CN114910590B - 一种十味安神颗粒hplc指纹图谱的建立方法及其指纹图谱 - Google Patents
一种十味安神颗粒hplc指纹图谱的建立方法及其指纹图谱 Download PDFInfo
- Publication number
- CN114910590B CN114910590B CN202210578639.2A CN202210578639A CN114910590B CN 114910590 B CN114910590 B CN 114910590B CN 202210578639 A CN202210578639 A CN 202210578639A CN 114910590 B CN114910590 B CN 114910590B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- peak
- fingerprint
- nerve
- schizandrin
- hplc
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 title claims abstract description 47
- 239000008187 granular material Substances 0.000 title claims abstract description 44
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 30
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 title description 25
- 239000013558 reference substance Substances 0.000 claims abstract description 20
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 claims abstract description 19
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 10
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 36
- JEJFTTRHGBKKEI-OKILXGFUSA-N deoxyschizandrin Chemical compound C1[C@H](C)[C@H](C)CC2=CC(OC)=C(OC)C(OC)=C2C2=C1C=C(OC)C(OC)=C2OC JEJFTTRHGBKKEI-OKILXGFUSA-N 0.000 claims description 29
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 24
- YTZSBJLNMIQROD-SFBCHFHNSA-N Morroniside Chemical compound O([C@@H]1OC=C([C@H]2C[C@H](O)O[C@@H](C)[C@H]21)C(=O)OC)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O YTZSBJLNMIQROD-SFBCHFHNSA-N 0.000 claims description 24
- UILPJVPSNHJFIK-UHFFFAOYSA-N Paeonol Chemical compound COC1=CC=C(C(C)=O)C(O)=C1 UILPJVPSNHJFIK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 24
- AEDDIBAIWPIIBD-ZJKJAXBQSA-N mangiferin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1C1=C(O)C=C(OC=2C(=CC(O)=C(O)C=2)C2=O)C2=C1O AEDDIBAIWPIIBD-ZJKJAXBQSA-N 0.000 claims description 24
- RTZKSTLPRTWFEV-OLZOCXBDSA-N Deoxygomisin A Chemical compound COC1=C2C=3C(OC)=C(OC)C(OC)=CC=3C[C@@H](C)[C@@H](C)CC2=CC2=C1OCO2 RTZKSTLPRTWFEV-OLZOCXBDSA-N 0.000 claims description 23
- RTZKSTLPRTWFEV-UHFFFAOYSA-N Isokadsuranin Natural products COC1=C2C=3C(OC)=C(OC)C(OC)=CC=3CC(C)C(C)CC2=CC2=C1OCO2 RTZKSTLPRTWFEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 23
- JEJFTTRHGBKKEI-UHFFFAOYSA-N deoxyschizandrin Natural products C1C(C)C(C)CC2=CC(OC)=C(OC)C(OC)=C2C2=C1C=C(OC)C(OC)=C2OC JEJFTTRHGBKKEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 23
- YBZZAVZIVCBPDJ-UHFFFAOYSA-N schizandrin B Natural products COC1=C2C=3C(OC)=C(OC)C(OC)=CC=3CC(C)C(C)(O)CC2=CC2=C1OCO2 YBZZAVZIVCBPDJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 23
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 22
- FYSHYFPJBONYCQ-UHFFFAOYSA-N schisanhenol Natural products C1C(C)C(C)CC2=CC(OC)=C(OC)C(OC)=C2C2=C1C=C(OC)C(OC)=C2O FYSHYFPJBONYCQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 17
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 14
- YEFOAORQXAOVJQ-RZFZLAGVSA-N schisandrol a Chemical compound C1[C@H](C)[C@@](C)(O)CC2=CC(OC)=C(OC)C(OC)=C2C2=C1C=C(OC)C(OC)=C2OC YEFOAORQXAOVJQ-RZFZLAGVSA-N 0.000 claims description 14
- YTZSBJLNMIQROD-UHFFFAOYSA-N (4aS)-1c-beta-D-glucopyranosyloxy-6xi-hydroxy-8t-methyl-(4ar,8ac)-5,6,8,8a-tetrahydro-1H,4aH-pyrano[3,4-c]pyran-4-carboxylic acid methyl ester Natural products C12C(C)OC(O)CC2C(C(=O)OC)=COC1OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O YTZSBJLNMIQROD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- IBFYXTRXDNAPMM-BVTMAQQCSA-N Geniposide Chemical compound O([C@@H]1OC=C([C@@H]2[C@H]1C(=CC2)CO)C(=O)OC)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O IBFYXTRXDNAPMM-BVTMAQQCSA-N 0.000 claims description 12
- IBFYXTRXDNAPMM-FZEIBHLUSA-N Geniposide Natural products COC(=O)C1=CO[C@@H](O[C@H]2O[C@@H](CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]2O)[C@H]2[C@@H]1CC=C2CO IBFYXTRXDNAPMM-FZEIBHLUSA-N 0.000 claims description 12
- AMBQHHVBBHTQBF-UHFFFAOYSA-N Loganin Natural products C12C(C)C(O)CC2C(C(=O)OC)=COC1OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O AMBQHHVBBHTQBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- YWQSXCGKJDUYTL-UHFFFAOYSA-N Mangiferin Natural products CC(CCC=C(C)C)C1CC(C)C2C3CCC4C(C)(C)CCCC45CC35CCC12C YWQSXCGKJDUYTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- YKRGDOXKVOZESV-WRJNSLSBSA-N Paeoniflorin Chemical compound C([C@]12[C@H]3O[C@]4(O)C[C@](O3)([C@]1(C[C@@H]42)O[C@H]1[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)C)OC(=O)C1=CC=CC=C1 YKRGDOXKVOZESV-WRJNSLSBSA-N 0.000 claims description 12
- VGLLGNISLBPZNL-RBUKDIBWSA-N arborescoside Natural products O=C(OC)C=1[C@@H]2C([C@H](O[C@H]3[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)OC=1)=C(CO)CC2 VGLLGNISLBPZNL-RBUKDIBWSA-N 0.000 claims description 12
- YLTGFGDODHXMFB-UHFFFAOYSA-N isoacetovanillon Natural products COC1=CC=C(C(C)=O)C=C1O YLTGFGDODHXMFB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- AMBQHHVBBHTQBF-UOUCRYGSSA-N loganin Chemical compound O([C@@H]1OC=C([C@H]2C[C@H](O)[C@H](C)[C@H]21)C(=O)OC)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O AMBQHHVBBHTQBF-UOUCRYGSSA-N 0.000 claims description 12
- 229940043357 mangiferin Drugs 0.000 claims description 12
- YKRGDOXKVOZESV-UHFFFAOYSA-N paeoniflorin Natural products O1C(C)(C2(CC34)OC5C(C(O)C(O)C(CO)O5)O)CC3(O)OC1C24COC(=O)C1=CC=CC=C1 YKRGDOXKVOZESV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- MLIBGOFSXXWRIY-UHFFFAOYSA-N paeonol Natural products COC1=CC=C(O)C(C(C)=O)=C1 MLIBGOFSXXWRIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 238000005303 weighing Methods 0.000 claims description 12
- VUWOVGXVRYBSGI-IRXABLMPSA-N 1,3,6-trihydroxy-2-[(2s,3r,4r,5s,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]-7-[(2s,3r,4r,5s,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyxanthen-9-one Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC(C(C2=C(O)C([C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)=C(O)C=C2O2)=O)=C2C=C1O VUWOVGXVRYBSGI-IRXABLMPSA-N 0.000 claims description 11
- VUWOVGXVRYBSGI-UHFFFAOYSA-N 7-O-beta-D-Glucopyranoside-Mangiferin Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1=CC(C(C2=C(O)C(C3C(C(O)C(O)C(CO)O3)O)=C(O)C=C2O2)=O)=C2C=C1O VUWOVGXVRYBSGI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 claims description 11
- WAYBWHJDPRHBMW-GUZANKGOSA-N neomangiferin Natural products OC[C@@H]1O[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O)c2cc3C(=O)c4c(O)c([C@@H]5O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]5O)c(O)cc4Oc3cc2O WAYBWHJDPRHBMW-GUZANKGOSA-N 0.000 claims description 11
- WRYJYFCCMSVEPQ-MNIDVGFKSA-N (2s,3r,4s,5s,6r)-2-[(2r,3r,4s,5s,6r)-2-[[(3s,4r,4ar,6ar,6bs,8s,8as,14ar,14bs)-8-hydroxy-4,8a-bis(hydroxymethyl)-4,6a,6b,11,11,14b-hexamethyl-1,2,3,4a,5,6,7,8,9,10,12,14a-dodecahydropicen-3-yl]oxy]-3,5-dihydroxy-6-methyloxan-4-yl]oxy-6-(hydroxymethyl)oxane Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2[C@@]([C@H]3[C@]([C@@H]4[C@@]([C@@]5(C[C@H](O)[C@@]6(CO)CCC(C)(C)CC6=C5C=C4)C)(C)CC3)(C)CC2)(C)CO)O[C@@H]([C@@H]1O)C)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O WRYJYFCCMSVEPQ-MNIDVGFKSA-N 0.000 claims description 10
- KYWSCMDFVARMPN-MSSMMRRTSA-N Saikosaponin A Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2[C@@]([C@H]3[C@]([C@@H]4[C@@]([C@@]5(C[C@H](O)[C@]67CO[C@]5([C@@H]6CC(C)(C)CC7)C=C4)C)(C)CC3)(C)CC2)(C)CO)O[C@@H]([C@@H]1O)C)[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O KYWSCMDFVARMPN-MSSMMRRTSA-N 0.000 claims description 10
- QLPRYZXNWYTFCI-UHFFFAOYSA-N saikosaponin D Natural products CC1OC(OC2CCC3(C)C(CCC4(C)C3C=CC56OCC7(CCC(C)(C)CC57)C(O)CC46C)C2(C)CO)C(O)C(O)C1OC8OC(CO)C(O)C(O)C8O QLPRYZXNWYTFCI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- PQPVAGWUNWFCJE-UHFFFAOYSA-N saikosaponin a Natural products CC1OC(OC2CCC3(C)C(C2)C(C)(CO)CC4(C)C3C=CC56OCC7(CCC(C)(C)CC57)C(O)CC46C)C(O)C(OC8OC(CO)C(O)C(O)C8O)C1O PQPVAGWUNWFCJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- WRYJYFCCMSVEPQ-IPNFWLSTSA-N saikosaponin b1 Natural products C[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2CC[C@@]3(C)[C@@H](CC[C@]4(C)[C@@H]3C=CC5=C6CC(C)(C)CC[C@]6(CO)[C@@H](O)C[C@]45C)[C@]2(C)CO)[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]7O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]7O)[C@H]1O WRYJYFCCMSVEPQ-IPNFWLSTSA-N 0.000 claims description 10
- GNVUHIXVRODVRA-UHFFFAOYSA-N saikosaponin-b2 Natural products CC1OC(OC2CCC3(C)C(CCC4(C)C3C=CC5=C6CC(C)(C)CCC6(CO)C(O)CC45C)C2(C)CO)C(O)C(O)C1OC7OC(CO)C(O)C(O)C7O GNVUHIXVRODVRA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 claims description 9
- 230000002936 tranquilizing effect Effects 0.000 claims description 8
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 7
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims description 7
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 7
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 7
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 7
- 238000000227 grinding Methods 0.000 claims description 7
- 229930193195 schizandrin Natural products 0.000 claims description 7
- YEFOAORQXAOVJQ-UHFFFAOYSA-N wuweizischun A Natural products C1C(C)C(C)(O)CC2=CC(OC)=C(OC)C(OC)=C2C2=C1C=C(OC)C(OC)=C2OC YEFOAORQXAOVJQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 239000012085 test solution Substances 0.000 claims description 6
- 239000003643 water by type Substances 0.000 claims description 5
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- YTJSFYQNRXLOIC-UHFFFAOYSA-N octadecylsilane Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC[SiH3] YTJSFYQNRXLOIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 claims description 2
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 claims 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 3
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 13
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 10
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 229940054967 vanquish Drugs 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 239000000932 sedative agent Substances 0.000 description 2
- 230000001624 sedative effect Effects 0.000 description 2
- 208000019901 Anxiety disease Diseases 0.000 description 1
- 241000510654 Bupleurum chinense Species 0.000 description 1
- 241000759833 Cornus officinalis Species 0.000 description 1
- 244000111489 Gardenia augusta Species 0.000 description 1
- 240000002853 Nelumbo nucifera Species 0.000 description 1
- 235000006508 Nelumbo nucifera Nutrition 0.000 description 1
- 235000006510 Nelumbo pentapetala Nutrition 0.000 description 1
- 244000236658 Paeonia lactiflora Species 0.000 description 1
- 235000008598 Paeonia lactiflora Nutrition 0.000 description 1
- 241000405911 Rehmannia glutinosa Species 0.000 description 1
- 240000006079 Schisandra chinensis Species 0.000 description 1
- 235000008422 Schisandra chinensis Nutrition 0.000 description 1
- 208000013738 Sleep Initiation and Maintenance disease Diseases 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000036506 anxiety Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 229940095686 granule product Drugs 0.000 description 1
- 206010022437 insomnia Diseases 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 238000013112 stability test Methods 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/86—Signal analysis
- G01N30/8624—Detection of slopes or peaks; baseline correction
- G01N30/8631—Peaks
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/86—Signal analysis
- G01N30/8675—Evaluation, i.e. decoding of the signal into analytical information
- G01N30/8686—Fingerprinting, e.g. without prior knowledge of the sample components
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Library & Information Science (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
本发明公开了一种十味安神颗粒HPLC指纹图谱的建立方法，该方法包括对照品及供试品溶液的制备、HPLC色谱条件的确定及HPLC标准指纹图谱的制作。同时公开了由该方法得到的十味安神颗粒HPLC标准指纹图谱，该指纹图谱有24个共有峰，通过对照品指认14个共有峰。方法简便、稳定性及重现性好，所得图谱特征峰全面，通过标准指纹图谱共有峰的比对，可对十味安神颗粒的质量进行全面评价和控制，有利于精准评估制剂的内在质量，确保临床用药的安全性、有效性。
Description
技术领域
本发明属于中药制剂分析领域，本发明公开了一种十味安神颗粒HPLC指纹图谱的建立方法及其指纹图谱。
背景技术
十味安神颗粒由山萸肉、五味子、地黄、白芍、牡丹皮、栀子、柴胡、莲子心、知母、酸枣仁10味药物组成，具有治疗失眠、焦虑、抑郁和更年期综合征的作用。
十味安神颗粒制剂是中药复方制剂，含多味中药且化学成分复杂，对其进行有效的质量控制是保证其临床疗效的重要基础。为保证并稳定产品质量，需要对其质量检测和控制法进行全面地研究。
十味安神颗粒HPLC指纹图谱研究能够指认14个共有峰，提供一种十味安神颗粒的HPLC指纹图谱建立方法，有效反映十味安神颗粒化学成分的整体性和复杂性，对制剂质量进行全面地评价和控制，进而保证临床用药的安全性与有效性。
发明内容
本发明的目的是提供一种十味安神颗粒指纹图谱建立方法。具体来说，该方法将十味安神颗粒制备成供试品溶液，经过HPLC分离检测，从而获得十味安神颗粒HPLC标准指纹图谱，实现全方位多方面检测，完善其质量检测体系，进而为十味安神颗粒的真伪鉴别和内在质量提供可靠依据。
本发明一种十味安神颗粒HPLC指纹图谱的建立方法，包括下列步骤。
1)对照品和供试品溶液的制备：称取莫诺苷、马钱苷、栀子苷、芒果苷、新芒果苷、芍药苷、丹皮酚、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯乙、五味子甲素、五味子乙素、柴胡皂苷A、柴胡皂苷B1对照品适量，用甲醇溶解，作为对照品溶液。
取十味安神颗粒研细，精密称定，加入50%~100%甲醇25~100 ml，超声提取10~30min，放冷，滤过，取续滤液，作为供试品溶液。
2)HPLC色谱条件的确定：十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，以乙腈为流动相A，0.1~0.3%磷酸溶液为流动相B，采用梯度洗脱；检测波长：220~260nm；流速：0.5~1.0ml/min；柱温：30~40℃。
3)指纹图谱的制作：按步骤2)色谱条件对对照品溶液和供试品溶液进行分析比较，得到由样品共有特征峰构成的十味安神颗粒HPLC标准指纹图谱。
优选地，步骤1)所述供试品溶液，按如下步骤制备：取十味安神颗粒研细，取约1.0g，精密称定，加入80%甲醇25 ml，超声提取30min，放冷，滤过，取续滤液，得供试品溶液。
优选地，步骤2)所述的色谱柱为Waters Symmetry C18 Column色谱柱。
进一步优选，所述色谱柱的规格为4.6×250mm，5μm。
优选地，步骤2)所述流动相B为0.1％磷酸溶液。
步骤2)所述梯度洗脱条件为。
。
优选地，所述的检测波长为240nm，流速为0.5~1.0ml/min，柱温为35℃。
本发明的另一个目的，是提供所述十味安神颗粒HPLC标准指纹图谱，将10批十味安神颗粒样品，按上述方法制备成供试品溶液，以HPLC分离检测，使用国家药典委员会推荐的《中药色谱指纹图谱相似度评价系统2012版》软件分析，得到十味安神颗粒HPLC标准指纹图谱。
本发明所得到的指纹图谱有24个共有峰，以五味子醇甲为参比峰，其共有峰相对保留时间tR依次分别为：0.261 ，0.294 ，0.564 ，0.578 ，0.602 ，0.659 ，0.727 ，0.764 ，0.773 ，0.890 ，0.943 ，0.950 ，0.966 ，0.970，1.013 ，1.020 ，1.025 ，1.044 ，1.058 ，1.095 ，1.127 ，1.134 ，1.138。
通过对照品比对，指认了其中14个共有峰，分别为莫诺苷（1号峰）、新芒果苷（2号峰）、栀子苷（3号峰）、芒果苷（4号峰）、马钱苷（5号峰）、芍药苷（6号峰）、丹皮酚（11号峰）、柴胡皂苷a（12号峰）、柴胡皂苷B1（14号峰）、五味子醇甲（15号峰）、五味子醇乙（18号峰）、五味子酯乙（21号峰）、五味子甲素（22号峰）、五味子乙素（24号峰）。
与现有技术相比，本申请能产生的有益效果包括。
1)本发明一种十味安神颗粒HPLC指纹图谱的建立方法，根据十味安神颗粒的处方成分构成特点，优选最佳的HPLC条件，所得指纹图谱分离度高、峰形好，各特征色谱峰均实现了良好分离，稳定性好、特征峰多，能全面、准确地评价十味安神颗粒的质量，适用于对十味安神颗粒产品质量的控制。
2)本发明检测方法以五味子醇甲为参比峰，确定了24个共有峰为构成十味安神颗粒指纹图谱的共有峰，从共有峰中鉴定出莫诺苷、栀子苷、芒果苷、马钱苷、芍药苷、丹皮酚、五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素、新芒果苷、柴胡皂苷A、柴胡皂苷B1、五味子醇乙、五味子酯乙等14种化学成分，指纹图谱组成更加丰富、全面。
3)本发明建立的十味安神颗粒HPLC指纹图谱克服了现有技术检测指标单一、不能反映内在质量的缺点，所提供的十味安神颗粒HPLC指纹图谱建立方法精密度高、重现性好，通过对比所得指纹图谱中共有峰的有无，可对十味安神颗粒的质量进行全面评价，有效地保证了成品的质量。
附图说明
图1为十味安神颗粒HPLC混合对照图谱。
其中，莫诺苷（1号峰）、新芒果苷（2号峰）、栀子苷（3号峰）、芒果苷（4号峰）、马钱苷（5号峰）、芍药苷（6号峰）、丹皮酚（11号峰）、柴胡皂苷a（12号峰）、柴胡皂苷B1（14号峰）、五味子醇甲（15号峰）、五味子醇乙（18号峰）、五味子酯乙（21号峰）、五味子甲素（22号峰）、五味子乙素（24号峰）。
图2为十味安神颗粒HPLC标准指纹图谱。
图标1-24为24个共有峰，其中，莫诺苷（1号峰）、新芒果苷（2号峰）、栀子苷（3号峰）、芒果苷（4号峰）、马钱苷（5号峰）、芍药苷（6号峰）、丹皮酚（11号峰）、柴胡皂苷a（12号峰）、柴胡皂苷B1（14号峰）、五味子醇甲（15号峰）、五味子醇乙（18号峰）、五味子酯乙（21号峰）、五味子甲素（22号峰）、五味子乙素（24号峰）。
图3为10批十味安神颗粒的HPLC指纹图谱叠加图。
其中，莫诺苷（1号峰）、新芒果苷（2号峰）、栀子苷（3号峰）、芒果苷（4号峰）、马钱苷（5号峰）、芍药苷（6号峰）、丹皮酚（11号峰）、柴胡皂苷a（12号峰）、柴胡皂苷B1（14号峰）、五味子醇甲（15号峰）、五味子醇乙（18号峰）、五味子酯乙（21号峰）、五味子甲素（22号峰）、五味子乙素（24号峰）。
具体实施方式
为了使本申请的目的、技术方案和优点更加清楚、明晰，以下将结合附图对实施例中的技术方案进行清楚、完整的描述。显而易见，以下实施例是本申请实施例的一部分，而不是全部。因此，以下对实施例的详细描述并非限定本申请要求保护的范围，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动的前提下所作出的等同替换或修改，均应包含在本发明的保护范围之内。
实施例1十味安神颗粒HPLC标准指纹图谱的建立。
1仪器与试药。
1.1仪器。
Thermo Scientific Vanquish Core HPLC戴安高效液相色谱仪（德国），DAD检测器；KQ5200B型超声波清洗器（昆山市超声仪器厂）；天平 ESJ30-5A（上海精密仪器仪表有限公司）。
1.2试药。
10批十味安神颗粒，样品批号见表1，乙腈为色谱纯，水为纯化水，其余试剂均为分析纯。
表1十味安神颗粒测试样品批号。
。
2方法与结果。
2.1色谱条件：色谱条件Waters Symmetry C18 Column色谱柱(5 μm, 4.6×250mm)，柱温35 ℃，流速1.0 ml/min，检测波长为240nm，进样10µl；流动相：以乙腈为流动相A，以0.1％磷酸溶液为流动相B。
按下表进行梯度洗脱。
。
2.2对照品和供试品溶液的制备。
精密称取莫诺苷、马钱苷、栀子苷、芒果苷、新芒果苷、芍药苷、丹皮酚、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯乙、五味子甲素、五味子乙素、柴胡皂苷A、柴胡皂苷B1混合对照品，加甲醇溶解，作为混合对照品溶液。
取十味安神颗粒研细，取约1.0g，精密称定，加入80%甲醇25 ml，超声提取30min，放冷，滤过，取续滤液，得供试品溶液。
2.3指纹图谱的建立。
将上述对照品溶液和供试品溶液分别注入HPLC色谱系统，测定10个批号十味安神颗粒HPLC指纹图谱，并进行分析比较，得到由其共有特征峰构成的十味安神颗粒HPLC标准指纹图谱。混合对照品溶液的图谱如图1所示，十味安神颗粒HPLC标准指纹图谱如图2所示，其中以15号五味子醇甲峰为参照峰，计算得出该标准指纹图谱具有的共有峰的相对保留时间tR分别为： 0.261 ，0.294 ，0.564 ，0.578 ，0.602 ，0.659 ，0.727 ，0.764 ，0.773 ，0.890 ，0.943 ，0.950 ，0.966 ，0.970，1.013 ，1.020 ，1.025 ，1.044 ，1.058 ，1.095 ，1.127 ，1.134 ，1.138。
其中，莫诺苷（1号峰）、新芒果苷（2号峰）、栀子苷（3号峰）、芒果苷（4号峰）、马钱苷（5号峰）、芍药苷（6号峰）、丹皮酚（11号峰）、柴胡皂苷a（12号峰）、柴胡皂苷B1（14号峰）、五味子醇甲（15号峰）、五味子醇乙（18号峰）、五味子酯乙（21号峰）、五味子甲素（22号峰）、五味子乙素（24号峰）。
将10个批号十味安神颗粒HPLC指纹图谱导入药典委员会推荐的《中药色谱指纹图谱相似度评价系统2012版》软件分析，进行色谱峰匹配，确定24个共有峰为构成十味安神颗粒指纹图谱的特征峰，以15号五味子醇甲色谱峰为参照峰，样品共有峰的相对保留时间分别列于表2，10批十味安神颗粒共有峰的相对峰面积见表3。10批十味安神颗粒与标准指纹图谱相似度计算结果依次为1.000，0.999，1.000，1.000，1.000，1.000，1.000，1.000，1.000，1.000。10批十味安神颗粒的HPLC指纹图谱叠加图如图3所示。
表2 10批十味安神颗粒共有峰的相对保留时间(tR)。
| 序号 | S1 | S2 | S3 | S4 | S5 | S6 | S7 | S8 | S9 | S10 |
| 1 | 0.260 | 0.261 | 0.261 | 0.262 | 0.262 | 0.263 | 0.260 | 0.262 | 0.262 | 0.262 |
| 2 | 0.290 | 0.291 | 0.293 | 0.295 | 0.296 | 0.298 | 0.287 | 0.295 | 0.297 | 0.297 |
| 3 | 0.563 | 0.563 | 0.563 | 0.564 | 0.565 | 0.565 | 0.563 | 0.564 | 0.565 | 0.565 |
| 4 | 0.576 | 0.576 | 0.577 | 0.578 | 0.579 | 0.579 | 0.576 | 0.578 | 0.579 | 0.579 |
| 5 | 0.601 | 0.601 | 0.601 | 0.602 | 0.602 | 0.602 | 0.601 | 0.602 | 0.602 | 0.602 |
| 6 | 0.658 | 0.658 | 0.659 | 0.659 | 0.659 | 0.659 | 0.658 | 0.659 | 0.659 | 0.659 |
| 7 | 0.726 | 0.727 | 0.727 | 0.727 | 0.728 | 0.728 | 0.727 | 0.728 | 0.728 | 0.728 |
| 8 | 0.763 | 0.763 | 0.763 | 0.764 | 0.764 | 0.764 | 0.763 | 0.764 | 0.764 | 0.764 |
| 9 | 0.772 | 0.772 | 0.772 | 0.773 | 0.773 | 0.773 | 0.772 | 0.773 | 0.773 | 0.773 |
| 10 | 0.890 | 0.890 | 0.890 | 0.890 | 0.890 | 0.890 | 0.890 | 0.890 | 0.890 | 0.890 |
| 11 | 0.943 | 0.943 | 0.943 | 0.943 | 0.943 | 0.943 | 0.943 | 0.944 | 0.944 | 0.944 |
| 12 | 0.951 | 0.951 | 0.951 | 0.950 | 0.950 | 0.950 | 0.950 | 0.950 | 0.950 | 0.950 |
| 13 | 0.966 | 0.966 | 0.966 | 0.966 | 0.966 | 0.966 | 0.966 | 0.966 | 0.966 | 0.966 |
| 14 | 0.970 | 0.970 | 0.970 | 0.970 | 0.970 | 0.970 | 0.970 | 0.969 | 0.969 | 0.970 |
| 15 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 |
| 16 | 1.012 | 1.012 | 1.012 | 1.013 | 1.013 | 1.013 | 1.013 | 1.013 | 1.013 | 1.013 |
| 17 | 1.019 | 1.019 | 1.019 | 1.020 | 1.020 | 1.020 | 1.020 | 1.020 | 1.020 | 1.020 |
| 18 | 1.025 | 1.025 | 1.025 | 1.025 | 1.025 | 1.025 | 1.025 | 1.025 | 1.025 | 1.025 |
| 19 | 1.044 | 1.044 | 1.044 | 1.044 | 1.044 | 1.044 | 1.044 | 1.044 | 1.044 | 1.044 |
| 20 | 1.058 | 1.058 | 1.058 | 1.058 | 1.058 | 1.058 | 1.058 | 1.058 | 1.058 | 1.058 |
| 21 | 1.094 | 1.094 | 1.095 | 1.095 | 1.095 | 1.095 | 1.095 | 1.095 | 1.095 | 1.095 |
| 22 | 1.127 | 1.127 | 1.127 | 1.128 | 1.128 | 1.128 | 1.128 | 1.128 | 1.128 | 1.128 |
| 23 | 1.134 | 1.134 | 1.134 | 1.134 | 1.134 | 1.134 | 1.134 | 1.135 | 1.135 | 1.135 |
| 24 | 1.137 | 1.137 | 1.138 | 1.138 | 1.138 | 1.138 | 1.138 | 1.138 | 1.138 | 1.138 |
表3 10批十味安神颗粒共有峰的相对峰面积(％)。
| 序号 | S1 | S2 | S3 | S4 | S5 | S6 | S7 | S8 | S9 | S10 |
| 1 | 0.260 | 0.261 | 0.261 | 0.262 | 0.262 | 0.263 | 0.260 | 0.262 | 0.262 | 0.262 |
| 2 | 0.290 | 0.291 | 0.293 | 0.295 | 0.296 | 0.298 | 0.287 | 0.295 | 0.297 | 0.297 |
| 3 | 0.563 | 0.563 | 0.563 | 0.564 | 0.565 | 0.565 | 0.563 | 0.564 | 0.565 | 0.565 |
| 4 | 0.576 | 0.576 | 0.577 | 0.578 | 0.579 | 0.579 | 0.576 | 0.578 | 0.579 | 0.579 |
| 5 | 0.601 | 0.601 | 0.601 | 0.602 | 0.602 | 0.602 | 0.601 | 0.602 | 0.602 | 0.602 |
| 6 | 0.658 | 0.658 | 0.659 | 0.659 | 0.659 | 0.659 | 0.658 | 0.659 | 0.659 | 0.659 |
| 7 | 0.726 | 0.727 | 0.727 | 0.727 | 0.728 | 0.728 | 0.727 | 0.728 | 0.728 | 0.728 |
| 8 | 0.763 | 0.763 | 0.763 | 0.764 | 0.764 | 0.764 | 0.763 | 0.764 | 0.764 | 0.764 |
| 9 | 0.772 | 0.772 | 0.772 | 0.773 | 0.773 | 0.773 | 0.772 | 0.773 | 0.773 | 0.773 |
| 10 | 0.890 | 0.890 | 0.890 | 0.890 | 0.890 | 0.890 | 0.890 | 0.890 | 0.890 | 0.890 |
| 11 | 0.943 | 0.943 | 0.943 | 0.943 | 0.943 | 0.943 | 0.943 | 0.944 | 0.944 | 0.944 |
| 12 | 0.951 | 0.951 | 0.951 | 0.950 | 0.950 | 0.950 | 0.950 | 0.950 | 0.950 | 0.950 |
| 13 | 0.966 | 0.966 | 0.966 | 0.966 | 0.966 | 0.966 | 0.966 | 0.966 | 0.966 | 0.966 |
| 14 | 0.970 | 0.970 | 0.970 | 0.970 | 0.970 | 0.970 | 0.970 | 0.969 | 0.969 | 0.970 |
| 15 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 |
| 16 | 1.012 | 1.012 | 1.012 | 1.013 | 1.013 | 1.013 | 1.013 | 1.013 | 1.013 | 1.013 |
| 17 | 1.019 | 1.019 | 1.019 | 1.020 | 1.020 | 1.020 | 1.020 | 1.020 | 1.020 | 1.020 |
| 18 | 1.025 | 1.025 | 1.025 | 1.025 | 1.025 | 1.025 | 1.025 | 1.025 | 1.025 | 1.025 |
| 19 | 1.044 | 1.044 | 1.044 | 1.044 | 1.044 | 1.044 | 1.044 | 1.044 | 1.044 | 1.044 |
| 20 | 1.058 | 1.058 | 1.058 | 1.058 | 1.058 | 1.058 | 1.058 | 1.058 | 1.058 | 1.058 |
| 21 | 1.094 | 1.094 | 1.095 | 1.095 | 1.095 | 1.095 | 1.095 | 1.095 | 1.095 | 1.095 |
| 22 | 1.127 | 1.127 | 1.127 | 1.128 | 1.128 | 1.128 | 1.128 | 1.128 | 1.128 | 1.128 |
| 23 | 1.134 | 1.134 | 1.134 | 1.134 | 1.134 | 1.134 | 1.134 | 1.135 | 1.135 | 1.135 |
| 24 | 1.137 | 1.137 | 1.138 | 1.138 | 1.138 | 1.138 | 1.138 | 1.138 | 1.138 | 1.138 |
2.4方法学考察。
2.4.1精密度试验。
取样品(20210301)，按照2.2项下方法制备供试品溶液，连续进样6次，以15号五味子醇甲峰为参照峰，计算出1-24号共有色谱峰相对保留时间的RSD<0.27％、相对峰面积的RSD<1.83％，同时用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统2012版》软件计算各色谱指纹图谱的相似度均大于0.99，表明仪器稳精密度良好。
2.4.2稳定性试验。
取样品(20210301)，按照2.2项下方法制备供试品溶液，分别在0，3，6，9，12，18，24h进样，以15号五味子醇甲峰为参照峰，计算出1-24号共有峰相对保留时间的RSD<0.73％，相对峰面积的RSD<2.86％，同时用相似度评价软件计算各色谱指纹图谱的相似度均大于0.99，表明供试品溶液在24小时内稳定。
2.4.3重现性试验。
取同一批号样品(20210301)，分别精密量取6份，按照2.2项下方法制备供试品溶液，分别进样，以15号五味子醇甲峰为参照峰，计算出1-24号共有峰相对保留时间的RSD<0.66％，相对峰面积的RSD<1.92％，同时用相似度评价软件计算各色谱指纹图谱的相似度均大于0.99，表明方法重现性良好。
实施例2十味安神颗粒HPLC标准指纹图谱的建立。
1仪器与试药。
1.1仪器。
Thermo Scientific Vanquish Core HPLC戴安高效液相色谱仪（德国），DAD检测器；KQ5200B型超声波清洗器（昆山市超声仪器厂）；天平 ESJ30-5A（上海精密仪器仪表有限公司）。
1.2试药。
10批十味安神颗粒，样品批号见表1，乙腈为色谱纯，水为纯化水，其余试剂均为分析纯。
2方法与结果。
2.1色谱条件：色谱条件Waters Symmetry C18 Column色谱柱(5 μm, 4.6×250mm)，柱温35 ℃，流速1.0 ml/min，检测波长为240nm，进样10µl；流动相：以乙腈为流动相A，以0.1％磷酸溶液为流动相B。
按下表进行梯度洗脱。
| 时间 | 流速（ml/min） | 流动相A（%） | 流动相B（%） |
| 0~15 | 1 | 7 | 93 |
| 15~15.1 | 1→0.5 | 7 | 93 |
| 15.1~20 | 0.5 | 7 | 93 |
| 20~22 | 0.5 | 7→10 | 93→90 |
| 22~40 | 0.5 | 10→14 | 90→86 |
| 40~40.1 | 0.5→1.0 | 14 | 86 |
| 40.1~50 | 1.0 | 14→22 | 86→78 |
| 50~52 | 1.0 | 22→30 | 78→70 |
| 52~70 | 1.0 | 30→70 | 70→30 |
| 70~71 | 1.0 | 70→90 | 30→10 |
| 71~80 | 1.0 | 90 | 10 |
2.2对照品和供试品溶液的制备。
精密称取莫诺苷、马钱苷、栀子苷、芒果苷、新芒果苷、芍药苷、丹皮酚、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯乙、五味子甲素、五味子乙素、柴胡皂苷A、柴胡皂苷B1混合对照品，加80%甲醇溶解，作为混合对照品溶液。
取十味安神颗粒研细，取约1.0g，精密称定，加入50%甲醇25 ml，超声提取20min，放冷，滤过，取续滤液，得供试品溶液。
2.3指纹图谱的建立。
将上述对照品溶液和供试品溶液分别注入HPLC色谱系统，测定10个批号十味安神颗粒HPLC指纹图谱，并进行分析比较，得到由其共有特征峰构成的十味安神颗粒HPLC标准指纹图谱。混合对照品溶液的图谱如图1所示，十味安神颗粒HPLC标准指纹图谱如图2所示，其中以15号五味子醇甲峰为参照峰，计算得出该标准指纹图谱具有的共有峰的相对保留时间tR分别为： 0.261 ，0.294 ，0.564 ，0.578 ，0.602 ，0.659 ，0.727 ，0.764 ，0.773 ，0.890 ，0.943 ，0.950 ，0.966 ，0.970，1.013 ，1.020 ，1.025 ，1.044 ，1.058 ，1.095 ，1.127 ，1.134 ，1.138。
实施例3十味安神颗粒HPLC标准指纹图谱的建立。
1仪器与试药。
1.1仪器。
Thermo Scientific Vanquish Core HPLC戴安高效液相色谱仪（德国），DAD检测器；KQ5200B型超声波清洗器（昆山市超声仪器厂）；天平 ESJ30-5A（上海精密仪器仪表有限公司）。
1.2试药。
10批十味安神颗粒，样品批号见表1，乙腈为色谱纯，水为纯化水，其余试剂均为分析纯。
2方法与结果。
2.1色谱条件：色谱条件Waters Symmetry C18 Column色谱柱(5 μm, 4.6×250mm)，柱温35 ℃，流速1.0 ml/min，检测波长为240nm，进样10µl；流动相：以乙腈为流动相A，以0.1％磷酸溶液为流动相B。
按下表进行梯度洗脱。
| 时间 | 流速（ml/min） | 流动相A（%） | 流动相B（%） |
| 0~15 | 1 | 7 | 93 |
| 15~15.1 | 1→0.5 | 7 | 93 |
| 15.1~20 | 0.5 | 7 | 93 |
| 20~22 | 0.5 | 7→10 | 93→90 |
| 22~40 | 0.5 | 10→14 | 90→86 |
| 40~40.1 | 0.5→1.0 | 14 | 86 |
| 40.1~50 | 1.0 | 14→22 | 86→78 |
| 50~52 | 1.0 | 22→30 | 78→70 |
| 52~70 | 1.0 | 30→70 | 70→30 |
| 70~71 | 1.0 | 70→90 | 30→10 |
| 71~80 | 1.0 | 90 | 10 |
2.2对照品和供试品溶液的制备。
精密称取莫诺苷、马钱苷、栀子苷、芒果苷、新芒果苷、芍药苷、丹皮酚、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯乙、五味子甲素、五味子乙素、柴胡皂苷A、柴胡皂苷B1混合对照品，加80%甲醇溶解，作为混合对照品溶液。
取十味安神颗粒研细，取约1.0g，精密称定，加入甲醇25 ml，超声提取10min，放冷，滤过，取续滤液，得供试品溶液。
2.3指纹图谱的建立。
将上述对照品溶液和供试品溶液分别注入HPLC色谱系统，测定10个批号十味安神颗粒HPLC指纹图谱，并进行分析比较，得到由其共有特征峰构成的十味安神颗粒HPLC标准指纹图谱。混合对照品溶液的图谱如图1所示，十味安神颗粒HPLC标准指纹图谱如图2所示，其中以15号五味子醇甲峰为参照峰，计算得出该标准指纹图谱具有的共有峰的相对保留时间tR分别为： 0.266 ，0.304 ，0.566 ，0.581 ，0.603 ，0.660 ，0.729 ，0.764 ，0.774 ，0.890 ，0.944 ，0.950 ，0.966 ，0.970，1.013 ，1.020 ，1.025 ，1.044 ，1.058 ，1.095 ，1.127 ，1.134 ，1.138。
Claims (7)
1.一种十味安神颗粒HPLC指纹图谱的建立方法，其特征在于，包括下列步骤：
1）对照品和供试品溶液的制备：称取莫诺苷、马钱苷、栀子苷、芒果苷、新芒果苷、芍药苷、丹皮酚、五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯乙、五味子甲素、五味子乙素、柴胡皂苷A、柴胡皂苷B1对照品适量，用甲醇溶解，作为对照品溶液；
取十味安神颗粒研细，精密称定，加入50%~100%甲醇25~100ml，超声提取10~30min，放冷，滤过，取续滤液，即得；
2）HPLC色谱条件的确定：十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，规格为4.6×250mm，5μm，以乙腈为流动相A，0.1~0.3%磷酸溶液为流动相B，采用梯度洗脱；检测波长：220~260nm；流速：0.5~1.0ml/min；柱温：30~40℃；梯度洗脱条件为：t0~15,1ml/min,7%A;t15~15.1,1.0→0.5ml/min,7%A;t15.1~20,0.5ml/min,7%A;t20~22,0.5ml/min,7%→10%A;t22~40,0.5ml/min,10%→14%A;t40~40.1,0.5→1.0ml/min,14%A;t40.1~50,1.0ml/min,14%→22%A;t50~52,1.0ml/min,22%→30%A;t52~70,1.0ml/min,30%→70%A;t70~71,1.0ml/min,70%→90%A;t71~80,1.0ml/min,90%A；
3）指纹图谱的制作：按步骤2）色谱条件对对照品溶液和供试品溶液进行分析比较，得到由样品共有特征峰构成的十味安神颗粒HPLC标准指纹图谱。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1）所述供试品溶液，按如下步骤制备：取十味安神颗粒研细，取约1.0g，精密称定，加入80%甲醇25 ml，超声提取30min，放冷，滤过，取续滤液，得供试品溶液。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2）所述的色谱柱为Waters SymmetryC18 Column色谱柱。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2）所述流动相B为0.1%磷酸溶液。
5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)所述的检测波长为240nm，流速为0.5~1.0ml/min，柱温为35℃。
6.如权利要求1-5中任一项所述的方法，其特征在于，指纹图谱包括24个共有峰，以五味子醇甲为参比峰，各共有峰保留时间与参比峰保留时间比值分别为：0.261，0.294，0.564，0.578，0.602，0.659，0.727，0.764，0.773，0.890，0.943，0.950，0.966，0.970，1.013，1.020，1.025，1.044，1.058，1.095，1.127，1.134，1.138。
7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，指纹图谱包括24个共有峰，分别为1号峰为莫诺苷、2号峰为新芒果苷、3号峰为栀子苷、4号峰为芒果苷、5号峰为马钱苷、6号峰为芍药苷、11号峰为丹皮酚、12号峰为柴胡皂苷a、14号峰为柴胡皂苷B1、15号峰为五味子醇甲、18号峰为五味子醇乙、21号峰为五味子酯乙、22号峰为五味子甲素、24号峰为五味子乙素。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210578639.2A CN114910590B (zh) | 2022-05-26 | 2022-05-26 | 一种十味安神颗粒hplc指纹图谱的建立方法及其指纹图谱 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210578639.2A CN114910590B (zh) | 2022-05-26 | 2022-05-26 | 一种十味安神颗粒hplc指纹图谱的建立方法及其指纹图谱 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN114910590A CN114910590A (zh) | 2022-08-16 |
| CN114910590B true CN114910590B (zh) | 2023-10-27 |
Family
ID=82768073
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202210578639.2A Active CN114910590B (zh) | 2022-05-26 | 2022-05-26 | 一种十味安神颗粒hplc指纹图谱的建立方法及其指纹图谱 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN114910590B (zh) |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106442834A (zh) * | 2016-08-31 | 2017-02-22 | 吉林修正药业新药开发有限公司 | 一种益肾安神药物hplc特征图谱的构建方法 |
| CN112057542A (zh) * | 2020-08-24 | 2020-12-11 | 河北平安健康集团股份有限公司 | 一种治疗失眠、焦虑、抑郁和更年期综合征的中药组合物及其制备方法 |
-
2022
- 2022-05-26 CN CN202210578639.2A patent/CN114910590B/zh active Active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106442834A (zh) * | 2016-08-31 | 2017-02-22 | 吉林修正药业新药开发有限公司 | 一种益肾安神药物hplc特征图谱的构建方法 |
| CN112057542A (zh) * | 2020-08-24 | 2020-12-11 | 河北平安健康集团股份有限公司 | 一种治疗失眠、焦虑、抑郁和更年期综合征的中药组合物及其制备方法 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| 五味子配方颗粒的HPLC指纹图谱研究;胥爱丽;董玉娟;;中国实验方剂学杂志(第02期);第81-84页 * |
| 再生胶囊的质量标准研究;黄怀鹏;史桥;申丽娟;陈娟;高国岭;李艳玲;;中成药(第10期);第15-17页 * |
| 枣仁安神颗粒指纹图谱的相关性研究;张颖;张起辉;王光函;陈晓辉;康廷国;毕开顺;;沈阳药科大学学报(第10期);第825-828页 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN114910590A (zh) | 2022-08-16 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN111337589B (zh) | 桔贝合剂hplc指纹图谱的建立方法 | |
| CN111830160B (zh) | 一种杞菊地黄丸指纹图谱的检测方法及其应用 | |
| CN112444579B (zh) | 柴银口服液uplc指纹图谱的建立方法 | |
| CN105675750A (zh) | 一种中成药“益肾补骨液” hplc特征图谱的构建方法 | |
| CN111487347B (zh) | 枳术颗粒指纹图谱的检测方法 | |
| CN107402265B (zh) | 康媛颗粒指纹图谱的检测方法 | |
| CN110031564B (zh) | 基于hplc指纹图谱的天然植物抗球虫饲料添加剂的质量检测方法 | |
| CN107643343B (zh) | 一种玉女煎标准汤的hplc指纹图谱测定方法 | |
| CN105699506A (zh) | 一种中成药“二丁颗粒”hplc指纹图谱的构建方法 | |
| CN114910590B (zh) | 一种十味安神颗粒hplc指纹图谱的建立方法及其指纹图谱 | |
| CN110274970A (zh) | 融差指纹图谱的建立方法及其在益血生胶囊质控中的应用 | |
| CN109856262B (zh) | 一种可同时用于二丁制剂主要成分定性与定量分析的方法 | |
| CN113917009A (zh) | 北柴胡非皂苷类成分hplc指纹图谱的构建方法及应用 | |
| CN110632198B (zh) | 一种消炎止咳片的hplc指纹图谱及其构建方法和应用 | |
| CN110031577B (zh) | 一种中药或中药组合物制剂的质量检测方法与鉴别应用 | |
| CN113341007A (zh) | 一种基于hplc特征图谱的枣仁安神胶囊全药味多成分含量测定方法 | |
| CN113917064A (zh) | 清热解毒口服液hplc指纹图谱的建立方法及其指纹图谱 | |
| CN113640432A (zh) | 一种壮腰健身丸的质量评价方法 | |
| CN117347532B (zh) | 归知糖疽颗粒制剂的hplc特征图谱的检测方法 | |
| CN110940748A (zh) | 一种小儿金青颗粒的hplc指纹图谱检测方法 | |
| CN115097042B (zh) | 阳春口服液hplc指纹图谱的建立方法 | |
| CN113588825B (zh) | 一种白芍道地药材指纹图谱的快速鉴别方法 | |
| CN110068640B (zh) | 基于hplc指纹图谱的蒙药紫檀香心药材质量检测方法 | |
| CN110286183B (zh) | 一种止得咳颗粒hplc指纹图谱及其质量分析方法 | |
| CN113391002B (zh) | 心通颗粒uplc指纹图谱的建立方法及其应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |