CN114805030A - 大苞荆芥提取物中二萜类成分及其制备方法和应用 - Google Patents
大苞荆芥提取物中二萜类成分及其制备方法和应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN114805030A CN114805030A CN202210637000.7A CN202210637000A CN114805030A CN 114805030 A CN114805030 A CN 114805030A CN 202210637000 A CN202210637000 A CN 202210637000A CN 114805030 A CN114805030 A CN 114805030A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- schizonepeta
- methanol
- extract
- nepetabnate
- gradient elution
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 241000951473 Schizonepeta Species 0.000 title claims abstract description 24
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 14
- 239000000284 extract Substances 0.000 title claims description 39
- 150000004141 diterpene derivatives Chemical class 0.000 title description 5
- 229930004069 diterpene Natural products 0.000 title description 4
- 241000612118 Samolus valerandi Species 0.000 title 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 title 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 13
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 11
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims abstract description 9
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 75
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 42
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 24
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 21
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 19
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 claims description 14
- 238000010992 reflux Methods 0.000 claims description 14
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 14
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 claims description 13
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 claims description 12
- 239000003480 eluent Substances 0.000 claims description 11
- 241000951376 Schizonepeta tenuifolia Species 0.000 claims description 9
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 8
- 125000001033 ether group Chemical group 0.000 claims description 7
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 7
- 238000007873 sieving Methods 0.000 claims description 7
- 238000002791 soaking Methods 0.000 claims description 7
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 7
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 6
- 240000009215 Nepeta cataria Species 0.000 claims description 5
- 235000010679 Nepeta cataria Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 claims description 5
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 claims description 5
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 claims description 4
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 4
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 abstract description 5
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 abstract description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 abstract description 2
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 10
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 7
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 5
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 4
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 3
- 238000000425 proton nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 3
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 2
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000207923 Lamiaceae Species 0.000 description 2
- 229930012538 Paclitaxel Natural products 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 238000005100 correlation spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 238000001052 heteronuclear multiple bond coherence spectrum Methods 0.000 description 2
- 238000004896 high resolution mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 2
- 230000005918 in vitro anti-tumor Effects 0.000 description 2
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 2
- 229960001592 paclitaxel Drugs 0.000 description 2
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 description 2
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N taxol Chemical compound O([C@@H]1[C@@]2(C[C@@H](C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3([C@H]21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N 0.000 description 2
- 150000003505 terpenes Chemical class 0.000 description 2
- -1 terpenoid compound Chemical class 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 241001529733 Nepeta Species 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 230000000118 anti-neoplastic effect Effects 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 210000000748 cardiovascular system Anatomy 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 208000019065 cervical carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000004737 colorimetric analysis Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 206010073071 hepatocellular carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000005570 heteronuclear single quantum coherence Methods 0.000 description 1
- 238000000990 heteronuclear single quantum coherence spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C35/00—Compounds having at least one hydroxy or O-metal group bound to a carbon atom of a ring other than a six-membered aromatic ring
- C07C35/22—Compounds having at least one hydroxy or O-metal group bound to a carbon atom of a ring other than a six-membered aromatic ring polycyclic, at least one hydroxy group bound to a condensed ring system
- C07C35/37—Compounds having at least one hydroxy or O-metal group bound to a carbon atom of a ring other than a six-membered aromatic ring polycyclic, at least one hydroxy group bound to a condensed ring system with a hydroxy group on a condensed system having three rings
- C07C35/42—Compounds having at least one hydroxy or O-metal group bound to a carbon atom of a ring other than a six-membered aromatic ring polycyclic, at least one hydroxy group bound to a condensed ring system with a hydroxy group on a condensed system having three rings derived from the phenanthrene skeleton
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C29/00—Preparation of compounds having hydroxy or O-metal groups bound to a carbon atom not belonging to a six-membered aromatic ring
- C07C29/74—Separation; Purification; Use of additives, e.g. for stabilisation
- C07C29/76—Separation; Purification; Use of additives, e.g. for stabilisation by physical treatment
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C29/00—Preparation of compounds having hydroxy or O-metal groups bound to a carbon atom not belonging to a six-membered aromatic ring
- C07C29/74—Separation; Purification; Use of additives, e.g. for stabilisation
- C07C29/76—Separation; Purification; Use of additives, e.g. for stabilisation by physical treatment
- C07C29/86—Separation; Purification; Use of additives, e.g. for stabilisation by physical treatment by liquid-liquid treatment
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C2603/00—Systems containing at least three condensed rings
- C07C2603/02—Ortho- or ortho- and peri-condensed systems
- C07C2603/04—Ortho- or ortho- and peri-condensed systems containing three rings
- C07C2603/22—Ortho- or ortho- and peri-condensed systems containing three rings containing only six-membered rings
- C07C2603/26—Phenanthrenes; Hydrogenated phenanthrenes
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Botany (AREA)
- Mycology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
本发明涉及大苞荆芥地上部分分离纯化技术领域，是一种NepetabrateF及其制备方法和作为制备预防肿瘤和抗肿瘤药物的应用，前者是将大苞荆芥地上部分经乙醇加热回流提取得大苞荆芥总浸膏，用石油醚、氯仿、乙酸乙酯进行萃取得到石油醚部位浸膏，再用硅胶柱色谱梯度洗脱分离，将第3个馏分经高效液相色谱梯度洗脱后纯化分离得到。本发明首次公开了NepetabrateF，本发明所述的NepetabrateF对HepG‑2细胞和HeLa细胞具有较强的抑制作用，从而使得NepetabrateF能够作为制备预防肿瘤药物和抗肿瘤药物的应用。
Description
技术领域
本发明涉及大苞荆芥地上部分分离纯化技术领域，是一种大苞荆芥提取物中二萜类成分及其制备方法和应用，其中，大苞荆芥提取物中二萜类成分为所述Nepetabrate F的简称。
背景技术
萜类化合物是天然产物中的一大类，也是结构种类最为复杂、生物活性最为多样的天然产物类别之一。大苞荆芥Nepeta bracteata Benth.为唇形科(Labiatae)荆芥属Nepeta植物，维吾尔名为“祖发印地”，为一种进口药材，现代药理学研究表明其所含的萜类化合物成分具有包括中枢神经系统作用、心血管系统作用、抗肿瘤、抗病毒等在内的广泛的药理活性。因此，开发和利用大苞荆芥的萜类体化合物，进一步挖掘其潜在的药用价值，并对其单体化合物的结构和理化性质进行确定和表征，系统评价萜类化合物抗肿瘤的能力对于开发利用大苞荆芥植物具有重要意义。
发明内容
本发明提供了一种大苞荆芥提取物中二萜类成分及其制备方法和应用，克服了上述现有技术之不足，本发明首次公开了Nepetabrate F，本发明所述的Nepetabrate F对HepG-2 细胞和HeLa细胞具有较强的抑制作用，从而使得Nepetabrate F能够作为制备预防肿瘤药物和抗肿瘤药物的应用。
本发明的技术方案之一是通过以下措施来实现的：一种Nepetabrate F，化学结构式为
下面是对上述发明技术方案之一的进一步优化或/和改进：
上述Nepetabrate F按照下述方法得到：第一步，将大苞荆芥地上部分粉碎过筛并加入乙醇，在室温下浸泡3小时至4小时后，在50℃至60℃条件下加热回流提取3次，每次1小时至3小时，合并每次回流提取液并减压回收、浓缩，得大苞荆芥总浸膏；第二步，将大苞荆芥总浸膏用水分散成混悬液后，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯进行萃取，将萃取液浓缩得到各部位浸膏；第三步，取石油醚部位浸膏用硅胶柱色谱梯度洗脱分离后得到8个馏分，其中，硅胶柱色谱梯度洗脱液包括氯仿和甲醇，氯仿和甲醇的体积比依次为1:0、100:1、80:1、50:1、40:1、30:1、10:1、4:1；第四步，将第3个馏分经高效液相色谱梯度洗脱后纯化分离，并收集洗脱物，在第18.5分钟处得到Nepetabrate F。
上述第一步中，每1g大苞荆芥地上部分加入8mL至12mL乙醇。
上述第四步中，高效液相色谱梯度洗脱的洗脱液为甲醇和水的混合液，其中，甲醇和水的体积比为85：15。
本发明的技术方案之二是通过以下措施来实现的：一种Nepetabrate F的制备方法，其特征在于按照下述步骤进行：第一步，将大苞荆芥地上部分粉碎过筛并加入乙醇，在室温下浸泡3小时至4小时后，在50℃至60℃条件下加热回流提取3次，每次1小时至3 小时，合并每次回流提取液并减压回收、浓缩，得大苞荆芥总浸膏；第二步，将大苞荆芥总浸膏用水分散成混悬液后，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯进行萃取，将萃取液浓缩得到各部位浸膏；第三步，取石油醚部位浸膏用硅胶柱色谱梯度洗脱分离后得到8个馏分，其中，硅胶柱色谱梯度洗脱液包括氯仿和甲醇，氯仿和甲醇的体积比依次为1:0、100:1、 80:1、50:1、40:1、30:1、10:1、4:1；第四步，将第3个馏分经高效液相色谱梯度洗脱后纯化分离，并收集洗脱物，在第18.5分钟处得到Nepetabrate F。
下面是对上述发明技术方案之二的进一步优化或/和改进：
上述第一步中，每1g大苞荆芥地上部分加入8mL至12mL乙醇。
上述第四步中，高效液相色谱梯度洗脱的洗脱液为甲醇和水的混合液，其中，甲醇和水的体积比为85：15。
本发明的技术方案之三是通过以下措施来实现的：一种Nepetabrate F作为制备预防肿瘤药物的应用。
本发明的技术方案之四是通过以下措施来实现的：一种Nepetabrate F作为制备抗肿瘤药物的应用。
本发明的技术方案之五是通过以下措施来实现的：一种Nepetabrate F作为制备防治肿瘤保健品的应用。
本发明首次公开了Nepetabrate F，本发明所述的Nepetabrate F对HepG-2细胞和HeLa细胞具有较强的抑制作用，从而使得Nepetabrate F能够作为制备预防肿瘤药物和抗肿瘤药物的应用。
附图说明
附图1为本发明Nepetabrate F的化学结构图。
附图2为本发明Nepetabrate F的HR-MS图谱。
附图3为本发明Nepetabrate F的1H-NMR谱图。
附图4为本发明Nepetabrate F的13C-APT谱图。
附图5为本发明Nepetabrate F的H1-H1 COSY谱图。
附图6为本发明Nepetabrate F的HSQC谱图。
附图7为本发明Nepetabrate F的HMBC谱图。
附图8为本发明Nepetabrate F的NOESY谱图。。
具体实施方式
本发明不受下述实施例的限制，可根据本发明的技术方案与实际情况来确定具体的实施方式。本发明中所提到各种化学试剂和化学用品如无特殊说明，均为现有技术中公知公用的化学试剂和化学用品；本发明中的百分数如没有特殊说明，均为质量重量百分数；本发明中的溶液若没有特殊说明，均为溶剂为水的水溶液，例如，盐酸溶液即为盐酸水溶液；本发明中的常温、室温一般指15℃到25℃的温度，一般定义为25℃。
下面结合实施例对本发明作进一步描述：
实施例1：该Nepetabrate F，化学结构式为
将本实施例所述的Nepetabrate F进行核磁共振氢谱(1H-NMR)和核磁共振碳谱(13C-APT)分析，本实施例所述的Nepetabrate F的1H-NMR谱图如图3所示，实施例所述的Nepetabrate F的13C-APT谱图如图4所示，结合图2、图5、图6、图7、图8对图 3和图4进行图谱解析，将图3和图4各峰进行归属，图3和图4的峰归属如表1所示。通过图3、图4和表1的数据可知，本实施例所述的Nepetabrate F的化学结构式如图1 所示，本实施例所述的Nepetabrate F为无定形粉末，易溶于氯仿、甲醇。
实施例2：作为上述实施例的优化，该Nepetabrate F按照下述方法得到：第一步，将大苞荆芥地上部分粉碎过筛并加入乙醇，在室温下浸泡3小时至4小时后，在50℃至 60℃条件下加热回流提取3次，每次1小时至3小时，合并每次回流提取液并减压回收、浓缩，得大苞荆芥总浸膏；第二步，将大苞荆芥总浸膏用水分散成混悬液后，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯进行萃取，将萃取液浓缩得到各部位浸膏；第三步，取石油醚部位浸膏用硅胶柱色谱梯度洗脱分离后得到8个馏分，其中，硅胶柱色谱梯度洗脱液包括氯仿和甲醇，氯仿和甲醇的体积比依次为1:0、100:1、80:1、50:1、40:1、30:1、10:1、4:1；第四步，将第3个馏分经高效液相色谱梯度洗脱后纯化分离，并收集洗脱物，在第18.5 分钟处得到Nepetabrate F。
实施例3：作为上述实施例的优化，第一步中，每1g大苞荆芥地上部分加入8mL 至12mL乙醇。
实施例4：作为上述实施例的优化，第四步中，高效液相色谱梯度洗脱的洗脱液为甲醇和水的混合液，其中，甲醇和水的体积比为85：15。
实施例5：该Nepetabrate F的制备方法，按照下述步骤进行：第一步，将大苞荆芥地上部分粉碎过筛并加入乙醇，在室温下浸泡3小时至4小时后，在50℃至60℃条件下加热回流提取3次，每次1小时至3小时，合并每次回流提取液并减压回收、浓缩，得大苞荆芥总浸膏；第二步，将大苞荆芥总浸膏用水分散成混悬液后，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯进行萃取，将萃取液浓缩得到各部位浸膏；第三步，取石油醚部位浸膏用硅胶柱色谱梯度洗脱分离后得到8个馏分，其中，硅胶柱色谱梯度洗脱液包括氯仿和甲醇，氯仿和甲醇的体积比依次为1:0、100:1、80:1、50:1、40:1、30:1、10:1、4:1；第四步，将第3个馏分经高效液相色谱梯度洗脱后纯化分离，并收集洗脱物，在第18.5分钟处得到 Nepetabrate F。
实施例6：该Nepetabrate F作为制备预防肿瘤药物的应用。
实施例7：该Nepetabrate F作为制备抗肿瘤药物的应用。
实施例8：该Nepetabrate F作为制备防治肿瘤保健品的应用。
实施例9：该Nepetabrate F按照下述方法得到：第一步，将6kg大苞荆芥地上部分粉碎过筛并加入40L乙醇，在室温下浸泡3小时后，在50℃条件下加热回流提取3次，每次2小时，合并每次回流提取液并减压回收、浓缩，得大苞荆芥总浸膏；第二步，将 437.0g大苞荆芥总浸膏用水分散成混悬液后，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯进行萃取，将萃取液浓缩得到各部位浸膏；第三步，取134.8g石油醚部位浸膏用硅胶柱色谱梯度洗脱分离后得到8个馏分，氯仿和甲醇的体积比依次为1:0、100:1、80:1、50:1、40:1、 30:1、10:1、4:1；第四步，将第3个馏分经高效液相色谱梯度洗脱后纯化分离，并收集洗脱物，在第18.5分钟处得到Nepetabrate F。
将本发明实施例9得到的Nepetabrate F进行核磁共振氢谱(1H-NMR)和核磁共振碳谱(13C-APT)分析。HR-MS图谱、1H-NMR谱图、13C-APT谱图、H1-H1 COSY谱图、HSQC 谱图、HMBC谱图、NOESY谱图如图2至图8所示。
结合图2、图5、图6、图7、图8对图3和图4进行图谱解析，将图3和图4各峰进行归属，图3和图4的峰归属如表1所示。通过图3、图4和表1的数据可知，本发明 Nepetabrate F的化学结构式如图1所示，本发明Nepetabrate F为无定形粉末，易溶于氯仿、甲醇。
将本发明所述的Nepetabrate F进行体外抗肿瘤药效学实验，体外抗肿瘤药效学实验利用MTT比色法。
以Nepetabrate F为实验组，以Paclitaxel(紫杉醇，抗肿瘤药物)为对照组，同时设立空白组，实验组、对照组和空白组选取HepG-2(人肝癌细胞)细胞和HeLa(人宫颈癌)细胞为实验对象，培养基稀释后，以6×104/mL的密度接种于96孔板，每孔100 μl，培养箱中正常培养24小时后，各组加入相对应的药物，使各组药物的最终浓度分别为2.5μg/mL(1组)，5μg/mL(2组)，10μg/mL(3组)，20μg/mL(4组)，40μ g/mL(5组)，共设5个浓度，每个浓度3个复孔；培养48小时后，于每孔加MTT 10μl 染色；继续培养四小时后，吸弃原培养液，每孔加入DMSO 150μl，置摇床上低速振荡10 min，使结晶物充分溶解，并于酶联免疫检测仪570nm波长处检测光密度值，根据光密度值计算50％抑制浓度(IC50，μg/mL)，光密度值计算IC50的计算方法为现有公知技术。实验组、对照组对HepG-2细胞和HeLa细胞的IC50如表2所示。表2数据可以看出，本发明所述的Nepetabrate F对HepG-2细胞和HeLa细胞均具有一定的抑制作用。
综上所述，本发明首次公开了Nepetabrate F，本发明所述的Nepetabrate F对HepG-2 细胞和HeLa细胞具有较强的抑制作用，从而使得Nepetabrate F能够作为制备预防肿瘤药物和抗肿瘤药物的应用。
以上技术特征构成了本发明的实施例，其具有较强的适应性和实施效果，可根据实际需要增减非必要的技术特征，来满足不同情况的需求。
表1
表2
Claims (10)
1.一种Nepetabrate F，其特征在于其化学结构式为
2.根据权利要求1所述的Nepetabrate F，其特征在于按照下述方法得到：第一步，将大苞荆芥地上部分粉碎过筛并加入乙醇，在室温下浸泡3小时至4小时后，在50℃至60℃条件下加热回流提取3次，每次1小时至3小时，合并每次回流提取液并减压回收、浓缩，得大苞荆芥总浸膏；第二步，将大苞荆芥总浸膏用水分散成混悬液后，依次用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯进行萃取，将萃取液浓缩得到各部位浸膏；第三步，取石油醚部位浸膏用硅胶柱色谱梯度洗脱分离后得到8个馏分，其中，硅胶柱色谱梯度洗脱液包括氯仿和甲醇，氯仿和甲醇的体积比依次为1:0、100:1、80:1、50:1、40:1、30:1、10:1、4:1；第四步，将第3个馏分经高效液相色谱梯度洗脱后纯化分离，并收集洗脱物，在第18.5分钟处得到Nepetabrate F。
3.根据权利要求2所述的Nepetabrate F，其特征在于第一步中，每1g大苞荆芥地上部分加入8mL至12mL乙醇。
4.根据权利要求2或3所述的Nepetabrate F，其特征在于第四步中，高效液相色谱梯度洗脱的洗脱液为甲醇和水的混合液，其中，甲醇和水的体积比为85:15。
5.一种根据权利要求1所述的Nepetabrate F的制备方法，其特征在于按照下述步骤进行：第一步，将大苞荆芥地上部分粉碎过筛并加入乙醇，在室温下浸泡3小时至4小时后，在50℃至60℃条件下加热回流提取3次，每次1小时至3小时，合并每次回流提取液并减压回收、浓缩，得大苞荆芥总浸膏；第二步，将大苞荆芥总浸膏用水分散成混悬液后，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯进行萃取，将萃取液浓缩得到各部位浸膏；第三步，取石油醚部位浸膏用硅胶柱色谱梯度洗脱分离后得到8个馏分，其中，硅胶柱色谱梯度洗脱液包括氯仿和甲醇，氯仿和甲醇的体积比依次为1:0、100:1、80:1、50:1、40:1、30:1、10:1、4:1；第四步，将第3个馏分经高效液相色谱梯度洗脱后纯化分离，并收集洗脱物，在第18.5分钟处得到Nepetabrate F。
6.根据权利要求5所述的Nepetabrate F的制备方法，其特征在于第一步中，每1g大苞荆芥地上部分加入8mL至12mL乙醇。
7.根据权利要求5或6所述的Nepetabrate F的制备方法，其特征在于第四步中，高效液相色谱梯度洗脱的洗脱液为甲醇和水的混合液，其中，甲醇和水的体积比为85：15。
8.一种根据权利要求1或2或3或4所述的Nepetabrate F作为制备预防肿瘤药物的应用。
9.一种根据权利要求1或2或3或4所述的Nepetabrate F作为制备抗肿瘤药物的应用。
10.一种根据权利要求1或2或3或4所述的Nepetabrate F作为制备防治肿瘤保健品的应用。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210637000.7A CN114805030B (zh) | 2022-06-07 | 2022-06-07 | 大苞荆芥提取物中二萜类成分及其制备方法和应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202210637000.7A CN114805030B (zh) | 2022-06-07 | 2022-06-07 | 大苞荆芥提取物中二萜类成分及其制备方法和应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN114805030A true CN114805030A (zh) | 2022-07-29 |
| CN114805030B CN114805030B (zh) | 2024-02-13 |
Family
ID=82521443
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202210637000.7A Active CN114805030B (zh) | 2022-06-07 | 2022-06-07 | 大苞荆芥提取物中二萜类成分及其制备方法和应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN114805030B (zh) |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106045819A (zh) * | 2016-06-29 | 2016-10-26 | 吉首大学 | 一种云实三环二萜及其制法和用途 |
| CN113943211A (zh) * | 2021-09-08 | 2022-01-18 | 新疆维吾尔自治区中药民族药研究所 | 维吾尔药材中二萜及其制备方法和作为制备预防或/和治疗炎症的抗炎、抗菌药物中的应用 |
-
2022
- 2022-06-07 CN CN202210637000.7A patent/CN114805030B/zh active Active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106045819A (zh) * | 2016-06-29 | 2016-10-26 | 吉首大学 | 一种云实三环二萜及其制法和用途 |
| CN113943211A (zh) * | 2021-09-08 | 2022-01-18 | 新疆维吾尔自治区中药民族药研究所 | 维吾尔药材中二萜及其制备方法和作为制备预防或/和治疗炎症的抗炎、抗菌药物中的应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN114805030B (zh) | 2024-02-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN113861008A (zh) | 大苞松香二萜及其制备方法和作为制备预防或/和治疗炎症的抗炎、抗菌药物中的应用 | |
| CN113831245A (zh) | 大苞荆芥提取物中的二萜及其制备方法和应用 | |
| CN108503521B (zh) | 愈创木烷型倍半萜a及其制备方法和作为制备预防肿瘤和抗肿瘤药物的应用 | |
| CN114044734B (zh) | 松香烷二萜及其制备方法和应用 | |
| CN114890870A (zh) | 大苞荆芥提取物中松香烷二萜及其制备方法和应用 | |
| CN114805030A (zh) | 大苞荆芥提取物中二萜类成分及其制备方法和应用 | |
| CN114853610A (zh) | 大苞荆芥中松香烷二萜的制备方法及其应用 | |
| CN113666894B (zh) | 一种从老鹰茶中提取分离呋喃酮类化合物的方法及其应用 | |
| CN115010581A (zh) | 神香草中松香烷二萜及其制备方法和应用 | |
| CN113061124B (zh) | 倍半萜二聚体化合物及其制备方法、应用和药物组合物 | |
| CN109369399B (zh) | 1,3-o-二阿魏酸酯-2-甲氧基丙二醇及其制备方法和应用 | |
| CN115057763A (zh) | 新型鸟巢烷型二萜类化合物及其制备方法 | |
| CN113861126A (zh) | 高度氧化二萜及其制备方法和作为制备预防或/和治疗炎症的抗炎、抗菌药物中的应用 | |
| CN109651233B (zh) | 一种生物碱类化合物及其从棒节石斛中提取分离的方法与应用 | |
| CN113943211A (zh) | 维吾尔药材中二萜及其制备方法和作为制备预防或/和治疗炎症的抗炎、抗菌药物中的应用 | |
| CN108299178B (zh) | 愈创木烷型倍半萜b及其制备方法和作为制备预防肿瘤和抗肿瘤药物的应用 | |
| CN115340519B (zh) | 苯骈色原酮化合物的制备方法和用途 | |
| CN113024494B (zh) | 一种菲类化合物、制备方法及应用 | |
| CN117447478A (zh) | 骆驼刺中的鸟氨酸系生物碱及其提取方法和应用 | |
| CN118373836B (zh) | 一种从小黄皮中提取的新化合物、提取方法及应用 | |
| CN116621854B (zh) | 臭椿叶中萜类化合物及其制备方法和应用 | |
| CN114805383B (zh) | 一种从老鹰茶中提取二聚呋喃酮类化合物的方法及其应用 | |
| CN115043718B (zh) | 蕨素类倍半萜化合物及其制备方法及用途 | |
| CN115651055B (zh) | 一种齐墩果烷型三萜皂苷化合物及其制备方法和应用 | |
| CN116003238B (zh) | 茉莉根中倍半萜类化合物及其提取方法和用途 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |