CN110236981B - 一种美白植物多糖组合物及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种美白植物多糖组合物及其应用。该美白植物多糖组合物包括白芨多糖、茯苓多糖和白芍多糖，其质量比为0.3～1：0.1～0.5：0.1～0.5，所用美白植物多糖组合物具有酪氨酸酶活性抑制能力以及抗氧化能力，并呈现浓度依赖性，白芨多糖、茯苓多糖和白芍多糖按比例联用能够协同增加其美白功效；在上述植物多糖组合物中还可以添加透明质酸钠，对皮肤保湿和美白具有协同增效的作用。本发明中的植物多糖组合物可应用于美白产品，如凝胶、面膜、面霜、精华液、乳液、保湿水等各种皮肤外用化妆品中。

Description

一种美白植物多糖组合物及其应用
技术领域
本发明属于日化产品领域，特别涉及一种美白植物多糖组合物及其应用。
背景技术
近年来，随着社会效益的迅速腾飞和生活水平的不断提高，健康白皙的肌肤已成为越来越多的人追求的目标。尽管皮肤中的色素含量由遗传所决定，但影响皮肤健康的因素还是有很多，如空气污染、雾霾环境和紫外线照射等，这使得维持健康白皙的皮肤受到了极大的挑战。
黑色素是一种存在于皮肤基底层的蛋白质。当紫外线照射皮肤时，黑色素开始产生变化，生成一种保护皮肤的物质，然后又经由细胞代谢的层层移动到肌肤表皮层，最后形成了我们所看到的色斑和肤色不匀等皮肤问题。
美白的过程其实是皮肤更新和清洁的过程，而去除掉老化的角质层会让皮肤比较干燥，干燥的皮肤容易产生黑色素，所以，需要及时地补充营养和水分。保湿也可以说是任何肤质都需要做的基础功课，如何能使美白保湿两不误也是一直以来热点话题。
黑色素细胞存在于人体表皮的基底层，在黑色素细胞中，黑色素在黑色素小体中合成。酪氨酸被酪氨酸酶氧化为多巴醌，并继续氧化脱羧形成二羟吲哚后转变为黑色素。常用美白制剂的主要作用在于影响酪氨酸酶、黑色素细胞及黑色素的新陈代谢等。由于酪氨酸酶是黑色素合成的主要限速酶，因此对酪氨酸酶的抑制作用成为衡量美白剂功效的一个重要因素。
目前市场上出现许多的中药自制面膜，对中药成分进行简单的粉碎混合，或进行浸提、蒸煮，尽管具有“纯天然”、“无添加”的优点，但产品的安全性以及敏感性有所欠缺；同时此类产品的美白保湿等功效性成分随原料的不同而差异明显。而多糖是由10个以上单糖通过糖苷键连接而成的聚糖，在自然界分布广泛，是组成高等植物、动物细胞膜及微生物细胞壁的天然大分子物质。有研究发现多种多糖具有抑制酪氨酸酶活性、保湿和抗氧化的作用，而且能够减少黑色素的含量。因此，对中药的植物天然成分进行精提，寻找一种效果稳定、对皮肤无刺激、有安全保证的美白组合物，具有巨大的时长潜力。
发明内容
本发明的首要目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一种美白植物多糖组合物。
本发明的另一目的在于提供所述美白植物多糖组合物的应用。
本发明的目的通过下述技术方案实现：一种美白植物多糖组合物，所述美白植物多糖组合物包括白芨多糖、茯苓多糖和白芍多糖；所述的白芨多糖、茯苓多糖与白芍多糖的质量比为(0.3～1)：(0.1～0.5)：(0.1～0.5)。
所述的白芨多糖、茯苓多糖与白芍多糖的质量比优选为(0.4～0.9)：(0.1～0.4)：(0.1～0.4)；更优选为(0.5～0.8)：(0.15～0.4)：(0.1～0.4)；最优选为0.7:0.15:0.4或0.6:0.35:0.3。
所述的美白植物多糖组合物还包括透明质酸钠。
所述的透明质酸钠的分子量为80～200万道尔顿，其纯度≥90％(纯度可以为≥91％、≥92％、≥93％、≥94％、≥95％、≥96％、≥97％、≥98％、或≥99％)；优选为≥95％；更优选为≥98％。
所述的白芨多糖、茯苓多糖、白芍多糖与透明质酸钠的质量比为(0.3～1)：(0.1～0.5)：(0.1～0.5)：(0.05～0.8)；优选为(0.3～1)：(0.1～0.4)：(0.1～0.4)：(0.1～0.7)；更优选为(0.5～0.8)：(0.15～0.4)：(0.1～0.4)：(0.3～0.7)；最优选为0.5:0.35:0.25:0.7，或0.8:0.4:0.1:0.3。
所述的白芨多糖、茯苓多糖和白芍多糖中的多糖含量均≥90％(多糖含量均可以为≥91％、≥92％、≥93％、≥94％、≥95％、≥96％、≥97％、≥98％、或≥99％)；优选为≥95％；更优选为≥97％。
所述的白芨多糖、茯苓多糖和白芍多糖可以白芨、茯苓、白芍为原料提取得到。
所述的美白植物多糖组合物优选为通过如下方法制备得到：
将白芨多糖、茯苓多糖和白芍多糖，以及透明质酸在4℃，1000r/min条件下搅拌20分钟；然后在200Mpa下均质搅拌10次，得到均匀体系的美白多糖组合物。
所述均质优选为采用微射流均质机进行均质。
所述的白芨多糖、茯苓多糖以及白芍多糖优选为通过如下方法制备得到：
(1)将白芨或茯苓或白芍晒干打碎成粉末，过筛，然后加入无水乙醇浸提脱脂，抽滤，重复2次以上，过滤，再将过滤得到的滤饼真空干燥，得到脱脂后的白芨或茯苓或白芍；
(2)将蒸馏水加入到脱脂后的白芨或茯苓或白芍中，料液比为1:30(g/mL)，于70～80℃水浴条件下进行提取，过滤，重复2次以上，然后合并滤液并将其浓缩至1/4体积，再加入无水乙醇至体系乙醇体积分数达到80％，静置过夜，最后抽滤、取沉淀物，洗涤、冷冻干燥，得到粗多糖；
(3)将粗多糖脱色、纯化、浓缩、冷冻干燥，得到纯化后的白芨多糖、茯苓多糖或白芍多糖。
步骤(1)中所述的过筛优选为过100目筛。
步骤(1)中所述的脱脂的时间优选为4h。
步骤(1)中所述的真空干燥为在50℃条件下进行真空干燥。
步骤(2)中所述的提取的条件优选为：在400W超声辅助下、50℃水浴提取30分钟后，再在70℃水浴提取3小时。
步骤(2)中所述的过滤优选为采用4层200目滤布进行过滤。
步骤(2)中所述的浓缩为真空旋转蒸发进行浓缩；优选为在65℃条件下真空旋转蒸发进行浓缩。
步骤(2)中所述的洗涤优选为采用丙酮和乙醚进行洗涤。
步骤(3)中所述的脱色优选为采用活性炭进行脱色；优选为通过如下步骤实现：将粗多糖加水复溶，得到多糖液；然后加入活性炭，于50℃水浴下处理30～60分钟，过滤，得到脱色后的多糖。
所述的多糖液的浓度优选为10mg/mL。
所述的活性炭的用量为多糖液质量的1％～3％。
步骤(3)中所述的纯化为采用截留分子量为5000Da透析袋进行纯化；优选为采用截留分子量为5000Da透析袋纯化12h。
步骤(3)中所述的浓缩为浓缩至1/4体积。
步骤(3)中所述的纯化后的白芨多糖、茯苓多糖及白芍多糖的多糖含量为≥97％。
所述的美白植物多糖组合物在制备具有美白作用的化妆品中的应用。
一种化妆品，包含所述的美白植物多糖组合物，该组合物作为美白功能成分。
所述的化妆品是按照一定剂型要求制成的制剂，主要是指通过涂抹于皮肤表面或者通过其他方式作用于生物体以使皮肤获得美白效果；所述的化妆品为凝胶、面膜、面霜、精华液、乳液、保湿水等，但不局限于此。
所述的化妆品除了含有前述的美白植物多糖组合物作为美白功能成分之外，还可以包含化妆品外用型常用基质、增稠剂、乳化剂、皮肤调理剂等。
所述的基质包括卡波姆、丁二醇、乙醇、水等。
所述的美白植物多糖组合物除了可以单独使用外，还可以与其他功效成分或化妆品辅料复配后使用，获得既具有美白功能，又同时具有其他功效成分。
一种乳液，包含以下按质量份数计组分：
组分1：浓度为10mg/ml的所述美白植物多糖组合物10份；
组分2：卡波姆0.2份，丁二醇15份，乳化剂1.5份，乙醇1.3份，水72份。
所述的乳液的制备方法，包括如下步骤：将组分2的原料混合均匀，在4℃、600r/min搅拌条件下缓慢加入组分1，然后在300Mpa下均质搅拌10次，得到所述乳液。
所述均质优选为采用微射流均质机进行均质。
本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果：
1、本发明的美白植物多糖组合物，由白芨多糖、茯苓多糖和白芍多糖组成，按一定配比组合得到美白植物多糖组合物，所用美白植物多糖组合物具有酪氨酸酶活性抑制能力以及抗氧化能力，并呈现浓度依赖性，白芨多糖、茯苓多糖和白芍多糖按一定比例联用能够协同增加其美白功效，可安全的应用于美白产品。在上述植物多糖组合物中还可以添加透明质酸钠，对皮肤保湿和美白具有协同增效的作用。
2、本发明提供的美白植物多糖组合物对皮肤美白、抗氧化、保湿以及调节皮肤微生态具有协同增效的作用，能减少皮肤色素生成和转移、抑制自由基活力、延缓皮肤衰老，快速有效地达到美白效果，比其他类型的美白剂更安全、更有效，可应用于日化产品增稠剂、凝胶、面膜、面霜、精华液、乳液、保湿水等各种剂型的皮肤外用化妆品。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备。下列实施例中未注明具体实验条件的试验方法，通常按照常规实验条件或按照制造厂所建议的实验条件。除非特别说明，本发明所用试剂和原材料均可通过市售获得。
本发明中的美白植物多糖组合物中的白芨多糖、茯苓多糖和白芍多糖可通过市售获得，或可以通过自提制备。本发明实施例中的植物多糖通过自提制备，具体制备方法如下：
1、白芨多糖的制备方法为：
(1)白芨(产地：浙江)晒干打碎成粉末，过100目筛。加入无水乙醇浸提脱脂4h，抽滤，重复2次，滤饼50℃真空干燥烘干，准确称取脱脂后白芨放入大锥形瓶中，加入蒸馏水，料液比为1:30(g/mL)，70℃水浴提取3h，用4层200目滤布过滤得滤液，重复2次提取；合并滤液后65℃真空旋转蒸发浓缩至1/4体积，加入无水乙醇至体系乙醇体积分数达80％，静置过夜；抽滤得沉淀物，沉淀物经丙酮、乙醚洗涤，冷冻干燥即得白芨粗多糖。
(2)白芨粗多糖经水复溶至浓度为10mg/mL，通过活性炭脱色，活性炭加入量为多糖液质量的1％～3％，50℃水浴下处理30～60分钟；过滤，然后在常温下将多糖过滤液装入5000Da透析袋用蒸馏水流动透析12h进行纯化。将透析液浓缩至1/4体积，加入无水乙醇至体系乙醇体积分数达80％，静置过夜；抽滤得沉淀物，对沉淀物进行冷冻干燥，得到白芨纯化多糖，经苯酚硫酸法测定，多糖含量为97％。
2、茯苓多糖的制备方法为：
(1)茯苓(产地：浙江)晒干打碎成粉末，过100目筛。加入无水乙醇浸提脱脂4h，抽滤，重复2次，滤饼50℃真空干燥烘干，准确称取脱脂后茯苓放入大锥形瓶中，加入蒸馏水，料液比为1:30(g/mL)，在400W超声辅助下50℃水浴提取30分钟后，再在70℃水浴下提取3小时，用4层200目滤布过滤得滤液，重复2次提取；合并滤液后65℃真空旋转蒸发浓缩至1/4体积，加入无水乙醇至体系乙醇体积分数达80％，静置过夜；抽滤得沉淀物，沉淀物经丙酮、乙醚洗涤，冷冻干燥即得茯苓粗多糖。
(2)茯苓粗多糖经水复溶至浓度为10mg/mL，通过活性炭脱色，活性炭加入量为多糖液质量的1％～3％，50℃水浴下处理30～60分钟；过滤，然后在常温下将多糖过滤液装入5000Da透析袋用蒸馏水流动透析12h进行纯化。抽滤得沉淀物，对沉淀物进行冷冻干燥，得到茯苓纯化多糖，经苯酚硫酸法测定，多糖含量为97％。
3、白芍多糖的制备方法为：
(1)白芍(产地：浙江)晒干打碎成粉末，过100目筛。加入无水乙醇浸提脱脂4h，抽滤，重复2次，滤饼50℃真空干燥烘干，准确称取脱脂后白芍放入大锥形瓶中，加入蒸馏水，料液比为1:30(g/mL)，80℃水浴提取3小时，用4层200目滤布过滤得滤液，重复2次提取；合并滤液后65℃真空旋转蒸发浓缩至1/4体积，加入乙醇至体系乙醇体积分数达80％，静置过夜；抽滤得沉淀物，沉淀物经丙酮、乙醚洗涤，冷冻干燥即得白芍粗多糖。
(2)白芍粗多糖经水复溶至浓度为10mg/mL，通过活性炭脱色，活性炭加入量为多糖液质量的1％～3％，50℃水浴下处理30～60分钟；过滤，然后在常温下将多糖过滤液装入5000Da透析袋用蒸馏水流动透析12h进行纯化。抽滤得沉淀物，对沉淀物进行冷冻干燥，得到白芍纯化多糖，经苯酚硫酸法测定，多糖含量为97％。
所述白芨多糖与茯苓多糖、白芍多糖的质量比为(0.3～1)：(0.1～0.5)：(0.1～0.5)，组合得到美白植物多糖组合物，对皮肤美白具有协同增效的作用。
进一步的，在上述植物多糖组合物种添加透明质酸钠，白芨多糖、茯苓多糖、白芍多糖和透明质酸钠按一定配比组合得到美白植物多糖组合物，对皮肤美白具有协同增效的作用。
更进一步的，按一定配比将上述步骤中的白芨多糖、茯苓多糖、白芍多糖和透明质酸经搅拌器在4℃，1000r/min速率下的混合20分钟；使用微射流均质机在200Mpa下均质搅拌混合物10次，即得均匀体系的美白多糖组合物。
本发明所述植物多糖组合物可以用于制备成具有皮肤美白作用的各种化妆品，如凝胶、面膜、面霜、精华液、乳液、保湿水等各种剂型的皮肤外用化妆品。
在一个具体实施方案中，提供制备成一种化妆品的具体制备方法：
本发明所述化妆品由以下组分组成：
以质量份数计：
组分1：为美白植物多糖组合物，10份；浓度10mg/ml，包含白芨多糖、茯苓多糖、白芍多糖和透明质酸钠。
组分2：卡波姆0.2份，丁二醇15份，鲸蜡硬脂葡糖苷1.5份，乙醇1.3份，水72份。
以上组合的重量百分比是相对于化妆品组合总重量的含量。
上述化妆品的制备步骤为：将组分2的原料混合溶解，在4℃下600r/min搅拌，搅拌状态下缓慢加入组分1；使用微射流均质机在300Mpa下均质搅拌混合物10次，即得乳液。
实施例1～4及对比例1～4
各实施例及对比例中各植物多糖的重量份配比如表1所示。其中，实施例1～4是本发明所述植物多糖组合物。
表1各实施例及对比例植物多糖的重量份配比
组分 实施例1 实施例2 实施例3 实施例4 对比例1 对比例2 对比例3 对比例4
白芨多糖 0.7 0.6 0.5 0.8 0.9 0.75
茯苓多糖 0.15 0.35 0.35 0.4 0.1 0.4
白芍多糖 0.4 0.3 0.25 0.1 0.5 0.4
透明质酸钠 0.7 0.3 1.8
注：透明质酸钠的分子量为80～200万道尔顿，纯度≥90％。
效果实施例1：不同实施例以及对比例的DPPH自由基清除能力
1、试剂和仪器
DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)：购于麦克林试剂公司；
UV-2000分光光度计：购自上海岛津公司。
2、准确称取实施例以及对比例中多糖组分(表1)，溶于去离子水，配置不同浓度(0.5～5mg/ml)的多糖组合物溶液。将2mL的DPPH溶液(0.1mM，75％乙醇配置)与2mL的多糖样品混合于试管中，充分混匀，室温避光静置30min后，采用紫外分光光度计在517nm处测吸光值。以VC(维生素C)作为阳性对照。通过DPPH自由基清除率与浓度关系计算EC50值，结果如表2所示。
表2实施例1～4和对比例1～4清除DPPH自由基的EC50值
试验例 EC50
实施例1 2.6452
实施例2 2.9428
实施例3 2.5368
实施例4 2.7189
对比例1 -
对比例2 3.7317
对比例3 5.8217
对比例4 4.0183
VC 0.9314
由表2数据可知，白芨多糖、茯苓多糖、白芍多糖三者的组合具有清除自由基的能力。实施例1～4的自由基清除效果优于对比例1～4，其中实施例3的效果最佳。
效果实施例2：不同实施例以及对比例的羟基自由基的清除率
1、试剂和仪器
FeSO4、H2O2和水杨酸钠：购于麦克林试剂公司；
UV-2000分光光度计：购自上海岛津公司。
2、准确称取实施例以及对比例中多糖组分(表1)，溶于去离子水，配置浓度为2.5mg/ml的多糖组合物溶液。在试管中加入1.5mmol/L的FeSO4溶液1.5mL，随后加入6mmol/L的H2O2溶液0.5mL，再加入20mmol/L的水杨酸钠溶液0.5mL，
在各试管中加入实施例以及对比例的多糖组合物溶液1mL，在37℃水浴下培养1小时，在562nm测吸光度为A1，以蒸馏水为空白对照测定吸光度为Ao，依据公式计算清除率(％)＝(1-A1/Ao)*100。以熊果苷作为阳性对照。实验结果如表3所示。
表3实施例1～4和对比例1～4的多糖组合物对羟基自由基的清除率
试验例 清除率(％)
实施例1 46.25
实施例2 43.74
实施例3 48.81
实施例4 50.12
对比例1 0.52
对比例2 40.21
对比例3 38.52
对比例4 36.87
熊果苷 49.39
从上述实验结果可知，本发明制备的美白植物多糖组合物对羟基自由基具有较好的羟基自由基清除能力，进而对皮肤起到光老化损伤的修复作用，从对比例结果可知，多糖组合物对清除羟基自由基存在协同作用。
效果实施例3：不同实施例以及对比例的体外酪氨酸酶抑制能力
1、试剂和仪器：
磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、酪氨酸酶和左旋多巴：购于麦克林试剂公司；
UV-2000分光光度计：购自上海岛津公司。
2、准确称取实施例以及对比例中多糖组分(表1)，溶于去离子水，配置浓度为5mg/ml的多糖组合物溶液。取1mL多糖溶液加入试管中，随后加入10mg/mL的酪氨酸酶溶液1mL(500U/mg，溶于pH 6.8的磷酸盐缓冲溶液中)，随后加入2mmol/L的左旋多巴溶液2.8mL(溶于pH 6.8的磷酸盐缓冲溶液中)，在37℃下孵化10分钟，在405nm测吸光度为A1，以蒸馏水为空白对照测定吸光度为Ao，以磷酸盐缓冲溶液(pH 6.8)代替酪氨酸酶溶液(10mg/mL)测得吸光值A2，以磷酸盐缓冲溶液代替酪氨酸酶溶液并以蒸馏水代替样品测得吸光值A3，依据公式计算抑制率(％)＝(1-(A1-A2/Ao-A3))*100。以熊果苷作为阳性对照。实验结果如表4所示。
表4实施例1～4和对比例1～4的多糖组合物对酪氨酸酶的抑制率
试验例 抑制率(％)
实施例1 50.61
实施例2 48.72
实施例3 56.17
实施例4 59.15
对比例1 0.24
对比例2 46.17
对比例3 41.62
对比例4 39.51
熊果苷 80.42
从上述实验结果可知，本发明制备的美白植物多糖组合物对酪氨酸酶具有较好的抑制能力，能有效阻碍黑色素的生成；从对比例结果可知，多糖组合物对酪氨酸酶抑制存在协同作用。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims (9)

1.一种美白植物多糖组合物，其特征在于：所述美白植物多糖组合物包括白芨多糖、茯苓多糖和白芍多糖；
所述的白芨多糖、茯苓多糖与白芍多糖的质量比为(0.3～1)：(0.1～0.5)：(0.1～0.5)；
所述的白芨多糖、茯苓多糖以及白芍多糖通过如下方法制备得到：
(1)将白芨或茯苓或白芍晒干打碎成粉末，过筛，然后加入无水乙醇浸提脱脂，抽滤，重复2次以上，过滤，再将过滤得到的滤饼真空干燥，得到脱脂后的白芨或茯苓或白芍；
(2)将蒸馏水加入到脱脂后的白芨或茯苓或白芍中，料液比为1:30，于70～80℃水浴条件下进行提取，过滤，重复2次以上，然后合并滤液并将其浓缩至1/4体积，再加入无水乙醇至体系乙醇体积分数达到80％，静置过夜，最后抽滤、取沉淀物，洗涤、冷冻干燥，得到粗多糖；
(3)将粗多糖脱色、纯化、浓缩、冷冻干燥，得到纯化后的白芨多糖、茯苓多糖或白芍多糖；
步骤(2)中所述的提取的条件为：在400W超声辅助下、50℃水浴提取30分钟后，再在70℃水浴提取3小时；
步骤(3)中所述的脱色为采用活性炭进行脱色；
步骤(3)中所述的纯化为采用截留分子量为5000Da透析袋进行纯化。
2.根据权利要求1所述的美白植物多糖组合物，其特征在于：
所述的白芨多糖、茯苓多糖与白芍多糖的质量比为(0.4～0.9)：(0.1～0.4)：(0.1～0.4)。
3.根据权利要求1所述的美白植物多糖组合物，其特征在于：所述美白植物多糖组合物还包括透明质酸钠；
所述的白芨多糖、茯苓多糖、白芍多糖与透明质酸钠的质量比为(0.3～1)：(0.1～0.5)：(0.1～0.5)：(0.05～0.8)。
4.根据权利要求3所述的美白植物多糖组合物，其特征在于：
所述的白芨多糖、茯苓多糖、白芍多糖与透明质酸钠的质量比为(0.5～0.8)：(0.15～0.4)：(0.1～0.4)：(0.3～0.7)。
5.根据权利要求3所述的美白植物多糖组合物，其特征在于：
所述的白芨多糖、茯苓多糖和白芍多糖中的多糖含量均≥90％；
所述的透明质酸钠的分子量为80～200万道尔顿，其纯度≥90％。
6.根据权利要求1所述的美白植物多糖组合物，其特征在于：
步骤(1)中所述的过筛过100目筛；
步骤(1)中所述的脱脂的时间为4h；
步骤(1)中所述的真空干燥为在50℃条件下进行真空干燥；
步骤(2)中所述的过滤为采用4层200目滤布进行过滤；
步骤(2)中所述的浓缩为在65℃条件下真空旋转蒸发进行浓缩；
步骤(2)中所述的洗涤为采用丙酮和乙醚进行洗涤。
7.权利要求1～6任一项所述的美白植物多糖组合物在制备具有美白作用的化妆品中的应用。
8.一种化妆品，其特征在于：包含权利要求1～6任一项所述的美白植物多糖组合物。
9.根据权利要求8所述的化妆品，其特征在于：所述的化妆品为凝胶、面膜、面霜、精华液、乳液或保湿水。
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