CN114947141A - 一种具有皮肤美容功效的组合物及其用途 - Google Patents
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Abstract
本发明属于保健食品技术领域,公开了一种具有皮肤美容功效的组合物及其用途。所述组合物包括如下重量份的原料:胶原三肽1~50份,胶原蛋白肽30~90份,透明质酸钠0.01~5份,橄榄提取物0.01~5份,维生素C 0.01~5份,维生素E 0~5份。本发明的组合物以小分子的胶原三肽和胶原蛋白肽为主要成分,配合透明质酸钠、橄榄提取物、维生素C和维生素E进行协同互作,集抗皱、提亮肤色和保湿功效于一体,能有效解决皮肤老化的问题;在此基础上,添加B族维生素、矿物质、燕窝酸、植物提取物、弹性蛋白肽和大豆蛋白肽进行协同复配,能进一步提高美白效果,从而集美白、抗皱、提亮肤色和保湿功效于一体,全方位护肤抗衰老。
Description
技术领域
本发明属于保健食品技术领域,特别涉及一种具有皮肤美容功效的组合物及其用途。
背景技术
随着年龄的增长,身体的各项机能开始下降,最直观的是皮肤出现衰老现象。皮肤老化是指皮肤功能衰老性损伤,出现颜色、色泽、形态、质感等外观整体状况的改变。皮肤老化分为内源性老化和外源性老化。内源性老化是指皮肤随年龄增长的自然老化;外源性老化的最主要原因是日晒所致的光老化。皮肤老化的主要表现为:皮肤弹性下降,松弛下垂,出现细小皱纹;皮肤干燥、毛孔变粗;皮肤蜡黄暗淡无光泽;色素斑形成等。皮肤老化的主要原因有:胶原蛋白减少,弹性纤维、网状纤维流失;天然保湿因子的含量下降;糖化及光老化等原因导致色泽暗淡、色素沉着等。
随着保健意识的增强,很多人开始选择口服功能性营养食品来调理和改善皮肤问题,内调+外养以达到更好的护肤抗衰老效果。但市场上常见的口服美容产品多为大分子胶原蛋白产品,在体内要经过消化分解为小分子胶原蛋白肽才能被人体吸收,在消化过程中会导致消化不充分,营养流失,吸收率低,难以起到理想的养肤效果。
CN104489700A公开一种具有改善皮肤水分、弹性和除皱功能的组合物,组合物由胶原蛋白肽、弹性蛋白肽、透明质酸钠和中药提取物组成,但该组合物中的胶原蛋白肽、弹性蛋白肽的分子量都比较大,人体对其的吸收利用率低;且该组合物仅公开具有改善皮肤水分、弹性和除皱功能,不具有提亮肤色或美白的效果。
CN109730232A公开一种具有养颜美容的饮品及其制备方法,饮品功效成分由胶原三肽、壳寡糖、γ-氨基丁酸、鱼胶原蛋白肽、鲣鱼弹性蛋白肽等组成,但功效评价中仅采用人体简单的主观感受,无客观的评价指标,缺乏科学性。
市场上常见的胶原蛋白产品功效成分较单一,不能同时具有抗皱、提亮肤色和保湿的效果,也不能更好的抵抗皮肤老化问题。
发明内容
本发明提供了一种具有皮肤美容功效的组合物及其用途,用以解决现有技术中存在的问题,本发明的组合物具有促进胶原蛋白基因Col1a1b表达而具有抗皱功效、抑制黑色素生成而具有皮肤美白功效、清除活性氧自由基而减少色素沉着、抑制水分流失而具有补水保湿等的美容抗衰效果。
本发明的目的之一在于提供,一种具有皮肤美容功效的组合物,所述组合物包括如下重量份的原料:
优选地,所述胶原三肽的重量份可以为1~28份,也可以为25~36份,也可以为35~50份。在某个优选实施方式中,为17.36份、16.04份、16.02份、18.55份、19.89份、19.88份、19.84份。
优选地,所述胶原蛋白肽的重量份可以为30~55份,也可以为50~80份,也可以为70~90份。在某个优选实施方式中,为69.44份、64.16份、64.09份、74.20份、79.55份、79.54份、79.36份。
优选地,所述透明质酸钠的重量份可以为0.01~1.2份,也可以为0.8~2.5份,也可以为2~5份。在某个优选实施方式中,为0.52份、0.32份、0.32份、0.37份、0.12份、0.12份、0.12份。
优选地,所述橄榄提取物的重量份可以为0.01~3份,也可以为1.8~3.8份,也可以为3.6~5份。在某个优选实施方式中,为0.17份、0.16份、0.16份、0.19份、0.12份、0.12份、0.20份。
优选地,所述维生素C的重量份可以为0.01~0.9份,也可以为0.8~2份,也可以为1.6~3份,也可以为2.8~5份。在某个优选实施方式中,为1.19份、0.38份、0.68份、0.74份、0.30份、0.32份、0.45份。
优选地,所述维生素E的重量份可以为0~2份,也可以为1~3份,也可以为2~4份,也可以为3~5份。在某个优选实施方式中,为0.029份、0.111份、0.028份、0.024份、0.036份。
优选地,所述橄榄提取物为橄榄果的水提物。
更优选地,橄榄提取物提取时,橄榄果加水打浆,油水分离除去油脂,得到橄榄汁,加柠檬酸在40~80℃提取2~6h,后经离心过滤,冷冻干燥得到固体粉末。其中,橄榄果为鲜果,橄榄果和水的质量比为1:(3~7),橄榄汁与柠檬酸的质量比为(30~70):1,采用油水分离器去除油脂。
在本申请的某些实施方式中,所述胶原三肽的相对分子量为250~500。
优选地,所述胶原三肽的相对分子量可以为250~360,也可以为330~450,也可以为400~500。优选地,所述胶原三肽的氨基酸序列为Gly-Pro-Hyp,所述胶原三肽购买自韩国艾美科健株式会社。本发明中胶原三肽符合《GB 31645-2018食品安全国家标准胶原蛋白肽》的规定。
在本申请的某些实施方式中,所述胶原蛋白肽的相对分子量500~5000。
优选地,所述胶原蛋白肽的相对分子量可以为500~2500,也可以为2000~4000,也可以为3500~5000。本发明中胶原蛋白肽符合《GB 31645-2018食品安全国家标准胶原蛋白肽》的规定。
在本申请的某些实施方式中,所述透明质酸钠的相对分子量为80000~200000。
优选地,所述透明质酸钠的相对分子量可以为80000~100000,也可以为98000~150000,也可以为13000~200000。本发明中透明质酸钠符合《QB/T 4576-2013透明质酸钠》的规定。
在本申请的某些实施方式中,所述组合物还包括植物提取物;以组合物的总质量为基准计,所述植物提取物的含量为0.01~5%。较佳地,所述植物提取物的含量可以为0.01~0.15%,也可以为0.1~0.8%,也可以为0.7~3%,也可以为2~5%。在某个优选实施方式中,为2.26%、2.99%、2.85%、2.23%、0.12%、0.20%。
优选地,所述植物提取物选自石榴提取物、白芸豆提取物、牡丹提取物、魔芋粉和米糠油粉中的一种或多种。本发明中魔芋粉和米糠油粉,为神经酰胺的重要来源,神经酰胺是构成皮肤角质层脂质的主要成分,能帮助修复皮肤屏障可以使皮肤柔软富有光泽;此外,神经酰胺能抵挡外界的刺激,缺失或者没有会造成皮肤失去了自身天然的防护作用,对外界物理、生物等所有伤害没有了防御能力,加强保水功能。
较佳地,所述石榴提取物为红石榴的水提物。
具体地,石榴提取物提取时,红石榴与水的质量比为1:(5~20),提取温度为50℃~100℃;提取时间为1~2h;提取液经过滤、浓缩、灭菌、干燥,得到固体粉末。
较佳地,所述白芸豆提取物为白芸豆的水提物。
具体地,白芸豆提取物提取时,白芸豆与水的质量比为1:(5~20),提取温度为50℃~100℃;提取时间为1~2h;提取液经过滤、浓缩、灭菌、干燥,得到固体粉末。
较佳地,所述牡丹提取物为牡丹花的水提物。
具体地,牡丹花提取物提取时,牡丹花与水的质量比为1:(5~20),提取温度为50℃~100℃;提取时间为1~2h;提取液经过滤、浓缩、灭菌,得到浓缩液。
较佳地,所述魔芋粉为魔芋的水提物。
具体地,魔芋提取物提取时,魔芋与水的质量比为1:(5~20),提取温度为50℃~100℃;提取时间为1~2h;提取液经过滤、浓缩、灭菌、干燥,得到固体粉末。
较佳地,所述米糠油粉为米糠的水提物。
具体地,米糠提取物提取时,米糠与水的质量比为1:(5~20),提取温度为50℃~100℃;提取时间为1~2h;提取液经过滤、浓缩、灭菌、干燥,得到固体粉末。
更优选地,所述植物提取物为石榴提取物和魔芋粉的混合物。
进一步优选地,所述石榴提取物和魔芋粉的质量比为(0.1~5):(1~300)。较佳地,质量比为(0.1~5):(1~50)。在某个优选实施方式中,为1:1、1:17、1:167、1:10。
更优选地,所述植物提取物为石榴提取物、白芸豆提取物、牡丹提取物和魔芋粉的混合物。
进一步优选地,所述石榴提取物、白芸豆提取物、牡丹提取物和魔芋粉的质量比为(1~10):(1~20):(1~50):(1~10)。较佳地,质量比为(1~5):(1~5):(10~30):(1~5)。在某个优选实施方式中,为1:2:20:1。
在本申请的某些实施方式中,所述组合物还包括大豆蛋白肽;以组合物的总质量为基准计,所述大豆蛋白肽的含量为1~30%。较佳地,所述大豆蛋白肽的含量可以为1~15%,也可以为10~22%,也可以为20~30%。在某个优选的实施方式中,为8.68%、16.04%、16.02%和3.71%。
优选地,所述大豆蛋白肽的相对分子量小于2000。本发明中,大豆蛋白肽是以大豆分离蛋白为原料,经酶解、分离、干燥、包装获得,80%肽段的相对分子量集中在2000以下,主要成分为肽的粉末状或颗粒状物质,符合《GB/T 22492-2008大豆肽粉》的规定。
在本申请的某些实施方式中,所述组合物还包括弹性蛋白肽;以组合物的总质量为基准计,所述弹性蛋白肽的含量为0.01~5%。较佳地,所述弹性蛋白肽的含量可以为0.01~0.2%,也可以为0.1~1.5%,也可以为1~5%。在某个优选的实施方式中,为0.43%。
优选地,所述弹性蛋白肽的相对分子量小于1000。弹性蛋白肽符合《GB/T 22729-2008海洋鱼低聚肽粉》的规定。
在本申请的某些实施方式中,所述组合物还包括燕窝酸;以组合物的总质量为基准计,所述燕窝酸的含量为0.01~5%。
较佳地,所述燕窝酸的含量可以为0.01~0.2%,也可以为0.1~0.4%,也可以为0.3~0.5%。在某个优选实施方式中,为0.09%。
在本申请的某些实施方式中,所述组合物还包括B族维生素;以组合物的总质量为基准计,所述B族维生素的含量为0.001~1%。较佳地,所述B族维生素的含量可以为0.001~0.02%,也可以为0.02~0.2%,也可以为0.1~0.8%,也可以为0.7~1%。在某个优选实施方式中,为0.02%、0.013%、0.02%、0.02%。
优选地,所述B族维生素选自维生素B1、维生素B6、烟酰胺和泛酸中的一种或多种。
更优选地,所述B族维生素选自维生素B1、维生素B6和烟酰胺的混合物。
进一步优选地,所述维生素B1、维生素B6和烟酰胺的质量比为(2~50):(1~10):(2~50)。较佳地,质量比为(3~20):(1~5):(1~15)。在某个优选实施方式中,为2:1:12。
更优选地,所述B族维生素选自维生素B1、维生素B6、烟酰胺和泛酸的混合物。
进一步优选地,所述维生素B1、维生素B6、烟酰胺和泛酸的质量比为(2~50):(1~10):(2~50):(1~20)。较佳地,质量比为(2~50):(1~10):(1~30):(1~20)。在某个优选实施方式中,为2:1:12:1。
在本申请的某些实施方式中,所述组合物还包括矿物质;以组合物的总质量为基准计,所述矿物质的含量为0.001~1%。较佳地,所述矿物质的含量可以为0.001~0.4%,也可以为0.2~0.6%,也可以为0.5~1%。在某个优选实施方式中,为0.017%、0.014%、0.074%。
优选地,所述矿物质选自葡萄糖酸亚铁和乙二胺四乙酸铁钠中的一种或两种。
更优选地,所述矿物质为葡萄糖酸亚铁。
优选地,以组合物的总重量份为100份,所述组合物包括如下重量份的原料:
本优选技术方案中,组合物中在较低浓度下有较好的美白、抗皱、提亮肤色和保湿功效。
优选地,以组合物的总重量份为100份,所述组合物包括如下重量份的原料:
本优选技术方案中,组合物中的美白、抗皱、提亮肤色和保湿功效均比较好,美白和保湿效果最好。
优选地,以组合物的总重量份为100份,所述组合物包括如下重量份的原料:
本优选技术方案中,组合物中的美白、抗皱、提亮肤色和保湿功效均比较好,保湿效果最好。
优选地,以组合物的总重量份为100份,所述组合物包括如下重量份的原料:
本优选技术方案中,组合物中的美白、抗皱、提亮肤色和保湿功效均比较好,提亮肤色和抗皱效果最好。
在本申请的某些实施方式中,所述组合物的剂型为口服液、胶囊剂、丸剂、片剂、粉剂、茶包、速溶茶、泡腾剂或颗粒剂。
本发明中,所述组合物的制备方法,优选包括如下步骤:将各组分混合即得。
本发明的目的之二在于提供,上文所述的具有皮肤美容功效的组合物在制备具有如下至少一项功能的产品中的用途,
1)美白皮肤;
2)皮肤抗皱;
3)提亮肤色;
4)皮肤保湿;
5)皮肤抗老化。
在本申请的某些实施方式中,本发明的组合物能抑制黑色素生成,从而具有皮肤美白功效。
在本申请的某些实施方式中,本发明的组合物能刺激Col1a1b基因表达,从而具有皮肤抗皱功效。
在本申请的某些实施方式中,本发明的组合物能清除活性氧自由基,从而具有提亮肤色的功效。
在本申请的某些实施方式中,本发明的组合物能抑制皮肤水分流失,从而具有保湿功效。
在本申请的某些实施方式中,所述产品包括口服化妆品或保健食品。
本发明的目的之三在于提供,一种口服化妆品,所述口服化妆品包括如上文所述的组合物,以及一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂。
本发明对所述口服化妆品的形式及制备方法没有特殊限制,采用本领域所熟知的口服化妆品的种类及制备方案即可。
本发明的目的之四在于提供,一种保健食品,所述保健食品中包括如上文所述的组合物,以及食品学上可接受的辅料。
本发明对所述保健食品的形式及制备方法没有特殊限制,采用本领域所熟知的保健食品的种类及制备方案即可。
本发明的具有皮肤美容功效的组合物,采用胶原蛋白肽,激活真皮纤维母细胞,提升胶原纤维的密度与直径,刺激皮肤胶原蛋白合成,改善肌肤皱纹;小分子胶原蛋白肽(胶原三肽)由于分子量小,可直接被肠道吸收,更高效的发挥抗皱作用;透明质酸钠可补充皮肤透明质酸含量,增强肌肤保水性,改善皮肤缺水和衰老;橄榄提取物富含羟基酪醇等多酚物质,具有抗氧化作用,可清除自由基、减少氧化导致的肌肤暗沉等问题;维生素C有助于胶原蛋白形成,并有抗氧化和减少色素沉淀的作用,可减少肌肤光老化;维生素E抗氧化清除自由基,以上成分进行协同,集抗皱、提亮肤色和保湿功效于一体,有效改善了皮肤老化的问题。在此基础上,添加B族维生素、矿物质、燕窝酸、植物提取物、弹性蛋白肽和大豆蛋白肽进行协同复配,能进一步提高美白效果,增强功效,起到很好的皮肤美白抗衰、提升气色等效果,有效解决多种皮肤衰老问题。该组合物在体外模型中能够有效促进胶原蛋白基因表达、减少黑色素生成、减少色素沉着、补水保湿。
本发明的有益效果:
1)本发明的组合物中,胶原三肽、胶原蛋白肽可促进胶原蛋白合成,改善肌肤皱纹;橄榄提取物富含多酚类成分,具有很强的自由基清除能力,减少氧化伤害,有助于延缓衰老;透明质酸钠,能达到很好的补水保湿功效;维生素C,可以促进胶原蛋白的吸收;本发明通过将胶原三肽、胶原蛋白肽、透明质酸钠、橄榄提取物、维生素C和维生素E进行复配,协同提高了抗皱功效、提亮肤色功效和保湿功效,有效改善了皮肤老化的问题。
2)本发明通过添加弹性蛋白肽、大豆蛋白肽等,能促进皮肤中胶原蛋白和弹性蛋白生成,与胶原蛋白肽合用可显著增强抗衰效果。通过添加魔芋粉或米糠油粉,其富含神经酰胺,能促进受损肌肤角质层结构修复再生,加强保水;牡丹提取物,能启动锁水基因,达到保湿功效;通过添加燕窝酸,燕窝中的活性成分,能抑制酪氨酸羟基酶和多巴羟基酶的活性,防止黑色素生成;白芸豆提取物含淀粉酶抑制剂,可以抑制糖化反应,防止肌肤暗黄。
3)本发明的组合物中维生素和矿物质类成分对皮肤抗衰也起到了积极作用,B族维生素类能促进皮肤的新陈代谢,修复更新;铁能使皮肤红润有光泽。
附图说明
图1为本发明中实施例1-7的组合物的美白功效的柱状图。
图2为本发明中实施例1-7的组合物的抗皱功效的柱状图。
图3为本发明中实施例1-7的组合物的提亮肤色功效的柱状图。
图4为本发明中实施例1-7的组合物的保湿功效的柱状图。
图1、2、3和4中附图说明如下:
***—P<0.001
**—P<0.01
*—P<0.05
具体实施方式
以下通过特定的具体实例说明本发明的实施方式,本领域技术人员可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本发明的其他优点与功效。本发明还可以通过另外不同的具体实施方式加以实施或应用,本说明书中的各项细节也可以基于不同观点与应用,在没有背离本发明的精神下进行各种修饰或改变。
在进一步描述本发明具体实施方式之前,应理解,本发明的保护范围不局限于下述特定的具体实施方案;还应当理解,本发明实施例中使用的术语是为了描述特定的具体实施方案,而不是为了限制本发明的保护范围;在本发明说明书和权利要求书中,除非文中另外明确指出,单数形式“一个”、“一”和“这个”包括复数形式。
当实施例给出数值范围时,应理解,除非本发明另有说明,每个数值范围的两个端点以及两个端点之间任何一个数值均可选用。除非另外定义,本发明中使用的所有技术和科学术语与本技术领域技术人员通常理解的意义相同。除实施例中使用的具体方法、设备、材料外,根据本技术领域的技术人员对现有技术的掌握及本发明的记载,还可以使用与本发明实施例中所述的方法、设备、材料相似或等同的现有技术的任何方法、设备和材料来实现本发明。
本申请下述实施例中,
橄榄提取物为橄榄果的水提物;橄榄果加水打浆,油水分离除去油脂,得到橄榄汁,加柠檬酸在60℃提取4h,后经离心过滤,冷冻干燥,得到橄固体粉末。其中,橄榄果为鲜果,橄榄果和水的质量比为1:5,橄榄汁与柠檬酸的质量比为50:1,采用油水分离器去除油脂。
石榴提取物为红石榴籽的水提物;红石榴与水的质量比为1:5,提取温度为70℃;提取时间为1h;提取液经过滤、浓缩、灭菌、干燥,得到固体粉末。
白芸豆提取物为白芸豆的水提物;白芸豆与水的质量比为1:10,提取温度为80℃;提取时间为2h;提取液经过滤、浓缩、灭菌、干燥,得到固体粉末。
牡丹提取物为牡丹花的水提物;牡丹花与水的质量比为1:10,提取温度为90℃;提取时间为2h;提取液经过滤、浓缩、灭菌,得到浓缩液。牡丹花优选为丹凤牡丹花。
魔芋粉为魔芋的水提物;魔芋与水的质量比为1:10,提取温度为70℃;提取时间为2h;提取液经过滤、浓缩、灭菌、干燥,得到固体粉末。
本申请以下实施例和对比例中,所用各原料组分的来源及参数见表1所示。
表1原料来源及参数
实施例1-7
参照表2所示的配方表,将各原料组按照配方表在混合罐中混合50min,得到具有皮肤美容功效的组合物。
表2实施例1-7的原料配方表(wt%)
将实施例1-7得到的组合物进行功效浓度的测定,具体如下:
1)分别称取实施例1-7得到的组合物适量,加水溶解,定容至50mL,作为原液。
2)将原液加水进行梯度稀释得到稀释液,将各实施例得到的稀释液分别对斑马鱼进行美白功效、抗皱功效、提亮肤色功效和保湿功效测试。
3)将不同梯度的稀释液的美白功效、抗皱功效、提亮肤色功效、保湿功效进行比较,选出功效均较明显的浓度点,作为最终组合物的功效浓度。说明:美白功效、抗皱功效、提亮肤色功效、保湿功效测试,得到的数值越高,代表功效越好,如果功效测试结果出现负值,说明无此功效。
功效浓度计算公式如下:
M—组合物质量,单位mg
D—稀释倍数
表3
从表3可知,实施例1至实施例7获得的组合物的最低功效浓度分别为7.14mg/100mL、7.48mg/100mL、7.49mg/100mL、6.47mg/100mL、12.57mg/100mL、12.57mg/100mL、12.60mg/100mL。
应用例
本应用例中,以斑马鱼测试模型为研究对象,从美白、抗皱、提亮肤色和保湿等4因素考察实施例1-7获得的组合物的功效。
斑马鱼模型中所用品系为黑色素等位基因突变半透明Albino品系斑马鱼(斑马鱼购自杭州环特生物科技股份有限公司),分别取受精后3天(3dpf)、5天(5dpf)、2天(2dpf)和4天(4dpf)的斑马鱼进行美白、抗皱、提亮肤色和保湿测试,成鱼饲养及繁殖方法符合国际AAALAC认证(认证编号:001458)的要求。
将实施例1-7获得组合物,取适量组合物加水溶解定容至50mL,采用水进行稀释得到不同浓度的样本溶液,同一组合物进行多个浓度的斑马鱼的体外功效测试,最终挑选出全部或部分功效较显著的浓度,实施例经挑选得到的样本溶液的浓度见表4。
(一)美白功效
实验分组:随机选择120条受精后3天的斑马鱼模型,分为8组,7个实验组和1个对照组,每组15条鱼,将鱼分别置于6孔板中,每孔15条斑马鱼。将实施例1-7的样本溶液分别添加到7个有斑马鱼的孔内,每个孔的恒定体积为3mL。对照组的斑马鱼仅添加同体积的水。
实验操作:添加相应的组合物溶液或水后,将7个实验组和1个对照组在黑暗中于28℃孵育24h,孵育结束后,从每组中随机抽取10条斑马鱼,在可见光显微镜下(VertA1,上海图森视觉科技有限公司,中国)观察,使用NIS Elements D 3.10高级图像处理软件计算斑马鱼头部的黑色素信号强度(S)。
酪氨酸酶促进了黑色素合成和黑色素基因表达,在黑色素形成的过程中进行干预,可抑制黑色素的形成。斑马鱼在发育初期全身透明,胚胎发育至24h时黑色素开始从视网膜上皮生长。色素细胞起源于背部外胚层分化的一群细胞—神经嵴细胞,然后增殖、迁徙、分化成色素母细胞。在黑色素形成的过程中进行干预,可抑制黑色素的形成。分析头部的黑色素信号强度,能评价组合物的美白功效。
组合物的美白功效按以下公式计算:
其中,S-斑马鱼头部黑色素信号强度。
(二)抗皱功效
实验分组:随机选择720条受精后5天的斑马鱼模型,分为8组,7个实验组和1个对照组,每组3个重复,每组共90条鱼。将720条鱼分别置于6孔板中,每孔30条斑马鱼。将实施例1-7的样品溶液添加到21个有斑马鱼的孔内,每个孔的恒定体积为3mL。3个重复对照组的斑马鱼仅添加同体积的水。
实验操作:添加相应的样本溶液和水后,将7个实验组和1个对照组在黑暗中于28℃孵育24h,孵育结束后。然后将每组鱼(1个重复中选择所有鱼)全鱼碾碎,用试剂盒提取RNA,测试总RNA,加入裂解液,采用RNA快速纯化试剂盒(上海奕杉生物科技有限公司)提取各组的总RNA,并通过紫外可见分光光度计(美国瓦里安医疗系统有限公司Lambda 950)测定提取的总RNA的浓度和纯度。根据Fast Quant RT试剂盒的说明书,利用2.00μg斑马鱼RNA合成20.0μL cDNA,通过q-PCR检测β-肌动蛋白(β-actin)和Col1a1b的基因表达。
皮肤的生长、修复、营养以及弹性、张力都与胶原蛋白有关,胶原蛋白的流失会使皮肤光滑度下降,产生皱纹。在四足动物中,I型胶原蛋白是一个三聚体,主要由两个α1链和一个α2链组成,分别由Col1a1a、Col1a1b和Col1a2基因编码,在结缔组织和骨中执行胶原蛋白相关生物功能。在斑马鱼中存在三种I型胶原基因,分别编码α1(I)、α2(I)和α3(I)链的Col1a1a、Col1a1b和Col1a2。因此,通过检测Col1a1b基因相对表达量,能评价组合物的抗皱功效。
组合物的抗皱功效按以下公式计算:
RNA相对表达量=2^ΔΔC(t)
ΔC(t)=C(t)目的基因-C(t)β-actin
其中,C(t)目的基因—用q-PCR检测出的Col1a1b的基因表达水平;
C(t)β-actin—用q-PCR检测出的β-肌动蛋白(β-actin)的基因表达水平;
C(t)目的基因—C(t)β-actin目的基因和C(t)β-actin的差值;
(三)提亮肤色功效
实验分组:随机选择135条受精后2天的斑马鱼模型,分为9组,7个实验组、1个正常对照组和1个模型对照组,每组15条鱼。将135条鱼分别置于6孔板中,每孔15条斑马鱼。将实施例1-7的样本溶液分别添加到7个有斑马鱼的孔内,每个孔的恒定体积为3mL。正常对照组、模型对照组的斑马鱼仅添加同体积的水。
实验操作:添加相应的样本溶液或水后,将7个实验组、1个正常对照组和1个模型对照组在避光下于28℃孵育2h后,模型对照组和实验组中均加入终浓度为1.75μM甲萘醌处理22h。处理结束后于28℃继续避光孵育20h。孵育完成后,各组随机挑选10尾斑马鱼,在可见光显微镜下拍照,用高级图像处理软件分析,获得斑马鱼卵黄囊色素的信号强度(S)。
自由基产生量大于机体清除能力时就发生氧化应激反应,最终导致皮肤色素沉着。通过抗氧化机制:提供电子、抑制氧化,或吸收自由基,可以起到清除自由基来改善皮肤色素沉着,即达到提亮肤色的功效。在斑马鱼上,可利用甲萘醌诱导造模,从而产生活性氧自由基。通过分析黑色素等位基因突变半透明Albino品系斑马鱼(环特生物提供)在自由基诱导下的卵黄囊色素信号强度,可以考察组合物的肤色提亮功效。
组合物的提亮肤色功效按以下公式计算:
(四)保湿功效
实验分组:随机选择135条受精后4天的斑马鱼模型,分为9组,7个实验组、1个正常对照组和1个模型对照组,每组15条鱼。将135条鱼置于6孔板中,每孔15条斑马鱼。将实施例1-7的样品溶液分别添加到7个有斑马鱼的孔内,每个孔的恒定体积为3mL。正常对照组、模型对照组的斑马鱼仅添加同体积的水。
实验操作:添加相应的样本溶液或水后,正常对照组和模型对照组用1.0%NaCl水溶液处理。所有组均在黑暗中于28℃培养18h。培养结束后,从每组中随机选择10条斑马鱼,在体视显微镜下观察(日本奥林巴斯SZX7),使用NIS Elements D 3.10高级图像处理软件计算斑马鱼的尾部面积(A)。
环境影响、皮肤衰老、代谢减缓等因素会造成肌肤水份流失,斑马鱼用氯化钠处理,由于渗透压的原因皮肤表面将会失水皱缩,尾部面积因皱缩而变小,可通过对尾部面积的影响,评价组合物的补水保湿效果。
组合物的保湿功效按以下公式计算:
美白、抗皱、提亮肤色和保湿实验结果见表4。
表4
从表4中可以看出,本发明的组合物在抗皱、提亮肤色和保湿的全部功效上都具有一定效果。
实施例5-7的组合物具有较好的抗皱、提亮肤色、保湿功效。与实施例7相比,实施例5的组合物中添加较多的胶原蛋白肽后,其抗皱、提亮肤色和保湿功效均高于实施例7;与实施例7相比,实施例6的组合物中添加少的橄榄提取物、维生素C和维生素E后,其提亮肤色和保湿功效均高于实施例7;与实施例6相比,实施例5中添加较多的维生素E后,其抗皱和保湿效果优于实施例5,但是提亮肤色效果差于实施例6。说明本发明的组合物复配透明质酸钠、橄榄提取物、维生素C和维生素E等成分,在低浓度就能发挥抗皱、提亮肤色、保湿功效。
实施例2-4的组合物中在较低浓度下有较好的美白、抗皱、提亮肤色和保湿功效。与实施例3相比,实施例2的组合物中添加较多的石榴提取物和减少的维生素C后,其美白、提亮肤色和保湿功效差于实施例3,但是抗皱效果优于实施例3;与实施例2相比,实施例3的组合物中添加较多的维生素C后,其美白、抗皱、提亮肤色和保湿功效均高于实施例2;与实施例2相比,实施例4的组合物中添加减少的大豆蛋白肽、魔芋粉和较多的维生素C以及维生素B1和维生素B6后,其美白、抗皱高于实施例2,但是提亮肤色和保湿功效均高于实施例2;与实施例4相比,实施例3的组合物中添加大豆蛋白肽和魔芋粉能显著提高美白、提亮肤色和保湿功效,但抗皱效果差于实施例4。
与实施例3相比,实施例1的组合物中添加燕窝酸、白芸豆提取物、牡丹花提取物和矿物质铁后,该组合物在较低功效浓度下,美白、抗皱、提亮肤色功效都达到了最佳效果(P<0.01)。表明,通过蛋白肽、透明质酸钠、燕窝酸、植物提取物、维生素和矿物质等多种成分之间的协同复配,在较低浓度时就可以全方位显著提高美白、抗皱、提亮肤色和保湿功效。
综合以上,实施例1-7的功效试验结果显示,蛋白肽、燕窝酸、透明质酸钠、植物提取物、维生素和矿物质类等成分之间的复配及添加量与美白、抗皱、提亮肤色、保湿效果成正相关。同时,透明质酸钠、燕窝酸、植物提取物、维生素等成分能协同蛋白肽,增强美白、抗皱、提亮肤色、保湿的效果。
对比例1
对比例1与实施例7的区别在于,不含有橄榄提取物,其余原料及工艺均与实施例7相同。配方见表5。
对比例2
对比例2与实施例7的区别在于,不含有维生素C,其余原料及工艺均与实施例7相同。配方见表5。
对比例3
对比例3与实施例7的区别在于,不含有维生素E,其余原料及工艺均与实施例7相同。配方见表5。
对比例4
对比例4与实施例7的区别在于,不含有橄榄提取物和维生素C,其余原料及工艺均与实施例7相同。配方见表5。
对比例5
对比例5与实施例7的区别在于,不含有橄榄提取物和维生素E,其余原料及工艺均与实施例7相同。配方见表5。
对比例6
对比例6与实施例7的区别在于,不含有维生素E和维生素C,其余原料及工艺均与实施例7相同。配方见表5。
表5(wt%)
将实施例7和对比例1-6得到的组合组进行功效实验,功效实验包括美白、抗皱、提亮肤色和保湿,实验方法同应用例。结果见表6。
表6
从表6可知,对比例1-6得到的组合物的美白功效、抗皱功效、提亮肤色功效和保湿功效,效果远差于本申请的实施例7。
本发明的组合物以小分子胶原三肽和胶原蛋白肽为主要成分,配合透明质酸钠、橄榄提取物、维生素C和维生素E进行协同互作,集抗皱、提亮肤色和保湿功效于一体,能有效改善了皮肤老化的问题;在此基础上,添加B族维生素、矿物质、燕窝酸、植物提取物、弹性蛋白肽和大豆蛋白肽进行协同复配,能进一步提高美白效果,集美白、抗皱、提亮肤色和保湿功效于一体,全方位美容效果显著。此外,本发明采用斑马鱼为实验对象,能更加客观、精准的评价组合物的功效。
以上所述,仅为本发明的较佳实施例,并非对本发明任何形式上和实质上的限制,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员,在不脱离本发明方法的前提下,还将可以做出若干改进和补充,这些改进和补充也应视为本发明的保护范围。凡熟悉本专业的技术人员,在不脱离本发明的精神和范围的情况下,当可利用以上所揭示的技术内容而做出的些许更动、修饰与演变的等同变化,均为本发明的等效实施例;同时,凡依据本发明的实质技术对上述实施例所作的任何等同变化的更动、修饰与演变,均仍属于本发明的技术方案的范围内。
Claims (10)
2.根据权利要求1所述的组合物,其特征在于,包括如下技术特征中的至少一项:
1)所述胶原三肽的相对分子量为250~500;
2)所述胶原蛋白肽的相对分子量为500~5000;
3)所述透明质酸钠的相对分子量为80000~200000。
3.根据权利要求1所述的组合物,其特征在于,包括如下技术特征中的至少一项:
A1)所述组合物还包括植物提取物;以组合物的总质量为基准计,所述植物提取物的含量为0.01~5%;
A2)所述组合物还包括大豆蛋白肽;以组合物的总质量为基准计,所述大豆蛋白肽的含量为1~30%;
A3)所述组合物还包括弹性蛋白肽;以组合物的总质量为基准计,所述弹性蛋白肽的含量为0.01~5%;
A4)所述组合物还包括燕窝酸;以组合物的总质量为基准计,所述燕窝酸的含量为0.01~5%;
A5)所述组合物还包括B族维生素;以组合物的总质量为基准计,所述B族维生素的含量为0.001~1%;
A6)所述组合物还包括矿物质;以组合物的总质量为基准计,所述矿物质的含量为0.001~1%。
4.根据权利要求3所述的组合物,其特征在于,所述植物提取物选自石榴提取物、白芸豆提取物、牡丹提取物、魔芋粉和米糠油粉中的一种或多种;
和/或,所述B族维生素选自维生素B1、维生素B6、烟酰胺和泛酸中的一种或多种;
和/或,所述矿物质选自葡萄糖酸亚铁和乙二胺四乙酸铁钠中的一种或两种;
和/或,所述弹性蛋白肽的相对分子量小于1000;
和/或,所述大豆蛋白肽的相对分子量小于2000。
5.根据权利要求4所述的组合物,其特征在于,所述植物提取物为石榴提取物和魔芋粉的混合物;
和/或,所述植物提取物为石榴提取物、魔芋粉、白芸豆提取物和牡丹提取物的混合物;
和/或,所述B族维生素选自维生素B1、维生素B6和烟酰胺的混合物;
和/或,所述B族维生素选自维生素B1、维生素B6、烟酰胺和泛酸的混合物。
6.根据权利要求5所述的组合物,其特征在于,所述石榴提取物和魔芋粉的质量比为(0.1~5):(1~300);
和/或,所述石榴提取物、白芸豆提取物、丹凤牡丹提取物和魔芋粉的质量比为(1~10):(1~20):(1~50):(1~10);
和/或,所述维生素B1、维生素B6和泛酸的质量比为(1~30):(1~10):(1~20);
和/或,所述维生素B1、维生素B6、烟酰胺和泛酸的质量比为(2~50):(1~10):(2~50):(1~20)。
7.根据权利要求1-6任一项所述的组合物在制备具有如下至少一项功能的产品中的用途,
1)美白皮肤;
2)皮肤抗皱;
3)提亮肤色;
4)皮肤保湿;
5)皮肤抗老化。
8.根据权利要求7所述的用途,其特征在于,所述产品包括口服化妆品和/或保健食品。
9.一种口服化妆品,其特征在于,所述口服化妆品包括如权利要求1-6任一项所述的组合物,以及一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂。
10.一种保健食品,其特征在于,所述保健食品中包括如权利要求1-6任一项所述的组合物,以及食品学上可接受的添加剂。
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