CN112062870B - 一种具有美白保湿活性的多糖、含有该多糖的美白保湿面霜及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种具有美白保湿活性的多糖、含有该多糖的美白保湿面霜及其制备方法，该多糖为一种薰衣草多糖。酪氨酸酶是一种氧化酶，且是调控黑色素生成的限速酶，抑制了酪氨酸酶的活性就可以减少黑色素的合成，发挥美白效果。保湿性能是化妆品优劣的重要考量因素，保湿性能优异的化妆品可以锁住皮肤的水分，降低皮肤的干燥、老化等程度，滋养皮肤。上述试验结果说明，薰衣草多糖一方面具有抑制酪氨酸酶的活性，具有美白作用；另一方面具有保湿性能，具有保湿作用，有效锁水。因此，薰衣草多糖具有应用于美白保湿化妆品的价值。
Description
技术领域
本发明属于化妆品领域，涉及美白保湿成分的发现和应用，具体涉及一种具有美白保湿活性的多糖、含有该多糖的美白保湿面霜及其制备方法。
背景技术
随着人们生活水平的提高，人们对美的追求越来越高，对化妆品的需求越来越大，而随着回归自然呼声的高涨，以植物提取物为功效成分的化妆品越来越受到青睐。酪氨酸酶是黑色素合成过程中的主要限速酶，目前大多数美白化妆品都是通过抑制酪氨酸酶活性来达到美白功效。从中草药植物中提取的美白成分有它特有的优点：对皮肤温和、安全性高、刺激性小、药性稳定、药力持久，已逐渐成为现阶段化妆品行业新产品开发的热点。
薰衣草(Lavandula angustifolia)是唇形科薰衣草属植物，薰衣草的产地大部分在法国，英国、澳大利亚等国。在中国薰衣草的主要种植地区有西北地区，其中新疆伊犁地区种植薰衣草较为普遍。薰衣草富含精油、单宁、香豆素、类黄酮、类多酚等多种化学成分，以其作为原料提取出的物质在医药、食品、化妆品等方面具有广泛应用。研究表明，薰衣草精油具有抗氧化、抗真菌、镇静催眠、抗焦虑等功效。
但是，薰衣草精油在薰衣草干花中的含有量只有1.5％左右，若直接丢弃去精油后的残渣将造成极大的资源浪费。
发明内容
本发明是为了克服现有技术不足，对提取精油后的薰衣草残渣进一步开发利用，提供一种具有美白保湿活性的多糖、含有该多糖的美白保湿面霜及其制备方法。
本发明技术方案为：
一种薰衣草多糖，通过如下方法制备：
将经过精油提取后的薰衣草干花残渣加入到蒸馏水中，55℃条件下提取4h，提取液过滤收集滤液，浓缩，加入4倍体积无水乙醇，搅拌均匀后于4℃静置醇沉，抽滤，滤渣依次用无水乙醇、丙酮各洗涤，烘干得粗多糖；
取粗多糖用Sevag法脱蛋白后用蒸馏水溶解制成溶液，上样于DEAE-52纤维素柱内，先后以蒸馏水、0.9％氯化钠溶液淋洗10个柱体积，收集0.9％氯化钠溶液淋洗液，透析脱盐，浓缩、冷冻干燥即得薰衣草多糖。
上述薰衣草多糖用于制备美白化妆品的用途。
上述薰衣草多糖用于制备保湿化妆品的用途。
一种美白保湿面霜，配方如下。
有益效果：
酪氨酸酶是一种氧化酶，且是调控黑色素生成的限速酶，抑制了酪氨酸酶的活性就可以减少黑色素的合成，发挥美白效果。保湿性能是化妆品优劣的重要考量因素，保湿性能优异的化妆品可以锁住皮肤的水分，降低皮肤的干燥、老化等程度，滋养皮肤。上述试验结果说明，薰衣草多糖一方面具有抑制酪氨酸酶的活性，具有美白作用；另一方面具有保湿性能，具有保湿作用，有效锁水。因此，薰衣草多糖具有应用于美白保湿化妆品的价值。
附图说明
图1为薰衣草多糖的SEM图；
图2为薰衣草多糖和海藻酸钠的保湿率-时间曲线。
具体实施方式
实施例1：薰衣草多糖的制备
1、原料：薰衣草干花经过精油提取后的残渣。精油提取方法为乙醇提取法：将薰衣草干花粉碎后，按照料液比1:20加入无水乙醇浸泡0.5h，热回流提取2h，重复热回流提取1次。
2、多糖提取步骤
将2kg经过精油提取后的薰衣草干花残渣加入到40L蒸馏水中(料液比为1:20)，55℃条件下提取4h，提取液过滤收集滤液，浓缩至4L，加入4倍体积无水乙醇，搅拌均匀后于4℃静置醇沉。72h后，抽滤，滤渣依次用无水乙醇、丙酮各洗涤3次，55℃烘干得粗多糖。
取5g粗多糖用Sevag法脱蛋白后用蒸馏水溶解制成5mg/mL的溶液，上样于DEAE-52纤维素柱(2.5×30cm)内，先后以蒸馏水、0.9％氯化钠溶液以1.0mL/min的流速各淋洗10个柱体积，收集0.9％氯化钠溶液淋洗液，透析48h脱盐，浓缩、冷冻干燥即得薰衣草多糖。
2.3含量测定和扫描电子显微镜观察
采用苯酚-硫酸法测定薰衣草多糖中的多糖含量为(96.23±1.62)％。
扫描电子显微镜(SEM)观察结果如图1所示，应该为不同多糖的混合物。
实施例2：薰衣草多糖的美白保湿功效
1、美白试验
按照文献方法测定薰衣草多糖对酪氨酸酶的抑制活性，试剂配制和反应体系构建如下：
磷酸钠缓冲液(1/15M，pH＝6.8)：精确称取1.0002g磷酸二氢钠，1.1865g磷酸氢二钠，加入少量去离子水溶解后，定容至500mL，4℃冰箱保存备用。
L-酪氨酸溶液(7.5mmol/L)：精确称取L-酪氨酸0.2725g，先加入数滴浓盐酸，加去离子水约50mL，微热完全溶解后，用氢氧化钠溶液调pH至7.0，加去离子水定容至200mL。
受试液：精确称取薰衣草多糖0.1g，分别溶于20mL去离子水，得到5mg/mL的待测液，再对倍稀释到2.5、1.25、0.625、0.3125mg/mL和0.15625mg/mL。
阳性对照：精确称取0.1g熊果苷，溶于20mL的去离子水中，得到5mg/mL的阳性对照母液，再对倍稀释到2.5、1.25、0.625、0.3125mg/mL和0.15625mg/mL。
酪氨酸酶液的制备：将马铃薯洗净，于4℃预冷4h左右。去皮，切成约1×1×1cm3丁状，于-20℃冷冻过夜。称重，按1:1(w:v)的比例加入4℃预冷的磷酸钠缓冲液，用组织捣碎机制成匀浆，3层纱布过滤，滤液于4000r/min离心10min，上清即为酪氨酸酶粗酶液，4℃保存，2h内用完。
将上述各溶液按照表1体积构建反应体系，总反应体系为5mL。其中，用分光光度计测量吸光值时，“受试液”、“标准对照”、“阳性对照”分别以“阴性对照1”、“阴性对照2”和“阴性对照3”调零。
表1反应体系
在此体系中，受试液(包括阳性对照熊果苷)的终浓度(mg/mL)梯度为0.015625、0.03125、0.0625、0.125、0.25和0.5。
实验时，向试管中依次加入磷酸盐缓冲液、不同浓度梯度的受试液(包括阳性对照)和酶液，于30℃水浴10min。然后加入底物L-酪氨酸，立即开始计时。测定反应20min时475nm波长下的吸光值。测定时以相应的阴性对照为参比，用下列公式计算受试液(包括阳性对照)对酪氨酸酶的抑制率，并依据浓度-抑制率曲线确定半数抑制浓度(IC50)。
抑制率(％)＝(A-B)÷A×100％
其中，“A”为标准对照的吸光值，“B”为受试液(或阳性对照)的吸光值。每个实验做3个平行。抑制率高表明其对酪氨酸酶活性的抑制强度高。
测试结果：阳性对照熊果苷的IC50值为(0.327±0.026)mg/mL，薰衣草多糖的IC50值为(0.559±0.031)mg/mL，可见薰衣草多糖对酪氨酸酶具有较强的抑制活性，接近阳性对照熊果苷，具有较强的美白活性。
2、保湿试验
称取0.5g薰衣草多糖、阳性对照海藻酸钠各3份于称量瓶中，加入0.2g的蒸馏水，待样品充分吸水后，置于装有硅胶的干燥器内，常温放置，并分别于3、6、9、12、15、18、21、24h后称重，计算3次平均值，按下式计算保湿率：
保湿率＝不同时间点所含水分重量÷初始水分重量×100％。
结果如表2和图2所示，薰衣草多糖的保湿性能优于阳性对照海藻酸钠。
表2不同时间保湿率(％)
| 薰衣草多糖 | 海藻酸钠 | |
| 3h | 92.8±3.2 | 87.4±2.9 |
| 6h | 85.9±2.6 | 79.8±3.1 |
| 9h | 78.3±2.9 | 72.6±2.7 |
| 12h | 67.5±2.7 | 61.7±3.2 |
| 15h | 57.9±3.1 | 52.3±2.8 |
| 18h | 47.3±3.3 | 40.8±3.1 |
| 21h | 42.2±2.8 | 35.9±2.7 |
| 24h | 39.5±3.0 | 32.4±2.9 |
酪氨酸酶是一种氧化酶，且是调控黑色素生成的限速酶，抑制了酪氨酸酶的活性就可以减少黑色素的合成，发挥美白效果。保湿性能是化妆品优劣的重要考量因素，保湿性能优异的化妆品可以锁住皮肤的水分，降低皮肤的干燥、老化等程度，滋养皮肤。上述试验结果说明，薰衣草多糖一方面具有抑制酪氨酸酶的活性，具有美白作用；另一方面具有保湿性能，具有保湿作用，有效锁水。因此，薰衣草多糖具有应用于美白保湿化妆品的价值。
实施例3：含有薰衣草多糖的美白保湿面霜
配方如下，按照常规工艺制备成含有薰衣草多糖(实施例1方法制备)的面霜。
Claims (1)
1.一种薰衣草多糖用于制备美白保湿化妆品的用途，该薰衣草多糖通过如下方法制备：
将经过精油提取后的薰衣草干花残渣加入到蒸馏水中，55℃条件下提取4h，提取液过滤收集滤液，浓缩，加入4倍体积无水乙醇，搅拌均匀后于4℃静置醇沉，抽滤，滤渣依次用无水乙醇、丙酮洗涤，烘干得粗多糖；
取粗多糖用Sevag法脱蛋白后用蒸馏水溶解制成溶液，上样于DEAE-52纤维素柱内，先后以蒸馏水、0.9%氯化钠溶液淋洗10个柱体积，收集0.9%氯化钠溶液淋洗液，透析脱盐，浓缩、冷冻干燥即得薰衣草多糖。
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