CN114949033A - 一种槐角提取物制备方法及其在治疗和/或预防银屑病药物中的应用 - Google Patents
一种槐角提取物制备方法及其在治疗和/或预防银屑病药物中的应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明属于生物医药技术领域,具体涉及一种槐角提取物制备方法及其在银屑病治疗或预防中的用途。本发明进一步涉及一种包含所述槐角提取物的医药组成物/组合物。本发明使用传统的水煎处理槐角药材,再纯化富集其中的的极性和弱极性成分,作为制剂的物质基础。药物形态优选为膏体或液体,给药形式优选为外用涂抹给药。临床试验表明,将该方法得到的槐角提取物涂抹在患处肤,可以抑制银屑病鳞屑/皮屑的增生,快速消除银屑病皮屑增厚、脱落及瘙痒,在银屑病治疗或预防上的具有良好的实际应用价值。
Description
技术领域
本发明属于生物医药技术领域,具体涉及一种槐角提取物制备方法及其和在治疗和/或预防银屑病药物中应用。
背景技术
银屑病是一种慢性的非传染性的、疼痛的、毁容的、也能致残的自身免疫病。银屑病无法治愈,82%的经治患者在1年内平均复发2.6次,有人把它比作“皮肤科的糖尿病”。银屑病的常见症状为皮肤瘙痒,鳞屑大量脱落和红斑。东亚、拉丁美洲、北美、中欧、西欧和澳大利亚的发病率依次为0.14%、1.10%、1.50%、1.83%、1.92%、1.99%。全球有1.25亿银屑病患者,美国目前有800万银屑病患者,中国2018年有655.8万银屑病患者,澳大利亚有45万银屑病患者。银屑病分为斑块状银屑病80-90%、银屑病关节炎30%、反向银屑病21-30%、掌跖银屑病12-16%、点滴状银屑病8%、脓疱型银屑病3%)和红皮病型银屑病2%。大约1/3的银屑病始于儿童时期。
银屑病特点是患者皮肤红肿,鳞屑出皮屑增生增厚,患处皮屑哗哗的脱落,给患者的身体和心里都带来极大痛苦。目前以局部疗法用于轻至中度银屑病,用药有皮质类固醇(氢化可的松、去炎松、氯倍他索等)、维生素D类似物(卡泊三醇、卡泊三烯、钙三醇等)、维甲酸类(他扎罗汀等)、钙调神经磷酸酶抑制剂(他克莫司、吡美莫司等)、水杨酸、煤焦油和蒽林。光疗法是中至重度银屑病的一线疗法,需反复治疗。全身系统疗法用于中度至重度或对其他治疗方法无效的银屑病,用药有类固醇、维甲酸类、甲氨蝶呤、环孢霉素、生物制剂和口服小分子。大部分银屑病治疗从最温和的疗法(局部疗法和光疗法)开始,必要的时候才用全身系统疗法。无论是局部疗法包括乳膏和软膏、全身系统疗法光疗法以及口服或注射药物,银屑病治疗应旨在首先阻止皮肤细胞快速生长并去除鳞屑,市场上没有专门用于阻止鳞屑快速生长并去除鳞屑得药物,而局部用药激素(氢化可的松、去炎松、氯倍他索等)和维生素D类似物(卡泊三醇、卡泊三烯、钙三醇等)又有较大的副作用、例如维生素D的过量使用容易导致血钙过多,表现为头痛、走路困难、肌肉骨头疼痛和心律不齐等,严重者导致骨质疏松、肾功能下降等;维A酸容易造成刺激性皮炎和光过敏,过度使用还容易出现红肿甚至糜烂,有潜在的胚胎毒性和致畸性;能有效抑制银屑病鳞屑的增生和脱落的产品,可以迅速改善患者的痛苦,提供患者的生活质量。
槐角为豆科植物槐Sophora japonica L.的干燥成熟果实。冬季采收,除去杂质,干燥。果肉气微,味苦,种子嚼之有豆腥气。槐角其性寒、味苦,有凉血止血、清肝明目的功效,可治疗痔疮出血、肠风下血、血痢、崩漏、血淋肝热目赤、头晕目眩等病症。古代的文献资料,表明槐角有护肤、护发、延缓衰老的作用。《颜氏家训》有“吾常服槐实,年七十余目看细字,须发犹黑”的记载。《梁书》说“庾肩吾常服槐实,年七十余,发鬓皆黑。”《名医别录》说“槐实,服之令脑满,3发不白而长生。”在《遵生八笺》中还有用冬天牛胆汁渍槐实百日,取出阴干,每次服1枚,可收到“百日身轻,千日白发自黑,久服明目”的效果。李时珍《本草纲目》中介绍了名医扁鹊服用槐实明目护发的方法。
槐角的主要含有槐角多糖类、黄酮甙类包括槐角甙、槐属双甙、染料木甙等极性化合物,槐角黄酮甙元类包括染料木素等弱极性化合物。种子中有半乳甘露聚糖,种子含油9.9%.游离或结合的脂肪酸中,油酸为22.3%,亚油酸为53%,亚麻酸为12%。
在中药的传统制备方法中,药材选择水煎或者绞汁等,能发挥较好的药效同时消除了药物的毒副作用。因此,对中药材进行水煎提取其中的有效活性成分应用于临床,才能更利于实现文献记载的临床效果。药材经水提取,得到的主要成为极性和弱极性的成分,药材槐角中主要成分槐角的主要含有槐角多糖类、黄酮甙类包括槐角甙、槐属双甙、染料木甙等极性化合物,槐角黄酮甙元类包括染料木素等弱极性化合物等,均能溶于水而被提取而发挥其治疗作用。
发明内容
基于上述现有银屑病治疗药物存在疗效和毒副作用等问题和不足,本发明首先提供一种槐角提取物在制备治疗和/或预防银屑病药物中应用;
所述的含一种槐角提取物制备的治疗和/或预防银屑病的药物,涂抹在银屑病皮肤患处,可以抑制银屑病皮屑的脱落,减少皮屑的增生,同时消除银屑病瘙痒;
本发明其次在于提供一种治疗和/或预防银屑病的槐角提取物;
本发明的目的是通过下述的技术方案实现:
本发明使用本发明采用传统的水煎处理槐角药材,再经过浓缩纯化富集,得到含槐角极性和弱极性成分的槐角提取物,作为药物制剂的物质基础,所述制备方法包括包括以下步骤:
粉碎:将槐角用水洗干净,在40-100℃温度,溶剂为水的条件下,粉碎至混悬液体或煎煮后粉碎至混悬液体;
提取:将上述的混悬液体,加提取溶剂2-6倍,在30-100℃的温度下,用超声波处理提取20-60分钟,通过80-150目滤布过滤或3000-10000转条件下离心,取上清液体,得水溶性粗提取物;
浓缩:取水溶性粗提取物于旋转蒸发仪中,在40-100℃下浓缩至密度为0.80-1.10,得浓缩提取物;
纯化富集:搅拌下向浓缩提取物中加入至0.5-1倍体积的乙醇,静置2-24h,用80-150目滤布过滤或3000-10000转条件下离心分离,滤液或上清液回收,得浸膏,浸膏干燥后即得富集后得提取物;
所述的制备方法,其特征在于,所述粉碎步骤(a)具体方法包括:取槐角药材,每次粉碎加入水量控制为每1-3g水对应槐角药材为1g。
所述的制备方法,其特征在于,所述槐角为豆科植物槐Sophorajaponica L.的干燥成熟果实和/或果皮;
所述提取步骤(b)中提取剂选用水或乙醇-水的混合溶剂;所述混合溶剂为加入乙醇后控制溶液中的乙醇浓度为0.1-60%;所述超声波提取的频率50-80kHz,超声功率150-300W;
所述的槐角提取物包括1-4任一项所述制备方法制备得到的提取物;
所述的槐角提取物,当其利用HPLC在以下条件下测定时,至少具有1个色谱峰在高分子量普鲁兰标准品(805000Da)色谱峰保留时间的0.8-1.1的范围内;
检测器:示差检测器(RI);
流速:0.5ml/ml;
对照品:高分子量普鲁兰标准品(805000Da)、中分子量普鲁兰标准品(48800Da)低分子量普鲁兰标准品(6200Da);
流动相:取磷酸氢二钠二水合物7.12g、磷酸二氢钠5.52g和叠氮化钠0.4g,加水2000ml使溶解,用0.45μm滤膜过滤并脱气;
本发明的第三在于还提供了含一种槐角提取物的治疗和/或预防银屑病的药物;
所述的药物含有槐角提取物,余量为药学可接受的载剂或其它可配伍的药物;
所述的可接受的载剂为赋形剂、填充剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、吸收促进剂、溶剂、防腐剂和表面活性剂中的至少一种;
所述的其它可配伍的药物,是指其它中药、化学药品或生物药物;
所述的药物的形态为膏体或液体;
所述的药物的给药形式为外用涂抹给药;
附图说明
构成本发明的一部分的说明书附图用来提供对本发明的进一步理解,本发明的示意性实施例及其说明用于解释本发明,并不构成对本发明的不当限定。
图1为本发明实验例1中槐角提取物色谱图,标明分子量的色谱峰为普鲁兰标准品(805000Da)、中分子量普鲁兰标准品(48800Da)低分子量普鲁兰标准品(6200Da),其他色谱峰为槐角提取物溶液的色谱峰。
具体实施方式
应该指出,以下详细说明都是示例性的,旨在对本发明提供进一步的说明。除非另有指明,本发明使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属技术领域的普通技术人员通常理解的相同含义。
实施例1
本发明的一个典型具体实施方式中,提供一种槐角提取物的制备方法,所述制备方法包括将槐角粉碎、煎煮、浓缩、富集的步骤;
所述粉碎步骤具体方法包括:取槐角药材,加水洗涤干净后,100℃煎煮20分钟后,粉碎为混悬液;取槐角药材,加水洗涤干净后,40℃条件下粉碎为混悬液;每次煎煮加入水的量控制为每1~3g水对应槐角药材为1g;
所述提取步骤中提取剂首选用水为溶剂:将上述的混悬液,加2-6倍水,如2倍水、6倍得水、优选3倍量水提得药物,提取药材中大分子成分,如附图中大分子量成分;
所述提取步骤中提取剂选用酸溶剂,将上述的混悬液体,加2-6倍酸溶液,如pH1.0盐酸水溶液、得pH4.0盐酸水溶液、pH6.0盐酸水溶液,pH控制为酸性,进一步控制为3.0~5.0,选用得酸包括盐酸,硫酸、醋酸和柠檬酸等酸性试剂;通过优化酸解条件,能够把增加槐角药物弱极性成分(如苷元等)等提取出来。
所述提取步骤中提取剂选用溶剂,加入乙醇后控制溶液中的乙醇浓度为0.1~60%,如10%、20%、30%、40%、50%、60%,优选为30%,得到乙醇提取液,提高的弱极性化合物得提取量。
所述提取步骤中用超声波处理提取20-60分钟,如20分钟、30分钟、40分钟、50分钟、60分钟,通过80-150目滤布过滤或3000-10000转条件下离心,取上清液体,得粗提取物。
所述浓缩步骤中,取粗提取物于旋转蒸发仪中或其他蒸发设备,在40-100℃下浓缩至密度为0.80-1.10,得浓缩提取物;
所述纯化富集步骤中:搅拌下向浓缩提取物中加入至0.5-1倍体积的乙醇,静置2-24h,用80-150目滤布过滤或3000-10000转条件下离心分离,滤液或上清液回收,得浸膏,浸膏干燥后即得富集后得提取物;
本发明的又一具体实施方式中,将槐角用水洗干净,在100℃温度,溶剂为水的条件下,粉碎至混悬液再加提取溶剂3倍,在90℃的温度下,用超声波处理提取20分钟,通过80-150目滤布过滤,搅拌下向浓缩提取物中加入至1倍体积的乙醇,静置24h,4000转条件下离心分离,上清液回收,在40-100℃下浓缩至密度为0.9-1.0,得提取物;
本发明的又一具体实施方式中,将槐角用水洗干净,在40℃温度加水粉碎至混悬液,再加pH3.0得盐酸溶液3倍量,在90℃的温度下,用超声波处理提取30分钟,通过80-150目滤布过滤,搅拌下向浓缩提取物中加入至1倍体积的乙醇,静置24h,4000转条件下离心分离,上清液回收,得浸膏,浸膏干燥后即得提取物;
本发明的又一具体实施方式中,将槐角用水洗干净,在100℃温度,溶剂为水的条件下,粉碎至混悬液,再加水或30%乙醇水溶液3倍,在60℃的温度下,用超声波处理提取60分钟,通过80-150目滤布过滤,滤液回收,在40-100℃下浓缩至密度为0.80,加防腐剂,甘油溶剂等制成液体制剂,可以喷或涂抹于头皮患处;
本发明的又一具体实施方式中,所述的药物由配伍的中药形成的组合物配伍中药可为槐花、地榆炭、黄芩、枳壳、当归、防风、大黄、地黄、当归、赤芍、红花、防风、荆芥穗。取槐角100-150g,上述单个或全部配伍药物各30-100g用水洗干净,在100℃温度,溶剂为水的条件下,粉碎至混悬液,再加30%乙醇水溶液3倍,在60℃的温度下,用超声波处理提取60分钟,通过80-150目滤布过滤,滤液回收,得浸膏,浸膏干燥后即得提取物;
本发明中含有上述槐角提取物的药物组合物可以以单位剂量形式给药。给药剂型可以是液体剂型、固体剂型。液体剂型可以是真溶液类、胶体类、微粒剂型、乳剂剂型、混悬剂型。其他剂型例如片剂、胶囊、滴丸、丸剂、粉剂、溶液剂、乳剂、颗粒剂、栓剂、包合物、填埋剂、贴剂、擦剂等;
本发明的药物组合或药物制剂中还可以含有常用的载体,这里所述可药用载体包括但不局限于:离子交换剂,氧化铝,硬脂酸铝,卵磷脂,血清蛋白如人血清蛋白;缓冲物质如磷酸盐,甘油,山梨酯,山梨酸钾,饱和植物脂肪酸的部分甘油酯混合物;水,盐或电解质,如硫酸鱼精蛋白,磷酸氢二钠,磷酸氢钾,氯化钠,柠檬酸,锌盐,胶态氧化硅,三硅酸镁,聚乙烯吡咯烷酮,纤维素物质,聚乙二醇,羧甲基纤维素钠,聚丙烯酸酯,蜂蜡,羊毛酯等。载体在药物组合物中的含量可以是1-99%重量,通常大约占到95%。防腐剂,缓冲剂等可直接溶于载体中;
口服片剂和胶囊可以含有赋形剂如粘合剂,如糖浆,阿拉伯胶,山梨醇,黄芪胶,或聚乙烯吡咯烷酮,填充剂,如乳糖,蔗糖,玉米淀粉,磷酸钙,山梨醇,氨基乙酸,润滑剂,如硬脂酸镁,滑石,聚乙二醇,硅土,崩解剂,如马铃薯淀粉,或可接受的增润剂,如月桂醇钠硫酸盐。片剂可以用制药学上公知的方法包衣;
悬浮液,溶液,乳浊液,这种液体制剂可以包含常规的添加剂,如悬浮剂,山梨醇,纤维素甲醚,葡萄糖糖浆,凝胶,羟乙基纤维素,羧甲基纤维素,硬脂酸铝凝胶,氢化的食用油脂,乳化剂,如卵磷脂,山梨聚糖单油酸盐,阿拉伯树胶;或非水载体,如杏仁油,油脂如甘油,乙二醇,或乙醇;防腐剂,如对羟基苯甲酸甲酯或丙酯,山梨酸,调味剂或着色剂;
本发明的又一具体实施方式中,取50重量份的凡士林放入不锈钢容器里,加温至溶化后;把槐角提取物适量,倒入凡士林溶液里搅拌并加温,搅拌至均匀后停止加温,倒入分装盒内成膏药,将冷却的膏药直接涂抹皮损处;
本发明的又一具体实施方式中,提供一种治疗银屑病相关疾病的方法,所述方法包括:向受试者施用上述槐角提取物或上述药物组合物,经临床验证,所述各槐角提取物、药物组合物具有抑制银屑病皮屑增生及脱落、同时有良好得止痒作用;
以下通过实施例对本发明做进一步解释说明,但不构成对本发明的限制。应理解这些实施例的数据仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。
实施例1槐角提取物中的大分子成分得分子量分布范围及含量测定,
具体方法如下:
(1)色谱条件:色谱柱:Waters Ultrahydrogel,7.8mm×300mm和的两根色谱柱;检测器:示差检测器(RI);流速:0.5ml/ml;流动相:取磷酸氢二钠二水合物7.12g、磷酸二氢钠5.52g和叠氮化钠0.4g,加水2000ml使溶解,用0.45μm滤膜过滤并脱气。
(2)分子量对照品:高分子量普鲁兰标准品(805000Da)、中分子量普鲁兰标准品(48800Da)低分子量普鲁兰标准品(6200Da)分别称取普鲁兰对照品6200Da,48800Da和805000Da约10mg,置10mL量瓶中,用稀释剂溶解并稀释至刻度,室温下静置至少12小时;
(3)取槐角多糖对照品适量,加水制成制成每1ml约含槐角多糖5mg的溶液。
(4)供试品溶液:取依据实施例1所述的方法得到的槐角提取物,加水溶解,摇匀,滤过,取续滤液作为供试品溶液。
(5)含量测定:测定槐角提取物中多糖的含量为约为提取物的70%,色谱的保留时间在高分子量普鲁兰标准品(805000Da)色谱峰保留时间的0.9左右。
实施例1及槐角甙类及甙元的含量测定,
具体方法如下:
(1)液相色谱条件:色谱柱Diamonsil C18柱(150×4.6mm,5μm);柱温25℃;
(2)流动为甲醇-水(0.5‰乙酸),等度洗脱;流速为1m L/min;
(3)对照品溶液:取槐角甙及染料木素对照品适量,加水制成制成每1ml约含槐角多糖1mg和0.1mg的溶液;
(4)供试品溶液:取依据实施例1所述的方法得到的槐角提取物,加水溶解,摇匀,滤过,取续滤液作为供试品溶液;
(5)含量测定:测定槐角提取物中槐角甙约为提取物的10%,染料木素约2%;
临床效果试验
1、一般性资料:随机选取临床诊断为银屑病的患者60例,男30例,女30例,年龄在25-65岁,病程1-15年,将所有患者随机分方法分成两组(治疗组1、治疗组2和对照组各20例),将全部入选患者按就诊顺序编号,采用现有的SPSS软件产生随机分配方案。各组患者在年龄、病程、皮损面积评分和皮损严重程度评分方面无显著性差异,具有可比性。
2、治疗方法:对照组给予口服阿维A胶囊,每日30mg;
实施例;在对照组基础上给予本发明实施例4、实施例5的槐角提取物和药物组合物,给药方法为:将槐角提取物和含有槐角提取物的药物组合物涂于皮肤上,每日早晚各1次,每日给予相当于槐角药材药材0.5g药量,连续治疗4周。
疗效评价指标及评价标准
参照PASI(银屑病面积和严重程度指数)标准进行评分,包括皮损面积评分和皮损严重程度评分。
治疗效果
治疗前后PASI评分对比
槐角提取物治疗寻常型银屑病,可以迅速的改善银屑病的皮屑脱落及增生和瘙痒疗效高,安全性好,值得临床进行广泛推广应用。
Claims (10)
1.一种槐角提取物的制备方法,其特征在于:
包括以下步骤:
粉碎:将槐角用水洗干净,在40-100℃温度,溶剂为水的条件下,粉碎至混悬液体或煎煮后粉碎至混悬液体;
提取:将上述的混悬液体,再加提取溶剂2-6倍,在30-100℃的温度下,用超声波处理提取20-60分钟,后通过80-150目滤布过滤或3000-10000转下离心,取澄清液体,得水溶性粗提取物。
浓缩:取水溶性粗提取物于旋转蒸发仪中或直接蒸发,在40-100℃下浓缩至密度为0.80-1.10,得浓缩提取物;
纯化富集:搅拌下向浓缩提取物中加入至0.5-1倍体积的乙醇,静置2-24h,用80-150目滤布过滤或3000-10000转离心分离,滤液或上清液回收,得浸膏,浸膏干燥后即得富集后得提取物;
2.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述槐角为豆科植物槐Sophorajaponica L.的干燥成熟果实和/或果皮。
3.如权利要求1所述提取步骤(b)中提取剂首选用水、其次为pH1.0-6.0酸化水或乙醇-水的混合溶剂;所述乙醇-水混合溶剂为加入乙醇后控制溶液中的乙醇浓度为0.1-60%;
4.如权利要求1和3所述的制备方法,其特征在于,所述粉碎步骤(a)具体方法包括:取槐角药材,每次粉碎加入水量控制为每1-3g水对应槐角药材为1g,所述超声波提取的频率50-80kHz,超声功率150-300W。
5.如权利要求1-4任一项所述制备方法制备得到的槐角提取物。
7.一种含槐角提取物的药物在制备治疗和/或预防银屑病中的应用,其特征在于:
所述的药物含如权利要求5和6所述的槐角提取物,余量可为药学可接受的载剂或其它可配伍的药物。
8.如权利要求7所述一种含槐角提取物的药物在制备治疗和/或预防银屑病药物中的应用,其特征在于:
所述的可接受的载剂为赋形剂、填充剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、吸收促进剂、溶剂、保湿剂、防腐剂和表面活性剂中的至少一种;所述的其它可配伍的药物,是指其它中药、化学药品或生物药物。
9.如权利要求7和8所述的一种含槐角提取物的药物在制备治疗和/或预防银屑病药物中的应用,其特征在于:
所述的药物为如权利要求5和6所述的槐角提取物或/和如权利要求8和9所述的载体和配伍药物构成的形态为膏体或液体,给药形式首选为外用涂抹给药。
10.如权利要求7-9所述的一种含槐角提取物的药物在制备治疗和/或预防银屑病药物中的应用,其特征在于:
所述的药物涂抹在银屑病皮肤患处,可以抑制银屑病表层皮肤鳞屑/皮屑的增生增厚,消除银屑病皮屑的脱落,减轻银屑病的瘙痒。
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