CN111265448B - 一种王不留行提取物化妆水及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种王不留行提取物化妆水及其制备方法,属于日用化妆品技术领域。本发明提供的含王不留形提取物的化妆水具有清除自由基,促内皮细胞和成纤维细胞增殖,延缓衰老的功效,其抑制DPPH的IC50=0.362mg/ml。该化妆水功能成分为天然产物,对皮肤无刺激,对酪氨酸酶抑制率的IC50=0.624mg/ml,能够有效抑制酪氨酸酶,达到美白肤色的效果。本发明的化妆水用量少、效果好、对皮肤无刺激,具有广阔的市场应用前景。
Description
技术领域
本发明涉及一种王不留行提取物化妆水及其制备方法,属于日用化妆品技术领域。
背景技术
随着环境的污染越来越严重,空气质量越来越差,导致皮肤松弛出现皱纹无光泽,进而导致皮肤毒素积累排出困难引发多种皮肤问题。但是针对现有皮肤老化问题,市场上出现多种化妆品,但大都含有对皮肤有害的物质如铅、汞、苯、激素和防腐剂等,虽然对皮肤老化具有一定的延缓作用,但是其副作用引发皮肤过敏、红肿、角质层脱落等问题也是困扰当前相关领域研究者的重要难题。因此我们急需从自然界寻找一种具有抗衰老功能的天然产物。一般天然产物毒性小,但提取分离难度较大。
王不留行提取物中具有丰富的黄酮类化合物和刺桐碱,其中黄酮类化合物是具有C6-C3-C6构成的2-苯基色原酮衍生物基本骨架的酚类化合物,具有抗菌消炎、吸收紫外线、促进皮肤细胞生长等多种抗衰老功能。前期研究结果表明,王不留行提取物具有促成纤维细胞增殖的作用,而真皮中的成纤维细胞具有合成和分泌胶原蛋白和弹性蛋白的能力,而胶原蛋白和弹性蛋白对维持皮肤的弹性和光滑发挥着重要的作用。因此防止紫外线对成纤维细胞的损伤,保持和促进成纤维细胞的活性,增加胶原蛋白和弹性蛋白的合成,对于延缓衰老和美白具有重要意义。
化妆水是一种黏度低、流动性好的液体化妆品,可以给皮肤补充水分,使角质层柔软,保持其正常功能,另外也具有良好的抑菌和清洁皮肤的作用,由于王不留行黄酮苷和王不留行刺桐碱的原料成本较高,限制了其在化妆品领域的应用。
发明内容
本发明的目的是提供一种王不留行提取物化妆水及其制备方法,通过优化组合物配方,使化妆水在减少对皮肤刺激性的基础上,具备清除自由基,修护细胞、延缓衰老的功效。
为实现上述目的,本发明提供了一种王不留行提取物化妆水,按照重量百分比由以下组分制成:基础成分6-8%、功能成分1%、王不留行提取物0.1%和去离子水。
在一种实施方式中,所述基础成分含有:丙二醇、甘油、海藻糖中的至少一种。
在一种实施方式中,所述功能成分含有:羟乙基纤维素、柠檬酸、羟苯乙酯、香精中的至少一种。
在一种实施方式中,所述王不留行提取物含有黄酮类化合物和生物碱类化合物,其制备方法为:将王不留行种子粉碎后用10倍质量的体积分数为70%的乙醇溶液在60℃下加热回流提取1.5h,两次,合并提取液减压浓缩得70%乙醇提取物,待挥至无醇味后,混悬于水中,依次用两倍柱体积乙酸乙酯和水饱和正丁醇萃取,收集水饱和正丁醇相,减压浓缩至干,用去离子水复溶,然后注入HPD-100型大孔树脂柱中吸附2h后,用30%乙醇洗脱,洗脱相真空干燥得王不留行提取物。
本发明的第二个目的是提供一种制备上述任一所述化妆水的方法,包括以下步骤:
(1)将终浓度为3-5%(v/v)的丙二醇、终浓度3-5%(v/v)的甘油和终浓度为10-30g/L的海藻糖溶于去离子水中加热融化,形成保湿混合体系;
(2)依次加入终浓度为0.5-1g/L羟乙基纤维素、4-8g/L柠檬酸、0.8-1.5g/L王不留行提取物、0.1-0.2%羟苯乙酯和0.2-0.5%(v/v)香精依次加入水相中,边加边搅拌,完全溶解后调节体系pH,经过滤后制得王不留行提取物化妆水。
在一种实施方式中,所述pH调节至5.8-7.6。
在一种实施方式中,所述pH调节至6.8-7.2。
在一种实施方式中,所述化妆水的制备方法为:
(1)将按终浓度计3%(v/v)丙二醇、3%(v/v)甘油、20g/L海藻糖共同溶于去离子水中,加热融化形成保湿剂混合体系,
(2)将0.8g/L(m/v)羟乙基纤维素、5g/L柠檬酸、1g/L王不留行提取物、0.1%(v/v)羟苯乙酯、0.2-0.5%(v/v)香精依次加入水相中,边加边搅拌,完全溶解后,用盐酸和氢氧化钠调节体系pH至6.8-7.2,经0.22μm滤膜过滤后制得王不留行提取物化妆水。
本发明的第二个目的是提供王不留行提取物在制备抗氧化化妆品中的应用。
本发明的第三个目的是提供王不留行提取物在制备美白化妆品中的应用。
本发明具有的有益效果如下:
(1)本发明提供的化妆水对抑制自由基(DPPH)的IC50=0.362mg/ml,具有抗氧化功能,能够有效清除自由基,促内皮细胞和成纤维细胞增殖、延缓衰老的功效;
(2)本发明的化妆水功能成分为天然产物,对皮肤无刺激,对酪氨酸酶抑制率的IC50=0.624mg/ml,能够有效抑制酪氨酸酶,达到美白肤色的效果。
附图说明
图1为王不留行提取物中各组分及王不留行提取物化妆水抑制自由基(DPPH)的效果图;
图2为王不留行提取物化妆水刺激性效果图。
具体实施方式
实施例1王不留行提取物的制备
将王不留行种子粉碎后用10倍质量的体积分数为70%的乙醇溶液在60℃下加热回流提取1.5h,重复一次,合并收集醇提物减压浓缩至无醇味后,混悬于水中,依次用醇提物两倍柱体积的乙酸乙酯和水饱和正丁醇萃取,收集水饱和正丁醇相,减压浓缩至干,用去离子水复溶,然后注入HPD-100型大孔树脂柱中吸附2h后,用体积分数为30%乙醇洗脱,将洗脱相真空干燥得王不留行提取物。
实施例2王不留行提取物化妆水的制备
王不留行提取物化妆水由下述组分按重量百分比组成:基础成分6-8%、功能成分1%、实施例1制备的王不留行提取物0.1%和去离子水88-91%;所述基础成分含有丙二醇、甘油、海藻糖中的至少一种;所述功能成分含有:羟乙基纤维素、柠檬酸、羟苯乙酯、香精中的至少一种或多种的混合。
可选地,基础成分为:丙二醇3%、甘油3%、海藻糖2%,功能成分为:羟乙基纤维素0.08%、柠檬酸0.5%、王不留行提取物0.1%、羟苯乙酯0.1%、香精0.2-0.5%。
实施例3
按如下步骤制备化妆水,其中,各浓度为体积浓度(v/v,单位统一为mL)或质量体积浓度(m/v,即每100mL溶液中含有相应g的溶质):
(1)将按终浓度计,3%(v/v)丙二醇、3%(v/v)甘油、2%(m/v)海藻糖共同溶于去离子水中,加热融化形成保湿剂混合体系,
(2)将0.08%(m/v)羟乙基纤维素、0.5%(m/v)柠檬酸、0.1%(m/v)王不留行提取物、0.1%(v/v)羟苯乙酯、0.2-0.5%(v/v)香精依次加入水相中,其中,羟苯乙酯和香精为油相组分,由于油相中无乙醇,故需依次加入水相中使之溶解,去离子水加至100%,边加边搅拌,完全溶解后,用盐酸和氢氧化钠调节体系pH至6.8~7.2,经0.22μm滤膜过滤后制得王不留行提取物化妆水。
理化指标:外观均匀液体不含杂质,25℃下pH为6.8~7.2,耐热(40±1)℃处理24h并恢复室温后与实验前无明显差异。耐寒(5±1)℃保持24h,恢复室温后理化指标与耐寒处理前无明显差异,无混浊现象。
实施例4
根据自由基伤害理论,自由基的产生是导致皮肤老化主要原因。因此,是否具有能清除自由基的能力是评价抗衰老护肤品的重要指标之一。
检测仪器:UV-1600紫外分光光度计。
1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)是一种稳定的以氮为中心的自由基,若受试物能清除它,则表示受试物具有降低轻自由基、烷自由基或过氧自由基等自由基的作用。DPPH在520nm有强吸收,其乙醇水溶液呈深紫色,加入受试物后,在520nm利用分光光度计测定其清除DPPH而引起吸光度减少的情况,根据吸光度变化可得出受试物清除DPPH的能力。
分别将商业化的王不留行黄酮苷和王不留行刺桐碱纯品用不含王不留行提取物的化妆水基质(在实施例3的制备过程中不加入王不留行提取物)配制成0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mg/ml的浓度;用实施例1制备的王不留行提取物调节实施例3的化妆水基质中王不留行提取物终浓度为0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mg/ml,进行自由基清除作用的测定。检测具体步骤如下:取待测样品2ml及浓度为100μmol/L的二苯基苦基苯胁(DPPH)水溶液2ml,先加入同一具塞试管中,摇匀,室温下静置30分钟,以溶剂为空白,于520nm波长下测定样品吸光度。以不含有王不留行提取物的化妆水基质(即在实施例3的基础上不添加王不留行提取物)作为对照。
表1王不留行提取物化妆水的抗衰老作用研究
浓度 | 0.2mg/ml | 0.4mg/ml | 0.6mg/ml | 0.8mg/ml | 1.0mg/ml |
王不留行提取物化妆水 | 0.435 | 0.539 | 0.670 | 0.701 | 0.732 |
王不留行黄酮苷 | 0.220 | 0.370 | 0.440 | 0.610 | 0.630 |
王不留行刺桐碱 | 0.054 | 0.071 | 0.062 | 0.078 | 0.082 |
结果显示:王不留行提取物化妆水抑制DPPH的IC50=0.362mg/ml;王不留行黄酮苷抑制DPPH的IC50=0.788mg/ml;化妆水基质在相同条件下的吸光度为0.043,可见化妆水基质和王不留行刺桐碱均没有抑制DPPH的作用。
实施例5
对实施例3制备的王不留行提取物化妆水进行皮肤刺激性测试:
(1)试验样品:实施例1王不留行提取物化妆水;
(2)试验动物:小白鼠;
(3)实验前24h将小白鼠背部颈椎两侧毛剃掉,去毛范围左右2cm×2cm,一侧用于实验,一侧用于对照,使用温水清洗皮肤,然后将0.5ml王不留行化妆水擦拭在一侧测试皮肤上,每天擦拭1次,擦拭后1h观察皮肤刺激反应,连续擦拭7天。
(4)试验结果:7天皮肤刺激试验,使用实施例1王不留行提取物化妆水,未出现过红斑水肿等等刺激反应(如图2所示)。
实施例6
对实施例3制备的化妆水的美白功效进行评价。
首先分别配制100U/ml的酪氨酸酶溶液、2.5mmol/L的L-酪氨酸溶液和pH=6.8的PBS(磷酸缓冲液)作为基础溶液,再分别按照表3的添加量配制指定浓度的待测溶液。分别采用酶标仪测定在475nm下吸光度,1组、2组、3组、4组测得的吸光度值分别为A1,A2,A3,A4.利用各组吸光度值,计算出王不留行提取物对酪氨酸酶的抑制率。
酪氨酸酶抑制率(%)=[(A3-A4)-(A1-A2)]/(A3-A4)*100%。
总反应体系如表2所示:
表2不同反应体系的组分
组别 | 1 | 2 | 3 | 4 |
L-酪氨酸(μL) | 200 | 200 | 200 | 200 |
PBS(μL) | 40 | 70 | 70 | 100 |
待测样品(μL) | 30 | 30 | 0 | 0 |
酶液(μL) | 30 | 0 | 30 | 0 |
表3不同浓度王不留行提取物的化妆水对酪氨酸酶的抑制率
王不留行提取物(mg/ml) | 5 | 0.625 | 0.078 |
抑制率(%) | 78.94 | 57.62 | 10.23 |
酪氨酸酶是一种多酚化酶,属于氧化还原酶,该酶类可以催化酪氨酸氧化成为多巴,继续氧化生成多巴醌,经一系列反应生成白色多巴色素等,因此抑制酪氨酸酶的活性可以阻止黑色素的合成。经计算:王不留行提取物化妆水对酪氨酸酶抑制率的IC50=0.624mg/ml,王不留行黄酮苷对抑制酪氨酸酶的IC50=1.28mg/ml,王不留行化妆水基质和王不留行刺桐碱没有抑制酪氨酸酶的作用。
虽然本发明已以较佳实施例公开如上,但其并非用以限定本发明,任何熟悉此技术的人,在不脱离本发明的精神和范围内,都可做各种的改动与修饰,因此本发明的保护范围应该以权利要求书所界定的为准。
Claims (3)
1.一种王不留行提取物化妆水,其特征在于,按照重量百分比由以下组分组成:丙二醇3%、甘油3%、海藻糖2%、羟乙基纤维素0.08%、柠檬酸0.5%、王不留行提取物0.1%、羟苯乙酯0.1%、香精0.2-0.5%,余量为去离子水;
所述王不留行提取物按如下方法制备:将王不留行种子粉碎后用10倍质量的体积分数为70%的乙醇溶液在60℃下加热回流提取1.5h,重复一次,合并收集醇提物减压浓缩至无醇味后,混悬于水中,依次用醇提物两倍体积的乙酸乙酯和水饱和正丁醇萃取,收集水饱和正丁醇相,减压浓缩至干,用去离子水复溶,然后注入HPD-100型大孔树脂柱中吸附2h后,用体积分数为30%乙醇洗脱,将洗脱相真空干燥得王不留行提取物。
2.一种制备化妆水的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将按终浓度计,3% v/v丙二醇、3% v/v甘油、2%m/v海藻糖共同溶于去离子水中,加热融化形成保湿剂混合体系,
(2)将0.08% m/v羟乙基纤维素、0.5%m/v柠檬酸、0.1% m/v王不留行提取物、0.1%v/v羟苯乙酯、0.2-0.5% v/v香精依次加入水相中,其中,羟苯乙酯和香精为油相组分,由于油相中无乙醇,故需依次加入水相中使之溶解,去离子水加至100%,边加边搅拌,完全溶解后,用盐酸和氢氧化钠调节体系pH至6.8~7.2,经0.22μm滤膜过滤后制得王不留行提取物化妆水;
所述王不留行提取物按如下方法制备:将王不留行种子粉碎后用10倍质量的体积分数为70%的乙醇溶液在60℃下加热回流提取1.5h,重复一次,合并收集醇提物减压浓缩至无醇味后,混悬于水中,依次用醇提物两倍体积的乙酸乙酯和水饱和正丁醇萃取,收集水饱和正丁醇相,减压浓缩至干,用去离子水复溶,然后注入HPD-100型大孔树脂柱中吸附2h后,用体积分数为30%乙醇洗脱,将洗脱相真空干燥得王不留行提取物。
3.权利要求1所述的王不留行提取物化妆水在制备抗氧化化妆品中的应用。
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