CN114671917A

CN114671917A - 一种姜黄素类似物和制备方法及其在抗癌细胞增殖药物中的应用

Info

Publication number: CN114671917A
Application number: CN202210231685.5A
Authority: CN
Inventors: 杨琼琼; 高海德
Original assignee: Guangdong Israel Institute Of Technology
Current assignee: Guangdong Israel Institute Of Technology
Priority date: 2022-01-10
Filing date: 2022-03-09
Publication date: 2022-06-28
Anticipated expiration: 2042-03-09
Also published as: CN114671917B

Abstract

本发明属于化学药物领域，具体公开了一种姜黄素类似物和制备方法及其在抗癌细胞增殖药物中的应用。姜黄素类似物包括有通式A或通式B结构，通式A结构的姜黄素类似物由1，1’‑二茂铁二甲醛与苯乙酮类化合物通过克莱森‑斯密特缩合反应制得，通式B结构的姜黄素类似物由亚苄基丙酮衍生物与1，1’‑二茂铁二甲醛通过克莱森‑斯密特缩合反应制得。本申请将二茂铁基团引入天然活性化合物分子中可以在不同程度上提高母体化合物的生物活性，从而使姜黄素类似物具有比姜黄素更高的抗癌效果，同时具有特意的选择毒性，对正常细胞的毒性较小，对癌细胞毒性较大，具有优异的抗癌细胞增殖活性以及毒性选择性。

Description

一种姜黄素类似物和制备方法及其在抗癌细胞增殖药物中的应用

技术领域

本发明涉及化学药物领域，尤其涉及一种姜黄素类似物和制备方法及其在抗癌细胞增殖药物中的应用。

背景技术

乳腺癌是女性中最常见的恶性肿瘤之一，在生物学和临床水平上都是一种异质性疾病。然而，由乳腺癌引起的死亡多数原因并不是因为原发性肿瘤本身，而是由于肿瘤转移至身体的其他器官如肺部和脑部而导致的死亡。研究表明，女性患有乳腺癌但不发生转移的存活率高达98％，然而发生乳腺癌转移的女性的存活率仅为27％。因此将乳腺癌细胞的代谢过程作为药物的靶标，如细胞迁移、细胞侵袭、细胞增殖以及细胞周期阻滞等，或许可以为乳腺癌的治疗提供一种新思路。

姜黄素是一种酚类化合物，主要从姜黄(Curcuma longa L.)中分离得到。姜黄素具有抗肿瘤作用，且临床实验也表明姜黄素在抗肿瘤方面有着良好的应用前景。有研究发现，姜黄素可通过阻断cyclin D1与CDK4的结合来抑制细胞周期进程，从而降低cyclin D1的活性，将细胞阻滞在G1期，姜黄素还能诱导p53依赖性细胞凋亡并导致细胞周期阻滞于G2期，从而抑制MCF-7乳腺癌细胞增殖，这些研究表明姜黄素可以影响乳腺癌细胞的代谢过程，或可抑制癌细胞的转移。然而姜黄素的药代动力学性质差，仍然受到低水溶性、快速代谢和生物利用度低的限制，姜黄素作为一种天然化合物其抗癌效果较低。

发明内容

本发明提供了一种姜黄素类似物和制备方法及其在抗癌细胞增殖药物中的应用，用于提供比姜黄素抗癌效果更好的姜黄素类似物。

为了解决上述技术问题，本发明目的之一提供了一种姜黄素类似物，包括具有通式A或通式B结构的化合物，通式A和通式B的结构如下所示：

[通式A]：

[通式B]：

其中，通式A中的R为3,4,5-OCH₃、2，4-OCH₃、4-OCH₃、2,3,4-OCH₃或3,4-OCH₃，通式B中的R为3,4,5-OCH₃、2,4-OCH₃、2-CH₂CH₃、2,5-OCH₃、4-OCH₃、2,3,4-OCH₃、3,4-OCH₃、3,5-OCH₃、2,3-OCH₃、2,6-OCH₃、2,4,5-OCH₃或OCH(CH₃)₂。

为了解决上述技术问题，本发明目的之二提供了一种姜黄素类似物的制备方法，用于制备具有通式A结构的姜黄素类似物，包括以下步骤：(1)在有机溶剂中，将二茂铁和二甲基甲酰胺通过Bouveault醛合成反应生成1，1’-二茂铁二甲醛；(2)在有机溶剂中，利用碱将1，1’-二茂铁二甲醛与苯乙酮类化合物通过克莱森-斯密特(Claisen-Schmidt)缩合反应生成具有通式A结构的姜黄素类似物。

作为优选方案，所述苯乙酮类化合物具有通式C结构，通式C的结构如下所示：

[通式C]：

其中，通式C中的R与通式A中的R结构相同。

作为优选方案，在步骤(1)中，将正丁基锂溶液滴加到含二茂铁和四甲基乙二胺(TMEDA)的无水己烷悬浮液中，搅拌并析出二锂化二茂铁沉淀，加入二甲基甲酰胺(DMF)，室温搅拌进行Bouveault醛合成反应，随后依次经萃取、过滤、干燥和纯化，得到1，1’-二茂铁二甲醛。

作为优选方案，在步骤(2)中，将1，1’-二茂铁二甲醛和苯乙酮类化合物溶解在甲醇有机溶剂中，加入氢氧化钠碱溶液，室温搅拌进行克莱森-斯密特(Claisen-Schmidt)缩合反应，随后依次经浓缩、干燥和纯化后，得到具有通式A结构的姜黄素类似物。

为了解决上述技术问题，本发明目的之三提供了一种姜黄素类似物的制备方法，用于制备具有通式B结构的姜黄素类似物，包括以下步骤：(1)在有机溶剂中，将二锂化二茂铁和二甲基甲酰胺通过Bouveault醛合成反应生成1，1’-二茂铁二甲醛；(2)在碱溶液中，将苯甲醛衍生物与丙酮发生加成反应得到亚苄基丙酮衍生物；(3)在有机溶剂中，利用碱将亚苄基丙酮衍生物与1，1’-二茂铁二甲醛通过克莱森-斯密特(Claisen-Schmidt)缩合反应得到具有通式B结构的姜黄素类似物。

作为优选方案，所述苯甲醛衍生物具有通式D结构，通式D结构如下所示：

[通式D]：

其中，通式D中的R与通式B中的R结构相同。

作为优选方案，在步骤(1)中，在步骤(1)中，将正丁基锂溶液滴加到含二茂铁和四甲基乙二胺(TMEDA)的无水己烷悬浮液中，搅拌并析出二锂化二茂铁沉淀，加入二甲基甲酰胺(DMF)，室温搅拌进行Bouveault醛合成反应，随后依次经萃取、过滤、干燥和纯化，得到1，1’-二茂铁二甲醛。

作为优选方案，在步骤(2)中，将苯甲醛衍生物、丙酮和水充分混合，随后加入NaOH碱溶液，在室温下搅拌进行加成反应，收集有机层，浓缩后得到亚苄基丙酮衍生物。

作为优选方案，在步骤(3)中，将1，1’-二茂铁二甲醛和亚苄基丙酮衍生物溶解在甲醇中，加入NaOH碱溶液，在室温下搅拌进行克莱森-斯密特(Claisen-Schmidt)缩合反应，依次经浓缩、干燥和纯化，得到具有通式B结构的姜黄素类似物。

为了解决上述技术问题，本发明目的之四提供了一种姜黄素类似物在抗癌细胞增殖药物中的应用。

作为优选方案，所述癌细胞为乳腺癌细胞或肝癌细胞。

相比于现有技术，本发明实施例具有如下有益效果：

1、本申请将二茂铁基团引入天然活性化合物分子中可以在不同程度上提高母体化合物的生物活性，从而使姜黄素类似物具有比姜黄素更高的抗癌效果，同时通式B的姜黄素类似物化合物的抗乳腺癌细胞增殖活性普遍高于通式A姜黄素类似物化合物的抗癌活性。

2、本申请中B7姜黄素类似物化合物的抗乳腺癌细胞增殖活性的IC₅₀值仅为0.334μM，其抗癌效果是姜黄素的16倍，顺铂的7倍；同时B7姜黄素类似物化合物具有特意的选择毒性，对乳腺癌细胞和肝癌细胞均具有选择性，对正常细胞的毒性较小，其选择性指数高达11.2。

3、本申请中B7姜黄素类似物化合物具有抑制细胞增殖、抑制细胞群落形成和抑制细胞核的分裂，并对细胞的线粒体膜损伤进而导致线粒体功能障碍，过量产生ROS，会导致氧化应激、细胞功能丧失以及细胞凋亡或坏死；同时可以抑制乳腺癌细胞迁移和侵袭，以防止癌细胞转移；还可以诱导细胞周期阻滞在G2/M期。

附图说明

图1是姜黄素类似物通式为A1的¹H MNR谱图和¹³C MNR谱图；

图2是姜黄素类似物通式为A2的¹H MNR谱图和¹³C MNR谱图；

图3是姜黄素类似物通式为A3的¹H MNR谱图和¹³C MNR谱图；

图4是姜黄素类似物通式为A4的¹H MNR谱图和¹³C MNR谱图；

图5是姜黄素类似物通式为A5的¹H MNR谱图和¹³C MNR谱图；

图6是姜黄素类似物通式为A6的¹H MNR谱图和¹³C MNR谱图；

图7是姜黄素类似物通式为A7的¹H MNR谱图和¹³C MNR谱图；

图8是姜黄素类似物通式为B1的¹H MNR谱图和¹³C MNR谱图；

图9是姜黄素类似物通式为B2的¹H MNR谱图和¹³C MNR谱图；

图10是姜黄素类似物通式为B3的¹H MNR谱图和¹³C MNR谱图；

图11是姜黄素类似物通式为B4的¹H MNR谱图和¹³C MNR谱图；

图12是姜黄素类似物通式为B5的¹H MNR谱图和¹³C MNR谱图；

图13是姜黄素类似物通式为B6的¹H MNR谱图和¹³C MNR谱图；

图14是姜黄素类似物通式为B7的¹H MNR谱图和¹³C MNR谱图；

图15是姜黄素类似物通式为B8的¹H MNR谱图和¹³C MNR谱图；

图16是姜黄素类似物通式为B9的¹H MNR谱图和¹³C MNR谱图；

图17是姜黄素类似物通式为B10的¹H MNR谱图和¹³C MNR谱图；

图18是姜黄素类似物通式为B11的¹H MNR谱图和¹³C MNR谱图；

图19是姜黄素类似物通式为B12的¹H MNR谱图和¹³C MNR谱图；

图20是姜黄素类似物通式为B13的¹H MNR谱图和¹³C MNR谱图；

其中，图1-20中左为¹H MNR谱图；右为¹³C MNR谱图；

图21是姜黄素类似物通式为B7化合物对MCF-7细胞的形态影响；

图22是姜黄素类似物通式为B7化合物抑制细胞群落形成结果；

图23是姜黄素类似物通式为B7化合物对细胞核的影响；

图24是姜黄素类似物通式为B7化合物对细胞凋亡的影响；

图25是姜黄素类似物通式为B7对MDA-MB-231细胞迁移和侵袭的影响(注：a-对MDA-MB-231细胞迁移的影响；b-对MDA-MB-231细胞侵袭的影响)；

图26是姜黄素类似物通式为B7化合物对伤口愈合的影响；

图27是姜黄素类似物通式为B7化合物对细胞膜电位的影响；

图28是姜黄素类似物通式为B7化合物对细胞内ROS的影响；

图29是姜黄素类似物通式为B7化合物的细胞周期阻滞作用(注：a-用不同浓度的B7化合物处理MCF-7细胞24小时后，通过流式细胞术分析收获细胞中PI染色的DNA含量；b-直方图显示细胞周期分布的百分比)。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1-7

一种姜黄素类似物，其结构式如下通式A所示，包括有表3中通式A1-A7中任一所示的结构，包括以下制备步骤：

(1)1，1’-二茂铁二甲醛的制备：首先将正丁基锂溶液(67ml，1.6M，0.10mol)在室温条件下滴加到200ml含二茂铁(10g，0.054mol)和四甲基乙二胺(TMEDA)(14.7g，0.25mol)的无水己烷悬浮液中；将混合溶液在室温条件下搅拌18小时，析出橙色的二锂化二茂铁沉淀，将悬浮液冷却至0℃，将二甲基甲酰胺(DMF)(7.85g，0.11mol，8.3ml)加入到悬浮液中，将其在室温下继续搅拌2小时进行Bouveault醛合成反应；然后用预冷的盐酸(200ml，5M)淬灭反应，用乙酸乙酯(100ml)萃取混合物三次，合并乙酸乙酯部分，再用无水硫酸钠除去乙酸乙酯部分的水分，接着过滤，蒸发，干燥，得到深红色固体粗产物；该粗产物通过柱色谱法纯化(己烷：二氯甲烷v/v 1：1)，得到纯的1，1’-二茂铁二甲醛。

(2)姜黄素类似物化合物的制备：将上述1，1’-二茂铁二甲醛(0.121g，0.5mmol)和苯乙酮类化合物(1mmol)溶解在30ml甲醇中，加入氢氧化钠水溶液(1.5M，5ml)，然后在室温下搅拌12小时进行克莱森-斯密特(Claisen-Schmidt)缩合反应；将混合物在真空条件下浓缩干燥，使用柱色谱法(石油醚：乙酸乙酯v：v 3：1)纯化产物，得到对应的通式A1-A7表示的姜黄素类似物化合物。

[通式A]：

上述实施例1-7中姜黄素类似物化合物A1-A7制备的反应如式(1)所示，式(1)中的化学结构1为二茂铁，式(1)中的化学结构2为二甲基甲酰胺，式(1)中的化学结构3为1，1’-二茂铁二甲醛，式(1)中的化学结构4为苯乙酮类化合物：

上述式(1)中的R对应姜黄素类似物A1-A7的具体结构如表1所示：

表1-反应方程式(1)中的R对应姜黄素类似物A1-A7的具体结构

姜黄素类似物通式	式(1)中R结构	姜黄素类似物通式	式(1)中R结构
				A1	3，4，5-OCH<sub>3</sub>	A5	4-OCH<sub>3</sub>
A2	2，4-OCH<sub>3</sub>	A6	2,3,4-OCH<sub>3</sub>
				A3	2-CH<sub>2</sub>CH<sub>3</sub>	A7	3,4-OCH<sub>3</sub>
A4	2,5-OCH<sub>3</sub>	-	-

上述实施例1-7获得的姜黄素类似物化合物A1-A7的¹H MNR谱图和¹³CMNR谱图如图1-7所示，其收率和结构鉴定数据如下：

A1：1,1’-双[(E)-3-(3，4，5-三甲氧基苯基)-3-氧丙烯基]二茂铁；棕红色固体；收率86％；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.65(d,J＝15.1Hz,2H),7.10(s,4H),6.95(d,J＝15.3Hz,2H),4.60(s,4H),4.50(s,4H),3.97(s,6H),3.90(s,6H),3.89(s,6H)；¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ187.6,152.9,143.8,142.4,133.3,119.4,106.0,80.7,72.8,70.5,60.8,56.3。MS(ESI):627.19(M+H⁺)。

A2:1,1’-双[(E)-3-(2，4-二甲氧基苯基)-3-氧丙烯基]二茂铁；棕红色固体；收率90％；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.70(d,J＝8.3Hz,2H),7.49(d,J＝15.5Hz,2H),7.10(d,J＝15.5Hz,2H),6.51(d,J＝7.9Hz,2H),6.42(s,2H),4.50(s,4H),4.42(s,4H),3.85(s,12H)；¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ189.6,163.9,160.2,142.1,132.7,125.6,105.1,98.6,81.1,72.5,70.2,55.7,55.5。MS(ESI):567.19(M+H⁺)。

A3:1,1’-双[(E)-3-(2-乙氧基苯基)-3-氧丙烯基]二茂铁；棕红色固体；收率93％；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.60(s,2H),7.44(d,J＝15.3Hz,4H),7.02(dd,J＝47.5,18.3Hz,6H),4.51(s,4H),4.43(s,4H),4.11(s,4H),1.50(t,J＝45.5Hz,6H)；¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ191.8,157.5,143.0,132.6,130.5,129.6,125.7,120.7,112.7,80.8,72.9,70.1,64.31,14.9。MS(ESI):535.07(M+H⁺)。

A4:1,1’-双[(E)-3-(2，5-二甲氧基苯基)-3-氧丙烯基]二茂铁；棕红色固体；收率85％；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.42(d,J＝15.6Hz,2H),7.15–7.09(m,2H),6.99(dt,J＝4.3,2.5Hz,3H),6.94(d,J＝1.2Hz,1H),6.89(d,J＝9.0Hz,2H),4.51(d,J＝1.5Hz,4H),4.44(d,J＝1.5Hz,4H),3.81(m,12H)；¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ191.7,153.7,152.3,143.7,130.0,125.5,118.6,114.4,113.4,80.6,72.9,70.3,56.5,55.8。MS(ESI):567.19(M+H⁺)。

A5:1,1’-双[(E)-3-(4-甲氧基苯基)-3-氧丙烯基]二茂铁；棕红色固体；收率87％；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.87(d,J＝8.2Hz,4H),7.65(d,J＝15.2Hz,2H),7.07(d,J＝15.0Hz,2H),6.89–6.77(m,4H),4.56(s,4H),4.48(s,4H),3.85(s,6H)；¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ163.1,143.5,130.6,113.7,80.8,72.5,70.5,55.4。MS(ESI):507.15(M+H⁺)。

A6:1,1’-双[(E)-3-(2，3，4-三甲氧基苯基)-3-氧丙烯基]二茂铁；棕红色固体；收率83％；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.48(d,J＝15.6Hz,2H),7.42(d,J＝8.7Hz,2H),7.04(d,J＝15.6Hz,2H),6.73(d,J＝8.8Hz,2H),4.59–4.52(m,4H),4.48–4.37(m,4H),3.94–3.87(m,18H)；¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ190.1,156.7,153.5,143.4,142.2,127.0,125.6,125.0,107.4,80.8,72.9,70.2,62.0,61.0,56.1。MS(ESI):627.19(M+H⁺)。

A7:1,1’-双[(E)-3-(3，4-二甲氧基苯基)-3-氧丙烯基]二茂铁；棕红色固体；收率85％；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.65(d,J＝15.3Hz,2H),7.49–7.38(m,4H),7.03(d,J＝15.3Hz,2H),6.71(d,J＝8.2Hz,2H),4.57(s,4H),4.49(s,4H),3.93(s,6H),3.91(s,6H)；¹³CNMR(101MHz,CDCl₃)δ187.3,153.0,149.0,143.4,131.2,122.7,119.5,110.6,109.8,80.8,72.5,70.6,55.9,55.9。MS(ESI):567.05(M+H⁺)。

实施例8-20

一种姜黄素类似物，其结构式通式B所示，包括有表3中通式B1-B13任一所示结构，包括以下制备步骤：

(1)亚苄基丙酮衍生物的制备：将苯甲醛衍生物(80.7mmol)、丙酮(74ml)和水(34ml)充分混合，随后将NaOH溶液(30.3mmol，5.5ml)和水(303ml)加入溶液中，获得黄色混合物；将黄色混合物在室温条件下搅拌20小时，收集有机层，真空浓缩，得到对应的亚苄基丙酮衍生物。

(2)姜黄素类似物化合物的制备：将1，1’-二茂铁二甲醛(0.5mmol)和上述亚苄基丙酮衍生物(1mmol)溶解在甲醇(30ml)中，加入NaOH溶液(1.5M，5ml)，在室温条件下搅拌24小时；将混合物在真空条件下浓缩干燥，使用柱色谱法(石油醚：乙酸乙酯v：v 3：1)纯化产物，得到对应的由通式B1-B13表示的姜黄素类似物化合物。

[通式B]：

上述实施例8-20中姜黄素类似物化合物B1-B13制备的反应如式(2)所示，其中，式(2)中化学结构3为1，1’-二茂铁二甲醛，式(2)中化学结构4为苯甲醛衍生物，式(2)中化学结构5为丙酮，式(2)中化学结构6为亚苄基丙酮衍生物：

上述式(2)中的R对应姜黄素类似物B1-B13的具体结构如表2所示：

表2-反应方程式(2)中的R对应姜黄素类似物B1-B13的具体结构

上述实施例8-20获得的姜黄素类似物化合物B1-B13的¹H MNR谱图和¹³CMNR谱图如图8-20所示，其收率和结构鉴定数据如下：

B1:1,1'-双[(1E，4E)-5-(3,4,5-三甲氧基苯基)-1,4-二烯-3-酮]二茂铁；棕红色固体；收率83％；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.44(dd,J＝25.5,15.7Hz,4H),6.73(d,J＝15.8Hz,2H),6.66(s,4H),6.52(d,J＝15.6Hz,2H),4.57(s,4H),4.48(s,4H),3.87(s,18H)；¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ187.7,153.3,142.9,142.3,140.3,130.3,124.7,124.1,105.6,80.7,72.5,70.5,60.9,56.1。MS(ESI):679.13(M+H⁺)。

B2:1,1'-双[(1E，4E)-5-(2,4-二甲氧基苯基)-1,4-二烯-3-酮]二茂铁；棕红色固体；收率71％；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.90(s,2H),7.64–7.33(m,4H),6.94(s,2H),6.67(s,2H),6.52–6.24(m,4H),4.54(s,4H),4.45(s,4H),3.82(s,12H)；¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ188.5,162.7,160.0,141.9,138.1,130.2,124.3,124.0,117.1,105.3,98.2,80.7,72.5,70.4,55.4。MS(ESI):619.26(M+H⁺)。

B3:1,1'-双[(1E，4E)-5-(2-乙氧基苯基)-1,4-二烯-3-酮]二茂铁；棕红色固体；收率85％；¹H NMR(300MHz,CDCl₃)δ7.96(d,J＝16.0Hz,2H),7.56–7.46(m,4H),7.28(d,J＝10.5Hz,2H),7.04(d,J＝16.0Hz,2H),6.87(t,J＝7.7Hz,2H),6.82(d,J＝8.2Hz,2H),6.61(d,J＝15.6Hz,2H),4.54(s,4H),4.46(s,4H),4.05(q,J＝6.8Hz,4H),1.47(t,J＝6.9Hz,6H)；¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ188.6,157.9,142.4,138.3,131.3,128.9,126.0,124.5,123.8,120.5,111.9,80.6,72.7,70.3,63.9,14.8。MS(ESI):587.40(M+H⁺)。

B4:1,1'-双[(1E，4E)-5-(2,5-二甲氧基苯基)-1,4-二烯-3-酮]二茂铁；棕红色固体；收率78％；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.91(d,J＝16.1Hz,2H),7.51(d,J＝15.4Hz,2H),7.03(s,2H),6.94–6.79(m,5H),6.75(d,J＝9.0Hz,2H),6.60(d,J＝15.6Hz,1H),4.56(s,4H),4.46(s,4H),3.80(s,6H),3.78(s,6H)；¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ188.4,153.5,153.1,142.5,137.8,126.4,124.4,124.0,117.4,112.7,112.3,80.7,72.7,70.4,56.0,55.7。MS(ESI):619.36(M+H⁺)。

B5:1,1'-双[(1E，4E)-5-(4-甲氧基苯基)-1,4-二烯-3-酮]二茂铁；棕红色固体；收率80％；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.50(t,J＝15.3Hz,4H),7.40(d,J＝8.4Hz,4H),6.78(dd,J＝23.0,12.0Hz,6H),6.53(d,J＝15.6Hz,2H),4.54(s,4H),4.45(s,4H),3.82(s,6H)；¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ187.9,161.4,142.6,142.2,130.0,127.6,124.2,123.3,114.2,80.6,72.5,70.4,55.3。MS(ESI):559.35(M+H⁺)。

B6:1,1'-双[(1E，4E)-5-(2,3,4-三甲氧基苯基)-1,4-二烯-3-酮]二茂铁；棕红色固体；收率80％；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.83(d,J＝16.0Hz,2H),7.48(d,J＝15.6Hz,2H),7.28(d,J＝8.8Hz,2H),6.89(d,J＝16.0Hz,2H),6.60(dd,J＝22.8,12.2Hz,4H),4.54(d,J＝1.7Hz,4H),4.45(d,J＝1.6Hz,4H),3.86(d,J＝12.3Hz,18H)；¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ188.2,155.5,153.5,142.3,142.3,137.6,124.8,124.3,123.2,122.0,107.6,80.7,72.6,70.3,61.4,60.8,56.0。MS(ESI):679.13(M+H⁺)。

B7:1,1'-双[(1E，4E)-5-(3,4-二甲氧基苯基)-1,4-二烯-3-酮]二茂铁；棕红色固体；收率74％；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.49(dd,J＝15.7,12.2Hz,4H),6.99(dd,J＝8.3,1.8Hz,2H),6.94(d,J＝1.8Hz,2H),6.73(dd,J＝21.0,12.1Hz,4H),6.53(d,J＝15.6Hz,2H),4.61–4.52(m,4H),4.52–4.42(m,4H),3.89(d,J＝4.2Hz,12H)；¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ187.7,151.2,149.1,142.8,142.1,127.8,124.1,123.6,123.0,110.9,109.9,80.7,72.5,70.5,55.9,55.8。MS(ESI):619.36(M+H⁺)。

B8：1,1'-双[(1E，4E)-5-(3,5-二甲氧基苯基)-1,4-二烯-3-酮]二茂铁；棕红色固体；收率76％；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.46(dd,J＝15.6,8.4Hz,4H),6.81(d,J＝15.8Hz,2H),6.59(s,4H),6.52(d,J＝15.6Hz,2H),6.43(d,J＝1.4Hz,2H),4.55(s,4H),4.47(s,4H),3.78(s,12H)；¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ187.7,160.9,142.8,142.6,136.7,125.8,124.0,106.1,102.8,80.6,72.6,70.5,55.3。MS(ESI):619.39(M+H⁺)。

B9:1,1'-双[(1E，4E)-5-(2,4,6-三甲氧基苯基)-1,4-二烯-3-酮]二茂铁；棕红色固体；收率81％；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.10(d,J＝16.1Hz,2H),7.55(d,J＝15.6Hz,2H),7.29(d,J＝9.7Hz,2H),6.67(d,J＝15.6Hz,2H),6.10(d,J＝11.6Hz,2H),6.03(s,2H),4.53(s,4H),4.44(s,4H),3.86(s,12H),3.83(s,6H)；¹³CNMR(101MHz,CDCl₃)δ189.8,162.8,161.5,141.5,134.1,125.8,124.8,106.4,90.3,80.8,72.5,70.3,55.6,55.3。MS(ESI):679.11(M+H⁺)。

B10:1,1'-双[(1E，4E)-5-(2,3-二甲氧基苯基)-1,4-二烯-3-酮]二茂铁；棕红色固体；收率79％；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.72(d,J＝16.1Hz,2H),7.28(d,J＝15.7Hz,2H),7.01–6.94(m,2H),6.79(dd,J＝15.1,7.1Hz,3H),6.70(dd,J＝9.2,8.4Hz,3H),6.39(d,J＝15.7Hz,2H),4.33(d,J＝1.7Hz,4H),4.25(d,J＝1.7Hz,4H),3.65(s,6H),3.61(s,6H)；¹³CNMR(101MHz,CDCl₃)δ188.2,153.1,148.8,142.8,137.3,129.2,126.9,124.2,124.1,119.4,114.0,80.6,72.9,70.3,61.3,55.9。MS(ESI):619.36(M+H⁺)。

B11:1,1'-双[(1E，4E)-5-(2,6-二甲氧基苯基)-1,4-二烯-3-酮]二茂铁；棕红色固体；收率78％；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.12(d,J＝16.2Hz,2H),7.54(d,J＝15.7Hz,2H),7.40(d,J＝16.2Hz,2H),7.22(dd,J＝17.7,9.3Hz,3H),6.68(d,J＝15.6Hz,2H),6.50(d,J＝8.4Hz,3H),4.53(s,4H),4.44(s,4H),3.90(s,6H),3.87(s,6H)；¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ189.8,160.3,142.1,133.9,131.1,128.7,124.6,112.9,103.7,80.8,72.7,70.3,68.9,55.8。MS(ESI):619.36(M+H⁺)。

B12:1,1'-双[(1E，4E)-5-(2,4,5-三甲氧基苯基)-1,4-二烯-3-酮]二茂铁；棕红色固体；收率87％。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.92(d,J＝16.0Hz,2H),7.52(d,J＝15.6Hz,2H),6.90(s,2H),6.73(d,J＝15.9Hz,2H),6.55(d,J＝15.6Hz,2H),6.32(s,2H),4.53(s,4H),4.44(s,4H),3.88(s,6H),3.85(s,6H),3.81(s,6H)；¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ188.1,154.1,152.0,142.9,141.7,137.5,124.2,123.6,115.2,110.1,96.3,80.7,72.3,70.5,56.2,56.1,55.9。MS(ESI):679.06(M+H⁺)。

B13:1,1'-双[(1E，4E)-5-(4-异丙氧基苯基)-1,4-二烯-3-酮]二茂铁；棕红色固体；收率76％；¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ7.54–7.46(m,6H),7.39(d,J＝8.2Hz,2H),6.84–6.71(m,6H),6.53(d,J＝15.6Hz,2H),4.56(m,6H),4.45(s,4H),1.35(d,J＝6.0Hz,12H)；¹³C NMR(101MHz,CDCl₃)δ187.9,159.9,142.7,142.1,130.1,127.3,124.3,123.1,115.8,80.7,72.5,70.4,70.0,22.0。MS(ESI):615.19(M+H⁺)。

上述实施例1-20制备的姜黄素类似物，其纯度在95％以上，以下表3给出了实施例-20制备的目标化合物的结构式：

表3-实施例1-20的姜黄素类似物化合物的结构式

效果例一

CCK-8法测定A1-A7和B1-B13分别对细胞存活率的影响：

试验步骤：将细胞接种在96孔板中，接种密度为2000个细胞/孔，培养12小时；吸弃细胞培养基，加入含有不同浓度测试化合物的新鲜培养基，采用姜黄素、顺铂作为对照组，继续培养48小时，培养基中的DMSO含量不超过0.1％；将CCK-8溶液加入到96孔板中(10μl/孔)，继续培养40分钟；然后使用多功能酶标仪在450nm处记录吸光度读数，测试结果表示为抑制细胞生长50％的测试化合物的浓度(IC₅₀)，检测结果如表4所示。

试验结果：从表2可看出，所有姜黄素类似物的抗癌细胞增殖活性的IC₅₀值均为微摩尔级别，B系列化合物普遍表现出比A系列化合物具有更高的抗癌细胞增殖活性(A2 vsB2；A3 vs B3；A4 vs B4；A5 vs B5；A6 vs B6；A7 vs B7)，但是A1却比B1表现出更低的抗癌细胞增殖活性。化合物B6、B7、B8、B10和B12表现出最佳的抗癌细胞增殖活性，IC₅₀值分别为0.756、0.334、0.305、0.379和0.706μM。其中，B7化合物的抗癌细胞增殖效果约为姜黄素的抗癌细胞增殖效果的16.8倍(IC₅₀＝5.626μM)，是著名的抗癌药物顺铂的7.3倍(IC₅₀＝2.451μM)。此外，带有三个甲氧基的化合物表现出比带有两个甲氧基的化合物具有更低的抗癌活性(B12 vs B7；B12 vs B8；B12 vs B10)。这些结果表明经过二茂铁结构修饰的姜黄素类似物能显著提高姜黄素的抗癌细胞增殖活性。

表4化合物A1-7和B1-13的抗MCF-7乳腺癌细胞增殖活性

注：IC₅₀值表示为三个独立实验的平均值±标准误差。

效果例二

B6、B7、B8、B10和B12对HFF人正常包皮成纤维细胞的细胞毒性影响：

由于药物不具有细胞选择性是目前限制抗癌药物临床使用的主要因素之一，为了深入了解这些新化合物对正常人体细胞的细胞毒性，我们进一步评估了上述效果例一中抗癌效果较好的五种代表性化合物以及姜黄素和顺铂对HFF人正常包皮成纤维细胞的细胞毒性，采用CCK-8法进行试验，并将这些化合物对HFF人正常包皮成纤维细胞的IC₅₀值和对MCF-7乳腺癌细胞的IC₅₀值的比值作为选择性强弱来进行判断。试验结果如表5所示，所有测试的化合物对乳腺癌细胞和肝癌细胞均具有选择性，但选择性不高。其中，B7化合物的选择系数到达了11.2，因此B7化合物将被用于进一步活性研究。

表5代表性化合物对人正常包皮成纤维细胞(HFF)的抗癌细胞增殖活性

注：选择指数(SI)＝(IC₅₀ MCF-7)/(IC₅₀ HFF)。

效果例三

姜黄素类似物B7对细胞形态影响的分析：

试验步骤：将MCF-7细胞接种到10cm平板培养皿中，培养12小时；吸弃培养基，用无血清培养基清洗一遍细胞，然后加入新鲜的含有不同浓度的B7化合物(0、0.3μM、0.6μM)继续培养24小时；运用倒置显微镜观察细胞形态，拍照保存，结果如图21所示。

试验结果：由图21可以看出随着B7化合物浓度的增加，细胞数量显著降低，并且细胞形态也发生了变化。B7化合物浓度越高，出现亮泡的细胞数量越多，这表明细胞正在发生凋亡。

效果例四

姜黄素类似物B7对细胞群落影响的分析：

试验步骤：将MCF-7细胞接种到6孔板中，接种密度为500个细胞/孔，用不同浓度的B7化合物(0、0.15μM、0.3μM)处理细胞24小时；吸弃培养基，PBS清洗细胞一遍，加入新鲜的培养基继续培养2-3天直到对照组细胞每个群落细胞数量达到50个细胞；吸弃培养基，加入甲醇固定细胞30分钟，然后用结晶紫染色15-20分钟；在空气中自然干燥6孔板培养皿，然后在倒置显微镜下观察细胞群落，拍照保存，结果如图22所示。

试验结果：如图22所示，B7化合物能显著抑制细胞群落的形成，当B7化合物浓度为0.3μM时，几乎没有细胞群生成，表明B7化合物具有很强的抑制细胞群落形成的能力。

效果例五

采用Hoechst 33342染色分析姜黄素类似物B7对细胞核的影响：

试验步骤：将MCF-7细胞接种到96孔板中，接种密度为5×10³个细胞/孔，在细胞培养箱中培养12小时；吸弃细胞培养基，用PBS清洗一遍细胞，然后加入新鲜的含有不同浓度的B7化合物(0、0.3μM、0.6μM)继续培养24小时；吸弃细胞培养基，用PBS清洗三遍细胞，每孔加入10μl Hoechst 33342(20μg/ml)，在室温避光条件下染色15分钟；运用荧光显微镜观察细胞形态，检测结果如图23所示。

试验结果：如图23所示，细胞的形态同样发生了变化，随着B7化合物浓度的升高，细胞数量减少且蓝色发亮细胞增多，表明核染色质发生聚集，这也是细胞凋亡的一个特征。

效果例六

采用吖啶橙-溴化乙锭双重染色分析姜黄素类似物B7对细胞凋亡的影响：

试验步骤：将MCF-7细胞接种到96孔板中，接种密度为5×10³个细胞/孔，在细胞培养箱中培养12小时；吸弃细胞培养基，用PBS清洗一遍细胞，然后加入新鲜的含有不同浓度的B7化合物(0、0.3、0.6μM)继续培养24小时；吸弃细胞培养基，用PBS清洗三遍细胞，每孔加10μl吖啶橙-溴化乙锭(100μg/ml)在室温避光条件下染色10分钟；运用荧光显微镜观察细胞形态，检测结果如图24所示。

试验结果：如图24所示，随着处理药物浓度的升高，细胞出现了从绿色到黄色/红色的明显颜色变化，这也是细胞凋亡的特征。

效果例七

姜黄素类似物B7对细胞迁移的影响：

试验步骤：将MDA-MB-231细胞接种到10cm平板培养皿中，在细胞培养箱中培养24小时；待细胞丰度达到80％时，吸弃细胞培养基，用PBS清洗细胞一遍，加入含1％FBS的细胞培养基继续培养12小时；吸弃细胞培养基，加入适量胰酶消化细胞2-3分钟，加入含血清的细胞培养基终止消化；离心弃去上清液，用PBS洗两遍，用含1％FBS的细胞培养基重悬细胞，计数，调整细胞密度为5×10⁴cells/ml；在24孔板下室加入750μl含20％FBS的培养基(含B7浓度分别为0、0.3μM、0.6μM)，将Transwell小室放进培养板，取细胞悬液100μl加入Transwell小室，在细胞培养箱中培养24小时；用镊子小心取出chamber，吸干上室液体，用PBS洗两次，移到预先加入约800μl甲醇的孔中，室温固定30min；取出chamber，吸干上室固定液，用PBS洗两次，移到预先加入约800μl 0.1％结晶紫染液的孔中，室温染色15-30分钟；轻轻用清水冲洗数次，取出chamber，吸去上室液体，用湿棉棒小心擦去上室底部膜表面上的细胞，用显微镜观察拍照，检测结果如图25所示。

效果例八

姜黄素类似物B7对细胞侵袭的影响：

试验步骤：在chamber上室底部中央垂直加入100μl用无血清培养基稀释均匀的matrigel，在细胞培养箱中温浴过夜，使其干成胶状；将MDA-MB-231细胞接种到10cm平板培养皿中，在细胞培养箱中培养24小时；待细胞丰度达到80％时，吸弃细胞培养基，用PBS清洗细胞一遍，加入含1％FBS的细胞培养基继续培养12小时；吸弃细胞培养基，加入适量胰酶消化细胞2-3分钟，加入含血清的细胞培养基终止消化；离心弃去上清液，用PBS洗两遍，用含1％FBS的细胞培养基重悬细胞，计数，调整细胞密度为5×10⁴cells/ml；用PBS清洗matrigel一次，在24孔板下室加入750μl含20％FBS的培养基(含B7浓度分别为0、0.3μM、0.6μM)，将Transwell小室放进培养板，取细胞悬液200μl加入Transwell小室，在细胞培养箱中培养24小时；用镊子小心取出chamber，吸干上室液体，用PBS洗两次，移到预先加入约800μl甲醇的孔中，室温固定30分钟；取出chamber，吸干上室固定液，用PBS洗两次，移到预先加入约800μl0.1％结晶紫染液的孔中，室温染色15-30分钟；轻轻用清水冲洗数次，取出chamber，吸去上室液体，用湿棉棒小心擦去上室底部膜表面上的细胞，用显微镜观察拍照，检测结果如图25所示。

效果例7-8试验结果：为了检测B7化合物是否具有抑制癌细胞迁移和侵袭的能力，选择了具有高度侵袭和转移能力的乳腺癌细胞MDA-MB-231作为代表性细胞进行B7化合物的活性评估。如图25所示，MDA-MB-231细胞在经过不同浓度的B7化合物处理24小时后，迁移通过小室的细胞数量随着浓度的升高而减少(图25a)，表明B7化合物能抑制细胞迁移。类似的，MDA-MB-231细胞在经过不同浓度的B7化合物处理24小时后，迁移通过Matrigel包被的小室的细胞数量随着浓度的升高而减少，表明B7化合物能抑制细胞侵袭(图25b)，而且B7化合物抑制细胞迁移和侵袭的能力并不是因为细胞毒性导致的，因为试验所采用的浓度远(0-0.3μM)低于其半数致死浓度(0.772μM)。

效果例九

姜黄素类似物B7对伤口愈合的影响，细胞划痕实验：

试验步骤：将MDA-MB-231细胞接种到6孔板中，接种密度为5×10⁵个细胞/孔，培养24小时；待细胞丰度达到95％以上时，用200μl移液枪枪头垂直于孔板制造划痕；吸弃培养基，用PBS清洗细胞三次以去除脱落的细胞，加入含1％FBS以及含有不同浓度的B7化合物(0、0.15、0.3μM)的培养基，继续培养24小时；运用倒置显微镜观察细胞，拍照保存，检测结果如图26所示。

试验结果：如图26所示，伤口愈合是癌细胞迁移生成新血管的关键步骤，未经药物处理的乳腺癌细胞在划伤后24小时内伤口已经完全愈合，而经过药物处理的乳腺癌细胞伤口愈合较慢，并且浓度越高，划痕距离越大，且24小时后依旧未愈合，这表明B7化合物能有效的抑制伤口愈合，可抑制血管的生成。

效果例十

姜黄素类似物B7对线粒体膜电位的影响分析：

试验步骤：将MCF-7细胞接种到10cm平板培养皿中培养12小时；吸弃培养基，用无血清培养基清洗一遍细胞，然后加入新鲜的含有不同浓度的B7化合物(0、0.3μM、0.6μM)继续培养24小时；吸弃细胞培养基，用PBS清洗细胞1次，加入胰酶消化细胞，加入含血清的培养基终止消化，离心，弃上清，再加入JC-1染色缓冲液重悬细胞，在37℃条件下孵育20分钟；通过流式细胞分析仪分析具有健康或者损伤的细胞膜电位的细胞百分比，检测结果如图27所示。

试验结果：越来越多的证据表明线粒体在调节细胞功能中起重要作用，而线粒体功能障碍或许与许多病理过程有关。为了探究B7化合物是否可以导致线粒体功能障碍，本次试验采用JC-1对MCF-7细胞的线粒体进行染色，然后检测线粒体膜电位(MMP)变化。如图27所示，随着B7化合物浓度的升高，绿色荧光强度从0.79％增加到28.31％，表明B7化合物导致MCF-7细胞的线粒体膜损伤进而导致线粒体功能障碍，最终导致细胞凋亡。

效果例十一

姜黄素类似物B7对细胞内活性氧(ROS)的影响：

试验步骤：将MCF-7细胞接种到96孔板中，接种密度为1×10⁵个细胞/孔，在细胞培养箱中培养24小时；吸弃细胞培养基，用PBS清洗一遍细胞，然后加入新鲜的含有不同浓度的B7化合物(0、0.3、0.6μM)继续培养2小时；吸弃细胞培养基，然后每孔加入100μl DCFH-DA(10μM)，在细胞培养箱中继续培养30分钟；用PBS清洗细胞以除去未进入细胞内的DCFH-DA，立即用多功能酶标仪检测荧光强度，激发波长为485nm，发射波长为535nm，ROS水平以测试组与对照组的比值表示，检测结果如图28所示。

试验结果：越来越多的证据表明，线粒体膜的损伤通常与线粒体产生ROS有关，因此本试验进一步采用荧光探针2'，7'-二氯荧光素二乙酸酯(DCF-DA)检测MCF-7细胞内的ROS水平。如图28所示，随着B7化合物浓度的上升，细胞荧光强度增加。然而当我们在细胞体系中提前加入还原剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)时，细胞内的荧光强度显著降低。该结果表明线粒体膜电位损伤确实产生ROS，而且损伤越严重ROS水平越高，然而过量产生ROS会导致氧化应激、细胞功能丧失以及细胞凋亡或坏死。

效果例十二

姜黄素类似物B7对细胞周期的影响分析：

试验步骤：将MCF-7细胞接种到10cm平板培养皿中，培养12小时；吸弃培养基，用无血清培养基清洗一遍细胞，然后加入新鲜的含有不同浓度的B7化合物(0、0.3、0.6μM)继续培养24小时；吸弃细胞培养基，用PBS清洗细胞1次，加入胰酶消化细胞，加入含血清的培养基终止消化，离心，弃上清，再加入70％乙醇在4℃条件下固定细胞过夜；离心去除乙醇，用含RNaseA(100μl)和碘化丙啶(400μl)的PBS溶液重悬细胞，放置30分钟；通过流式细胞分析仪分析细胞内不同细胞周期时的DNA含量，检测结果如图29所示。

试验结果：效果例11中提到B7化合物会促进ROS的产生，然而细胞对氧化应激的反应是一个复杂的过程，通常与细胞周期有关，因此本试验进一步研究B7化合物对细胞周期的影响。如图29所示，MCF-7细胞经B7化合物处理后期细胞周期被抑制在G2/M期，当B7化合物浓度从0升高到0.6μM时，处于G2/M期的细胞含量从13.65％升高到25.59％，这表明B7化合物可以诱导细胞周期阻滞于G2/M期。

以上所述的具体实施例，对本发明的目的、技术方案和有益效果进行了进一步的详细说明，应当理解，以上所述仅为本发明的具体实施例而已，并不用于限定本发明的保护范围。特别指出，对于本领域技术人员来说，凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims

1.一种姜黄素类似物，其特征在于，包括具有通式A或通式B结构的化合物，通式A和通式B的结构如下所示：

[通式A]：

[通式B]：

其中，通式A中的R为3，4，5-OCH₃、2，4-OCH₃、4-OCH₃、2,3,4-OCH₃或3,4-OCH₃，通式B中的R为3,4,5-OCH₃、2,4-OCH₃、2-CH₂CH₃、2,5-OCH₃、4-OCH₃、2,3,4-OCH₃、3,4-OCH₃、3,5-OCH₃、2,3-OCH₃、2,6-OCH₃、2,4,5-OCH₃或OCH(CH₃)₂。

2.一种姜黄素类似物的制备方法，其特征在于，用于制备如权利要求1所述的具有通式A结构的姜黄素类似物，包括以下步骤：

(1)在有机溶剂中，将二茂铁和二甲基甲酰胺通过Bouveault醛合成反应生成1，1’-二茂铁二甲醛；

(2)在有机溶剂中，利用碱将1，1’-二茂铁二甲醛与苯乙酮类化合物通过克莱森-斯密特(Claisen-Schmidt)缩合反应生成具有通式A结构的姜黄素类似物。

3.如权利要求2所述的一种姜黄素类似物的制备方法，其特征在于，所述苯乙酮类化合物具有通式C结构，通式C的结构如下所示：

[通式C]：

其中，通式C中的R与通式A中的R结构相同。

4.如权利要求2所述的一种姜黄素类似物的制备方法，其特征在于：

在步骤(1)中，将正丁基锂溶液滴加到含二茂铁和四甲基乙二胺(TMEDA)的无水己烷悬浮有机液中，搅拌并析出二锂化二茂铁沉淀，加入二甲基甲酰胺(DMF)，室温搅拌进行Bouveault醛合成反应，随后依次经萃取、过滤和干燥和纯化，得到1，1’-二茂铁二甲醛；

在步骤(2)中，将1，1’-二茂铁二甲醛和苯乙酮类化合物溶解在甲醇有机溶剂中，加入氢氧化钠溶液，室温搅拌进行克莱森-斯密特(Claisen-Schmidt)缩合反应，随后依次经浓缩、干燥和纯化后，得到具有通式A结构的姜黄素类似物。

5.一种姜黄素类似物的制备方法，其特征在于，用于制备如权利要求1所述的具有通式B结构的姜黄素类似物，包括以下步骤：

(2)在碱溶液中，将苯甲醛衍生物与丙酮发生加成反应得到亚苄基丙酮衍生物；

(3)在有机溶剂中，利用碱将亚苄基丙酮衍生物与1，1’-二茂铁二甲醛通过克莱森-斯密特(Claisen-Schmidt)缩合反应得到具有通式B结构的姜黄素类似物。

6.如权利要求5所述的一种姜黄素类似物的制备方法，其特征在于，所述苯甲醛衍生物具有通式D结构，通式D结构如下所示：

[通式D]：

其中，通式D中的R与通式B中的R结构相同。

7.如权利要求5所述的一种姜黄素类似物的制备方法，其特征在于，在步骤(1)中，将正丁基锂溶液滴加到含二茂铁和四甲基乙二胺(TMEDA)的无水己烷悬浮液中，搅拌并析出二锂化二茂铁沉淀，加入二甲基甲酰胺(DMF)，室温搅拌进行Bouveault醛合成反应，随后依次经萃取、过滤、干燥和纯化，得到1，1’-二茂铁二甲醛。

8.如权利要求5所述的一种姜黄素类似物的制备方法，其特征在于：

在步骤(2)中，将苯甲醛衍生物、丙酮和水充分混合，随后加入NaOH碱溶液，在室温下搅拌进行加成反应，收集有机层，浓缩后得到亚苄基丙酮衍生物；

在步骤(3)中，将1，1’-二茂铁二甲醛和亚苄基丙酮衍生物溶解在甲醇中，加入NaOH溶液，在室温下搅拌进行克莱森-斯密特(Claisen-Schmidt)缩合反应，依次经浓缩、干燥和纯化，得到具有通式B结构的姜黄素类似物。

9.一种如权利要求1所述的姜黄素类似物在抗癌细胞增殖药物中的应用。

10.如权利要求9所述的一种姜黄素类似物在抗癌细胞增殖药物中的应用。其特征在于，所述癌细胞为乳腺癌细胞或肝癌细胞。