CN114672468B - Far2蛋白以及far2基因以及利用它们提高植物耐盐碱性的方法 - Google Patents

Far2蛋白以及far2基因以及利用它们提高植物耐盐碱性的方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了利用FAR2蛋白提高植物耐盐碱性的方法。本发明提供了FAR2蛋白在调控植物盐碱耐逆性中的应用。本发明还保护一种培育转基因植物的方法，包括如下步骤：将FAR2基因导入受体植物中，得到盐碱耐逆性增高的转基因植物。FAR2蛋白是序列表的序列1所示的蛋白质。FAR2基因即编码FAR2蛋白的基因。本发明对于培育耐盐碱植物具有重大的应用价值。

Description

FAR2蛋白以及FAR2基因以及利用它们提高植物耐盐碱性的方法
技术领域
本发明属于生物技术领域，具体涉及FAR2蛋白以及FAR2基因以及利用它们提高植物耐盐碱性的方法。
背景技术
随着人口的增长和社会经济的发展，耕地面积逐步减少，土地质量也在下降，世界范围内土地盐碱地问题越来越严重。盐碱地是一种可利用的资源，其改良与利用已经成为确保我国耕地“红线”不被突破、实现农业可持续发展的重要举措。推进盐碱地资源的生态利用和产业化开发对于建设生态文明，推动绿色发展具有重要意义。
土壤盐碱化趋势在世界范围内不断扩展，严重限制了农作物的生长，已经成为制约农业生产的重要因素。盐碱胁迫对植物造成的危害在于盐碱化土壤中高浓度的Na+和过高的pH。随着植物细胞内盐离子的积累，将对细胞产生离子毒害效应，从而在多方面影响细胞发挥正常功能。在碱土环境中,除碱金属元素外的大部分金属元素都会形成不溶性盐,Na+作为自然界中含量最高的碱金属元素,则会富集在碱土中造成土壤的盐化。
盐碱胁迫对植物造成的危害在于盐碱化土壤中高浓度的Na+和过高的pH。随着植物细胞内盐离子的积累，将对细胞产生离子毒害效应，从而在多方面影响细胞发挥正常功能。在碱土环境中，除碱金属元素外的大部分金属元素都会形成不溶性盐，Na+作为自然界中含量最高的碱金属元素,则会富集在碱土中造成土壤的盐化。
发明内容
本发明的目的是提供FAR2蛋白以及FAR2基因以及利用它们提高植物耐盐碱性的方法。
本发明保护一种培育转基因植物的方法，包括如下步骤：将编码FAR2蛋白的基因导入受体植物中，得到盐碱耐逆性增高的转基因植物。编码FAR2蛋白的基因具体通过含有编码FAR2蛋白的基因的重组载体导入受体植物。盐碱耐逆性增高体现为在盐碱环境中叶片更绿和/或株高更高。
FAR2蛋白，获自玉米(Zea mays L.)，是如下(a1)或(a2)或(a3)：
(a1)序列表的序列1所示的蛋白质；
(a2)在(a1)所述蛋白质的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白；
(a3)将(a1)所述蛋白质进行一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由其衍生的蛋白质。
编码FAR2蛋白的基因是如下(b1)或(b2)或(b3)或(b4)或(b5)的DNA分子：
(b1)编码区如序列表的序列2中第236-2020位核苷酸所示的DNA分子；
(b2)序列表的序列2所示的DNA分子；
(b3)序列表的序列3所示的DNA分子；
(b4)在严格条件下与(b1)或(b2)或(b3)杂交且编码具有相同功能蛋白质的DNA分子；
(b5)与(b1)或(b2)或(b3)至少具有70％、至少具有75％、至少具有80％、至少具有85％、至少具有90％、至少具有95％、至少具有96％、至少具有97％、至少具有98％或至少具有99％同源性且编码所述蛋白质的DNA分子。
所述严格条件是在2×SSC，0.1％SDS的溶液中，在68℃下杂交并洗膜2次，每次5min，又于0.5×SSC，0.1％SDS的溶液中，在68℃下杂交并洗膜2次，每次15min。
本发明还保护一种植物育种方法，包括如下步骤：增加目的植物中FAR2蛋白的含量和/或活性，从而使植物的盐碱耐逆性增高。盐碱耐逆性增高体现为在盐碱环境中叶片更绿和/或株高更高。
FAR2蛋白，获自玉米(Zea mays L.)，是如下(a1)或(a2)或(a3)：
(a1)序列表的序列1所示的蛋白质；
(a2)在(a1)所述蛋白质的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白；
(a3)将(a1)所述蛋白质进行一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由其衍生的蛋白质。
本发明还提供了FAR2蛋白，获自玉米(Zea mays L.)，是如下(a1)或(a2)或(a3)：
(a1)序列表的序列1所示的蛋白质；
(a2)在(a1)所述蛋白质的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白；
(a3)将(a1)所述蛋白质进行一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由其衍生的蛋白质。
本发明还提供了编码FAR2蛋白的基因，即FAR2基因。
FAR2基因是如下(b1)或(b2)或(b3)或(b4)或(b5)的DNA分子：
(b1)编码区如序列表的序列2中第236-2020位核苷酸所示的DNA分子；
(b2)序列表的序列2所示的DNA分子；
(b3)序列表的序列3所示的DNA分子；
(b4)在严格条件下与(b1)或(b2)或(b3)杂交且编码具有相同功能蛋白质的DNA分子；
(b5)与(b1)或(b2)或(b3)至少具有70％、至少具有75％、至少具有80％、至少具有85％、至少具有90％、至少具有95％、至少具有96％、至少具有97％、至少具有98％或至少具有99％同源性且编码所述蛋白质的DNA分子。
所述严格条件是在2×SSC，0.1％SDS的溶液中，在68℃下杂交并洗膜2次，每次5min，又于0.5×SSC，0.1％SDS的溶液中，在68℃下杂交并洗膜2次，每次15min。
本发明提供了FAR2蛋白在调控植物盐碱耐逆性中的应用。具体来说，所述调控为正调控，即FAR2蛋白增多，植物的盐碱耐逆性增高。
本发明提供了FAR2蛋白在提高植物盐碱耐逆性中的应用。盐碱耐逆性增高体现为在盐碱环境中叶片更绿和/或株高更高。
本发明还保护编码FAR2蛋白的基因或含有编码FAR2蛋白的基因的重组载体或含有编码FAR2蛋白的基因的表达盒在培育盐碱耐逆性增高的转基因植物中的应用。盐碱耐逆性增高体现为在盐碱环境中叶片更绿和/或株高更高。
标签具体如表1所示。
表1标签的序列
标签 残基 序列
Poly-Arg 5-6(通常为5个) RRRRR
Poly-His 2-10(通常为6个) HHHHHH
FLAG 8 DYKDDDDK
Strep-tag II 8 WSHPQFEK
c-myc 10 EQKLISEEDL
HA 9 YPYDVPDYA
可用现有的植物表达载体构建含有FAR2基因的重组载体。
构建重组载体时，可在其转录起始核苷酸前加上任何一种增强型、组成型、组织特异型或诱导型启动子，它们可单独使用或与其它的植物启动子结合使用。此外，构建重组载体时，还可使用增强子，包括翻译增强子或转录增强子，这些增强子区域可以是ATG起始密码子或邻接区域起始密码子等，但必需与编码序列的阅读框相同，以保证整个序列的正确翻译。所述翻译控制信号和起始密码子的来源是广泛的，可以是天然的，也可以是合成的。翻译起始区域可以来自转录起始区域或结构基因。为了便于对转基因植物进行鉴定及筛选，可对所用重组载体进行加工，如加入在植物中表达可产生颜色变化的酶或发光化合物的基因、具有抗性的抗生素标记物或是抗化学试剂标记基因等。从转基因安全性考虑，可不加任何选择性标记基因，直接以表型筛选转化植物。
所述植物表达载体具体可为pBCXUN载体。
所述重组载体具体可为将序列表的序列2中第236-2020位核苷酸所示的DNA分子插入pBCXUN载体中得到的重组质粒pBCXUN-FAR2。
所述植物为单子叶植物或双子叶植物。
所述植物为禾本科植物。
所述植物为玉蜀黍属植物。
所述植物为玉米。
所述植物为玉米B73-329。
本发明的发明人发现，FAR2参与盐碱胁迫响应过程，调控植物的盐碱耐逆性。与玉米B73-329相比较，FAR2过表达株系表现出显著增高的盐碱耐逆性。从而证明，FAR2蛋白的功能为提高植物对高盐碱的耐逆性。本发明对于培育耐盐碱植物具有重大的应用价值。
附图说明
图1为实施例2中的植株照片。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明进行进一步的详细描述，给出的实施例仅为了阐明本发明，而不是为了限制本发明的范围。以下提供的实施例可作为本技术领域普通技术人员进行进一步改进的指南，并不以任何方式构成对本发明的限制。
下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。玉米(Zea mays L.)B73-329记载于：王芳,崔鹏娟,黄芸,王志文,王海峰,陈益芳.玉米磷吸收和再分配的分子机制[A],2018全国植物生物学大会论文集[C],2018年。pBCXUN载体是将pCXUN载体(GenBank:FJ905215.1，06-JUL-2009)的HYG基因(hptII，潮霉素抗性基因)替换为Bar基因(编码膦丝菌素乙酰转移酶)(核苷酸序列是序列4)，保持pCXUN的其它核苷酸不变得到的表达载体。
实施例1、FAR2基因及其编码蛋白的发现
从玉米中发现一个新蛋白，如序列表的序列1所示，命名为FAR2蛋白。
玉米基因组DNA中，FAR2基因如序列表的序列3所示。
玉米cDNA中，FAR2基因如序列表的序列2所示，开放阅读框为第236-2020位。
实施例2、转基因植物的获得和盐碱耐逆性鉴定
一、构建重组质粒
将序列表的序列2中第236-2020位核苷酸所示的DNA分子插入pBCXUN载体中，得到重组质粒pBCXUN-FAR2，已进行测序验证。重组质粒pBCXUN-FAR2中，插入的DNA分子的转录由Ubi启动子启动并由Nos终止子终止，从而表达FAR2蛋白。
二、FAR2基因过表达植物的获得
1、将重组质粒pBCXUN-FAR2导入农杆菌EHA105，得到重组农杆菌。
2、采用步骤1制备的重组农杆菌对玉米B73-329的胚性愈伤组织进行侵染，然后依次进行共培养、抗性筛选(抗性筛选采用除草剂草丁膦)，然后依次进行预分化、分化、生根，得到T0代再生植株。
3、T0代再生植株进行PCR鉴定，筛选获得转基因植株；将T0代转基因植株自交，得到的种子即为T1代种子，T1代种子长成的植株即为T1代植株；将T1代植株自交，得到的种子即为T2代种子，T2代种子长成的植株即为T2代植株；将T2代植株自交，得到的种子即为T3代种子，T3代种子长成的植株即为T3代植株。
4、将T1代植株以及抽样的T2代植株进行PCR鉴定。对于某一T1代植株，如果该植株以及该植株自交得到的T2代植株均为转基因植株，该植株的自交后代为纯合的转基因株系。获得三个纯合的转基因株系，分别为FAR2-OX1株系、FAR2-OX2株系和FAR2-OX3株系。
步骤3和步骤4中PCR鉴定的方法如下：提取植株叶片的基因组DNA，采用UbiP-seq(对应于Ubi启动子中)和NosR-seq(对应于Nos终止子中)组成的引物对进行PCR扩增，如果得到特异性扩增产物，该植株为转基因植株。
三、FAR2基因过表达植物的盐碱耐逆性鉴定
供试种子：FAR2-OX1株系的T3代种子、FAR2-OX2株系的T3代种子、FAR2-OX3株系的T3代种子、玉米B73-329的种子。
供试种子种植于蛭石中，用1/2Hoagland’s营养液浇灌，正常培养至3叶期。然后开始用含120mM NaHCO3的1/2Hoagland’s营养液浇灌(每7-10天浇灌一次)，正常培养28天。然后观察拍照并统计存活率。
进行五次重复试验，每次重复试验的每种样本至少设置5个生物学重复。
植株照片见图1。
FAR2基因过表达植物表现出比玉米B73-329更强的盐碱耐逆性，具体表现为叶片较绿，株高更高。FAR2基因过表达植物的株高为玉米B73-329植株的1.5至1.7倍。
上述结果表明，FAR2蛋白正调控植物的盐碱耐逆性。
以上对本发明进行了详述。对于本领域技术人员来说，在不脱离本发明的宗旨和范围，以及无需进行不必要的实验情况下，可在等同参数、浓度和条件下，在较宽范围内实施本发明。虽然本发明给出了特殊的实施例，应该理解为，可以对本发明作进一步的改进。总之，按本发明的原理，本申请欲包括任何变更、用途或对本发明的改进，包括脱离了本申请中已公开范围，而用本领域已知的常规技术进行的改变。按以下附带的权利要求的范围，可以进行一些基本特征的应用。
                         序列表
<110>  中国农业大学
<120>  FAR2蛋白以及FAR2基因以及利用它们提高植物耐盐碱性的方法
<130>  GNCYX203353
<160>  4
<170>  SIPOSequenceListing 1.0
<210>  1
<211>  594
<212>  PRT
<213>  Zea mays L.
<400>  1
Met Gly Ser Ser Cys Val Asn Leu Ser Arg Ala Val Leu Pro Gly Phe
1               5                   10                  15
Gly Ala Ala Glu Gly Ser Arg Arg Arg Arg Gly Leu Leu Leu Pro Leu
            20                  25                  30
Leu Ser Ser Ser Ser Arg Arg Leu His Gly Gly Gly Ala Val Ala Cys
        35                  40                  45
Cys Ser Ser Ser Ser Ser Ala Thr Ala Ala Gly Ser Ser Arg Pro Pro
    50                  55                  60
Pro Pro Leu Pro Ser Phe Val Asp Pro Ala His Gly Asp Pro Pro Gly
65                  70                  75                  80
Ala Ala Gly Gly Gly Ile Gly Val Ala Glu Phe Leu Gly Ala Lys Asn
                85                  90                  95
Phe Leu Ile Thr Gly Gly Thr Gly Phe Leu Ala Lys Val Leu Ile Glu
            100                 105                 110
Lys Ile Leu Arg Thr Asn Pro Asp Val Gly Lys Val Tyr Val Leu Ile
        115                 120                 125
Lys Ala Lys Asp Ser Glu Ala Ala Leu Ala Arg Leu Arg Asn Glu Val
    130                 135                 140
Val Asp Thr Glu Leu Phe Lys Cys Leu Gln Asp Ile His Gly Glu Gly
145                 150                 155                 160
Tyr Asp Gly Phe Ile Ala Arg Lys Leu Val Pro Val Val Gly Asp Val
                165                 170                 175
Arg Glu Ala Asn Val Gly Ile Ala Pro Asp Leu Ala Asp Glu Ile Ala
            180                 185                 190
Asp Gln Val Asp Val Ile Ile Asn Ser Ala Ala Asn Thr Thr Phe Asp
        195                 200                 205
Glu Arg Tyr Asp Val Ala Met Asp Ile Asn Thr Val Gly Pro Phe Arg
    210                 215                 220
Ile Met Ser Phe Ala Gln Arg Phe Arg Arg Leu Lys Leu Phe Leu Gln
225                 230                 235                 240
Val Ser Thr Val Ala Tyr Val Asn Gly Gln Arg Gln Gly Leu Val Leu
                245                 250                 255
Glu Lys Pro Phe Arg Met Gly Asp Thr Ile Ala Lys Glu Leu Pro Gly
            260                 265                 270
Trp Ser Ser Ser Pro Gly His Lys Ile Pro Val Leu Asp Ile Glu Ala
        275                 280                 285
Glu Ile Lys Leu Ala Phe Tyr Ser Thr Arg His Arg Pro Asp Asp Ser
    290                 295                 300
Pro Ser Phe Ala Gln Glu Met Lys Asp Leu Gly Leu Glu Arg Ala Lys
305                 310                 315                 320
Leu His Gly Trp Gln Asp Thr Tyr Val Phe Thr Lys Ala Met Gly Glu
                325                 330                 335
Met Val Ile Asn Ser Met Arg Gly Glu Ile Pro Val Val Thr Ile Arg
            340                 345                 350
Pro Ser Val Ile Glu Ser Thr Trp Arg Asp Pro Phe Pro Gly Trp Met
        355                 360                 365
Glu Gly Asn Arg Met Met Asp Pro Val Val Leu Tyr Tyr Gly Lys Gly
    370                 375                 380
Gln Leu Thr Gly Phe Leu Ala Asp Pro Asp Gly Val Leu Asp Val Val
385                 390                 395                 400
Pro Ala Asp Met Val Val Asn Ala Thr Leu Ala Ser Met Ala Lys His
                405                 410                 415
Gly Gly Gly Ala Ala Gly Pro Gly Met His Val Tyr His Val Ser Ser
            420                 425                 430
Ser Thr Val Asn Pro Leu Val Phe Gly Asp Leu Ser Arg Phe Leu Phe
        435                 440                 445
Gln His Phe Thr Arg Cys Pro Tyr Ser Asp Ala Ala Gly Gln Pro Ile
    450                 455                 460
Leu Val Pro Pro Met Arg Leu Phe Asp Thr Met Glu Gln Phe Ala Ser
465                 470                 475                 480
Tyr Val Glu Thr Asp Ala Leu Leu Arg Ser Ala Arg Ser Thr Ser Ser
                485                 490                 495
Ser Ser Ser Leu Ala Gln Arg Ala Arg Asp Leu Cys Ala Arg Ser Val
            500                 505                 510
Glu Gln Thr Val His Leu Gly Ser Ile Tyr Arg Pro Tyr Thr Phe Tyr
        515                 520                 525
Gly Gly Arg Phe Asp Asn Ala Asn Thr Glu Ala Leu Leu Ala Ala Met
    530                 535                 540
Ser Pro Ala Glu Arg Ala Arg Phe His Phe Asp Val Arg Gly Val Asp
545                 550                 555                 560
Trp Ala Asp Tyr Ile Thr Asn Val His Ile Pro Gly Leu Arg Lys His
                565                 570                 575
Val Met Lys Gly Arg Gly Val Ala Ala Asn Gln Leu Leu Ala Ser Thr
            580                 585                 590
Ser Val
<210>  2
<211>  2413
<212>  DNA
<213>  Zea mays L.
<400>  2
gtcgcagtcg caggtcactc actagctagc ttgggccctc gtcatctcgt tccgcccagg 60
tgaaagtttg gcgcgcatgc acgttagcag gcaggaagta gcagcttcgt cttaacaccc 120
acccacctac tactaccctg ctgcaaaccg caaccgcgcc cgcgcgggag agcttaccct 180
cgcgcaccac caagcccgca cctgcatttc tttgcggccg cgcgcgcgcg ggccaatggg 240
gagttcctgc gtgaacctct cccgcgccgt cctccccggc ttcggcgccg ccgagggatc 300
ccgccgccgc cgtggcctcc ttctcccgct gctgtcgtcg tcgtcgaggc gcctgcacgg 360
cggcggcgcc gtggcgtgct gctcgtcgtc gtcctccgct actgctgccg gctcatcgag 420
gccgccgcca ccgctgccgt ccttcgtcga cccggcgcac ggggatccgc ctggagctgc 480
cggcggcggg atcggtgtcg ccgagtttct cggcgccaag aacttcctca tcaccggcgg 540
gaccggtttc ctggcaaaag ttcttatcga gaagattttg aggacaaacc ctgacgtcgg 600
caaggtgtac gtgctcatca aggccaagga cagcgaagca gcgttggcga gattgcgaaa 660
cgaggtcgtg gacacggagc tgttcaaatg cctgcaggac atccacgggg aaggctacga 720
cggcttcatc gcaaggaagc tggtccccgt cgtcggcgac gtcagggaag ccaacgtcgg 780
catcgcgccc gacctcgccg acgagatcgc cgaccaggtg gacgtcatca tcaactcagc 840
ggccaacacc acgttcgacg agcggtacga cgtcgccatg gacatcaaca ccgtggggcc 900
gttccggatc atgagcttcg cgcagcgctt ccgacgcctc aagctcttct tgcaagtgtc 960
tacagtagcc tacgtgaatg gacagaggca aggcctggtg ctggagaagc cgtttcgcat 1020
gggagacacc atagccaagg agctgccggg gtggtcttct tctccagggc acaagatacc 1080
cgtgctggac atcgaggcag agatcaagct ggccttctac tccacaagac accgccccga 1140
tgattctccc tcgtttgctc aagaaatgaa agatttgggc ctagagaggg caaaactcca 1200
tgggtggcaa gacacctatg tgttcaccaa ggccatgggg gagatggtca tcaactccat 1260
gcgaggagag ataccggtgg tcaccatcag gcccagcgtc atcgagagca cctggaggga 1320
cccattcccg ggctggatgg aagggaacag gatgatggat cctgtggtcc tctattacgg 1380
gaaaggccag ctgacggggt tcctcgcaga tccagatggt gttcttgatg tggtcccggc 1440
ggacatggtg gtgaacgcga cgctggcgtc gatggcgaag cacggcggcg gcgcggcggg 1500
gcccgggatg cacgtgtacc acgtgtcgtc gtcgacggtg aaccctctgg tgttcggcga 1560
cctgagccgg ttcctgttcc agcacttcac gcggtgcccc tacagcgacg cggcggggca 1620
gcccatcctg gtgccgccca tgcgcctctt cgacaccatg gagcagttcg ccagctacgt 1680
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gcgggcgcgc gacctgtgcg ccaggtccgt ggagcagacc gtccacctgg gcagcatcta 1800
ccggccctac accttctacg gcggccgctt cgacaacgcc aacacggagg cgctgctcgc 1860
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tactactgct acgtacgtag cagcaaccta aggttgcgct tgcattgcac taaagataga 2220
tataccatgc tgttcatctc tcctccatgt tgagctgttg attcttgcgc ttgtacttca 2280
aaacaaaatg aactctgtga tggtcgtcag taacaaatct gacgaaacat cgtggctgtc 2340
tgatagtgtc attcccgaca ctgtaagccg ttcttttacc aaaatttact ttactgatgg 2400
aaggagttca aca                                                    2413
<210>  3
<211>  4469
<212>  DNA
<213>  Zea mays L.
<400>  3
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agacattacc ccctccggcc ctcgcccctt aatataaggt gtaaccactt attgttcttg 120
ttctataata taagacatgc tctctttaga cacatgtaca tcgatacagt ggtatagaga 180
aaactaaata tatttcttgg cccttgagcc agagggagac gaggagtatt ggacatgagc 240
agtacaggcc gaagcgcatg ccaacaaatg gaggcccgct gttgtgtaca cgcaacacaa 300
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cgcgctttgc atgtctcgcc aacggcgcac accatcatcg gccgggcggc tcccttttcg 420
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ctagctagct gggacttctt tggcgcgtta aaacctgcct tcttggcagc ccagctcgca 600
gtcgcagtcg caggtcactc actagctagc ttgggccctc gtcatctcgt tccgcccagg 660
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cggcggcggg atcggtgtcg ccgagtttct cggcgccaag aacttcctca tcaccggcgg 1140
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gcgagattgc gaaacgaggt gtgcatgcat ggcgttcatc catgcatttg ttacatatat 1440
acatgcactt gttctttctt tctttcttca cagttcacac tagcttgcta tttgtgtaat 1500
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gatcgccgac caggtggacg tcatcatcaa ctcagcggcc aacaccacgt tcgacgagcg 1740
gtgcgtgatc gatgctagct agcagctaca tagtctgttc ttcagtgatc catgcatcta 1800
tcgatcaacc gcagcatccc caccttgcat tgtgtttggt cgcacaggta cgacgtcgcc 1860
atggacatca acaccgtggg gccgttccgg atcatgagct tcgcgcagcg cttccgacgc 1920
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gcaaacgaaa agaaaaggcc caagtcgaat tattgatatt ttttgtcgtt gtgattatat 2400
ataaattaat aaattggtag ggcaaaactc catgggtggc aagacaccta tgtgttcacc 2460
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aggcccagcg tcatcgagag cacctggagg gacccattcc cgggctggat ggaagggaac 2580
aggtacgtac tacctgcagt gtatacatgc atgcgtacct tcaagctaat ggtagtgctg 2640
atctctctct ctctctctct ctctctctct ctctctcttg gcattattgg caaaattgtt 2700
gatgaacaca ggatgatgga tcctgtggtc ctctattacg ggaaaggcca gctgacgggg 2760
ttcctcgcag atccagatgg tgttcttgat gtggtacgta cctcgcagat ccagttgagt 2820
tgtagtgctc cctaaactaa aacgttagta ttgaacaact aacttagtgt ccacctgata 2880
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gcggcggcgc ggcggggccc gggatgcacg tgtaccacgt gtcgtcgtcg acggtgaacc 3000
ctctggtgtt cggcgacctg agccggttcc tgttccagca cttcacgcgg tgcccctaca 3060
gcgacgcggc ggggcagccc atcctggtgc cgcccatgcg cctcttcgac accatggagc 3120
agttcgccag ctacgtggag acggacgcgc tgctgcgcag cgcccggtcg acctcgtcct 3180
cgtcgtcgct ggcgcagcgg gcgcgcgacc tgtgcgccag gtccgtggag cagaccgtcc 3240
acctgggcag catctaccgg ccctacacct tctacggcgg ccgcttcgac aacgccaaca 3300
cggaggcgct gctcgcggcc atgtcgccgg cggagagggc gcggttccac ttcgacgtgc 3360
ggggcgtgga ctgggcggac tacatcacca acgtccacat ccctggactc cggaagcacg 3420
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ccggcatgcg cgacggcggg cgtgtacact atctgccagg cccagaccgt tgctgctgct 3540
acatgccatt gccatgccgc cgtcacacca cacggccggt gaccgacgac caatcttgcc 3600
gtacgttcca tcctcatact actgctacgt acgtagcagc aacctaaggt tgcgcttgca 3660
ttgcactaaa gatagatata ccatgctgtt catctctcct ccatgttgag ctgttgattc 3720
ttgcgcttgt acttcaaaac aaaatgaact ctgtgatggt cgtcagtaac aaatctgacg 3780
aaacatcgtg gctgtctgat agtgtcattc ccgacactgt aagccgttct tttaccaaaa 3840
tttactttac tgatggaagg agttcaacag ttccttgcaa ttgatgaatg gtgatacaga 3900
ttagcacacg cctatttgta gtacaagctt acgctacaca ggtgcaaatg gtactccggt 3960
ctttttggcc agttccacga ctctgtaaaa actgcataaa acagagggcg gccagagttg 4020
taggtggatg gccgcccttc tctgtcgcct gaaaagggtg aaactctggg catagtgctt 4080
cggcattccc ctgttatttc tgtctggccc ttgatccagc agacgttgac atcgattatc 4140
acgacacagg ctgggaaacg gtaacatcga cagctcaaag gaaataatcc ggtgttcttc 4200
gcgtcacatc tggctcacct ctcctagggg ctggttcaaa ctatgataat aggtagacaa 4260
aattggtaaa tcatatgcaa taggcgtgta ctaagaagtc tgttttgggg accgaaaaaa 4320
acatctggat gtctttttaa gaaaaaaaca tatagatagt aaattcatat cagggtcatg 4380
ccacaaaaat gagccaacta aaatggggaa gtagcagaat gatgtggcca cattacctgg 4440
atgaatgtgt ggctgttgca gtcgtcaac                                   4469
<210>  4
<211>  552
<212>  DNA
<213>  人工序列(Artificial Sequence)
<400>  4
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gtctgcacca tcgtcaacca ctacatcgag acaagcacgg tcaacttccg taccgagccg 120
caggaaccgc aggagtggac ggacgacctc gtccgtctgc gggagcgcta tccctggctc 180
gtcgccgagg tggacggcga ggtcgccggc atcgcctacg cgggcccctg gaaggcacgc 240
aacgcctacg actggacggc cgagtcgacc gtgtacgtct ccccccgcca ccagcggacg 300
ggactgggct ccacgctcta cacccacctg ctgaagtccc tggaggcaca gggcttcaag 360
agcgtggtcg ctgtcatcgg gctgcccaac gacccgagcg tgcgcatgca cgaggcgctc 420
ggatatgccc cccgcggcat gctgcgggcg gccggcttca agcacgggaa ctggcatgac 480
gtgggtttct ggcagctgga cttcagcctg ccggtaccgc cccgtccggt cctgcccgtc 540
accgagattt ga                                                     552

Claims (8)

1.一种培育转基因植物的方法，包括如下步骤：将编码FAR2蛋白的基因导入受体植物中，得到盐碱耐逆性增高的转基因植物；
FAR2蛋白是如下（a1）或（a2）：
（a1）序列表的序列1所示的蛋白质；
（a2）在（a1）所述蛋白质的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白；
所述植物为玉米。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：编码FAR2蛋白的基因是编码区如序列表的序列2中第236-2020位核苷酸所示的DNA分子。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于：编码FAR2蛋白的基因是如下（b1）或（b2）的DNA分子：
（b1）序列表的序列2所示的DNA分子；
（b2）序列表的序列3所示的DNA分子。
4.一种植物育种方法，包括如下步骤：增加目的植物中FAR2蛋白的含量，从而使植物的盐碱耐逆性增高；
FAR2蛋白是如下（a1）或（a2）：
（a1）序列表的序列1所示的蛋白质；
（a2）在（a1）所述蛋白质的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白；
所述植物为玉米。
5.FAR2蛋白在提高植物的盐碱耐逆性中的应用；
FAR2蛋白是如下（a1）或（a2）：
（a1）序列表的序列1所示的蛋白质；
（a2）在（a1）所述蛋白质的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白；
所述植物为玉米。
6.编码FAR2蛋白的基因、含有编码FAR2蛋白的基因的重组载体或含有编码FAR2蛋白的基因的表达盒在培育盐碱耐逆性增高的转基因植物中的应用；
FAR2蛋白是如下（a1）或（a2）：
（a1）序列表的序列1所示的蛋白质；
（a2）在（a1）所述蛋白质的N端或/和C端连接标签得到的融合蛋白；
所述植物为玉米。
7.如权利要求6所述的方法，其特征在于：编码FAR2蛋白的基因是编码区如序列表的序列2中第236-2020位核苷酸所示的DNA分子。
8.如权利要求6所述的方法，其特征在于：编码FAR2蛋白的基因是如下（b1）或（b2）的DNA分子：
（b1）序列表的序列2所示的DNA分子；
（b2）序列表的序列3所示的DNA分子。
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