CN114717165B - 一种复合菌剂及包含该复合菌剂的生防种衣剂 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种复合菌剂，其包括贝莱斯芽孢杆菌ZLP‑101、枯草芽孢杆菌BSD‑2以及解淀粉芽孢杆菌WS‑8；所述贝莱斯芽孢杆菌ZLP‑101的保藏号为CGMCC No.20130；所述解淀粉芽孢杆菌WS‑8的保藏编号为CGMCC No.11787；所述枯草芽孢杆菌BSD‑2的保藏编号为CGMCC No.8440。本发明还涉及包含上述复合菌剂的生防种衣剂。本发明安全、高效、无污染，对人无害，对环境友好，可用于防治病虫害且提高作物种子出苗率、促进植株生长。

Description

一种复合菌剂及包含该复合菌剂的生防种衣剂

技术领域

本发明涉及一种复合菌剂及包含该复合菌剂的生防种衣剂。

背景技术

种衣剂作为防治种传、土传病害及地下害虫最简便、经济有效的途经，已成为农业生产上不可或缺的农药制品之一。

目前，土传病害如瓜类的灰霉病、疫病、白粉病、根腐病、枯萎病、菌核病、立枯病等、茄果类的灰霉病、菌核病、黄萎病、根腐病、枯萎病、立枯病等、豆类灰霉病、枯萎病、疫病、根腐病、细菌性疫病等，还有蚜虫、飞虱、粉虱等等同翅目害虫、蛴螬等鞘翅目地下害虫给农业生产带来严重的损失，严重影响作物的产量和质量；农作物随着农业保护地栽培面积的不断扩大以及复种指数的增加，土传真菌病害严重，往往多种病害混合发生，成为农业生产的严重障碍。

但当前的种衣剂多以中高毒化学药剂为主，药剂在土壤中的毒性残留时间长，造成土壤、水源污染，土壤微生态平衡破坏、有害生物产生抗药性等问题。而功能微生物具有杀虫防病、促进生长、提高产量等作用，由于其安全环保，以微生物及其活性代谢产物为主要成分研发生物型种衣剂是新的发展方向。

发明内容

本发明的目的是提供一种安全、高效、无污染，对人畜无害，对环境友好，可用于防治病虫害且提高作物种子出苗率、促进植株生长的复合菌剂及包含该复合菌剂的生防种衣剂。

本发明采用如下技术方案：

一种复合菌剂，其包括贝莱斯芽孢杆菌ZLP-101、枯草芽孢杆菌BSD-2以及解淀粉芽孢杆菌WS-8；所述贝莱斯芽孢杆菌ZLP-101的保藏号为CGMCC No.20130；所述解淀粉芽孢杆菌WS-8的保藏编号为CGMCC No.11787；所述枯草芽孢杆菌BSD-2的保藏编号为CGMCCNo.8440。

进一步的，复合菌剂中，贝莱斯芽孢杆菌ZLP-101的活菌量≥1.0×10¹⁰cfu/mL、枯草芽孢杆菌BSD-2的活菌量≥5×10⁷cfu/mL、解淀粉芽孢杆菌WS-8的活菌量≥2×10⁸cfu/mL。

一种包含上述复合菌剂的生防种衣剂，其包括复合菌剂、增效化学助剂、分散剂、增稠剂、着色剂以及成膜剂。

其中，所述增效化学助剂为复合菌剂质量的0.01％；所述分散剂的质量为复合菌剂质量的2％；所述增稠剂的质量为复合菌剂质量的0.1％；所述着色剂的质量为复合菌剂质量的0.2％；所述成膜剂的质量为复合菌剂质量的3％。

其中，所述增效化学助剂为高效氯氟氰菊酯、噻虫嗪、吡虫啉、戊唑醇、噻虫胺、氯虫、嘧菌酯、咯菌腈、恶霉灵、噻呋酰胺、精甲霜灵、灭幼脲、定虫隆、啶虫脒、溴氰菊酯、辛硫磷、丙溴磷、杀螟松、异丙威、哒幼酮、虫死净、虫酰肼、甲氧虫酰肼、环虫酰肼、呋喃虫酰肼、吡丙醚、灭幼脲、除虫脲、氯虫脲、氯酰脲、杀铃脲、杀螟丹、杀虫单、杀虫双、杀虫环、噻嗪酮、氯虫苯甲酰胺、螺虫乙酯、虫螨腈、杀虫磺、甲维盐、溴虫腈、敌百虫、呋喃丹、除虫菊酯、丁醚脲、丁烯氯虫腈、吡蚜酮、烯啶虫胺中的一种以上。

其中，所述分散剂为木质素磺酸钠、鞣酸、焦磷酸钠中的一种以上。

其中，所述增稠剂为黄原胶、硅酸铝镁中的一种以上。

其中，所述成膜剂为海藻酸钠、羧甲基纤维素钠、黄原胶、淀粉中的一种以上。

其中，所述着色剂为酸性品红、玫瑰精、甜菜红、紫胶红、越桔红、辣椒红中的一种以上。

其中，所述生防种衣剂通过如下方法制备：

(1)分别将贝莱斯芽孢杆菌ZLP-101、枯草芽孢杆菌BSD-2以及解淀粉芽孢杆菌WS-8进行发酵，然后将获得的发酵液进行混合，得到复合菌剂；

(2)向复合菌剂中加入增效化学助剂，混合均匀；

(3)向步骤(2)的混合液中依次加入分散剂、增稠剂、着色剂，最后加入成膜剂，充分搅拌均匀，得到生防种衣剂。

本发明的有益效果在于：本发明的生防种衣剂安全、高效、无污染，对人畜无害，对环境友好，可用于防治玉米纹枯病、叶斑病，黄瓜枯萎病、炭疽病，番茄早疫病，花生根腐病，小麦黑穗病、葡萄白腐病等作物病害。同时，还可防治蛴螬、金针虫、甜纹夜蛾、斜纹夜蛾、小菜蛾、蝼蛄、根蛆等虫害。另外，具有提高黄瓜、玉米、花生等作物种子出苗率、促进植株生长的作用。

附图说明

图1为贝莱斯芽孢杆菌ZLP-101在LB固体培养基上的菌落形态。

图2为贝莱斯芽孢杆菌ZLP-101的菌体形态。

图3为枯草芽孢杆菌BSD-2在LB固体培养基上的菌落形态。

图4为枯草芽孢杆菌BSD-2的菌体形态。

图5为解淀粉芽孢杆菌WS-8在LB固体培养基上的菌落形态。

图6为解淀粉芽孢杆菌WS-8的菌体形态。

图7为本发明生防种衣剂包衣的玉米种子。

具体实施方式

以下结合优选实施例对本发明的技术方案进行详细地阐述。以下实施例仅仅用于说明和解释本发明，而不构成对本发明技术方案的限制。

实施例1贝莱斯芽孢杆菌ZLP-101的抑菌谱测定

贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)ZLP-101，保藏号为CGMCC No.20130，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心进行保藏，地址为：中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏日期为2020年7月3日。

选取常见植物真菌病害病原菌如：马铃薯干腐病菌、马铃薯早疫病菌、马铃薯枯萎病菌、马铃薯环腐病菌、梨黑斑病菌、番茄灰霉病菌、辣椒炭疽病菌、番茄根腐病菌、黄瓜灰霉菌、棉花枯萎病菌、葡萄白腐病菌、葡萄灰霉病菌、苹果轮纹病菌、烟草赤星病菌等多种植物病原菌为靶标，采用平板对峙法测定菌株贝莱斯芽孢杆菌ZLP-101的抑菌谱。

表1贝莱斯芽孢杆菌ZLP-101对不同植物病原菌的抑制作用

通过表1的实施数据可知，贝莱斯芽孢杆菌ZLP-101对所试14种植物真菌病害均有较强的拮抗作用，其中对马铃薯干腐病菌的抑制作用最强，抑菌圈直径可达30.15mm，其次为枯萎病菌，抑菌圈达29.28mm。

实施例2解淀粉芽孢杆菌WS-8的抑菌谱测定

解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)WS-8，保藏号为CGMCCNo.11787，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心进行保藏，地址为：中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。

选取常见植物真菌病害病原菌如：黄瓜灰霉病菌、棉花枯萎病菌、梨黑斑病菌、黄瓜炭疽病菌、黄瓜黑星病菌、苹果轮纹病菌、粉红单瑞、小麦赤霉病菌、番茄早疫病菌、玉米小斑病菌、辣椒疫霉病菌、番茄叶霉病菌、尖孢镰刀菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、维氏气单胞菌、嗜水气单胞菌、迟钝爱德华氏菌、白色念珠菌、枯草芽胞杆菌C-3等20种植物病原菌为靶标，采用平板对峙法测定解淀粉芽孢杆菌WS-8的抑菌谱。

表2解淀粉芽孢杆菌WS-8无菌滤液抑菌谱的测定

通过表2的实施数据可知，解淀粉芽孢杆菌WS-8对所试20种植物真菌病害均有较强的拮抗作用，其中对黄瓜灰霉病菌的抑制作用最强，抑菌圈直径可达22.5mm，其次为苹果轮纹菌，抑菌圈达21.5mm。

实施例3枯草芽孢杆菌BSD-2的抑菌谱测定

枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BSD-2，保藏号为CGMCC No.8440，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心进行保藏，地址为：中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。

选取常见植物真菌病害病原菌如：黄瓜灰霉病菌、棉花枯萎病菌、梨黑斑病菌、黄瓜炭疽病菌、苹果轮纹病菌、小麦赤霉病菌、番茄早疫病菌、玉米小斑病菌、辣椒疫霉病菌、尖孢镰刀菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌等13种植物病原菌为靶标，采用平板对峙法测定枯草芽孢杆菌BSD-2的抑菌谱。

表3枯草芽孢杆菌BSD-2无菌滤液抑菌谱的测定

通过表3的实施数据可知，枯草芽孢杆菌BSD-2对所试13种植物真菌病害均有较强的拮抗作用，其中对黄瓜灰霉病菌的抑制作用最强，抑菌圈直径可达23.8mm。

实施例4生防菌复合菌剂的制备

从-80℃冰箱中取出甘油保存的3株生防菌(贝莱斯芽孢杆菌ZLP-101、解淀粉芽孢杆菌WS-8、枯草芽孢杆菌BSD-2)，置于-4℃冰箱解冻后，在超净台中用无菌接种针，蘸取菌液分别在做好的NB培养基(牛肉膏5g/L、蛋白胨10g/L、NaCl 5g/L、葡萄糖10g/L，pH为7.0±0.2)平皿中划线，然后放置32℃恒温培养箱中培养18-24h。

用无菌接种针挑取平皿中的单菌落至NB液体培养基中，将液体培养基置于32℃恒温摇床培养箱中，转速180r/min，使发酵液中活菌数达到1.0×10¹⁰cfu/mL以上并且产生芽孢量大于90％。

根据发酵液中的活菌数对发酵液进行稀释或浓缩后，取3株生防菌的发酵液混合制得复合菌剂，使复合菌剂中贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)ZLP-101的活菌量≥1.0×10¹⁰cfu/mL，枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BSD-2的活菌量≥5×10⁷cfu/mL，解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)WS-8的活菌量≥2×10⁸cfu/mL。

实施例5生防种衣剂中复合菌剂的无菌滤液抑菌谱测定

选取马铃薯干腐病菌、马铃薯早疫病菌、马铃薯枯萎病菌、马铃薯环腐病菌、马铃薯干腐病菌、烟草赤星病菌、维氏气单胞菌、嗜水气单胞菌、迟钝爱德华氏菌、白色念珠菌、枯草芽胞杆菌C-3、玉米叶斑病菌、玉米纹枯病菌、小麦黑穗病菌、花生根腐病菌、葡萄白腐病菌、番茄早疫病菌、黄瓜灰霉病菌、黄瓜枯萎病菌、黄瓜炭疽病菌为靶标，采用平板对峙法测定复合菌剂(实施例4)的抑菌谱。

表4本发明生防种衣剂中复合菌剂对不同病原菌的抑制作用

通过表4的实施数据可以看出，生防种衣剂中复合菌剂的无菌滤液抑菌谱，发现，不仅对黄瓜灰霉病菌、苹果轮纹病、黄瓜炭疽病、玉米叶斑病、玉米纹枯病、花生根腐病菌、嗜水气单胞菌、等植物病原菌有较强的拮抗作用，而且对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、维氏气单胞菌等病原细菌也有显著的抑菌效果。说明该复合菌剂抗菌谱较宽，对多种不同类型的病原菌均有抑菌作用，在对作物病害防治领域具有很好的应用效果。

实施例6生防菌复合菌剂对鞘翅目、鳞翅目、同翅目及蜚蠊目昆虫的杀虫效果

将贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)ZLP-101、枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)BSD-2和解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)WS-8的发酵产物调配成5×10¹⁰cfu/L、5×10⁷cfu/L、2×10⁸cfu/L浓度，配置药土，加入适量食料(碎玉米秸秆等)并混匀，以清水配制药土作为对照。将容量4L的塑料桶作容器，每桶放置混合均匀药土150g。采用药土法，选取大小一致的白星花金龟、甜菜夜蛾、斜纹夜蛾、小菜蛾的三龄幼虫、菜青虫、斑衣蜡蝉及蟑螂，处理重复3次，在相对湿度为50％～70％、温度为25℃～28℃的环境中。每处理试虫数量为15头，重复3次。接虫后置于室内常温培养，每隔8h观察一次，56h后统计死亡率。

表5复合菌剂对鞘翅目、鳞翅目、同翅目及蜚蠊目昆虫的灭杀作用

通过表5的实施数据可以看出，复合菌剂对蛴螬、甜菜夜蛾、斜纹夜蛾、小菜蛾的三龄幼虫、菜青虫、斑衣蜡蝉及蟑螂等害虫有很好的杀灭作用。

实施例7生防种衣剂的制备

1)将贝莱斯芽孢杆菌ZLP-101发酵菌液、解淀粉芽孢杆菌WS-8发酵菌液及枯草芽孢杆菌BSD-2发酵菌液混合均匀制得复合菌剂，使得复合菌剂中贝莱斯芽孢杆菌ZLP-101的活菌量≥1.0×10¹⁰cfu/mL、枯草芽孢杆菌BSD-2的活菌量≥5×10⁷cfu/mL、解淀粉芽孢杆菌WS-8的活菌量≥2×10⁸cfu/mL。再按比例在复合菌剂中加入复合菌剂质量0.01％的增效化学助剂高效氯氟氰菊酯。

2)再依次加入复合菌剂质量2％的分散剂木质磺酸钠、0.1％的增稠剂黄原胶和0.2％的着色剂酸性品红。最后加入3％的成膜剂海藻酸钠，用搅拌器充分搅拌均匀，即可得生防种衣剂。

实施例8生防种衣剂的性能测定

生防种衣剂主要为防治玉米和黄瓜的病虫害，选择了两种市场上防治玉米病虫害的生防种衣剂1和生防种衣剂2。生防种衣剂1为拌种组合装(噻虫嗪+微生物菌剂)，购自北京沃瑞康种衣剂生物科技有限公司公司。生防种衣剂2为微生物拌种剂，购自浙江浙丰种衣剂有限公司公司。按照FAO相关标准，对市售的两种生防种衣剂以及实施例7制备的生防种衣剂的理化性质指标与性状稳定性进行测定，结果见表6。

表6生防种衣剂的性能测定结果

根据表6的数据可见，本发明生防种衣剂在稳定性、包衣均匀度、成膜时间等性能均优于市面上主防玉米黄瓜病虫害的生防种衣剂1和2，表明，本发明生防种衣剂成膜快、包衣脱落率低、均匀度及冷热稳定性良好。

实施例9生防种衣剂对蛴螬的防治效果

试验共设3个处理，CK为不包衣的玉米裸种，处理为市场上生防种衣剂1进行包衣的玉米种子(1)、市场上生防种衣剂2进行包衣的玉米种子(2)和本发明的生防种衣剂(实施例7)进行包衣的玉米种子(3)，各生防种衣剂与种子的质量比为1∶50。

处理和CK分别设3个平行，共计12个小区，每小区面积20m²，共180m²，随机区组排列。5月13日播种，5月25日出苗，6月20日，调查每小区所有植株，记录被害株数，计算被害株率和防效。

被害率(％)＝受害株数/总株数×100。

保苗率(％)＝(总株数-受害株数)/总株数×100。

防效(％)＝(各处理保苗率-CK保苗率)/(1-CK保苗率)×100。

表7本发明生防种衣剂对玉米蛴螬的防治效果

注：表中同列小写字母不同表示差异显著(P<0.05)，大写字母不同表示差异极显著(P<0.01)，下同。

根据表7的实施数据可以看出，本发明的生防种衣剂对玉米蛴螬的防效达80.77％，显著高于市面上的生防种衣剂1和2，表明，本发明生防种衣剂对玉米地下害虫蛴螬有显著的防治效果。

实施例10生防种衣剂对金针虫、根蛆和蝼蛄的防治效果

在玉米、小麦和大蒜上施用，表8的实施数据结果表明，经过本发明生防种衣剂(实施例7)的包衣后的作物种子，对金针虫的防效达73.50％，对蝼蛄的防效达79.43％，对根蛆的防效达72.50％。

表8本发明生防种衣剂对金针虫、根蛆和蝼蛄的防治效果

实施例11生防种衣剂对玉米叶斑病的防治效果

试验设1个处理，CK对不包衣的玉米裸种，处理为本发明生防种衣剂(实施例7)包衣的玉米种子，生防种衣剂与种子的质量比为1∶50。

将培养的玉米小斑病菌与灭菌后的土壤以1∶3的比例混匀，在无菌条件下常温放置7d，待土壤表面长满菌丝后，将包有本发明的生防种衣剂的玉米种子种下，每个处理20颗种子，重复3次，对照组不包衣，待玉米出苗后，检测包衣本发明生防种衣剂是否能够降低病原菌对于玉米种子的侵染与伤害。

发病率(％)＝(发病的玉米植株数/总植株数)×100。

防治效果(％)＝(处理发病率-对照发病率)/对照发病率×100。

表9本发明生防种衣剂对玉米叶斑病的防治效果

接种玉米小斑病菌后，不包衣的种子生长势较包衣的种子长势差。根据表9的实施数据结果表明，本发明的生防种衣剂对玉米叶斑病的防效达83.64％，可以明显抑制玉米叶斑病的发生，降低其发病率。

实施例12生防种衣剂在对玉米、小麦、番茄等作物病害的防治效果

通过在玉米、小麦、番茄、黄瓜和花生上的应用，根据表10的实施数据可以看出，本发明的生防种衣剂对玉米纹枯病、小麦黑穗病、番茄早疫病、黄瓜枯萎病和花生根腐病的防效在76.22％～85.25％之间。结果表明，本发明生防种衣剂(实施例7)对玉米、小麦、花生和番茄、黄瓜等作物的病害有很好的防治效果。

表10本发明生防种衣剂对作物病害的防治效果

实施例13生防种衣剂对黄瓜种子及盆栽植株的促生效果

试验设3个处理，CK为不包衣的裸种；处理1为市售生防种衣剂1(拌种组合装)的黄瓜包衣种子；处理2为市售生防种衣剂2(微生物拌种剂)的黄瓜包衣种子；处理3为本发明生防种衣剂(实施例7)的黄瓜包衣种子。各生防种衣剂与种子的质量比为1∶50。

选用直径9cm的玻璃培养皿作为发芽容器，每个培养皿铺3层滤纸，各处理选取10粒黄瓜种子置于培养皿中，加入6mL灭菌水，以后每d加入2mL灭菌水。每处理重复3次。将培养皿放入25℃培养箱中进行发芽试验。发芽试验以种子根长0.2cm作为发芽标志，培养第1d开始统计发芽数量，以后每d统计1次，分别计算发芽势和发芽率。

选用直径15cm的塑料花盆做黄瓜盆栽出苗试验，土壤选蛭石与营养土为2∶1，将催好芽的种子每盆播种10粒，种子上面均匀覆盖2cm厚的土壤，每处理重复3次，放入培养箱萌发。期间根据水分情况适当进行补水，在播种后第4d调查出苗数，计算出苗率。30d后测定各处理的植株总重、叶片面积、根重和叶绿素含量。便携式叶绿素仪测定叶绿素含量、株高用卷尺测、游标卡尺测量茎粗。

发芽势(％)＝(2d发芽的种子数/供试种子总数)×100。

发芽率(％)＝(4d发芽的种子数/供试种子总数)×100。

出苗率(％)＝(出苗的种子数/供试的种子总数)×100。

表11本发明生防种衣剂对黄瓜种子发芽的影响

根据表11的实施数据可以看出，本发明生防种衣剂包衣的黄瓜种子在发芽势、发芽率及出苗率方面都显著优于不包衣的黄瓜裸种子及市面上主防玉米黄瓜病虫害的生防种衣剂1和2，表明本发明生防种衣剂在促进黄瓜种子发芽和出苗有显著的促进作用。

表12本发明生防种衣剂对盆栽黄瓜植株的促生效果

由表12实施数据结果可以看出，与对照组不包衣的种子相比，生防种衣剂包衣处理的黄瓜在叶片面积、植株总重、根重和叶绿素含量都显著增高，且较市面上的生防种衣剂1和2的植株总重、根重和叶绿素含量也显著增高，表明本发明的生防种衣剂对黄瓜的植株有较好的促生效果。

实施例14生防种衣剂对玉米种子的促生效果

试验设3个处理，每个处理5个平行。CK为不包衣的裸种；处理1为市售生防种衣剂1(拌种组合装)的玉米包衣种子；处理2为市售生防种衣剂2(微生物拌种剂)的玉米包衣种子；处理3为本发明生防种衣剂(实施例7)的玉米包衣种子。各生防种衣剂与种子的质量比为1∶50。

选用直径20cm的塑料花盆做玉米盆栽出苗试验，土壤选枳实与营养土为2∶1，每个处理100粒种子(一盆均匀撒播20粒，进行标记)，出苗后调查出苗数量，计算出苗率。出苗率(％)＝出苗数/播种数×100。

表13本发明生防种衣剂对玉米种子的促生效果

由表13的实施数据可以看出，本发明生防种衣剂的出苗率极显著的高于不包衣的玉米裸种及市面上主要防治玉米和黄瓜病虫害的生防种衣剂1和2，表明，本发明生防种衣剂对玉米种子的出苗有显著的促进效果。

实施例15生防种衣剂对玉米植株的促生效果

此次试验在日光温室中进行，大棚长80m，宽6m，占地面积480m²。试验共设1个处理，CK为不包衣的裸玉米种子，处理为本发明生防种衣剂(实施例7)∶玉米种子(质量比)＝1∶50的玉米包衣种子。每个处理设3个平行小区，随机区组排列，小区面积为40m²。玉米种植方式为人工点播，株距为0.5×0.5m，每穴点播两粒种子。播种后30d后统计玉米的生长指标，包括叶绿素、叶片数、株高、茎粗等。便携式叶绿素仪测定叶绿素含量、株高用卷尺测、游标卡尺测量茎粗，测量部位为植株地上部2cm处。

表14生防种衣剂对玉米的促生效果

由表14的实施数据结果可以看出，与对照组不包衣的种子相比，本发明生防种衣剂包衣处理的玉米在株高、茎粗、叶绿素及叶片数上都显著增高。表明，本发明的生防种衣剂对玉米植株的生长有较好的促生效果。

Claims (8)

1.一种复合菌剂，其特征在于，其包括贝莱斯芽孢杆菌ZLP-101、枯草芽孢杆菌BSD-2以及解淀粉芽孢杆菌WS-8；所述贝莱斯芽孢杆菌ZLP-101的保藏号为CGMCC No. 20130；所述解淀粉芽孢杆菌WS-8的保藏编号为CGMCC No.11787；所述枯草芽孢杆菌BSD-2的保藏编号为CGMCC No.8440；

在复合菌剂中，贝莱斯芽孢杆菌ZLP-101的活菌量≥1.0×10¹⁰cfu/mL、枯草芽孢杆菌BSD-2的活菌量≥5×10⁷cfu/mL、解淀粉芽孢杆菌WS-8的活菌量≥2×10⁸cfu/mL。

2.一种包含权利要求1所述复合菌剂的生防种衣剂，其特征在于，其包括所述复合菌剂、增效化学助剂、分散剂、增稠剂、着色剂以及成膜剂。

3.根据权利要求2所述的生防种衣剂，其特征在于，所述增效化学助剂为复合菌剂质量的0.01-0.03%；所述分散剂的质量为复合菌剂质量的2-2.5%；所述增稠剂的质量为复合菌剂质量的0.1-0.4%；所述着色剂的质量为复合菌剂质量的0.2-0.3%；所述成膜剂的质量为复合菌剂质量的3-5%。

4.根据权利要求3所述的生防种衣剂，其特征在于，所述增效化学助剂为高效氯氟氰菊酯、噻虫嗪、吡虫啉、戊唑醇、噻虫胺、氯虫、嘧菌酯、咯菌腈、恶霉灵、噻呋酰胺、精甲霜灵、灭幼脲、定虫隆、啶虫脒、溴氰菊酯、辛硫磷、丙溴磷、杀螟松、异丙威、哒幼酮、虫死净、虫酰肼、甲氧虫酰肼、环虫酰肼、呋喃虫酰肼、吡丙醚、灭幼脲、除虫脲、氯虫脲、氯酰脲、杀铃脲、杀螟丹、杀虫单、杀虫双、杀虫环、噻嗪酮、氯虫苯甲酰胺、螺虫乙酯、虫螨腈、杀虫磺、甲维盐、溴虫腈、敌百虫、呋喃丹、除虫菊酯、丁醚脲、丁烯氯虫腈、吡蚜酮、烯啶虫胺中的一种以上。

5.根据权利要求3所述的生防种衣剂，其特征在于，所述分散剂为木质素磺酸钠、鞣酸、焦磷酸钠中的一种以上。

6.根据权利要求3所述的生防种衣剂，其特征在于，所述增稠剂为黄原胶、硅酸铝镁中的一种以上。

7.根据权利要求3所述的生防种衣剂，其特征在于，所述成膜剂为海藻酸钠、羧甲基纤维素钠、黄原胶、淀粉中的一种以上。

8.根据权利要求3所述的生防种衣剂，其特征在于，其通过如下方法制备：

（1）分别将贝莱斯芽孢杆菌ZLP-101、枯草芽孢杆菌BSD-2以及解淀粉芽孢杆菌WS-8进行发酵，然后将获得的发酵液进行混合，得到复合菌剂；

（2）向复合菌剂中加入增效化学助剂，均匀；

（3）向步骤（2）的混合液中依次加入分散剂、增稠剂、着色剂，最后加入成膜剂，充分搅拌均匀，得到生防种衣剂。

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