剂，可直接应用。该硇洲马尾藻提取物具有抗炎、舒缓肌肤的功效，可以直接用于制作具有敏感皮肤修复功效的化妆品。

下面通过具体的实施例对本发明作进一步地说明。

实施例1

将硇洲马尾藻去除坏死部分，用清水洗净，自然晾干，放置烘箱中，在50℃干燥13h，经过粉碎机粉碎后过50目药典筛，得到硇洲马尾藻粉末，密封保存，备用。取甜菜碱与1，3-丁二醇按照1:4的摩尔比例混合后，于80℃、400rpm条件下加热1h后，形成均一透明的低共熔溶剂。将硇洲马尾藻粉末与制好的低共熔溶剂按照质量体积比1:30混合，在250W超声功率，40℃超声20min后，在2000rpm条件下离心10min，得到上清液和残渣，回收上清液，残渣继续用低共熔溶剂萃取2次，合并上清液，浓缩得到硇洲马尾藻提取物。

实施例2

将硇洲马尾藻去除坏死部分，用清水洗净，自然晾干，放置烘箱中，在50℃干燥13h，经过粉碎机粉碎后过50目药典筛，得到硇洲马尾藻粉末，密封保存，备用。取甜菜碱与尿素按照1:6的摩尔比例混合后，于80℃、400rpm条件下加热1.5h后，形成均一透明的低共熔溶剂。将硇洲马尾藻粉末与制好的低共熔溶剂按照质量体积比1:50混合，在350W超声功率，50℃超声30min后，在2000rpm条件下离心15min，得到上清液和残渣，回收上清液，残渣继续用萃取液萃取2次，合并上清液，浓缩得到硇洲马尾藻提取物。

实施例3

将硇洲马尾藻去除坏死部分，用清水洗净，自然晾干，放置烘箱中，在50℃干燥13h，经过粉碎机粉碎后过50目药典筛，得到硇洲马尾藻粉末，密封保存，备用。取甜菜碱与乳酸按照1:9的摩尔比例混合后，于80℃、400rpm条件下加热1.5h后，形成均一透明的低共熔溶剂，低共熔溶剂直接用作萃取液。将硇洲马尾藻粉末与制好的低共熔溶剂按照质量体积比1:70混合，在450W超声功率，60℃超声40min后，在2000rpm条件下离心20min，得到上清液和残渣，回收上清液，残渣继续用萃取液萃取2次，合并上清液，浓缩得到硇洲马尾藻提取物。

本发明还对硇洲马尾藻进行了安全性和功效型评估检测：

实施例4

针对实施例1进行了安全性评估检测：

基于巨噬细胞细胞毒性检测试验，结果如图1所示。从图1可知，实施例1获得的马尾藻提取物基于巨噬细胞，提取物在2.5%浓度范围内未表现出明显的细胞毒性。

基于角质形成细胞细胞毒性检测试验，结果如图2所示。从图2可知，实施例1获得的马尾藻提取物基于角质形成细胞，在0.0718%的浓度范围内未表现出明显的细胞毒性。

1、鸡胚绒毛尿囊膜血管试验，结果如下表1所示。

表1、硇洲马尾藻提取物对鸡胚绒毛尿囊膜毒性效应实验结果

从上表1可以看出，该硇洲马尾藻提取物对鸡胎绒毛尿囊膜的RC₅₀:34.73%(95%CI:30.62%-37.62%)，属于无刺激。

实施例5

针对实施例1进行了功效型评估检测：

1、针对实施例1进行了敏感度（TiVi）测试，结果如图3所示。其中，*：表示各时间点与造模后的数值，有差异性；**：表示各时间点与造模后的数值，有非常显著差异；***：表示组间有差异性。

测试结果：

阴性对照组在建模成功后，皮肤敏感度随着时间的推移缓慢降低，与建模后相比差异具有统计学意义（ P<0.05）；且阴性对照组在使用后90 min时间点皮肤敏感度（TiVi）的差值显著性低于空白组（ P<0.05），说明皮肤自身（阴性对照组）具有一定的修复能力；

硇洲马尾藻提取物在使用后40 min、60 min、90 min时间点，敏感度（TiVi）值均显著下降（p＜0.05）优于阴性对照组；说明硇洲马尾藻提取物可促进皮肤舒缓刺激，效果显著好于阴性对照组。

结论：

TiVi柱状图结合TiVi700测试图像如图4所示，图4中代表着皮肤敏感的情况，经过一段时间，皮肤红色减弱，说明硇洲马尾藻提取物起到了降低皮肤敏感度的作用。从图4也可知，在进行乳酸刺痛实验后的40 min、60 min、90 min时间点，敏感度（TiVi）下降优于阴性对照组，说明硇洲马尾藻提取物可促进皮肤舒缓刺激，降低皮肤敏感度。

2、针对实施例1进行了TNF-α炎症因子抑制效果测试，结果如图5所示。其中，BC为空白对照组，NC为阴性对照组，PC（地塞米松）为阳性对照组。用1-test方法进行统计分析时，与BC组相比，显著性以#表示，P-value<0.05表示为#，P-value<0.01表示为##；与NC组相比，显著性以*表示，P-value<0.05表示为*，P-value<0.01表示为**。

测试结果：

与空白对照组相比，阴性对照组的TNF-α分泌水平显著升高(P<0.01)，说明本次实验刺激条件有效；

与阴性对照组相比，阳性对照组的TNF-α分泌水平显著降低(P<0.01)，说明本次实验阳性对照组有效；

与阴性对照组相比，硇洲马尾藻提取物可显著降低TNF-α含量，具有抗炎功效。

因此，依据实施例4、5的结果，可以知道硇洲马尾藻提取物具有抗炎、舒缓肌肤的效果。

综上所述，本发明提供一种硇洲马尾藻提取物的提取方法、硇洲马尾藻提取物及其应用。本发明的硇洲马尾藻提取物的提取方法，采用了超声辅助萃取技术，利用超声波空化，破坏植物细胞壁，有助于细胞内的物质溶出和扩散；又采用了具有无毒性、可生物降解、可回收、易制备的低共熔溶剂为萃取剂。本发明的超声辅助低共熔溶剂提取方法与传统的提取方法相比，是一种绿色的萃取分离方法，提高了萃取效率，缩短了萃取时间，减少了有机溶剂的使用，绿色环保。本发明获得的硇洲马尾藻提取物具有抗炎、舒缓肌肤的功效，可以直接应用在化妆品领域中。

应当理解的是，本发明的应用不限于上述的举例，对本领域普通技术人员来说，可以根据上述说明加以改进或变换，所有这些改进和变换都应属于本发明所附权利要求的保护范围。

Claims (1)

1.一种硇洲马尾藻提取物在制备具有敏感皮肤修复功效的化妆品中的应用，

其中，所述硇洲马尾藻提取物的提取方法，包括步骤：

提供硇洲马尾藻和低共熔溶剂；

将所述硇洲马尾藻进行预处理，得到硇洲马尾藻粉末；

将所述硇洲马尾藻粉末与低共熔溶剂混合，经超声处理后，离心除杂，浓缩，得到硇洲马尾藻提取物；

所述将所述硇洲马尾藻进行预处理的步骤，具体包括：将硇洲马尾藻去除坏死部分，用水洗净，晾干，然后在40-60℃下干燥12-14h，经粉碎后过40-80目药典筛；

所述低共熔溶剂的配置方法，包括步骤：将氢键受体与氢键给体按照预设摩尔比混合后，在预设温度、预设转速条件下加热预设时间后，得到所述低共熔溶剂；

所述氢键受体为甜菜碱，所述氢键给体为1，3-丁二醇、尿素、甘油、1,3-丙二醇、乳酸中的一种；

所述氢键受体与氢键给体的摩尔比为1:2-1:10；

所述预设温度为60-90℃，所述预设时间为1-2h，所述预设转速为400-800rpm；

所述硇洲马尾藻粉末与低共熔溶剂的质量体积比为1：30-70；

所述超声处理的时间为20-40min，所述超声处理的温度为40-60℃，所述超声功率为200-500W；

所述离心除杂，浓缩的步骤，具体包括：在2000-3000rpm条件下离心得到上清液和残渣，残渣继续利用所述低共熔溶剂萃取1-3次，收集上清液，浓缩。

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