CN114591989B

CN114591989B - 融合rna及其外泌体递送系统

Info

Publication number: CN114591989B
Application number: CN202210332000.6A
Authority: CN
Inventors: 尹乐; 顾雨春
Original assignee: Chengnuo Regenerative Medical Technology Zhuhai Hengqin New Area Co ltd
Current assignee: Chengnuo Regenerative Medical Technology Zhuhai Hengqin New Area Co ltd
Priority date: 2022-03-30
Filing date: 2022-03-30
Publication date: 2022-11-04
Anticipated expiration: 2042-03-30
Also published as: CN114591989A

Abstract

本发明公开了融合RNA及其外泌体递送系统。本发明的融合RNA是经修饰的RNF112基因对应的mRNA。本发明还公开了所述融合RNA的编码核酸以及表达载体。将本发明的所述融合RNA导入外泌体或导入可产生外泌体的细胞中可获得装载所述融合RNA的外泌体。本发明制备的外泌体可作为目的基因mRNA的递送系统将其导入靶细胞或靶组织中，从而治疗相关疾病。

Description

融合RNA及其外泌体递送系统

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体涉及融合RNA及其外泌体递送系统。

背景技术

外泌体(exosomes)是由细胞分泌的直径为30～150nm的囊泡，细胞质膜凹陷形成的细胞内小泡，具有与细胞膜相同的膜结构，可以携带诸如RNA、蛋白质等大量成分，与细胞的生物学功能及细胞间的信号传递有着密切的关系。因其特殊的结构，相较人工合成的药物载体，外泌体作为药物载体进行药物运输有独特的优势，主要体现在外泌体的膜结构与细胞膜相同，可以提高药物进入细胞的效率，甚至可以透过血脑屏障，同时外泌体引起的有害免疫反应极低，有很好的渗透滞留(EPR)效应从而具有缓释效果等。目前已经尝试用外泌体携带miRNA、siRNA、化学小分子药物等进行基因治疗和肿瘤治疗等研究。但是如何将mRNA递送至外泌体从而产生携带RNA的外泌体是本申请需要解决的问题。

发明内容

为了克服现有技术缺陷，本发明的目的在于提供一种RNA递送系统，所述递送系统能够将目的RNA序列导入外泌体。

为了实现上述目的，本发明提供了如下技术方案：

本发明提供了一种融合RNA，所述融合RNA的序列包括RNA结合蛋白的RNA结合基序以及SEQ ID NO.1所示的RNA序列；RNA结合蛋白的RNA结合基序连接于SEQ ID NO.1所示的RNA序列的3’端；

进一步，所述RNA结合蛋白包括但不限于L7AE、MS2、TAT、MS2等；

进一步，所述L7AE的RNA结合基序包括SEQ ID NO.5所示的序列。

L7AE蛋白的RNA结合序列(识别序列)：

GGCCAGAGTGGGGGGCGTGATGCGAAAGCTGACCCACTCTGGCC(SEQ ID NO.5)。

本发明还提供了编码前面所述的融合RNA的核酸分子。

术语“核酸”，“多核苷酸”和“寡核苷酸”可互换使用，并且是指线性或环状构型以及单链或双链形式的脱氧核糖核苷酸或核糖核苷酸聚合物。为了本公开的目的，这些术语不应解释为对聚合物长度的限制。该术语可以涵盖天然核苷酸的已知类似物，以及在碱基、糖和/或磷酸部分(例如硫代磷酸酯骨架)中修饰的核苷酸。通常，特定核苷酸的类似物具有相同的碱基配对特异性；即A的类似物将与T碱基配对。

本发明还提供了包含前面所述的核酸分子的载体。

“载体”是指能够指导目的基因表达并可以转移基因序列到靶细胞的任何核酸构建体。该术语包括克隆和表达载体，以及整合载体。

可用于本发明的载体包括非病毒载体和病毒载体。非病毒载体包括DNA或RNA质粒，DNA MC，裸核酸以及与诸如脂质体，纳米颗粒或泊洛沙姆的递送运载体复合的核酸。病毒载体包括但不限于逆转录病毒，慢病毒，腺病毒，腺相关病毒，牛痘和单纯疱疹病毒载体。

本发明提供了一种RNA递送系统，所述RNA递送系统包括前面所述的载体、表达外泌体蛋白和RNA结合蛋白的载体。

优选地，所述RNA结合蛋白连接于外泌体蛋白的C端；

进一步，所述外泌体蛋白包括外泌体跨膜蛋白、外泌体表面蛋白。

可用于本发明的外泌体蛋白可以包括但不限于：CD9、CD53、CD63、CD81、CD54、CD50、FLOT1、FLOT2、CD49d、CD71、CD133、CD138、CD235a、ALIX、AARDC1、Syntenin-1、Syntenin-2、Lamp2b、TSPAN8、syndecan-1、syndecan-2、syndecan-3、syndecan-4、TSPAN14、CD37、CD82、CD151、CD231、CD102、NOTCH1、NOTCH2、NOTCH3、NOTCH4、DLL1、DLL4、JAG1、JAG2、CD49d/ITGA4、ITGB5、ITGB6、ITGB7、CD11a、CD11b、CD11c、CD18/ITGB2、CD41、CD49b、CD49c、CD49e、CD51、CD61、CD104、Fc受体、白介素受体、免疫球蛋白、MHC-I或MHC-II成分、CD2、CD3ε、CD3ζ、CD13、CD18、CD19、CD30、CD34、CD36、CD40、CD40L、CD44、CD45、CD45RA、CD47、CD86、CD110、CD111、CD115、CD117、CD125、CD135、CD184、CD200、CD279、CD273、CD274、CD362、COL6A1、AGRN、EGFR、GAPDH、GLUR2、GLUR3、HLA-DM、HSPG2、L1CAM、LAMB1、LAMC1、LFA-1、LGALS3BP、Mac-1α、Mac-1β、MFGE8、SLIT2、STX3、TCRA、TCRB、TCRD、TCRG、VTI1A、VTI1B、其它外泌体多肽及其任何组合组成的组。

在本发明的具体实施方案中，所述外泌体膜蛋白是Lamp2b。

进一步，所述表达外泌体蛋白和RNA结合蛋白的载体还表达靶向分子，所述靶向分子识别靶组织或靶细胞。

优选地，所述靶向分子包括能够与细胞膜表面抗原相互作用的靶向肽、识别特定细胞表面抗原的抗体或其抗原结合片段、亲合体。

细胞膜表面抗原包括但不限于ER、PR、P53、EGFR、IGFR、Her2、CD20、CD25、CD117、CD34、CD138、CD33、VEGFR、BCMA、Mesothelin、CEA、PSCA、MUC1、EpCAM、S100、CD22、CD19、CD70、CD30、ALK、RANK、GPC2、GPC3、Her3、EGFRvIII、GD2、PD-L1、PD-L2。

作为靶向分子的实施例，所述靶向分子包括但不限于：GE11、T7、RVG，识别CD19的单链抗体、识别BCMA的单链抗体。

进一步，所述RNA递送系统还包括促进外泌体生产或分泌的载体。

更进一步，所述载体表达STEAP、syndevan-4和NadB。

本发明还提供了一种外泌体，所述外泌体包括前面所述的融合RNA。

进一步，所述外泌体还包括靶向分子，所述靶向分子识别靶组织或靶细胞。

进一步，所述靶向分子的限定同前。

本发明还提供了前面所述的外泌体的制备方法，所述制备方法包括以下任一项：

1)将前面所述的融合RNA、前面所述的核酸分子导入外泌体中；

2)将前面所述的RNA递送系统导入产生外泌体的细胞中；培养所述细胞产生外泌体。

本发明还提供了一种细胞，所述细胞为以下任一项：

1)产生并分泌前面所述的外泌体；

2)导入了前面所述的RNA递送系统。

本发明还提供了前面所述的细胞的制备方法，所述制备方法包括如下步骤：将前面所述的RNA递送系统引入到产生外泌体的细胞中。

本发明细胞或后续提到的能够分泌外泌体的细胞包括但不限于原代细胞、细胞系、存在于多细胞生物的细胞、或基本上任何其它类型的细胞来源。本发明的细胞包括体内产生外泌体的细胞。根据本发明的细胞可以选自广泛范围的细胞和细胞系，例如间充质干细胞或基质细胞(可从例如骨髓、脂肪组织、脐带胶质(Wharton'sjelly)、围产期组织、胎盘、牙芽、脐带血、皮肤组织等获得)、成纤维细胞、羊膜细胞且更具体地说是任选地表达各种早期标记物的羊膜上皮细胞、骨髓抑制细胞、M2极化巨噬细胞、脂肪细胞、内皮细胞、成纤维细胞等。特别关注的细胞系包括人脐带内皮细胞(HUVEC)、人胚肾(HEK)细胞、内皮细胞系例如微血管内皮细胞或淋巴内皮细胞、红细胞、红系祖细胞、软骨细胞、不同来源的MSC、羊膜细胞、羊膜上皮(AE)细胞、通过羊膜穿刺术或从胎盘获得的任何细胞、气道上皮细胞或肺泡上皮细胞、成纤维细胞、内皮细胞等。此外，免疫细胞例如B细胞、T细胞、NK细胞、巨噬细胞、单核细胞、树突细胞(DC)也在本发明的范围内，并且基本上能够产生细胞外囊泡的任何类型的细胞也包括在本文中。通常，外泌体基本上可以源自任何细胞来源，无论是原始细胞来源还是永生化细胞系。外泌体细胞可以是任何胚胎的、胎儿的和成年的体干细胞类型，包括诱导多能干细胞(iPSC)和通过任何方法衍生的其它干细胞。当治疗神经系统疾病时，可以考虑利用例如原代神经细胞、星形胶质细胞、少突胶质细胞、小胶质细胞和神经祖细胞作为源细胞。对于待治疗的患者而言，细胞本质上可以是同种异体的、自体的、甚至异种的，即细胞可以来自患者本人或者来自无关的、匹配的或不匹配的供体。

将外源性核酸分子引入外泌体或细胞的方法是本领域技术人员已知的，包括但不限于脂质介导的转移(即脂质体，包括中性和阳离子脂质)，电穿孔，直接注射，生物射弹，细胞融合，粒子轰击，磷酸钙共沉淀，DEAE-葡聚糖介导的转移和病毒载体介导的转移。使用例如Sonitron 2000系统(Rich-Mar)的超声操作也可以用于外源性核酸的递送。另外的示例性核酸递送系统包括由AmaxaBiosystems(Cologne,Germany)，Maxcyte公司(Rockville，Maryland)，BTX分子递送系统(Holliston,MA)和Copernicus Therapeutics公司提供的那些(参见例如US6008336)。

本发明还提供了一种药物组合物，所述药物组合物包括前面所述的外泌体、前面所述的细胞。

进一步，所述药物组合物还包括药学上可接受的载体或赋形剂。

术语“药学上可接受的载体”是指不会对受试者造成明显刺激并且不会消除组合物中所施用的细胞外囊泡的生物学活性和性质的载体或稀释剂。药学上可接受的载体可以增强或稳定组合物，或者可以用于促进组合物的制备。药学上可接受的载体可以包括生理上相容的溶剂、分散介质、包衣、抗细菌和抗真菌剂、等渗剂和吸收延迟剂等。可以选择载体以最小化受试者的不良副作用和/或最小化一种或多种活性成分的降解。这些配制品中的任何一种中也可以包含佐剂。

术语“药学上可接受的赋形剂”是指添加到药物组合物中以进一步促进活性成分的施用的惰性物质。肠胃外施用的配制品可以例如含有赋形剂如无菌水或盐水，聚亚烷基二醇如聚乙二醇，植物油或氢化萘。其他示例性赋形剂包括但不限于碳酸氢钙、磷酸钙、各种糖和各种类型的淀粉、纤维素衍生物、明胶、乙烯-乙酸乙烯酯共聚物颗粒和表面活性剂(包括例如聚山梨酯20)。

本发明的药物组合物可以通过本领域已知的多种方法施用。给予的途径和/或方式可以根据所期望的结果而变化。在一些实施例中，施用是玻璃体内、静脉内、肌内、腹膜内或皮下施用。药学上可接受的载体应适合于玻璃体内、静脉内、肌内、皮下、肠胃外、脊髓或表皮施用(例如，通过注射或输注)。在一些实施例中，包含至少一种外泌体和药学上可接受的载体或赋形剂的药物组合物可以处于适于肠胃外施用的形式。在一些实施例中，药物组合物可以是无菌可注射的水性或悬浮液的形式，其可以根据已知程序进行配制。无菌可注射制剂也可以是在无毒的肠胃外可接受的缓冲液中的无菌可注射悬浮液。

本发明还提供了一种应用，所述应用包括以下任一项：

1)前面所述的融合RNA、前面所述的核酸分子在制备装载外源RNA的外泌体中的应用；

2)前面所述的载体、前面所述的RNA递送系统在制备装载外源RNA的外泌体中的应用；

3)前面所述的细胞在制备装载外源RNA的外泌体中的应用；

4)前面所述的融合RNA、前面所述的核酸分子、前面所述的载体、前面所述的RNA递送系统、前面所述的外泌体或前面所述的细胞在制备治疗ALS的药物中的应用。

本发明还提供了一种治疗或预防ALS的方法，所述方法包括将前面所述的外泌体或细胞给有需要的受试者施用。

术语“受试者”和“患者”可互换使用，并且是指哺乳动物，例如人类患者和非人类灵长类动物，以及实验动物，例如兔子，狗，猫，大鼠，小鼠和其他动物。因此，本文所用的术语“受试者”或“患者”是指可以对其施用本发明表达盒的任何哺乳动物患者或受试者。本发明的受试者包括患有疾病的受试者。

如本文所用，术语“治疗(treating)”和“治疗(treatment)”是指减轻症状的严重性和/或频率，消除症状和/或根本原因，预防症状和/或其根本原因的发生，以及改善或补救损害。癌症和移植物抗宿主疾病是可以使用本文所述的组合物和方法治疗的病况的非限制性实例。因此，“治疗”和“治疗”包括：

(i)防止疾病或病况在哺乳动物中发生，特别是当这种哺乳动物易患该病况但尚未被诊断为患有该疾病或病况时；

(ii)抑制疾病或病况，即阻止其发展；

(iii)减轻疾病或病况，即导致疾病或病况消退；和/或

(iv)缓解或消除由疾病或病况引起的症状，即缓解疼痛并且处理或不处理潜在疾病或病况。

附图说明

图1显示pLenti-EF1α-GFP-L7AE(C/Dbox)Neo载体结构示意图；

图2显示pLenti-EF1α-RVG-Lamp2b-L7Ae载体结构示意图；

图3显示激光共聚焦显微镜的细胞荧光图。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步说明，以使本领域的技术人员可以更好地理解本发明并能予以实施，但所举实施例不作为对本发明的限定。

实验例1构建相关载体

1、实验材料

293FT细胞(ATCC，CRL-3249)，DMEM培养基(Hyclone，SH30022.01)，FBS(CellMaxFetal Bovine Serum，SA101.02)，常规载体pRSV-Rev(Plasmid#12253)、pMDLg/pRRE(Plasmid#12251)、pMD2.G(Plasmid#12259)、pLenti-EF1α-GFP-L7AE(C/Dbox)Neo(如图1所示)。

pLenti-EF1α-GFP-L7AE(C/Dbox)Neo全序列如SEQ ID NO.6所示。

2、实验方法

1)表达经修饰的RNF112基因的重组载体构建

将目的基因序列(经修饰的RNF112基因，pep RNF112，核酸序列如SEQ ID NO.1所示，氨基酸序列如SEQ ID NO.2)通过BsiWI、XbaI酶切位点连入Plenti-EF1α-GFP-L7AE(C/Dbox)Neo载体中。

2)pLenti-EF1α-RVG-Lamp2b-L7Ae载体构建

pLenti-EF1α-RVG-Lamp2b-L7Ae载体全序列如SEQ ID NO.3所示(图2)。

实施例2构建产生外泌体的工程细胞株以及分离外泌体

1、利用pLenti-EF1α-RVG-Lamp2b-L7Ae载体包装慢病毒，感染HEK293T细胞株，并使用G418筛选，获得稳转细胞株，命名为293T-RVG-Lamp2b-L7Ae；

2、以pLenti-EF1α-pepRNF112-L7AE(C/Dbox)Neo载体包装慢病毒并感染步骤1制备好的293T-RVG-Lamp2b-L7Ae细胞株，重复感染3次，并使用puromycin筛选获得稳转细胞株；

3、将步骤2获得的细胞株在T175培养瓶中扩增培养，收集上清，0.45μm滤膜过滤后，加入外泌体分离试剂4℃过夜，隔天10000g，1h离心，离心后弃去上清，用400μl DPBS重悬后置于-80℃储藏。

实施例3外泌体侵染293T-TDP43-EGFP细胞模型

1、构建293T-TDP43-EGFP细胞模型

1)包装TDP43-EGFP慢病毒

合成TDP43-EGFP核酸序列后经BsiWI、PflFI酶切位点连入pLenti-EF1a载体。TDP43-EGFP核酸序列如SEQ ID NO.4所示。

慢病毒包装流程：

通过胰酶消化收集293T细胞，用适当的完全培养基平铺细胞于10cm培养皿上(根据实验需要选择培养皿，使细胞贴壁后所占面积达到培养皿总面积的80％以上)。将细胞置于含5％CO₂的37℃温箱中孵育8-24h，当细胞贴壁完全后即可开始转染；

混匀核心质粒和包装质粒：取无菌1.5ml EP管，加入400μl Opti-MEM培养基，加入10μg核心质粒和15μg病毒包装质粒(包含PMD2G、VSVG、REV)，及75μl PEI转染试剂，充分混匀，静置15-20min；

孵育：将这400μl的混合液逐滴加入上述单层细胞的细胞培养基中，轻轻摇动平皿混匀后置于含5％CO₂的37℃温箱孵育；

收取病毒上清：6-10h后吸去培养基，加入10ml 37℃预热的完全培养基，继续将细胞放置温箱孵育，40h左右可以收集含慢病毒的上清，经45μm滤膜过滤后，可用于感染或者分装后置于－80℃储存待用。

2)使用步骤1)中慢病毒感染293T细胞，并使用puromycin进行筛选；

3)步骤2)中细胞挑取单克隆培养作为细胞模型。

2、使用实施例2收集到的外泌体侵染293T-TDP43-EGFP细胞，连续侵染数次；

3、使用激光共聚焦显微镜观察293T-TDP43-EGFP细胞胞质荧光变化。

4、结果

如图3所示，对照组(ctrl)为293T细胞表达TDP43-EGFP融合蛋白的单克隆细胞株，标记为293T-EGFP，对照组左侧为PI染色，标记细胞核，右侧为EGFP成像，绿色为TDP43-EGFP融合蛋白在细胞内的分布情况，EV-HSP组为293T-TDP43-EGFP侵染携带经修饰的RNF112基因mRNA的外泌体，同样左侧为PI染色细胞核，右侧为TDP-EGFP分布。显然可见，实验组较对照组，其细胞质中TDP-EGFP蛋白积聚明显降低，说明外泌体递送经修饰的RNF112基因mRNA可减少细胞模型的细胞质中TDP43蛋白积聚。

序列表

<110> 呈诺再生医学科技（珠海横琴新区）有限公司

<120> 融合RNA及其外泌体递送系统

<141> 2022-03-30

<160> 6

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 1992

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 1

atggtgctgg tggaggtgct ggccgacccc ctggaccaca gagggtcgac gtcggggtcg 60

gggaagccgg ggtcggggga agggtcgacg aaaggcatgc caaggcccgc cttgtcagtc 120

acttcctttt gtcatcggct tggcaaacgg gagagaaaac agagcttcat gggaaacagc 180

ggcaacagtt ggtcccatac acctttcccc aagttggagc taggcctggg gccccagccc 240

atggcgcccc gggagctccc tacctgctcc atctgcctgg agaggttgcg cgaccccatc 300

tcgctggact gtggccacga cttctgcata cggtgcttca gcacacaccg tctcccgggc 360

tgtgagccgc cctgctgtcc tgagtgccgg aagatatgca agcagaagag gggcctccgg 420

agcctgggcg agaagatgaa gctcctgccg cagcggccgc tgccccctgc actgcaggag 480

acgtgtcctg tgagggcgga gccgctgctg ctggttcgca tcaatgcctc tgggggcctc 540

atccttagga tgggggccat caaccgctgc ctgaagcacc ctctggccag ggacacccca 600

gtctgcctcc tcgctgtcct gggggagcag cactcaggga agtccttcct cctcaaccat 660

ttgcttcagg gcttgccggg cctggagtct ggtgagggcg gccggccaag aggaggagag 720

gcatccctgc agggctgcag gtggggcgcc aatggcctcg ccaggggcat atggatgtgg 780

agccacccct tcttgctggg gaaagaaggg aagaaggtgg cggtgttcct ggtggacaca 840

ggggatgcca tgagccctga gctgagcagg gaaacaagga tcaagctctg tgctctcacc 900

acgatgctga gctcctacca gatcctcagc acctcccagg agctgaagga tacagacctg 960

gactatctgg agatgtttgt ccacgtggcc gaggtgatgg gcaagcatta tgggatggtg 1020

ccaatccagc atctggacct cttagttcgt gactcatccc accccaacaa ggcagggcag 1080

gggcatgtag gcaacatctt ccagagattg tctggcagat accccaaggt gcaggagctg 1140

ctgcaaggga agcgagcccg ttgctgcctc ttgcctgccc cagggaggcg gcggatgaac 1200

caaggccatg caagccctgg tgacacagat gatgacttcc gccaccttct gggggcctac 1260

gtctcagatg tgctgagtgc ggccccccag cacgctaaga gccgctgcca ggggtactgg 1320

aacgaggggc gcgccgtggc caggggggac agacgcctac tcacggggca gcagctagct 1380

caggaaatca agaacctctc aggatggatg gggaggacag ggcccggttt cacctctccg 1440

gatgagatgg ctgctcagct gcacgacctg aggaaggtgg aagctgccaa gagggagttc 1500

gaggagtatg tgaggcagca ggacgtagcc accaagcgca tattctctgc gctgcgggtc 1560

ctgccagaca ccatgcggaa cctcctctcc acccagaaag atgccattct ggcccgccat 1620

ggtgtggcct tactctgcaa ggggagagat cagaccttgg aggcactgga agctgagctg 1680

caggccacgg ccaaggcctt catggactcc tacacgatgc gcttctgtgg ccacctagct 1740

gctgtggggg gtgctgtggg ggccgggctc atgggcctgg cagggggcgt ggtgggtgct 1800

ggcatggcag cagctgcact ggctgcagag gctgggatgg tggctgctgg agctgccgtg 1860

ggggccacag gggccgctgt ggttgggggt ggcgtgggtg ctgggttggc tgccacagtg 1920

ggctgcatgg agaaggagga ggatgagagg cttctggaag gggaccgaga gccccttctc 1980

caggaagagt aa 1992

<210> 2

<211> 663

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 2

Met Val Leu Val Glu Val Leu Ala Asp Pro Leu Asp His Arg Gly Ser

1 5 10 15

Thr Ser Gly Ser Gly Lys Pro Gly Ser Gly Glu Gly Ser Thr Lys Gly

20 25 30

Met Pro Arg Pro Ala Leu Ser Val Thr Ser Phe Cys His Arg Leu Gly

35 40 45

Lys Arg Glu Arg Lys Gln Ser Phe Met Gly Asn Ser Gly Asn Ser Trp

50 55 60

Ser His Thr Pro Phe Pro Lys Leu Glu Leu Gly Leu Gly Pro Gln Pro

65 70 75 80

Met Ala Pro Arg Glu Leu Pro Thr Cys Ser Ile Cys Leu Glu Arg Leu

85 90 95

Arg Asp Pro Ile Ser Leu Asp Cys Gly His Asp Phe Cys Ile Arg Cys

100 105 110

Phe Ser Thr His Arg Leu Pro Gly Cys Glu Pro Pro Cys Cys Pro Glu

115 120 125

Cys Arg Lys Ile Cys Lys Gln Lys Arg Gly Leu Arg Ser Leu Gly Glu

130 135 140

Lys Met Lys Leu Leu Pro Gln Arg Pro Leu Pro Pro Ala Leu Gln Glu

145 150 155 160

Thr Cys Pro Val Arg Ala Glu Pro Leu Leu Leu Val Arg Ile Asn Ala

165 170 175

Ser Gly Gly Leu Ile Leu Arg Met Gly Ala Ile Asn Arg Cys Leu Lys

180 185 190

His Pro Leu Ala Arg Asp Thr Pro Val Cys Leu Leu Ala Val Leu Gly

195 200 205

Glu Gln His Ser Gly Lys Ser Phe Leu Leu Asn His Leu Leu Gln Gly

210 215 220

Leu Pro Gly Leu Glu Ser Gly Glu Gly Gly Arg Pro Arg Gly Gly Glu

225 230 235 240

Ala Ser Leu Gln Gly Cys Arg Trp Gly Ala Asn Gly Leu Ala Arg Gly

245 250 255

Ile Trp Met Trp Ser His Pro Phe Leu Leu Gly Lys Glu Gly Lys Lys

260 265 270

Val Ala Val Phe Leu Val Asp Thr Gly Asp Ala Met Ser Pro Glu Leu

275 280 285

Ser Arg Glu Thr Arg Ile Lys Leu Cys Ala Leu Thr Thr Met Leu Ser

290 295 300

Ser Tyr Gln Ile Leu Ser Thr Ser Gln Glu Leu Lys Asp Thr Asp Leu

305 310 315 320

Asp Tyr Leu Glu Met Phe Val His Val Ala Glu Val Met Gly Lys His

325 330 335

Tyr Gly Met Val Pro Ile Gln His Leu Asp Leu Leu Val Arg Asp Ser

340 345 350

Ser His Pro Asn Lys Ala Gly Gln Gly His Val Gly Asn Ile Phe Gln

355 360 365

Arg Leu Ser Gly Arg Tyr Pro Lys Val Gln Glu Leu Leu Gln Gly Lys

370 375 380

Arg Ala Arg Cys Cys Leu Leu Pro Ala Pro Gly Arg Arg Arg Met Asn

385 390 395 400

Gln Gly His Ala Ser Pro Gly Asp Thr Asp Asp Asp Phe Arg His Leu

405 410 415

Leu Gly Ala Tyr Val Ser Asp Val Leu Ser Ala Ala Pro Gln His Ala

420 425 430

Lys Ser Arg Cys Gln Gly Tyr Trp Asn Glu Gly Arg Ala Val Ala Arg

435 440 445

Gly Asp Arg Arg Leu Leu Thr Gly Gln Gln Leu Ala Gln Glu Ile Lys

450 455 460

Asn Leu Ser Gly Trp Met Gly Arg Thr Gly Pro Gly Phe Thr Ser Pro

465 470 475 480

Asp Glu Met Ala Ala Gln Leu His Asp Leu Arg Lys Val Glu Ala Ala

485 490 495

Lys Arg Glu Phe Glu Glu Tyr Val Arg Gln Gln Asp Val Ala Thr Lys

500 505 510

Arg Ile Phe Ser Ala Leu Arg Val Leu Pro Asp Thr Met Arg Asn Leu

515 520 525

Leu Ser Thr Gln Lys Asp Ala Ile Leu Ala Arg His Gly Val Ala Leu

530 535 540

Leu Cys Lys Gly Arg Asp Gln Thr Leu Glu Ala Leu Glu Ala Glu Leu

545 550 555 560

Gln Ala Thr Ala Lys Ala Phe Met Asp Ser Tyr Thr Met Arg Phe Cys

565 570 575

Gly His Leu Ala Ala Val Gly Gly Ala Val Gly Ala Gly Leu Met Gly

580 585 590

Leu Ala Gly Gly Val Val Gly Ala Gly Met Ala Ala Ala Ala Leu Ala

595 600 605

Ala Glu Ala Gly Met Val Ala Ala Gly Ala Ala Val Gly Ala Thr Gly

610 615 620

Ala Ala Val Val Gly Gly Gly Val Gly Ala Gly Leu Ala Ala Thr Val

625 630 635 640

Gly Cys Met Glu Lys Glu Glu Asp Glu Arg Leu Leu Glu Gly Asp Arg

645 650 655

Glu Pro Leu Leu Gln Glu Glu

660

<210> 3

<211> 11396

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 3

tcgacggatc gggagatctc ccgatcccct atggtgcact ctcagtacaa tctgctctga 60

tgccgcatag ttaagccagt atctgctccc tgcttgtgtg ttggaggtcg ctgagtagtg 120

cgcgagcaaa atttaagcta caacaaggca aggcttgacc gacaattgca tgaagaatct 180

gcttagggtt aggcgttttg cgctgcttcg cgatgtacgg gccagatata cgcgttgaca 240

ttgattattg actagttatt aatagtaatc aattacgggg tcattagttc atagcccata 300

tatggagttc cgcgttacat aacttacggt aaatggcccg cctggctgac cgcccaacga 360

cccccgccca ttgacgtcaa taatgacgta tgttcccata gtaacgccaa tagggacttt 420

ccattgacgt caatgggtgg agtatttacg gtaaactgcc cacttggcag tacatcaagt 480

gtatcatatg ccaagtacgc cccctattga cgtcaatgac ggtaaatggc ccgcctggca 540

ttatgcccag tacatgacct tatgggactt tcctacttgg cagtacatct acgtattagt 600

catcgctatt accatggtga tgcggttttg gcagtacatc aatgggcgtg gatagcggtt 660

tgactcacgg ggatttccaa gtctccaccc cattgacgtc aatgggagtt tgttttggca 720

ccaaaatcaa cgggactttc caaaatgtcg taacaactcc gccccattga cgcaaatggg 780

cggtaggcgt gtacggtggg aggtctatat aagcagcgcg ttttgcctgt actgggtctc 840

tctggttaga ccagatctga gcctgggagc tctctggcta actagggaac ccactgctta 900

agcctcaata aagcttgcct tgagtgcttc aagtagtgtg tgcccgtctg ttgtgtgact 960

ctggtaacta gagatccctc agaccctttt agtcagtgtg gaaaatctct agcagtggcg 1020

cccgaacagg gacttgaaag cgaaagggaa accagaggag ctctctcgac gcaggactcg 1080

gcttgctgaa gcgcgcacgg caagaggcga ggggcggcga ctggtgagta cgccaaaaat 1140

tttgactagc ggaggctaga aggagagaga tgggtgcgag agcgtcagta ttaagcgggg 1200

gagaattaga tcgcgatggg aaaaaattcg gttaaggcca gggggaaaga aaaaatataa 1260

attaaaacat atagtatggg caagcaggga gctagaacga ttcgcagtta atcctggcct 1320

gttagaaaca tcagaaggct gtagacaaat actgggacag ctacaaccat cccttcagac 1380

aggatcagaa gaacttagat cattatataa tacagtagca accctctatt gtgtgcatca 1440

aaggatagag ataaaagaca ccaaggaagc tttagacaag atagaggaag agcaaaacaa 1500

aagtaagacc accgcacagc aagcggccgc tgatcttcag acctggagga ggagatatga 1560

gggacaattg gagaagtgaa ttatataaat ataaagtagt aaaaattgaa ccattaggag 1620

tagcacccac caaggcaaag agaagagtgg tgcagagaga aaaaagagca gtgggaatag 1680

gagctttgtt ccttgggttc ttgggagcag caggaagcac tatgggcgca gcgtcaatga 1740

cgctgacggt acaggccaga caattattgt ctggtatagt gcagcagcag aacaatttgc 1800

tgagggctat tgaggcgcaa cagcatctgt tgcaactcac agtctggggc atcaagcagc 1860

tccaggcaag aatcctggct gtggaaagat acctaaagga tcaacagctc ctggggattt 1920

ggggttgctc tggaaaactc atttgcacca ctgctgtgcc ttggaatgct agttggagta 1980

ataaatctct ggaacagatt tggaatcaca cgacctggat ggagtgggac agagaaatta 2040

acaattacac aagcttaata cactccttaa ttgaagaatc gcaaaaccag caagaaaaga 2100

atgaacaaga attattggaa ttagataaat gggcaagttt gtggaattgg tttaacataa 2160

caaattggct gtggtatata aaattattca taatgatagt aggaggcttg gtaggtttaa 2220

gaatagtttt tgctgtactt tctatagtga atagagttag gcagggatat tcaccattat 2280

cgtttcagac ccacctccca accccgaggg gacccgacag gcccgaagga atagaagaag 2340

aaggtggaga gagagacaga gacagatcca ttcgattagt gaacggatcg gcactgcgtg 2400

cgccaattct gcagacaaat ggcagtattc atccacaatt ttaaaagaaa aggggggatt 2460

ggggggtaca gtgcagggga aagaatagta gacataatag caacagacat acaaactaaa 2520

gaattacaaa aacaaattac aaaaattcaa aattttcggg tttattacag ggacagcaga 2580

gatccagttt ggttaattaa tgcaaagatg gataaagttt taaacagaga ggaatctttg 2640

cagctaatgg accttctagg tcttgaaagg agtgggaatt ggctccggtg cccgtcagtg 2700

ggcagagcgc acatcgccca cagtccccga gaagttgggg ggaggggtcg gcaattgaac 2760

cggtgcctag agaaggtggc gcggggtaaa ctgggaaagt gatgtcgtgt actggctccg 2820

cctttttccc gagggtgggg gagaaccgta tataagtgca gtagtcgccg tgaacgttct 2880

ttttcgcaac gggtttgccg ccagaacaca ggtaagtgcc gtgtgtggtt cccgcgggcc 2940

tggcctcttt acgggttatg gcccttgcgt gccttgaatt acttccactg gctgcagtac 3000

gtgattcttg atcccgagct tcgggttgga agtgggtggg agagttcgag gccttgcgct 3060

taaggagccc cttcgcctcg tgcttgagtt gaggcctggc ctgggcgctg gggccgccgc 3120

gtgcgaatct ggtggcacct tcgcgcctgt ctcgctgctt tcgataagtc tctagccatt 3180

taaaattttt gatgacctgc tgcgacgctt tttttctggc aagatagtct tgtaaatgcg 3240

ggccaagatc tgcacactgg tatttcggtt tttggggccg cgggcggcga cggggcccgt 3300

gcgtcccagc gcacatgttc ggcgaggcgg ggcctgcgag cgcggccacc gagaatcgga 3360

cgggggtagt ctcaagctgg ccggcctgct ctggtgcctg gcctcgcgcc gccgtgtatc 3420

gccccgccct gggcggcaag gctggcccgg tcggcaccag ttgcgtgagc ggaaagatgg 3480

ccgcttcccg gccctgctgc agggagctca aaatggagga cgcggcgctc gggagagcgg 3540

gcgggtgagt cacccacaca aaggaaaagg gcctttccgt cctcagccgt cgcttcatgt 3600

gactccacgg agtaccgggc gccgtccagg cacctcgatt agttctcgag cttttggagt 3660

acgtcgtctt taggttgggg ggaggggttt tatgcgatgg agtttcccca cactgagtgg 3720

gtggagactg aagttaggcc agcttggcac ttgatgtaat tctccttgga atttgccctt 3780

tttgagtttg gatcttggtt cattctcaag cctcagacag tggttcaaag tttttttctt 3840

ccatttcagg tgtcgtgacg tacgatggtg tgcttccgcc tcttcccggt tccgggctca 3900

gggctcgttc tggtctgcct agtcctggga gctgtgcggt cttatgcagg taactcgact 3960

atgggcagtg gatacaccat ttggatgccc gagaatccga gaccagggac accttgtgac 4020

atttttacca atagcagagg gaagagagca tccaacgggg gcagtggatc tggatccggt 4080

ggctcgagtt tggaacttaa tttgacagat tcagaaaatg ccacttgcct ttatgcaaaa 4140

tggcagatga atttcacagt tcgctatgaa actacaaata aaacttataa aactgtaacc 4200

atttcagacc atggcactgt gacatataat ggaagcattt gtggggatga tcagaatggt 4260

cccaaaatag cagtgcagtt cggacctggc ttttcctgga ttgcgaattt taccaaggca 4320

gcatctactt attcaattga cagcgtttca ttttcctaca acactggtga taacacaaca 4380

tttcctgatg ctgaagataa aggaatcctt actgttgatg aacttttggc catcagaatc 4440

ccattgaatg acctttttag atgcaatagt ttatcaactt tggaaaagaa tgatgttgtc 4500

caacactact gggatgttct tgtacaagct tttgtccaaa atggcacagt gagcacaaat 4560

gagttcctgt gtgataaaga caaaacttca acagtggcac ccaccataca caccactgtg 4620

ccatctccta ctacaacacc tactccaaag gaaaaaccag aagctggaac ctattcagtt 4680

aataatggca atgatacttg cctgctggct accatggggc tgcagctgaa catcactcag 4740

gataaggttg cttcagttat taacatcaac cccaatacaa ctcactccac aggcagctgc 4800

cgttctcaca ctgctctact tagactcaat agcagcacta ttaagtatct tgactttgtc 4860

tttgctgtga aaaatgaaaa ccgattttat ctgaaggaag tgaacatcag catgtatttg 4920

gttaatggct ccgttttcag cattgcaaat aacaatctca gctactggga tgcccccctg 4980

ggaagttctt atatgtgcaa caaagagcag actgtttcag tgtctggagc atttcagata 5040

aatacctttg atctaagggt tcagcctttc aatgtgacac aaggaaagta ttctacagcc 5100

caagagtgtt cgctggatga tgacaccatt ctaatcccaa ttatagttgg tgctggtctt 5160

tcaggcttga ttatcgttat agtgattgct tacgtaattg gcagaagaaa aagttatgct 5220

ggatatcaga ctctgggaag cggataccca tacgatgtgc cagattacgc tgggtcgacg 5280

tcggggtcgg ggaagccggg gtcgggggaa gggtcgacga aaggcatgta cgtgagattt 5340

gaggttcctg aggacatgca gaacgaagct ctgagtctgc tggagaaggt tagggagagc 5400

ggtaaggtaa agaaaggtac caacgagacg acaaaggctg tggagagggg actggcaaag 5460

ctcgtttaca tcgcagagga tgttgacccg cctgagatcg ttgctcatct gcccctcctc 5520

tgcgaggaga agaatgtgcc gtacatttac gttaaaagca agaacgacct tggaagggct 5580

gtgggcattg aggtgccatg cgcttcggca gcgataatca acgagggaga gctgagaaag 5640

gagcttggaa gccttgtgga gaagattaaa ggccttcaga aggtcaaaca aactcttaac 5700

tttgatttac tcaaactggc tggggatgta gaaagcaatc caggtccaat ggccaagttg 5760

accagtgccg ttccggtgct caccgcgcgc gacgtcgccg gagcggtcga gttctggacc 5820

gaccggctcg ggttctcccg ggacttcgtg gaggacgact tcgccggtgt ggtccgggac 5880

gacgtgaccc tgttcatcag cgcggtccag gaccaggtgg tgccggacaa caccctggcc 5940

tgggtgtggg tgcgcggcct ggacgagctg tacgccgagt ggtcggaggt cgtgtccacg 6000

aacttccggg acgcctccgg gccggccatg accgagatcg gcgagcagcc gtgggggcgg 6060

gagttcgccc tgcgcgaccc ggccggcaac tgcgtgcact tcgtggccga ggagcaggac 6120

taagaattcg atatcaagct tatcgataat caacctctgg attacaaaat ttgtgaaaga 6180

ttgactggta ttcttaacta tgttgctcct tttacgctat gtggatacgc tgctttaatg 6240

cctttgtatc atgctattgc ttcccgtatg gctttcattt tctcctcctt gtataaatcc 6300

tggttgctgt ctctttatga ggagttgtgg cccgttgtca ggcaacgtgg cgtggtgtgc 6360

actgtgtttg ctgacgcaac ccccactggt tggggcattg ccaccacctg tcagctcctt 6420

tccgggactt tcgctttccc cctccctatt gccacggcgg aactcatcgc cgcctgcctt 6480

gcccgctgct ggacaggggc tcggctgttg ggcactgaca attccgtggt gttgtcgggg 6540

aaatcatcgt cctttccttg gctgctcgcc tgtgttgcca cctggattct gcgcgggacg 6600

tccttctgct acgtcccttc ggccctcaat ccagcggacc ttccttcccg cggcctgctg 6660

ccggctctgc ggcctcttcc gcgtcttcgc cttcgccctc agacgagtcg gatctccctt 6720

tgggccgcct ccccgcatcg ataccgtcga cctcgagacc tagaaaaaca tggagcaatc 6780

acaagtagca atacagcagc taccaatgct gattgtgcct ggctagaagc acaagaggag 6840

gaggaggtgg gttttccagt cacacctcag gtacctttaa gaccaatgac ttacaaggca 6900

gctgtagatc ttagccactt tttaaaagaa aaggggggac tggaagggct aattcactcc 6960

caacgaagac aagatatcct tgatctgtgg atctaccaca cacaaggcta cttccctgat 7020

tggcagaact acacaccagg gccagggatc agatatccac tgacctttgg atggtgctac 7080

aagctagtac cagttgagca agagaaggta gaagaagcca atgaaggaga gaacacccgc 7140

ttgttacacc ctgtgagcct gcatgggatg gatgacccgg agagagaagt attagagtgg 7200

aggtttgaca gccgcctagc atttcatcac atggcccgag agctgcatcc ggactgtact 7260

gggtctctct ggttagacca gatctgagcc tgggagctct ctggctaact agggaaccca 7320

ctgcttaagc ctcaataaag cttgccttga gtgcttcaag tagtgtgtgc ccgtctgttg 7380

tgtgactctg gtaactagag atccctcaga cccttttagt cagtgtggaa aatctctagc 7440

agggcccgtt taaacccgct gatcagcctc gactgtgcct tctagttgcc agccatctgt 7500

tgtttgcccc tcccccgtgc cttccttgac cctggaaggt gccactccca ctgtcctttc 7560

ctaataaaat gaggaaattg catcgcattg tctgagtagg tgtcattcta ttctgggggg 7620

tggggtgggg caggacagca agggggagga ttgggaagac aatagcaggc atgctgggga 7680

tgcggtgggc tctatggctt ctgaggcgga aagaaccagc tggggctcta gggggtatcc 7740

ccacgcgccc tgtagcggcg cattaagcgc ggcgggtgtg gtggttacgc gcagcgtgac 7800

cgctacactt gccagcgccc tagcgcccgc tcctttcgct ttcttccctt cctttctcgc 7860

cacgttcgcc ggctttcccc gtcaagctct aaatcggggg ctccctttag ggttccgatt 7920

tagtgcttta cggcacctcg accccaaaaa acttgattag ggtgatggtt cacgtagtgg 7980

gccatcgccc tgatagacgg tttttcgccc tttgacgttg gagtccacgt tctttaatag 8040

tggactcttg ttccaaactg gaacaacact caaccctatc tcggtctatt cttttgattt 8100

ataagggatt ttgccgattt cggcctattg gttaaaaaat gagctgattt aacaaaaatt 8160

taacgcgaat taattctgtg gaatgtgtgt cagttagggt gtggaaagtc cccaggctcc 8220

ccagcaggca gaagtatgca aagcatgcat ctcaattagt cagcaaccag gtgtggaaag 8280

tccccaggct ccccagcagg cagaagtatg caaagcatgc atctcaatta gtcagcaacc 8340

atagtcccgc ccctaactcc gcccatcccg cccctaactc cgcccagttc cgcccattct 8400

ccgccccatg gctgactaat tttttttatt tatgcagagg ccgaggccgc ctctgcctct 8460

gagctattcc agaagtagtg aggaggcttt tttggaggcc taggcttttg caaaaagctc 8520

ccgggagctt gtatatccat tttcggatct gatcagcacg tgttgacaat taatcatcgg 8580

catagtatat cggcatagta taatacgaca aggtgaggaa ctaaaccatg gccaagttga 8640

ccagtgccgt tccggtgctc accgcgcgcg acgtcgccgg agcggtcgag ttctggaccg 8700

accggctcgg gttctcccgg gacttcgtgg aggacgactt cgccggtgtg gtccgggacg 8760

acgtgaccct gttcatcagc gcggtccagg accaggtggt gccggacaac accctggcct 8820

gggtgtgggt gcgcggcctg gacgagctgt acgccgagtg gtcggaggtc gtgtccacga 8880

acttccggga cgcctccggg ccggccatga ccgagatcgg cgagcagccg tgggggcggg 8940

agttcgccct gcgcgacccg gccggcaact gcgtgcactt cgtggccgag gagcaggact 9000

gacacgtgct acgagatttc gattccaccg ccgccttcta tgaaaggttg ggcttcggaa 9060

tcgttttccg ggacgccggc tggatgatcc tccagcgcgg ggatctcatg ctggagttct 9120

tcgcccaccc caacttgttt attgcagctt ataatggtta caaataaagc aatagcatca 9180

caaatttcac aaataaagca tttttttcac tgcattctag ttgtggtttg tccaaactca 9240

tcaatgtatc ttatcatgtc tgtataccgt cgacctctag ctagagcttg gcgtaatcat 9300

ggtcatagct gtttcctgtg tgaaattgtt atccgctcac aattccacac aacatacgag 9360

ccggaagcat aaagtgtaaa gcctggggtg cctaatgagt gagctaactc acattaattg 9420

cgttgcgctc actgcccgct ttccagtcgg gaaacctgtc gtgccagctg cattaatgaa 9480

tcggccaacg cgcggggaga ggcggtttgc gtattgggcg ctcttccgct tcctcgctca 9540

ctgactcgct gcgctcggtc gttcggctgc ggcgagcggt atcagctcac tcaaaggcgg 9600

taatacggtt atccacagaa tcaggggata acgcaggaaa gaacatgtga gcaaaaggcc 9660

agcaaaaggc caggaaccgt aaaaaggccg cgttgctggc gtttttccat aggctccgcc 9720

cccctgacga gcatcacaaa aatcgacgct caagtcagag gtggcgaaac ccgacaggac 9780

tataaagata ccaggcgttt ccccctggaa gctccctcgt gcgctctcct gttccgaccc 9840

tgccgcttac cggatacctg tccgcctttc tcccttcggg aagcgtggcg ctttctcata 9900

gctcacgctg taggtatctc agttcggtgt aggtcgttcg ctccaagctg ggctgtgtgc 9960

acgaaccccc cgttcagccc gaccgctgcg ccttatccgg taactatcgt cttgagtcca 10020

acccggtaag acacgactta tcgccactgg cagcagccac tggtaacagg attagcagag 10080

cgaggtatgt aggcggtgct acagagttct tgaagtggtg gcctaactac ggctacacta 10140

gaagaacagt atttggtatc tgcgctctgc tgaagccagt taccttcgga aaaagagttg 10200

gtagctcttg atccggcaaa caaaccaccg ctggtagcgg tggttttttt gtttgcaagc 10260

agcagattac gcgcagaaaa aaaggatctc aagaagatcc tttgatcttt tctacggggt 10320

ctgacgctca gtggaacgaa aactcacgtt aagggatttt ggtcatgaga ttatcaaaaa 10380

ggatcttcac ctagatcctt ttaaattaaa aatgaagttt taaatcaatc taaagtatat 10440

atgagtaaac ttggtctgac agttaccaat gcttaatcag tgaggcacct atctcagcga 10500

tctgtctatt tcgttcatcc atagttgcct gactccccgt cgtgtagata actacgatac 10560

gggagggctt accatctggc cccagtgctg caatgatacc gcgagaccca cgctcaccgg 10620

ctccagattt atcagcaata aaccagccag ccggaagggc cgagcgcaga agtggtcctg 10680

caactttatc cgcctccatc cagtctatta attgttgccg ggaagctaga gtaagtagtt 10740

cgccagttaa tagtttgcgc aacgttgttg ccattgctac aggcatcgtg gtgtcacgct 10800

cgtcgtttgg tatggcttca ttcagctccg gttcccaacg atcaaggcga gttacatgat 10860

cccccatgtt gtgcaaaaaa gcggttagct ccttcggtcc tccgatcgtt gtcagaagta 10920

agttggccgc agtgttatca ctcatggtta tggcagcact gcataattct cttactgtca 10980

tgccatccgt aagatgcttt tctgtgactg gtgagtactc aaccaagtca ttctgagaat 11040

agtgtatgcg gcgaccgagt tgctcttgcc cggcgtcaat acgggataat accgcgccac 11100

atagcagaac tttaaaagtg ctcatcattg gaaaacgttc ttcggggcga aaactctcaa 11160

ggatcttacc gctgttgaga tccagttcga tgtaacccac tcgtgcaccc aactgatctt 11220

cagcatcttt tactttcacc agcgtttctg ggtgagcaaa aacaggaagg caaaatgccg 11280

caaaaaaggg aataagggcg acacggaaat gttgaatact catactcttc ctttttcaat 11340

attattgaag catttatcag ggttattgtc tcatgagcgg atacatattt gaatgt 11396

<210> 4

<211> 2019

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 4

atgtctgaat atattcgggt aaccgaagat gagaacgatg agcccattga aataccatcg 60

gaagacgatg ggacggtgct gctctccacg gttacagccc agtttccagg ggcgtgtggg 120

cttcgctaca ggaatccagt gtctcagtgt atgagaggtg tccggctggt agaaggaatt 180

ctgcatgccc cagatgctgg ctggggaaat ctggtgtatg ttgtcaacta tccaaaagat 240

aacaaaagaa aaatggatga gacagatgct tcatcagcag tgaaagtgaa aagagcagtc 300

cagaaaacat ccgatttaat agtgttgggt ctcccatgga aaacaaccga acaggacctg 360

aaagagtatt ttagtacctt tggagaagtt cttatggtgc aggtcaagaa agatcttaag 420

actggtcatt caaaggggtt tggctttgtt cgttttacgg aatatgaaac acaagtgaaa 480

gtaatgtcac agcgacatat gatagatgga cgatggtgtg actgcaaact tcctaattct 540

aagcaaagcc aagatgagcc tttgagaagc agaaaagtgt ttgtggggcg ctgtacagag 600

gacatgactg aggatgagct gcgggagttc ttctctcagt acggggatgt gatggatgtc 660

ttcatcccca agccattcag ggcctttgcc tttgttacat ttgcagatga tcagattgcg 720

cagtctcttt gtggagagga cttgatcatt aaaggaatca gcgttcatat atccaatgcc 780

gaacctaagc acaatagcaa tagacagtta gaaagaagtg gaagatttgg tggtaatcca 840

ggtggctttg ggaatcaggg tggatttggt aatagcagag ggggtggagc tggtttggga 900

aacaatcaag gtagtaatat gggtggtggg atgaactttg gtgcgttcag cattaatcca 960

gccatgatgg ctgccgccca ggcagcacta cagagcagtt ggggtatggt gggcatgtta 1020

gccagccagc agaaccagtc aggcccatcg ggtaataacc aaaaccaagg caacatgcag 1080

agggagccaa accaggcctt cggttctgga aataactctt atagtggctc taattctggt 1140

gcagcaattg gttggggatc agcatccaat gcagggtcgg gcagtggttt taatggaggc 1200

tttggctcaa gcatggattc taagtcttct ggctggggaa tggggtcgac gtcggggtcg 1260

gggaagccgg ggtcggggga agggtcgacg aaaggccgta gcatggtgag caagggcgag 1320

gagctgttca ccggggtggt gcccatcctg gtcgagctgg acggcgacgt aaacggccac 1380

aagttcagcg tgtccggcga gggcgagggc gatgccacct acggcaagct gaccctgaag 1440

ttcatctgca ccaccggcaa gctgcccgtg ccctggccca ccctcgtgac caccctgacc 1500

tacggcgtgc agtgcttcag ccgctacccc gaccacatga agcagcacga cttcttcaag 1560

tccgccatgc ccgaaggcta cgtccaggag cgcaccatct tcttcaagga cgacggcaac 1620

tacaagaccc gcgccgaggt gaagttcgag ggcgacaccc tggtgaaccg catcgagctg 1680

aagggcatcg acttcaagga ggacggcaac atcctggggc acaagctgga gtacaactac 1740

aacagccaca acgtctatat catggccgac aagcagaaga acggcatcaa ggtgaacttc 1800

aagatccgcc acaacatcga ggacggcagc gtgcagctcg ccgaccacta ccagcagaac 1860

acccccatcg gcgacggccc cgtgctgctg cccgacaacc actacctgag cacccagtcc 1920

gccctgagca aagaccccaa cgagaagcgc gatcacatgg tcctgctgga gttcgtgacc 1980

gccgccggga tcactctcgg catggacgag ctgtacaag 2019

<210> 5

<211> 44

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 5

ggccagagtg gggggcgtga tgcgaaagct gacccactct ggcc 44

<210> 6

<211> 10780

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 6

tcgacggatc gggagatctc ccgatcccct atggtgcact ctcagtacaa tctgctctga 60

tgccgcatag ttaagccagt atctgctccc tgcttgtgtg ttggaggtcg ctgagtagtg 120

cgcgagcaaa atttaagcta caacaaggca aggcttgacc gacaattgca tgaagaatct 180

gcttagggtt aggcgttttg cgctgcttcg cgatgtacgg gccagatata cgcgttgaca 240

ttgattattg actagttatt aatagtaatc aattacgggg tcattagttc atagcccata 300

tatggagttc cgcgttacat aacttacggt aaatggcccg cctggctgac cgcccaacga 360

cccccgccca ttgacgtcaa taatgacgta tgttcccata gtaacgccaa tagggacttt 420

ccattgacgt caatgggtgg agtatttacg gtaaactgcc cacttggcag tacatcaagt 480

gtatcatatg ccaagtacgc cccctattga cgtcaatgac ggtaaatggc ccgcctggca 540

ttatgcccag tacatgacct tatgggactt tcctacttgg cagtacatct acgtattagt 600

catcgctatt accatggtga tgcggttttg gcagtacatc aatgggcgtg gatagcggtt 660

tgactcacgg ggatttccaa gtctccaccc cattgacgtc aatgggagtt tgttttggca 720

ccaaaatcaa cgggactttc caaaatgtcg taacaactcc gccccattga cgcaaatggg 780

cggtaggcgt gtacggtggg aggtctatat aagcagcgcg ttttgcctgt actgggtctc 840

tctggttaga ccagatctga gcctgggagc tctctggcta actagggaac ccactgctta 900

agcctcaata aagcttgcct tgagtgcttc aagtagtgtg tgcccgtctg ttgtgtgact 960

ctggtaacta gagatccctc agaccctttt agtcagtgtg gaaaatctct agcagtggcg 1020

cccgaacagg gacttgaaag cgaaagggaa accagaggag ctctctcgac gcaggactcg 1080

gcttgctgaa gcgcgcacgg caagaggcga ggggcggcga ctggtgagta cgccaaaaat 1140

tttgactagc ggaggctaga aggagagaga tgggtgcgag agcgtcagta ttaagcgggg 1200

gagaattaga tcgcgatggg aaaaaattcg gttaaggcca gggggaaaga aaaaatataa 1260

attaaaacat atagtatggg caagcaggga gctagaacga ttcgcagtta atcctggcct 1320

gttagaaaca tcagaaggct gtagacaaat actgggacag ctacaaccat cccttcagac 1380

aggatcagaa gaacttagat cattatataa tacagtagca accctctatt gtgtgcatca 1440

aaggatagag ataaaagaca ccaaggaagc tttagacaag atagaggaag agcaaaacaa 1500

aagtaagacc accgcacagc aagcggccgc tgatcttcag acctggagga ggagatatga 1560

gggacaattg gagaagtgaa ttatataaat ataaagtagt aaaaattgaa ccattaggag 1620

tagcacccac caaggcaaag agaagagtgg tgcagagaga aaaaagagca gtgggaatag 1680

gagctttgtt ccttgggttc ttgggagcag caggaagcac tatgggcgca gcgtcaatga 1740

cgctgacggt acaggccaga caattattgt ctggtatagt gcagcagcag aacaatttgc 1800

tgagggctat tgaggcgcaa cagcatctgt tgcaactcac agtctggggc atcaagcagc 1860

tccaggcaag aatcctggct gtggaaagat acctaaagga tcaacagctc ctggggattt 1920

ggggttgctc tggaaaactc atttgcacca ctgctgtgcc ttggaatgct agttggagta 1980

ataaatctct ggaacagatt tggaatcaca cgacctggat ggagtgggac agagaaatta 2040

acaattacac aagcttaata cactccttaa ttgaagaatc gcaaaaccag caagaaaaga 2100

atgaacaaga attattggaa ttagataaat gggcaagttt gtggaattgg tttaacataa 2160

caaattggct gtggtatata aaattattca taatgatagt aggaggcttg gtaggtttaa 2220

gaatagtttt tgctgtactt tctatagtga atagagttag gcagggatat tcaccattat 2280

cgtttcagac ccacctccca accccgaggg gacccgacag gcccgaagga atagaagaag 2340

aaggtggaga gagagacaga gacagatcca ttcgattagt gaacggatcg gcactgcgtg 2400

cgccaattct gcagacaaat ggcagtattc atccacaatt ttaaaagaaa aggggggatt 2460

ggggggtaca gtgcagggga aagaatagta gacataatag caacagacat acaaactaaa 2520

gaattacaaa aacaaattac aaaaattcaa aattttcggg tttattacag ggacagcaga 2580

gatccagttt ggttaattaa tgcaaagatg gataaagttt taaacagaga ggaatctttg 2640

cagctaatgg accttctagg tcttgaaagg agtgggaatt ggctccggtg cccgtcagtg 2700

ggcagagcgc acatcgccca cagtccccga gaagttgggg ggaggggtcg gcaattgaac 2760

cggtgcctag agaaggtggc gcggggtaaa ctgggaaagt gatgtcgtgt actggctccg 2820

cctttttccc gagggtgggg gagaaccgta tataagtgca gtagtcgccg tgaacgttct 2880

ttttcgcaac gggtttgccg ccagaacaca ggtaagtgcc gtgtgtggtt cccgcgggcc 2940

tggcctcttt acgggttatg gcccttgcgt gccttgaatt acttccactg gctgcagtac 3000

gtgattcttg atcccgagct tcgggttgga agtgggtggg agagttcgag gccttgcgct 3060

taaggagccc cttcgcctcg tgcttgagtt gaggcctggc ctgggcgctg gggccgccgc 3120

gtgcgaatct ggtggcacct tcgcgcctgt ctcgctgctt tcgataagtc tctagccatt 3180

taaaattttt gatgacctgc tgcgacgctt tttttctggc aagatagtct tgtaaatgcg 3240

ggccaagatc tgcacactgg tatttcggtt tttggggccg cgggcggcga cggggcccgt 3300

gcgtcccagc gcacatgttc ggcgaggcgg ggcctgcgag cgcggccacc gagaatcgga 3360

cgggggtagt ctcaagctgg ccggcctgct ctggtgcctg gcctcgcgcc gccgtgtatc 3420

gccccgccct gggcggcaag gctggcccgg tcggcaccag ttgcgtgagc ggaaagatgg 3480

ccgcttcccg gccctgctgc agggagctca aaatggagga cgcggcgctc gggagagcgg 3540

gcgggtgagt cacccacaca aaggaaaagg gcctttccgt cctcagccgt cgcttcatgt 3600

gactccacgg agtaccgggc gccgtccagg cacctcgatt agttctcgag cttttggagt 3660

acgtcgtctt taggttgggg ggaggggttt tatgcgatgg agtttcccca cactgagtgg 3720

gtggagactg aagttaggcc agcttggcac ttgatgtaat tctccttgga atttgccctt 3780

tttgagtttg gatcttggtt cattctcaag cctcagacag tggttcaaag tttttttctt 3840

ccatttcagg tgtcgtgacg tacgatggtg agcaagggcg aggagctgtt caccggggtg 3900

gtgcccatcc tggtcgagct ggacggcgac gtaaacggcc acaagttcag cgtgtccggc 3960

gagggcgagg gcgatgccac ctacggcaag ctgaccctga agttcatctg caccaccggc 4020

aagctgcccg tgccctggcc caccctcgtg accaccctga cctacggcgt gcagtgcttc 4080

agccgctacc ccgaccacat gaagcagcac gacttcttca agtccgccat gcccgaaggc 4140

tacgtccagg agcgcaccat cttcttcaag gacgacggca actacaagac ccgcgccgag 4200

gtgaagttcg agggcgacac cctggtgaac cgcatcgagc tgaagggcat cgacttcaag 4260

gaggacggca acatcctggg gcacaagctg gagtacaact acaacagcca caacgtctat 4320

atcatggccg acaagcagaa gaacggcatc aaggtgaact tcaagatccg ccacaacatc 4380

gaggacggca gcgtgcagct cgccgaccac taccagcaga acacccccat cggcgacggc 4440

cccgtgctgc tgcccgacaa ccactacctg agcacccagt ccgccctgag caaagacccc 4500

aacgagaagc gcgatcacat ggtcctgctg gagttcgtga ccgccgccgg gatcactctc 4560

ggcatggacg agctgtacaa ggtcaaacaa actcttaact ttgatttact caaactggct 4620

ggggatgtag aaagcaatcc aggtccagct agcatgggat cggccattga acaagatgga 4680

ttgcacgcag gttctccggc cgcttgggtg gagaggctat tcggctatga ctgggcacaa 4740

cagacaatcg gctgctctga tgccgccgtg ttccggctgt cagcgcaggg gcgcccggtt 4800

ctttttgtca agaccgacct gtccggtgcc ctgaatgaac tgcaggacga ggcagcgcgg 4860

ctatcgtggc tggccacgac gggcgttcct tgcgcagctg tgctcgacgt tgtcactgaa 4920

gcgggaaggg actggctgct attgggcgaa gtgccggggc aggatctcct gtcatctcac 4980

cttgctcctg ccgagaaagt atccatcatg gctgatgcaa tgcggcggct gcatacgctt 5040

gatccggcta cctgcccatt cgaccaccaa gcgaaacatc gcatcgagcg agcacgtact 5100

cggatggaag ccggtcttgt cgatcaggat gatctggacg aagagcatca ggggctcgcg 5160

ccagccgaac tgttcgccag gctcaaggcg cgcatgcccg acggcgagga tctcgtcgtg 5220

acccatggcg atgcctgctt gccgaatatc atggtggaaa atggccgctt ttctggattc 5280

atcgactgtg gccggctggg tgtggcggac cgctatcagg acatagcgtt ggctacccgt 5340

gatattgctg aagagcttgg cggcgaatgg gctgaccgct tcctcgtgct ttacggtatc 5400

gccgctcccg attcgcagcg catcgccttc tatcgccttc ttgacgagtt cttctaatct 5460

agaggccaga gtggggggcg tgatgcgaaa gctgacccac tctggccgaa ttcgatatca 5520

agcttatcga taatcaacct ctggattaca aaatttgtga aagattgact ggtattctta 5580

actatgttgc tccttttacg ctatgtggat acgctgcttt aatgcctttg tatcatgcta 5640

ttgcttcccg tatggctttc attttctcct ccttgtataa atcctggttg ctgtctcttt 5700

atgaggagtt gtggcccgtt gtcaggcaac gtggcgtggt gtgcactgtg tttgctgacg 5760

caacccccac tggttggggc attgccacca cctgtcagct cctttccggg actttcgctt 5820

tccccctccc tattgccacg gcggaactca tcgccgcctg ccttgcccgc tgctggacag 5880

gggctcggct gttgggcact gacaattccg tggtgttgtc ggggaaatca tcgtcctttc 5940

cttggctgct cgcctgtgtt gccacctgga ttctgcgcgg gacgtccttc tgctacgtcc 6000

cttcggccct caatccagcg gaccttcctt cccgcggcct gctgccggct ctgcggcctc 6060

ttccgcgtct tcgccttcgc cctcagacga gtcggatctc cctttgggcc gcctccccgc 6120

atcgataccg tcgacctcga gacctagaaa aacatggagc aatcacaagt agcaatacag 6180

cagctaccaa tgctgattgt gcctggctag aagcacaaga ggaggaggag gtgggttttc 6240

cagtcacacc tcaggtacct ttaagaccaa tgacttacaa ggcagctgta gatcttagcc 6300

actttttaaa agaaaagggg ggactggaag ggctaattca ctcccaacga agacaagata 6360

tccttgatct gtggatctac cacacacaag gctacttccc tgattggcag aactacacac 6420

cagggccagg gatcagatat ccactgacct ttggatggtg ctacaagcta gtaccagttg 6480

agcaagagaa ggtagaagaa gccaatgaag gagagaacac ccgcttgtta caccctgtga 6540

gcctgcatgg gatggatgac ccggagagag aagtattaga gtggaggttt gacagccgcc 6600

tagcatttca tcacatggcc cgagagctgc atccggactg tactgggtct ctctggttag 6660

accagatctg agcctgggag ctctctggct aactagggaa cccactgctt aagcctcaat 6720

aaagcttgcc ttgagtgctt caagtagtgt gtgcccgtct gttgtgtgac tctggtaact 6780

agagatccct cagacccttt tagtcagtgt ggaaaatctc tagcagggcc cgtttaaacc 6840

cgctgatcag cctcgactgt gccttctagt tgccagccat ctgttgtttg cccctccccc 6900

gtgccttcct tgaccctgga aggtgccact cccactgtcc tttcctaata aaatgaggaa 6960

attgcatcgc attgtctgag taggtgtcat tctattctgg ggggtggggt ggggcaggac 7020

agcaaggggg aggattggga agacaatagc aggcatgctg gggatgcggt gggctctatg 7080

gcttctgagg cggaaagaac cagctggggc tctagggggt atccccacgc gccctgtagc 7140

ggcgcattaa gcgcggcggg tgtggtggtt acgcgcagcg tgaccgctac acttgccagc 7200

gccctagcgc ccgctccttt cgctttcttc ccttcctttc tcgccacgtt cgccggcttt 7260

ccccgtcaag ctctaaatcg ggggctccct ttagggttcc gatttagtgc tttacggcac 7320

ctcgacccca aaaaacttga ttagggtgat ggttcacgta gtgggccatc gccctgatag 7380

acggtttttc gccctttgac gttggagtcc acgttcttta atagtggact cttgttccaa 7440

actggaacaa cactcaaccc tatctcggtc tattcttttg atttataagg gattttgccg 7500

atttcggcct attggttaaa aaatgagctg atttaacaaa aatttaacgc gaattaattc 7560

tgtggaatgt gtgtcagtta gggtgtggaa agtccccagg ctccccagca ggcagaagta 7620

tgcaaagcat gcatctcaat tagtcagcaa ccaggtgtgg aaagtcccca ggctccccag 7680

caggcagaag tatgcaaagc atgcatctca attagtcagc aaccatagtc ccgcccctaa 7740

ctccgcccat cccgccccta actccgccca gttccgccca ttctccgccc catggctgac 7800

taattttttt tatttatgca gaggccgagg ccgcctctgc ctctgagcta ttccagaagt 7860

agtgaggagg cttttttgga ggcctaggct tttgcaaaaa gctcccggga gcttgtatat 7920

ccattttcgg atctgatcag cacgtgttga caattaatca tcggcatagt atatcggcat 7980

agtataatac gacaaggtga ggaactaaac catggccaag ttgaccagtg ccgttccggt 8040

gctcaccgcg cgcgacgtcg ccggagcggt cgagttctgg accgaccggc tcgggttctc 8100

ccgggacttc gtggaggacg acttcgccgg tgtggtccgg gacgacgtga ccctgttcat 8160

cagcgcggtc caggaccagg tggtgccgga caacaccctg gcctgggtgt gggtgcgcgg 8220

cctggacgag ctgtacgccg agtggtcgga ggtcgtgtcc acgaacttcc gggacgcctc 8280

cgggccggcc atgaccgaga tcggcgagca gccgtggggg cgggagttcg ccctgcgcga 8340

cccggccggc aactgcgtgc acttcgtggc cgaggagcag gactgacacg tgctacgaga 8400

tttcgattcc accgccgcct tctatgaaag gttgggcttc ggaatcgttt tccgggacgc 8460

cggctggatg atcctccagc gcggggatct catgctggag ttcttcgccc accccaactt 8520

gtttattgca gcttataatg gttacaaata aagcaatagc atcacaaatt tcacaaataa 8580

agcatttttt tcactgcatt ctagttgtgg tttgtccaaa ctcatcaatg tatcttatca 8640

tgtctgtata ccgtcgacct ctagctagag cttggcgtaa tcatggtcat agctgtttcc 8700

tgtgtgaaat tgttatccgc tcacaattcc acacaacata cgagccggaa gcataaagtg 8760

taaagcctgg ggtgcctaat gagtgagcta actcacatta attgcgttgc gctcactgcc 8820

cgctttccag tcgggaaacc tgtcgtgcca gctgcattaa tgaatcggcc aacgcgcggg 8880

gagaggcggt ttgcgtattg ggcgctcttc cgcttcctcg ctcactgact cgctgcgctc 8940

ggtcgttcgg ctgcggcgag cggtatcagc tcactcaaag gcggtaatac ggttatccac 9000

agaatcaggg gataacgcag gaaagaacat gtgagcaaaa ggccagcaaa aggccaggaa 9060

ccgtaaaaag gccgcgttgc tggcgttttt ccataggctc cgcccccctg acgagcatca 9120

caaaaatcga cgctcaagtc agaggtggcg aaacccgaca ggactataaa gataccaggc 9180

gtttccccct ggaagctccc tcgtgcgctc tcctgttccg accctgccgc ttaccggata 9240

cctgtccgcc tttctccctt cgggaagcgt ggcgctttct catagctcac gctgtaggta 9300

tctcagttcg gtgtaggtcg ttcgctccaa gctgggctgt gtgcacgaac cccccgttca 9360

gcccgaccgc tgcgccttat ccggtaacta tcgtcttgag tccaacccgg taagacacga 9420

cttatcgcca ctggcagcag ccactggtaa caggattagc agagcgaggt atgtaggcgg 9480

tgctacagag ttcttgaagt ggtggcctaa ctacggctac actagaagaa cagtatttgg 9540

tatctgcgct ctgctgaagc cagttacctt cggaaaaaga gttggtagct cttgatccgg 9600

caaacaaacc accgctggta gcggtggttt ttttgtttgc aagcagcaga ttacgcgcag 9660

aaaaaaagga tctcaagaag atcctttgat cttttctacg gggtctgacg ctcagtggaa 9720

cgaaaactca cgttaaggga ttttggtcat gagattatca aaaaggatct tcacctagat 9780

ccttttaaat taaaaatgaa gttttaaatc aatctaaagt atatatgagt aaacttggtc 9840

tgacagttac caatgcttaa tcagtgaggc acctatctca gcgatctgtc tatttcgttc 9900

atccatagtt gcctgactcc ccgtcgtgta gataactacg atacgggagg gcttaccatc 9960

tggccccagt gctgcaatga taccgcgaga cccacgctca ccggctccag atttatcagc 10020

aataaaccag ccagccggaa gggccgagcg cagaagtggt cctgcaactt tatccgcctc 10080

catccagtct attaattgtt gccgggaagc tagagtaagt agttcgccag ttaatagttt 10140

gcgcaacgtt gttgccattg ctacaggcat cgtggtgtca cgctcgtcgt ttggtatggc 10200

ttcattcagc tccggttccc aacgatcaag gcgagttaca tgatccccca tgttgtgcaa 10260

aaaagcggtt agctccttcg gtcctccgat cgttgtcaga agtaagttgg ccgcagtgtt 10320

atcactcatg gttatggcag cactgcataa ttctcttact gtcatgccat ccgtaagatg 10380

cttttctgtg actggtgagt actcaaccaa gtcattctga gaatagtgta tgcggcgacc 10440

gagttgctct tgcccggcgt caatacggga taataccgcg ccacatagca gaactttaaa 10500

agtgctcatc attggaaaac gttcttcggg gcgaaaactc tcaaggatct taccgctgtt 10560

gagatccagt tcgatgtaac ccactcgtgc acccaactga tcttcagcat cttttacttt 10620

caccagcgtt tctgggtgag caaaaacagg aaggcaaaat gccgcaaaaa agggaataag 10680

ggcgacacgg aaatgttgaa tactcatact cttccttttt caatattatt gaagcattta 10740

tcagggttat tgtctcatga gcggatacat atttgaatgt 10780

Claims

1.一种融合RNA，所述融合RNA的序列包括RNA结合蛋白的RNA识别序列以及SEQ IDNO.1所示的RNA序列；RNA结合蛋白的RNA识别序列连接于SEQ ID NO.1所示的RNA序列的3’端。

2.根据权利要求1所述的融合RNA，其特征在于，所述RNA结合蛋白包括L7AE、MS2、TAT。

3. 根据权利要求2所述的融合RNA，其特征在于，所述L7AE的RNA识别序列为SEQ IDNO.5所示的序列。

4.编码权利要求1-3中任一项所述的融合RNA的核酸分子。

5.包含权利要求4所述的核酸分子的载体。

6.一种RNA递送系统，所述RNA递送系统包括权利要求5所述的载体、表达外泌体蛋白和RNA结合蛋白的载体。

7.根据权利要求6所述的RNA递送系统，其特征在于，所述RNA结合蛋白连接于外泌体蛋白的C端。

8.根据权利要求6或7所述的RNA递送系统，其特征在于，所述外泌体蛋白是Lamp2b。

9.根据权利要求6或7所述的RNA递送系统，其特征在于，所述RNA结合蛋白包括L7AE、MS2、TAT。

10.根据权利要求6所述的RNA递送系统，其特征在于，所述表达外泌体蛋白和RNA结合蛋白的载体还表达靶向分子，所述靶向分子识别靶组织或靶细胞。

11.根据权利要求10所述的RNA递送系统，其特征在于，所述靶向分子包括与细胞膜表面抗原相互作用的靶向肽、识别特定细胞表面抗原的抗体或其抗原结合片段、亲合体。

12.根据权利要求6所述的RNA递送系统，其特征在于，所述RNA递送系统还包括促进外泌体生产或分泌的载体。

13.根据权利要求12所述的RNA递送系统，其特征在于，所述载体表达STEAP、syndevan-4和NadB。

14.一种外泌体，所述外泌体包括权利要求1-3中任一项所述的融合RNA。

15.根据权利要求14所述的外泌体，其特征在于，所述外泌体还包括靶向分子，所述靶向分子识别靶组织或靶细胞。

16.根据权利要求15所述的外泌体，其特征在于，所述靶向分子包括靶向肽、抗体或其抗原结合片段、亲合体。

17.权利要求14-16中任一项所述的外泌体的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下任一项：

1）将权利要求1-3中任一项所述的融合RNA、权利要求4所述的核酸分子导入外泌体中；

2）将权利要求6-13中任一项所述的RNA递送系统导入产生外泌体的细胞中；培养所述细胞产生外泌体。

18.一种分离的体细胞，所述分离的体细胞为以下任一项：

1）产生并分泌权利要求14-16中任一项所述的外泌体；

2）导入了权利要求6-13中任一项所述的RNA递送系统。

19.权利要求18所述的分离的体细胞的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：将权利要求6-13中任一项所述的RNA递送系统引入到产生外泌体的体外培养的细胞中。

20.一种药物组合物，所述药物组合物包括权利要求14-16中任一项所述的外泌体、权利要求18所述的分离的体细胞。

21.根据权利要求20所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物还包括药学上可接受的载体或赋形剂。

22.一种应用，其特征在于，所述应用包括以下任一项：

1）权利要求1-3中任一项所述的融合RNA、权利要求4所述的核酸分子在制备装载外源RNA的外泌体中的应用，所述装载为体外装载；

2）权利要求5所述的载体、权利要求6-13中任一项所述的RNA递送系统在制备装载外源RNA的外泌体中的应用，所述装载为体外装载；

3）权利要求18所述的分离的体细胞在制备装载外源RNA的外泌体中的应用，所述装载为体外装载；

4）权利要求1-3中任一项所述的融合RNA、权利要求4所述的核酸分子、权利要求5所述的载体、权利要求6-13中任一项所述的RNA递送系统、权利要求14-16中任一项所述的外泌体或权利要求18所述的分离的体细胞在制备治疗ALS的药物中的应用。