CN114574539B - 一种霹雳果肽及其制备方法与应用 - Google Patents

Abstract

本公开提供了一种霹雳果肽的制备方法，包括霹雳果的前处理(破壳)，霹雳果油脂及蛋白粕粉的分离，浓缩后经中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、纤维素酶的一次酶解，酸性蛋白酶的二次酶解，再经离心、浓缩和喷雾干燥即可得到霹雳果肽粉，最终将其作为配料应用于烘焙食品，具有抑制金黄色葡萄球菌、改善烘焙食品质构的作用。此外，具有降血糖的霹雳果肽应用于烘焙食品中能够降低升糖指数。本公开解决了烘焙食品放置一段时间后质构特性差的痛点，且在新原料开发阶段避免了霹雳果中脂肪对霹雳果蛋白水解的影响，制备所得的肽亦或应用于功能性食品或医药行业。

Description

一种霹雳果肽及其制备方法与应用

技术领域

本公开涉及蛋白深加工的技术领域，尤其涉及一种霹雳果肽及其制备方法与应用。

背景技术

烘焙食品是以面粉、酵母、食盐、糖和水为基本原料，添加适量油脂、乳品、鸡蛋、添加剂等，采用烘焙工艺定型和成熟的一大类方便食品。目前，烘焙食品销售形势主要包括短保类的现烤食品以及密封脱氧的长保类食品。对于长保类烘焙食品，由于产品自身含水量较高，容易滋生腐败菌，这不得迫使添加防腐剂以延长食品保质期，以保证食品质量安全。但消费者在选择商品时往往会关注产品配料表，清洁标签更受消费者喜爱。金黄色葡萄球菌隶属于葡萄球菌属，是革兰氏阳性菌代表，为一种常见的食源性致病微生物，常在腐败变质的面包中检测到金黄色葡萄球菌的存在，故开发一种抑制金黄色葡萄球菌的天然原料很有必要。此外，面包放置过久之后，由于组织结构的变化导致其硬度增加，食用时容易产生干涩感，开发新食品原料以改善这一窘境也是促进烘焙行业发展的重要措施。

霹雳果原产于菲律宾比科尔半岛，如今我国的华东、中南、西南等地也有分布，属于一种高级坚果，由于其富含单不饱和脂肪酸，故具有良好的降低胆固醇的效果。在营养成分方面，霹雳果中除含有大量的脂类物质(约占比75-85％)外，还含有丰富的优质蛋白(约占比10-15％) 以及少量的矿物质、维生素、氨基酸等具有营养价值和功能的成分。然而，市面上的有关霹雳果的加工工艺多是采用炒制和油炸，产品主要以坚果类为主，对其成分并未分离并加以高值化利用。另外，由于国内外有关霹雳果的报道多聚焦于其果壳的吸附作用，关于其重要营养成分如霹雳果蛋白的利用与研究更是屈指可数，仅有少量文献提及到霹雳果肽，但又未公布霹雳果肽的制备方式及应用，究其原因是现今缺少一套可行的提取蛋白及其酶解工艺。

目前，应用于食品加工中的多肽多以不同类型的蛋白酶，例如碱性蛋白酶、酸性蛋白酶、中性蛋白酶、风味蛋白酶中的一种或多种组合，定向裂解富含蛋白的原料，从而获得便于人体吸收、水溶性良好的小分子物质。随着酶解技术的成熟，市场以及消费者不同的需求促使越来越多的生物活性多肽，例如抗菌肽、降胆固醇肽、免疫调节肽、美容肽、降血压肽、降血糖肽等映入眼帘，部分多肽也已作为原料应用于新食品或医药的开发。考虑到霹雳果中含有丰富的蛋白，而目前暂未报道霹雳果肽的提取工艺及其活性研究，为此有必要开发一种适用于霹雳果蛋白提取及其作为原料制备肽的方法。

发明内容

鉴于此，本发明的目的在于提供一种霹雳果肽及其制备方法，通过原料超微粉碎及蛋白酶酶解，得到的霹雳果肽可以改善面包质构及延长保质期。本发明的目的还在于提供一种霹雳果肽在抑制烘焙食品金黄色葡萄球菌生长繁殖及降血糖功能中的应用。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

一种霹雳果肽的制备方法，包括：

破壳：利用破壳机将霹雳果外壳与果仁分离，果仁备用；

烘干：将所述果仁放入烘箱中烘干处理，烘干温度为55-65℃，使其水分含量在3-5％之间；

粉碎：将烘干后的霹雳果仁用超微化粉碎机粉碎，再过80目筛网，得到霹雳果粉；

超临界萃取：首先预热超临界萃取釜设备，使其温度达到45-50℃，倒入所述霹雳果粉后向超临界萃取釜中通入超临界二氧化碳流体，设置设备温度为35-40℃，压力为30-40MPa，二氧化碳流量为52-57L/h，在此条件下萃取1-2h，得到霹雳果油浆，将所述霹雳果油浆导入分离釜(压力8-10MPa)中进行分离，得到霹雳果油与霹雳果粕粉；

盐析：将所述霹雳果粕粉加入15-20倍量的0.1-0.2mol/L的NaCl- 磷酸盐缓冲溶液，55-65℃下浸提2次，每次60-90min，合并3次提取液，得到霹雳果浓缩蛋白溶液；

加热处理：通过浓缩处理使所述霹雳果浓缩蛋白溶液浓度在10-15％之间，在搅拌条件下(300-500r/min)，85-90℃条件下处理45-60min；得到霹雳果蛋白粉；

一次酶解：待体系温度降低至52-55℃时，投放占比所述霹雳果蛋白粉质量的1-1.2％的中性蛋白酶、0.1-0.15％的木瓜蛋白酶、0.1-0.15％的纤维素酶，用0.5mol/L的柠檬酸溶液或冰乙酸溶液控制反应pH在5.8-6.5 之间，搅拌(500-1000r/min)酶解2-3h；

二次酶解：达到反应时间后，用上述酸溶液调节pH为3.5-4.5，加入占比所述霹雳果蛋白粉质量的0.6-1％的酸性蛋白酶，酶解反应2-2.5h；

灭酶、干燥：将酶解液加热至85-90℃并保留15-20min，灭酶结束后降温至50℃开始离心处理(5000r/min)，收集上清液并浓缩至固形物含量在20-25％之间，喷雾干燥，制得霹雳果肽。

本公开首次从霹雳果中分离得到了霹雳果肽，在原料的前处理上，使用超微化处理方式，使得霹雳果油脂分离更彻底，更有利于后续蛋白酶解；另外，在蛋白酶的选择上，先利用中性酶和木瓜蛋白酶进行一次酶解，由于在酶解过程中体系pH会不断降低至某一值，最后用酸性酶进行二次酶解，可以减少调节体系pH的酸的用量。

本公开还提供了一种霹雳果肽，由霹雳果果仁经过粉碎、萃取、盐析、加热、酶解灭酶及干燥制得，所述霹雳果肽的粗蛋白质含量在 81.2-87.7％之间，水分含量在4.4-5.1％之间，肽含量在70.2-80.7％之间，分子量在990-1129Da之间。

本公开还提供了一种霹雳果肽的应用，用于抑制金黄色葡萄球菌。

本公开还提供了一种霹雳果肽的应用，用于降血糖。

附图说明

附图示出了本公开的示例性实施方式，并与其说明一起用于解释本公开的原理，其中包括了这些附图以提供对本公开的进一步理解，并且附图包括在本说明书中并构成本说明书的一部分。

图1为根据一些实施例的面包金黄色葡萄球菌的繁殖情况。

图2为根据一些实施例的喂食面包后小鼠血糖变化曲线。

具体实施方式

下面结合附图和实施方式对本公开作进一步的详细说明。可以理解的是，此处所描述的具体实施方式仅用于解释相关内容，而非对本公开的限定。另外还需要说明的是，为了便于描述，附图中仅示出了与本公开相关的部分。

需要说明的是，在不冲突的情况下，本公开中的实施方式及实施方式中的特征可以相互组合。下面将参考附图并结合实施方式来详细说明本公开。

本公开提供了一种霹雳果肽的制备方法，包括：

破壳：利用破壳机将霹雳果外壳与果仁分离，果仁备用；

烘干：将所述果仁放入烘箱中烘干处理，烘干温度为55-65℃，使其水分含量在3-5％之间；

粉碎：将烘干后的霹雳果仁用超微化粉碎机粉碎，再过80目筛网，得到霹雳果粉；

超临界萃取：首先预热超临界萃取釜设备，使其温度达到45-50℃，倒入所述霹雳果粉后向超临界萃取釜中通入超临界二氧化碳流体，设置设备温度为35-40℃，压力为30-40MPa，二氧化碳流量为52-57L/h，在此条件下萃取1-2h，得到霹雳果油浆，将所述霹雳果油浆导入分离釜(压力8-10MPa)中进行分离，得到霹雳果油与霹雳果粕粉；

盐析：将所述霹雳果粕粉加入15-20倍量的0.1-0.2mol/L的NaCl- 磷酸盐缓冲溶液，55-65℃下浸提2次，每次60-90min，合并3次提取液，得到霹雳果浓缩蛋白溶液；

加热处理：通过浓缩处理使所述霹雳果浓缩蛋白溶液浓度在10-15％之间，在搅拌条件下(300-500r/min)，85-90℃条件下处理45-60min；得到霹雳果蛋白粉；

一次酶解：待体系温度降低至52-55℃时，投放占比所述霹雳果蛋白粉质量的1-1.2％的中性蛋白酶、0.1-0.15％的木瓜蛋白酶、0.1-0.15％的纤维素酶，用0.5mol/L的柠檬酸溶液或冰乙酸溶液控制反应pH在5.8-6.5 之间，搅拌(500-1000r/min)酶解2-3h；

二次酶解：达到反应时间后，用上述酸溶液调节pH为3.5-4.5，加入占比所述霹雳果蛋白粉质量的0.6-1％的酸性蛋白酶，酶解反应2-2.5h；

灭酶、干燥：将酶解液加热至85-90℃并保留15-20min，灭酶结束后降温至50℃开始离心处理(5000r/min)，收集上清液并浓缩至固形物含量在20-25％之间，喷雾干燥，制得霹雳果肽。

实施例1蛋白酶添加量对霹雳果肽质量的影响

(1)破壳：利用破壳机将霹雳果外壳与果仁分离，果仁备用；

(2)烘干：将步骤(1)的果仁进行烘干处理，烘干温度为55-65℃，使其水分含量在3-5％之间；

(3)粉碎、过筛：将烘干后的霹雳果仁用超微化粉碎机粉碎，再过 60目筛网，得到霹雳果粉；

(4)萃取、分离：首先预热超临界萃取釜设备，使其温度达到 45℃-50℃，倒入步骤(3)所获得的霹雳果粉后向超临界萃取釜中通入超临界二氧化碳流体，设置设备温度为35-40℃，压力为30-40MPa，二氧化碳流量为52-57L/h，在此条件下萃取1h，便可获得霹雳果油浆，然后再将霹雳果油浆导入分离釜(压力为8-10MPa)中进行分离，得到霹雳果油与霹雳果粕粉两种样品；

(5)盐析、干燥：将脱脂粕粉加入10-20倍量的0.1mol/L的NaCl 磷酸盐缓冲溶液，55℃下浸提2次，每次60min，合并3次提取液得到霹雳果浓缩蛋白溶液；

(6)加热处理：通过浓缩处理使蛋白溶液浓度在10-15％之间，在搅拌条件下(300-500r/min)，85-90℃条件下处理45min；

(7)一次酶解：待体系温度降低至55℃时，投放占比霹雳果蛋白粉1-1.2％的中性蛋白酶、0.1-0.15％的木瓜蛋白酶、0.1-0.15％的纤维素酶，用0.5mol/L的柠檬酸溶液控制反应pH在5.8-6.5之间，搅拌(500/min) 酶解2h；

(8)二次酶解：达到反应时间后，用上述酸溶液调节pH为3.5，加入占比霹雳果蛋白粉质量的0.6-1％的酸性蛋白酶继续酶解反应2h。

(9)灭酶、干燥：酶解反应结束后将酶解液加热至85℃并保持20 min，灭酶结束后降温至50℃开始离心处理(5000r/min)，收集上清液并浓缩至固形物含量在20-25％，喷雾干燥，制得霹雳果肽成品。

表1蛋白酶类型对霹雳果肽质量的影响

如表1所示，不同酶类型以及添加量对霹雳果肽的酶解效果不同。采用单一的酸性蛋白酶作为酶制剂(即省去一次酶解步骤，直接二次酶解)，其酶解得率最低，而且分子量较高，表明单一的酸性蛋白酶并不能较好的去裂解蛋白质，仍有大量的蛋白质残留在体系中。当在此基础上分别添加中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶与木瓜蛋白酶、纤维素酶时，其得率得到显著的提高。这是因为在蛋白质分离过程中，可能有些许纤维素残留在蛋白质中，阻碍酶制剂与蛋白的接触。此外，随着蛋白酶种类的增加，其可作用于蛋白位点的选择更多，故使得蛋白酶解的更加彻底，因此获得的霹雳果肽分子量较低。但不同酶裂解所得的果肽霹雳果肽均有抑制金黄色葡萄球菌繁殖的能力，且表现出分子量越低，抑制效果越好。

实施例2酶解时间对霹雳果肽质量的影响

(1)破壳：利用破壳机将霹雳果外壳与果仁分离，果仁备用；

(2)烘干：将步骤(1)的果仁进行烘干处理，烘干温度为55-65℃，使其水分含量在3-5％之间；

(3)粉碎、过筛：将烘干后的霹雳果仁用超微化粉碎机粉碎，再过 80目筛网，得到霹雳果粉；

(4)萃取、分离：首先预热超临界萃取釜设备，使其温度达到 38℃-50℃，倒入步骤(3)所获得的霹雳果粉后向超临界萃取釜中通入超临界二氧化碳流体，设置设备温度为35-40℃，压力为30-40MPa，二氧化碳流量为52-57L/h，在此条件下萃取2h，便可获得霹雳果油浆，然后再将霹雳果油浆导入分离釜(压力8-10MPa)中，进行分离，得到霹雳果油与霹雳果粕粉两种样品；

(5)盐析、干燥：将脱脂粕粉加入10-20倍量的0.2mol/L的NaCl- 磷酸盐缓冲溶液，65℃下浸提2次，每次90min，合并3次提取液得到霹雳果浓缩蛋白溶液；

(6)加热处理：通过浓缩处理使蛋白溶液浓度在10-15％之间，在搅拌条件下(300-500r/min)，85-90℃条件下处理50min；

(7)一次酶解：待体系温度降低至55℃时，投放占比霹雳果蛋白粉1.2％的中性蛋白酶、0.15％的木瓜蛋白酶、0.15％的纤维素酶，用0.5 mol/L的柠檬酸溶液控制反应pH在5.8-6.5之间，搅拌(1000r/min)酶解2-3h，

(8)二次酶解：达到反应时间后，用上述酸溶液调节pH为4.5占比霹雳果蛋白粉质量的1％的酸性蛋白酶酶解反应2-2.5h。

(9)灭酶、干燥：反应结束将酶解液加热至90℃并保持15min，灭酶结束后降温至50℃开始离心处理(5000r/min)，收集上清液并浓缩至固形物含量在20-25％，喷雾干燥，制得霹雳果肽成品。

表2酶解时间对霹雳果肽质量的影响

不同酶解时间对霹雳果肽的质量影响如表2所示。结果表明一次酶解与二次酶解时间较长时，其酶解得率最高而且其金黄色葡萄球菌抑制率也是最高值，但可能由于酶解时间较长，酶解较为彻底，生成的氨基酸含量偏高，故其肽含量相比于其他组较低。

实施例3二道酶解pH对霹雳果肽质量的影响

(1)破壳：利用破壳机将霹雳果外壳与果仁分离，果仁备用；

(2)烘干：将步骤(1)的果仁进行烘干处理，烘干温度为55-65℃，使其水分含量在3-5％之间；

(3)粉碎、过筛：将烘干后的霹雳果仁用超微化粉碎机粉碎，再过 100目筛网，得到霹雳果粉；

(4)萃取、分离：首先预热超临界萃取釜设备，使其温度达到 38℃-50℃，倒入步骤(3)所获得的霹雳果粉后向超临界萃取釜中通入超临界二氧化碳流体，设置设备温度为35-40℃，压力为30-40MPa，二氧化碳流量为52-57L/h，在此条件下萃取1-2h，便可获得霹雳果油浆，然后再将霹雳果油浆导入分离釜(压力8-10MPa)中，进行分离，得到霹雳果油与霹雳果粕粉两种样品；

(5)盐析、干燥：将脱脂脱苦粕粉加入10-20倍量的0.2mol/L的 NaCl磷酸盐缓冲溶液，55-65℃下浸提2次，每次80min，合并3次提取液得到霹雳果浓缩蛋白溶液；

(6)加热处理：通过浓缩处理使蛋白溶液浓度在10-15％之间，在搅拌条件下(300-500r/min)，85-90℃条件下处理45min；

(7)一次酶解：待体系温度降低至55℃时，投放占比霹雳果蛋白粉1％的中性蛋白酶、0.15％的木瓜蛋白酶、0.15％的纤维素酶，用0.5mol/L 的冰乙酸溶液控制反应pH在5.8-6.5之间，搅拌(500-1000r/min)酶解 2h，

(8)二次酶解：达到反应时间后，用上述酸溶液调节pH为3.5-4.5，加入占比霹雳果蛋白1％的酸性蛋白酶酶解反应2.5h。

(9)灭酶、干燥：反应结束将酶解液加热至85℃并保持15min，灭酶结束后降温至50℃开始离心处理(5000r/min)，收集上清液并浓缩至固形物含量在15-25％，喷雾干燥，制得霹雳果肽成品。

表3二道酶解体系pH对霹雳果肽质量的影响

通过碱溶酸沉法得到的蛋白原料比较单一(以球蛋白为主)，故提取到的多肽除了最为普遍的抗氧化活性外，基本无其他活性。目前多种具有其他活性的植物肽往往不选用碱性蛋白酶去裂解蛋白质，因此验证酸性蛋白酶在不同pH条件下酶解肽的质量，其结果如表3所示。在pH为 3.5时，霹雳果肽具有最高的金黄色葡萄球菌抑制率。

实施例4霹雳果肽降血糖的活性实验

1)构建高血糖小鼠模型：

将实验小鼠分为2组，分别为霹雳果肽高血糖组、喂水高血糖组，每组10只并对每只实验小鼠进行编号与标记，记录下每只小鼠的血糖数值。随后，依次对霹雳果肽高血糖组及喂水高血糖组的小鼠腹腔注射0.2 mL浓度为18mg/mL的四氧嘧啶溶液，并在7d后测量每只小白鼠的血糖数值。

2)霹雳果肽对小鼠降血糖的作用：

先设计实验动物，以上述的高血糖小鼠模型为基础，在22-25℃的动物房中将20只实验小鼠适应性饲养7d，并测定每只小鼠的血糖值，观察是否造模成功及每一组小鼠的血糖值变化情况。在第7d造模成功后，霹雳果肽组的小白鼠只投喂18mg/mL及每日定量的饲料；喂水组的小白鼠只投喂水及每日定量的饲料。在持续饲喂7d后测量记录每组小鼠的血糖值并比较分析每组小鼠的血糖值变化。

表4小鼠的平均血糖数值情况(p＜0.05)

组别	血糖值(mmol/L)
		霹雳果肽(990Da)高血糖组	12.96±0.013b
喂水高血糖组	16.23±0.002a

霹雳果多肽的降血糖实验结果，如表4所示。结果表明投喂一定量的霹雳果肽具有降低高血糖小鼠血糖的效果。在烘焙食品中，糖类是不可或缺的原料除了赋予烘焙产品一定的风味外，也是酵母在发酵过程中，最直接的能量来源而且在调整面团组织结构和质地，通过焦糖化反应和褐色反应赋予烘焙产品诱人的色泽。然而，大量糖的添加导致食用烘焙食品后体内升糖指数上升，故不适宜糖尿病患者食用。霹雳果肽能够具有降低血糖值的作用，故在功能性食品中可能具有潜在的利用价值。实施例5霹雳果肽在烘焙食品中的应用

表5基础配方

表6实验组配方

1)按照上述表5基础配方，依次称取5份中种面团与主面团所需的物料；

2)将中种面团分成小块加入主面团除黄油以外的所有材料，再分别加入如表6所示的5组实验组配方中的材料，所打成光滑状态后，再加入软化的黄油，继续搅拌至面团出现手套膜。盖上保鲜膜室温下松弛30 min；

3)用电子称将面团按照模具均匀等分，盖保鲜膜松弛20min；

4)将面团整形后依次放入模具中，在38±2℃环境中醒发20min；

5)170℃预热烤箱，随后将醒发后的面团放置于烘箱中，烘烤30min。出炉后马上脱模，冷却后切割。

6)密封包封。

表7面包的质构特性(37℃/7d)

实验组	硬度(g)	胶黏性	咀嚼性/g	弹性	回复性
						1	132.2±5.71	1.32±0.02	103.4±7.54	0.69±0.04	0.21±0.01
2	103.1±5.34	1.13±0.06	156.4±10.22	0.94±0.03	0.35±0.04
						3	96.2±12.22	1.01±0.04	231.3±15.23	1.02±0.05	0.56±0.03
4	106.5±10.31	1.27±0.05	132±11.32	0.72±0.03	0.23±0.05
						5	130.1±6.23	1.30±0.03	104.1±3.21	0.67±0.04	0.22±0.06

测定在37℃放置7天后的面包质构。结果如表7所示，添加霹雳果肽后面包的弹性值增大但其硬度降低，表明霹雳果肽的加入有利于改善面包的质构。

面包在37℃放置30天后感染金黄色葡萄球菌的情况如图1所示。结果表明，霹雳果肽的添加可以抑制金黄色葡萄球菌的生长繁殖。

血糖指数(GI)是衡量碳水化合物对血糖的反应，是判断食品是否适合糖尿病人食用的重要指标。低GI食品能够有助于维持血糖的稳定状态，具有预防糖尿病、抑制肥胖、抗高血压等诸多作用，故对保持身体健康具有重要作用。根据文献(王璇，山东师范大学[D]：2020)可知， GI与血糖值间存在线性关系。从图2可知，测定喂食同等分量的不同组分面包，测定小鼠的血糖变化，食用添加有降血糖作用的霹雳果肽面包并不会造成小鼠血糖在较短时间内快速升高，且能够显著降低血糖峰值的效果。

在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例/方式”、“一些实施例/ 方式”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例/ 方式或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本申请的至少一个实施例/方式或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不必须针对的是相同的实施例/方式或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例/方式或示例中以合适的方式结合。此外，在不相互矛盾的情况下，本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例/方式或示例以及不同实施例/方式或示例的特征进行结合和组合。

此外，在本公开的描述中，“多个”的含义是至少两个，例如两个，三个等，除非另有明确具体的限定。“和/或”仅仅是描述关联对象的关联关系，表示三种关系，例如，A和/或B，表示为：单独存在A，同时存在A和B，单独存在B这三种情况。对于本领域的普通技术人员而言，可以根据具体情况理解上述术语在本公开中的具体含义。

本领域的技术人员应当理解，上述实施方式仅仅是为了清楚地说明本公开，而并非是对本公开的范围进行限定。对于所属领域的技术人员而言，在上述公开的基础上还可以做出其它变化或变型，并且这些变化或变型仍处于本公开的范围内。

Claims (4)

1.一种霹雳果肽的制备方法，其特征在于，包括：

破壳：利用破壳机将霹雳果外壳与果仁分离，果仁备用；

烘干：将所述果仁放入烘箱中烘干处理；烘干温度为55-65℃，使其水分含量在3-5％之间；

粉碎：将烘干后的霹雳果仁用超微化粉碎机粉碎，再过80目筛网，得到霹雳果粉；

超临界萃取：首先预热超临界萃取釜设备，使其温度达到45-50℃，倒入所述霹雳果粉后向超临界萃取釜中通入超临界二氧化碳流体，萃取1-2h，得到霹雳果油浆，将所述霹雳果油浆导入分离釜中进行分离，得到霹雳果油与霹雳果粕粉；所述超临界萃取的参数设置为：设备温度为35-40℃，压力为30-40MPa，二氧化碳流量为52-57L/h；

盐析：将所述霹雳果粕粉加入NaCl-磷酸盐缓冲溶液，浸提，合并提取液，得到霹雳果浓缩蛋白溶液；所述盐析中，将所述霹雳果粕粉加入15-20倍量的0.1-0.2mol/L的NaCl-磷酸盐缓冲溶液，55-65℃下浸提2次，每次60-90min，合并3次提取液，得到霹雳果浓缩蛋白溶液；

加热处理：通过浓缩处理使所述霹雳果浓缩蛋白溶液浓度在10-15％之间，在搅拌条件下，加热；得到霹雳果蛋白粉；加热条件为：85-90℃条件下处理45-60min；

一次酶解：待体系温度降低至52-55℃时，投放中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、纤维素酶，控制反应pH在5.8-6.5之间，搅拌酶解；所述一次酶解中，投放占比所述霹雳果蛋白粉质量的1-1.2％的中性蛋白酶、0.1-0.15％的木瓜蛋白酶、0.1-0.15％的纤维素酶，用0.5mol/L的柠檬酸溶液或冰乙酸溶液控制反应pH在5.8-6.5之间，搅拌酶解2-3h；

二次酶解：达到反应时间后，用酸溶液调节pH为3.5-4.5，加入酸性蛋白酶，酶解；所述二次酶解中，加入占比所述霹雳果蛋白粉质量的0.6-1％的酸性蛋白酶，酶解反应2-2.5h；

灭酶、干燥：将酶解液加热至85-90℃并保留15-20min，灭酶结束后降温至50℃开始离心处理，收集上清液并浓缩至固形物含量在20-25％之间，喷雾干燥，制得霹雳果肽。

2.一种如权利要求1制备方法得到的霹雳果肽，其特征在于，由霹雳果果仁经过粉碎、萃取、盐析、加热、酶解灭酶及干燥制得，所述霹雳果肽的粗蛋白质含量在81.2-87.7％之间，水分含量在4.4-5.1％之间，肽含量在70.2-80.7％之间，分子量在990-1129Da之间。

3.一种如权利要求2所述的霹雳果肽的应用，其特征在于，制备抑制金黄色葡萄球菌的药物中的应用。

4.一种如权利要求2所述的霹雳果肽的应用，其特征在于，制备降血糖的药物中的应用。

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