CN114903176B - 一种低致敏性的多肽营养粉及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于食品技术领域，具体涉及一种低致敏性的多肽营养粉及其制备方法。本发明以胶原蛋白、大豆蛋白及乳清蛋白为原料，通过多种蛋白分解工艺制备出胶原蛋白肽、大豆肽和乳清肽，将胶原蛋白肽、大豆肽和乳清肽进行科学配伍配制成多肽营养粉，营养粉中不含致敏的蛋白质，含有多种人类必需氨基酸和非必需氨基酸，还可以增强免疫细胞活力，增强体液免疫和细胞免疫功能，从根本上提高人体免疫力，适合用于对牛奶过敏的婴幼儿及其他人群作为营养补充剂。
Description
技术领域
本发明属于食品技术领域，具体涉及一种低致敏性的多肽营养粉及其制备方法。
背景技术
过敏是一种机体的变态反应，是人对正常物质(过敏原)的一种不正常的反应，当过敏原接触到过敏体质的人群，会发生过敏。在过敏反应的发生过程中，过敏介质起着直接的作用，机体免疫能力低下，大量自由基对肥大细胞和嗜碱粒细胞的氧化破坏是过敏发生的内因。食物蛋白过敏是人体对食物中蛋白质不恰当的免疫应答引起的不良反应，由于其对人体健康会造成不良后果，甚至导致休克，受到食品科学家的普遍关注。目前食用营养粉大多为蛋白质类营养粉，这类营养粉中的蛋白质大分子未经分解，便直接被包入细胞内，身体的免疫系统将此大分子(蛋白质)视为入侵的外来物，于是展开一连串的防御反应，症状也就跟着产生，即人们常说的“过敏”。因此，十分有必要对如何组合多种蛋白分解方法展开研究，以获得多肽成分，进而以制备出具有低致敏性的多肽营养粉。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术不足，提供一种低致敏性的多肽营养粉及其制备方法。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：
第一方面，本发明提供了一种低致敏性的多肽营养粉，按重量百分比计，包括如下组分：胶原蛋白肽40～60％、大豆肽30～50％、乳清肽8～18％、营养助剂0～5％。
本发明将胶原蛋白肽、大豆肽和乳清肽进行科学配伍，配制成的多肽营养粉致敏性极低，食用安全性高，富含多种小分子多肽，还可以增强免疫细胞活力，有效地调整淋巴T细胞亚群的功能，增强体液免疫和细胞免疫功能，从根本上提高人体免疫力。
优选的，低致敏性的多肽营养粉，按重量百分比计，包括如下组分：胶原蛋白肽46～60％、大豆肽30～40％、乳清肽8～12％、营养助剂0～5％。
发明人经过大量实验发现，当所述多肽营养粉中胶原蛋白肽的重量百分比为46～60％，所述大豆肽的重量百分比为30～40％，所述乳清肽的重量百分比为8～12％时，多肽营养粉与血清结合不会引起任何过敏反应，安全性高。
优选的，所述营养助剂包括矿物质营养源。
进一步优选的，所述矿物质营养源包括柠檬酸钙、乳酸钙中的至少一种。
进一步优选的，所述矿物质营养源在多肽营养粉中的重量百分比为0～2％。在本发明中，矿物质营养源结合小分子肽，有助于促进人体对矿物质营养源的吸收。
优选的，所述营养助剂包括调味剂。进一步优选的，所述调味剂为食用香精。
优选的，所述胶原蛋白肽的分子量为189～500Dalt，短线状结构，胶原蛋白肽分子的聚合体在10μm以下。
本发明以胶原蛋白、大豆蛋白及乳清蛋白为原料，针对不同的原料，选择特定生物酶的种类，并优化生物酶解的过程参数，通过酶解反应改变过敏原表位结构，去除过敏原蛋白表面的过敏原表位，暴露蛋白内部过敏原，断裂肽键，使蛋白质部分水解成小肽或氨基酸，减小过敏原的分子质量，从而获得致敏性低的胶原蛋白肽、大豆肽及乳清肽。
优选的，所述胶原蛋白肽为采用下述方法制得：将胶原蛋白溶液的pH值调整至7.0～8.0，加入胶原蛋白酶，在50～60℃下水浴搅拌2～4h后，将溶液的pH值调整至2.0～4.0，再加入胃蛋白酶，在35～38℃下水浴搅拌1～2h，经灭酶、分离纯化、干燥得到胶原蛋白肽。
进一步优选的，所述胶原蛋白酶的重量为胶原蛋白溶液重量的0.02～0.04％。
进一步优选的，所述胃蛋白酶的重量为胶原蛋白溶液重量的0.2～0.4％。
优选的，所述大豆肽为采用下述方法制得：将大豆蛋白和Alcalase蛋白酶解液混合，调节pH值至6.0～11.0，在35～38℃下水浴搅拌1～4h后，经灭酶、过滤、干燥得到大豆肽。
进一步优选的，所述Alcalase蛋白酶解液的重量为大豆蛋白重量的15～20倍。
进一步优选的，所述Alcalase蛋白酶解液中Alcalase蛋白酶的质量百分含量为1～5％。
优选的，所述乳清肽为采用下述方法制得：将乳清蛋白和胃蛋白酶解液混合，调节pH值至2～4，在35～38℃下水浴搅拌2～6h，经灭酶、过滤、干燥得到乳清肽。
进一步优选的，所述胃蛋白酶解液的重量为乳清蛋白重量的15～20倍。
进一步优选的，所述胃蛋白酶解液中胃蛋白酶的质量百分含量为2～4％。
第二方面，本发明提供的一种如第一方面所述的低过敏性的多肽营养粉的制备方法，包括如下步骤：将多肽营养粉的各原料混合均匀即可。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：
本发明以胶原蛋白、大豆蛋白及乳清蛋白为原料，通过多种蛋白分解工艺制备出胶原蛋白肽、大豆肽和乳清肽，将胶原蛋白肽、大豆肽及乳清肽进行科学配伍配制成多肽营养粉，营养粉不含致敏的蛋白质，含有多种人类必需氨基酸和非必需氨基酸，还可以增强免疫细胞活力，增强体液免疫和细胞免疫功能，从根本上提高人体免疫力，适合用于对牛奶过敏的婴幼儿及其他人群作为营养补充剂。
具体实施方式
为更好地说明本发明的目的、技术方案和优点，下面将结合具体实施例对本发明进一步说明。本领域技术人员应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
本发明所采用的试剂、方法和设备，如无特殊说明，均为本技术领域常规试剂、方法和设备。
实施例1
本实施例提供一种低致敏性的多肽营养粉，包括如下按重量百分比计的组分：胶原蛋白肽40％、大豆肽40％、乳清肽18％、乳酸钙1％、食用香精1％；其制备方法包括如下步骤：
(1)将市售的粗胶原蛋白溶于水，粗胶原蛋白和水的重量比为1:10，得到粗胶原蛋白溶液，粗胶原蛋白溶液的pH值调整至7.0，加入胶原蛋白酶，所述胶原蛋白酶的重量为胶原蛋白溶液重量的0.03％，在55℃下水浴搅拌3h后，将溶液的pH值调整至3.0，再加入胃蛋白酶，胃蛋白酶的重量为胶原蛋白溶液重量的0.3％，在37℃下水浴搅拌1.5h，将酶解后的产物升温至85℃，保温25min进行灭酶，再利用超滤膜进行分离纯化，滤除蛋白分子，得到滤液，将滤液喷雾干燥得到分子量为189～500Dalt的胶原蛋白肽，短线状结构，胶原蛋白肽分子的聚合体在10μm以下；
(2)向大豆蛋白中加入Alcalase蛋白酶解液，Alcalase蛋白酶解液的重量为大豆蛋白重量的18倍，Alcalase蛋白酶解液中Alcalase蛋白酶的质量百分含量为4％，调节pH值至9.0，在37℃下水浴搅拌2h后，将酶解后的产物升温至85℃，保温15min进行灭酶，再利用小分子滤膜进行过滤，滤除蛋白分子，得到滤液，将滤液喷雾干燥得到大豆肽；
(3)向乳清蛋白中加入胃蛋白酶解液，胃蛋白酶解液的重量为乳清蛋白重量的15倍，所述胃蛋白酶解液中胃蛋白酶的质量百分含量为3％，调节pH值至3.0，在37℃下水浴搅拌4h，将酶解后的产物升温至85℃，保温15min进行灭酶，再利用小分子滤膜进行过滤，滤除蛋白分子，得到滤液，将滤液喷雾干燥得到乳清肽；
(4)将胶原蛋白肽、大豆肽、乳清肽、乳酸钙和食用香精按照组分配比混合均匀得到多肽营养粉。
实施例2
本实施例提供一种低致敏性的多肽营养粉，其制备方法与实施例1的不同之处在于，本实施例的低致敏性的多肽营养粉，包括如下按重量百分比计的组分：胶原蛋白肽60％、大豆肽30％、乳清肽8％、乳酸钙1％、食用香精1％。
实施例3
本实施例提供一种低致敏性的多肽营养粉，其制备方法与实施例1的不同之处在于，本实施例的低致敏性的多肽营养粉，包括如下按重量百分比计的组分：胶原蛋白肽46％、大豆肽40％、乳清肽12％、乳酸钙1％、食用香精1％。
实施例4
本实施例提供一种低致敏性的多肽营养粉，其制备方法与实施例1的不同之处在于，本实施例的低致敏性的多肽营养粉，包括如下按重量百分比计的组分：胶原蛋白肽40％、大豆肽50％、乳清肽8％、乳酸钙1％、食用香精1％。
实施例5
本实施例提供一种低致敏性的多肽营养粉，其制备方法与实施例1的不同之处在于，本实施例的低致敏性的多肽营养粉，包括如下按重量百分比计的组分：胶原蛋白肽50％、大豆肽40％、乳清肽8％、乳酸钙1％、食用香精1％。
效果例1
将鸡蛋、牛奶、大豆蛋白、白软干酪及各实施例制得的分子多肽营养粉进行如下试验：
1、试验目的：
通过把低敏产品和鸡蛋、牛奶、大豆蛋白以及白软干酪点在同一张膜条上，然后用血清检测，通过检测结果分析低敏产品和鸡蛋、牛奶、大豆蛋白以及白软干酪的阳性相关性。
2、试验步骤：
(1)待测溶液的制备：将实施例1～5所得的多肽营养粉按表1中顺序编号，然后称取约30mg多肽营养粉加入到10ml水中，超声溶解，然后用点样的基质溶液分别稀释成10mg/L，20mg/L和40mg/L的多肽粉溶液，备用；分别称取30mg的鸡蛋、牛奶、大豆蛋白以及白软干酪，将鸡蛋蛋白液、大豆蛋白、牛奶、白软干酪,加入到10ml水中，超声分散，然后用点样的基质溶液稀释制成10mg/L的溶液，备用。
表1多肽营养粉编号详细表
(2)用点样仪进行点样，点样矩阵中抗原分布如下表2所示。
表2点样矩阵中抗原分布
| STD-100 | STD-200 | STD-300 | 空白 |
| STD-25 | STD-50 | 空白 | STD-150 |
| 鸡蛋 | 牛奶 | 大豆蛋白 | 白软干酪 |
| 空白 | 空白 | 空白 | 空白 |
| 5#10mg/L | 5#20mg/L | 5#40mg/L | 空白 |
| 4#10mg/L | 4#20mg/L | 4#40mg/L | 空白 |
| 3#10mg/L | 3#20mg/L | 3#40mg/L | 空白 |
| 2#10mg/L | 2#20mg/L | 2#40mg/L | 空白 |
| 1#10mg/L | 1#20mg/L | 1#40mg/L | STD-150 |
备注：表2中STD表示标准品，HUMAN IgG whole molecule，生产厂家为RocklandImmunochemicals Inc，STD-100表示标准品的浓度为100mg/L，STD-200表示标准品的浓度为200mg/L，STD-300表示标准品的浓度为300mg/L，STD-25表示标准品的浓度为25mg/L，STD-50表示标准品的浓度为50mg/L，STD-100表示标准品的浓度为100mg/L。
(3)筛选血清标本40种，然后采用免疫印迹法进行食物特异性IgG检测，根据膜条是否显色来判断过敏性，如果显色判定为阳性，如果不显色则判定为阴性，根据显色的深浅划分致敏等级，检测结果如表3所示。
表3血清检测分析结果
备注：上表中“-”代表阴性，“1”代表轻度；“2”代表中度；“3”代表重度。
从表3的分析结果可知，40例标本中，无论鸡蛋、牛奶、大豆蛋白和白软干酪是阴性还是阳性，2#、3#、5#对应的标本全部检测结果为阴性，1#对应的6号和8号标本具有轻度致敏性，4#对应的6号和8号标本具有轻度致敏性，1#和4#对应的其他38例检测结果全部为阴性。
实施例6
本实施例提供一种低致敏性的多肽营养粉，其制备方法与实施例1的不同之处在于，本实施例的低致敏性的多肽营养粉，包括如下按重量百分比计的组分：胶原蛋白肽50％、大豆肽40％、乳清肽10％。
实施例7
本实施例提供一种低致敏性的多肽营养粉，包括如下按重量百分比计的组分：胶原蛋白肽40％、大豆肽40％、乳清肽18％、乳酸钙1％、食用香精1％；其制备方法包括如下步骤：
(1)将胶原蛋白溶液的pH值调整至7.0，加入胶原蛋白酶，所述胶原蛋白酶的重量为胶原蛋白溶液重量的0.04％，在55℃下水浴搅拌2h后，将溶液的pH值调整至4.0，再加入胃蛋白酶，胃蛋白酶的重量为胶原蛋白溶液重量的0.2％，在35℃下水浴搅拌2h，将酶解后的产物升温至80℃，保温20min进行灭酶，再利用超滤膜进行分离纯化，滤除蛋白分子，得到滤液，将滤液喷雾干燥得到胶原蛋白肽；
(2)向大豆蛋白中加入Alcalase蛋白酶解液，Alcalase蛋白酶解液的重量为大豆蛋白重量的20倍，Alcalase蛋白酶解液中Alcalase蛋白酶的质量百分含量为1％，调节pH值至6.0，在35～38℃下水浴搅拌5h后，将酶解后的产物升温至90℃，保温10min进行灭酶，再利用小分子滤膜进行过滤，滤除蛋白分子，得到滤液，将滤液喷雾干燥得到大豆肽；
(3)向乳清蛋白中加入胃蛋白酶解液，胃蛋白酶解液的重量为乳清蛋白重量的15倍，所述胃蛋白酶解液中胃蛋白酶的质量百分含量为2％，调节pH值至4.0，在35℃下水浴搅拌6h，将酶解后的产物升温至90℃，保温20min进行灭酶，再利用小分子滤膜进行过滤，滤除蛋白分子，得到滤液，将滤液喷雾干燥得到乳清肽；
(4)将胶原蛋白肽、大豆肽、乳清肽、乳酸钙和食用香精按照组分配比混合均匀得到多肽营养粉。
实施例8
本实施例提供一种低致敏性的多肽营养粉，包括如下按重量百分比计的组分：胶原蛋白肽40％、大豆肽40％、乳清肽14％、乳酸钙2％、食用香精3％；其制备方法包括如下步骤：
(1)将胶原蛋白溶液的pH值调整至8.0，加入胶原蛋白酶，所述胶原蛋白酶的重量为胶原蛋白溶液重量的0.02％，在55℃下水浴搅拌4h后，将溶液的pH值调整至2.0，再加入胃蛋白酶，胃蛋白酶的重量为胶原蛋白溶液重量的0.4％，在38℃下水浴搅拌1h，将酶解的产物升温至90℃，保温10min进行灭酶，再利用超滤膜进行分离纯化，滤除蛋白分子，得到滤液，将滤液喷雾干燥得到胶原蛋白肽；
(2)向大豆蛋白中加入Alcalase蛋白酶解液，Alcalase蛋白酶解液的重量为大豆蛋白重量的15倍，Alcalase蛋白酶解液中Alcalase蛋白酶的质量百分含量为5％，调节pH值至11.0，在38℃下水浴搅拌1h后，将酶解后的产物升温至80℃，保温20min进行灭酶，再利用小分子滤膜进行过滤，滤除蛋白分子，得到滤液，将滤液喷雾干燥得到大豆肽；
(3)向乳清蛋白中加入胃蛋白酶解液，胃蛋白酶解液的重量为乳清蛋白重量的20倍，所述胃蛋白酶解液中胃蛋白酶的质量百分含量为4％，调节pH值至2.0，在38℃下水浴搅拌2h，将酶解后的产物升温至80℃，保温20min进行灭酶，再利用小分子滤膜进行过滤，滤除蛋白分子，得到滤液，将滤液喷雾干燥得到乳清肽；
(4)将胶原蛋白肽、大豆肽、乳清肽、乳酸钙和食用香精按照组分配比混合均匀得到多肽营养粉。
对比例1
本对比例提供一种多肽营养粉，其制备方法与实施例1的不同之处在于，本对比例的多肽营养粉，包括如下按重量百分比计的组分：胶原蛋白肽30％、大豆肽60％、乳清肽8％、乳酸钙1％、食用香精1％。
对比例2
本对比例提供一种多肽营养粉，其制备方法与实施例1的不同之处在于，本对比例的多肽营养粉，包括如下按重量百分比计的组分：胶原蛋白肽40％、大豆肽30％、乳清肽28％、乳酸钙1％、食用香精1％。
对比例3
本对比例提供一种多肽营养粉，包括如下按重量百分比计的组分：胶原蛋白肽40％、大豆肽40％、乳清肽18％、乳酸钙、食用香精余量；其制备方法与实施例1的不同之处在于，本对比例采用下述方法制得胶原蛋白肽：将胶原蛋白溶液的pH值调整至3.0，加入胃蛋白酶，胃蛋白酶的重量为胶原蛋白溶液重量的0.03％，在55℃下水浴搅拌3h后，将溶液的pH值调整至7.0，再加入胶原蛋白酶，所述胶原蛋白酶的重量为胶原蛋白溶液重量的0.03％，在37℃下水浴搅拌1.5h，将酶解后的产物升温至85℃，保温25min进行灭酶，再利用超滤膜进行分离纯化，滤除蛋白分子，得到滤液，将滤液喷雾干燥得到胶原蛋白肽。
效果例2
按照效果例1的方法对实施例6～8及对比例1～3所得的营养粉进行过敏性测试。测试结果如下表所示。
表4
最后所应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
Claims (4)
1.一种低致敏性的多肽营养粉，其特征在于，按重量百分比计，由如下组分组成：胶原蛋白肽40~60%、大豆肽30~50%、乳清肽8~18%、营养助剂0~5%；所述胶原蛋白肽为采用下述方法制得：将胶原蛋白溶液的pH值调整至7.0~8.0，加入胶原蛋白酶，在50~60℃下水浴搅拌2~4h后，将溶液的pH值调整至2.0~4.0，再加入胃蛋白酶，在35~38℃下水浴搅拌1~2h，经灭酶、分离纯化、干燥得到胶原蛋白肽；所述胶原蛋白酶的重量为胶原蛋白溶液重量的0.02~0.04%，所述胃蛋白酶的重量为胶原蛋白溶液重量的0.2~0.4%，所述胶原蛋白溶液中胶原蛋白和水的重量比为1: 10；
所述大豆肽的制备方法为：将大豆蛋白和Alcalase蛋白酶解液混合，调节pH值至6.0~11.0，在35~38℃下水浴搅拌1~4h后，经灭酶、过滤、干燥得到大豆肽；
所述Alcalase蛋白酶解液的重量为大豆蛋白重量的15~20倍，所述Alcalase蛋白酶解液中Alcalase蛋白酶的质量百分含量为1~5%；
所述乳清肽的制备方法为：将乳清蛋白和胃蛋白酶解液混合，调节pH值至2~4，在35~38℃下水浴搅拌2~6h，经灭酶、过滤、干燥得到乳清肽；
所述胃蛋白酶解液的重量为乳清蛋白重量的15~20倍，所述胃蛋白酶解液中胃蛋白酶的质量百分含量为2~4%。
2.如权利要求1所述的低致敏性的多肽营养粉，其特征在于，按重量百分比计，由如下组分组成：胶原蛋白肽46~60%、大豆肽30~40%、乳清肽8~12%、营养助剂0~5%。
3.如权利要求1所述的低致敏性的多肽营养粉，其特征在于，所述胶原蛋白肽的分子量为189~500Dalt。
4.一种如权利要求1~3中任一项所述的低致敏性的多肽营养粉的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：将多肽营养粉的各原料混合均匀即可。
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