CN114634934A - 特异识别金葡菌肠毒素b的核酸适配体3-2和2-27的序列及应用 - Google Patents

特异识别金葡菌肠毒素b的核酸适配体3-2和2-27的序列及应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了属于分子生物医学技术领域的两条特异识别金葡菌肠毒素B的核酸适配体3‑2、2‑27的序列和应用。本发明涉及核酸适配体3‑2、2‑27特异的序列，采用5’端或3’端修饰、标记(如同位素、生物素或者地高辛等)的方法，检测到核酸适配体3‑2、2‑27能够特异识别金葡菌肠毒素B。核酸适配体3‑2、2‑27作为试剂盒的组成部分或者检测指标，用于金葡菌肠毒素B的检测或者抗金葡菌感染发生、发展、进程相关的基础研究及靶向药物研制等。

Description

特异识别金葡菌肠毒素B的核酸适配体3-2和2-27的序列及 应用
发明领域：
本发明涉及两条特异识别金葡菌肠毒素B的核酸适配体3-2、2-27的序列和修饰，以及 修饰后的3-2、2-27在识别金葡菌肠毒素B方面的应用。本发明涉及3-2、2-27在生物医药 方面的应用。3-2、2-27作为试剂盒的组成部分或者检测指标，用于金葡菌肠毒素B的检测 或者抗金葡菌感染发生、发展、进程相关的基础研究及靶向药物研制等。
背景技术：
指数富集的配基系统进化技术，简称SELEX(Systematic Evolution of Ligandsby EXponential Enrichment)技术，是近十几年兴起并迅速得到发展的高通量生物文库筛选技术。 应用大容量的随机寡核苷酸文库(ssDNA文库和RNA文库)，结合PCR体外扩增技术，以 指数级富集与靶分子特异结合的寡核苷酸，经过反复的体外筛选、扩增，最终获得的核酸适 配体(aptamer)基于空间结构与靶分子呈高特异性和高亲和力的结合。由于核酸适配体具有 精确识别、无免疫原性、易体外合成与修饰等优点，又称为“人工替代抗体”，在基础医学、 临床诊断与新药研发等方面具有广阔的应用前景。尤其是近年来兴起的复合靶SELEX技术， 使得对未知靶分子进行筛选成为可能，并且通过引入消减筛选步骤，能够获得特异识别两组 复合靶子中差异存在分子的核酸适配体，并能利用该配基反过来对差异靶分子进行研究，这 就为开发新型分子探针以及鉴定生物标志物开辟了新的途径。
金黄色葡萄球菌肠毒素(Staphylococcalenterotoxins，SEs)是由金黄色葡萄球菌和化脓性 链球菌分泌的超级抗原。SEs是免疫系统的有效激活剂。金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)和 相关的超抗原毒素是免疫系统的有效激活剂。这些蛋白质毒素直接与抗原呈递细胞上的主要 组织相容性复合物(MHCII)类分子和T细胞受体(TCR)的特定Vβ区结合，导致单核细 胞、巨噬细胞和T淋巴细胞均被激活，引发早期的“细胞因子风暴”和大规模的多克隆T细 胞增殖。使得促炎细胞因子：肿瘤坏死因子α(TNF-α)，白介素1(IL-1)，IL-2，干扰素γ (IFN-γ)和巨噬细胞趋化蛋白1等大量释放，引起发热，炎症，多器官损伤，低血压和致 死性休克等疾病。SEB被美国疾病控制与预防中心(CentersforDiseaseControlandPrevention，简 称cdc)认定为B类精选制剂。SEB中毒通常是在食用加工过的肉类或奶制品后(处理和储存 不当)而引起的食物中毒。除了造成食物中毒，SEB还被用作生物战剂，吸入SEB后2小时 内可引起以下症状：头痛、肌肉疼痛、心动过速、咳嗽、恶心、呕吐、腹泻和结膜刺激。这些 形式的失能发生在毫微克水平，而微克的SEB可能是致命的。
本发明是通过SELEX技术获得了两条核酸适配体3-2、2-27。经鉴定，核酸适配体3-2、 2-27能够特异识别金葡菌肠毒素B，而不结合其他蛋白，对照核酸序列与上述蛋白均无结合， 目前虽见到文献有报道特异结合金葡菌肠毒素B的核酸适配体的相关研究报道，但是我们筛 选获得的适配体序列与文献报道的适配体序列并不一样，类似于针对同一抗原可以有不同结 合位点的抗体，由于其筛选的初始文库不同，因此针对同一靶标SEB，不同的适配体与其结 合的位点也会不同。因此本发明中的适配体3-2、2-27的序列具有独创性和新颖性。
发明内容：
本发明目的在于提出特异识别金葡菌肠毒素B的核酸适配体3-2、2-27的序列及其应用 领域，包括核酸适配体3-2、2-27作为试剂盒的组成部分或者检测指标，用于金葡菌肠毒素 B的检测或者抗金葡菌感染发生、发展、进程相关的基础研究及靶向药物研制等
本发明通过以下技术方案实现：
首先由生工公司合成P7-26序列，并在5’端或3’端修饰、标记(如生物素)，然后进行应用研究：ELISA方法或滤膜-化学发光法检测3-2、2-27识别金葡菌肠毒素B。
本发明优点：
1)与蛋白类的抗体相比，核酸适配体更加稳定；核酸适配体可直接体外合成、标记，因此 不需要标记的二抗，使得操作更为简单、迅速；核酸适配体的合成成本较抗体制备成本 低，周期短。
2)本发明证实核酸适配体3-2、2-27序列特异识别金葡菌肠毒素B。因此，核酸适配体3-2、 2-27序列在生防与疾控等方面的研究相关领域中均具有广泛的应用价值和广阔的市场前 景。
附图说明：
图1 ELISA实验证实适配体3-2、2-27所结合的靶标为金葡菌肠毒素B。
图2滤膜-化学发光法实验证实适配体3-2、2-27所结合的靶标为金葡菌肠毒素B。
图3 ELISA实验证明3-2、2-27特异识别金葡菌上清中的SEB，而对照序列无结合。
图4适配体3-2与金葡菌肠毒素B结合的平衡解离常数(KD值)的测定.
图5适配体2-27与金葡菌肠毒素B结合的平衡解离常数(KD值)的测定
具体实施方式：
下面通过适配体3-2、2-27对金葡菌肠毒素B的识别来进一步描述本发明。
本发明通过以下技术方案实现：
1.通过生物素标记的3-2、2-27对金葡菌肠毒素B的特异识别来进一步描述本发明。
1.1合成3-2、2-27(序列表中SEQ ID No.1、NO.2)和无关对照序列-GP30(序列表中SEQ ID No.3)，通过公司合成使3-2、2-27和GP30的5’端标记上Bio。
Bio-3-2：
5-GCAATGGTACGGTACTTCCGGGGGTGGGTGTCTGGTGTCTGGTGCATCCTGGTTGCTGTTTGTGCAAAAGTGCACGCT ACTTTGCTAA-3’
Bio-2-27：
5-GCAATGGTACGGTACTTCCGGTCTGGTTAGGTGTTGGGCATGGTGGTTGCTTTCCAAAAGTGCACGCTACTTTGCTAA -3’
Bio-GP30：
5’-GCAATGGTACGGTACTTCC(N)30CAAAAGTGCACGCTACTTTGCTAA-3’
注：N代表A、T、G、C任意一种。
2.ELISA方法鉴定生物素标记的3-2、2-27特异识别金葡菌肠毒素B
2.1将一定量的金葡菌肠毒素B融于pH 9.7的碳酸盐缓冲液中，按照100μl/孔加入到酶联 条中，4℃包被蛋白过夜；
2.2弃包被液，每孔加入100μl含2％BSA封闭液，室温封闭60min；
2.3将不同浓度的Bio-2-27、Bio-3-2和无关对照序列Bio-GP30溶解于合适体积的缓冲液中 (1×PBS-1mmolMgCl2)，于100℃变性5min后立即置于冰上充分冷却；
2.4将经过变性处理后的Bio-2-27、Bio-3-2和无关对照序列(Bio-GP30文库)加入酶联条 中，使核酸适配体与包被的金葡菌肠毒素B共同孵育37℃2h；
2.5弃去孔内液体，每孔用350μl的洗涤液洗涤，重复洗涤3次，最后一次洗涤后要把孔内 液体完全甩干；
2.6每孔加入100μl按照1∶100稀释好的HRP酶，室温孵育40min，弃去孔内液体，洗板5 次，方法同上；
2.7每孔加入100μl TMB显色底物，37℃避光显色，当有明显颜色变化时，加10μl终止 液，酶联仪读数。
3.滤膜-化学发光法鉴定Bio标记的3-2、2-27对SEB的特异识别
3.1将一定量的SEB点在HAWP膜上，并室温平衡30min；
3.2将一定浓度的Bio-标记的3-2、2-27和无关对照序列(Bio-GP30文库)溶解于合适 体积的缓冲液中(1×PBS-1mmolMgCl2)，于100℃变性5min后立即置于冰上充分冷却；
3.3洗膜：将上述滤膜侵泡在洗涤缓冲液中并置于摇床上缓慢摇动，共洗3次，每次2min；
3.4将上述滤膜放入加有1∶100稀释好的HRP酶缓冲液中，室温孵育40min，洗膜，方法同 上，共洗3次；
3.5上述滤膜与TMB显色液孵育5min，37℃避光显色，化学发光仪检测并留图。
4.ELISA方法鉴定生物素标记的3-2、2-27特异识别金葡菌培养上清中的肠毒素B
4.1将一定量的金葡菌培养上清融于pH 9.7的碳酸盐缓冲液中，按照100μl/孔加入到酶联 条中，4℃包被蛋白过夜；
4.2弃包被液，每孔加入100μl含2％BSA封闭液，室温封闭60min；
4.3将不同浓度的Bio-2-27、Bio-3-2和无关对照序列(Bio-GP30文库)溶解于合适体积的 缓冲液中(1×PBS-1mmolMgCl2)，于100℃变性5min后立即置于冰上充分冷却；
4.4将经过变性处理后的Bio-3-2、Bio-2-27和无关对照序列(Bio-GP30文库)加入酶联条 中，使核酸适配体与包被的金葡菌肠毒素B共同孵育37℃2h；
4.5弃去孔内液体，每孔用350μl的洗涤液洗涤，重复洗涤3次，最后一次洗涤后要把孔内 液体完全甩干；
4.6每孔加入100μl按照1∶100稀释好的HRP酶，室温孵育40min，弃去孔内液体，洗板5 次，方法同上；
4.7每孔加入100μl TMB显色底物，37℃避光显色，当有明显颜色变化时，加10μl终止 液，酶联仪读数。
5、3-2、2-27与SEB蛋白结合的平衡解离常数(KD值)的测定
将100nM Bio标记的适配体溶解于上样液中(1×PBS，1mmol/L MgCl2，0.02％吐温20)进样，随后分别与最高浓度为2μM的等比稀释的不同浓度SEB溶液(上样液溶解)结合，最后用上样液解离。整个上样、结合、解离过程均在分子相互作用仪中进行。舍去偏离曲线较远的点绘制图像。适配体-SEB相互作用的曲线和解离常数(KD)为使用软件计算和绘制得到。
实验结果：
以上实验方法均证明核酸适配体3-2、2-27特异结合SEB
由图1可以得到结论：ELISA实验证明3-2、2-27特异识别SEB，而对照序列则 与SEB无结合。
由图2可以得到结论：滤膜-化学发光法实验证明3-2、2-27能够特异结合SEB， 而对照序列与SEB无结合。
由图3可以得到结论：ELISA实验证明3-2、2-27特异识别金葡菌培养上清中的SEB，而对照序列则无结合。
由图4可以得到结论：3-2与SEB结合的平衡解离常数KD值，约为1.11E-05M。
由图5可以得到结论：2-27与SEB结合的平衡解离常数KD值，约为4.55E-05M。
总之，核酸适配体3-2、2-27能够特异识别SEB，具有广泛临床应用价值。
Figure ISA0000227699850000011
Figure ISA0000227699850000021

Claims (4)

1.两条特异识别金葡菌肠毒素B的单链DNA核酸适配体3-2、2-27的序列，其特征在于，所述的核苷酸序列分别如序列表中SEQ ID No.1、No.2所示。
2.据权利要求1中所述方法，核酸适配体3-2、2-27可以是体外化学合成的，也可以是通过PCR或其他分子生物学方法制备的。
3.据权利要求1中所述方法，核酸适配体3-2、2-27的5’端或3’端可以经同位素、生物素、地高辛等标记。
4.据权利要求1中所述方法，核酸适配体3-2、2-27作为试剂盒的组成部分或者检测指标，用于金葡菌肠毒素B的检测或者抗金葡菌感染发生、发展、进程相关的基础研究及靶向药物研制等领域中的应用。
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Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103224936A (zh) * 2013-05-16 2013-07-31 江南大学 一组特异性识别金黄色葡萄球菌肠毒素a的核酸适配体
CN103243101A (zh) * 2013-05-16 2013-08-14 江南大学 一组特异性识别金黄色葡萄球菌肠毒素c1的核酸适配体
CN104450712A (zh) * 2014-04-11 2015-03-25 中国人民解放军军事医学科学院基础医学研究所 一种特异识别Vasorin(VASN)蛋白的寡核苷酸配基V4-2的序列和应用
US20150260717A1 (en) * 2014-03-12 2015-09-17 Korea Institute Of Science And Technology Universal nucleic acid aptamers for commonly binding to various types of microorganicms and method of producing the same
CN106636105A (zh) * 2016-12-16 2017-05-10 中国人民解放军南京军区福州总医院 金黄色葡萄球菌肠毒素c2的核酸适配体c203及其筛选方法和应用
CN111139288A (zh) * 2020-01-21 2020-05-12 长江师范学院 基于适配体识别-杂交链式反应同时检测金黄色葡萄球菌肠毒素a、b的荧光传感器

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103224936A (zh) * 2013-05-16 2013-07-31 江南大学 一组特异性识别金黄色葡萄球菌肠毒素a的核酸适配体
CN103243101A (zh) * 2013-05-16 2013-08-14 江南大学 一组特异性识别金黄色葡萄球菌肠毒素c1的核酸适配体
US20150260717A1 (en) * 2014-03-12 2015-09-17 Korea Institute Of Science And Technology Universal nucleic acid aptamers for commonly binding to various types of microorganicms and method of producing the same
CN104450712A (zh) * 2014-04-11 2015-03-25 中国人民解放军军事医学科学院基础医学研究所 一种特异识别Vasorin(VASN)蛋白的寡核苷酸配基V4-2的序列和应用
CN106636105A (zh) * 2016-12-16 2017-05-10 中国人民解放军南京军区福州总医院 金黄色葡萄球菌肠毒素c2的核酸适配体c203及其筛选方法和应用
CN111139288A (zh) * 2020-01-21 2020-05-12 长江师范学院 基于适配体识别-杂交链式反应同时检测金黄色葡萄球菌肠毒素a、b的荧光传感器

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
DEGRASSE JA 等: "A single-stranded DNA aptamer that selectively binds to Staphylococcus aureus enterotoxin B", PLOS ONE *
李慧 等: "用于未纯化蛋白样品核酸适配体筛选的Western印迹-SELEX筛选技术的建立", 生物技术通讯 *
王琦 等: "基于核酸适配体传感器检测食品致病菌的研究进展", 生物技术通报 *

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