CN114908011B - 一种香肠乳杆菌及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种香肠乳杆菌及其应用，本发明提供的香肠乳杆菌在酸性pH＝3.0条件下表现出较好的耐受性，在高温45℃及高盐(10％NaCl)环境中有较强的适应性，具有抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌等有害菌的生长，且具有高产阿魏酸酯酶的能力，能显著降低稻秸青贮饲料pH,显著增加乳酸含量，显著减少氨态氮含量，显著增加干物质、WSC含量，显著降低NDF、ADF、纤维素含量，提高稻秸青贮饲料的发酵品质，可广泛应用于稻秸发酵饲料制备领域。
Description
技术领域
本发明属于乳杆菌技术领域，具体涉及一种香肠乳杆菌及其应用。
背景技术
我国是草食家畜生产大国，优质青贮饲料的均衡供给已经成为制约肉羊产业良性发展的瓶颈。因此，充分利用和开发农区潜在的庞大非常规饲料资源成为当务之急。秸秆综合治理已成为头等大事，秸秆禁烧、禁抛与综合利用成为生态文明建设和资源高效利用的重中之重。在当前我国畜牧业发展面临粗饲料资源紧缺的情况下，合理有效地开发利用秸秆成为畜牧业发展的方向。
稻秸中细胞壁成分占80％以上，细胞壁中存在特殊结构(纤维素层次结构和凝聚态结构)限制了秸秆在动物体内的消化利用，同时，由于稻秸质地坚硬粗糙、粗蛋白质含量低，半纤维素和纤维素被木质素包裹，使稻秸适口性差、难以被最大限度的利用。发酵不仅能够促进稻秸中粗纤维转化为糖类物质，提高营养价值，还能改善其适口性。但由于稻秸茎叶上自然附着乳酸菌少，可溶性碳水化合物(WSC)含量很低，单独青贮很难制成优质的青贮饲料。实际生产中由于受管理条件和天气影响，青贮饲料二次发酵霉变在所难免，霉变的青贮饲料不仅造成饲料营养的损失，而且可引起家畜产奶量下降、下痢、流产、乳房炎等问题，影响家畜的生产性能。所以筛选出优良的乳酸菌菌剂至关重要。
发明内容
本部分的目的在于概述本发明的实施例的一些方面以及简要介绍一些较佳实施例。在本部分以及本申请的说明书摘要和发明名称中可能会做些简化或省略以避免使本部分、说明书摘要和发明名称的目的模糊，而这种简化或省略不能用于限制本发明的范围。
作为本发明其中一个方面，本发明提供一种香肠乳杆菌，其特征在于：所述香肠乳杆菌保藏编号为CCTCC NO：M 2022416。
作为本发明的另一个方面，本发明提供所述的香肠乳杆菌作为植物饲料添加剂的应用。
作为本发明所述的应用的一种优选方案：所述香肠乳杆菌用于植物饲料青贮。
作为本发明所述的应用的一种优选方案：所述香肠乳杆菌能够高产阿魏酸酯酶。
作为本发明所述的应用的一种优选方案：所述香肠乳杆菌提高植物饲料中乳酸含量，降低植物饲料中乙酸含量，降低氨态氮含量。
作为本发明所述的应用的一种优选方案：所述香肠乳杆菌抑制青贮中好氧细菌和酵母菌产生。
作为本发明所述的应用的一种优选方案：所述香肠乳杆菌显著增加干物质、WSC含量，显著降低NDF、ADF、纤维素含量。
作为本发明所述的应用的一种优选方案：所述植物饲料包括稻秸。
作为本发明的另一个方面，本发明提供所述的香肠乳杆菌在制备抑菌制剂中的应用。
所述香肠乳杆菌抑制大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌。
本发明的有益效果：本发明提供的香肠乳杆菌在酸性pH＝3.0条件下表现出较好的耐受性，在高温45℃及高盐(10％NaCl)环境中有较强的适应性，具有抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌等有害菌的生长，且具有高产阿魏酸酯酶的能力，能显著降低稻秸青贮饲料pH,显著增加乳酸含量，显著减少氨态氮含量，显著增加干物质、WSC含量，显著降低NDF、ADF、纤维素含量，提高稻秸青贮饲料的发酵品质，可广泛应用于稻秸发酵饲料制备领域。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其它的附图。其中：
图1为FA标准曲线。
图2为产阿魏酸酯酶菌株的透明圈筛选。
图3为形态学鉴定图。
图4为菌株的生长曲线图。
具体实施方式
为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合具体实施例对本发明的具体实施方式做详细的说明。
在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明，但是本发明还可以采用其他不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似推广，因此本发明不受下面公开的具体实施例的限制。
其次，此处所称的“一个实施例”或“实施例”是指可包含于本发明至少一个实现方式中的特定特征、结构或特性。在本说明书中不同地方出现的“在一个实施例中”并非均指同一个实施例，也不是单独的或选择性的与其他实施例互相排斥的实施例。
实施例1：
香肠乳杆菌的分离和鉴定：
方法：
样品处理：
选择健壮的湖羊，使用瘤胃导管从胃部预留孔中采集胃液，置于无菌保温瓶中，并迅速带回实验室，在超净工作台上，采用无菌纱布过滤，进而梯度稀释。
菌种保藏信息：
保藏单位：中国典型培养物保藏中心(CCTCC)；
保藏地址：中国.武汉.武汉大学；
分类命名：Lactobacillus farciminis SR2；
保藏编号：CCTCC No：M 2022416
保藏时间：2022年04月14日
产阿魏酸酯酶菌株的初筛：选择三个合适梯度，各取100uL稀释液按三点法加到MRS培养基平板上，均匀涂布后，置于37℃培养箱中倒置厌氧培养48h。挑选形态各异的菌落继续在MRS培养基上反复划线，直至得到纯化的单菌落，用无菌牙签挑取单菌落点接在筛选培养基上，30℃培养12-72h，观察是否在平板上出现明显的透明圈。若出现透明圈，可初步认为该菌株具有产FAE能力。此外，将初筛菌株继续进行革兰氏染色和H2O2酶试验，观察该菌株镜检结果是否为紫色单细胞以及H2O2酶反应是否为阴性，若符合以上特征，可判定其为乳酸菌。
产阿魏酸酯酶菌株的复筛：
(1)FA标准曲线的制定：取6个100mL容量瓶，从1-5编号，参照表1加入试剂，每组做3个平行。
表1FA标准曲线制定
按上述步骤混匀后，经0.22um滤膜，进行高效液相色谱(HPLC)测定，测得数值绘制阿魏酸标准曲线，见图1。
由结果可知FA的函数方程为y＝58.225x-392.6，FA浓度(50～200ug/mL)与峰面积的相关系数为R2＝0.9980，具有良好的线性关系，可用于后续菌株FAE酶活力的测定。
(2)发酵液的准备：将初筛产FAE的乳酸菌移接到MRS液体培养基中，37℃培养过夜后，90％无菌生理盐水洗涤2-3次，菌体重置于去离子水。按5％接种量移接菌悬液于新鲜的产酶液体培养基中发酵，37℃培养48h，测定初筛乳酸菌的FAE活力，为进一步筛选作参考。待测液8000-12000rpm/min离心5min，取得上清发酵液。
(3)酶活测定：取2支试管，参照表2，加入试剂，每组做3个平行。
表2FAE的活力测定表
上述步骤完成后，沸水浴10min，8000-12000rpm/min离心5min，取上清过滤膜，进行HPLC测定。根据标准曲线计算阿魏酸的浓度，以每1min内分解FAE，产生1umolFA需要的酶量定义成1个酶活单位(U)，计算公式：
酶活(mU/mL)＝反应液中阿魏酸的含量(ug)/阿魏酸摩尔质量×反应时间(min)
(4)HPLC色谱条件：
C18色谱柱：Synergi Hydro-RP80(250×4.6mm 4um)
流动相：A-甲醇；B-1％冰乙酸(28:72)
流速：0.6mL/min
柱温：40℃
检测波长：UV320nm
进样量：10uL
高产阿魏酸酯酶菌株的鉴定：
形态学鉴定
取一环产FAE乳酸菌在MRS培养基上划线，37℃下倒置，厌氧培养48h，观察菌落的形状、颜色、大小及边缘等特征，同时，取单菌落，使用革兰氏染色试剂盒(北京索莱宝科技有限公司)进行染色，镜检菌体形态。
生长曲线测定：
取一环乳酸菌接种至MRS液体培养基中，37℃培养，培养48h；再取菌悬液分别接种(按5％接种量)至液体培养基中，37℃培养，培养0～24h，每间隔两小时取一管测定其OD600nm值和pH值，绘制菌株生长曲线。
生长特性鉴定：
耐酸试验：
取一环乳酸菌接种至MRS液体培养基中，37℃培养，培养48h；再取菌悬液分别接种(按5％接种量)至不同pH(3.5、4、4.5、5、5.5、6、6.5)的MRS液体培养基中，37℃培养，培养48h，目测菌株生长情况。
耐温试验：
取一环乳酸菌接种至MRS液体培养基中，37℃培养，培养48h；再取菌悬液分别接种(按5％接种量)至MRS液体培养基中，分别在不同温度(5℃、25℃、30℃、37℃、45℃)培养，其中，5℃与15℃下培养120h，25℃与35℃下培养48h，45℃下培养96h。
菌株耐盐试验：
取一环乳酸菌接种至MRS液体培养基中，37℃培养，培养48h；再取菌悬液分别接种(按5％接种量)至含3％、6.5％、10％、15％盐浓度的MRS液体培养基中，37℃培养，培养48h，目测菌株生长情况。
生化鉴定：
分别挑取乳酸菌的单菌落进行生化检测，使用购买于杭州天和的细菌生化鉴定管进行测定，按反应管试剂盒中说明书方法操作，之后培养2～3d不等，记录菌株反应情况，并结合《乳酸细菌分类鉴定及实验方法》推测菌株大致所属类型。
16SrDNA法鉴定：
16SrDNA序列鉴定由南京擎科生物公司完成。
抑菌试验：
将冷冻保存的SR2菌株接种于MRS培养基中，在温度37℃下培养24h，如此传代培养2次得到活化的SR2菌株，活化后的菌株按3％的接种量重新转接MRS液体培养基中，培养24小时，菌液离心得上清液。细菌(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌)为指示菌，以营养琼脂培养基作为指示细菌的培养基，并进行菌种活化，用生理盐水分别讲指示菌液稀释到OD600吸光度为0.1。向培养皿中倾注10ml高压灭菌过的水琼脂进行铺底，凝固后将灭菌的牛津杯置于琼脂纸上，吸取1ml指示菌菌液加入到100ml恒温至50±5℃的营养肉汤培养基中，摇匀，倒入到放有牛津杯的凝固的琼脂培养基中，每个培养皿倒20ml，冷却凝固。用镊子取出牛津杯，吸取200uL的SR2菌液上清液注入到孔内，以MRS培养液为空白对照，放入4℃冰箱内放置2h，再将培养皿放入37℃培养箱培养，18h观察SR2菌株对指示细菌的抑菌效果。
实验结果：
产阿魏酸酯酶菌株的筛选结果：
本试验将湖羊瘤胃液处理后稀释涂布于MRS培养基中，经分离纯化获得156株乳酸菌，将156株乳酸菌分别点接在以阿魏酸乙酯为唯一碳源的筛选平板上，培养12h后发现，仅有2株编号为SR1和SR2的菌株产生较大的透明圈，可初步判断菌株SR1、SR2能利用碳源阿魏酸乙酯，可能具有FAE活力，其中SR1、SR2的透明圈直径分别为8mm、12mm，与菌株SR1相比，菌株SR2的直径更大，表明该菌株降解阿魏酸乙酯性能更好，透明圈结果如图2所示。
此外，依据透明圈的初筛结果，将菌株SR1、SR2的发酵液按2.3检测方法，通过高效液相色谱法发现菌株SR1、SR2都具有阿魏酸酯酶(FAE)活性，且菌株SR2的酶活力高于SR1，为10.36mU/mL，结果见表3。菌株SR42产阿魏酸酯酶的活性高，其中植物乳杆菌、乳酸片球菌、短乳杆菌产阿魏酸酯酶的酶活分别为8.34、5.12、7.56mU/mL。
表3菌株的透明圈大小及其酶活测定
图2的a为乳酸菌的稀释涂布图；图2的b为产阿魏酸酯酶菌株在平板上产生的透明圈。
形态学鉴定:将菌种SR1、SR2分别划线接种于含琼脂的MRS培养基上，37℃厌氧培养，培养48h后，菌落特征见图3a、图3b，结果显示，菌株SR1在平板上形成乳白色、圆形、边缘规则、中心凸起且表面有光泽的菌落，菌株SR2为中心稍凸起的乳白色菌落，但其边缘不整齐，表面湿润呈扁平状。培养48h后涂片染色结果见图3c、图3d，结果显示，SR1、SR2镜检均为G+短杆菌。
图3a，SR1菌落特征；b，SR2菌落特征；c，SR1镜检形态(100×)；d，SR2镜检形态(100×)。
菌株的生长曲线：
由图4的a可知，随着菌株SR1的生长，培养液pH值逐渐下降，可能是由于菌株SR1在生长过程中产生了乳酸等代谢物质。培养基中乳酸的积累量与菌体SR1的培养时间有关，培养时间越久，产生的乳酸越多，从而导致培养液的pH不断下降，干扰了菌株的生长代谢。从OD值结果来看0～2h，菌株SR1生长缓慢，处在停滞期；2～16h菌株SR1步入生长对数期，生长速率最快；16h后步入平缓期，生长逐渐稳定；24h后，菌株SR1的最终pH为3.94。
由图4的b可知，菌株SR2在生长过程中利用糖产生乳酸，使得培养液酸度不断提高，导致菌体受损，生长受抑制。从OD值与pH来看，菌株SR2在2h后繁殖速度加快，步入对数生长期，同时产酸能力也相应提高，pH值快速下降；18h后逐渐趋于稳定，pH值缓慢降低，24h后菌株SR2的最终pH为3.83。
菌株的生长特性：
表4菌株在不同条件下的生长情况
注：-，不生长；+，微弱生长；++，一般生长；+++，良好生长
由表4可知，在pH＝2.0条件下，2株菌均不能生长；在pH＝3.0时，SR1微弱生长，SR2一般生长；在pH值4.0～7.0时，2菌株都能良好的生长。2株菌在5℃条件下，不能生长；在25～37℃条件下，生长良好；而在45℃时，生长微弱。2株菌在含3％～10％NaCl的培养液中生长，而盐浓度达到15％时，2株菌都不生长。表明，菌株SR1能够在pH4.0～7.0、25～37℃、3％盐浓度的MRS培养液中良好生长；菌株SR2的耐酸能力比SR1高，能够在pH3.0～7.0、25～37℃、3％盐浓度的MRS培养液中很好生长。
菌株的生化反应试验：
表5菌株的生化反应情况
注：+，阳性；-，阴性。
由表5可知，SR1、SR2与乳糖、蔗糖、麦芽糖、葡萄糖等的生化管反应均显示黄色，为阳性，硝酸盐还原试验、接触酶试验均为阴性，SR1发生葡萄糖产气，SR2发生精氨酸产氨现象；SR1与阿拉伯糖、核糖、甘露醇、山梨醇的生化管反应为阴性，而SR2为阴性。以上结果与胡博、章德法等人对鼠李糖乳杆菌及香肠乳杆菌的理化试验鉴定结果基本一致，同时结合凌代文的《乳酸细菌分类鉴定及实验方法》，可初步判断SR1为鼠李糖乳杆菌、SR2为香肠乳杆菌。
16SrDNA法鉴定结果：将供试样品的基因组DNA作模板，通过引物对模板进行PCR扩增，得到PCR产物，取产物5ul进行凝胶电泳验证，获得与预期相符大约在1.5kbp处的目的片段。将合格PCR产物送至南京擎科公司测序，SR、SR2的序列长度分别为1408bp、1478bp，通过DNAStar SeqMan软件对SR、SR2的原始序列进行校正、拼接，获得有效序列，提交至NCBI，并采用BLAST软件比对分析，结果显示，SR1与Lactobacillus rhamnosus的同源性为98.78％，SR2与Lactobacillus farciminis的相似度为99.73％，符合预期结果。综合菌株SR1、SR2的形态学、理化特征及16SrDNA信息结果，将从湖羊瘤胃液中分离出的具有阿魏酸酯酶活性的菌株SR1、SR2确定为鼠李糖乳杆菌、香肠乳杆菌。
SR2抑菌实验结果：
与其他细菌相比，香肠乳酸菌SR2的产阿魏酸酯酶的活力要高于乳酸片球菌(4.32mU/mL)、短乳杆菌(7.56mU/mL)。香肠乳杆菌SR2对酸度的耐受性更强。适合用于青贮的微生物发酵剂应持有一致的发酵途径，既可以利用糖提高产酸量，又需要具备一定的耐酸性，使青贮饲料的pH值尽快地降至4.0，从而阻碍有害微生物活动，改善饲料品质。菌株SR2在酸性(pH＝3.0)条件下均表现出较好的耐受性，且在高温(45℃)及高盐度(10％NaCl)环境中有较强的适应性，具有抑菌效果，且具有产阿魏酸酯酶的能力。
实施例2：
香肠乳杆菌SR2在稻秸饲料化利用中的应用效果：
材料与方法：
试验材料：
供试青贮料：于2021年10月，取自江苏省农业科学院粮食作物研究所试验基地收获的去穗粳稻秸秆。
供试菌株：鼠李糖乳杆菌SR1和香肠乳杆菌SR2。
菌剂制取：将鼠李糖乳杆菌SR1和香肠乳杆菌SR2活化后按5％接种量转移至MRS培养基，37℃培养至活菌数达108cfu/mL以上，于离心机中10000rpm离心2min去上清获得菌体，用无菌生理盐水将菌体稀释至108cfu/mL。
试验设计：
处理组设置：试验共设置鼠李糖乳杆菌SR1(R)、香肠乳杆菌SR2(F)、鼠李糖乳杆菌SR1和香肠乳杆菌SR2(RF)3种添加剂，同时设置无添加剂CK对照组，共4个处理，；各组添加量情况如下表所示。
表5试验设计
青贮调制：将稻秸切至2～3cm长，把活化好的SR1与和SR2菌株按5×105cfu/g稻秸的喷施量，用喷壶雾状喷撒于切断的稻秸中，其中，CK组喷洒等量的水。手套一次性熟料手套混匀，装入青贮袋，使用真空封口机抽气封口，每袋重300g。室温发酵60d后开袋取样进行品质检测。另取稻秸原料放置-20℃冰箱保存，已备后续检测。
样品测定：测定样品DM(干物质)、NDF(中性洗涤纤维)、ADF(酸性洗涤纤维)、CP(粗蛋白)、WSC(可溶性碳水化合物)、体外消化率(IVDMD)、pH值、有机酸(乳酸、乙酸、丙酸、丁酸)、氨态氮含量。
实验结果：
不同菌剂处理稻秸青贮饲料的发酵品质分析结果：
表6稻秸青贮60d后的发酵品质分析
注：同行标注不同小写字母表示不同菌株处理发酵后差异显著(P<0.05)。PA，丙酸；AA,丁酸。“---”表示未检测到。
由表6可知，稻秸青贮发酵60d后，与CK组相比，所有处理组的pH值均显著低于对照组(P<0.001),其中，F组处理的稻秸pH值最低(P<0.001)。
有机酸是影响饲料发酵品质的重要因素。与CK组相比，F组、RF组的LA(乳酸)含量显著高于CK组(P<0.001)，其中，F组的LA含量最高，显著高于RF组。添加香肠乳杆菌SR2(F组)处理后促进了乳酸的生成，F组与CK、R、RF三个处理组相比，乳酸含量分别增加了114.53％、97.57％、10.36％；香肠乳杆菌的添加对乙酸(AA)的影响较大，明显降低了F组和RF组的乙酸含量，提高了乳酸/乙酸值。
LA/AA(乳酸/乙酸)值反映了青贮中乳酸菌的同质发酵情况。除R组外，F组和RF组的LA/AA值比CK组增加了114.53％、94.39％，显著高于CK组，其中，F组的LA/AA值最高。
AN(氨态氮)含量反映了青贮料中蛋白质的分解程度，含量高低影响饲料的饲用价值，氨态氮以腐败微生物(如梭菌)降解青贮原样中的粗蛋白而产生，其含量越高，表明发酵效果越差。F组、RF组的AN含量分别比CK组减少了60.63％、49.84％。说明添加香肠乳杆菌SR2能有效减少腐败菌对稻秸原料中粗蛋白的降解，进而改善青贮稻秸的品质。
微生物数目也是评定饲料发酵品质的一项重要指标。F组和RF组的乳酸菌数显著高于CK组(P<0.001)；F组和RF组的好氧细菌数都显著低于CK组(P<0.001)，其中，F组的好氧细菌数最少；F组的酵母菌数显著低于其他处理组(P<0.001)，R组、RF组与CK组之间差异不大。
不同菌剂处理稻秸饲料青贮的营养品质分析结果：
表7稻秸青贮60d后的营养品质分析
/>
注：同行标注不同小写字母表示不同菌株处理发酵后差异显著(P<0.05)。
由表可知，除R组外，F组和RF组的DM(干物质)含量显著高于CK组(P<0.001),R组的DM含量与CK组无差异；F组的CP含量最高，显著高于CK和F组。
WSC含量反映饲料在发酵期间对糖的消耗。F组、RF组的WSC含量分别比CK组增加了42.67％、27.7％，且都显著高于CK组(P＝0.003)。
纤维高低直接影响动物的采食和消化性能。与CK组相比，F组的NDF含量显著低于CK组(P＝0.006)；F组的ADF含量最低，显著低于CK组与R组。F组的纤维素含量最低，显著低于CK组、R组；虽然各组间IVDMD含量差异不显著，但F组的IVDMD含量最高，与CK组相比，IVDMD提高2.25％。有研究发现，添加产阿魏酸乳酸菌苜蓿青贮试验中发现，接种产阿魏酸酯酶乳酸菌没有提高青贮苜蓿的发酵品质及纤维降解能力。而我们的研究发现添加产阿魏酸酯酶的香肠乳杆菌SR2(F组)稻秸饲料中NDF、ADF、纤维素含量降低，碳水化合物含量增加。
SR2序列：
GACGACGATGCTATAATGCAGTCGAACGAACCATCCTGAAGATTGAAGCTTGCTTCATGATTCAGATCTTGGTGAGTGGCGGACGGGTGAGTAACACGTGGGTAACCTGCCCAAAAGTGGGGGATAACATTTGGAAACAAGTGCTAATACCGCATAACAACTACTTTCACATGATCGTAGTTTGAAAGATGGCTCTGCTATCGCTTTTGGATGGACCCGCGGCGTATTAGCTAGTTGGTGAGGTAATAGCTCACCAAGGCAATGATACGTAGCCGACCTGAGAGGGTAATCGGCCACATTGGGACTGAGACACGGCCCAAACTCCTACGGGAGGCAGCAGTAGGGAATCTTCCACAATGGGCGAAAGCCTGATGGAGCAATGCCGCGTGAGTGAAGAAGGTTTTCGGATCGTAAAACTCTGTTGTTGAAGAAGAACATGCGTGAGAGTAACTGTTCACGTACTGACGGTATTCAACCAGAAAGCCACGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGTGGCAAGCGTTGTCCGGATTTATTGGGCGTAAAGAGAATGTAGGCGGTTTATTAAGTTTGAAGTGAAAGCCCTCGGCTCAACCGAGGAAGTGCTTCGAAAACTGGTAAACTTGAGTGCAGAAGAGGAAAGTGGAACTCCATGTGTAGCGGTGGAATGCGTAGATATATGGAAGAACACCAGTGGCGAAGGCGGCTTTCTGGTCTGTAACTGACGCTGAGATTCGAAAGCATGGGTAGCAAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCATGCCGTAAACGATGAGTGCTAAGTGTTGGAGGGTTTCCGCCCTTCAGTGCTGCAGCTAACGCATTAAGCACTCCGCCTGGGGAGTACGACCGCAAGGTTGAAACTCAAAGGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAGCATGTGGTTTAATTCGAAGCAACGCGAAGAACCTTACCAGGTCTTGACATACCATGACAAACTAAGAGATTAGTCTTTCCCTTCGGGGACATGGATACAGGTGGTGCATGGTTGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTTATTATCAGTTGCCAGCATTCAGTTGGGCACTCTGGTGAGACTGCCGGTGACAAACCGGAGGAAGGTGGGGACGACGTCAAATCATCATGCCCCTTATGACCTGGGCTACACACGTGCTACAATGGTCGGTACAACGTGTTGCGAACTCGCGAGGGCAAGCAAATCACTTAAAACCGATCTCAGTTCGGATTGCAGGCTGCAACTCGCCTGCATGAAGCTGGAATCGCTAGTAATCGCGGATCAGCATGCCGCGGTGAATACGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCACACCATGAGAGTTTGTAACACCCAAAGTCGGTGGGGTAACCCTTCGGGGAACTAGCCGCCTAAGGTGACAAAGTG
SR1序列：
CTCTCCTGTGACCTTAGGCGGCTGGCTCCAAAAAGGTTACCCCACCGACTTCGGGTGTTACAAACTCTCGTGGTGTGACGGGCGGTGTGTACAAGGCCCGGGAACGTATTCACCGCGGCATGCTGATCCGCGATTACTAGCGATTCCAGCTTCATGTAGGCGAGTTGCAGCCTACAATCCGAACTGAGAACGGTTTTATGAGATTAGCTCCACCTCGCGGTCTTGCAGCTCTTTGTACCGTCCATTGTAGCACGTGTGTAGCCCAGGTCATAAGGGGCATGATGATTTGACGTCATCCCCACCTTCCTCCGGTTTGTCACCGGCAGTCACCTTAGAGTGCCCAACTAAATGATGGCAACTAAGATCAAGGGTTGCGCTCGTTGCGGGACTTAACCCAACATCTCACGACACGAGCTGACGACAACCATGCACCACCTGTCACTCTGCTCCCGAAGGAGAAGCCCTATCTCTAGGGTTGTCAGAGGATGTCAAGACCTGGTAAGGTTCTTCGCGTTGCTTCGAATTAAACCACATGCTCCACCGCTTGTGCGGGCCCCCGTCAATTCCTTTGAGTTTCAGCCTTGCGGCCGTACTCCCCAGGCGGAGTGCTTAATGCGTTAACTTCAGCACTAAAGGGCGGAAACCCTCTAACACTTAGCACTCATCGTTTACGGCGTGGACTACCAGGGTATCTAATCCTGTTTGCTCCCCACGCTTTCGCGCCTCAGTGTCAGTTACAGACCAGAAAGTCGCCTTCGCCACTGGTGTTCCTCCATATCTCTACGCATTTCACCGCTACACATGGAATTCCACTTTCCTCTTCTGCACTCAAGTCTCCCAGTTTCCAATGACCCTCCACGGTTGAGCCGTGGGCTTTCACATCAGACTTAAGAAACCACCTGCGCGCGCTTTACGCCCAATAATTCCGGATAACGCTTGCCACCTACGTATTACCGCGGCTGCTGGCACGTAGTTAGCCGTGGCTTTCTGGTTAGGTACCGTCAAGGTGCCAGCTTATTCAACTAGCACTTGTTCTTCCCTAACAACAGAGTTTTACGACCCGAAAGCCTTCATCACTCACGCGGCGTTGCTCCGTCAGACTTTCGTCCATTGCGGAAGATTCCCTACTGCTGCCTCCCGTAGGAGTCTGGGCCGTGTCTCAGTCCCAGTGTGGCCGATCACCCTCTCAGGTCGGCTACGCATCGTTGCCTTGGTGAGCCGTTACCTCACCAACTAGCTAATGCGACGCGGGTCCATCCATAAGTGACAGCCGAAGCCGCCTTTCAATTTCGAACCATGCGGTTCAAAATGTTATCCGGTATTAGCCCCGGTTTCCCGGAGTTATCCCAGTCTTATGGGCAGGTTACCCACGTGTTACTCACCCGTCCGCCGCTAACTTCATAAGAGCAAGCTCTTAATCCATTCGCTCGACTGCAGTATAGCACCCGCACGTC
应说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的精神和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。
Claims (9)
1.一种香肠乳杆菌（Lactobacillus farciminis），其特征在于：所述香肠乳杆菌保藏编号为CCTCC NO：M 2022416。
2.权利要求1所述的香肠乳杆菌作为植物饲料添加剂的应用。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：所述香肠乳杆菌用于植物饲料青贮。
4.根据权利要求2或3所述的应用，其特征在于：所述香肠乳杆菌能够高产阿魏酸酯酶。
5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述香肠乳杆菌提高植物饲料中乳酸含量，降低植物饲料中乙酸含量，降低氨态氮含量。
6.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述香肠乳杆菌抑制青贮中好氧细菌和酵母菌产生。
7.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述香肠乳杆菌显著增加干物质、可溶性碳水化合物含量，显著降低中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维、纤维素含量。
8.根据权利要求2或3所述的应用，其特征在于：所述植物饲料包括稻秸。
9. 权利要求1所述的香肠乳杆菌在制备抑菌制剂中的应用，其特征在于：所述香肠乳杆菌抑制大肠杆菌（Escherichia coli）、沙门氏菌（salmonella）、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）。
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