CN114657269A - 一组高效能常染色体微单倍型遗传标记以及用于检测该组遗传标记的引物组 - Google Patents

一组高效能常染色体微单倍型遗传标记以及用于检测该组遗传标记的引物组 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一组高效能常染色体微单倍型遗传标记以及用于检测该组遗传标记的引物组。本发明提供了一种引物组，由398种引物组成；引物为单链DNA分子；398种引物的核苷酸序列依次如序列表的序列1至序列398所示。本发明还保护所述引物组在制备法医鉴定试剂盒中的应用。本发明还保护所述引物组在制备亲缘关系鉴定试剂盒中的应用。本发明中，发明人筛选得到了301个在千人基因组数据中Ae达到4以上的候选微单倍型。针对这301个候选基因座设计特异性引物，复合成了一套高分辨率微单倍型基因座多重检测体系。该体系共包含199个常染色体微单倍型。利用Miseq FGx平台检测得到两个样本的199个基因座均具有良好的均衡性。本发明对于法医鉴定和亲缘关系鉴定具有重大的应用推广价值。

Description

一组高效能常染色体微单倍型遗传标记以及用于检测该组遗 传标记的引物组
技术领域
本发明涉及一组常染色体微单倍型遗传标记以及用于检测该组遗传标记的引物组。
背景技术
微单倍型(microhaplotype,MH)由Kidd实验室(美国,耶鲁大学医学院)在2013年首先提出，是一种在几百个核苷酸以内，由两个或多个紧密连锁的单核苷酸多态性(singlenucleotide polymorphism,SNP)位点组合而成的多等位基因分子标记。
微单倍型遗传标记已被证实在多种法庭科学应用中具有优势，包括混合DNA分析，祖先推断以及亲缘鉴定等。自2013年Kidd教授提出微单倍型的概念以来，陆续有研究团队开发出新的微单倍型位点供法医工作者们使用。微单倍型具有非重复序列和多等位的特点，因而被认为是混合DNA分析中的理想遗传标记。
目前已报告的微单倍型基因座主要有2015年Nakahara Hiroaki等开发的27个微单倍型，2017年Kidd团队开发的130个微单倍型，Chen等在2018年共筛选得到的26个微单倍型，同团队在2019年发布的11个微单倍型以及2020年Sun等人新筛选的36个微单倍型等。Kidd等提出以有效等位基因数(effective number of alleles，Ae)作为衡量微单倍型基因座的混合DNA分析性能的参数。在以往的研究中筛选得到的微单倍型的Ae往往不如法医常用STR基因座高。例如，2020年Pang等对Kidd团队开发的130个微单倍型构建了复合扩增体系，在256个中国汉族无关个体的评估中，Ae高于5的基因座仅有3个，而研究中至少13个常用STR的Ae高于5。因此，开发一套更高Ae的微单倍型基因座是混合DNA分析应用中所需要的。
发明内容
本发明的目的是提供一组高效能常染色体微单倍型遗传标记以及用于检测该组遗传标记的引物组。
本发明提供了一种引物组，由398种引物组成；引物为单链DNA分子；398种引物的核苷酸序列依次如序列表的序列1至序列398所示。
所述引物组中：各种引物的配比见表2。
所述引物组可用于鉴定199个微单倍型。
所述引物组可用于鉴定917个SNP。
本发明还保护所述引物组在制备法医鉴定试剂盒中的应用。
本发明还保护所述引物组在制备亲缘关系鉴定试剂盒中的应用。
本发明还保护所述引物组在法医鉴定中的应用。
本发明还保护所述引物组在亲缘关系鉴定中的应用。
本发明还保护一种试剂盒，包括所述引物组。
本发明还保护所述试剂盒的制备方法，包括将所述引物组中的所有引物混合包装的步骤。
本发明还保护所述试剂盒在法医鉴定中的应用。
本发明还保护所述试剂盒在亲缘关系鉴定中的应用。
所述试剂盒可用于鉴定199个微单倍型。
所述试剂盒可用于鉴定917个SNP。
所述199个微单倍型如下：mh01WL-005、mh01WL-006、mh01WL-007、mh01WL-010、mh01WL-011、mh01WL-012、mh01WL-013、mh01WL-020、mh01WL-027、mh01WL-033、mh01WL-037、mh01WL-038、mh01WL-041、mh01WL-042、mh01WL-043、mh01WL-044、mh01WL-045、mh01WL-047、mh02WL-002、mh02WL-003、mh02WL-005、mh02WL-009、mh02WL-014、mh02WL-017、mh02WL-028、mh02WL-029、mh02WL-030、mh02WL-031、mh02WL-032、mh02WL-035、mh02WL-036、mh02WL-038、mh02WL-040、mh02WL-041、mh02WL-044、mh02WL-047、mh02WL-050、mh03WL-003、mh03WL-006、mh03WL-009、mh03WL-010、mh03WL-011、mh03WL-013、mh03WL-015、mh03WL-016、mh03WL-017、mh03WL-021、mh03WL-022、mh03WL-029、mh03WL-035、mh03WL-038、mh03WL-039、mh04WL-003、mh04WL-005、mh04WL-007、mh04WL-009、mh04WL-022、mh04WL-023、mh04WL-026、mh04WL-027、mh04WL-028、mh04WL-030、mh04WL-031、mh04WL-033、mh04WL-035、mh04WL-036、mh04WL-037、mh05WL-001、mh05WL-002、mh05WL-003、mh05WL-004、mh05WL-008、mh05WL-010、mh05WL-013、mh05WL-019、mh05WL-021、mh05WL-024、mh05WL-025、mh05WL-026、mh05WL-030、mh05WL-031、mh05WL-033、mh06WL-004、mh06WL-005、mh06WL-007、mh06WL-008、mh06WL-009、mh06WL-012、mh06WL-014、mh06WL-018、mh06WL-027、mh06WL-029、mh06WL-031、mh06WL-032、mh06WL-034、mh07WL-003、mh07WL-004、mh07WL-005、mh07WL-007、mh07WL-009、mh07WL-011、mh07WL-012、mh07WL-015、mh07WL-016、mh07WL-020、mh07WL-022、mh07WL-023、mh07WL-034、mh07WL-036、mh08WL-003、mh08WL-005、mh08WL-008、mh08WL-009、mh08WL-011、mh08WL-012、mh08WL-015、mh08WL-018、mh08WL-023、mh08WL-024、mh08WL-026、mh08WL-027、mh09WL-003、mh09WL-004、mh09WL-005、mh09WL-006、mh09WL-010、mh09WL-013、mh09WL-015、mh10WL-001、mh10WL-003、mh10WL-005、mh10WL-007、mh10WL-012、mh10WL-013、mh10WL-015、mh10WL-021、mh10WL-022、mh11WL-002、mh11WL-004、mh11WL-005、mh11WL-007、mh11WL-008、mh11WL-009、mh11WL-012、mh11WL-020、mh12WL-002、mh12WL-004、mh12WL-005、mh12WL-006、mh12WL-009、mh12WL-010、mh12WL-011、mh12WL-018、mh12WL-022、mh12WL-023、mh12WL-024、mh12WL-025、mh13WL-001、mh13WL-003、mh13WL-005、mh13WL-010、mh13WL-012、mh13WL-013、mh14WL-001、mh14WL-004、mh14WL-005、mh14WL-008、mh14WL-009、mh14WL-013、mh14WL-016、mh15WL-001、mh15WL-003、mh15WL-004、mh15WL-013、mh15WL-015、mh15WL-017、mh15WL-019、mh16WL-003、mh16WL-004、mh16WL-008、mh16WL-013、mh16WL-018、mh17WL-003、mh17WL-004、mh17WL-009、mh17WL-010、mh17WL-011、mh17WL-015、mh17WL-016、mh18WL-002、mh18WL-005、mh18WL-013、mh19WL-001、mh19WL-009、mh20WL-003、mh20WL-007、mh20WL-008、mh20WL-009和mh20WL-011。
所述199个微单倍型具体见表1的第1列。
所述199个微单倍型的具体信息见表1。
所述917个SNP如下：rs11119867、rs11119868、rs4951574、rs11583051、rs7550051、rs10802546、rs1266382、rs1266383、rs4659682、rs10925157、rs6662274、rs6685989、rs6677537、rs6662404、rs10918905、rs74120927、rs72703787、rs11576829、rs78127998、rs858113、rs10918906、rs16846350、rs74139746、rs12093903、rs3820638、rs16835120、rs2490423、rs150658758、rs16835127、rs10918374、rs2341465、rs6668329、rs1725260、rs116890383、rs1725261、rs1725262、rs99174、rs72712989、rs357064、rs3128333、rs148611022、rs144236779、rs112359187、rs7364595、rs12562987、rs7544172、rs79314878、rs78437080、rs7541801、rs7544268、rs60833534、rs1546766、rs12128701、rs1972155、rs476283、rs112864886、rs12734689、rs4839444、rs79661270、rs563998、rs563992、rs563980、rs6425124、rs76364717、rs10912164、rs76740939、rs75025140、rs80080263、rs6425992、rs12042056、rs11810587、rs1336130、rs1336131、rs1533623、rs1533622、rs4142791、rs17131325、rs347029、rs78831116、rs613217、rs12742998、rs17372453、rs4912351、rs60008712、rs79018108、rs4912352、rs7555371、rs11807872、rs6670238、rs12026376、rs11586331、rs10175601、rs10210256、rs72926275、rs10210537、rs10190094、rs3820781、rs10181993、rs3820780、rs3820779、rs561995、rs536137、rs13399585、rs560956、rs78638539、rs1434112、rs4852535、rs12997328、rs1434111、rs13420405、rs114348754、rs16855079、rs60587303、rs11890048、rs11691504、rs75919336、rs11900625、rs62185756、rs4674556、rs4477907、rs72968648、rs77788766、rs6726044、rs10191936、rs12999343、rs61060565、rs79928199、rs56389742、rs73003452、rs6724031、rs719595、rs719596、rs719593、rs4443039、rs6729249、rs6716353、rs62124787、rs7576183、rs6542588、rs6542589、rs16823166、rs2204902、rs2204901、rs13403886、rs2204900、rs10804225、rs35747291、rs6737326、rs6737229、rs17019662、rs12712517、rs56029564、rs17019664、rs140212558、rs11680676、rs11673784、rs11680713、rs79942136、rs12617710、rs11684587、rs67348767、rs56976146、rs4972594、rs117532062、rs4972408、rs17813202、rs3064101、rs62179606、rs12620434、rs1036294、rs6544942、rs1036295、rs35872096、rs72622556、rs72622557、rs2035102、rs1461268、rs35225898、rs140975620、rs2616593、rs2728063、rs2616592、rs2616591、rs12496271、rs13099784、rs4440141、rs17009383、rs6790203、rs4955146、rs73827204、rs3867379、rs62261809、rs73123362、rs3911516、rs2597230、rs2775154、rs1185220、rs4472048、rs4435636、rs62252780、rs4496473、rs12637532、rs13084271、rs6782206、rs58069725、rs710597、rs4687123、rs710598、rs710599、rs9876525、rs2350497、rs2882429、rs13065761、rs9872883、rs9853091、rs12492852、rs9820376、rs74282562、rs2109409、rs56283092、rs16824723、rs75018547、rs9869815、rs9850393、rs55654578、rs2319305、rs2319306、rs4401335、rs11711747、rs62247567、rs13071886、rs9863256、rs75165935、rs16848265、rs76344017、rs138371083、rs372405456、rs36127459、rs36197486、rs313936、rs3822280、rs3822281、rs3822282、rs7657219、rs313935、rs4279197、rs13132046、rs13132246、rs6834670、rs6834909、rs13104723、rs12649715、rs12649111、rs10025721、rs58857469、rs55944510、rs13114257、rs34333259、rs34917904、rs295224、rs295223、rs28457169、rs28670363、rs56245659、rs34045823、rs28448292、rs17050878、rs72680309、rs12499286、rs10016086、rs5015586、rs7656741、rs79783707、rs61149859、rs6817993、rs73816283、rs17081616、rs73125564、rs73125566、rs11936953、rs10024233、rs1025847、rs74652347、rs1025848、rs1016185、rs1016184、rs12503567、rs1553619、rs12507527、rs1553620、rs76899508、rs11935733、rs7694605、rs1381962、rs113201195、rs1381963、rs112585960、rs1381964、rs13185934、rs76865591、rs12188767、rs12188768、rs7702282、rs12516726、rs75469971、rs1363513、rs1363514、rs72660784、rs2900038、rs6898683、rs2052550、rs638073、rs74772620、rs638060、rs541503526、rs490329、rs1806132、rs1806094、rs1806093、rs256255、rs10491291、rs256256、rs256257、rs7715472、rs2642778、rs2591790、rs2591791、rs2642779、rs2642780、rs35138278、rs282290、rs282291、rs1437125、rs2421059、rs377474907、rs7702436、rs11948938、rs60570779、rs4146192、rs4146195、rs4146194、rs7717933、rs7700860、rs7719212、rs10520895、rs968419、rs56128577、rs11743649、rs6876806、rs57258507、rs17732378、rs61467430、rs58051462、rs76933101、rs7726431、rs143876253、rs13170982、rs17105785、rs3797057、rs32946、rs117055966、rs32945、rs9374163、rs9372250、rs9320324、rs9320325、rs7765990、rs56091651、rs76958343、rs78611110、rs10484348、rs16874548、rs1075665、rs2307373、rs2307379、rs3819724、rs3819725、rs3819726、rs3819727、rs3819728、rs1555054、rs10806767、rs534564738、rs59830421、rs9365492、rs16882875、rs78971226、rs6458855、rs6902435、rs60373379、rs185621365、rs67871424、rs6557232、rs34170156、rs12526829、rs10945514、rs200538603、rs57987480、rs55685832、rs10945516、rs13215061、rs372903846、rs6905159、rs74680508、rs16891327、rs117905422、rs6905820、rs35890417、rs223592、rs742380、rs760954、rs72500595、rs12526421、rs4714872、rs9395121、rs9395122、rs11759008、rs9502569、rs9502570、rs62393595、rs9393460、rs1321897、rs35983066、rs36086996、rs73168338、rs11976878、rs73714297、rs73714298、rs73714299、rs73714300、rs553056418、rs4329178、rs62447871、rs62447872、rs4329179、rs11767642、rs11978283、rs77954465、rs7788721、rs10238094、rs7788502、rs10238109、rs113582339、rs7807533、rs205756、rs157926、rs75885220、rs11772815、rs6958133、rs11772770、rs59233121、rs11765845、rs16874525、rs67644657、rs113300562、rs35735948、rs112152970、rs59169432、rs6961988、rs10266582、rs1488512、rs319300、rs319299、rs12536738、rs7804755、rs7804773、rs12673166、rs10951886、rs12666798、rs34598155、rs11771826、rs11978141、rs7801695、rs12667263、rs6976748、rs6976503、rs273144、rs273145、rs71538623、rs10256375、rs56825774、rs11238208、rs10488327、rs2726069、rs58031278、rs34578041、rs16880934、rs76170009、rs13276678、rs2514341、rs16896628、rs10216623、rs61006720、rs75929510、rs7828131、rs186721342、rs7844732、rs59858156、rs62512907、rs16934309、rs10957422、rs12545635、rs56335415、rs56117030、rs10099729、rs13282943、rs75622753、rs959757、rs77718050、rs60644074、rs1993208、rs79555624、rs72507645、rs77985912、rs73672723、rs78918423、rs66489805、rs78660914、rs10504880、rs6986107、rs6999527、rs7830706、rs7464104、rs4455823、rs16882722、rs4556085、rs35553521、rs12681051、rs11774245、rs11774252、rs16904693、rs2673581、rs2597374、rs16904694、rs7821178、rs57138870、rs79040243、rs10491886、rs28472295、rs10491885、rs10968632、rs10968633、rs10125791、rs2987741、rs7047561、rs1156731、rs10817560、rs10817561、rs7867434、rs66892783、rs1469745、rs12353154、rs13300818、rs4977444、rs913700、rs4992812、rs4992813、rs2360716、rs4986759、rs146649501、rs4639578、rs6477589、rs6477590、rs6477591、rs7855060、rs10977317、rs2570295、rs2570296、rs2570297、rs12685598、rs2570298、rs6597839、rs7908115、rs34997829、rs6597840、rs28519979、rs6597841、rs75338350、rs756020、rs2457861、rs75151358、rs2642607、rs9645503、rs2642606、rs9645504、rs10884113、rs12413101、rs10786850、rs17655804、rs12415889、rs4880667、rs4880668、rs10904212、rs11252408、rs4142672、rs4142673、rs4142674、rs73329419、rs1252892、rs2182165、rs912807、rs4746891、rs190467703、rs4746892、rs72824928、rs1886606、rs7077625、rs878747、rs12770865、rs10788705、rs2376611、rs10788706、rs2279616、rs2279617、rs2279618、rs8808、rs4930027、rs10734256、rs418439、rs77284315、rs2515254、rs10898363、rs78411471、rs7947409、rs76168657、rs12365397、rs76503871、rs76476328、rs78484501、rs12574821、rs11222039、rs11601883、rs10894188、rs870332、rs2512075、rs2510133、rs2510134、rs11025542、rs11025543、rs76066547、rs11025544、rs2270679、rs2216998、rs6588955、rs73550477、rs2194844、rs117519938、rs10784676、rs10878751、rs10784677、rs10878752、rs11111068、rs10860807、rs75704291、rs79656532、rs61935789、rs1551845、rs2126622、rs7966197、rs1037997、rs79968241、rs7971277、rs74064131、rs17346872、rs61912796、rs79730559、rs4269977、rs10849630、rs3884577、rs3742057、rs11183384、rs3742058、rs3742059、rs10744558、rs11611619、rs76008323、rs520825、rs10774019、rs61906961、rs79546991、rs4761512、rs892491、rs61935444、rs1434237、rs3913079、rs74424563、rs3901660、rs3843623、rs6488668、rs7961959、rs10845939、rs118010816、rs1895954、rs1895953、rs1895952、rs7486969、rs12426206、rs7968107、rs10862814、rs11116193、rs7978233、rs139769118、rs8002895、rs4142200、rs4142201、rs9589941、rs7982573、rs9524387、rs67626349、rs9568197、rs9316447、rs896000、rs896001、rs896002、rs896003、rs595825、rs426049、rs408642、rs378609、rs474054、rs9315199、rs2149859、rs570992、rs571057、rs61948769、rs57119344、rs56283581、rs12584253、rs7330452、rs9603516、rs7335737、rs7330627、rs7330119、rs71414180、rs12879112、rs2747091、rs2747092、rs79184081、rs56220001、rs10131981、rs17107120、rs2332753、rs6575256、rs7154848、rs72631613、rs7155002、rs12590273、rs76684693、rs74042350、rs7140539、rs12147074、rs8019382、rs1253686、rs1253687、rs17615874、rs10873497、rs10139755、rs10139867、rs10144863、rs1118119、rs17726763、rs1118118、rs17121444、rs76265814、rs2372985、rs1875417、rs1875416、rs28491654、rs1875415、rs8034493、rs8035569、rs8035595、rs8034380、rs904372、rs3101651、rs745331、rs3104513、rs732916、rs8025148、rs8025460、rs59910040、rs8025467、rs12900428、rs10162687、rs75777581、rs12904683、rs12903854、rs1538131、rs1538132、rs8030928、rs74355053、rs12050534、rs12050539、rs12050538、rs77824716、rs80164756、rs7186185、rs117354000、rs76992156、rs1560109、rs11645674、rs148882194、rs9925735、rs62027339、rs62027340、rs62027341、rs143585690、rs140288033、rs390112、rs390379、rs426580、rs422842、rs7190826、rs8063019、rs10852602、rs8045324、rs9940853、rs9940862、rs284983、rs12597818、rs9930435、rs12149390、rs62044982、rs11646642、rs79327881、rs62044983、rs77768922、rs72792997、rs12452943、rs4796165、rs4541123、rs12953230、rs146855883、rs2889386、rs16967221、rs2120192、rs6501742、rs9891808、rs113724779、rs79699949、rs76232934、rs72806091、rs71354719、rs62055032、rs77392217、rs71355229、rs71355230、rs77768946、rs536547537、rs76348814、rs76975040、rs71354720、rs1399062、rs1399063、rs1399064、rs1399065、rs16948340、rs12453867、rs9915423、rs16955267、rs2934899、rs4600520、rs4420592、rs2332307、rs7503060、rs2354762、rs2354763、rs73353471、rs9946246、rs80058239、rs4797173、rs4797174、rs9952919、rs9946353、rs9966977、rs9967164、rs77423215、rs11151807、rs56012714、rs2617941、rs34824207、rs77976286、rs9961039、rs12981234、rs10415518、rs8110107、rs8110128、rs72558013、rs10419866、rs12978036、rs10420798、rs11672621、rs11672623、rs10423902、rs68049、rs3091958、rs62205412、rs13036500、rs13036516、rs6084218、rs6076450、rs6037439、rs56215087、rs16988276、rs75546754、rs6134428、rs56411315、rs17262364、rs6041019、rs6131288、rs73622277、rs73622278、rs73622279、rs11086443、rs4810802、rs6090857和rs6012444。
所述917个SNP的具体信息见表1。
本发明中，发明人基于gnomAD数据库的SNP频率，利用千人基因组的群体基因分型数据遍历了常染色体几乎所有变异，最终筛选得到了301个在千人基因组数据中Ae达到4以上的候选微单倍型。针对这301个候选基因座设计特异性引物，复合成了一套高分辨率微单倍型基因座多重检测体系。该体系共包含199个常染色体微单倍型，包括86个Ae≥5的微单倍型，33个Ae≥6的微单倍型，且有14个微单倍型的Ae在8以上。199个微单倍型中，Ae最高达到15.32。利用Miseq FGx平台检测得到两个样本的199个基因座均具有良好的均衡性。
本发明对于法医鉴定和亲缘关系鉴定具有重大的应用推广价值。
附图说明
图1为部分微单倍型的靶序列示意图。
图2为部分微单倍型的靶序列示意图。
图3为部分微单倍型的靶序列示意图。
图4为部分微单倍型的靶序列示意图。
图5为部分微单倍型的靶序列示意图。
图6为部分微单倍型的靶序列示意图。
图7为部分微单倍型的靶序列示意图。
图8为部分微单倍型的靶序列示意图。
图9为部分微单倍型的靶序列示意图。
图10为部分微单倍型的靶序列示意图。
图11为部分微单倍型的靶序列示意图。
图12为部分微单倍型的靶序列示意图。
图13为部分微单倍型的靶序列示意图。
图14为部分微单倍型的靶序列示意图。
图15为部分微单倍型的靶序列示意图。
图16为部分微单倍型的靶序列示意图。
图17为部分微单倍型的靶序列示意图。
图18为部分微单倍型的靶序列示意图。
图19为部分微单倍型的靶序列示意图。
图20为部分微单倍型的靶序列示意图。
图21为部分微单倍型的靶序列示意图。
图中，下划线标注引物对应区域，方框依次标注各个SNP。
图中，标注的SNP均为单核苷酸，如果两个SNP相邻，在图中显示位于同一个方框中。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明进行进一步的详细描述，给出的实施例仅为了阐明本发明，而不是为了限制本发明的范围。以下提供的实施例可作为本技术领域普通技术人员进行进一步改进的指南，并不以任何方式构成对本发明的限制。
下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
基因座筛选工作均使用python语言编写脚本在Linux系统上执行。hg19人类基因组的信息：http://hgdownload.soe.ucsc.edu/goldenPath/hg19/bigZips。千人基因组群体基因分型数据：https://ftp-trace.ncbi.nih.gov/1000genomes/ftp/release/20130502/ALL.chr1～22.phase3_shapeit2_mvncall_integrated_v5a.20130502.genotypes.vcf.gz。gnomAD数据库频率数据：http://gnomad-sg.org/downloads。
实施例1、基于gnomAD数据库与千人基因组群体基因分型数据的微单倍型筛选
一、变异数据中的SNP过滤
千人基因组基因型数据只保留东亚人群(105名中国南方汉族人、93名中国西双版纳傣族人、99名越南胡志明市居民、104名日本东京居民和103名中国北京汉族人)的基因型数据。根据以下原则进行变异数据过滤：(1)gnomAD数据库中变异频率低于0.02或高于0.98的SNP；(2)位于基因组重复区域的SNP(http://hgdownload.soe.ucsc.edu/goldenPath/hg19/database/genomicsuperdups.txt.gz)；(3)位于低复杂序列区域或重复序列区域(http://hgdownload.soe.ucsc.edu/goldenPath/hg19/database/rmsk.txt.gz)的SNP；(4)位于编码区的SNP(http://hgdownload.soe.ucsc.edu/goldenPath/hg19/database/ncbiRefSeq.txt.gz)。
二、基于SNP坐标的微单倍型聚集
根据每条染色体数据中的SNP坐标，以滑动窗口的方式聚集200bp内所有的过滤后的SNP，并以10bp的距离向后延伸。
三、微单倍型的筛选
经过以上过程后生成的文件，将文件每行整理为一个微单倍型的格式，同时计算了每个微单倍型在人群中的频率和Ae值。然后根据以下原则进行微单倍型筛选：(1)位点必须距离着丝粒区5M bp以上(http://hgdownload.soe.ucsc.edu/goldenPath/hg19/database/cytoBand.txt.gz)；(2)包含至少3个SNP；(3)不得包含插入和缺失变异。根据各单倍型频率平方和的倒数计算筛选得到的各微单倍型的Ae值。对于相距5M bp以内的微单倍型，只保留Ae值最高的一个。这个过程会将由滑窗得到的重叠的微单倍型一并过滤。最后保留了筛选得到的Ae为4以上的301个候选微单倍型。
Figure BDA0003632966320000071
pi为所有样本数据中现察到的单倍型的频率。
四、微单倍型的命名
根据Kidd等的建议(http://doi.org/10.1186/s40246-016-0078-y)为候选微单倍型命名。
实施例2、基于二代测序技术检测微单倍型的试剂盒制备
一、引物的设计
针对301个候选微单倍型基因座的核心区域坐标，基于hg19对各基因座设计引物，通过摸索实验条件，使多数引物扩增条件尽可能一致，筛选复合扩增效率好的酶进行扩增以达到实验要求。
通过分析实验所得数据证明，在Tm＝60℃，25个循环时所得位点个数最多、分型准确且测序深度较为均一。优化后的PCR扩增反应程序：95℃5min；95℃30s、60℃2min、72℃2min，25个循环；72℃5min；4℃保存。
测序深度较差或未被检测到的微单倍型基因座通过引物优化、调整引物浓度来达到实验预期结果。过程包括，引物的重新设计，引物的简并碱基查找，引物浓度的调整。
经过301个候选微单倍型基因座的引物设计并检测，最终结果保留199个有效引物对组合，包含398条引物，用于检测199个微单倍型。199个微单倍型的SNP组成，各个SNP所位于的染色体以及在染色体上的位置信息以及多态形式见表1(表1中“SNP在染色体上的位置”指的是对应于参考基因组GRCh37.p13的位置)。用于检测199个微单倍型的398条引物的核苷酸序列以及在反应体系中的工作浓度见表2。
表1 微单倍型的SNP组成以及各个SNP信息
Figure BDA0003632966320000081
Figure BDA0003632966320000091
Figure BDA0003632966320000101
Figure BDA0003632966320000111
Figure BDA0003632966320000121
Figure BDA0003632966320000131
Figure BDA0003632966320000141
Figure BDA0003632966320000151
Figure BDA0003632966320000161
Figure BDA0003632966320000171
Figure BDA0003632966320000181
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Figure BDA0003632966320000201
Figure BDA0003632966320000211
Figure BDA0003632966320000221
Figure BDA0003632966320000231
Figure BDA0003632966320000241
Figure BDA0003632966320000251
Figure BDA0003632966320000261
Figure BDA0003632966320000271
Figure BDA0003632966320000281
Figure BDA0003632966320000291
表2用于检测各个微单倍型的引物以及引物在PCR扩增体系中的浓度
Figure BDA0003632966320000292
Figure BDA0003632966320000301
Figure BDA0003632966320000311
Figure BDA0003632966320000321
Figure BDA0003632966320000331
Figure BDA0003632966320000341
引物中的简并碱基含义如下：R代表A或G，Y代表C或T，M代表A或C，K代表G或T，S代表G或C，W代表A或T，H代表A或T或C，B代表G或T或C，V代表G或A或C，D代表G或A或T，N代表A或T或C或G。
二、基于二代测序技术的检测微单倍型基因座的试剂盒的制备
制备引物混合物。引物混合物由398种条引物组成，均为单链DNA分子，依次如序列表的序列1至序列398所示(见表2)。
基于二代测序技术的检测微单倍型基因座的试剂盒包括引物混合物。
实施例3、基于二代测序技术的检测微单倍型基因座的试剂盒的应用
一、DNA样本准备
标准品样本：2800M Control DNA,Promega,DD7101。
供试样本：血卡，血样采集自一位男性志愿者。
提取供试样本的基因组DNA，然后用超纯水稀释至DNA浓度为1ng/μL，即为模板溶液。取标准品样本，用超纯水稀释至DNA浓度为1ng/μL，即为模板溶液。共计两种模板溶液。
二、PCR扩增
取模板溶液，进行PCR扩增，得到PCR扩增产物。
PCR扩增的反应体系(20μL)：含有1μL模板溶液、1U TaqDNA polymerase和引物混合物。引物混合物提供的有效成分为表2中列出的398种引物。PCR扩增的反应体系中，各个引物的浓度见表2。PCR扩增的反应体系还含有如下组分，且各个组分在体系中的浓度如下：20mM Tris-HClpH 8.3、50mM KCl、1.6mM MgCl2、0.8mg/mL牛血清白蛋白、0.2％(体积比)Tween-20、3.2％(体积比)甘油、0.02g/100ml NaN3、200mM dNTP。PCR扩增的反应体系中，除了上述组分，余量为ddH2O。
PCR扩增反应程序：95℃5min；95℃30s、60℃2min、72℃2min，25个循环；72℃5min；4℃保存。
三、PCR扩增产物的纯化
完成步骤二后，取PCR扩增产物，采用PCR Purification Kit并按说明书操作，进行DNA纯化，得到纯化产物。
PCR Purification Kit(250)：QIAGEN公司，产品目录号为28006。
四、文库制备
1、取步骤三得到的纯化产物，采用TruSeq DNA PCR-Free HT Library Prep Kit并按说明书操作，进行文库制备。
TruSeq DNA PCR-Free HT Library Prep Kit：Illumina公司，产品目录号为FC-121-3003。文库制备的过程依次包括：末端修复、末端修复产物纯化、连接A-tail、连接Adapter以及连接产物的纯化。
2、取步骤1的产物，采用KAPA Library Quantification Kit进行文库定量，然后进行文库均一化，得到文库溶液。
KAPA Library Quantification Kit：KAPA公司，产品目录号为KK4824。
五、上样测试
取步骤四得到的文库溶液，采用测序试剂
Figure BDA0003632966320000351
Reagent Micro Kit v2(300-cycles)在MiSeq FGx二代测序仪(MiSeq FGx Forensic Genomics System，Verogen公司)进行测序(测序读长设置为正向251bp，反向51bp)。
Figure BDA0003632966320000352
v2 Reagent Kit：Illumina公司，产品目录号为MS-103-1002。
六、数据分析
MHTyper微单倍型等位基因调用程序流程详见Zhang等人的研究：https://doi.org/10.1080/00450618.2019.1699956。将测序平台得到的fastq格式文件上传到部署有MHTyper软件的Linux服务器中，使用MHTyper分析。
质控：设置最低测序深度阈值为10X，最低等位基因比例为主要等位基因测序深度的0.01。低于以上两种阈值的等位基因被认为是由测序错误或污染等导致，均由MHTyper过滤。
统计：MHTyper软件将上传的样本测序数据反馈为各基因座等位基因分型，测序深度和数字分型以表格文件(.xlsx)给出，并将各基因座等位基因以图形展示(.png)。
结果见表3。标准品样本与供试样本均获得了完整的基因座分型。结果表明，本发明能够满足法医物证检验的要求。针对表3中的数据，示例性的解释如下：以mh01WL-005为例，依次由5个SNP组成(rs11119867、rs11119868、rs4951574、rs11583051、rs7550051，见表1)，其等位基因1对应的基因型为“CCTAA”并且等位基因2对应的基因型为“TTCAA”，指的是一条染色体上所述5个SNP依次为C、C、T、A、A，另一条同源染色体上的所述5个SNP依次为T、T、C、A、A。针对表3中的数据，示例性的解释如下：以mh01WL-020为例，依次由3个SNP组成(rs99174、rs72712989、rs357064，见表1)，其等位基因1对应的基因型为“TCC”且等位基因2对应空白，指的是一条染色体上所述3个SNP依次为T、C、C，另一条同源染色体上的所述3个SNP同样依次为T、C、C。
表3 分型检测结果
Figure BDA0003632966320000361
Figure BDA0003632966320000371
Figure BDA0003632966320000381
Figure BDA0003632966320000391
Figure BDA0003632966320000401
以上对本发明进行了详述。对于本领域技术人员来说，在不脱离本发明的宗旨和范围，以及无需进行不必要的实验情况下，可在等同参数、浓度和条件下，在较宽范围内实施本发明。虽然本发明给出了特殊的实施例，应该理解为，可以对本发明作进一步的改进。总之，按本发明的原理，本申请欲包括任何变更、用途或对本发明的改进，包括脱离了本申请中已公开范围，而用本领域已知的常规技术进行的改变。按以下附带的权利要求的范围，可以进行一些基本特征的应用。
序列表
<110> 公安部物证鉴定中心
北京安智因生物技术有限公司
<120> 一组高效能常染色体微单倍型遗传标记以及用于检测该组遗传标记的引物组
<130> GNCYX221175
<160> 398
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 1
ggtctgaacc ttgttttggt 20
<210> 2
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 2
gacaagttcc agtaytggct 20
<210> 3
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 3
ttggagcaca ttttcccagc 20
<210> 4
<211> 31
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 4
gtaaaaaaat catgakttta gacatgaatt g 31
<210> 5
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 5
tcttacatgc ttttctctga ct 22
<210> 6
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 6
cagaggcagt gatcttcayt 20
<210> 7
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 7
ggcagctrrg ttcacttgaa ta 22
<210> 8
<211> 25
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 8
gtgtycatgg agtaatatag agatg 25
<210> 9
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 9
gcactttcag aaaagacccg ag 22
<210> 10
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 10
ggacccatca tcctcgttct c 21
<210> 11
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 11
ctgactctgg gtatagaagc ct 22
<210> 12
<211> 23
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 12
taatccacaa gtgtgaggac agg 23
<210> 13
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 13
tccagttctc cacacccctc 20
<210> 14
<211> 18
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 14
agattctgct gagctgcc 18
<210> 15
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 15
attccagttc ctgcgggtg 19
<210> 16
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 16
atcgggggtg cttactgaga 20
<210> 17
<211> 15
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 17
gccaggccag gcgac 15
<210> 18
<211> 16
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 18
ggcctggtga cacacg 16
<210> 19
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 19
tgggatgatt ctgtgtggta ca 22
<210> 20
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 20
tggcctgcag agatgtgac 19
<210> 21
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 21
ctgaaaattt gctactctcc ca 22
<210> 22
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 22
tccagtcatg tctagaattg ct 22
<210> 23
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 23
tggcttcgtg agtatctcca ac 22
<210> 24
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 24
ctggccagaa taacccactc 20
<210> 25
<211> 32
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 25
gaccaatata aatattaata aaccacatag ag 32
<210> 26
<211> 25
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 26
cctagtagac agttttgttt ggtca 25
<210> 27
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 27
tgggagaagg aaggagggga 20
<210> 28
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 28
tcctcgcaag acaggtcct 19
<210> 29
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 29
ggtccagagc accagttctc 20
<210> 30
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 30
acaattcgca acagtgaaag ca 22
<210> 31
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 31
ttctaggaat tgggggaygg 20
<210> 32
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 32
gtcaccccca accctaactg 20
<210> 33
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 33
ctgttctgag gactgggcag 20
<210> 34
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 34
cttcagcagc cttgaatgga 20
<210> 35
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 35
cctgagggca cagatgtagc 20
<210> 36
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 36
cggagtgggc aaasgatagg 20
<210> 37
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 37
catgtgtcta aaggctggg 19
<210> 38
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 38
tgctggtcat tttaggaaaa gcta 24
<210> 39
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 39
tgggttgatt tgtcctttgc 20
<210> 40
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 40
accacttttt acacgtgcca 20
<210> 41
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 41
ccacctggtc aattcccatg 20
<210> 42
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 42
ccttagggta gggcagacag 20
<210> 43
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 43
cttccccatg ctgccttttg 20
<210> 44
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 44
ccaaagcctt atttgtccag ca 22
<210> 45
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 45
tcctcaccat tcccaggcag 20
<210> 46
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 46
gcacacttca tctgccttgt 20
<210> 47
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 47
ctaatgcctc aagtcacctg 20
<210> 48
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 48
aactgttttg agggtaagca 20
<210> 49
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 49
atgcaaaaga ggaacaacaa gg 22
<210> 50
<211> 25
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 50
gatttcaggt atactaatac tgccc 25
<210> 51
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 51
agtctgccca ctcttccca 19
<210> 52
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 52
gcggcagcag tgttttctay c 21
<210> 53
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 53
gagatccagt cggtggtgt 19
<210> 54
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 54
tcattgacag cagtggcctc 20
<210> 55
<211> 28
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 55
cctccttccc ctgaataatt atcttact 28
<210> 56
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 56
gcagttcaga agtgaggggt a 21
<210> 57
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 57
ttgtctctgg aaggccttgg 20
<210> 58
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 58
cttgcaaggc caagggtttc 20
<210> 59
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 59
atgtgtgggg aggagtaggg 20
<210> 60
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 60
gcagaacaag accctgctc 19
<210> 61
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 61
ccccaatgag caggacgtta 20
<210> 62
<211> 28
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 62
ctttctctag tagatttcaa tgagtaga 28
<210> 63
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 63
gcctgttgca ggctaagct 19
<210> 64
<211> 32
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 64
ctaaccttat tctttctctt ttagtaattt ca 32
<210> 65
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 65
agatgagacc ttttgcccag g 21
<210> 66
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 66
tcttgccttc tcatagacgc tc 22
<210> 67
<211> 17
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 67
atcagaacag cgcccct 17
<210> 68
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 68
gagattcagg acccagaacg 20
<210> 69
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 69
taaatccwct aaggagactg gttc 24
<210> 70
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 70
attcctgact tcgccctgaa 20
<210> 71
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 71
ccagtcaatc cttcacattg at 22
<210> 72
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 72
caggtgttgt gtttgaagaa gt 22
<210> 73
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 73
ccctggtagt caaggaggct 20
<210> 74
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 74
gccctctcag aagccaagag 20
<210> 75
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 75
cttctttgtc ttggctccaa 20
<210> 76
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 76
agacaggagc catctatttg t 21
<210> 77
<211> 17
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 77
tgaggttgca gcacact 17
<210> 78
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 78
cactgcaatt tacggagtgt 20
<210> 79
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 79
tgaacaacct gaccacagag 20
<210> 80
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 80
aaaatgtgca aaagcttccc 20
<210> 81
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 81
gaacatacaa cctctgccac 20
<210> 82
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 82
caggggtgag gtgaaaccag 20
<210> 83
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 83
gcacactgga catgttgtg 19
<210> 84
<211> 25
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 84
tcttcgtagt tactttatgt aagga 25
<210> 85
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 85
gccaaaactg gtatagtggg ttga 24
<210> 86
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 86
ttttagcaag atgccctcct gg 22
<210> 87
<211> 17
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 87
ggctccagca tgacrcr 17
<210> 88
<211> 25
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 88
tggasatcat gttttatact gcctt 25
<210> 89
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 89
gacactgatg aatcatgctc t 21
<210> 90
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 90
gcttcaaaac cttccacaag 20
<210> 91
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 91
gctagatccc ttctaagcac cc 22
<210> 92
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 92
agggccatcc tagcaaactg 20
<210> 93
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 93
ttggtactca cacagggccc 20
<210> 94
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 94
ttaccactca tcccagcacc 20
<210> 95
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 95
tgcagggcac aagatgttta 20
<210> 96
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 96
tgaagacttg cctgacaaaa ca 22
<210> 97
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 97
tgcactagac tkggacagct 20
<210> 98
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 98
tgtctgccct gactgtaagt 20
<210> 99
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 99
atttgacttc cagaaccaga tc 22
<210> 100
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 100
tgactaggat ctggtcaggg g 21
<210> 101
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 101
cccattagtc gtaaaatgca ttgc 24
<210> 102
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 102
agcattctgg cctgctactc 20
<210> 103
<211> 27
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 103
tgcaacatat ttggagaaga tattaca 27
<210> 104
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 104
ggccaagtgc tctcaggata 20
<210> 105
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 105
ggacctcaca tcaatctcac tg 22
<210> 106
<211> 18
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 106
tggaggggga ctggtgta 18
<210> 107
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 107
gctgtgtgat ccaagatacc 20
<210> 108
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 108
ttccatcaga cagagcaaca 20
<210> 109
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 109
caacaggata gaccgagtcc 20
<210> 110
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 110
caagcacaga aggcagcaac 20
<210> 111
<211> 18
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 111
aagctagctg gctcccat 18
<210> 112
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 112
agggcctcat tatgctgcat ag 22
<210> 113
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 113
gggacagtag gcatttaata gagc 24
<210> 114
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 114
gccttaaagt ctgtgaggtc a 21
<210> 115
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 115
tgcatgagaa gaagccagca 20
<210> 116
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 116
tgtgcacctc tcaagctcg 19
<210> 117
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 117
accacctccc catattttcc a 21
<210> 118
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 118
ttcagagtca actcaagcaa ca 22
<210> 119
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 119
cttctaccac ccatctgcaa ct 22
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 120
aggtcagtat gtattttgtg gtgtc 25
<210> 121
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 121
aaccagttgc aatcgtagaa gt 22
<210> 122
<211> 25
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 122
cttcttatct cttccttttc acctc 25
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<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 123
gcccaggtca cagagctaat 20
<210> 124
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 124
ggagaacttg tgactttcag gt 22
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<211> 25
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 125
gtgtgtgtgt gtgtaaagtt ttcag 25
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<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 126
cctcttcctc aaagcagaaa gc 22
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<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 127
aatgggtgtc cgtgggaac 19
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<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 128
tccccttgcc tctgtttact 20
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<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 129
tgggccatac cttcacagaa g 21
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<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 130
tagggttaga aagctggcga 20
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<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 131
agtgttgagg ggctttggac 20
<210> 132
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 132
tcccaagaga acaaatgtgc 20
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<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 133
accagctaag tgaactagtt ct 22
<210> 134
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 134
kgagtagaag agatgatgct ctac 24
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<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 135
agaaccacag gaaggagcta 20
<210> 136
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 136
agaagagtca ggacaagaca 20
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 137
gaggctggat caggtacca 19
<210> 138
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 138
ggtattgtgt tactgctgtt ct 22
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 139
caccaccact ctgctgtgat 20
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 140
gccagtgaga gagagtgagc 20
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<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 141
accttcctga gtcaagatca 20
<210> 142
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 142
ttarccaggt atgatggtgc 20
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<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 143
ttctctcggt caggttcacg 20
<210> 144
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 144
aggatgctaa ggataggggc 20
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<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 145
acaggggaaa ggatttgctg 20
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 146
gctgcttccc ctgctagttc 20
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 147
accttacctg ggtagcaaaa 20
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 148
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 149
tcgaaaaagc tgcctacatc c 21
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 150
acatttcacc aatactttga gtgatcta 28
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 151
ggacaccagg cctcaaatag 20
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 152
tgggaagatg tgtcctacgt 20
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 153
cttgtttcta atgagtgatc cagtgg 26
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 154
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 155
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 156
agttaacgtt cactctaggt aagac 25
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 157
cttctgtgag ggacgggac 19
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 158
tatgggcccg ggagtgtg 18
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 159
aggctctttt acacaaaata agct 24
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<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 160
gctgggagcc tatagagaga 20
<210> 161
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 161
cccatatcca gtgttcctca gata 24
<210> 162
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 162
aatggaaaga tctctctggg attg 24
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<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 163
gtaggattca ctgggctggg 20
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<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 164
tcctgaacct ccagaatgga 20
<210> 165
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 165
cccacgagag aacctgcaac 20
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<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 166
ctgggatgca ttatttctgc c 21
<210> 167
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 167
catatgttgt atgttataaa tcgcaca 27
<210> 168
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 168
attcatgagg caagggaggt 20
<210> 169
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 169
ggatttaccc tcattgatgt ct 22
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<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 170
ttgttcytgg ttgtggttt 19
<210> 171
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 171
tgcatcagaa cagccaagtg 20
<210> 172
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 172
atgacctgaa atyrtttccc 20
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<211> 18
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 173
gccaagctga aaatgggg 18
<210> 174
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 174
gsagataaaa gaagccattg ttctg 25
<210> 175
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 175
gtcactcagg tccttcaagc 20
<210> 176
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 176
tttcaaagga acagcatgcc 20
<210> 177
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 177
accctaacat taaacactgt rt 22
<210> 178
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 178
ctgcatcatc ctctcctgag 20
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 179
cacagaacat ttaagtgatg gaagagt 27
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 180
cgtgtctcag ggtatgaaaa tgac 24
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 181
ccttgtaggg ttaatccaat catgt 25
<210> 182
<211> 25
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 182
gagtgaagtc aagatgagaa aagag 25
<210> 183
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 183
tgaggaaaca gggattttac tcta 24
<210> 184
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 184
ccacctgtgc aaccttacc 19
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<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 185
gatgaccagt gcatccacac t 21
<210> 186
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 186
atttggcaga ggggactgt 19
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 187
ttgaaccagc cactcctgtt 20
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 188
agctgcagag gccacca 17
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 189
agccatttat tttcatggtt taaagt 26
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 190
aggataattc ttgggatcaa tgcc 24
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 191
gacatrttgg gagagaggta 20
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<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 192
cagagatctg ctaggccagg 20
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 193
cctgagagtt actttctcta acaag 25
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<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 194
cagtggacac tcaggaagt 19
<210> 195
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 195
aggagacctg cttgttgggg 20
<210> 196
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 196
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 197
ttgctaccat ctgcactagc 20
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 198
agagtagaga ctgcctttca 20
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 199
acgtgaagga ggaagaaaga 20
<210> 200
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 200
gaagcaaagg agagatgagg 20
<210> 201
<211> 18
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 201
gcggagggag acatccag 18
<210> 202
<211> 17
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 202
cccgccccga attcctt 17
<210> 203
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 203
cactgagggc ataacagatt 20
<210> 204
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 204
ctctggtgct ggtattacct 20
<210> 205
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 205
catgtgtgaa aactttaccc c 21
<210> 206
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 206
tggccatgga gtactgtaat 20
<210> 207
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 207
ccttgaggac acagcttccc 20
<210> 208
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 208
agcatttatc agacgtgaaa actt 24
<210> 209
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 209
gttgctcaga catcatctca ccat 24
<210> 210
<211> 23
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 210
ttcagagctg cttctgtgat ggg 23
<210> 211
<211> 23
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 211
ccaatcctct gtgtctgtta ggt 23
<210> 212
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 212
cagaccaact ggaatgcaca 20
<210> 213
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 213
gtggtgggca caatggagag 20
<210> 214
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 214
aagcttttac tgctccgagt gt 22
<210> 215
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 215
aagctcttta gagggtaact tctg 24
<210> 216
<211> 33
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 216
attttaattt taaccacttt tttcattgat act 33
<210> 217
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 217
gmatgtgcaa aggcaaggag a 21
<210> 218
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 218
ttcagtgcct tgtcacagca g 21
<210> 219
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 219
cccaaagcat cttcataagg t 21
<210> 220
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 220
gcagtgaatc tctcttctct c 21
<210> 221
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 221
tgttttctcc caagccaggc 20
<210> 222
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 222
gtttgtttag tggggtccct 20
<210> 223
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 223
aaaacctcac cagtgttcaa 20
<210> 224
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 224
ttgagtccat cctaacaaat cc 22
<210> 225
<211> 26
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 225
agaactgata tcttaaaaag tgaact 26
<210> 226
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 226
gatcttgagt ttattttaca cagc 24
<210> 227
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 227
tctctgcctt ctgtttctta ac 22
<210> 228
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 228
agaaagtgct acagttcgtt c 21
<210> 229
<211> 27
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 229
ggtgaattca gtagcattat tcagagc 27
<210> 230
<211> 18
<212> DNA
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<211> 20
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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ccagcccttg tagtaggctt 20
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 314
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 317
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 323
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 325
ggggcacata aacagaacca 20
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 327
gcagagttca gccagatgg 19
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 329
cagagacaaa tgaccttgct 20
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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gcagtacagc caaatggaat 20
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 332
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 333
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<211> 31
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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aaatagatta tattaaggaa aatgatgagt t 31
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 335
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<211> 20
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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actgctccta gaacagcatg c 21
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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acaccccact ccacatc 17
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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tcactacctt acagccagag 20
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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actatggaat atcttgtgct gc 22
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<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 349
acctggacta atggggcaaa 20
<210> 350
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 350
gggcttccca ggttatcaca 20
<210> 351
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 351
tccccaacca ttcttgccc 19
<210> 352
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 352
tgggatgtct tgcttctatg t 21
<210> 353
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 353
acttcaaaag tattgcccta gg 22
<210> 354
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 354
cctgcagaaa ctcagcttga 20
<210> 355
<211> 23
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 355
tgctttctgt aggcagatct agg 23
<210> 356
<211> 25
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 356
aaaggctttg acacgcatta tctga 25
<210> 357
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 357
tggcagagtg gatgaagggg 20
<210> 358
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 358
tctcactgca cctctctgaa 20
<210> 359
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 359
taggaagcgg gcaggagtgt 20
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<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 360
ggaaactggg aaactgggct 20
<210> 361
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 361
ggagcagagt gggatgaaag 20
<210> 362
<211> 23
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<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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aaaaccagat tcactcttgg gta 23
<210> 363
<211> 25
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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gcccaaattg cattactagt tctct 25
<210> 364
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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ccaatgtttg cttctgtgac tc 22
<210> 365
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 365
aggcatgctc tggtgaaatc 20
<210> 366
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 366
tatcaaaact ggaggtgcag 20
<210> 367
<211> 25
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
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gattcctgag tattatgtgg atcac 25
<210> 368
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 368
aaacacatca ctgggcggg 19
<210> 369
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 369
ccatccagag ccctgagtaa g 21
<210> 370
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 370
tcgcctgtga agatgtcttt t 21
<210> 371
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 371
ggagtaggtt tccttttccc c 21
<210> 372
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 372
gtgcactttc gtggcccta 19
<210> 373
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 373
ggaagcgtca cataagatct gaaa 24
<210> 374
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 374
ttcattarat gcagtagcat cctc 24
<210> 375
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 375
gggaagtcgt aacccttcca 20
<210> 376
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 376
tgcattcaca tcattgcagt 20
<210> 377
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 377
tggtttcctg gcttccaaga 20
<210> 378
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 378
tggctcatga tctttgcaat g 21
<210> 379
<211> 30
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 379
gaccttgtct caaaaaacaa aaaacaaata 30
<210> 380
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 380
ggagacaaac tggagctgtt gg 22
<210> 381
<211> 25
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 381
ggtaactcca taactgatag aatcc 25
<210> 382
<211> 25
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 382
tgggatcaac tgtcataaag cttat 25
<210> 383
<211> 27
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 383
aaattgaata tagaggacaa agcaaaa 27
<210> 384
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 384
ggggtgtaag gtacaagggg 20
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<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 385
agagcccaca ctgaagcaaa 20
<210> 386
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 386
caggtgcaga ggtgtaaggg 20
<210> 387
<211> 18
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 387
tggcagggac ctacaggg 18
<210> 388
<211> 18
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 388
gcctcaggct ccctcaga 18
<210> 389
<211> 25
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 389
tgggaggcat ttgaaataga atagc 25
<210> 390
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 390
ttgatcaaag cgggcccca 19
<210> 391
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 391
ggcaggcaca gtgtcttctt 20
<210> 392
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 392
ccgtgtacct gaccctcctt 20
<210> 393
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<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 393
gtgatagaca atttcccggg gcac 24
<210> 394
<211> 25
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 394
ctccacttca ggcaattttc aaagg 25
<210> 395
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 395
tgattctgat gaggtctgcc a 21
<210> 396
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 396
ccactctgtt ctgtccccac 20
<210> 397
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 397
tctgagcgac ayacccact 19
<210> 398
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<400> 398
tcaaggcrtc gagacctcag 20

Claims (9)

1.引物组，由398种引物组成；引物为单链DNA分子；398种引物的核苷酸序列依次如序列表的序列1至序列398所示。
2.权利要求1所述引物组在制备法医鉴定试剂盒中的应用。
3.权利要求1所述引物组在制备亲缘关系鉴定试剂盒中的应用。
4.权利要求1所述引物组在法医鉴定中的应用。
5.权利要求1所述引物组在亲缘关系鉴定中的应用。
6.一种试剂盒，包括权利要求1所述引物组。
7.权利要求6所述试剂盒的制备方法，包括将所述引物组中的所有引物混合包装的步骤。
8.权利要求6所述试剂盒在法医鉴定中的应用。
9.权利要求6所述试剂盒在亲缘关系鉴定中的应用。
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