CN113749994A - 一种具有抗敏祛痘作用的精油组合物、其制备方法及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种具有抗敏祛痘作用的精油组合物、其制备方法及其应用。该精油组合物由葎草精油、香橼皮精油、木姜子精油按3:6:4的比例组成，按照离子凝胶结合超声波法制成壳聚糖与该组合物按质量比为1:1的纳米乳，按10‑15％的比例添加到抗敏祛痘化妆品中。该精油组合物均从天然植物中提取而来，并可发挥协同增效作用，具有抑制透明质酸酶、抑制金黄色葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌和抑制黑色素沉着等活性，制备成的纳米乳可减少精油的挥发，维持精油有效成分的稳定，添加到化妆品中，长期使用可达到抗敏祛痘的功效，安全有效，作用温和，效果持久不反弹。
Description
技术领域
本发明涉及一种具有抗敏祛痘作用的精油组合物，更具体地涉及一种由葎草精油、香橼皮精油、木姜子精油组成的精油组合物，该精油组合物的制备方法及其应用，属于日用化学品领域。
背景技术
痘痘是毛囊皮脂腺的一种慢性炎症性皮肤病。痘痘的发生主要与皮脂分泌过多导致毛囊皮脂腺导管堵塞，皮脂排出被阻碍，同时脂肪酸趋化炎症细胞和介质，诱导并加剧炎症反应。近几年来人们生活水平不断提高，人们越来越注重外在形象，祛痘意识也在逐年提高，但是竞争日益激烈的祛痘市场中大多数的祛痘类化妆品会通过添加许多激素、抗生素、维A酸等物质，短期内减轻充血和水肿，使某些有皮肤损害的炎症反应暂时得到缓解和消退，但长期使用会产生耐药性和依赖性，一旦停用皮肤就会痒、红、肿、烂脸，痘痘会更快更猛的复发！我们平时使用的祛痘产品主要是通过一些方法来调节毛囊皮脂腺导管的角化，抑制皮脂的分泌，减少痤疮丙酸杆菌的繁殖，消除预防炎症反应的发生。
植物精油从天然植物萃取中而来，含有各种不同的天然物质，有着其他祛痘产品没有的优势。精油具有抗炎、抑菌、抗氧化、抗病毒、延缓皮肤老化、促进皮肤新陈代谢等作用，因此精油在祛痘领域会是一类绿色、安全、高效、温和的产品。这与整个消费意识形态往自然、生态方面发展的愿望是相同的，也就是最符合消费者的消费愿望。
迄今为止，已经开发了许多用于提取精油的方法，通过不同方法提取出的精油往往会有成分、含量、生物活性的差异。本发明通过查询文献，进行了大量筛选实验，优化提取方案，最终得到葎草精油、香橼皮精油、木姜子精油的最优制备方案。本发明有效地克服了精油易挥发、提取效率低等缺点，通过先进的纳米乳包被技术配制成复合精油纳米乳，减少精油挥发，避免精油有效成分氧化分解变质，增加精油的稳定性，优化皮肤对精油的吸收，掩盖或缓解精油的不良气味，使消费者更易接受，满足消费者的消费愿望。
葎草是桑科多年生攀援草本植物，茎、枝、叶柄均具倒钩刺。中国除新疆、青海外，南北各省区均有分布。日本、越南也有分布。常生于沟边、荒地、废墟、林缘边。葎草用作中药，有清热解毒，利尿通淋，主肺热咳嗽等功效，茎皮纤维可作造纸原料，种子油可制肥皂，果穗可代啤酒花用。
香橼是芸香科植物，又名枸橼或枸橼子，属不规则分枝的灌木或小乔木。新生嫩枝、芽及花蕾均暗紫红色。单叶，稀兼有单身复叶，叶片椭圆形或卵状椭圆形，叶缘有浅钝裂齿。中国台湾、福建、广东、广西、云南等省区南部较多栽种。其干片有清香气，味略苦而微甜，性温，无毒，具有理气宽中，消胀降痰功效。
木姜子是樟科木姜子属植物，为中国特有的香料植物资源之一，幼树树皮黄绿色，光滑，老树树皮灰褐色。主要分布于我国长江以南各省区，直至西藏，除高海拔地区外，大部分地区均有分布，长江以南，珠江以北地区较为常见。木姜子的果实、花、叶、木材及根均有用途，其中主要利用价值是果皮中含有芳香油，在香料工业和医药工业上有重要用途。药用方面具有理气散结、解毒消肿、止血之功能。民间用于治疗痈疽肿痛，乳痈，蛇虫咬伤，外伤出血；还可治疗脚肿、慢性气管炎等。
本发明人对多种芳香植物进行精油提取和活性筛选，经过大量研究实验，最后得到了本发明最佳比例的精油组合物，并证明了其在抗敏祛痘方面中的积极作用，并由此完成了本发明。本发明提供了一种精油组合物以及该精油组合物制备的纳米乳，具有显著的抑菌、抗敏和抑制黑色素沉着的作用，将其添加到化妆品中，可达到抗敏祛痘的功效。
发明内容
本发明的第一个目的在于提供一种精油组合物，该精油组合物提取方法简单，具有抗敏、抑菌和抑制黑色素沉着等功效。
本发明第二个目的在于提供上述精油组合物及其纳米乳的制备方法。
本发明第三个目的在于提供上述精油组合物纳米乳在制备抗敏祛痘化妆品中的应用。
本发明提供的一种精油组合物，由葎草精油、香橼皮精油、木姜子精油按3：6：4的比例组成。
优选地，上述精油组合物中葎草精油的制备方法是：
取葎草全株，干燥，粉碎，过80目筛，放入超临界CO2萃取釜中，萃取条件为：萃取压力20MPa、萃取温度50℃、CO2流量2.0L/min、萃取时间1.5h，收集分离釜中的挥发油，用无水硫酸钠干燥24h，3000rpm离心15min,吸取上层油状透明液体，即得葎草精油；
上述精油组合物中香橼皮精油的制备方法是：
将纤维素酶与果胶酶按2:1混合制成复合酶；取香橼鲜皮，干燥，粉碎，过80目筛，置圆底烧瓶中，加入18倍量蒸馏水，用盐酸调节pH至4.8后向烧瓶中加入0.5％的复合酶，置于水浴锅内50℃恒温酶解60min，升温至80℃杀酶，再将圆底烧瓶转入微波提取器中，设置微波功率为750W，微波辐射60min，在微波提取器上接挥发油分离器，收集蒸馏出的精油，即得香橼皮精油；
上述精油组合物中木姜子精油的制备方法是：
将纤维素酶与果胶酶按1:1混合制成复合酶；取木姜子果实，粉碎，过40目筛，置圆底烧瓶中，加入12倍量蒸馏水，用盐酸调节pH至5.0后向烧瓶中加入1％的复合酶，置于水浴锅内45℃恒温酶解30min，升温至80℃杀酶，向圆底烧瓶中加玻璃珠数粒，振摇混合后，连接回流冷凝管和挥发油分离器，保持微沸6h，收集蒸馏出的精油，即得木姜子精油；
按比例选取葎草精油、香橼皮精油、木姜子精油均匀混合，即得精油组合物。
所述用于抗敏祛痘化妆品中的精油组合物，按照离子凝胶结合超声波法制成壳聚糖与该组合物按质量比为1:1的纳米乳，按10-15％的比例添加到抗敏祛痘化妆品中。
所述抗敏祛痘化妆品，其在剂型和基质选择上没有特别限制，可制成抗敏祛痘保湿水、抗敏祛痘乳和抗敏祛痘霜等。
本发明还包括精油组合物在抗敏祛痘化妆品领域中的用途。
本发明精油组合物在抗敏祛痘化妆品领域的有益效果如下：
1.本发明精油组合物是一种从植物中提取的精油成分，活性高，无毒副作用，用于肌肤的抗敏祛痘，作用可靠持久不反弹。
2.本发明人独创地将葎草精油、香橼皮精油、木姜子精油进行组合，并经过大量配方比例的研究实验确定这些组分之间的用量配比，使该精油组合物具有明显的协同增效作用，可高效抑菌、抗敏、抑制黑色素的沉着，并通过离子凝胶结合超声波法将其制备成精油组合物纳米乳，有效地减少精油的挥发损失，维持精油有效组分的稳定，添加在保湿水、乳液、面霜等日用化妆品剂型中，温和无毒害，发挥抗敏祛痘功效。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明所述技术方案作进一步的说明。
实施例1抗敏祛痘系列化妆品的制备
第一步：各种精油的制备
葎草精油的制备方法：
取葎草全株，干燥，粉碎，过80目筛，放入超临界CO2萃取釜中，萃取条件为：萃取压力20MPa、萃取温度50℃、CO2流量2.0L/min、萃取时间1.5h，收集分离釜中的挥发油，用无水硫酸钠干燥24h，3000rpm离心15min,吸取上层油状透明液体，即得葎草精油。
香橼皮精油的制备方法：
将纤维素酶与果胶酶按2:1混合制成复合酶；取香橼皮，干燥，粉碎，过80目筛，置圆底烧瓶中，加入18倍量蒸馏水，用盐酸调节pH至4.8后向烧瓶中加入0.5％的复合酶，置于水浴锅内50℃恒温酶解60min，升温至80℃杀酶，再将圆底烧瓶转入微波提取器中，设置微波功率为750W，微波辐射60min，在微波提取器上接挥发油分离器，收集蒸馏出的精油，即得香橼皮精油。
木姜子精油的制备方法：
将纤维素酶与果胶酶按1:1混合制成复合酶；取木姜子果实，粉碎，过40目筛，置圆底烧瓶中，加入12倍量蒸馏水，用盐酸调节pH至5.0后向烧瓶中加入1％的复合酶，置于水浴锅内45℃恒温酶解30min，升温至80℃杀酶，向圆底烧瓶中加玻璃珠数粒，振摇混合后，连接回流冷凝管和挥发油分离器，保持微沸6h，收集蒸馏出的精油，即得木姜子精油。
第二步：精油组合物纳米乳的制备
(1)以1％冰醋酸(v/v)为溶剂配制3.2mg/mL壳聚糖溶液，超声波水浴1h后，1μm微孔滤膜过滤，以氢氧化钠调节滤液pH值至4.0；
(2)将吐温-80作为表面活性剂逐滴添加到加至上述壳聚糖滤液中，在60℃条件下搅拌30min得到均匀混合物；
(3)取精油组合物溶于无水乙醇，按照壳聚糖/精油组合物的质量比为1：1将精油组合物逐滴加入到冷却的壳聚糖溶液中，常温搅拌30min，在1200r/min条件下搅拌20min；
(4)将上述混合物加入三聚磷酸钠溶液，1000r/min持续搅拌50min，即得所需的精油组合物纳米乳。
第三步：将精油组合物纳米乳添加到日用化妆品制备成抗敏祛痘保湿水、抗敏祛痘乳、抗敏祛痘霜。
本发明提供一种所述精油组合物纳米乳在抗敏祛痘化妆品中的应用，优选所述精油组合物纳米乳在抗敏祛痘化妆品中质量添加量为10-15％。
所述抗敏祛痘化妆品，在剂型和基质选择上没有特别限制，可制成抗敏祛痘保湿水、抗敏祛痘乳膏和抗敏祛痘面霜等。
抗敏祛痘保湿水的制备：
抗敏祛痘保湿水的原料组分及含量如表1所示。
表1抗敏祛痘保湿水配方
制备工艺：
将精油组合物纳米乳、甘油、透明质酸钠和去离子水混合后，在80～100℃下加热搅拌使其充分融化成混合物料A；再将其余各组分加入混合物料A中，混合均匀，即得抗敏祛痘保湿水。
抗敏祛痘乳液的制备：
抗敏祛痘乳液的原料组分及含量如表2所示。
表2抗敏祛痘乳液配方
制备工艺：
将维生素E油、尼泊金甲酯、霍霍巴油、聚甘油脂肪酸酯、甘油作为油相，60℃加热并搅拌均匀，备用；将透明质酸钠、水溶性硅油、三乙醇胺、卡波姆、去离子水作为水相，加热至60～70℃，搅拌至均匀分散后，与油相混合，在60℃下匀质搅拌，搅拌速度控制在30r/min，加入精油组合物纳米乳，搅拌均匀，冷却至室温即得抗敏祛痘乳液。
抗敏祛痘面霜的制备：
抗敏祛痘面霜的原料组分及含量如表3所示。
表3抗敏祛痘面霜配方
制备工艺：
将硬脂酸、甘油、液体石蜡、单硬脂酸甘油酯、白凡士林、三乙醇胺、十二烷基硫酸钠、尼铂金乙酯混合，60℃加热熔融并搅拌均匀，加入去离子水，边加边搅拌得到O/W型乳霜基质；在60℃下恒温加热基质使其完全熔化，稍微冷却后，加入精油组合物纳米乳，搅拌均匀，冷却至室温即得抗敏祛痘面霜。
以下通过试验例进一步阐述本发明所述精油组合物具有抗敏、抑菌和抑制黑色素沉着功效，可用于制备抗敏祛痘系列化妆品。
试验例1
本发明精油组合物的体外抗过敏活性研究：
1.材料与方法
1.1试验材料
按上述实施方案分别制备葎草精油，香橼皮精油，木姜子精油。按组方比例制成葎草精油和香橼皮精油的精油组合物(组合物1，木姜子精油用等比例的花生油代替)；香橼皮精油和木姜子精油的精油组合物(组合物2，葎草精油用等比例的花生油代替)；葎草精油和木姜子精油的精油组合物(组合物3，香橼皮精油用等比例的花生油代替)；本发明精油组合物(组合物4)；本发明精油组合物纳米乳(组合物4制备的纳米乳)。
1.2试验方法
(1)将0.5mL透明质酸酶(500U/mL)加入到0.5mL醋酸缓冲液(0.1mol/L)中，分别加入精油组合物0.3mL、精油组合物纳米乳2mg，在37℃下孵育20min。然后加入0.1mL的CaCl2(2.5mol/L)，在37℃下孵育20min。
(2)20min后，加入1.2mg/mL透明质酸钠0.5mL，混合物在37℃孵育40min，放置室温10min。加入0.5mL乙酰丙酮(3.5mL乙酰丙酮溶于50mL 1mol/L碳酸钠溶液中)、0.1mL NaOH(5mol/L)，沸水浴15min，冰浴10min，放置室温10min来停止反应。
(3)将0.8g二甲基苯甲醛溶于15mL浓盐酸和15mL无水乙醇混合均匀制成显色剂，量取1mL显色剂加入上述反应液中；充分振荡后，加入无水乙醇3.5mL；然后将混合物放置室温30min。在530nm测定吸光度，根据下式计算透明质酸酶抑制活性(％)。
式中：A：对照溶液OD值；B：对照空白溶液(酶钝化、蒸馏水代替样品)OD值；C：试样溶液的OD值；D：不加试样的OD值。
2.结果与分析
各组合物对透明质酸酶的抑制率见表4。
表4各组合物的透明质酸抑制率试验结果(
n＝10)
与组合物1比较，*P<0.01；与组合物2比较，#P<0.01；与组合物3比较，△P<0.01；与组合物4比较，▲P<0.01。
从表4可以得到，各组合物均有抑制透明质酸酶的活性，说明具有一定的抗过敏作用，其中组合物5的抗敏活性最高。分别与组合物1、组合物2、组合物3比较，组合物4的抗敏活性均显著升高，说明将3种天然植物精油组合应用，其抗敏活性明显升高，缺少任何一种都会使其活性下降。由组合物4制备成纳米乳，其透明质酸酶抑制率较组合物4也有显著升高，因为组合物1-4中的精油不稳定易挥发，导致其作用时间短活性低，而制成纳米乳可以克服这一缺点，使其抗敏活性明显提高。
3.结论：本发明精油组合物及其纳米乳有较高的透明质酸酶抑制率，特别是精油组合物纳米乳，显示出良好的抗敏活性，可以起到快速抗敏、舒缓受损皮肤的作用。
试验例2
本发明精油组合物对金黄色葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌的体外抑制活性：
1.材料与方法
1.1试验材料
各组合物的制备方法同试验例1。
1.2试验方法
(1)菌种液的制备：无菌条件下，以移液枪吸取金黄色葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌2个菌株，分别在pH7.2～7.4的肉汤培养基37℃下培养约24h后，密封并轻轻搅匀作为菌种液。
(2)含菌培养基平皿的制备：将熔化并冷却至40℃左右的琼脂倒入经过高压蒸汽灭菌后的培养皿中，待培养基完全凝固后，分别加入0.1mL的金黄色葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌悬液，用涂布棒涂匀，使菌悬液均匀分布在培养基上。倒入灭菌后的培养皿中，放冷后，即得含菌培养基平板。
(3)抑菌圈的测量：待含有金黄色葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌的琼脂培养基凝固后，用直径7mm的打孔器打孔，每个培养皿可以打四个孔，每一个孔加30μL精油组合物和200mg的精油组合物纳米乳，水平置于37℃的培养箱中培养20-24h后，测量抑菌圈直径。每个组合物测试8次，计算均值和标准差。
2.结果与分析
各组合物对金黄色葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌的抑菌活性见表5。
表5各组合物对金黄色葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌的抑菌试验结果(
n＝8)
与组合物1比较，*P<0.01；与组合物2比较，#P<0.01；与组合物3比较，△P<0.05，△△P<0.01；与组合物4比较，▲P<0.01。
从表5可以得到，各组合物均对金黄色葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌有抑制作用，且组合物5抑菌作用最好。分别与组合物1、组合物2、组合物3比较，组合物4的抑菌活性均显著升高，说明3种天然植物精油组合可起到协同作用，对金黄色葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌的抑制作用明显加强，缺少任何一种都会使其活性下降。组合物1-4由于精油易挥发而使其作用下降，将精油组合物制备成纳米乳能显著克服这一缺点，可持久稳定高效地发挥抑菌作用。
3.结论：本发明精油组合物纳米乳能有效抑制金黄色葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌，从而达到持久祛痘的效果。
试验例3
本发明精油组合物对黑色素沉着的抑制作用：
1.材料与方法
1.1试验材料
各组合物的制备方法同试验例1。
1.2试验方法
(1)B16细胞的培养：以含10％胎牛血清的DMEM为培养液，将B16黑素瘤细胞在37℃、湿度为95％、CO2浓度为5％的环境中进行培养。
(2)黑色素含量的测定：取对数期的B16黑素瘤细胞，弃去培养液，用PBS清洗2次，加入培养液，调节细胞密度为以每孔1×104/mL的密度接种在96孔细胞培养板上，每孔加入200μL，培养24h后，细胞完全贴壁，弃去上层的培养基，加入含各组合物培养基500μL(分别含精油组合物30μL和精油组合物纳米乳200mg)，设定对照组(细胞+培养基)和空白对照组(培养基)，于37℃、5％CO2恒温培养箱中继续培养48h后，吸去培养液，使用PBS清洗5次，后使用0.25％胰蛋白酶消化处理细胞，再收集细胞到离心管中，以10000r/min离心10min，弃去上清液，后加入150μL含10％DMSO的2mol/L的NaOH 150μL，于65℃水浴完全溶解黑色素，并于80℃水浴中保温2h，通过每孔上清液在490nm波长下的吸收度，测定黑色素的含量用相对于空白对照吸收度的百分比表示，含量的百分比越小，证明样品对黑色素沉着的抑制作用越强。
2.结果与分析
各组合物对黑色素沉着的抑制作用见表6。
表6各组合物对黑色素沉着的抑制作用(
n＝10)
与组合物1比较，*P<0.01；与组合物2比较，#P<0.01；与组合物3比较，△P<0.01；与组合物4比较，▲P<0.01。
从表6可以得到，各精油组合物均对黑色素的沉着有抑制作用，且5号抑制色素沉着效果最好。分别与组合物1、组合物2、组合物3比较，组合物4的黑色素含量最低，说明3种天然植物精油组合可起到协同作用，黑色素含量显著降低，缺少任何一种都会使其抑制作用减弱。组合物1-4由于精油易挥发，导致其抑制黑色素沉着的作用减弱，将精油组合物制备成纳米乳，减少精油的挥发，可以稳定持久地发挥精油组合物活性成分对黑色素沉着的抑制作用。
Claims (4)
1.一种精油组合物，其特征在于，该组合物是由葎草精油、香橼皮精油和木姜子精油组合而成，其中所述葎草精油、香橼皮精油、木姜子精油的比例为3:6:4；
其中葎草精油的制备方法是：
取葎草全株，干燥，粉碎，过80目筛，放入超临界CO2萃取釜中，萃取条件为：萃取压力20MPa、萃取温度50℃、CO2流量2.0L/min、萃取时间1.5h，收集分离釜中的挥发油，用无水硫酸钠干燥24h，3000rpm离心15min,吸取上层油状透明液体，即得葎草精油；
其中香橼皮精油的制备方法是：
将纤维素酶与果胶酶按2:1混合制成复合酶；取香橼皮，干燥，粉碎，过80目筛，置圆底烧瓶中，加入18倍量蒸馏水，用盐酸调节pH至4.8后向烧瓶中加入0.5％的复合酶，置于水浴锅内50℃恒温酶解60min，升温至80℃杀酶，再将圆底烧瓶转入微波提取器中，设置微波功率为750W，微波辐射60min，在微波提取器上接挥发油分离器，收集蒸馏出的精油，即得香橼皮精油；
其中木姜子精油的制备方法是：
将纤维素酶与果胶酶按1:1混合制成复合酶；取木姜子果实，粉碎，过40目筛，置圆底烧瓶中，加入12倍量蒸馏水，用盐酸调节pH至5.0后向烧瓶中加入1％的复合酶，置于水浴锅内45℃恒温酶解30min，升温至80℃杀酶，向圆底烧瓶中加玻璃珠数粒，振摇混合后，连接回流冷凝管和挥发油分离器，保持微沸6h，收集蒸馏出的精油，即得木姜子精油；
按比例选取葎草精油、香橼皮精油、木姜子精油，混合均匀，即得精油组合物。
2.一种精油组合物纳米乳，其特征在于，采用离子凝胶结合超声波法，将如权利要求1所述的精油组合物制成壳聚糖与该组合物按质量比为1:1的纳米乳。
3.如权利要求2所述的精油组合物纳米乳，其特征在于，所述精油组合物纳米乳的制备包括以下步骤：
(1)以1％冰醋酸(v/v)为溶剂配制3.2mg/mL壳聚糖溶液，超声波水浴1h后，1μm微孔滤膜过滤，以氢氧化钠调节滤液pH值至4.0；
(2)将吐温-80作为表面活性剂逐滴添加到加至上述壳聚糖滤液中，在60℃条件下搅拌30min得到均匀混合物；
(3)取精油组合物溶于无水乙醇，按照壳聚糖/精油组合物的质量比为1：1将精油组合物逐滴加入到冷却的壳聚糖溶液中，常温搅拌30min，在1200r/min条件下搅拌20min；
(4)将上述混合物加入三聚磷酸钠溶液，1000r/min持续搅拌50min，即得所需的精油组合物纳米乳。
4.一种精油组合物纳米乳的应用，其特征在于，如权利要求2所述的精油组合物纳米乳按其质量占抗敏祛痘化妆品质量的10-15％添加到抗敏祛痘化妆品中；
由上述精油组合物纳米乳制得的抗敏祛痘化妆品，其在剂型和基质选择上没有特别的限制，可制成抗敏祛痘保湿水、抗敏祛痘乳和抗敏祛痘霜等。
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