CN114685633B

CN114685633B - 一种培育抗旱性改变的植物的方法以及ZmMADS27蛋白及其编码基因

Info

Publication number: CN114685633B
Application number: CN202011477556.1A
Authority: CN
Inventors: 王瑜; 巩志忠; 王亚琳
Original assignee: China Agricultural University
Current assignee: China Agricultural University
Priority date: 2020-12-15
Filing date: 2020-12-15
Publication date: 2023-03-24
Anticipated expiration: 2040-12-15
Also published as: CN114685633A

Abstract

本发明公开了一种培育抗旱性改变的植物的方法以及ZmMADS27蛋白及其编码基因。本发明提供的蛋白质，命名为ZmMADS27蛋白，是序列表中序列1所示的蛋白质。编码ZmMADS27蛋白的基因也属于本发明的保护范围，所述基因命名为ZmMADS27基因。本发明还保护ZmMADS27蛋白在调控植物抗旱性中的应用。本发明丰富了玉米抗旱相关的基因资源，可用于对玉米进行改良，改善玉米的抗旱性，且具有育种快速、定向精准的优势。本发明对于抗旱植物育种具有重大的应用推广价值。

Description

一种培育抗旱性改变的植物的方法以及ZmMADS27蛋白及其编码基因

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体一种培育抗旱性改变的植物的方法以及ZmMADS27蛋白及其编码基因。

背景技术

干旱与水资源短缺已成为世界农业和社会发展的制约因素。在我国，浇灌用水占国内水资源用量的80％左右，农业实际利用自然降水的比率不到10％，农业浇灌水的有效利用率只有30％-40％。我国玉米种植面积2400万公顷，50％以上种植在东北、西北、西南地区依靠自然降水缺水的旱地上。这些地区年降水量200-600mm不等，有些地方蒸发量大，水分流失快，且降水变率很大，玉米生长发育对水分的需要满足率低，年际间不稳定。对玉米带地区气象资料和玉米产量的相关分析得出，干旱是导致我国玉米产量波动的主要原因。同时受温室效应的影响，水资源短缺的问题将愈来愈突出。

玉米是我国主要的粮食作物和饲料作物，常年种植面积2450万hm²左右。在旱地作物中，玉米不仅需水较多，而且对水分胁迫比较敏感。干旱是严重制约玉米产量的一个非生物因素，研究玉米抗旱机制具有重要的意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种培育抗旱性改变的植物的方法以及ZmMADS27蛋白及其编码基因。

本发明提供的蛋白质，命名为ZmMADS27蛋白，获自玉米(Zea mays L.)，是如下(a1)或(a2)或(a3)或(a4)：

(a1)序列表中序列1所示的蛋白质；

(a2)将序列表中序列1所示的蛋白质经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与植物抗旱性相关的由其衍生的蛋白质；

(a3)在(a1)所述蛋白质的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白；

(a4)来源于玉米且与(a1)具有98％以上同一性且与植物抗旱性相关的蛋白质。

标签具体如表1所示。

表1标签的序列

/>

编码ZmMADS27蛋白的基因也属于本发明的保护范围。

所述基因命名为ZmMADS27基因。

具体来说，ZmMADS27基因是如下(b1)或(b2)或(b3)或(b4)或(b5)的DNA分子：

(b1)编码区如序列表中序列3所示的DNA分子；

(b2)序列表中序列2中第794-8284位核苷酸所示的DNA分子；

(b3)序列表中序列2所示的DNA分子；

(b4)在严格条件下与(b1)或(b2)或(b3)限定的DNA分子杂交且编码所述蛋白质的DNA分子；

(b5)来源于玉米且与(b1)或(b2)或(b3)限定的DNA分子至少具有70％、至少具有75％、至少具有80％、至少具有85％、至少具有90％、至少具有95％、至少具有96％、至少具有97％、至少具有98％或至少具有99％同源性且编码所述蛋白质的DNA分子。

所述严格条件是在2×SSC，0.1％SDS的溶液中，在68℃下杂交并洗膜2次，每次5min，又于0.5×SSC，0.1％SDS的溶液中，在68℃下杂交并洗膜2次，每次15min。

含有ZmMADS27基因的重组载体、表达盒或重组菌均属于本发明的保护范围。

可用现有的植物表达载体构建含有ZmMADS27基因的重组载体。

构建重组表达载体时，可在其转录起始核苷酸前加上任何一种增强型、组成型、组织特异型或诱导型启动子，它们可单独使用或与其它的植物启动子结合使用。此外，构建重组表达载体时，还可使用增强子，包括翻译增强子或转录增强子，这些增强子区域可以是ATG起始密码子或邻接区域起始密码子等，但必需与编码序列的阅读框相同，以保证整个序列的正确翻译。所述翻译控制信号和起始密码子的来源是广泛的，可以是天然的，也可以是合成的。翻译起始区域可以来自转录起始区域或结构基因。为了便于对转基因植物进行鉴定及筛选，可对所用表达载体进行加工，如加入在植物中表达可产生颜色变化的酶或发光化合物的基因、具有抗性的抗生素标记物或是抗化学试剂标记基因等。从转基因安全性考虑，可不加任何选择性标记基因，直接以表型筛选转化植物。

所述植物表达载体具体可为pBCXUN载体。

所述重组载体具体可为将序列表的序列3所示的DNA分子插入pBCXUN载体中得到重组质粒pBECXUN-ZmMADS27。

本发明还保护ZmMADS27蛋白在调控植物抗旱性中的应用。具体来说，所述调控为负调控，即ZmMADS27蛋白增多使得植物的抗旱性降低。

本发明还保护所述ZmMADS27基因或所述重组载体或所述表达盒或所述重组菌在培育抗旱性降低的转基因植物中的应用。

本发明还保护一种培育转基因植物的方法，包括如下步骤：将ZmMADS27基因导入受体植物中，得到抗旱性降低的转基因植物。所述ZmMADS27基因具体可通过所述重组载体导入受体植物。

本发明还保护一种植物育种方法，包括如下步骤：增加目的植物中ZmMADS27蛋白的含量和/或活性，从而使植物抗旱性降低。

所述植物为单子叶植物或双子叶植物。

所述植物为禾本科植物。

所述植物为玉蜀黍属植物。

所述植物为玉米。

所述植物为玉米B73。

由于玉米同一DNA段序列可产生不同转录本，翻译出不同蛋白质，该段序列产生的不同转录本以及翻译出的不同蛋白质均在本发明的保护范围内。

ZmMADS27基因的转录本不止一个，其它形式的转录本相应的cDNA过表达后也可能抗干旱胁迫，均属于本发明保护的范围。

本发明丰富了玉米抗旱相关的基因资源，可用于对玉米进行改良，改善玉米的抗旱性，且具有育种快速、定向精准的优势。本发明对于抗旱植物育种具有重大的应用推广价值。

具体实施方式

下面结合具体实施方式对本发明进行进一步的详细描述，给出的实施例仅为了阐明本发明，而不是为了限制本发明的范围。以下提供的实施例可作为本技术领域普通技术人员进行进一步改进的指南，并不以任何方式构成对本发明的限制。

下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。pBCXUN载体是将pCXUN载体(GenBank:FJ905215.1，06-JUL-2009)的HYG基因(hptII，潮霉素抗性基因)替换为Bar基因(编码膦丝菌素乙酰转移酶)(GenBank:MG719235.1中的第284-835位核苷酸，02-OCT-2018)，保持pCXUN的其它核苷酸不变得到的表达载体。玉米B73即玉米自交系B73(也称为玉米自交系b73)。

实施例1、ZmMADS27蛋白及其编码基因的发现

从玉米B73中发现一个新蛋白，如序列表的序列1所示，命名为ZmMADS27蛋白。

玉米B73的基因组DNA中，ZmMADS27基因如序列表的序列2所示(9310bp)。序列2中，转录本的读码框为第794-8284位核苷酸，包括8个外显子。8个外显子依次为：读码框第1-185位核苷酸，第2636-2714位核苷酸，第3324-3418位核苷酸，第3866-3965位核苷酸，第6205-6246位核苷酸，第6374-6415位核苷酸，第7164-7327位核苷酸，第7443-7491位核苷酸。

实施例2、转基因植物的获得和抗旱性鉴定

一、构建重组质粒

将序列表的序列3所示的DNA分子插入pBCXUN载体中，得到重组质粒pBECXUN-ZmMADS27，已进行测序验证。重组质粒pBECXUN-ZmMADS27中，序列表的序列3所示的DNA分子的转录由Ubi启动子启动并由Nos终止子终止，从而表达ZmMADS27蛋白。

二、ZmMADS27基因过表达植物的获得

1、将重组质粒pBECXUN-ZmMADS27导入农杆菌EHA105，得到重组农杆菌。

2、采用步骤1制备的重组农杆菌对玉米B73的胚性愈伤组织进行侵染，然后依次进行共培养、抗性筛选(抗性筛选采用除草剂草丁膦)，然后依次进行预分化、分化、生根，得到T₀代再生植株。

3、T₀代再生植株进行PCR鉴定，筛选获得转基因植株；将T₀代转基因植株自交，得到的种子即为T₁代种子，T₁代种子长成的植株即为T₁代植株；将T₁代植株自交，得到的种子即为T₂代种子，T₂代种子长成的植株即为T₂代植株；将T₂代植株自交，得到的种子即为T₃代种子，T₃代种子长成的植株即为T₃代植株。

4、将T₁代植株以及抽样的T₂代植株进行PCR鉴定。对于某一T₁代植株，如果该植株以及该植株自交得到的T₂代植株均为转基因植株，该植株的自交后代为纯合的转基因株系。

步骤3和步骤4中PCR鉴定的方法如下：提取植株叶片的基因组DNA，采用UbiP-seq(对应于Ubi启动子中)和NosR-seq(对应于Nos终止子中)组成的引物对进行PCR扩增，如果得到特异性扩增产物，该植株为转基因植株。

UbiP-seq:TTTTAGCCCTGCCTTCATACGC；

NosR-seq:AGACCGGCAACAGGATTCAATC。

三、ZmMADS27基因过表达植物的抗旱性鉴定

供试种子：纯合的转基因株系的T₃代种子或玉米B73的种子。

1、将供试种子播种于装有营养土的小盆中，25℃培养7天。

2、完成步骤1后，将长势一致的幼苗移栽到装有2500g营养土的长方形大盆中，每个盆中，一半区域种植15株转基因植株，另一半区域种植15株玉米B73植株，正常浇水并培养7天。设置三次重复试验，每次重复试验5盆。

3、完成步骤2后，持续不浇水20天，此时可以观察到转基因植株和玉米B73植株表型差异明显。

4、完成步骤3后，恢复正常浇水并培养7天，然后统计存活率。

存活率即存活植株占总植株数量的百分比。

转基因植株的存活率为21％±3％。玉米B73植株的存活率为43％±4％。

以上对本发明进行了详述。对于本领域技术人员来说，在不脱离本发明的宗旨和范围，以及无需进行不必要的实验情况下，可在等同参数、浓度和条件下，在较宽范围内实施本发明。虽然本发明给出了特殊的实施例，应该理解为，可以对本发明作进一步的改进。总之，按本发明的原理，本申请欲包括任何变更、用途或对本发明的改进，包括脱离了本申请中已公开范围，而用本领域已知的常规技术进行的改变。按以下附带的权利要求的范围，可以进行一些基本特征的应用。

序列表

<110> 中国农业大学

<120> 一种培育抗旱性改变的植物的方法以及ZmMADS27蛋白及其编码基因

<130> GNCYX203235

<160> 3

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 251

<212> PRT

<213> Zea mays L.

<400> 1

Met Gly Arg Gly Arg Val Glu Leu Lys Arg Ile Glu Asn Lys Ile Asn

1 5 10 15

Arg Gln Val Thr Phe Ala Lys Arg Arg Asn Gly Leu Leu Lys Lys Ala

20 25 30

Tyr Glu Leu Ser Val Leu Cys Asp Ala Glu Val Ala Leu Ile Ile Phe

35 40 45

Ser Asn Arg Gly Lys Leu Tyr Glu Phe Cys Ser Gly Gln Ser Ile Thr

50 55 60

Lys Thr Leu Glu Arg Tyr Glu Lys Asn Ser Tyr Gly Gly Pro Asp Thr

65 70 75 80

Ala Val Gln Asn Lys Glu Asn Glu Leu Val Gln Ser Ser Arg Asn Glu

85 90 95

Tyr Leu Lys Leu Lys Ala Arg Val Asp Asn Leu Gln Arg Thr Gln Arg

100 105 110

Gln Val Asp Ser Thr Phe Glu Leu Asn Leu Leu Gly Glu Asp Leu Gly

115 120 125

Ser Leu Gly Val Lys Glu Leu Glu Gln Leu Glu Lys Gln Leu Asp Ser

130 135 140

Ser Leu Arg His Ile Arg Ser Thr Arg Thr Gln His Met Leu Asp Gln

145 150 155 160

Leu Thr Asp Leu Gln Arg Arg Glu Gln Met Leu Cys Glu Ala Asn Lys

165 170 175

Cys Leu Arg Arg Lys Leu Glu Glu Thr Ser Asn Gln Val His Gly Gln

180 185 190

Val Trp Glu His Gly Ala Asn Leu Leu Gly Tyr Glu Arg His Ser Pro

195 200 205

Gln Gln Gln Ala Pro Ser His Val Gly Asn Gly Leu Phe Phe His Pro

210 215 220

Leu Glu Ala Ala Ala Glu Pro Thr Leu Gln Ile Gly Phe Ala Pro Glu

225 230 235 240

His Met Asn Asn Phe Met Pro Thr Trp Leu Pro

245 250

<210> 2

<211> 9310

<212> DNA

<213> Zea mays L.

<400> 2

tcctgtctgc gcgaactatg gcaatgcatg gcgaccgacc tcttccgaac cagaacggca 60

tgtctgcagg ctcgatcgct gcaagcatgc atgcccgttg gaagacgccg gaacgaaaac 120

gggtcgtcga gctcgaatcg atggaggaaa gaggaaagca gcgcgccgag cctacctatg 180

gcagttagca ggggaggggc cctctagcgg caggggtggg gggctttgcc caaaaccacg 240

acaagcggag gttgcatcca gaaaagtcca cgccctttct ctcctttctc tctctctctc 300

tagcatcgac ctgctgtcga gtcctcactg gtcaattcag ctgagcgatg agagagacgg 360

agtgacggga ggctgacaca tggccgggta ttgaggcgcg gaattgaatc tgattaaata 420

atgcaaaaag gtggcgtgcc aggacggagg acagaaagca atcacgagac gggaggggtt 480

ggcctttcgc ctctagggtt ccgggtcgcc caccacctta ccggaaatgg caattgcggg 540

acgcgccccc aatcactcac cacccctttc gtctcgccct tttaacccaa tcccctctcc 600

acgactctcc acccatctcc tgagtcctgc ctgcgctcgc ctcagctcct ttcttccccg 660

ccccttggct tttgcttggt tgcatcgggc cggtcgagcc ggagaggaaa agctagctag 720

cagctaccag ctctcggccg gcggtggtag tctgcctgca gctggggtta gctgcaaggg 780

ttgggagcta gccatgggga ggggtcgggt ggagctgaag cggatcgaga acaagatcaa 840

ccgccaggtc accttcgcca agcgccgcaa cggcctgctc aagaaggcgt acgagctctc 900

cgtgctctgc gacgccgaag tcgcgctcat catcttctcc aaccgcggca agctctacga 960

gttctgcagc ggacagaggt atacgcacgc atgcgtgtgc gaacaccacg cacgcacata 1020

tatatacatg gacacatggt acatgtgtgt gttctgtggc agttgccgga agccgcagat 1080

cctctcggat ctgacatccg gggaagcgcg gggtggtggc gggagcttag acggtttttg 1140

tgcttgttta tacgggcgta gtttcacggg gatctgggta ccacagggtg gatccgcacg 1200

tgcgagggcc aagctcgtcg tttctgatct gtgattcgtt ttttagggtt taatctggga 1260

gtacaaatta agcctcatgg atttctttcc gaattagcta gggttctgaa ttgctccttg 1320

gcttgtgaag aatggtgatt ttagcagatc tggccaattt tcgtttgttc ctggggttgt 1380

ggactttgta ttattgatgg atcgattggt ctagaggtgc cgtgaatccc cagttaaatt 1440

aatcgctatt tgtatatgca taaagagcta caaagttcgg gtgagcaaag ggcgaggact 1500

agggccctct atcgaatttg tcgtgttgca cgtacatgta agctttaatt tcacccggga 1560

tcgaatccgg ccgtttttct cagatttttc atttgcatgt tttagtctca tatttggcaa 1620

gcttagctta gaggctcagt tcaagcatga atggacgtcg cgtgttgctt attactagct 1680

gatcttcgaa tgcaatctct ttgaaaataa aaaggaattt tgttactgcc aaataaatga 1740

gatttagtac acgttataaa ccttctctat ctatccctgc gtccctccca cggccggtca 1800

aaaataggaa tacatttata ctgatatcat tatgaaaaga tctcagttgc atttgcttca 1860

tatggagtag tgtatatata atatttttat caagtaccca tatcattgtt catgatccga 1920

aaaggtcatt atatatatga caatctgttt taattaaatg actcaaaaaa ccattgaaat 1980

caacccacat taattagcaa tgttgtctag atcaagtaag ccctcacaca attaaaatta 2040

aaccgttagc attattgtct agatcaatta acccaatcag attttttcac taaccgttat 2100

tactgggaag actataagat caaaccatat gggtggttaa tttgtttata tatggtaacg 2160

tcttaaattt ttttgtattg cctaggaaga tctcttaatt tccacaatgt tctgtaacgt 2220

aactagataa tcagcattgt gtccaactct cttgctgttt gtctaaggct tgtgtcagta 2280

ttagttttgt tgggatgctg aaaattttca gttaatgatt ccatgatcca gcaagtgcgg 2340

caagctttta atattttata aatttattag ttctaaattt ggaattaaat tctccatttt 2400

atattgcaat ttgcaagtgt gtagaaatac tatattatat taaggttttc tttactccaa 2460

gatttgttct gtaagcggga tagtatatat tgttagcttt aatttctttc caataatata 2520

aacatgctca tcttttgcac ctcatatttt atatacatgt ttgtaatttc attttggggg 2580

gggggggggc taactactct aacgttatat atttttttta gtttgtaata ttatttaagt 2640

gtatatataa ctgaacacct tgtaaacaag attcctagga ctgccctgga ggtataaact 2700

agagtacaat caagtgtcag gtttcaaatg tcattcgttg tgtcccactg actccacctt 2760

tctgatcgaa ctgtcctttc atttcactgc atttcaatcc ccttgcccgc aaaactctcc 2820

aaagcaaaag ctttatcata tgtcccttct atggtctaca caattggcac ctattgctct 2880

acactagtat tttatgcatg ctgtcacata tatatgcatg catatcttca acatatatac 2940

tatatatatg catgcaaatc ttcaacatat actgtatact agattttgtt catgatcact 3000

cacgtctttt ttctttctga aagtctaaag cacatgttgt tagggcaact gacactcccg 3060

gtattggggg aaattaaata ctctatatat ggttttgctg ggtcaagaca taatttttct 3120

attattttgt ttgttagaat gtatcgtaag cttaaatcag gaattttctg tgttataact 3180

gcgacagatg taaatcacat taattatgtg aacttgaagt attgatagga agatatagta 3240

aaactagcga tgctataaga tttgtttcgt cgacaagcat atatatgcta atacgtatac 3300

agcttggacg caacgaaaaa caaaatttag ttgcatatta ttatccttgt tgacaatgct 3360

tcatcttctc catgaaccac atattttctg tggtctgcta actatccatg ctaattttga 3420

acttgtagca ttaccaaaac acttgagagg tatgaaaaaa acagttatgg aggaccagat 3480

actgctgtac agaacaagga gaacgaggta atctaagctc gacacattta tttacctgaa 3540

tcaatgtcag gagttctctt ctgttttact agtattatat ttcctcatac aaagattcta 3600

gtactcattg gtttgatgaa aacttaaatc catatattga tgtttaaaaa attagtttca 3660

tgattcaaca tctctttgtg aaaatttaaa agatacagtg gttttgttct cgtacagtta 3720

tcacatataa ttaaaaagat tctagaactc taatttggaa aatacagtta ttatagaagc 3780

tacatcttcg ttttgttcaa gtgaacatct tattctgttt gtgtagggct ggcaattaca 3840

gaagctacat tttcgttttg ttatttcctg tttcttttta tcgcgtgtac ttcccaatta 3900

gagttactag aatcatggat atataattcc tatgttgtag aaaacacaag tttacattga 3960

gctgttgtca aagatgatat agctccaaat atcattgcat ctgaactgat attccattcc 4020

cgtcactatt gcccagccac tatttgcttc aaaagcattt aatgctcact tttttttcaa 4080

tatattttgc ggactgaagt acctcttatt ttgcagttag tccagagcag tcgtaatgag 4140

tacctcaagc tgaaagcgag ggtggataat ttacagagga ctcagaggca agttgactct 4200

acgtttgagt tgtatcttcg caacaaaagg aatctctctt gcccgatcca cattgtccat 4260

tagaaaaatt gctacacatg tttggacaat ttcatcaaaa taaatttgtg gaactgtcat 4320

ttccagtgta tgaactatta gttaggtacc aggtaaatga catccctttt cagggaaaaa 4380

tgtttctgta ttgtttgttt tgccctactt tggtgattaa ctagtacaaa acataaagat 4440

tcattgcata gctaaagcat tgggtcttca gcatatatgc acacctgaaa agagtttcag 4500

aattctcata acctttgaat tagatatcat ttatgtacac taaatgaatc cagaaaccat 4560

aatttaatct caacgaagtt aaactaagtt tcttaatgga atgtgtaatg cttagctaag 4620

atgcacatat ttgattttcg ctttattcgc aattacagga atttgcttgg tgaagatctg 4680

gggtcacttg gtgtcaaaga gcttgagcag cttgagaagc aacttgattc atccttaagg 4740

cacataagat ccacaagggt aattcattga agaaaccatt ttctaatgcg ttatttcttt 4800

tggatgaagc tagtgttgat aacacagttc atatttctaa ttaacaagcc attttgaata 4860

tagagtactc tatatataat tgtgatcgtc acactagtac acaaaagttt tatactgtta 4920

gtggtaaacc tatttgcact gacgtttttt acaatcatca gtactagagg ccaatagaaa 4980

taatttttat acaaacgtgt aactgaaaac ctccactggt agttgaacta agaaaaccgc 5040

tagtgaaact cgagttccat aggcggtcca ggtaataaaa ccgttggtga aaatattttc 5100

caagaaacat aaaaatgagt ttaaaaatag caaaaagata tttttattag gagggaggtt 5160

ctcaactacg tatagtatag tactcctatt ttatagtata tagtacttta atttgttatg 5220

gtactcctgt taccttttag aaggtaagat cttatagaaa tcataaccct tgttttatta 5280

taaaaaataa aacaatcaaa tgatataatt aagcaaattt ctagaatcgc accatccctc 5340

aagtaataaa tatcttttgc ccctccttgt ttgcaccgac atgatcaggc atagacggag 5400

tcagaaaaaa agtttagaag ggacgactga tctaaactgc tgcagtatag aagccccttc 5460

tacattatat tgtgcacatt ttagattagg agaggctcta atgagactat atgggatccg 5520

aagcggtagg ggatctcgag cctcgcctgc cccaccgctc catccgtctc tttgatcagg 5580

taaagagaac cgtttggtat acacgatgaa attgtacacg cacgtgagta attttttatc 5640

ttcgcattag cttgagtaag tttgagtagt gaagtgtcaa gagcataata aaactaccaa 5700

agccattttt ctacccccaa agttgttatc agaacggtga agaactgcac cacttgtatc 5760

ctttagttag atctaaacta gggtcgtata tatagagcag ttaggttttt tttttcaaag 5820

tcgcaagatc tgatgtaaat ttttcttcac gtcataaaaa tgttgtgaat cccgtcagtt 5880

ttttttttaa atgctacaac ttaaactttt ttattacaaa ataaataagt ttgaagaaat 5940

acacttacat tttataccgt atgtcacgac atcacgttac attaaatagg aaagttggat 6000

tatacatgta cgttcgatct aatggaagat agtttcccta gctatttctc ctctaccacc 6060

aaggaagtca taaacatctt cataatctac tccaaatctt gattccctgg caagatttta 6120

aaaaatgttc tcccacaatt ctctatctta actcccaaca ctggcccaac cacgcggaaa 6180

tatacacatg tatattgatt ggccaaacta aagatataat gatgtgggga agaataactg 6240

gaacatggtt ctcaatgcaa atatacaagt gagaaagaaa atatataagc aatcatagtg 6300

atttggatat agtccatgat ttctgataca aaattgttat atatatttta ggagtgggat 6360

ttttaaaact attggagaag ctcaacaaat aatctcccaa ttaagttttt tagccacttg 6420

aaaaacttat tgatttacca attgattttt ggaaactatt aaagatgctc caacatatga 6480

taattaacat atggattaac agtccataga tatttgagag taccatctat tgtaattcat 6540

ctctaatatt ttctgtgact aatgcacctt aattattagg taggtctgga atttgaaata 6600

ttttgaatga tgaaattcat ttcatataaa aaaactcgac ctgcggggta tgagagcccc 6660

atacattata ttaagaagac tttctcatgc aagtcgagaa aaccctcgaa cacctatcac 6720

gcccatacac aacggcacca taacacatat gagaaacgac tgcgattggg accgggcctt 6780

agacccatgc tttggcgtgg tactgacgag gggatttctt taatcacaac ctgaaattcg 6840

ctcccatggg aagtcaactc caggatctga gtagtgctgc tcagaccacc taaccaactc 6900

agctataacc ctttcgcaca tacatttcat ataggtatga acgattttgt attttgtatc 6960

tttcaaatgc taatcaagga aatttctgat ttcgcagaca caacatatgc ttgatcagct 7020

cactgatctt cagaggaggg tatgctatta atatgataga atttataaat atttctacat 7080

gtagatatat ttttggatga tttcttccta gataagagca tatgtactgt tctaactaat 7140

taatgatatc gctaaaccat gtccaggagc aaatgctgtg tgaagcaaat aagtgcctta 7200

gaagaaaggt atgcatgcat aatggtccta accatgtccc ttaaatgctg catacatatt 7260

ttacccggtc ttgtttagat actcgagaaa gcatattgtt attttgtttt gatgtcatgt 7320

tttgagttaa agtagatgga atatatcaat aaagcagcat tgagctcttc aagttggaag 7380

atctgtttat taacagcata tgctcgttgc acacacatat aatctgcgta tatatgcttg 7440

cgaatacatg tgcaatgaac acattaaatt gagtttccat gagcacaaat atacactgta 7500

ctggttcatg ttaatcagtt gaaccagcta tcacttatat atgctgtctc cagcagcagc 7560

tacgacccta tcacgtctcc aatctcatct attatttcaa actttactct atatataaat 7620

agtgtaatat acagtacaaa ttctatattt tacacaatct gctgtggata atacttctat 7680

atgcatggtg tttgtcttaa tatatccgcc acaggatgtt ttgcataagg aatactgttg 7740

ttcagttgtg gcagcacaac tgtaattcat atattaacct ctcaaaatat gcattgtgca 7800

tattgttaca tttgactgct attacagtat gcatgtgata acagtattta ccaactaaat 7860

gagttttaag gggggtttct gagatcaatg aggtttcttg tttcgtataa aaaattaatg 7920

tggtttcttc acgtgattgt tttgcaaata aaaaagctgg aggagaccag caaccaggtg 7980

catggccaag tgtgggagca cggtgccaac ttactcggct acgagaggca ctctcctcaa 8040

cagcaggccc catcacatgt tggcaatggt ttgttctttc atcccctgga agctgcagca 8100

gagccaaccc tgcagatcgg gtatgtcatc atatgcctcc agatgcatca tgtgattcgc 8160

tatatcgtac ataaagcgag cctgtgcatc gatctgatca tgtcttgttg ttgtgtttgg 8220

catgcatgtt tgcaggttcg ctcctgagca tatgaataac ttcatgccaa catggctacc 8280

ctgaagatgg atcttgaggc aaaggaaata aataaagatg cggtggcagc atcatactct 8340

atgcaagcta agagtgacag ctgtgtttca gtcacatata tgatctagtc tgtgtgtcaa 8400

tgtgtcgaaa aacatgtctg tgattttgtt atatgaatgt aacgcgcaat gaaacataca 8460

ggactagctg cttgcttgac gatgcgtttg cgtgtatccg tataaattaa aggctataag 8520

ccacatcgta tatgcgtact gcacatgcgt gcattatcta aagggcgtga ttgaaagcct 8580

gcatagattc taggttaggt tccacgggtg caggtagcgt aatgtttgga tgcctgtatt 8640

ggtctttgga ccaagctgga ttcatggaac tagaaaaaaa atataaaata ttttgacttt 8700

tttgaaattt aaacccactc tcgatctata tagattcaga gcaaaacgaa agtcataaaa 8760

tagacgtggg atcagggttg agtgtatcta gtgagccagg ttgagttggt gcaggcacac 8820

aaatcaagaa agcgttttat ttatattttt tgttatatcc ttttaattga tatatctaat 8880

taataaatcg attgcacttt cgtgtttaca aaactaaact actacactta ctatataaca 8940

tattatatat ttatttattc atcttgttaa cccagtaaac caaacattgt ttcctctcct 9000

agcctcgcat gcatatggcc aaaccaatca catttgtatg tgtaccaaat caatatggct 9060

caacatggtt cggctctgtt gagcactaaa aagagcaccg gacggtccgc gcctgtgggc 9120

cggatggtcc gcggaagcgc agaacagatt agggttccaa gtttcttgct atgtttattg 9180

gcgagaatct cgggattagc tcggaatttt gttggtaacg ggtccagccc cctcctctat 9240

aaaagcagag gaatacgatc gatttaatca atcaatcgaa ccctcaatca atataattta 9300

catttattct 9310

<210> 3

<211> 756

<212> DNA

<213> Zea mays L.

<400> 3

atggggaggg gtcgggtgga gctgaagcgg atcgagaaca agatcaaccg ccaggtcacc 60

ttcgccaagc gccgcaacgg cctgctcaag aaggcgtacg agctctccgt gctctgcgac 120

gccgaagtcg cgctcatcat cttctccaac cgcggcaagc tctacgagtt ctgcagcgga 180

cagagcatta ccaaaacact tgagaggtat gaaaaaaaca gttatggagg accagatact 240

gctgtacaga acaaggagaa cgagttagtc cagagcagtc gtaatgagta cctcaagctg 300

aaagcgaggg tggataattt acagaggact cagaggcaag ttgactctac gtttgagttg 360

aatttgcttg gtgaagatct ggggtcactt ggtgtcaaag agcttgagca gcttgagaag 420

caacttgatt catccttaag gcacataaga tccacaagga cacaacatat gcttgatcag 480

ctcactgatc ttcagaggag ggagcaaatg ctgtgtgaag caaataagtg ccttagaaga 540

aagctggagg agaccagcaa ccaggtgcat ggccaagtgt gggagcacgg tgccaactta 600

ctcggctacg agaggcactc tcctcaacag caggccccat cacatgttgg caatggtttg 660

ttctttcatc ccctggaagc tgcagcagag ccaaccctgc agatcgggtt cgctcctgag 720

catatgaata acttcatgcc aacatggcta ccctga 756

Claims

1.一种蛋白质在培育抗旱性降低的转基因植物中的应用，

所述蛋白质是如下(a1)或(a2)：

(a1)序列表中序列1所示的蛋白质；

(a2)在(a1)所述蛋白质的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白；

所述植物为单子叶植物。

2.一种基因在培育抗旱性降低的转基因植物中的应用，

所述基因是如下(b1)或(b2)或(b3)的DNA分子：

(b1)序列表中序列3所示的DNA分子；

(b2)序列表中序列2所示的DNA分子；

(b3)在严格条件下与(b1)或(b2)限定的DNA分子杂交且编码权利要求1所述蛋白质的DNA分子；

所述植物为单子叶植物。

3.一种培育转基因植物的方法，包括如下步骤：将权利要求2所述基因导入受体植物中，得到抗旱性降低的转基因植物；所述植物为单子叶植物。

4.一种植物育种方法，包括如下步骤：将编码权利要求1所述蛋白质的核酸分子导入受体植物中，从而使植物抗旱性降低；所述植物为单子叶植物。