CN114941019B - 微生物发酵菌渣再利用的方法、裂褶菌菌渣的提取物及其应用 - Google Patents
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Abstract
本申请涉及化妆品领域，涉及一种微生物发酵菌渣再利用的方法、裂褶菌菌渣的提取物及其应用。将微生物发酵菌渣调整为菌液；对菌液进行破壁萃取，然后离心去渣，得到第一上清液；对第一上清液进行浓缩，得到浓缩液，对浓缩液进行醇沉，然后离心分离，得到沉淀物和第二上清液；向第二上清液中加入复合酶，进行酶解；然后分离提纯，得第三上清液；对沉淀物进行干燥，得到第一提取物SPE‑SPG；对第三上清液进行浓缩，得到浸膏，并将浸膏干燥得到第二提取物SPE‑SPP。SPE‑SPG中总糖的含量达到67.5％，可以用作化妆品原料；SPE‑SPP中蛋白质的含量达到65％，可以用于微生物培养基。提高了微生物发酵菌渣的利用率。
Description
技术领域
本申请涉及化妆品领域，具体而言，涉及一种微生物发酵菌渣再利用的方法、裂褶菌菌渣的提取物及其应用。
背景技术
在化妆品制备过程中，经常会产生微生物发酵菌渣，如何对微生物发酵菌渣进行再利用，实现环保绿色生产成为本领域的难点。
裂褶菌(Schizophyllum commune)又称白参、树花、八担柴，隶属于真菌门(Eumycophyta)，担子菌纲(Basidiomycetes)，伞菌目(Agaricales)，裂褶菌科(Schizophyllaceae)，裂褶菌属(Schizophyllum)。裂褶菌和发酵液中菌丝体中含有丰富的免疫活性多糖、蛋白质和生物活性L-型氨基酸，其中人体必需氨基酸有8种，在菌丝体中还含有24种微量元素，其中7种为必需微量元素。
裂褶菌菌种经液体深层发酵可产生多种生物活性物质，其中裂褶菌胞外多糖的制备工艺是研究最多的方向，裂褶菌胞外多糖现已被应用于化妆品产品中，在医药应用也有研究。但是在发酵后得到的子实体常常被当做菌渣废料处理。
目前在大规模工业生产中产生的裂褶菌残渣主要的处理方式是作为废料或者作为饲料处理，然而这种方式利用率低，环保性差。
发明内容
本申请实施例的目的在于提供一种微生物发酵菌渣再利用的方法、裂褶菌菌渣的提取物及其应用。
第一方面，本申请提供一种微生物发酵菌渣再利用的方法，包括：
将微生物发酵菌渣调整为菌液；微生物发酵菌渣为裂褶菌子实体；
对菌液进行破壁萃取，然后离心去渣，得到第一上清液；
对第一上清液进行浓缩，得到浓缩液，对浓缩液进行醇沉，然后离心分离，得到沉淀物和第二上清液；
向第二上清液中加入复合酶，进行酶解；然后分离提纯，得第三上清液；
对沉淀物进行干燥，得到第一提取物；对第三上清液进行浓缩，得到浸膏，并将浸膏干燥得到第二提取物。
本申请提供了一种微生物发酵菌渣再利用的方法，经过特殊工艺处理制备得到裂褶菌提取物，分别为第一裂褶菌提取物(主要含裂褶菌多糖)，缩写为SPE-SPG；第二裂褶菌提取物(主要含裂褶菌蛋白)，缩写为SPE-SPP。
本申请方法通过简单的破壁和醇沉工艺即可得到可用于化妆品中的大分子多糖。减少了破壁前期复合酶制剂使用，是性价比高的工艺。去处多糖之后的上清液，经过酶解处理可得到小分子蛋白成分，应用于微生物培养吸收利用率高。
而现有技术中，受技术和生产条件所限，工艺生产中得到的裂褶菌残渣常备作为废料处理，这不仅需要处理成本而且不利于环境保护；另外一个简单的处理方式是经过干燥处理作为饲料，没有经过深加工的处理方式利用率低，且不能体现其价值。
进一步地，在本申请一些实施方式中，通过检测数据结果显示本申请方法得到的SPE-SPG中总糖的含量达到67.5％，可以用作化妆品原料；SPE-SPP中蛋白质的含量达到65％，可以用于微生物培养基。因此，采用本申请的方法提高了微生物发酵菌渣的利用率，更加环保。
在本申请的其他实施例中，上述的将微生物发酵菌渣调整为菌液的步骤包括：
将微生物发酵菌渣与水混合，使得固含量为3％-12％。
在本申请的其他实施例中，上述的对菌液进行破壁萃取的步骤包括：
将菌液采用高压脉冲电场进行破壁处理；
控制场强为10kV/cm～20kV/cm，脉冲频率为200pps-500pps，脉冲宽度为1μs-10μs；处理时间为400μs-1000μs。
在本申请的其他实施例中，上述的对第一上清液进行浓缩，得到浓缩液的步骤包括：
对第一上清液进行真空减压浓缩，浓缩至固含量为15％-25％。
在本申请的其他实施例中，上述的对浓缩液进行醇沉的步骤包括：
向浓缩液中加入乙醇进行醇沉，乙醇的体积为浓缩液体积的2倍-4倍。
在本申请的其他实施例中，上述的向第二上清液中加入复合酶，进行酶解的步骤包括：
将第二上清液调整至温度为35℃-60℃、pH为5.0-7.5；然后加入复合酶进行酶解；复合酶加入的重量为第二上清液重量的0.01％-0.03％；酶解时间3h-7h。
在本申请的其他实施例中，上述的复合酶包括碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶或者风味蛋白酶中的至少一种。
在本申请的其他实施例中，上述的加入复合酶进行酶解后，还升温至70℃-90℃进行灭酶处理。
在本申请的其他实施例中，上述的分离提纯，得第三上清液是在离心速度为1000r/min-1500r/min，离心5min-10min条件下进行。
在本申请的其他实施例中，上述的对第三上清液进行浓缩包括：
将第三上清液经过真空减压浓缩得到固含量为50％-65％的浸膏。
第二方面，本申请提供一种裂褶菌菌渣的提取物，采用前述的微生物发酵菌渣再利用的方法制得，裂褶菌菌渣的提取物包括裂褶菌多糖和裂褶菌蛋白。
第三方面，本申请提供一种裂褶菌菌渣的提取物的应用，裂褶菌蛋白应用于微生物培养基；裂褶菌多糖应用于化妆品。
具体实施方式
为使本申请实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本申请实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本申请一部分实施例，而不是全部的实施例。
因此，以下对本申请的实施例的详细描述并非旨在限制要求保护的本申请的范围，而是仅仅表示本申请的选定实施例。基于本申请中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本申请保护的范围。
化妆品原料裂褶多糖在制备过程中产生的微生物发酵菌渣为裂褶菌菌渣。裂褶菌菌渣是裂褶菌菌种经过液体发酵后过滤离心后得到沉淀物，主要为裂褶菌子实体。发明人在前期研究阶段通过检测发现此菌渣中富含蛋白质和多糖成分，还包含有维生素和矿素质成分。
为了提高此菌渣的利用率，本申请提供了一种微生物发酵菌渣再利用的方法。经过特殊工艺处理制备得到裂褶菌提取物，分别为第一裂褶菌提取物(主要含裂褶菌多糖)，缩写为SPE-SPG；第二裂褶菌提取物(主要含裂褶菌蛋白)，缩写为SPE-SPP。
SPE-SPG和SPE-SPP可以被用于食品、饲料和微生物培养基，应用前景广阔，符合资源高效，环境友好的发展概念。
在本申请一些实施方式中，微生物发酵菌渣再利用的方法，包括以下步骤：
步骤S1、将微生物发酵菌渣调整为菌液。
进一步地，在本申请一些实施方式中，将微生物发酵菌渣调整为菌液的步骤包括：
将微生物发酵菌渣与水混合，使得固含量为3％-12％。
进一步可选地，在本申请一些实施方式中，将微生物发酵菌渣调整为菌液的步骤包括：
将微生物发酵菌渣与水混合，使得固含量为4％-11％。
进一步可选地，在本申请一些实施方式中，将微生物发酵菌渣调整为菌液的步骤包括：
将微生物发酵菌渣与水混合，使得固含量为5％-10％。
示例性地，将微生物发酵菌渣调整为菌液的步骤包括：
将微生物发酵菌渣与水混合，使得固含量为6％、7％、8％或者9％。
示例性地，在一些实施方式中，将液体发酵工序中得到的裂褶菌菌渣加水调整至固含量为3％-12％，进一步地，选用溶解式搅拌棒让液体搅拌至均匀。
步骤S2、对菌液进行破壁萃取，然后离心去渣，得到第一上清液。
进一步地，在本申请一些实施方式中，对菌液进行破壁萃取的步骤包括：
将菌液采用高压脉冲电场进行破壁处理；
控制场强为10kV/cm～20kV/cm，脉冲频率为200pps-500pps，脉冲宽度为1μs-10μs；处理时间为400μs-1000μs。
进一步可选地，在本申请一些实施方式中，对菌液进行破壁萃取的步骤包括：
将菌液采用高压脉冲电场进行破壁处理；
控制场强为11kV/cm～19kV/cm，脉冲频率为220pps-480pps，脉冲宽度为2μs-9μs；处理时间为500μs-900μs。
示例性地，将菌液采用高压脉冲电场进行破壁处理；
控制场强为12kV/cm、13kV/cm、14kV/cm、15kV/cm、16kV/cm、17kV/cm或者18kV/cm。脉冲频率为250pps、300pps、350pps、400pps或者420pps。脉冲宽度为2μs、3μs、4μs、5μs、6μs、7μs、8μs或者9μs。处理时间为550μs、600μs、650μs、700μs、750μs、800μs或者850μs。
进一步地，在本申请一些实施方式中，在常温下采用高压脉冲电场PEF设备对菌液进行破壁处理，如果是夏季(室温较高)，可采用循环式冷却水浴，控制液体温度为20-40℃。控制场强为10～20kV/cm，脉冲频率为200-500pps，脉冲宽度为1-10μs；处理时间为400-1000μs。
本申请采用高压脉冲电场法PEF，利用细胞膜电穿孔原理，使组织细胞发生不可逆破坏，促进细胞内组成流出。处理时间短，产热少，耗能少，破壁效果佳。
进一步地，将破壁处理后的液体静置一定时间0-2h。进一步可选地，将破壁处理后的液体静置一定时间0.5-1.8h。示例性地，将破壁处理后的液体静置一定时间0.6h、0.8h、1.0h、1.2h或者1.5h。
本申请采用高压脉冲电场设备进行破壁萃取可以让胞内物质充分释放，并且通过控制温度可以降低蛋白变性可能。相比于本领域常规的方法采用高压均质破壁、超声破壁方法，本申请的破壁萃取方法的破壁及萃取更充分，并且能稳定液体温度变化。
在本领域，一些常规方法，采用复合酶制剂对酵母菌等进行破壁处理，这种方法一般需要震荡破壁数小时，例如4小时或以上。
相比于本申请的破壁处理方式，极大地缩短了处理时间(仅需要400μs-1000μs)，能够快速地使组分释放出来。
步骤S3、对第一上清液进行浓缩，得到浓缩液，对浓缩液进行醇沉，然后离心分离，得到沉淀物和第二上清液。
进一步地，在本申请一些实施方式中，对第一上清液进行浓缩，得到浓缩液的步骤包括：
对第一上清液进行真空减压浓缩，浓缩至固含量为15％-25％。
进一步可选地，对第一上清液进行真空减压浓缩，浓缩至固含量为16％-24％。进一步可选地，对第一上清液进行真空减压浓缩，浓缩至固含量为18％-22％。示例性地，对第一上清液进行真空减压浓缩，浓缩至固含量为19％、20％或者21％。
进一步地，在本申请一些实施方式中，对浓缩液进行醇沉的步骤包括：
向浓缩液中加入乙醇进行醇沉，乙醇的体积为浓缩液体积的2倍-4倍。
进一步可选地，对浓缩液进行醇沉的步骤包括：向浓缩液中加入乙醇进行醇沉，乙醇的体积为浓缩液体积的2.5倍-3.5倍。示例性地，向浓缩液中加入乙醇进行醇沉，乙醇的体积为浓缩液体积的2.6倍、2.8倍、3.0倍或者3.2倍。
在醇沉前将液体浓缩到适合浓度可以减少乙醇用量并且利于沉淀多糖。通过醇沉方法除去多糖，不仅可以得到多糖，并且可以提升蛋白的提取率及纯度。
步骤S4、向第二上清液中加入复合酶，进行酶解；然后分离提纯，得第三上清液。
进一步地，在本申请一些实施方式中，向第二上清液中加入复合酶，进行酶解的步骤包括：
将第二上清液调整至温度为35℃-60℃、pH为5.0-7.5；然后加入复合酶进行酶解；复合酶加入的重量为第二上清液重量的0.01％-0.03％；酶解时间3h-7h。
进一步可选地，在本申请一些实施方式中，向第二上清液中加入复合酶，进行酶解的步骤包括：
将第二上清液调整至温度为36℃-58℃、pH为5.5-7.0；然后加入复合酶进行酶解；复合酶加入的重量为第二上清液重量的0.015％-0.025％；酶解时间3.5h-6.5h。
示例性地，进行酶解的步骤包括：将第二上清液调整至温度为36℃、38℃、40℃、42℃、45℃、50℃或者55℃；pH为6.0或者6.5；然后加入复合酶进行酶解；复合酶加入的重量为第二上清液重量的0.018％或者0.020％；酶解时间4h、4.5h、5h或者5.5h。
进一步地，在本申请一些实施方式中，复合酶包括碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶或者风味蛋白酶中的至少一种。
示例性地，在本申请一些实施方式中，复合酶为碱性蛋白酶；或者在本申请一些实施方式中，复合酶为木瓜蛋白酶；或者在本申请一些实施方式中，复合酶为风味蛋白酶。或者在本申请一些实施方式中，复合酶为碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶的混合物。或者在本申请一些实施方式中，复合酶为碱性蛋白酶和风味蛋白酶的混合物。或者在本申请一些实施方式中，复合酶为碱性蛋白酶、风味蛋白酶和木瓜蛋白酶的混合物。
进一步地，在本申请一些实施方式中，加入复合酶进行酶解后，还升温至70℃-90℃进行灭酶处理。进一步可选地，加入复合酶进行酶解后，还升温至72℃-88℃进行灭酶处理。示例性地，加入复合酶进行酶解后，还升温至75℃、80℃或者85℃进行灭酶处理。
进一步地，在本申请一些实施方式中，分离提纯，得第三上清液是在离心速度为1000r/min-1500r/min，离心5min-10min条件下进行。进一步可选地，分离提纯，得第三上清液是在离心速度为1050r/min-1450r/min，离心5.5min-9.5min条件下进行。示例性地，分离提纯，得第三上清液是在离心速度为1100r/min、1200r/min、1300r/min、1400r/min；离心6min、7min、8min或者9min条件下进行。
步骤S5、对沉淀物进行干燥，得到第一提取物；对第三上清液进行浓缩，得到浸膏，并将浸膏干燥得到第二提取物。
进一步地，在本申请一些实施方式中，对沉淀物进行干燥采用喷雾干燥。示例性地，向沉淀物中加入一定量敷料(本领域常规选择即可)经过喷雾干燥，得到第一提取物。第一提取物主要含裂褶菌多糖；缩写为SPE-SPG。
进一步地，在本申请一些实施方式中，对第三上清液进行浓缩包括：
将第三上清液经过真空减压浓缩得到固含量为50％-65％的浸膏。
进一步可选地，在本申请一些实施方式中，对第三上清液进行浓缩包括：将第三上清液经过真空减压浓缩得到固含量为52％-63％的浸膏。示例性地，对第三上清液进行浓缩包括：将第三上清液经过真空减压浓缩得到固含量为53％、55％、58％、60％或者62％。
进一步地，还对浸膏进行干燥。进一步可选地，采用喷雾干燥的方法进行干燥。
示例性地，在一些具体的实施方式中，上述的浸膏经过喷雾干燥得到第二提取物。第二提取物主要包含裂褶菌蛋白，缩写为SPE-SPP。
本申请将裂褶菌残渣进行加工处理得到SPE-SPG和SPE-SPP，这两个成分气味颜色自然，无不良气味，并且无使用有毒性添加剂或试剂，得到的产物安全，可被应用于食品、化妆品、饲料及微生物培养基中。经过本申请的处理方式不仅节约了废料处理成本而且提升裂褶菌渣的利用率，减少废料，降低浪费。
本申请一些实施方式提供一种裂褶菌菌渣的提取物，采用前述实施方式提供的微生物发酵菌渣再利用的方法制得，裂褶菌菌渣的提取物包括裂褶菌多糖和裂褶菌蛋白。
本申请一些实施方式提供一种裂褶菌菌渣的提取物的应用。前述实施方式提供的裂褶菌菌渣的提取物中裂褶菌蛋白应用于微生物培养基；裂褶菌多糖应用于化妆品。
以下结合实施例对本申请的特征和性能作进一步的详细描述：
实施例1
提供一种微生物发酵菌渣再利用的方法，微生物发酵菌渣为裂褶菌菌渣，该裂褶菌菌渣来自于化妆品生产工艺中产生的裂褶菌液体发酵过滤后得到的裂褶菌子实体，经过检测子实体中粗蛋白和总蛋白含量，其中粗多糖含量达25-38％，粗蛋白的含量达18-27％。
对上述的裂褶菌菌渣按照以下步骤进行处理：
1)配液处理：将液体发酵工序中得到的裂褶菌菌渣加水调整至固含量为3％，选用溶解式搅拌棒让液体搅拌至均匀；
2)破壁萃取：将步骤1)配制的菌液在常温下采用高压脉冲电场PEF设备对菌液进行破壁处理，控制场强为10kV/cm，脉冲频率为200pps，脉冲宽度为1μs；处理时间为400μs；将破壁处理后的液体静置一定时间0.5h；
3)离心去渣：将步骤2)中的菌液离心，去渣，得到上清液；
4)醇沉：将上清液经过真空减压浓缩为固含量为15％浓缩液，在浓缩液中加入2倍体积的95％乙醇进行醇沉，离心分离，得到沉淀物(含胞内多糖成分)和上清液；
5)酶解处理：步骤4)中上清液升温至35℃，调整pH为5.0,加入复合酶0.01％，复合酶含碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、风味蛋白酶中的一种或两种以上种，进行酶解3h。之后升温至70℃进行灭酶处理；
6)分离提纯：步骤5)中的液体经过离心，离心速度为1000r/min,离心5min，去处沉淀，取上清液；
7)浓缩：步骤6)中上清液经过真空减压浓缩得到固含量为50％的浸膏；
8)干燥：步骤4)中沉淀物加入一定量敷料经过喷雾干燥，可得到第一提取物即SPE-SPG；步骤6)中浸膏经过喷雾干燥得到第二提取物即SPE-SPP。
实施例2
与实施例1裂褶菌菌渣相同，按照以下步骤进行处理：
1)配液处理：将液体发酵工序中得到的裂褶菌菌渣加水调整至固含量为12％，选用溶解式搅拌棒让液体搅拌至均匀；
2)破壁萃取：将步骤1)配制的菌液在常温下采用高压脉冲电场PEF设备对菌液进行破壁处理，如果是夏季(室温较高)，可采用循环式冷却水浴，控制液体温度为40℃。控制场强为20kV/cm，脉冲频率为500pps，脉冲宽度为10μs；处理时间为1000μs；将破壁处理后的液体静置一定时间2h；
3)离心去渣：将步骤2)中的菌液离心，去渣，得到上清液；
4)醇沉：将上清液经过真空减压浓缩为固含量为25％浓缩液，在浓缩液中加入4倍体积的95％乙醇进行醇沉，离心分离，得到沉淀物(含胞内多糖成分)和上清液；
5)酶解处理：步骤4)中上清液升温至60℃，调整pH为7.5,加入复合酶0.03％，复合酶含碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、风味蛋白酶中的一种或两种以上种，进行酶解7h。之后升温至90℃进行灭酶处理；
6)分离提纯：步骤5)中的液体经过离心，离心速度为1500r/min,离心10min，去处沉淀，取上清液；
7)浓缩：步骤6)中上清液经过真空减压浓缩得到固含量为65％的浸膏；
8)干燥：步骤4)中沉淀物加入一定量敷料经过喷雾干燥，可得到第一提取物即SPE-SPG；步骤6)中浸膏经过喷雾干燥得到第二提取物即SPE-SPP。
实施例3
与实施例1裂褶菌菌渣相同，按照以下步骤进行处理：
1)配液处理：将液体发酵工序中得到的裂褶菌菌渣加水调整至固含量为8％，选用溶解式搅拌棒让液体搅拌至均匀；
2)破壁萃取：将步骤1)配制的菌液在常温下采用高压脉冲电场PEF设备对菌液进行破壁处理，如果是夏季(室温较高)，可采用循环式冷却水浴，控制液体温度为30℃。控制场强为15kV/cm，脉冲频率为300pps，脉冲宽度为5μs；处理时间为600μs；将破壁处理后的液体静置一定时间1h；
3)离心去渣：将步骤2)中的菌液离心，去渣，得到上清液；
4)醇沉：将上清液经过真空减压浓缩为固含量为20％浓缩液，在浓缩液中加入3倍体积的95％乙醇进行醇沉，离心分离，得到沉淀物(含胞内多糖成分)和上清液；
5)酶解处理：步骤4)中上清液升温至50℃，调整pH为6.0,加入复合酶0.02％，复合酶含碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、风味蛋白酶中的一种或两种以上种，进行酶解5h。之后升温至80℃进行灭酶处理；
6)分离提纯：步骤5)中的液体经过离心，离心速度为1200r/min,离心7min，去处沉淀，取上清液；
7)浓缩：步骤6)中上清液经过真空减压浓缩得到固含量为60％的浸膏；
8)干燥：步骤4)中沉淀物加入一定量敷料经过喷雾干燥，可得第一提取物即SPE-SPG；步骤6)中浸膏经过喷雾干燥得到第二提取物即SPE-SPP。
对实施例1～实施例3得到的第一提取物SPE-SPG和第二提取物SPE-SPP进行检测。
实验例1
1、检测SPE-SPG产物总糖含量
采用苯酚-硫酸法检测制备得到的SPE-SPG中总糖含量。通过检测数据结果显示实施例1～实施例3中的SPE-SPG中总糖的含量达到67.5％。
2、检测SPE-SPP产物蛋白质的含量
采用凯氏定氮法测定制备得到的SPE-SPP中蛋白质的含量，检测数据结果显示实施例1～实施例3中SPE-SPP中蛋白质的含量达到65％。
实验例2
SPE-SPP用于微生物培养基
制备量种培养基，①号是培养基由3％葡萄糖、0.3％酵母粉、0.05％硫酸镁、0.1％磷酸氢二钾及剩余量水组成，②号培养基是由3％葡萄糖、0.3％SPE-SPP、0.05％硫酸镁、0.1％磷酸氢二钾及剩余量水组成。将5％裂褶菌菌种分别在①号和②号培养基中，于28℃，160r/min条件下进行发酵，发酵120h后，将发酵产物进行离心处理，除去菌体，分别得到发酵液①和发酵液②。
采用苯酚-硫酸法和DNS法检测两种上清液中多糖含量。多糖在浓硫酸的作用下，先水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，与苯酚反应生成橙黄色溶液，在490nm处有最大吸收。以葡萄糖为标准品，测定发酵产物总糖含量。采用DNS法测定发酵产物还原糖含量，还原糖在碱性条件下可被氧化成糖酸及其他产物，而氧化剂3,5-二硝基水杨酸则被还原成棕红色的3-氨基-5硝基水杨酸。在一定范围内，还原糖的量与棕红色物质的颜色深浅成正比关系，利用分光光度计在550nm处测定其吸光度。以葡萄糖为标准品，测定发酵产物还原糖含量。
计算公式为：总糖含量(mg/mL)＝吸光度对应葡萄糖浓度×稀释倍数N；还原糖含量(mg/mL)＝吸光度对应葡萄糖浓度×稀释倍数N；多糖含量(mg/mL)＝总糖含量(mg/mL)-还原糖含量(mg/mL)
结果显示，发酵液①和发酵液②中多糖含量分别为2.753mg/ml和2.740mg/ml，两者含量相近。
由此说明本申请方法制备得到的SPE-SPP作为微生物培养的氮源具有一定应用价值，可以应用于微生物培养基领域。
实验例3
SPE-SPG体外保湿作用
采用体外实验测试保湿效果。将SPE-SPG、燕麦β-葡聚糖用水溶解调配成一定浓度的膏状。将胶布剪成需要的段数贴在玻璃板上，准确称量1％甘油(阳性对照组)、SPE-SPG和燕麦β-葡聚糖各0.2g均匀涂抹在胶布上，放入相对湿度为85％的干燥器中，在4，8和24h时称重，计算样品的保湿率和相对于标准品甘油的相对保湿率。计算方法：ME＝mt×100％/mo；RME＝(mt-mt，w)×100％/(mt，s-mt，w)式中，mt——放置t小时后水分的质量/g；Mo——放置初水分的质量/g；mt，s——参照标准(1％甘油)放置t小时后的水分质量/g；mt，w——空白对照(水)放置t小时后的水分质量/g。
测试结果见下表：
表1 RH 85％条件下样品的ME
表2 RH 85％条件下样品的HME
结果显示，SPE-SPG的保湿性能优于燕麦β-葡聚糖，相对于甘油的保湿率显著大于燕麦β-葡聚糖。
由此说明本申请制备得到的SPE-SPG的保湿效果明显，具备开发作为日用化妆品中保湿剂的潜力。
以上所述仅为本申请的优选实施例而已，并不用于限制本申请，对于本领域的技术人员来说，本申请可以有各种更改和变化。凡在本申请的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本申请的保护范围之内。
Claims (2)
1.一种微生物发酵菌渣再利用的方法，其特征在于，包括：
所述微生物发酵菌渣为裂褶菌子实体；所述微生物发酵菌渣为化妆品原料裂褶多糖在制备过程中发酵过滤后得到；所述裂褶菌子实体中，粗多糖含量25-38%，粗蛋白的含量18-27%；
所述方法包括：
配液处理：将液体发酵工序中得到的裂褶菌菌渣加水调整至固含量为3%-12%，将配制好的液体搅拌至均匀；
破壁萃取：将所述配液处理步骤得到的液体在常温下采用高压脉冲电场PEF 设备对菌液进行破壁处理，控制场强为10 kV/cm～20kV/cm，脉冲频率为200 pps -500pps，脉冲宽度为1μs -10μs；处理时间为400μs-1000μs；将破壁处理后的液体静置一定时间0.5h~2h；
离心去渣：将所述破壁萃取步骤得到的液体离心，去渣，得到上清液；
醇沉：将所述离心去渣步骤得到的上清液经过真空减压浓缩为固含量为15%~25%浓缩液，在浓缩液中加入2~4倍体积的95%乙醇进行醇沉，离心分离，得到含胞内多糖成分的沉淀物和上清液；
酶解处理：将所述醇沉步骤得到的上清液升温至35~60℃，调整pH为5.0~7.5，加入复合酶0.01%~0.03%，复合酶含碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、风味蛋白酶中的一种或两种以上种，进行酶解3h ~7h；之后升温至70℃~90℃进行灭酶处理；
分离提纯：将所述酶解处理步骤得到的液体经过离心，离心速度为1000r/min~1500r/min；离心5min~10min，去除沉淀，取上清液；
浓缩：将所述分离提纯步骤中得到的上清液经过真空减压浓缩得到固含量为50%~65%的浸膏；
干燥：将所述醇沉步骤得到的沉淀物加入敷料经过喷雾干燥，可得到第一提取物；将所述浓缩步骤得到的浸膏经过喷雾干燥得到第二提取物；
所述第一提取物的保湿性能优于燕麦β-葡聚糖，用于化妆品中保湿剂；
所述第二提取物用于微生物培养基，作为微生物培养的氮源。
2.权利要求1所述的裂褶菌菌渣的提取物的应用，其特征在于，所述裂褶菌蛋白应用于微生物培养基。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210738581.3A CN114941019B (zh) | 2022-06-24 | 2022-06-24 | 微生物发酵菌渣再利用的方法、裂褶菌菌渣的提取物及其应用 |
Applications Claiming Priority (1)
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