CN104447436B - 一种磺酰腙类衍生物、其制备方法及其抗自由基或抗肿瘤活性应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种具有良好的抗自由基氧化损伤活性和抗肿瘤活性的磺酰腙类化合物，其结构式为：其中R₁为甲基，R₂和R ₃为氢，R₄为甲氧基，R₅为羟基，R₆为溴所构成的化合物，或者R₁，R₂，R₅，R₆为氢，R₃为羟基，R₄为甲氧基所构成的化合物抗自由基和抗肿瘤作用最好，并可能成为一种新型抗肿瘤药物。

Description

一种磺酰腙类衍生物、其制备方法及其抗自由基或抗肿瘤活 性应用

技术领域

本发明属于化学医药领域，更具体地，涉及一种具有抗自由基活性和抗肿瘤活性的磺酰腙类衍生物、其制备方法及其应用。

背景技术

癌症的发生是由多因素引起的，其中包括自由基，尤其是活性氧ROS。在癌症的启动和促进阶段都有自由基的参与，自由基可以攻击细胞膜使其发生脂质过氧化反应，破坏细胞内关键部位，导致 DNA 链发生断裂或形成交联，使其分子结构发生变化，引起基因突变导致癌症的发生。DNA 损伤后如果不能及时修复或者错误的修复都能够在某些重要的片段上导致癌症的发生。

由于近年来对 ROS 在细胞的致癌及增殖过程中作用的了解，同时又发现很多抗氧化剂具有预防癌症并抑制恶性肿瘤增殖的作用。已经发现癌变的两个阶段即诱癌与致癌都有活性氧自由基的参与，外源性以及内源性自由基以及自由基的链式反应启动癌基因的表达和损伤 DNA 造成染色体突变，从而诱发机体产生癌症。自由基与癌症的发生和发展密切相关，清除体内的活性氧自由基能够有效的预防并抑制癌症的发生。

潮汕地区乃至广东地区是肝癌和食管癌的高发区，在治疗肝癌和食管癌的药物中存在低效高毒的现象，所以开发和研究具有清除自由基活性，抗肿瘤活性且毒性较低的药物，一直是现在医药领域的一个重要方向。而腙类化合物是一类特殊的席夫碱，其分子结构中含有亚结构（-NHN=C-）。国内外大量的研究表明，腙类化合物在抗氧化、抗炎、抗菌、杀虫、抗病毒以及抗肿瘤等方面具有非常广泛的生理活性。其中，磺酰腙类化合物表现出优异的抗肿瘤活性。

发明内容

本发明为提供一种具有良好的抗氧化和抗肿瘤活性的磺酰腙类衍生物。

本发明的另一个目的在于提供一种制备上述磺酰腙类衍生物的方法。

本发明的再一个目的在于将上述磺酰腙类衍生物应用于制备消化道抗肿瘤药物。

上述所述的消化道肿瘤为肝癌和食管癌。

本发明提供的一系列磺酰腙衍生物清除自由基和抗肿瘤活性较强，在制备治疗消化道抗肿瘤药物方面有广阔的应用前景。

本发明所述的磺酰腙类衍生物，命名为取代苯甲醛-苯磺酰腙或取代苯甲醛-对甲苯磺酰腙，具有式I的分子结构：

式I

取代基R₁为氢、甲基， R_{2, 3, 4, 5, 6}为氢、烃基、羟基、烷氧基或卤素。

列举其中八种化合物如下所示：

优选地，R₄为甲氧基，且R₁为甲基，R_{2, 3,} 为氢，R₅为羟基，R₆为溴；或R_{1, 2, 5, 6}为氢，R₄为甲氧基，R₃为羟基。对这两种优选的磺酰腙衍生物的结构式及名称如下：

本文还提供了本发明所述的磺酰腙衍生物的制备方法，包括以下步骤：

（1）芳香取代磺酰肼和醛（酮）通过亲核加成-消除反应缩合，生成磺酰腙类化合物粗品；

制备S2的技术路线为：

制备S5的技术路线为：

（2）干燥后磺酰腙类化合物粗品经75%乙醇/水重结晶，即得磺酰腙类衍生物。

具体实施方式

以下结合具体实施例来进一步解释本发明，但实施例并不对本发明做任何形式的限定。除非特别说明，本发明采用的试剂以及设备为本技术领域试剂和设备。

实施例1 3-甲氧基-4羟基-5溴苯甲醛-对甲苯磺酰腙的制备

S2

称取对甲苯磺酰肼0.47g（2.5mmol）用适量无水乙醇50℃搅拌回流溶解，缓慢滴加等摩尔数5-溴香兰素的无水乙醇溶液，50℃反应1.5h。中止反应，将反应液倒入冷冰水中，立即有大量白色沉淀析出。抽滤，得黄色块状沉淀物，50℃真空干燥过夜，75%乙醇/水重结晶，得淡黄色针状结晶0.75g，产率为75.2%，mp：165.8-166.1℃。

S2的¹HNMR数据：

2.37（s，3H，Ar-CH₃），3.84（s，3H，O-CH₃），7.13（s，1H，），7.28（s，1H，），7.41（d，2H，，J=8.4Hz），7.77（d，2H，，J=8.4Hz），7.79（s，1H，N=CH），9.97（s，1H，Ar-OH），11.33（s，1H，NH）

实施例2 2-羟基-3-甲氧基苯甲醛-苯磺酰腙的制备

S5

称取苯磺酰肼0.86g（5mmol）用适量无水乙醇室温搅拌溶解，缓慢滴加等摩尔数邻香兰素的无水乙醇溶液，50℃反应1h，中止反应，蒸去部分溶剂，将反应液倒入冷冰水中，变混浊并在瓶壁析出浅棕色油状物，置冰箱24小时后析出大量淡黄色沉淀物。抽滤，水洗，得大量灰白色沉淀。50℃真空干燥过夜，75%乙醇重结晶，得无色针状结晶0.61g，产率为39.5%，mp：125.4-126.1℃。

S5的¹HNMR数据：

3.78（s，3H，O-CH₃），6.78（t，1H，，J=8Hz），6.97（d，1H，，J=8Hz），7.07（d，1H，，J=8Hz），7.61-7.67（m，3H，），7.87（d，2H，J=7.2Hz），8.21（s，1H，N=CH）， 9.65（s，1H，Ar-OH），11.54（s，1H，NH）

以下通过药效学试验和对比试验来进一步阐述本发明所述药物的有益效果。

试验例1 S2、S5清除DPPH、ABTS⁺自由基的能力测定

将S2、S5 配制为8mmol/L的溶液，进行梯度稀释成浓度分别为4mmol/L、2mmol/L、1mmol/L、0.5mmol/L、0.25mmol/L、0.125mmol/L、0.0625mmol/L、0.03125mmol/L的溶液。

将上述各浓度的溶液分别加到DPPH溶液（0.12mmol·L^-1）中，DPPH溶液的特征紫色变浅，在517nm处有最大吸收。根据吸光度的变化可测得S2, S5清除DPPH自由基的IC₅₀值分别为14.22, 13.81，VC的IC₅₀值为16.52，S2, S5的清除DPPH效价强于抗坏血酸VC。

将上述各浓度的溶液分别加到ABTS⁺溶液中，ABTS⁺溶液的特征绿色变浅或消失，在734nm处测定吸光度。根据吸光度的变化测得S2, S5清除ABTS⁺自由基的IC₅₀值分别为42.3,38.9。ABTS⁺溶液由ABTS和K₂S₂O₈溶液在室温避光的条件下混合12-16h制备得到。

按上述方法，测定10b清除DPPH、ABTS⁺自由基的能力。

S2和S5清除DPPH自由基或ABTS⁺自由基的能力与抗坏血酸的能力对比结果如下表：

表1 S2, S5清除DPPH自由基或ABTS⁺自由基活性

	清除DPPH自由基的IC50值	清除ABTS+自由基的IC50值
			抗坏血酸VC	16.52	58.9
S2	14.22	42.3
			S5	13.81	38.9

结果表明，S2和S5清除DPPH自由基或ABTS⁺自由基活性强于抗坏血酸VC。

试验例2 S2, S5 对肝癌细胞株HepG2和食管癌细胞株EC109的抗增殖能力测定

将HepG2，EC109细胞株消化制成 5 ×10^-4个/L 的细胞悬液, 每孔100 μL 的量接种于 96 孔培养板中, 用含 10% 胎牛血清的DMEM 培养液置 37 ℃、5% CO₂细胞培养箱中培养 24h, 按照实验分组要求培养后, 每孔加入20μL MTT （5mg/mL）溶液, 在 37 ℃ 继续孵育4 h 后吸出上清液, 每孔加入 150μL DMSO, 用平板摇床摇匀, 用酶标仪在 490nm 波长处检测每孔的吸光度(A 值)。以5-氟尿嘧啶（5-FU）为阳性药。

表2 S2, S5对肝癌细胞株HepG2细胞的抑制率

结果：S2, S5 对肝癌细胞株HepG2 的抑制活性强于5-FU2倍以上。

表3 S2, S5食对管癌细胞株EC109的抑制率

结果：S2, S5 对食管癌细胞株EC109的抑制活性强于5-FU。

Claims (1)

1.一种如式I所示的磺酰腙类衍生物在制备抗肿瘤药物中的应用，其特征在于，所述的肿瘤为肝脏肿瘤或食管肿瘤，式I 结构如下：

其中， 取代基R₁为甲基；

R₂为 氢；

R₃为 氢；

R₄为 甲氧基；

R₅为 羟基；

R₆为 溴；

或取代基R₁为氢；

R₂为 氢；

R₃为羟基；

R₄为 甲氧基；

R₅为氢；

R₆为氢。