CN114903128B - 一种小龙虾复合饲料及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种小龙虾复合饲料及其制备方法。本发明的小龙虾复合饲料包括以下制备原料：黄豆粉、米糠、红薯粉、玉米粉、菜籽粕、复合菌剂、无机盐、诱食剂、免疫添加剂和成型助剂；其中，上述诱食剂包括蚯蚓粉和二甲基‑β‑丙酸噻亭；上述免疫添加剂包括甜瓜蒂、石榴皮、苦参、连翘、黄柏和麒麟草。采用本发明制备的小龙虾复合饲料能够有效提高饲料利用率，且具有较好的促生长和抗病效果，对促进小龙虾人工养殖产业的发展具有重要作用。

Description

一种小龙虾复合饲料及其制备方法
技术领域
本发明涉及小龙虾养殖技术领域，尤其是涉及一种小龙虾复合饲料及其制备方法。
背景技术
近年来随着小龙虾人工养殖产业的推广，养殖规模迅速发展，养殖模式也呈现多样化，养殖技术水平参差不齐，小龙虾养殖中也暴露出营养摄入不均衡，龙虾生长缓慢、抗病力差、品质下降等问题，部分地区甚至出现养殖过程中滥用抗生素的情况，严重制约了淡水小龙虾产业的健康良性发展，同时也给水产品安全以及人类健康带来了危害。
相关研究表明，通过营养调控可以改善小龙虾的免疫功能，提高小龙虾对疾病的抵抗力，同时还能促进小龙虾的生长，因此，越来越多的人致力于小龙虾功能性饲料的研究，但是相关功能性饲料仍存在利用率低、促生长和抗病作用效果不明显等问题。基于此，亟需寻求一种易吸收、且具有较好的促生长和抗病效果的小龙虾复合饲料。
发明内容
本发明旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明提出一种小龙虾复合饲料，能够有效提高饲料利用率，且具有较好的促生长和抗病效果。
本发明还提出一种小龙虾复合饲料的制备方法。
本发明的第一方面，提供一种小龙虾复合饲料，包括以下制备原料：黄豆粉、米糠、红薯粉、玉米粉、菜籽粕、复合菌剂、无机盐、诱食剂和免疫添加剂；
其中，所述诱食剂包括蚯蚓粉和二甲基-β-丙酸噻亭；
所述免疫添加剂包括甜瓜蒂、石榴皮、苦参、连翘、黄柏和麒麟草。
在本发明中，复合小龙虾饲料中的黄豆粉是黄豆经研磨后所得粉末，黄豆有“植物肉”及“绿色乳牛”之誉，这主要是由于黄豆中的蛋白质含量约为40％，在量和质上均可与动物蛋白比美。此外，黄豆中还含有丰富的脂肪(约为18-20％)、维生素A、维生素B、维生素D、维生素E及钙、磷、铁等矿物质，为小龙虾的生长提供了大量的营养物质来源。
米糠主要是由水稻果皮、水稻种皮、水稻外胚乳、水稻糊粉层和水稻胚加工制成的，是稻谷加工的主要副产品，米糠中平均含蛋白质15％，脂肪16％-22％，糖3％-8％，水分10％，其中米糠脂肪中主要的脂肪酸大多为油酸、亚油酸等不饱和脂肪酸，能保持细胞膜的相对流动性，以保证细胞的正常生理功能，从而提高细胞的免疫能力。此外，米糠中还含大量的维生素、植物醇、膳食纤维、氨基酸及矿物质等，可有效促进小龙虾的健康发育。
红薯粉是将红薯干燥研磨后所得粉末，每500克红薯约含蛋白质11.5克、糖14.5克、脂肪1克、磷100毫克、钙90毫克、铁2克，胡萝卜素0.5毫克，另含有维生素B1、维生素B2、维生素C、尼克酸、亚油酸等。其中维生素B1和维生素B2的含量分别比大米高6倍和3倍，维生素B1对维持小龙虾食欲、肌肉的弹性和健康精神状态至关重要，当维生素B1 缺乏时，可能导致小龙虾厌食、疲劳和生长滞缓等，将红薯作为饲料添加成分，为小龙虾生长发育提供了天然的维生素来源。此外，红薯中还含有丰富的赖氨酸，赖氨酸有助于促进小龙虾的生长发育、增强小龙虾免疫力。
玉米粉和菜籽粕是饲料中常见的添加成分，玉米有着很强的营养价值和保健作用，它淀粉含量高，还有大量的纤维、蛋白质、脂肪、胡萝卜素、维生素E、维生素B族，以及钙、磷、铁、镁等多种矿物质。菜籽粕则是重要的饲料蛋白原料，其粗蛋白含量可以达到35％-40％，可为小龙虾的生长提供了丰富的蛋白质来源。
根据本发明的一些实施例，所述小龙虾复合饲料包括以下重量份数的制备原料：黄豆粉 20-30份、米糠10-15份、红薯粉10-15份、玉米粉10-15份、菜籽粕5-10份、复合菌剂1-2 份、无机盐0.02-0.1份、诱食剂2-8份和免疫添加剂2-8份。
根据本发明的一些实施例，所述小龙虾复合饲料包括以下重量份数的制备原料：黄豆粉 10-30份、米糠12-15份、红薯粉12-15份、玉米粉12-15份、菜籽粕5-8份、复合菌剂1-1.5 份、无机盐0.02-0.05份、诱食剂5-8份和免疫添加剂4-8份。
根据本发明的一些实施例，所述蚯蚓粉和所述二甲基-β-丙酸噻亭的重量比为8-10：1。
蚯蚓是小龙虾最喜爱的动物性饵料之一，蚯蚓粉是将新鲜的蚯蚓经风干或烘干之后粉碎制得，将蚯蚓粉添加至小龙虾复合饲料中有利用提高小龙虾的摄食量，促进小龙虾的生长。此外，蚯蚓的肌肉中还存在可抑制病原菌生长的抗菌素和抗逆性因子，可以在小龙虾的体内发挥作用，使得小龙虾的体质得到增强，更好地发挥其抗病促生长的功能。
二甲基-β-丙酸噻亭对水产动物(如鱼、虾和蟹等)具有较强的诱食作用，能够有效提高小龙虾的摄食频率，同时，二甲基-β-丙酸噻亭还具有改善养殖产品的肉质，使淡水品种呈现海产风味，提高经济价值的作用。
此外，二甲基-β-丙酸噻亭对提高小龙虾对饲料利用率也具有重要作用，这主要是由于二甲基-β-丙酸噻亭分子上的(CH3)2S-基团，具有甲基供体功能，能有效地被小龙虾利用，促进小龙虾体内消化酶的分泌，进而促进小龙虾的消化和对营养物质的吸收，从而提高饲料利用率。
根据本发明的一些实施例，所述免疫添加剂中的甜瓜蒂、石榴皮、苦参、连翘、黄柏和麒麟草的重量比为1：1：1：1：2：1-3。
根据本发明的一些实施例，所述免疫添加剂中的甜瓜蒂、石榴皮、苦参、连翘、黄柏和麒麟草的重量比为1：1：1：1：2：2。
甜瓜蒂，为葫芦科植物甜瓜的果柄，味苦，性寒；归脾、胃、肝经。涌吐痰食，除湿退黄。甜瓜蒂中富含葫芦苦素，葫芦苦素有利于提高细胞免疫功能，提高小龙虾的抗病能力。
石榴皮又名石榴壳、西榴皮，为石榴科植物石榴(学名为Punica granatum L)的干燥果皮，具有涩肠止泻，止血，驱虫之功效。石榴皮所含根皮碱，对伤寒杆菌、痢疾杆菌均有抑制作用。此外，石榴皮还能使肠黏膜收敛，分泌物减少，有涩肠止泻的特殊功效。
苦参为豆科植物苦参的干燥根，味苦，性寒；具有清热燥湿，杀虫，利尿之功。苦参中的生物碱(如苦参碱、苦豆碱、氧化苦参碱、槐果碱、槐胺碱和槐定碱等)和黄酮均对致病细菌和真菌均具有较好的抑制作用。
连翘，味苦，性微寒，具有清热、解毒功效。连翘与甜瓜蒂搭配具有很好的协同作用，这主要是因为甜瓜蒂虽具有较好的提高细胞免疫功能的作用，但是大量使用具有微毒性，连翘具有较好的解毒功效，与甜瓜蒂搭配使用可以有效减缓甜瓜蒂的微毒性。
黄柏，味苦，性寒；具有清热、燥湿、泻火和解毒的功效。黄柏中主要包括小檗碱、药根碱、木兰花碱、黄柏碱、掌叶防己碱等生物碱，及黄柏酮、黄柏内醑、7-脱氢豆甾醇、B- 谷甾醇、黏液质等多种活性成分，对小龙虾致病菌(如嗜水气单胞菌、温和气单胞菌和副溶血弧菌)具有较好的抑制作用。
麒麟草，又名加拿大一枝黄花，全草可入药，有散热去湿、消积解毒功效。嗜水气单胞菌、温和气单胞菌和副溶血弧菌是小龙虾养殖过程中最重要的致病性细菌病原体，感染这些病原体后，小龙虾症状主要表现为螯足无力、体表溃烂，大多数还伴有肝胰腺组织坏死现象，易导致小龙虾死亡，而麒麟草对嗜水气单胞菌、温和气单胞菌和副溶血弧菌均具有较强的抑制作用，可以有效增强小龙虾的存活率。
根据本发明的一些实施例，所述复合菌剂包括EM菌和丁酸梭菌。
EM菌(Effective Microorganisms)是以光合细菌群、乳酸菌群、酵母菌群和放线菌群为主的10个属80余个微生物复合而成的一种微生物菌制剂。利用EM菌作为小龙虾复合饲料添加菌剂进行发酵处理，有利用提高小龙虾复合饲料的利用率，这主要是由于一方面EM菌可以有效改善虾肠道微生物种群，促进小龙虾对营养物质的消化吸收；另一方面EM菌可以降解植物性饲料中的纤维素、半纤维素和木质素，这主要是因为EM菌中的乳酸菌群能够依靠摄取光合细菌、酵母菌产生的糖类形成乳酸，而乳酸具有较好的促有机物分解作用，最终将纤维素、半纤维素和木质素分解为易吸收的小分子物质，从而进一步提高促进吸收作用。此外，饲料经EM菌发酵后能产生多种不饱和脂肪酸和芳香酸，使饲料具有特殊的芳香味和良好的适口性，能够进一步提高对小龙虾的诱食作用。
丁酸梭菌(Clostridium butyricum)，又名宫入菌、酪酸梭菌，属于芽孢杆菌科，梭菌属，是一种厌氧的革兰氏阳性芽孢杆菌，对外界环境有较强的抵抗力。丁酸梭菌略有酸臭味，在体内丁酸梭菌能耐受胃液、胆汁酸和消化液的作用，在室温下具有良好的储存性与稳定性。丁酸梭菌主要代谢产物生物丁酸，是肠黏膜细胞的主要能量来源，具有修复肠道黏膜和增加肠道屏障功能，对于预防和治疗肠炎、促进二次消化有着独特的作用，其优势高于乳酸，此外，丁酸梭菌进入小龙虾肠道后会黏附于肠黏膜，对致病菌产生黏附竞争性抑制，减少其他致病菌对肠黏膜黏附和定植的机会，这种在一定程度上降低致病菌的增殖，促进小龙虾肠道有益菌的生长。
根据本发明的一些实施例，所述EM菌和丁酸梭菌的重量比为8-12：1。
当复合菌剂中EM菌和丁酸梭菌的重量比为8-12：1时，其对促进肠道有益菌的繁殖具有重要作用。这主要是由于EM菌中的乳酸菌与丁酸梭菌存在交叉互养关系，乳酸菌将淀粉和寡聚果糖等发酵后产生乳酸，而丁酸梭菌以乳酸为底物，可将乳酸转化为丁酸，而丁酸梭菌产生的大量丁酸降低了结肠内的pH值，为乳酸菌提供了更适宜的生存环境。当丁酸梭菌过高或过低时可能打破这种平衡关系，降低其带来的有益效果。
根据本发明的一些实施例，所述EM菌的总活菌数大于100亿/mL。
根据本发明的一些实施例，所述丁酸梭菌的活菌数大于30亿/mL。
在本发明的实施例中，复合菌剂中含有较多的活菌数，其中EM菌的总活菌数大于100亿 /mL，丁酸梭菌的活菌数大于30亿/mL，以保证制备所得到的小龙虾复合饲料中有足量的活菌量，使其在进入小龙虾肠道内后继续发挥作用。
根据本发明的一些实施例，所述复合菌剂还包括溶剂。
根据本发明的一些实施例，所述溶剂包括水。
根据本发明的一些实施例，所述无机盐为氯化钠。
在小龙虾复合饲料中添加适量无机盐有利于补充小龙虾所需的矿物质元素，使营养均衡，进而促进虾卵更为健康。
根据本发明的一些实施例，所述小龙虾复合饲料还包括成型助剂。
根据本发明的一些实施例，按照重量份数计所述成型助剂为2-5份。
本发明的第二方面，提供一种小龙虾复合饲料的制备方法，包括以下步骤：
S1、将黄豆粉、米糠、红薯粉、玉米粉、菜籽粕和复合菌剂混合，发酵，得预处理饲料；
S2、将所述无机盐、所述诱食剂、所述成型助剂、所述免疫添加剂和步骤S1所得预处理饲料混合，制粒，得小龙虾复合饲料。
在本发明中，采用预发酵的方式对黄豆粉、米糠、红薯粉、玉米粉和菜籽粕进行处理，有利于提高小龙虾对饲料中蛋白质的吸收利用效率，这主要是由于常规的小龙虾复合饲料中虽然也含有丰富的蛋白质，但实际在喂养小龙虾过程中，这些植物蛋白质大部分为大分子物质，难以被小龙虾充分吸收利用，而在本发明中，添加的黄豆粉、米糠、红薯粉、玉米粉和菜籽粕经过复合菌剂发酵处理后，一些大分子植物蛋白被分解成小分子物质，有利于进一步促进小龙虾对植物蛋白的吸收和利用。
根据本发明的一些实施例，步骤S1中所述发酵的温度为30-37℃。
根据本发明的一些实施例，步骤S1中所述发酵的温度为34-36℃。
根据本发明的一些实施例，步骤S1中所述发酵的温度为35℃。
根据本发明的一些实施例，步骤S1中所述发酵的时间为3-5天。
根据本发明的一些实施例，步骤S1中所述发酵的时间为5天。
根据本发明的一些实施例，步骤S1中所述发酵的过程中每6小时搅拌一次，以避免发酵过程中局部温度过高，影响发酵效率。
根据本发明的一些实施例，所述免疫添加剂制备原料甜瓜蒂、石榴皮、苦参、连翘、黄柏和麒麟草需要经过磨研粉碎、过筛后再与其他小龙虾复合饲料混合。
具体的，所述过筛是指过100-120目筛。
根据本发明一些实施例，至少具有如下有益效果：
(1)本发明的小龙虾复合饲料能够促进小龙虾的生长，提高小龙虾的增重率和存活率，且还能够有效提高小龙虾细胞免疫功能，增加小龙虾的抗病性能。
(2)本发明的小龙虾复合饲料制备方法简单，结合发酵处理，有利于提高小龙虾对饲料的吸收利用率和小龙虾复合饲料的适口感，对小龙虾人工养殖产业健康发展具有重要的作用。
具体实施方式
以下将结合实施例对本发明的构思及产生的技术效果进行清楚、完整地描述，以充分地理解本发明的目的、特征和效果。显然，所描述的实施例只是本发明的一部分实施例，而不是全部实施例，基于本发明的实施例，本领域的技术人员在不付出创造性劳动的前提下所获得的其他实施例，均属于本发明保护的范围。
在实施例中，成型助剂购于宁津县嘉和节能材料有限公司，货号为JH-58。
在实施例中，EM菌剂购于河南省中农康畜贸易有限公司，货号为0302020002。
在实施例中，丁酸梭菌购买于湖北熙富药业有限公司，货号为xf20201022。
在实施例中，二甲基-β-丙酸噻亭的CAS号为4337-33-1。
实施例1
一种小龙虾复合饲料，包括以下制备原料：黄豆粉、米糠、红薯粉、玉米粉、菜籽粕、复合菌剂、无机盐、诱食剂、免疫添加剂和成型助剂；
其中，上述诱食剂包括蚯蚓粉和二甲基-β-丙酸噻亭；
上述免疫添加剂包括甜瓜蒂、石榴皮、苦参、连翘、黄柏和麒麟草。
上述制备原料按照重量分数计，包括黄豆粉20份、米糠10份、红薯粉10份、玉米粉10份、菜籽粕5份、复合菌剂1份、无机盐0.02份、诱食剂2份、免疫添加剂2份和成型助剂5份。
其中，复合菌剂包括EM菌和丁酸梭菌，添加的重量比为8:1，EM菌的总活菌数大于100 亿/mL，丁酸梭菌的活菌数大于30亿/mL；
无机盐为氯化钠；
诱食剂为蚯蚓粉和二甲基-β-丙酸噻亭，添加的重量比为10:1；
免疫添加剂为甜瓜蒂、石榴皮、苦参、连翘、黄柏和麒麟草，添加的重量比为1：1：1：1：2：1。
上述小龙虾复合饲料的制备方法，包括以下步骤：
S1、称取上述重量份数的黄豆粉、米糠、红薯粉、玉米粉、菜籽粕和复合菌剂，将其混合均匀，在30℃条件下密闭发酵4天，期间每隔6h搅拌一次，得预处理饲料；
S2、分别称取上述重量份数的甜瓜蒂、石榴皮、苦参、连翘、黄柏和麒麟草，将其研磨粉碎后混匀，过筛(120目)，得免疫添加剂；
S3、将上述无机盐、上述诱食剂、上述成型助剂与步骤S1所得预处理饲料，以及步骤 S2所得免疫添加剂混合，制粒，得小龙虾复合饲料。
实施例2
一种小龙虾复合饲料，包括以下制备原料：黄豆粉、米糠、红薯粉、玉米粉、菜籽粕、复合菌剂、无机盐、诱食剂、免疫添加剂和成型助剂；
其中，上述诱食剂包括蚯蚓粉和二甲基-β-丙酸噻亭；
上述免疫添加剂包括甜瓜蒂、石榴皮、苦参、连翘、黄柏和麒麟草。
上述制备原料按照重量分数计，包括黄豆粉30份、米糠10份、红薯粉15份、玉米粉10份、菜籽粕5份、复合菌剂2份、无机盐0.05份、诱食剂8份、免疫添加剂8份和成型助剂2份。
其中，复合菌剂包括EM菌和丁酸梭菌，添加的重量比为10:1，EM菌的总活菌数大于100 亿/mL，丁酸梭菌的活菌数大于30亿/mL；
无机盐为氯化钠；
诱食剂为蚯蚓粉和二甲基-β-丙酸噻亭，添加的重量比为8:1；
免疫添加剂为甜瓜蒂、石榴皮、苦参、连翘、黄柏和麒麟草，添加的重量比为1：1：1：1：2：2。
上述小龙虾复合饲料的制备方法，包括以下步骤：
S1、称取上述重量份数的黄豆粉、米糠、红薯粉、玉米粉、菜籽粕和复合菌剂，将其混合均匀，在35℃条件下密闭发酵5天，期间每隔6h搅拌一次，得预处理饲料；
S2、分别称取上述重量份数的甜瓜蒂、石榴皮、苦参、连翘、黄柏和麒麟草，将其研磨粉碎后混匀，过筛(120目)，得免疫添加剂；
S3、将上述无机盐、上述诱食剂、上述成型助剂与步骤S1所得预处理饲料，以及步骤 S2所得免疫添加剂混合，制粒，得小龙虾复合饲料。
实施例3
一种小龙虾复合饲料，包括以下制备原料：黄豆粉、米糠、红薯粉、玉米粉、菜籽粕、复合菌剂、无机盐、诱食剂、免疫添加剂和成型助剂；
其中，上述诱食剂包括蚯蚓粉和二甲基-β-丙酸噻亭；
上述免疫添加剂包括甜瓜蒂、石榴皮、苦参、连翘、黄柏和麒麟草。
上述制备原料按照重量分数计，包括黄豆粉30份、米糠10份、红薯粉15份、玉米粉10份、菜籽粕5份、复合菌剂1份、无机盐0.05份、诱食剂8份、免疫添加剂8份和成型助剂2份。
其中，复合菌剂包括EM菌和丁酸梭菌，添加的重量比为10:1，EM菌的总活菌数大于100 亿/mL，丁酸梭菌的活菌数大于30亿/mL；
无机盐为氯化钠；
诱食剂为蚯蚓粉和二甲基-β-丙酸噻亭，添加的重量比为8:1；
免疫添加剂为甜瓜蒂、石榴皮、苦参、连翘、黄柏和麒麟草，添加的重量比为1：1：1：1：2：2。
上述小龙虾复合饲料的制备方法，包括以下步骤：
S1、称取上述重量份数的黄豆粉、米糠、红薯粉、玉米粉、菜籽粕和复合菌剂，将其混合均匀，在35℃条件下密闭发酵5天，期间每隔6h搅拌一次，得预处理饲料；
S2、分别称取上述重量份数的甜瓜蒂、石榴皮、苦参、连翘、黄柏和麒麟草，将其研磨粉碎后混匀，过筛(120目)，得免疫添加剂；
S3、将上述无机盐、上述诱食剂、上述成型助剂与步骤S1所得预处理饲料，以及步骤 S2所得免疫添加剂混合，制粒，得小龙虾复合饲料。
实施例4
一种小龙虾复合饲料，包括以下制备原料：黄豆粉、米糠、红薯粉、玉米粉、菜籽粕、复合菌剂、无机盐、诱食剂、免疫添加剂和成型助剂；
其中，上述诱食剂包括蚯蚓粉和二甲基-β-丙酸噻亭；
上述免疫添加剂包括甜瓜蒂、石榴皮、苦参、连翘、黄柏和麒麟草。
上述制备原料按照重量分数计，包括黄豆粉30份、米糠10份、红薯粉15份、玉米粉10份、菜籽粕5份、复合菌剂2份、无机盐0.05份、诱食剂6份、免疫添加剂8份和成型助剂2份。
其中，复合菌剂包括EM菌和丁酸梭菌，添加的重量比为10:1，EM菌的总活菌数大于100 亿/mL，丁酸梭菌的活菌数大于30亿/mL；
无机盐为氯化钠；
诱食剂为蚯蚓粉和二甲基-β-丙酸噻亭，添加的重量比为8:1；
免疫添加剂为甜瓜蒂、石榴皮、苦参、连翘、黄柏和麒麟草，添加的重量比为1：1：1：1：2：2。
上述小龙虾复合饲料的制备方法，包括以下步骤：
S1、称取上述重量份数的黄豆粉、米糠、红薯粉、玉米粉、菜籽粕和复合菌剂，将其混合均匀，在35℃条件下密闭发酵5天，期间每隔6h搅拌一次，得预处理饲料；
S2、分别称取上述重量份数的甜瓜蒂、石榴皮、苦参、连翘、黄柏和麒麟草，将其研磨粉碎后混匀，过筛(120目)，得免疫添加剂；
S3、将上述无机盐、上述诱食剂、上述成型助剂与步骤S1所得预处理饲料，以及步骤 S2所得免疫添加剂混合，制粒，得小龙虾复合饲料。
实施例5
一种小龙虾复合饲料，包括以下制备原料：黄豆粉、米糠、红薯粉、玉米粉、菜籽粕、复合菌剂、无机盐、诱食剂、免疫添加剂和成型助剂；
其中，上述诱食剂包括蚯蚓粉和二甲基-β-丙酸噻亭；
上述免疫添加剂包括甜瓜蒂、石榴皮、苦参、连翘、黄柏和麒麟草。
上述制备原料按照重量分数计，包括黄豆粉30份、米糠10份、红薯粉15份、玉米粉10份、菜籽粕5份、复合菌剂2份、无机盐0.05份、诱食剂8份、免疫添加剂4份和成型助剂2份。
其中，复合菌剂包括EM菌和丁酸梭菌，添加的重量比为10:1，EM菌的总活菌数大于100 亿/mL，丁酸梭菌的活菌数大于30亿/mL；
无机盐为氯化钠；
诱食剂为蚯蚓粉和二甲基-β-丙酸噻亭，添加的重量比为8:1；
免疫添加剂为甜瓜蒂、石榴皮、苦参、连翘、黄柏和麒麟草，添加的重量比为1：1：1：1：2：2。
上述小龙虾复合饲料的制备方法，包括以下步骤：
S1、称取上述重量份数的黄豆粉、米糠、红薯粉、玉米粉、菜籽粕和复合菌剂，将其混合均匀，在35℃条件下密闭发酵5天，期间每隔6h搅拌一次，得预处理饲料；
S2、分别称取上述重量份数的甜瓜蒂、石榴皮、苦参、连翘、黄柏和麒麟草，将其研磨粉碎后混匀，过筛(120目)，得免疫添加剂；
S3、将上述无机盐、上述诱食剂、上述成型助剂与步骤S1所得预处理饲料，以及步骤 S2所得免疫添加剂混合，制粒，得小龙虾复合饲料。
对比例1
一种小龙虾复合饲料，包括以下制备原料：黄豆粉、米糠、红薯粉、玉米粉、菜籽粕、无机盐、诱食剂、免疫添加剂和成型助剂；
其中，上述诱食剂包括蚯蚓粉和二甲基-β-丙酸噻亭；
上述免疫添加剂包括甜瓜蒂、石榴皮、苦参、连翘、黄柏和麒麟草。
上述制备原料按照重量分数计，包括黄豆粉30份、米糠10份、红薯粉15份、玉米粉10份、菜籽粕5份、无机盐0.05份、诱食剂8份、免疫添加剂8份和成型助剂2份。
其中，无机盐为氯化钠；
诱食剂为蚯蚓粉和二甲基-β-丙酸噻亭，添加的重量比为8:1；
免疫添加剂为甜瓜蒂、石榴皮、苦参、连翘、黄柏和麒麟草，添加的重量比为1：1：1：1：2：2。
上述小龙虾复合饲料的制备方法，包括以下步骤：
S1、称取上述重量份数的黄豆粉、米糠、红薯粉、玉米粉和菜籽粕，将其混合均匀，得预处理饲料；
S2、分别称取上述重量份数的甜瓜蒂、石榴皮、苦参、连翘、黄柏和麒麟草，将其研磨粉碎后混匀，过筛(120目)，得免疫添加剂；
S3、将上述无机盐、上述诱食剂、上述成型助剂与步骤S1所得预处理饲料，以及步骤 S2所得免疫添加剂混合，制粒，得小龙虾复合饲料。
对比例2
一种小龙虾复合饲料，包括以下制备原料：黄豆粉、米糠、红薯粉、玉米粉、菜籽粕、复合菌剂、无机盐、免疫添加剂和成型助剂；
其中：
上述免疫添加剂包括甜瓜蒂、石榴皮、苦参、连翘、黄柏和麒麟草。
上述制备原料按照重量分数计，包括黄豆粉30份、米糠10份、红薯粉15份、玉米粉10份、菜籽粕5份、复合菌剂2份、无机盐0.05份、免疫添加剂8份和成型助剂2份。
其中，复合菌剂包括EM菌和丁酸梭菌，添加的重量比为10:1，EM菌的总活菌数大于100 亿/mL，丁酸梭菌的活菌数大于30亿/mL；
无机盐为氯化钠；
免疫添加剂为甜瓜蒂、石榴皮、苦参、连翘、黄柏和麒麟草，添加的重量比为1：1：1：1：2：2。
上述小龙虾复合饲料的制备方法，包括以下步骤：
S1、称取上述重量份数的黄豆粉、米糠、红薯粉、玉米粉、菜籽粕和复合菌剂，将其混合均匀，在35℃条件下密闭发酵5天，期间每隔6h搅拌一次，得预处理饲料；
S2、分别称取上述重量份数的甜瓜蒂、石榴皮、苦参、连翘、黄柏和麒麟草，将其研磨粉碎后混匀，过筛(120目)，得免疫添加剂；
S3、将上述无机盐、上述成型助剂与步骤S1所得预处理饲料，以及步骤S2所得免疫添加剂混合，制粒，得小龙虾复合饲料。
对比例3
一种小龙虾复合饲料，包括以下制备原料：黄豆粉、米糠、红薯粉、玉米粉、菜籽粕、复合菌剂、无机盐、诱食剂和成型助剂；
其中，上述诱食剂包括蚯蚓粉和二甲基-β-丙酸噻亭；
上述免疫添加剂包括甜瓜蒂、石榴皮、苦参、连翘、黄柏和麒麟草。
上述制备原料按照重量分数计，包括黄豆粉30份、米糠10份、红薯粉15份、玉米粉10份、菜籽粕5份、复合菌剂2份、无机盐0.05份、诱食剂8份和成型助剂2份。
其中，复合菌剂包括EM菌和丁酸梭菌，添加的重量比为10:1，EM菌的总活菌数大于100 亿/mL，丁酸梭菌的活菌数大于30亿/mL；
无机盐为氯化钠；
诱食剂为蚯蚓粉和二甲基-β-丙酸噻亭，添加的重量比为8:1。
上述小龙虾复合饲料的制备方法，包括以下步骤：
S1、称取上述重量份数的黄豆粉、米糠、红薯粉、玉米粉、菜籽粕和复合菌剂，将其混合均匀，在35℃条件下密闭发酵5天，期间每隔6h搅拌一次，得预处理饲料；
S2、将上述无机盐、上述诱食剂、上述成型助剂与步骤S1所得预处理饲料混合，制粒，得小龙虾复合饲料。
对比例4
一种小龙虾复合饲料，包括以下制备原料：黄豆粉、米糠、红薯粉、玉米粉、菜籽粕、复合菌剂、无机盐、诱食剂、免疫添加剂和成型助剂；
其中，上述诱食剂包括蚯蚓粉和二甲基-β-丙酸噻亭；
上述免疫添加剂包括甜瓜蒂、石榴皮、苦参、连翘、黄柏和麒麟草。
上述制备原料按照重量分数计，包括黄豆粉30份、米糠10份、红薯粉15份、玉米粉10份、菜籽粕5份、复合菌剂2份、无机盐0.05份、诱食剂8份、免疫添加剂8份和成型助剂2份。
其中，复合菌剂为EM菌，EM菌的总活菌数大于100亿/mL；
无机盐为氯化钠；
诱食剂为蚯蚓粉和二甲基-β-丙酸噻亭，添加的重量比为8:1；
免疫添加剂为甜瓜蒂、石榴皮、苦参、连翘、黄柏和麒麟草，添加的重量比为1：1：1：1：2：2。
上述小龙虾复合饲料的制备方法，包括以下步骤：
S1、称取上述重量份数的黄豆粉、米糠、红薯粉、玉米粉、菜籽粕和复合菌剂，将其混合均匀，在35℃条件下密闭发酵5天，期间每隔6h搅拌一次，得预处理饲料；
S2、分别称取上述重量份数的甜瓜蒂、石榴皮、苦参、连翘、黄柏和麒麟草，将其研磨粉碎后混匀，过筛(120目)，得免疫添加剂；
S3、将上述无机盐、上述诱食剂、上述成型助剂与步骤S1所得预处理饲料，以及步骤 S2所得免疫添加剂混合，制粒，得小龙虾复合饲料。
对比例5
一种小龙虾复合饲料，包括以下制备原料：黄豆粉、米糠、红薯粉、玉米粉、菜籽粕、复合菌剂、无机盐、诱食剂、免疫添加剂和成型助剂；
其中，上述诱食剂包括蚯蚓粉和二甲基-β-丙酸噻亭；
上述免疫添加剂包括甜瓜蒂、石榴皮、苦参、连翘、黄柏和麒麟草。
上述制备原料按照重量分数计，包括黄豆粉30份、米糠10份、红薯粉15份、玉米粉10份、菜籽粕5份、复合菌剂2份、无机盐0.05份、诱食剂8份、免疫添加剂8份和成型助剂2份。
其中，复合菌剂为丁酸梭菌，丁酸梭菌的总活菌数大于30亿/mL；
无机盐为氯化钠；
诱食剂为蚯蚓粉和二甲基-β-丙酸噻亭，添加的重量比为8:1；
免疫添加剂为甜瓜蒂、石榴皮、苦参、连翘、黄柏和麒麟草，添加的重量比为1：1：1：1：2：2。
上述小龙虾复合饲料的制备方法，包括以下步骤：
S1、称取上述重量份数的黄豆粉、米糠、红薯粉、玉米粉、菜籽粕和复合菌剂，将其混合均匀，在35℃条件下密闭发酵5天，期间每隔6h搅拌一次，得预处理饲料；
S2、分别称取上述重量份数的甜瓜蒂、石榴皮、苦参、连翘、黄柏和麒麟草，将其研磨粉碎后混匀，过筛(120目)，得免疫添加剂；
S3、将上述无机盐、上述诱食剂、上述成型助剂与步骤S1所得预处理饲料，以及步骤 S2所得免疫添加剂混合，制粒，得小龙虾复合饲料。
对比例6
一种小龙虾复合饲料，包括以下制备原料：黄豆粉、米糠、红薯粉、玉米粉、菜籽粕、复合菌剂、无机盐、诱食剂、免疫添加剂和成型助剂；
其中，上述诱食剂包括蚯蚓粉和二甲基-β-丙酸噻亭；
上述免疫添加剂包括苦参、连翘和黄柏。
上述制备原料按照重量分数计，包括黄豆粉30份、米糠10份、红薯粉15份、玉米粉10份、菜籽粕5份、复合菌剂2份、无机盐0.05份、诱食剂8份、免疫添加剂8份和成型助剂2份。
其中，复合菌剂包括EM菌和丁酸梭菌，添加的重量比为10:1，EM菌的总活菌数大于100 亿/mL，丁酸梭菌的活菌数大于30亿/mL；
无机盐为氯化钠；
诱食剂为蚯蚓粉和二甲基-β-丙酸噻亭，添加的重量比为8:1；
免疫添加剂为苦参、连翘和黄柏，添加的重量比为1：1：2。
上述小龙虾复合饲料的制备方法，包括以下步骤：
S1、称取上述重量份数的黄豆粉、米糠、红薯粉、玉米粉、菜籽粕和复合菌剂，将其混合均匀，在35℃条件下密闭发酵5天，期间每隔6h搅拌一次，得预处理饲料；
S2、分别称取上述重量份数的苦参、连翘和黄柏，将其研磨粉碎后混匀，过筛(120目)，得免疫添加剂；
S3、将上述无机盐、上述诱食剂、上述成型助剂与步骤S1所得预处理饲料，以及步骤 S2所得免疫添加剂混合，制粒，得小龙虾复合饲料。
检测例
取同一批次、大小相同的健康小龙虾2400尾(每尾均重约为8.50g，计W0)，分为12组，每组200尾(计S0)，分别放入人工养殖池塘喂养。对人工养殖池塘进行分组编号并投喂小龙虾复合饲料，其中第1-5号人工养殖池塘对应投喂实施例1-5所制得的小龙虾复合饲料，第6-11号人工养殖池塘对应投喂对比例1-6所制得的小龙虾复合饲料，第12号人工养殖池塘投喂市售普通小龙虾复合饲料(为空白组)。
每组每日投喂量约为小龙虾体重的4-8％，且分两次投喂，基于小龙虾的夜间捕食习性，在上午8：00投喂30％的日粮，下午19：00投喂70％的日粮，各组日投喂量需保持一致，投喂期间保持氧气充足，溶氧≥6.0mg/L，pH为7.3±1.2，氨氮<0.2mg/L，亚硝酸盐<0.005mg/L。试验水温为自然水温，温度为21-26℃。
(1)生长性能评估
试验开始后，第30天在各个人工养殖池塘中随机捞取20尾测量体重，计算增重率，同时统计各个人工养殖池塘小龙虾的存活数(St)，计算存活率。
增重率的计算公式为：
增重率(％)＝(Wt－W0)/W0×100％；
存活率的计算公式为：
存活率(％)＝St/S0×100％；
其中，W0为试验小龙虾初始均重量，单位为g；Wt为喂养第30天的终末均重量，单位为g；t为喂养天数；S0为试验初始小龙虾存活数，单位为尾，St为喂养第30天的终末小龙虾存活数，单位为尾。
增重率和存活率的检测结果如表1所示。
表1：
从表1中可以看出采用本发明的小龙虾复合饲料，小龙虾经过30天喂养后，增重率均大于400％，其中实施例2的增重率达472.59％，其增重效果远大于市面常规售卖的小龙虾饲 (304.82％)，这主要是由于在本发明的小龙虾复合饲料中添加了诱食剂(蚯蚓粉和二甲基- β-丙酸噻亭)，蚯蚓作为小龙虾最喜爱的动物性饵料之一，其营养成分高，将其干燥粉碎后添加至饲料中不仅可以促进小龙虾的摄食率，还能增强小龙虾的体质，使其充分发挥其抗病促生长的功能。与实施例2相比，对比例2未添加诱食剂，其增重率仅为322.12％，且存活率也下降了约6％，这主要是由于在本发明中，蚯蚓粉除了发挥诱食功能外，其本身还含有丰富的可抑制病原菌生长的抗菌素和抗逆性因子，这些因子可以在小龙虾的体内发挥作用，使得小龙虾的体质得到增强。
其次，对其增重发挥中药作用的成分还包括复合菌剂EM菌和丁酸梭菌，在前期饲料制备过程中，经过菌剂发酵预处理，可以将黄豆粉、米糠、红薯粉、玉米粉和菜籽粕中的植物蛋白和纤维素分解成了易吸收的小分子物质，一方面提高了小龙虾对饲料的吸收利用效率，另一方面EM菌和丁酸梭菌本身也是有益菌，能够有效改善虾肠道微生物种群，促进小龙虾对营养物质的消化吸收。在这双重作用下，小龙虾的增重效果得到显著提高。
此外，从表1中也可以看出采用本发明的小龙虾复合饲料，其存活率均在94.5％以上，与空白组及对照组相比，存活率得到有效提高，这主要是由于在本发明的小龙虾复合饲料添加的免疫添加剂(甜瓜蒂、石榴皮、苦参、连翘、黄柏和麒麟草)能够有效提高小龙虾对病原体的抵抗能力。
(2)免疫功能评估
为了检测本发明小龙虾复合饲料中的免疫添加剂对小龙虾免疫功能的影响，在喂养小龙虾30天后分别从2号人工养殖池塘(喂养实施例2所得饲料)、8号人工养殖池塘(喂养对比例3所得饲料)、11号人工养殖池塘(喂养对比例6所得饲料)和12号人工养殖池塘(喂养常规市售小龙虾饲料)随机捞出20尾小龙虾，随后用1mL注射器从围心腔抽取血淋巴，置于4℃冰箱过夜，之后用4℃离心机离心(5000r/min)10min，取上清液(血清)，-20℃冻存备用。
本发明分别采用酸性蛋白酶(ACP)活性检测试剂盒(购于北京索莱宝科技有限公司，货号BC2305)、碱性蛋白酶(AKP)活性检测试剂盒(购于北京索莱宝科技有限公司，货号BC2300)、超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒(购于北京索莱宝科技有限公司，货号BC0170)、酚氧化酶(PO)活性检测试剂盒(购于上海谷研实业有限公司，货号GOY-016363)对小龙虾的酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、超氧化物歧化酶和酚氧化酶含量进行检测，具体检测方法参照相关的试剂盒说明书。
其中酸性磷酸酶以100mL血清在37℃时与基质作用30min产生1mg酚为1个酶活力单位。碱性磷酸酶以100mL血清在37℃时与基质作用30min产生1mg酚为1个酶活力单位。超氧化物歧化酶以每毫升反应液中超氧化物歧化酶抑制率达50％时所对应的超氧化物歧化酶量为1 个酶活力单位。酚氧化酶活力测量以L-DOPA(3,4-二羟苯丙氨酸，购自Sigma公司)为底物，在96孔酶标板中分别加入10μL血清与200μL 0.1mol/L磷酸钾缓冲液(pH6.0)，振荡混匀后向各样品孔中加入10μL 0.01mol/L的L-DOPA溶液，在490nm波长处读取吸光值，每隔5min读取1次，以试验条件下OD490每分钟增加0.001为1个酶活力单位。
酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、超氧化物歧化酶和酚氧化酶的检测结果如表2所示。
表2：
注：同列数据上标字母a和b不同表示差异显著(P<0.05)。
酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、超氧化物歧化酶和酚氧化酶是无脊椎动物非特异性免疫功能中4种重要的免疫因子，它们在机体对病原的识别与清除过程中发挥重要作用，是评估无脊椎动物免疫功能的重要指标。从表2中可以看出，本发明的小龙虾复合饲料与常规的市售小龙虾饲料相比，喂养30天后，小龙虾的酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、超氧化物歧化酶和酚氧化酶显著提高，可见本发明的小龙虾复合饲料对小龙虾免疫功能的提升效果显著优于常规的市售小龙虾饲料。
对比例3为未添加免疫添加剂组，与实施例2组相比，小龙虾的酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、超氧化物歧化酶和酚氧化酶显著降低，这是由于本发明的免疫添加剂中含有丰富的增强细胞免疫功能和提高抗菌效果的物质(如葫芦苦素、小檗碱、药根碱、木兰花碱和苦参碱等)，在小龙虾复合饲料中添加该成分有利于显著提高小龙虾的体质，减少疾病发生概率，促进小龙虾的健康生长。
综上所述，本发明的小龙虾复合饲料能够促进小龙虾的生长，提高小龙虾的增重率和存活率，此外，本发明的小龙虾复合饲料还能够有效提高小龙虾细胞免疫功能，增加小龙虾的抗病性能，对培育优良小龙虾品种也具有重要作用。
上面对本发明实施例作了详细说明，但是本发明不限于上述实施例，在所属技术领域普通技术人员所具备的知识范围内，还可以在不脱离本发明宗旨的前提下作出各种变化。此外，在不冲突的情况下，本发明的实施例及实施例中的特征可以相互组合。

Claims (5)

1.一种小龙虾复合饲料，其特征在于，包括以下重量份数计的制备原料：黄豆粉20-30份、米糠10-15份、红薯粉10-15份、玉米粉10-15份、菜籽粕5-10份、复合菌剂1-2份、无机盐0.02-0.1份、诱食剂2-8份、免疫添加剂2-8份和成型助剂为2-5份；
其中，所述诱食剂的制备原料包括蚯蚓粉和二甲基-β-丙酸噻亭；
所述免疫添加剂的制备原料包括甜瓜蒂、石榴皮、苦参、连翘、黄柏和麒麟草；
所述复合菌剂包括EM菌和丁酸梭菌；
所述小龙虾复合饲料由以下制备方法制备得到：
S1、将所述黄豆粉、所述米糠、所述红薯粉、所述玉米粉、所述菜籽粕和所述复合菌剂混合，发酵，得预处理饲料；
S2、将所述无机盐、所述诱食剂、所述成型助剂、所述免疫添加剂和步骤S1所得预处理饲料混合，制粒，得小龙虾复合饲料。
2.根据权利要求1所述的小龙虾复合饲料，其特征在于，所述蚯蚓粉和所述二甲基-β-丙酸噻亭的重量比为8-10：1。
3.根据权利要求1所述的小龙虾复合饲料，其特征在于，所述甜瓜蒂、石榴皮、苦参、连翘、黄柏和麒麟草的重量比为1：1：1：1：2：1-3。
4.根据权利要求1所述的小龙虾复合饲料，其特征在于，所述EM菌和丁酸梭菌的重量比为8-12：1；
其中，所述EM菌的总活菌数大于100亿/mL；所述丁酸梭菌的活菌数大于30亿/mL。
5.根据权利要求1所述的小龙虾复合饲料，其特征在于，所述无机盐为氯化钠。
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