CN114618022B - 一种纤维素微凝胶及其制备方法与应用 - Google Patents

一种纤维素微凝胶及其制备方法与应用 Download PDF

Info

Publication number
CN114618022B
CN114618022B CN202210177594.8A CN202210177594A CN114618022B CN 114618022 B CN114618022 B CN 114618022B CN 202210177594 A CN202210177594 A CN 202210177594A CN 114618022 B CN114618022 B CN 114618022B
Authority
CN
China
Prior art keywords
cellulose
microgel
prepared
cellulose microgel
cell
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202210177594.8A
Other languages
English (en)
Other versions
CN114618022A (zh
Inventor
孙志远
林晨
周金生
王钧平
郑立新
李珺
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Shenzhen Huayuan Regeneration Medical Science Co ltd
Huayuan Regenerative Medicine Hong Kong Ltd
Original Assignee
Shenzhen Huayuan Regeneration Medical Science Co ltd
Huayuan Regenerative Medicine Hong Kong Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Shenzhen Huayuan Regeneration Medical Science Co ltd, Huayuan Regenerative Medicine Hong Kong Ltd filed Critical Shenzhen Huayuan Regeneration Medical Science Co ltd
Priority to CN202210177594.8A priority Critical patent/CN114618022B/zh
Publication of CN114618022A publication Critical patent/CN114618022A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN114618022B publication Critical patent/CN114618022B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/50—Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
    • A61L27/52—Hydrogels or hydrocolloids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/14—Macromolecular materials
    • A61L27/18—Macromolecular materials obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/14—Macromolecular materials
    • A61L27/20—Polysaccharides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/36—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix
    • A61L27/38—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix containing added animal cells
    • A61L27/3804—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix containing added animal cells characterised by specific cells or progenitors thereof, e.g. fibroblasts, connective tissue cells, kidney cells
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/50—Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/50—Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
    • A61L27/54—Biologically active materials, e.g. therapeutic substances
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/0068—General culture methods using substrates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2300/00—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
    • A61L2300/60—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices characterised by a special physical form
    • A61L2300/602—Type of release, e.g. controlled, sustained, slow
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2513/00—3D culture
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2533/00—Supports or coatings for cell culture, characterised by material
    • C12N2533/30—Synthetic polymers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2533/00—Supports or coatings for cell culture, characterised by material
    • C12N2533/70—Polysaccharides
    • C12N2533/78—Cellulose

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Oral & Maxillofacial Surgery (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Materials For Medical Uses (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

本发明公开了一种纤维素微凝胶及其制备方法与应用。所述纤维素微凝胶的制备原料包括双键修饰的纤维素单体，所述双键修饰的纤维素单体为经氨基聚乙二醇丙烯酸酯双键修饰的羧甲基纤维素钠。本发明的纤维素微凝胶具有较优的力学性能、稳定性较好、体内降解周期较长，应用前景好。

Description

一种纤维素微凝胶及其制备方法与应用
技术领域
本发明属于生物材料技术领域，具体涉及一种纤维素微凝胶及其制备方法与应用。
背景技术
微凝胶是微米尺度的、具有三维空间网络结构的水凝胶颗粒。因其具有高含水量，成分与细胞外基质相似，生物相容性良好，可用于药物研究、组织工程和再生医学中活细胞的封装。微凝胶不仅为细胞提供一个三维的支撑结构，还可以避免细胞在注射和移植过程中所受到的损伤。此外，微凝胶可充当微米大小的3D培养单元，允许独立监测或操纵细胞。理想细胞包裹微凝胶颗粒应由尺寸可控、均匀的网络结构组成，允许将封装的细胞稳定地包裹在具有精确内部结构的受控微环境中。
细胞封装的成功临床应用很大程度上取决于一些关键特性，例如：(1)形态和尺寸特性；(2)机械稳定性；(3)生物相容性；(4)微球的分子交换性。天然高分子多糖(如海藻酸盐、琼脂糖或透明质酸)具有足够的机械性能，允许分子交换，已大量用作细胞包裹维持细胞活力。但这些天然高分子多糖在体内降解周期短，其降解后，细胞将在人体暴露，遭受人体免疫排斥而凋亡，无法实现长效治疗。
发明内容
本发明旨在至少解决上述现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明提出一种纤维素微凝胶，具有体内降解周期较长的特点。
本发明还提出一种纤维素微凝胶的制备方法。
本发明还提出一种生物墨水。
本发明还提出一种细胞3D培养载体。
本发明还提出一种生物材料。
本发明还提出一种医用材料。
本发明还提出一种医疗器械。
本发明还提出上述纤维素微凝胶或生物墨水的应用。
本发明的第一方面，提出了一种纤维素微凝胶，所述纤维素微凝胶的制备原料包括双键修饰的纤维素单体，所述双键修饰的纤维素单体为经氨基聚乙二醇丙烯酸酯双键修饰的羧甲基纤维素钠。
氨基聚乙二醇丙烯酸酯的简称为：PEGA；羧甲基纤维素钠的简称为：CMC；双键修饰的纤维素单体的简称为：DCMC。
根据本发明实施例的纤维素微凝胶，至少具有以下有益效果：本发明采用经氨基聚乙二醇丙烯酸酯双键修饰的羧甲基纤维素钠为纤维素单体(DCMC)，制备得到的纤维素微凝胶具有较优的力学性能、稳定性较好、体内降解周期较长。具体包括：
DCMC结构上的CMC和PEGA具有较大的分子量，可在生理环境下快速成胶，并且具有较优的力学性能，且CMC和PEGA的稳定性较好，能够大大延长微凝胶在体内的降解时间；
本发明使用的CMC为水溶性天然高分子多糖，具有黏度可调节、来源广泛、生物相容性好、机械性能优异等特性。PEGA是生物相容性很好的线性分子，无抗原性，具有水溶性和良好的两亲性，同时具有免疫学惰性和分子大小可变性。且PEGA在体内降解缓慢，较其他小分子更适宜于用来修饰CMC。
由于CMC和PEGA均生物相容性好，具有很好的水溶性，均有较好的稳定性，降解缓慢。本发明中在CMC分子链上接枝烯烃基团(PEGA双键修饰)使其获得可聚合性，制备得到稳定的纤维素基微凝胶，可用于细胞包裹，在生理环境下的降解周期较长，减轻包裹细胞遭受人体免疫排斥而凋亡，有利于实现长效治疗。
本发明中的纤维素微凝胶具有体内降解周期较长的特点，具有较好的稳定性，可用于细胞封装，在生物医用材料、组织工程和再生医学技术领域具有很好的应用前景。
在本发明的一些实施方式中，所述羧甲基纤维素钠中的羧基经活化后，与所述氨基聚乙二醇丙烯酸酯反应，得到双键修饰的纤维素单体。
在本发明的一些优选的实施方式中，活化所述羧甲基纤维素钠侧链上的羧基。
在本发明的一些实施方式中，所述氨基聚乙二醇丙烯酸酯的分子量为1000-5000。
通过上述实施方式，PEGA改性CMC能够提高CMC的分子量，使DCMC能够快速固化。
在本发明的一些实施方式中，羧甲基纤维素钠粘度为3000-5000mpa·s。
在本发明的一些实施方式中，所述氨基聚乙二醇丙烯酸酯与所述羧甲基纤维素钠的质量比值为1：(1-10)。
在本发明的一些实施方式中，所述纤维素微凝胶为包裹细胞的纤维素微凝胶。
通过上述实施方式，本发明中的包裹细胞的纤维素微凝胶，具有较优的力学性能、稳定性较好、体内降解周期较长，可减轻包裹细胞遭受人体免疫排斥而凋亡，有利于实现长效治疗。
在本发明的一些优选的实施方式中，所述细胞包括成纤维细胞、肾细胞、胰岛细胞或肝细胞的至少一种。
本发明的第二方面，提出了一种纤维素微凝胶的制备方法，包括如下步骤：以双键修饰的纤维素单体为原料，采用微流控技术制备得到所述纤维素微凝胶，其中，所述双键修饰的纤维素单体为经氨基聚乙二醇丙烯酸酯双键修饰的羧甲基纤维素钠。
在本发明的一些实施方式中，所述制备方法包括如下步骤：
S1，羧甲基纤维素钠中的羧基经活化后，与氨基聚乙二醇丙烯酸酯反应，得到双键修饰的纤维素单体；
S2，光引发剂的溶液与所述双键修饰的纤维素单体混合，得到混合物Ⅰ，过滤除菌后与生物细胞重悬液混合，得到混合物Ⅱ；
S3，以所述混合物Ⅱ为水相，通过微流控技术、光引发聚合，制备得到所述纤维素微凝胶。
其中，双键修饰的纤维素单体的前驱液；混合物Ⅱ为生物墨水。
通过上述实施方式，本发明公开了一种水溶性的纤维素功能单体(双键修饰的纤维素单体)。该纤维素单体可以采用微流控技术制备成微液滴，进而通过光引发进一步反应和交联成微凝胶球，从而使用于细胞包裹。双键修饰的纤维素单体能在温和条件下制备得到微凝胶球，即所述纤维素微凝胶。所得纤维素微凝胶具有较优的力学性能，同时具有较长的降解时间。
在本发明的一些优选的实施方式中，步骤S1中，所述羧甲基纤维素钠中的羧基经活化后，与所述氨基聚乙二醇丙烯酸酯反应，得到双键修饰的纤维素单体。
在本发明的一些更优选的实施方式中，步骤S1中，羧甲基纤维素钠的溶液中加入活化剂，活化羧甲基纤维素钠上的羧基后，再加入氨基聚乙二醇丙烯酸酯进行反应，得到反应混合物，析出提纯后，得到所述双键修饰的纤维素单体。
在本发明的一些优选的实施方式中，所述活化剂为1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺。
1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐的简称为：EDC；N-羟基琥珀酰亚胺的简称为：NHS。
在本发明的一些更优选的实施方式中，步骤S1中，羧基活化时间为0.5-3h。
在本发明的一些更优选的实施方式中，步骤S1中，于羧甲基纤维素钠的MES缓冲液中，加入活化剂，活化羧甲基纤维素钠上的羧基。然后，加入氨基聚乙二醇丙烯酸酯后于室温下反应得到反应混合物，向所述反应混合物加入乙醇后析出，过滤得到粗品Ⅰ。最后，将粗品Ⅰ溶于水中，透析，冷冻干燥，得到所述双键修饰的纤维素单体，灭菌备用。
MES缓冲液为0.1mol/L的2-(N-吗啉代)乙磺酸缓冲液(pH＝5.5)，其作用包括调节pH，使活化剂于弱酸条件下更好地活化羧基。
在本发明的一些更优选的实施方式中，步骤S1中，所述透析为采用12kDa～14kDa的透析袋透析3天。
在本发明的一些更优选的实施方式中，步骤S1中，所述灭菌为采用60Co射线灭菌。
在本发明的一些更优选的实施方式中，步骤S1中，在羧甲基纤维素钠的MES缓冲液中，所述羧甲基纤维素钠的质量百分比浓度为1-3％。
在本发明的一些更优选的实施方式中，步骤S1中，加入氨基聚乙二醇丙烯酸酯后反应24-72h。
在本发明的一些优选的实施方式中，步骤S2中，所述光引发剂的溶液为光引发剂的PBS溶液。
其中，PBS起到调节pH的作用，PBS溶液能够营造适合细胞存活所需的pH环境(7.3±0.1)。
在本发明的一些优选的实施方式中，步骤S2中，光引发剂的PBS溶液与灭菌后的所述双键修饰的纤维素单体混合，得到混合物Ⅰ。
在本发明的一些优选的实施方式中，步骤S2中，在混合物Ⅱ中，所述生物细胞重悬液的体积百分比浓度为10-20％。
在本发明的一些优选的实施方式中，步骤S2中，光引发剂为苯基(2,4,6-三甲基苯甲酰基)磷酸锂盐。
苯基(2,4,6-三甲基苯甲酰基)磷酸锂盐的简称为：LAP。
在本发明的一些更优选的实施方式中，步骤S2中，光引发剂的PBS溶液中，光引发剂的质量百分比浓度为0.1-3％。
在本发明的一些优选的实施方式中，步骤S2中，生物细胞重悬液中，生物细胞计数1×105-1×108个/mL，培养基为含有10％胎牛血清和1％双抗的完全DMEM培养基。
在本发明的一些优选的实施方式中，步骤S3中，以所述混合物Ⅱ为水相，采用微流控技术与油相混合制备得到W/O微液滴，经光照使微液滴形成包裹细胞的微凝胶球，即所述纤维素微凝胶。将所述纤维素微凝胶洗涤后储存于PBS溶液中。
在本发明的一些更优选的实施方式中，步骤S3中，以所述混合物Ⅱ为水相，含有非离子型碳氟表面活性剂的氟化油HFE-7500的混合液为油相，采用微流控技术制备得到W/O微液滴，光照，所述W/O微液滴交联形成包裹细胞的微凝胶球，即所述纤维素微凝胶。将所述纤维素微凝胶洗涤后储存于PBS溶液中。
在本发明的一些更优选的实施方式中，步骤S3中，所述W/O微液滴交联成为微凝胶球后，使用氟化油HFE7500洗涤后，再用PBS溶液清洗3次后，最终转移到PBS溶液中储存。
在本发明的一些更优选的实施方式中，步骤S3中，油相中，所述非离子型碳氟表面活性剂的质量分数为1-4％。
在本发明的一些优选的实施方式中，步骤S3中，油相和水相的流速比为(5:1)-(40:1)。
在本发明的一些优选的实施方式中，步骤S3中，所述光照时间为1-5min。
在本发明的一些更优选的实施方式中，步骤S3中，所述光照波长为380-420nm。
本发明的第三方面，提出了一种生物墨水，包括上述纤维素微凝胶。
在本发明的一些实施方式中，所述纤维素微凝胶为包裹细胞的纤维素微凝胶。
本发明的第四方面，提出了一种细胞3D培养载体，包括上述纤维素微凝胶或上述生物墨水中的至少一种。
本发明的第五方面，提出了一种生物材料，包括上述纤维素微凝胶或上述生物墨水中的至少一种；或者所述生物材料的制备原料包括上述生物墨水。
在本发明的一些实施方式中，所述生物材料包括植入材料。
在本发明的一些实施方式中，所述生物材料由所述生物墨水经3D打印或声波打印制备得到。
本发明的第六方面，提出了一种医用材料，包括上述纤维素微凝胶或上述生物墨水或上述细胞3D培养载体或上述生物材料中的至少一种。
本发明的第七方面，提出了一种医疗器械，其特征在于，包括上述纤维素微凝胶或上述生物墨水或上述细胞3D培养载体或上述生物材料或上述医用材料中的至少一种。
本发明的第八方面，提出了上述纤维素微凝胶或上述生物墨水在打印、医用材料或生物材料制备中的应用。
在本发明的一些实施方式中，所述打印包括3D打印或声波打印。
附图说明
下面结合附图和实施例对本发明做进一步的说明，其中：
图1为本发明实施例1中DCMC及未改性的CMC核磁共振氢谱图；
图2为本发明实施例2中纤维素微凝胶(包裹胰岛瘤细胞)的光学微观测试结果图；
图3为本发明实施例5中纤维素微凝胶及CMC的抗酶降解实验结果图；
图4为本发明实施例4中纤维素微凝胶内细胞活死表征结果图；
图5为本发明实施例5中纤维素微凝胶的细胞毒性测试结果图。
具体实施方式
以下将结合实施例对本发明的构思及产生的技术效果进行清楚、完整地描述，以充分地理解本发明的目的、特征和效果。显然，所描述的实施例只是本发明的一部分实施例，而不是全部实施例，基于本发明的实施例，本领域的技术人员在不付出创造性劳动的前提下所获得的其他实施例，均属于本发明保护的范围。
实施例中采用的细胞，均由实验室分离所得。
实施例1
本实施例公开了一种纤维素微凝胶，为包裹细胞的纤维素微凝胶，其制备过程包括：
(Ⅰ)将2g羧甲基纤维素钠(CMC)溶解在200mL的MES缓冲液(pH＝5.5，0.1mol/L)中。取1.936g EDC和1.164g NHS加入上述溶液中，搅拌30分钟，然后加入1g氨基聚乙二醇丙烯酸酯(PEGA)，室温下反应24h。将一份1.0L乙醇倒入反应混合物中，然后通过抽滤的方式收集析出的产物。随后将产物采用12kDa～14kDa的透析袋用去离子水透析3天，冷冻干燥，得到双键修饰的纤维素单体(DCMC)，进行60Co射线灭菌，备用。实验所用到的其他试剂及器材采用高温高压和过滤灭菌，整个实验过程在无菌环境中完成。其中，氨基聚乙二醇丙烯酸酯的分子量为1000，羧甲基纤维素钠粘度为3000mpa·s。
(Ⅱ)取0.2g苯基(2,4,6-三甲基苯甲酰基)磷酸锂盐(LAP)溶解到100mL PBS溶液中，随后加入1g DCMC，搅拌至完全溶解得到DCMC前驱液，过滤除菌后，将混有DMEM培养基的胰岛瘤细胞悬浮液加入到DCMC前驱液中，作为水相(细胞悬浮液的体积百分比浓度为10％，细胞重悬液中，生物细胞计数约为1×106个/mL，培养基为含有10％胎牛血清和1％双抗的完全DMEM培养基)。取1mL质量体积分数为10％非离子型碳氟表面活性剂(其中，溶剂为氟化油HFE-7500，溶质为非离子型碳氟表面活性剂)，加入9mL氟化油HFE-7500稀释至非离子型碳氟表面活性剂的质量体积分数为1％，搅拌均匀，过滤除菌后得到油相。载有L929细胞的前驱液通过微流控技术制备成W/O微液滴，其中，水相和油相的流速分别设定为0.3mL/h和2.7mL/h。收集在微流控芯片中产生的微液滴，并置于蓝光(405-420nm)下照射2min使DCMC微液滴交联成微凝胶球。使用氟化油HFE7500洗涤后，用PBS溶液清洗3次后，重新转移到PBS溶液中储存，得到包裹胰岛瘤细胞微凝胶球，即包裹胰岛瘤细胞的纤维素微凝胶。
本实施例提供了一种生物墨水，包括上述操作制备得到的纤维素微凝胶。
本实施例提供了一种细胞3D培养载体，包括上述操作制备得到的纤维素微凝胶或上述生物墨水。
本实施例提供了一种生物材料，包括上述操作制备得到的纤维素微凝胶或上述生物墨水。其中，所述生物材料可作为植入材料。
本实施例提供了一种生物材料，以上述生物墨水为原料，经3D打印或声波打印制备得到。
本实施例提供了一种医用材料，包括上述操作制备得到的纤维素微凝胶或上述生物墨水或细胞3D培养载体或上述生物材料。
本实施例提供了一种医疗器械，包括上述操作制备得到的纤维素微凝胶或上述生物墨水或细胞3D培养载体或上述生物材料或上述医用材料。
实施例2
本实施例公开了一种纤维素微凝胶，为包裹细胞的纤维素微凝胶，其制备过程包括：
(Ⅰ)将2g CMC溶解在200mL的MES缓冲液(pH＝5.5，0.1mol/L)中。取1.936g EDC和1.164g NHS加入上述溶液中，搅拌30分钟，然后加入2g PEGA，室温下反应24h。将一份1.0L乙醇倒入反应混合物中，然后通过抽滤的方式收集析出的产物。随后将产物采用12kDa～14kDa的透析袋用去离子水透析3天，冷冻干燥，得到DCMC单体，进行60Co射线灭菌，备用。实验所用到的其他试剂及器材采用高温高压和过滤灭菌，整个实验过程在无菌环境中完成。其中，氨基聚乙二醇丙烯酸酯的分子量为1000，羧甲基纤维素钠粘度为3000mpa·s。
(Ⅱ)取0.2g苯基(2,4,6-三甲基苯甲酰基)磷酸锂盐(LAP)溶解到100mL PBS溶液中，随后加入1g DCMC，搅拌至完全溶解得到DCMC前驱液，过滤除菌后，将混有DMEM培养基的胰岛瘤细胞悬浮液加入到DCMC前驱液中，作为水相(细胞悬浮液的体积百分比浓度为10％，细胞重悬液中，生物细胞计数1×106个/mL，培养基为含有10％胎牛血清和1％双抗的完全DMEM培养基)。取1mL质量体积分数为10％非离子型碳氟表面活性剂(其中，溶剂为氟化油HFE-7500，溶质为非离子型碳氟表面活性剂)，加入9mL氟化油HFE-7500稀释至非离子型碳氟表面活性剂的质量体积分数为1％，搅拌均匀，过滤除菌后得到油相。载有L929细胞的前驱液通过微流控技术制备成W/O微液滴，其中，水相和油相的流速分别设定为0.3mL/h和2.7mL/h。收集在微流控芯片中产生的微液滴，并置于蓝光(405-420nm)下照射2min使DCMC微液滴交联成微凝胶球。使用氟化油HFE7500洗涤后，用PBS溶液清洗3次后，重新转移到PBS溶液中储存，得到胰岛瘤细胞的微凝胶球，即包裹胰岛瘤细胞的纤维素微凝胶。
本实施例提供了一种生物墨水，包括上述操作制备得到的纤维素微凝胶。
本实施例提供了一种细胞3D培养载体，包括上述操作制备得到的纤维素微凝胶或上述生物墨水。
本实施例提供了一种生物材料，包括上述操作制备得到的纤维素微凝胶或上述生物墨水。
本实施例提供了一种生物材料，以上述生物墨水为原料，经3D打印或声波打印制备得到。本实施例提供了一种医用材料，包括上述操作制备得到的纤维素微凝胶或上述生物墨水或细胞3D培养载体或上述生物材料。
本实施例提供了一种医疗器械，包括上述操作制备得到的纤维素微凝胶或上述生物墨水或细胞3D培养载体或上述生物材料或上述医用材料。
实施例3
本实施例公开了一种纤维素微凝胶，为包裹细胞的纤维素微凝胶，其制备过程包括：
(Ⅰ)将2g CMC溶解在200mL的MES缓冲液(pH＝5.5，0.1mol/L)中。取1.936g EDC和1.164g NHS加入上述溶液中，搅拌30分钟，然后加入1g PEGA，室温下反应72h。将一份1.0L乙醇倒入反应混合物中，然后通过抽滤的方式收集析出的产物。随后将产物采用12kDa～14kDa的透析袋用去离子水透析3天，冷冻干燥，得到DCMC单体，进行60Co射线灭菌，备用。实验所用到的其他试剂及器材采用高温高压和过滤灭菌，整个实验过程在无菌环境中完成。其中，氨基聚乙二醇丙烯酸酯的分子量为2000，羧甲基纤维素钠粘度为3000mpa·s。
(Ⅱ)取0.2g苯基(2,4,6-三甲基苯甲酰基)磷酸锂盐(LAP)溶解到100mL PBS溶液中，随后加入1g DCMC，搅拌至完全溶解得到DCMC前驱液，过滤除菌后，将混有DMEM培养基的肝细胞悬浮液加入到DCMC前驱液中，作为水相(细胞悬浮液的体积百分比浓度为20％，细胞重悬液中，生物细胞计数1×108个/mL，培养基为含有10％胎牛血清和1％双抗的完全DMEM培养基)。取1mL质量体积分数为10％非离子型碳氟表面活性剂(其中，溶剂为氟化油HFE-7500，溶质为非离子型碳氟表面活性剂)，加入9mL氟化油HFE-7500稀释至非离子型碳氟表面活性剂的质量体积分数为1％，搅拌均匀，过滤除菌后得到油相。载有L929细胞的前驱液通过微流控技术制备成W/O微液滴，其中，水相和油相的流速分别设定为0.3mL/h和2.7mL/h。收集在微流控芯片中产生的微液滴，并置于蓝光(405-420nm)下照射2min使DCMC微液滴交联成微凝胶球。使用氟化油HFE7500洗涤后，用PBS溶液清洗3次后，重新转移到PBS溶液中储存，得到包裹肝细胞的微凝胶球，即包裹肝细胞的纤维素微凝胶。
本实施例提供了一种生物墨水，包括上述操作制备得到的纤维素微凝胶。
本实施例提供了一种细胞3D培养载体，包括上述操作制备得到的纤维素微凝胶或上述生物墨水。
本实施例提供了一种生物材料，包括上述操作制备得到的纤维素微凝胶或上述生物墨水。
本实施例提供了一种生物材料，以上述生物墨水为原料，经3D打印或声波打印制备得到。
本实施例提供了一种医用材料，包括上述操作制备得到的纤维素微凝胶或上述生物墨水或细胞3D培养载体或上述生物材料。
本实施例提供了一种医疗器械，包括上述操作制备得到的纤维素微凝胶或上述生物墨水或细胞3D培养载体或上述生物材料或上述医用材料。
实施例4
本实施例公开了一种纤维素微凝胶，为包裹细胞的纤维素微凝胶，其制备过程包括：
(Ⅰ)将2g CMC溶解在200mL的MES缓冲液(pH＝5.5，0.1mol/L)中。取1.936g EDC和1.164g NHS加入上述溶液中，搅拌30分钟，然后加入1g PEGA，室温下反应72h。将一份1.0L乙醇倒入反应混合物中，然后通过抽滤的方式收集析出的产物。随后将产物采用12kDa～14kDa的透析袋用去离子水透析3天，冷冻干燥，得到DCMC单体，进行60Co射线灭菌，备用。实验所用到的其他试剂及器材采用高温高压和过滤灭菌，整个实验过程在无菌环境中完成。其中，氨基聚乙二醇丙烯酸酯的分子量为1000，羧甲基纤维素钠粘度为5000mpa·s。
(Ⅱ)取0.2g苯基(2,4,6-三甲基苯甲酰基)磷酸锂盐(LAP)溶解到100mL PBS溶液中，随后加入1g DCMC，搅拌至完全溶解得到DCMC前驱液，过滤除菌后，将混有DMEM培养基的L929悬浮液加入到DCMC前驱液中，作为水相(细胞悬浮液的体积百分比浓度为10％，细胞重悬液中，生物细胞计数1×106个/mL，培养基为含有10％胎牛血清和1％双抗的完全DMEM培养基)。取1mL质量体积分数为10％非离子型碳氟表面活性剂(其中，溶剂为氟化油HFE-7500，溶质为非离子型碳氟表面活性剂)，加入9mL氟化油HFE-7500稀释至非离子型碳氟表面活性剂的质量分数为1％，搅拌均匀，过滤除菌后得到油相。载有L929细胞的前驱液通过微流控技术制备成W/O微液滴，其中，水相和油相的流速分别设定为0.3mL/h和2.7mL/h。收集在微流控芯片中产生的微液滴，并置于蓝光(405-420nm)下照射2min使DCMC微液滴交联成微凝胶球。使用氟化油HFE7500洗涤后，用PBS溶液清洗3次后，重新转移到PBS溶液中储存，得到包裹L929的微凝胶球，即包裹L929的纤维素微凝胶。
本实施例提供了一种生物墨水，包括上述操作制备得到的纤维素微凝胶。
本实施例提供了一种细胞3D培养载体，包括上述操作制备得到的纤维素微凝胶或上述生物墨水。
本实施例提供了一种生物材料，包括上述操作制备得到的纤维素微凝胶或上述生物墨水。
本实施例提供了一种生物材料，以上述生物墨水为原料，经3D打印或声波打印制备得到。
本实施例提供了一种医用材料，包括上述操作制备得到的纤维素微凝胶或上述生物墨水或细胞3D培养载体或上述生物材料。
本实施例提供了一种医疗器械，包括上述操作制备得到的纤维素微凝胶或上述生物墨水或细胞3D培养载体或上述生物材料或上述医用材料。
实施例5
本实施例公开了一种纤维素微凝胶，为没有包裹细胞的纤维素微凝胶，其制备过程包括：
(Ⅰ)将2g CMC溶解在200mL的MES缓冲液(pH＝5.5，0.1mol/L)中。取1.936g EDC和1.164g NHS加入上述溶液中，搅拌30分钟，然后加入1g PEGA，室温下反应72h。将一份1.0L乙醇倒入反应混合物中，然后通过抽滤的方式收集析出的产物。随后将产物采用12kDa～14kDa的透析袋用去离子水透析3天，冷冻干燥，得到双键修饰的纤维素单体(DCMC)，进行60Co射线灭菌，备用。实验所用到的其他试剂及器材采用高温高压和过滤灭菌，整个实验过程在无菌环境中完成。其中，氨基聚乙二醇丙烯酸酯的分子量为1000，羧甲基纤维素钠粘度为3000mpa·s。
(Ⅱ)取0.2g苯基(2,4,6-三甲基苯甲酰基)磷酸锂盐(LAP)溶解到100mL PBS溶液中，随后加入1g DCMC，搅拌至完全溶解得到DCMC前驱液，过滤除菌后，作为水相。取1mL质量体积分数为10％非离子型碳氟表面活性剂(其中，溶剂为氟化油HFE-7500，溶质为非离子型碳氟表面活性剂)，加入9mL氟化油HFE-7500稀释至非离子型碳氟表面活性剂的质量体积分数为1％，搅拌均匀，过滤除菌后得到油相。将水相和油相通过微流控技术制备成W/O微液滴，其中，水相和油相的流速分别设定为0.3mL/h和2.7mL/h。收集在微流控芯片中产生的微液滴，并置于蓝光(405-420nm)下照射2min使DCMC微液滴交联成微凝胶球。使用氟化油HFE7500洗涤后，用PBS溶液清洗3次后，重新转移到PBS溶液中储存，得到纤维素微凝胶。
本实施例提供了一种生物墨水，包括上述操作制备得到的纤维素微凝胶。
本实施例提供了一种细胞3D培养载体，包括上述操作制备得到的纤维素微凝胶或上述生物墨水。
本实施例提供了一种生物材料，包括上述操作制备得到的纤维素微凝胶或上述生物墨水。
本实施例提供了一种生物材料，以上述生物墨水为原料，经3D打印或声波打印制备得到所述生物材料。
本实施例提供了一种医用材料，包括上述操作制备得到的纤维素微凝胶。
本实施例提供了一种医疗器械，包括上述操作制备得到的纤维素微凝胶。
试验例
本试验例测试了实施例得到的双键修饰的纤维素单体(DCMC)、纤维素微凝胶，以及原料羧甲基纤维素钠(CMC)进行了测试，具体为：
(1)对实施例1中采用的原料CMC(市售、未改性)、制备得到的DCMC做了化学结构表征，测试结果如图1所示：
具体为：采用Bruker核磁共振氢谱仪对CMC和DCMC进行核磁氢谱测定，将CMC和DCMC以1.0％的浓度溶解在重水D2O中，测试条件为400MHz。
从核磁共振氢谱图中可以看出，与CMC相比，DCMC产生了新的吸收峰，其中δ＝5.83和δ＝6.1处是乙烯基的质子吸收峰。证实了PEGA的氨基与CMC的羧基发生了反应，在CMC的侧链成功接枝了烯烃基团。
(2)测试了实施例2中制备得到的纤维素微凝胶(包裹胰岛瘤细胞)的光学微观结构，测试结果如图2所示，从图中可以看出，微凝胶的形状、大小均一，细胞在微凝胶内部分布均匀，说明纤维素微凝胶(DCMC微凝胶)具有一定的强度，能够维持特定的形状，可作为细胞包裹材料。
(3)对实施例5中制备得到的纤维素微凝胶及CMC进行了抗酶降解实验，测试结果如图3所示：
测试实验具体为：将未改性的CMC或实施例5制得的纤维素微凝胶冷冻干燥24h，得到冻干样品。称取100mg的冻干样品置于称量瓶中，加入含有纤维素酶0.1mg/mL，pH＝5的CH3COOH-NaOH的缓冲溶液中。将称量瓶置于37℃恒温水浴中，在设定时间取出样品，用去离子水清洗2次，冷冻干燥，称量。
设置对照实验为：与测试实验的区别之处在于，称取100mg的冻干样品置于称量瓶中，加入不含有纤维素酶的、pH＝5的CH3COOH-NaOH的缓冲溶液中。
水凝胶的生物降解率按下式计算：
生物降解率＝(m1-m2)/m0×100％
式中m1为对照实验中残余物的质量，m0和m2分别为酶处理前和处理后样品的质量。
所谓生物降解，是指材料在体内或模拟体液环境中的降解。除化学降解外，酶降解是生物体内的特征降解反应。从图3可以看出，相比CMC(图中简写：CMC)，实施例5中制备得到的纤维素微凝胶(图中简写单体：DCMC)具有较强的抗酶降解能力，抗酶降解能力的提高主要取决于改性CMC单体与PEGA生成了共价键，具有很高键能，远高于CMC之间以氢键为主的物理交联作用，不容易被破坏；并且藉由交联作用将线型分布的CMC转变成具有三维空间延展性的凝胶结构，增加了样品的聚集程度和堆积密度，使酶分子吸附、渗入、瓦解凝胶的阻力增大，延长了降解作用的时间。
(4)对实施例4中制备得到的纤维素微凝胶(包裹L929)中的细胞的存活状态进行表征，测试结果如图4所示：
具体为：生物细胞(L929)在实施例4制备而得的微凝胶球中经过1天培养后，加入1-2mLCalcein AM/PI检测工作液，37℃避光孵育30min。孵育结束后，用PBS充分洗涤，在荧光显微镜下观察染色效果(Calcein AM为绿色荧光，Ex/Em＝494/517nm；PI为红色荧光，Ex/Em＝535/617nm)。其中，(a)图为40倍下显微镜图像；(b)-(d)图为活死染色后荧光图像，Calcein AM(绿色，活细胞)、PI(红色，死细胞)：其中，(b)活死共染色；(c)活细胞染色；(d)死细胞染色。
由图4可知，染色后观察到大量绿色荧光信号，表明细胞存活状态较好，纤维素微凝胶(DCMC微凝胶)具有良好的生物相容性，该纤维素微凝胶的仿生环境适合生物细胞在其中粘附、增殖和分化。
(5)细胞毒性测试：对实施例5中制备得到的纤维素微凝胶进行了CCK8毒性测试，具体测试方法为：取2g纤维素微凝胶，加入10mL全DMEM培养基，置于37℃恒温水浴箱中浸提24h，对浸提液进行过滤除菌。在96孔培养板所标定受试区域内种植小鼠成纤维细胞L929(细胞数为104/孔)，置于二氧化碳培养箱中培养24h。待细胞密度达80％左右时，去除培养基，并用无菌PBS清洗受试区域，在该区域加入过滤后的浸提液，同时设置阳性对照组(含有1M NaOH溶液的DMEM培养基)以及空白对照组(DMEM培养基)，置于二氧化碳培养箱中培养24h。取出实验组，阳性对照组和空白对照组的液体，并用无菌PBS清洗，采用CCK8试剂盒进行测试，测试结果如图5所示。
细胞毒性测试结果表明，实施例5中制备得到的纤维素微凝胶细胞存活率为92.64％，具有很好的生物相容性，无明显细胞毒性，可用于体内研究。
本发明提供了一种用于长效细胞包裹的纤维素微凝胶的制备方法，首先，以水溶性的羧甲基纤维素钠(CMC)为原料，采用羧基活化剂活化CMC侧链上的羧基，使其与氨基聚乙二醇丙烯酸酯(PEGA)发生反应，得到双键修饰的纤维素单体(DCMC)。其次，将DCMC溶解到含有光引发剂的PBS溶液中，并将不同的细胞悬浮液加入到纤维素前驱液中，作为水相。用含有氟碳表面活性剂的氟化油HFE7500作油相。最后，采用微流控技术制备得到W/O微液滴，光照，所述W/O微液滴交联形成包裹细胞的微凝胶球，即得到载有不同细胞的纤维素微凝胶。相比传统的纤维素材料，DCMC单体合成过程简单绿色，反应条件温和，不需要使用有毒有害溶剂，细胞包裹所使用的水凝胶材料能够在温和条件下制备。DCMC单体有很好的水溶性，可在生理环境下快速成胶。
本发明在CMC分子链上接枝烯烃基团使其获得光固化特性。通过蓝光引发光固化，可制备得到稳定的纤维素基水凝胶，DCMC结构上的CMC和PEGA具有较大的分子量，可在生理环境下快速成胶，并且具有较优的力学性能，纤维素和聚乙二醇的稳定性较好，能够大大延长微凝胶在体内的降解时间。
需要说明的是，本文中的“室温”，如无特殊说明，均约为25℃；本文中涉及数值的“约”的含义为误差±2％。
上面结合附图对本发明实施例作了详细说明，但是本发明不限于上述实施例，在所属技术领域普通技术人员所具备的知识范围内，还可以在不脱离本发明宗旨的前提下作出各种变化。此外，在不冲突的情况下，本发明的实施例及实施例中的特征可以相互组合。

Claims (13)

1.一种用于医用材料的纤维素微凝胶，其特征在于，所述纤维素微凝胶的制备原料包括双键修饰的纤维素单体，所述双键修饰的纤维素单体为经氨基聚乙二醇丙烯酸酯双键修饰的羧甲基纤维素钠；
所述羧甲基纤维素钠中的羧基经活化后，与所述氨基聚乙二醇丙烯酸酯反应，得到双键修饰的纤维素单体；
所述氨基聚乙二醇丙烯酸酯与所述羧甲基纤维素钠的质量比值为1：（1-10）；
所述纤维素微凝胶的制备方法包括如下步骤：
S1，羧甲基纤维素钠中的羧基经活化后，与氨基聚乙二醇丙烯酸酯反应，得到双键修饰的纤维素单体；
S2，光引发剂的溶液与所述双键修饰的纤维素单体混合，得到混合物Ⅰ，过滤除菌后与生物细胞重悬液混合，得到混合物Ⅱ；
S3，以所述混合物Ⅱ为水相，含有非离子型碳氟表面活性剂的氟化油的混合液为油相，通过微流控技术和光引发聚合，制备得到所述纤维素微凝胶。
2.根据权利要求1所述的纤维素微凝胶，其特征在于，所述氨基聚乙二醇丙烯酸酯的分子量为1000-5000。
3.根据权利要求1所述的纤维素微凝胶，其特征在于，所述纤维素微凝胶为包裹细胞的纤维素微凝胶。
4.一种如权利要求1所述的纤维素微凝胶的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：以双键修饰的纤维素单体为原料，采用微流控技术制备得到所述纤维素微凝胶，其中，所述双键修饰的纤维素单体为经氨基聚乙二醇丙烯酸酯双键修饰的羧甲基纤维素钠。
5.一种生物墨水，其特征在于，包括如权利要求1-3任一项所述的纤维素微凝胶或如权利要求4所述方法制备得到的纤维素微凝胶中的至少一种。
6.一种细胞3D培养载体，其特征在于，包括如权利要求1-3任一项所述的纤维素微凝胶或如权利要求4所述方法制备得到的纤维素微凝胶或如权利要求5所述的生物墨水中的至少一种。
7.一种生物材料，其特征在于，包括如权利要求1-3任一项所述的纤维素微凝胶或如权利要求4所述方法制备得到的纤维素微凝胶或如权利要求5所述的生物墨水中的至少一种；或者所述生物材料的制备原料包括权利要求5所述的生物墨水。
8.根据权利要求7所述的生物材料，其特征在于，所述生物材料包括植入材料。
9.根据权利要求7所述的生物材料，其特征在于，所述生物材料由所述生物墨水经3D打印或声波打印制备得到。
10.一种医用材料，其特征在于，包括如权利要求1-3任一项所述的纤维素微凝胶或如权利要求4所述方法制备得到的纤维素微凝胶或如权利要求5所述的生物墨水或如权利要求6所述的细胞3D培养载体或如权利要求7-9任一项所述的生物材料中的至少一种。
11.一种医疗器械，其特征在于，包括如权利要求1-3任一项所述的纤维素微凝胶或如权利要求4所述方法制备得到的纤维素微凝胶或如权利要求5所述的生物墨水或如权利要求6所述的细胞3D培养载体或如权利要求7-9任一项所述的生物材料或如权利要求10所述的医用材料中的至少一种。
12.如权利要求1-3任一项所述的纤维素微凝胶或如权利要求4所述方法制备得到的纤维素微凝胶或如权利要求5所述的生物墨水在打印、医用材料或生物材料制备中的应用。
13.根据权利要求12所述的应用，其特征在于，所述打印包括3D打印或声波打印。
CN202210177594.8A 2022-02-24 2022-02-24 一种纤维素微凝胶及其制备方法与应用 Active CN114618022B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210177594.8A CN114618022B (zh) 2022-02-24 2022-02-24 一种纤维素微凝胶及其制备方法与应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210177594.8A CN114618022B (zh) 2022-02-24 2022-02-24 一种纤维素微凝胶及其制备方法与应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN114618022A CN114618022A (zh) 2022-06-14
CN114618022B true CN114618022B (zh) 2023-08-11

Family

ID=81899769

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202210177594.8A Active CN114618022B (zh) 2022-02-24 2022-02-24 一种纤维素微凝胶及其制备方法与应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN114618022B (zh)

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109942752A (zh) * 2019-03-22 2019-06-28 华南农业大学 改性羧甲基纤维素生物相容性复合水凝胶前驱液、复合水凝胶及其应用
CN110441514A (zh) * 2019-06-18 2019-11-12 北京利德曼生化股份有限公司 一种胶乳微球与抗体复合物的制备方法、产品及其应用
CN113731509A (zh) * 2021-08-12 2021-12-03 江苏奥净嘉环保科技有限公司 一种光催化水凝胶粒子的制备方法

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ITMI20041373A1 (it) * 2004-07-09 2004-10-09 Lima Lto S P A N-metil-ammidi di carbossimetilcellulosa acido alginico o carbossimetalamido
US20110182957A1 (en) * 2008-06-19 2011-07-28 Nicoll Steven B Cellulosics for tissue replacement
CN110787320B (zh) * 2019-12-02 2021-10-29 南方医科大学 一种直写成型3d打印生物墨水的制备及其3d打印方法
CN111116736A (zh) * 2019-12-23 2020-05-08 余雪平 胶原蛋白及胶原蛋白与羧甲基纤维素的复合材料
CN112111072A (zh) * 2020-09-17 2020-12-22 南京工业大学 可3D打印的ε-聚赖氨酸抗菌水凝胶及其制备方法与应用

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109942752A (zh) * 2019-03-22 2019-06-28 华南农业大学 改性羧甲基纤维素生物相容性复合水凝胶前驱液、复合水凝胶及其应用
CN110441514A (zh) * 2019-06-18 2019-11-12 北京利德曼生化股份有限公司 一种胶乳微球与抗体复合物的制备方法、产品及其应用
CN113731509A (zh) * 2021-08-12 2021-12-03 江苏奥净嘉环保科技有限公司 一种光催化水凝胶粒子的制备方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
薛巍等.《生物医用水凝胶》.暨南大学出版社,2012,(第1版),140-142. *

Also Published As

Publication number Publication date
CN114618022A (zh) 2022-06-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN109675104B (zh) 矿化水凝胶及仿生矿化骨修复材料的制备方法
US20180094106A1 (en) Self-integrating hydrogels and methods for making the same
CN109316630B (zh) 一种生物仿生基质的3d打印墨水及其制备方法
CN108794771B (zh) 双网络交联纤维素/丝素蛋白高强度水凝胶及其制备与应用
CN112321778B (zh) 一种双蛋白水凝胶的制备方法
CN112062981B (zh) 一种培养基介导交联的透明质酸基双交联水凝胶制备方法
CN112190763B (zh) 透明质酸/ε-聚赖氨酸抗菌水凝胶及其制备方法和应用
CN111662464A (zh) 一种壳聚糖/海藻酸钠双网络水凝胶的制备方法
CN112920425B (zh) 医用水凝胶组合物，医用水凝胶及其制备方法
CN112126081B (zh) 基于逆Diels-Alder反应的可快速固化水凝胶、其制备方法及应用
CN113444264B (zh) 用于细胞三维培养的双网络水凝胶的制备方法及应用方法
CN113150561B (zh) 一种用于3d生物打印的胶原基生物墨水及其制备方法与应用
CN114349990A (zh) 一种动态特性可调水凝胶及其制备方法与应用
CN112999418B (zh) 医用水凝胶组合物、医用水凝胶及其制备方法
da Silva et al. Poly (N‐isopropylacrylamide) surface‐grafted chitosan membranes as a new substrate for cell sheet engineering and manipulation
CN112812324A (zh) 一种聚阳离子-透明质酸复合水凝胶及其制备方法与应用
CN113265032B (zh) 一种聚烯丙基胺修饰的温敏共聚物的制备方法及其应用
CN114618022B (zh) 一种纤维素微凝胶及其制备方法与应用
CN116426003A (zh) 一种用于细胞扩增培养的3d水凝胶及其制备方法
CN109758608B (zh) 具有高韧性的可打印复合水凝胶及制备方法与应用
CN108822299B (zh) 羟氨基封端的聚乙二醇嵌段聚合物及制法和含该聚乙二醇嵌段聚合物的水凝胶及制法和应用
CN111378082B (zh) 一种双基团光敏明胶的制备方法和应用
CN111218421A (zh) 一种黏附型细胞支架及其制备和应用
CN114957730A (zh) 一种高反应活性水凝胶微球及其制备方法和应用
CN112126069B (zh) 基于胶原和透明质酸的可快速固化水凝胶、其制法及应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant