CN114755200A - 基于光动力治疗的可视化监测系统及方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种基于光动力治疗的可视化监测系统及方法,系统包括:样品池模块,用于放置待测样品并为待测样品提供监测环境;光源模块,用于为样品池模块提供光源;成像模块,用于监测光源模块在开启和关闭时的待测样品的结构变化,还用于定位样品池模块中造影剂的聚集位点以及光敏剂的聚集和作用位点。本发明实现对光动力治疗过程的可视化监测,该监测手段无需对样品进行染色,属于非标记成像范畴;成像激光功率极低及非标记的手段有效降低了成像过程中的光毒性,避免了对光动力治疗实际生理过程造成的影响。相对于已有的成像监测手段,本发明还无需对样品进行复杂的前处理,实现样品自由。
Description
技术领域
本发明涉及光学衍射层析成像技术领域,尤其涉及一种基于光动力治疗的可视化监测系统及方法。
背景技术
光动力治疗是一种区别于传统治疗手段(如手术治疗、化疗、放疗及免疫治疗)的新型肿瘤治疗技术,是利用激光活化光敏剂治疗肿瘤疾病的一种全新技术。该治疗技术利用特定波长的光照射肿瘤组织,能活化主动或被动聚集在肿瘤组织的光敏剂,并生成羟基自由基及单线态氧等强氧化性物质。单态氧与附近的生物大分子发生氧化反应,产生细胞毒性进而杀伤肿瘤细胞。光动力治疗技术起源于上世纪70年代末八十年代初,因其具备无创、无损、治疗时间短、毒副作用低、治疗精准和可协同肿瘤免疫治疗等优点在近年来得到了飞速发展,被广泛应用于各种皮肤类疾病、肿瘤、细菌感染类疾病的治疗中。
值得注意的是,尽管目前众多研究表明光动力治疗技术具备时空可控、毒副作用小、可增强抗肿瘤免疫等突出的优点,但目前该疗法在临床的实际应用局限于对手术治疗无效或对放射疗法不敏感的病例,要发展为临床一线治疗手段,仍面临着许多挑战。制约光动力治疗效率的三大关键性因素分别为光源、光敏剂以及氧气。近年来,对于光动力治疗的研究,研究者们主要将精力投入于如何改善激发光源、光敏剂品质以及氧气含量来提高光动力治疗的效果。
虽然目前光动力治疗的研究开展的如火如荼,但是对于光动力治疗的机理性研究少之又少。相关研究仅停留于表面现象(如利用染色法观察细胞是否死亡、直观测量肿瘤组织是否不再增长或缩小),至于激光活化所产生的强氧化物质实际作用于哪个细胞器,如何引起该细胞器形态发生变化导致细胞凋亡的研究几乎没有,现有技术报道的多是猜测强氧化物质作用于线粒体,使得线粒体形态发生变化进而导致细胞凋亡,然而目前并没有可视化的直接证据。主要瓶颈在于没有一种成像手段能够对光动力治疗下的各种细胞器形态变化进行长时程的、三维的监测。
发明内容
本发明提供一种基于光动力治疗的可视化监测系统及方法,用以解决现有技术中光动力治疗实时可视化监测的发展现状的局限,实现对光动力治疗过程的实时、三维的可视化监测。
本发明提供一种基于光动力治疗的可视化监测系统,包括:
样品池模块,用于放置待测样品并为待测样品提供监测环境;
光源模块,用于为所述样品池模块提供光源,所述光源包含但不仅限于白光光源、连续激光光源及飞秒激光光源;
成像模块,用于监测所述光源模块在开启和关闭时的待测样品的结构变化,还用于定位所述样品池模块中造影剂的聚集位点以及光敏剂的聚集和作用位点;
根据本发明提供的一种基于光动力治疗的可视化监测系统,所述光源模块包括光学衍射层析成像照明光源模块、宽场荧光成像照明光源模块和光动力治疗飞秒激光激发光源模块。
根据本发明提供的一种基于光动力治疗的可视化监测系统,所述成像模块包括光学衍射层析成像模块和宽场荧光成像模块;
所述光学衍射层析成像模块用于监测所述光源模块在开启和关闭时的待测样品的结构变化;
所述宽场荧光成像模块用于定位所述样品池模块中造影剂的聚集位点以及光敏剂的聚集和作用位点。
根据本发明提供的一种基于光动力治疗的可视化监测系统,所述监测环境包括恒定温度、湿度、二氧化碳浓度、造影剂和待测样品所需营养物质。
根据本发明提供的一种基于光动力治疗的可视化监测系统,所述待测样品的结构变化包括微纳结构变化及三维形态变化。
根据本发明提供的一种基于光动力治疗的可视化监测系统,所述待测样品包括与多种类型光敏剂共同孵育的肿瘤细胞、细菌或微生物。
根据本发明提供的一种基于光动力治疗的可视化监测系统,所述系统还包括倒置荧光显微镜镜架模块和二向色镜组模块,所述光源模块连接所述二向色镜组模块,所述光源模块、样品池模块和成像模块由上至下设置在倒置荧光显微镜镜架模块上。
根据本发明提供的一种基于光动力治疗的可视化监测系统,所述光敏剂包括多种不同浓度光敏剂。
根据本发明提供的一种基于光动力治疗的可视化监测系统,所述造影剂包括多种具有特定靶向细胞器功能的造影剂。
本发明还提供一种基于光动力治疗的可视化监测方法,该方法应用于所述的基于光动力治疗的可视化监测系统中,包括:
准备样品池模块和待测样品;
在所述样品池模块放置所述待测样品;
打开光源模块持续照射所述样品池模块,并同时打开成像模块对样品池模块进行监测,获得成像结果。
本发明提供的一种基于光动力治疗的可视化监测系统及方法,通过成像模块实现对光动力治疗过程的可视化监测,该监测手段无需对样品进行染色,属于非标记成像范畴;成像激光功率极低及非标记的手段有效降低了成像过程中的光毒性,避免了对光动力治疗实际生理过程造成的影响;另外,通过该成像手段可实现三维、实时地可视化监测。本发明相对于已有的成像监测手段,无需对样品进行复杂的前处理(如染色),实现样品自由。同时,监测成像系统的光路设计简单易行,便于实现后续产业化发展。该方法的成像手段普适其他药物(如抗肿瘤药物)的前期筛选。
附图说明
为了更清楚地说明本发明或现有技术中的技术方案,下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作一简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图是本发明的一些实施例,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1是本发明实施例提供的基于光动力治疗的可视化监测系统的组成示意图;
图2是本发明实施例提供的基于光动力治疗的可视化监测系统的结构示意图;
图3是本发明实施例提供的白光激发下的成像模块的光路图;
图4是本发明实施例提供的飞秒激光激发下的成像模块的光路图;
图5是本发明实施例提供的基于光动力治疗的可视化监测方法的流程示意图。
附图标记:
101:样品池模块;102:光源模块;103:成像模块;
201:光学衍射层析成像照明光源模块;202:宽场荧光成像照明光源模块;203:光动力治疗飞秒激光激发光源模块;204:倒置荧光显微镜镜架模块;205:二向色镜组模块;206:宽场荧光成像系统模块;207:样品池模块;208:光学衍射层析成像模块;
301:405nm单纵模连续激光器;302:银镜;303:声光调制器;304:二分之一玻片;305:+1级衍射光被偏振分光棱镜;306:耦合器;307:第一透镜;308:扫描透镜;309:保偏光纤;310:Flash 4.0CMOS相机;311:第二透镜;312:平板分束镜;313:滤波片;314:汞灯;315:二向色镜;316:第三透镜;317:60倍水镜;318:样品池;319:100倍油镜;320:第四透镜;321Panda相机;322:光纤飞秒激光器;323:扩束镜;324:第五透镜;325:第六透镜。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚,下面将结合本发明中的附图,对本发明中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
光学衍射层析技术(ODT显微成像技术)是一种新型的非标记、非侵入的三维显微成像技术,由于考虑光场的衍射效应并结合定量相位成像,ODT显微成像技术能够感知纳米尺度的折射率变化,并对生物组织样品进行长时程、无损伤的三维成像观测,在细胞生物学中得到了广泛的应用,促进了生物医学的快速发展,成为现阶段成像技术的研究热点。基于其非标记、光毒性小、可长时程检测及三维成像等优点,将宽场荧光成像系统与其结合可实现对光动力治疗过程的实时可视化监测。宽场荧光显微镜是一种通过使用特定波长激发光激发样本中荧光探针,并通过相机接收荧光信号成像的技术。该技术可以对细胞群体、单个细胞结构和特定蛋白结构进行成像。宽场荧光成像技术具有极高的时间分辨能力,适用于二维成像,可用于活体细胞的动态成像。在此基础上,本发明提出了一种基于光动力治疗的可视化监测系统,下面结合图1描述本发明实施例的系统,包括:
样品池模块101,用于放置待测样品并为待测样品提供监测环境;
光源模块102,用于为所述样品池模块提供光源,所述光源包含但不仅限于白光光源、连续激光光源及飞秒激光光源;
成像模块103,用于监测所述光源模块在开启和关闭时的待测样品的结构变化,还用于定位所述样品池模块中造影剂的聚集位点以及光敏剂的聚集和作用位点。
本发明实施例的基于光动力治疗的可视化监测系统可实现对光动力治疗过程非标记无创、三维地实时监测。样品池模块能保持恒定温度、适度及二氧化碳浓度,在为样品的长时程监测提供良好、舒适的周围环境的同时提供相应的营养物质,成像模块正对着样品池,实时监测在光动力治疗激发光光源模块在开启/关闭时样品结构变化;还能监测具有特定靶向细胞器功能的造影剂(tracker)在何种三维形态结构的细胞器处聚集,进而区分出各种类型的细胞器,与此同时,实时定位出光敏剂的聚集、作用位点。
在本发明的至少一个实施例中,所述光源模块101包括光学衍射层析成像照明光源模块201、宽场荧光成像照明光源模块202和光动力治疗飞秒激光激发光源模块203。
需要说明的是,采用光动力治疗飞秒激光激发光源模块203能够实现精准、穿透深度深的光动力治疗。
在本发明的至少一个实施例中,所述成像模块包括光学衍射层析成像模块206和宽场荧光成像模块208,两套检测系统在同一个焦平面上,使得ODT和FL能够在同一时间段对样品进行实时成像;
所述光学衍射层析成像模块206用于监测所述光源模块在开启和关闭时的待测样品的结构变化;
所述宽场荧光成像模块208用于定位所述样品池模块中造影剂的聚集位点以及光敏剂的聚集和作用位点。
本发明实施例中的基于光动力治疗的可视化监测系统可基于光学衍射层析成像技术,实时监测细胞内各种细胞器在激光和光敏剂的活化作用下产生的三维形态变化以及细胞的凋亡过程;还可基于宽场荧光成像技术,借助各种具有特定靶向细胞器功能的造影剂(tracker)识别出光学衍射层析成像拍摄出的各种细胞器分别是什么类型细胞器。与此同时,利用造影剂的荧光效应,还可以清晰、定量分析出各类光敏剂聚集、作用于哪种细胞器。
需要说明的是,传统商用靶向不同细胞器的造影剂主要目的在于区分自制的光敏剂主要靶向作用在那种细胞器上,以及区分不同三维结构的细胞器是何种细胞器,从而达到识别光动力过程中产生的过氧化物到底是作用在何种细胞器,从而促使细胞凋亡的。
如下给出两个实施例描述两种光源下的可视化监视:
实施例1:白光激发下的光动力治疗可视化监测
如图3所示,展示了本实施例中odt成像模块、宽场荧光成像模块以及光源模块的光路设计,本实施例的对白光激发下的光动力治疗过程实现非标记无创、三维、实时可视化监测的显微成像系统包括:405nm单纵模连续激光器301、银镜302、声光调制器303、二分之一玻片304、+1级衍射光被偏振分光棱镜305、耦合器306、第一透镜307、扫描透镜308、保偏光纤309、Flash 4.0CMOS相机310、第二透镜311、平板分束镜312、滤波片313、汞灯314、二向色镜315、第三透镜316、60倍水镜317、样品池318、100倍油镜319、第四透镜320和Panda相机321。
如图3所示,显微成像系统是在商用显微镜(舜宇IRX60镜架)上改装而成的。光学衍射层析成像使用的是405nm的单纵模连续激光器301作为照明光源,在银镜302的作用下调节激光方向,在被声光调制器303调制后,+1级衍射光被偏振分光棱镜305分成两路,并分别通过耦合器306耦合进入保偏光纤309。其中参考光耦合前经过一延时光路,使得两路光同时到达相机。旋转二分之一波片304可调节分光比。信号光从光纤输出后,首先被透镜307准直,之后通过一个两端装有偏转方向正交的一对扫描振镜308的4-f系统以实现准直光束偏转方向的二维扫描,光束通过二向色镜315发生折返,经过第三透镜316聚焦在60倍水镜317的后焦面上,以实现在样品池318中的样品上进行不同方向的准直光束照明。透过样品的光被物镜319收集。参考光从光纤309输出后,被透镜后经过平板分束镜312改变光路方向与上述物镜收集的信号光合束,再通过第二透镜311聚焦在Flash 4.0CMOS相机310上。
在白光激发光动力治疗的应用场景下,宽场荧光成像和光动力治疗过程使用同一个光源汞灯(即低功率下进行荧光成像,高功率下进行光动力治疗)。低功率的白光通过滤波片313和二向色镜315,经第三透镜316聚焦在60倍水镜317的后焦面上,实现对样品池样品的宽场照射,样品中tracker所发出的荧光信号被物镜19收集,经第四透镜320聚焦在Panda相机321上;高功率的白光通过滤波片313和二向色镜315,经第三透镜316聚焦在60倍水镜317的后焦面上,实现对样品中光敏剂的激发,进行光动力治疗,并通过光学衍射层析成像进行对样品内部微纳结构变化的可视化检测。
实施例二:飞秒激光激发下的光动力治疗可视化监测
如图4所示,本实施例的对飞秒激光激发下的光动力治疗过程实现非标记无创、三维、实时可视化监测的显微成像系统包括:405nm单纵模连续激光器301、银镜302、声光调制器303、二分之一玻片304、+1级衍射光被偏振分光棱镜305、耦合器306、第一透镜307、扫描透镜308、保偏光纤309、Flash 4.0CMOS相机310、第二透镜311、平板分束镜312、滤波片313、汞灯314、二向色镜315、第三透镜316、60倍水镜317、样品池318、100倍油镜319、透镜320和Panda相机321、光纤飞秒激光器322、扩束镜323、透镜324和透镜325。
本实施例中,在odt成像的光路基础上增添了双光子光动力治疗的光路模块,使得整个系统用可以实现诊疗一体化。
如图4所示,显微成像系统是在商用显微镜(舜宇IRX60镜架)上改装而成的。光学衍射层析成像使用的是405nm的单纵模连续激光器301作为照明光源,在银镜302的作用下调节激光方向,在被声光调制器303调制后,+1级衍射光被偏振分光棱镜305分成两路,并分别通过耦合器306耦合进入保偏光纤309。其中参考光耦合前经过一延时光路,使得两路光同时到达相机。旋转二分之一波30片4可调节分光比。信号光从光纤输出后,首先被透镜307准直,之后通过一个两端装有偏转方向正交的一对扫描振镜308的4-f系统以实现准直光束偏转方向的二维扫描,光束通过二向色镜315反射,经过第三透镜316聚焦在60倍水镜317(奥林巴斯,LUMPLFLN60XW)的后焦面上,以实现在样品池318中的样品上进行不同方向的准直光束照明。透过样品的光被物镜319收集。参考光从光纤309输出后,被透镜后经过平板分束镜312改变光路方向与上述物镜收集的信号光合束,再通过透镜311聚焦在Flash4.0CMOS相机310上。
在飞秒激光激发动力治疗的应用场景下,宽场荧光成像汞灯作为照明光源。低功率的白光通过滤波片313和二向色镜315,经第三透镜316聚焦在60倍水镜317的后焦面上,实现对样品池样品的宽场照射,样品中tracker所发出的荧光信号被物镜319收集,经第四透镜320聚焦在Panda相机321上。光动力治疗借助于飞秒激光激发光源模块,飞秒激光激发光源模块包括:飞秒激光器322、银镜302、扩束器23、扫描振镜323、第五透镜324、第六透镜325和二向色镜315;其中,样品放置在样品池318上,飞秒激光器322发出高斯光束的激光,经两面银镜302反射后,经过扩束器扩束323,经扫描振镜308反射依次经过扫描透镜324和套筒透镜325聚焦再经二向色镜反射,由物镜317聚焦至位于样品池内的样品上,由飞秒激光激发进行光动力治疗,并通过光学衍射层析成像进行对样品内部微纳结构变化的可视化检测。
在本发明的至少一个实施例中,所述监测环境包括恒定温度、湿度、二氧化碳浓度、造影剂和待测样品所需营养物质。
在本发明的至少一个实施例中,所述待测样品的结构变化包括微纳结构变化及三维形态变化。
在本发明的至少一个实施例中,所述待测样品包括与多种类型光敏剂共同孵育的肿瘤细胞、细菌或微生物。
在本发明的至少一个实施例中,所述系统还包括倒置荧光显微镜镜架模块204和二向色镜组模块205,所述光源模块连接所述二向色镜组模块,所述光源模块、样品池模块和成像模块由上至下设置在倒置荧光显微镜镜架模块上。
在本发明的至少一个实施例中,所述光敏剂包括多种不同浓度光敏剂。
在本发明的至少一个实施例中,所述造影剂包括多种具有特定靶向细胞器功能的造影剂。
下面对本发明提供的基于光动力治疗的可视化监测方法进行描述,下文描述的基于光动力治疗的可视化监测方法应用于上述的基于光动力治疗的可视化监测系统中,包括如下步骤:
步骤501、准备样品池模块和待测样品;
步骤502、在所述样品池模块放置所述待测样品;
步骤503、打开光源模块持续照射所述样品池模块,并同时打开成像模块对样品池模块进行监测,获得成像结果。
在本发明的至少一个实施例中,监测准备阶段具体包括如下步骤:
准备样品池模块,将待测样品放置在样品池模块中,通上二氧化碳,保持恒定温度;
将光学衍射层析成像系统模块和宽场荧光成像系统模块正对着样品池模块。其中光学衍射层析成像模块和宽场荧光成像模块的照明光路均位于样品池的正上方,两模块的收集信号光路均位于样品池的正下方。
在本发明的至少一个实施例中,准备待检测样品具体包括如下步骤:
将生长状态良好的各类肿瘤细胞悬浮液(或者细菌及各种微生物样品)以5000个/孔的密度接种于两块96孔板上,并将两块96孔板放置于含5%的CO2恒温培养箱(37℃)中培育孵化24h。待细胞(或者细菌及各种微生物样品)贴壁,达到使用状态后,从培养箱中取出两块96孔板,使用移液枪将两块96孔板中的培养基吸出,向其中一块96孔板各个孔内加入不同浓度(0、2.5、5、10、20、40、80μg/mL)的各类光敏剂,以没有加入光敏剂的实验组作为空白对照。将该96孔板放入含5%的CO2恒温培养箱(37℃)中继续培育孵化4h后拿出备用。与此同时,向另外一块96孔板的各个孔内加入各类具有特定靶向细胞器功能的造影剂(tracker),随后将该96孔板放入含5%的CO2恒温培养箱(37℃)中继续培育孵化4h后拿出备用。
需要说明的是,使用不同浓度的光敏剂进行MTT检测,能够选择作用时间点。如效应强,则相应降低光敏剂浓度。不同类型的光敏剂对应不同的光敏剂药物的光动力治疗。共定位时,光敏剂和造影剂两者都放,用来识别自制的光敏剂到底富集在何种细胞器上;在进行光动力治疗的只需要放置光敏剂。
在本发明的至少一个实施例中,获得成像结果后,能够根据成像结果确定各种细胞器的微纳结构及三维形态,具体包括:
将与各种具有特定靶向细胞器功能的造影剂(tracker)共孵育4h的各类肿瘤细胞悬浮液(或者细菌及各种微生物样品)置于样品池模块进行宽场荧光成像以及光学衍射层析成像。该步骤旨在确定各种形态的微纳结构是什么细胞器,以便于后期判断光动力治疗过程中造影剂聚集、作用在何种细胞器上。
需要说明的是,先通过造影剂获得细胞结构;造影剂获得细胞结构的时候是打开连续激光器,进行宽场荧光成像和ODT成像;
光动力治疗过程主要是依靠光敏剂在光的作用下产生强氧化物质,促使细胞凋亡。光动力治疗过程是打开白光光源或者飞秒激光器光源,随后打开单纵模连续激光器进行odt成像,检测细胞内部三维微纳结构的变化。
在本发明的至少一个实施例中,光动力治疗的可视化检测具体包括:
将与不同浓度的各类光敏剂共孵育4h的各类肿瘤细胞悬浮液(或者细菌及各种微生物样品)置于样品池模块进行光动力治疗。首先打开光动力治疗激发光光源模块,对样品进行5-10min的持续性照射;与此同时,打开光学衍射层析成像模块对治疗过程进行长时程的实时监测。
需要说明的是,将光学衍射层析成像实时拍摄的原始数据进行解算,同时对解算的成像结果进行定性及定量分析。例如,对于ODT长时程拍摄的光动力治疗过程,使用ImageJ制作完成四维的ODT图像处理,完成光动力治疗下的各类细胞器四维微纳结构变化的定性分析。同时定量计算分析各类细胞器的数值变化
最后应说明的是:以上实施例仅用以说明本发明的技术方案,而非对其限制;尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明,本领域的普通技术人员应当理解:其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分技术特征进行等同替换;而这些修改或者替换,并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。
Claims (10)
1.一种基于光动力治疗的可视化监测系统,其特征在于,包括:
样品池模块,用于放置待测样品并为待测样品提供监测环境;
光源模块,用于为所述样品池模块提供光源,所述光源包含但不仅限于白光光源、连续激光光源及飞秒激光光源;
成像模块,用于监测所述光源模块在开启和关闭时的待测样品的结构变化,还用于定位所述样品池模块中造影剂的聚集位点以及光敏剂的聚集和作用位点。
2.根据权利要求1所述的基于光动力治疗的可视化监测系统,其特征在于,所述光源模块包括光学衍射层析成像照明光源模块、宽场荧光成像照明光源模块和光动力治疗飞秒激光激发光源模块。
3.根据权利要求2所述的基于光动力治疗的可视化监测系统,其特征在于,所述成像模块包括光学衍射层析成像模块和宽场荧光成像模块;
所述光学衍射层析成像模块用于监测所述光源模块在开启和关闭时的待测样品的结构变化;
所述宽场荧光成像模块用于定位所述样品池模块中造影剂的聚集位点以及光敏剂的聚集和作用位点。
4.根据权利要求1至3中任一所述的基于光动力治疗的可视化监测系统,其特征在于,所述监测环境包括恒定温度、湿度、二氧化碳浓度、造影剂和待测样品所需营养物质。
5.根据权利要求1至3中任一所述的基于光动力治疗的可视化监测系统,其特征在于,所述待测样品的结构变化包括微纳结构变化及三维形态变化。
6.根据权利要求1至3中任一所述的基于光动力治疗的可视化监测系统,其特征在于,所述待测样品包括与多种类型光敏剂共同孵育的肿瘤细胞、细菌或微生物。
7.根据权利要求1至3中任一所述的基于光动力治疗的可视化监测系统,其特征在于,所述系统还包括倒置荧光显微镜镜架模块和二向色镜组模块,所述光源模块连接所述二向色镜组模块,所述光源模块、样品池模块和成像模块由上至下设置在倒置荧光显微镜镜架模块上。
8.根据权利要求1至3中任一所述的基于光动力治疗的可视化监测系统,其特征在于,所述光敏剂包括多种不同浓度光敏剂。
9.根据权利要求1至3中任一所述的基于光动力治疗的可视化监测系统,其特征在于,所述造影剂包括多种具有特定靶向细胞器功能的造影剂。
10.一种基于光动力治疗的可视化监测方法,其特征在于,该方法应用于权利要求1至9中任一所述的基于光动力治疗的可视化监测系统中,包括:
准备样品池模块和待测样品;
在所述样品池模块放置所述待测样品;
打开光源模块持续照射所述样品池模块,并同时打开成像模块对样品池模块进行监测,获得成像结果。
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