CN1144579C - 用于增进口腔卫生的组合物 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种用于增进口腔卫生的组合物，它可有效地防治牙周疾病和龋齿，其特征在于它含有一种或多种作为有效成分的组分，该组分选自对胶原酶具有良好抑制作用的乌索脱氧胆酸和鹅胆酸，已知胶原酶是牙龈炎的诱发物。

Description

用于增进口腔卫生的组合物
本发明涉及一种用于增进口腔卫生的组合物，它可有效地防治牙周疾病及预防龋齿。本发明特别涉及一种用于增进口腔卫生的组合物，它可有效地防治牙周疾病和龋齿，其特征在于它含有一种或多种作为有效成分的组分，该组分选自对胶原酶活性具有良好抑制作用的乌索脱氧胆酸和鹅胆酸。
口腔组织中出现的多种口腔疾病是由口腔中存在的大量微生物作用形成的牙斑造成的。它们在临床及病理方面的价值已被广泛研究，并且也已被许多研究人员发现，其中包括Alcxander(Alcxander A.G，J.Periodent，42，21-28，1971)，Ash(Ash，M.M.，J.Periodontol，35，424，1964)等。
唾液是一种特殊的混合物，它含有电解质和其它组分，对于维护口腔健康和消化具有重要作用。唾液中含有各种酶，其中包括金属蛋白酶等某些酶，它们能增强患有牙周疾病的患者的酶活性。因此，唾液酶是防治牙周疾病研究的重要对象。已知与该类唾液酶形成相关的是唾液腺、血清、白细胞、上皮细胞、口腔微生物等。
胶原酶属于金属蛋白酶之一，对于结缔组织的分解具有显著作用，并且它以失活形式存在于健康口腔，而以活化形式存在于牙周疾病患者的口腔中。因此，鉴于胶原酶的灭活对治疗牙周疾病的显著贡献，需要开发具有胶原酶抑制作用的物质。
已知，fel tauri(黄牛的胆囊)和fel ursi(熊的胆囊)是取自药用动物的天然药物，并且公知具有止痛、利胆、镇静、解痉和抗炎作用、治疗慢性肝炎、胸部(thoractic)肿瘤等作用。另外韩国专利公开93-11992和93--11993披露了通过混合fel tauri盐制成的口腔清洁剂，它是将牛胆汁和盐混合，并在高温下加热制成的，牛胆汁中含有甘氨胆酸、牛磺胆酸等以及盐，经加热的该混合物具有抑制牙斑形成和防治牙周疾病的作用。但fel tauri和felursi都取自药用动物的天然药物，还存在某些问题，即它们含有过多组分、用于药品时稳定性差、在贮存条件下该天然原料会自行变性，而且它很难保持恒定的药效。
因此，本发明人通过研究改进了现有技术中存在的上述问题，并且研制出一种能基本消除牙周疾病因从而预防牙周病发作的药物。结果，我们发现了一种含有一种或多种组分的组合物，该组分选自乌索脱氧胆酸和鹅胆酸，它们均是fel ursi的主要成分，它们作为有效成份可有效地抑制胶原酶的活性，胶原酶是引起牙周疾病的物质，该组合物具有改进的贮存稳定性，并且与含fel tauri或fel ursi本身的组合物相比对人类患者具有改进的安全性，从而完成了本发明。
因此，本发明的目的是提供一种用于增进口腔卫生的组合物，它含有一种或多种作为活性成分的组分，该组分选自乌索脱氧胆酸和鹅胆酸。
另外，本发明的另一目的是提供一种用于增进口腔卫生的组合物，它含有一种或多种作为活性成分的组分，该组分选自乌索脱氧胆酸和鹅胆酸，该组合物另外还含有三氯生以提供牙斑形成的优良抑制作用。
以上内容概述了本发明的有关目的。这些目的应被认为仅是对本发明的某些有关特点和应用的说明。通过以不同方式应用本发明公开的内容或者在本发明公开的范围内改进本发明可获得许多其它的有益结果。因此除权利要求书所限定的本发明的内容以外，可参照本发明的公开内容对本发明的其它目的和内容进行更详尽地理解。
本发明涉及一种用于增进口腔卫生的组合物，它含有一种或多种选自乌索脱氧胆酸和鹅胆酸的有效成分以及用于牙膏、漱口剂、香口胶、口腔按摩霜或口腔按摩膏的可接受的载体，其中选自乌索脱氧胆酸和鹅胆酸的一种或多种成分的含量占组合物总重量的0.02-1.0wt％。
在本发明的组合物中，作为有效成分的乌索脱氧胆酸和鹅胆酸可单独使用或以混合物的形式使用。当将乌索脱氧胆酸和鹅胆酸的混合物用于本发明的组合物中时，由于乌索脱氧胆酸和鹅胆酸可相应地替换，因此所述的两组分的混合比非严格限制。乌索脱氧胆酸和鹅胆酸的混合比一般是100∶1至1∶100(重量)。
本发明的组合物中，分别使用或以混合物形式使用的乌索脱氧胆酸和鹅胆酸的含量占组合物总重量的0.02至1.0％(重量)，优选为0.02-0.6％(重量)。当采用的是乌索脱氧胆酸和鹅胆酸的混合物时，混合物的用量应与单独使用相同量的一种成分时所得的效果基本类似。如果有效成分的用量低于0.02％(重量)，该组合物预防牙龈炎的效果就会降低到无法达到所需目的，如果有效成分的用量超过1.00％(重量)，则并非优选，因为所需药效的增加与有效成分含量的增加不成正比。
如需要，本发明的组合物还可含有三氯生，它具有良好的杀菌效果，并且还具有消除牙斑和防治牙周疾病的效果，从而提供抑制牙斑形成和缓解牙龈炎的增效作用。当本发明组合物中包含三氯生时，组合物中含有占组合物总重量的0.01-1.0％(重量)、优选0.02-0.6％(重量)的乌索脱氧胆酸或鹅胆酸，或其混合物，和0.0001％-1.0％(重量)、特别是0.001-0.300％(重量)的三氯生。如果三氯生的加入量低于0.0001％(重量)，则所需的协同作用较弱，如果三氯生的加入量超过1.000％(重量)，则并非优选，因协同作用不会因三氯生的增加而增强。
如需要，根据所制备的组合物种类，本发明的组合物还可包含一种或多种适用的物质，它们选自：氟化物如氟化钠、氟磷酸钠、氟化胺、氟化锡等、蓄盐(bamboo salt)、洗必泰、凝血酸、尿囊素、己酸、酶和草药提取物如黄檗皮、桔梗根、荆芥全草、枙子果实、甘草根、地榆根等作为辅助有效成分。特别优选将辅助有效成分蓄盐、黄檗皮提取物、桔梗根提取物、荆芥全草提取物和氟化物按一定比例结合使用。即蓄盐的用量占组合物总重量的1.0-5.0％(重量)，三种草药提取物的总重量可为0.01-5.0％(重量)，氟化物的用量为本技术领域中的常规适用量，特别是0.1-1.0％(重量)。如果辅助有效成分的用量低于优选用量，则难于达到所需效果，而如果辅助有效成分的用量超过优选用量，则不利于最终产品如牙膏的性状。
本发明的用于增强口腔卫生的组合物可被制成牙膏、漱口剂、香口胶、口腔按摩霜等，根据应用的目的，所采用的常规添加剂包括磨料、润湿剂、粘合剂、发泡剂、甜味剂、防腐剂、药用成分、香精、酸性调节剂、增白剂等。
当本发明的组合物制备成牙膏形式时，该牙膏组合物除包含上述的有效成分外，还包含牙膏制备中常用的添加剂，例如，磨料、润湿剂、粘合剂、发泡剂、甜味剂、香精、酸性调节剂、增白剂等。
用作磨料的一种或多种物质选自磷酸氢钙、硅石沉淀物、碳酸钙、水合氧化铝、高岭土和碳酸氢钠(NaHCO3)，用量为组合物总重量的20-60％(重量)。
用作润湿剂的一种或多种物质选自甘油、山梨醇、非晶性山梨醇溶液、丙二醇、聚乙二醇和木糖醇，用量为组合物总重量的20-60％(重量)。甘油或非晶性山梨醇溶液和丙二醇或聚乙二醇混合物的混合比优选为10∶1至1∶1，用量为组合物总重量的20-50％(重量)。
用作粘合剂的一种或多种物质选自角叉菜胶、呫吨胶、羧甲基纤维素钠、羧基乙烯聚合物、藻酸钠、蜂胶和Laponite，其用量占组合物总重量的0.1-3.0％(重量)，优选0.5-2.0％(重量)。
用作发泡剂的一种或多种物质选自阴离子表面活性剂如十二烷基硫酸钠、十二烷基肌氨酸钠等，以及脂肪酸山梨醇酯，聚氧乙烯氢化蓖麻油和聚氧乙烯-聚氧丙烯缩聚物，用量为占组合物总重量的0.5-5.0％(重量)，优选为0.5-3.5％(重量)。
另外，作为甜味剂的一种或多种物质选自糖精钠、甜味素和甘草甜素，用量为占组合物总重量的0.05-0.5％(重量)，一种或多种防腐剂选自对羟基苯甲酸酯和苯甲酸钠。
用作香精的薄荷精油、留兰香精油、薄荷脑、碳油(carbon)等均按适用的比例混合。优选将适量的茴香油按某一混合比加入上述香精混合物。用作酸性调节剂的一种或多种物质选自磷酸、磷酸钠、柠檬酸、柠檬酸钠、琥珀酸、琥珀酸钠、酒石酸和酒石酸钠，用于将PH值调节至5-8。另外，用作增白剂的氧化钛的用量为组合物总重量0.1-2.0％(重量)。
当本发明的组合物制成漱口剂形式时，按以下方法制备。
漱口剂组合物一般由醇部分和纯水部分构成。即每种组分均溶于对其能良好溶解的部分，然后将所得的两部分混合制备成漱口剂组合物。在此，乙醇用于使漱口剂具有清新口感并溶解那些微溶于水的香精和防腐剂。虽然香精的挥发与乙醇的含量成正比，但由于过量的乙醇会造成苦味并会刺激口腔粘膜，因此乙醇的用量一般占组合物总重量的1.0-30.0％(重量)，优选2.0至20％(重量)。
主要用于制备漱口剂组合物的组分包括增溶剂、润湿剂、香精、甜味剂、防腐剂等，还包括药用成分如杀菌剂、酶、抗血浆酶剂等。
可应用的杀菌剂包括抗菌剂，阳离子表面活性剂和季铵盐化合物。但由于抗菌剂会引起过敏和导致微生物的抗药性，在使用时应作仔细的预先检验。用作酶的一种或多种物质选自糊精酶，它是牙斑的主要成分；葡糖淀粉酶，它可分解口腔中食物残渣中的淀粉和其它附着的多糖物质；α-淀粉酶；β-淀粉酶，葡萄糖氧化酶，它可使葡萄糖氧化(葡萄糖可造成龋齿，其机理是：葡萄糖被口腔中的微生物无氧分解成有机酸，它会腐蚀牙面)产生过氧化氢，溶菌酶，它通过直接作用破坏细胞壁以产生杀菌活性，酶的用量是0.1-100000单位/克组合物。采用抗血浆酶剂用于抑制牙龈炎和出血，预防牙周疾病。为止，选自凝血酸、氨基己酸等的一种或多种物质的用量为组合物总重量的0.05-0.30％(重量)。
作为使香精在水中增溶的增溶剂的一种或多种物质选自阴离子表面活性剂如十二烷基硫酸钠，十二烷基肌氨酸钠等，脂肪酸山梨醇酯，聚氧乙烯氢化蓖麻油，聚氧乙烯-聚氧丙烯缩聚物、高级烷基乙酸酯和脂肪酸山梨醇酯的聚氧乙烯衍生物，优选的一种或多种物质选自十二烷基硫酸钠、聚氧乙烯氢化蓖麻油和聚氧乙烯-聚氧丙烯缩聚物，其用量为组合物总重量的0.1-3.0％(重量)，优选为0.5-3.0％(重量)。
使用润湿剂使产品具有稳定性、甜味和一定粘性。可用于此目的的润湿剂可列举甘油、山梨醇溶液、非晶性山梨醇溶液、丙二醇、聚乙二醇和木糖醇，优选甘油、非晶性山梨醇溶液和木糖醇。润湿剂的用量一般占组合物总重量的2.0-40.0％(重量)，优选用量为3.0-20.0％(重量)。
另外，可采用改进使用口感的香精和甜味剂。用作香精的薄荷油、留兰香精油、L-薄荷脑、桉叶油或水杨酸甲酯，其用量为0.1-1.0％(重量)；并采用乳糖、山梨醇、甜味素、糖精钠等为甜味剂。特别是糖精钠的用量一般占组合物总重量的0.001-0.1％(重量)。
用作防腐剂的一种或多种物质选自苯甲酸、苯甲酸钠、对羟基苯甲酸酯、甲酚和福尔马林，其用量占组合物总重量的0.05-0.15％(重量)。优选采用苯甲酸、苯甲酸钠、对羟基苯甲酸甲酯或丙酯作为防腐剂。
另外，本发明的漱口剂组合物还可包含缓冲剂、着色剂、氟化钠等。其中用于调节该漱口剂组合物酸性的缓冲剂是选自磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸钠、柠檬酸、柠檬酸钠、琥珀酸、琥珀酸钠、酒石酸和酒石酸钠的一种或多种物质。优选采用选自磷酸二氢钠和磷酸钠的一种或多种物质。着色剂用于提高商品的价值，并适于该漱口剂组合物的使用目的。为此可采用适用的食用着色剂。一般采用氯化钠减轻牙龈炎和产生抗菌活性，其用量为组合物总重量的3-35％(重量)。
将通过以下实施例和实验更详尽地来说明本发明。但应注意，这些有助于清楚理解本发明及本发明技术范围的实施例对本发明不是限定性的。
实施例1-6和对比实施例1-4
本发明中实施例1-6的牙膏组合物和对比实施例1-4的牙膏组合物是按下表1的配比制备的。具体地说是应将粉状组分包括羧甲基纤维素钠、糖精钠、对羟基苯甲酸酯等分散于作为润湿剂组分的山梨醇溶液和甘油中，并将所得的分散液用纯水稀释，并在搅拌器中初步混合。向该混合物中加入磨料和药用成分。最后加入发泡剂烷基硫酸钠、稳定剂和香精，并在真空条件下混合制备目的牙膏组合物。
表    1
  组  分 实施例1 实施例2 实施例3 实施例4 实施例5 实施例6 对比实施例1 对比实施例2 对比实施例3 对比实施例4
磷酸氢钙 40.00 40.00 20.00 - - 40.00 40.00 40.00 40.00 -
碳酸钙 - - 20.00 - 38.00 - - - - 38.00
硅石沉淀粉 - - - 20.00 - - - - - -
山梨醇 25.00 25.00 25.00 40.00 25.00 - 30.00 30.00 - -
甘油 - - - - - 25.00 - - 25.00 25.00
十二烷基硫酸钠 1.50 1.50 1.50 1.50 1.50 1.50 1.50 1.50 1.50 1.50
糖精钠 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10
对羟基苯甲酸酯 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10
羧甲基纤维素钠 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 - 1.00 1.00 - 1.00
角叉菜胶 - - - - - 0.90 - - 0.90 -
乌索脱氧胆酸 0.02 0.20 0.60 1.00 0.10 0.02 0.01 2.00 - -
鹅胆酸 - - - - 0.10 - - - - -
蓄盐 - - - - - 3.00 - - 3.00 -
氟磷酸二钠 0.76 0.76 0.76 0.76 0.76 0.76 0.76 0.76 0.76 -
黄檗皮提取物 - - - - - 0.10 - - 0.10 -
桔梗根提取物 - - - - - 0.10 - - 0.10 -
荆芥全草提取物 - - - - - 0.10 - - 0.10 -
纯水加至 100.0 100.0 100.0 100.0 100.0 100.0 100.0 100.0 100.0 100.0
注：单位＝重量％(wt％)
实施例7-12和对比实施例5-8
本发明实施例7-12的漱口剂组合物和对比实施例5-8的漱口剂组合物是根据下表2的配比经常规方法制备的。具体地说是将能溶于乙醇的组分完全溶解在乙醇溶剂中，然后加入香精。将混合物充分搅拌，然后加入预先制备好的纯水部分(将润湿剂和其它组分溶于纯水中制得的溶液)，经搅拌得到初始溶液，然后将所得溶液过滤，得到所需的漱口剂组合物。
表    2
  组分 实施例7 实施例8 实施例9 实施例10 实施例11 实施例12 对比实施例5 对比实施例6 对比实施例7 对比实施例8
乙醇(90％) 10.00 10.00 10.00 - - 10.00 10.00 10.00 10.00 -
甘油 10.00 - 10.00 - - - - - - 38.00
山梨醇溶液 - 15.00 - 15.00 - - - - - -
木糖醇 - - - - 10.00 10.00 - - - -
十二烷基硫酸钠 1.20 1.20 1.20 1.20 - 1.20 1.20 1.20 - -
聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物(poloxamer407) - - - - 1.20 - - - 1.20 -
糖精钠 0.50 0.50 0.50 0.50 0.50 0.50 0.50 0.50 0.50 0.50
对羟基苯甲酸酯 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10
乌索脱氧胆酸 0.02 0.20 0.60 1.00 0.10 0.02 0.01 2.00 - -
鹅胆酸 - - - - 0.10 - - - - -
蓄盐 - - - - - 3.00 - - 3.00 -
氟磷酸二钠 0.76 0.76 0.76 0.76 0.76 0.76 0.76 0.76 0.76 -
黄檗皮提取物 - - - - - 0.10 - - 0.10 -
桔梗根提取物 - - - - - 0.10 - - 0.10 -
荆芥全草提取物 - - - - - 0.10 - - 0.10 -
香精 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.O0
纯水加至 100.0 100.0 100.0 100.0 100.0 100.0 100.0 100.0 100.0 100.0
注：单位＝重量％(wt％)
实施例13-19和对比实施例9-11
本发明实施例13-19的牙膏和对比实施例9-11的牙膏是根据下表3的配比制备的。具体地说是将粉状组分包括羧甲基纤维素钠、糖精钠、防腐剂对羟基苯甲酸酯等分散于作为润湿剂组分的山梨醇溶液和甘油中，并将所得的分散液用纯水稀释，并在搅拌机中初步混合。向该混合物中加入磨料和药用成分。最后加入作为发泡剂的烷基硫酸钠、稳定剂和香精，并在真空条件下混合制备所需的牙膏组合物。
表  3
  组  分 实施例13 实施例14 实施例15 实施例16 实施例17 实施例18 实施实例19 对比实施例9 对比实施例10 对比实施例11
磷酸氢钙 40.00 40.00 20.00 - - 40.00 40.00 40.00 40.00 -
碳酸钙 - - 20.00 - 38.00 - - - - 38.00
硅石沉淀粉 - - - 20.00 - - - - - -
山梨醇 25.00 25.00 25.00 40.00 25.00 - 30.00 30.00 - -
甘油 - - - - - 25.00 - - 25.00 25.00
十二烷基硫酸钠 1.50 1.50 1.50 1.50 1.50 1.50 1.50 1.50 1.50 1.50
糖精钠 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10
对羟基苯甲酸酯 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10 0.10
羧甲基纤维素钠 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 - 1.00 1.00 1.00 1.00
角叉菜胶 - - - - - 0.90 - - 0.90 -
乌索脱氧胆酸 0.01 0.02 0.02 0.20 0.20 0.01 0.10 0.001 - 1.50
鹅胆酸 - - - - - 0.01 - - - -
三氯生 0.0001 0.0001 0.0100 0.1000 0.3000 0.0001 1.0000 0.0001 0.0300 1.5000
氟磷酸二钠 0.76 0.76 0.76 0.76 0.76 0.76 0.76 0.76 0.76 0.76
纯水加至 100.0 100.0 100.0 100.0 100.0 100.0 100.0 100.0 100.0 100.0
注：单位＝重量％(wt％)
实施例20：香口胶
胶基                                  25.00％
山梨醇                                44.00％
甘露醇                                12.00％
甘油                                  13.00％
卵磷酯                                0.50％
甜味素                                2.00％
乌索脱氧胆酸                          0.02％
香精                                  1.00％
实施例21：口腔按摩霜(膏)
单月桂酸甘油酯                        3.00％
油醇                                  5.00％
聚乙二醇                              15.00％
白凡士林                              3.00％
N-十六烷基谷氨酸单钠盐                0.50％
羟乙基纤维素                          5.00％
乙酸生育酚酯                          0.10％
乌索脱氧胆酸                          0.20％
甜味素                                0.20％
香精                                  0.30％
纯水加至                              100.00％
上述实施例20的香口胶和实施例21的口腔按摩霜都表现出可减轻牙龈炎的良好效果。
实施1
通过以下方法来测试和比较本发明的用于增进口腔卫生的组合物的各种有效成分对胶原酶活性的抑制作用，其中有效成分包括乌索脱氧胆酸和鹅胆酸。
1)被测物质
乌索脱氧胆酸、鹅胆酸、fel tauri盐、蓄盐、普通盐、Machili皮、黄檗皮、桔梗根、荆芥全草、甘草根、独活根Chamomillae花、Myrrha、普洱茶、蒲公英根及全草、金银花、升麻根茎。
2)测试方法
①将100μl 2％的azocol溶液加入试管中，然后加入190μl缓冲溶液(0.05 M Tris-HCl，1m McaCl2，pH7.8)。
②在以上制得的溶液中加入下列浓度的各种被测物质：—加入乌索脱氧胆酸(10％乙醇溶液)或鹅胆酸(10％乙醇溶液)，其最终浓度为0.02％；
将fel tauri盐、蓄盐或普通盐溶于上述缓冲溶液，其最终浓度为2.0％。
—加入Machili皮、黄檗皮、桔梗根、荆芥全草、甘草根、独活根、Chamomillae花、Myrha、普洱茶、蒲公英根及全草、金银花或升麻根茎的30％乙醇提取物，使其最终浓度为0.1％。
③加入100μl浓度为100ppm的胶原酶，然后将该混合物在37℃的培养箱中保存18小时。(分别由10、100、200μl的胶原酶作标准活性曲线。)
④将试管离心5分钟。
⑤将上清液从试管中分离出来并加到细胞中。采用分光光度计测定540nm处的吸收度，然后由标准活性曲线测定出被测组的活性。
3)结果
表4  被测物质对胶原酶活性的抑制作用
  项  目     吸收度(540nm) 对酶活性的抑制(％)   备注
空白试验     0.003 不含胶原酶
对比组     0.323     0.00 含胶原酶
乌索脱氧胆酸     0.243     45.64
鹅胆酸     0.260     39.23
Fel tauri盐     0.330     -6.15
蓄盐     0.320     1.98
普通盐     0.330     -6.15
Maohili皮提取物     0.298     17.74   含胶原酶，30％的乙醇提取物
黄檗皮提取物     0.315     5.80
桔梗根提取物     0.325     -2.01
荆芥全草提取物     0.320     1.98
甘草根提取物     0.325     -2.01
独活根提取物     0.325     -2.01
Chamomillae花提取物     0.328     -4.48
Myrrha提取物     0.310     9.48
普洱茶提取物     0.305     13.02
蒲公英根及全草提取物     0.300     1.98
金银花提取物     0.328     -4.48
升麻根茎提取物     0.330     -6.15
表5  有关含量和混合比的乌索脱氧胆酸和鹅胆酸对胶为酶的抑制作用。
乌索脱氧胆酸含量(％)  鹅胆酸含量(％)    吸收度(540mm) 对酶活性的抑制(％)
    0.001     -     0.326     -2.82
    0.010     -     0.305     13.02
    0.020     -     0.243     45.64
    0.050     -     0.215     57.54
    0.100     -     0.166     71.26
    0.150     -     0.050     88.60
    0.200     -     0.005     92.03
    0.600     -     0.002     92.22
    1.000     -     0.000     92.34
    2.000     -     0.000     92.34
    -     0.001     0.324     -1.20
    -     0.010     0.315     6.55
    -     0.020     0.260     39.23
    -     0.050     0.230     52.15
    -     0.100     0.180     67.87
    -     0.150     0.052     88.41
    -     0.200     0.007     91.91
    -     0.600     0.002     92.22
    -     1.000     0.002     92.22
    -     2.000     0.002     92.22
    0.005     0.005     0.310     9.48
    0.025     0.025     0.220     55.81
    0.050     0.050     0.180     67.87
    0.100     0.100     0.005     92.03
    0.500     0.500     0.002     92.22
从以上表4和表5可以看出，与其它草药提取物相比，乌索脱氧胆酸和鹅胆酸对胶原酶表现出更强的抑制作用。该作用由浓度为0.01％开始，并在浓度为0.6％时达到最大。但在浓度超过0.6％后，该作用不再有显著增长。另外，当使用乌索脱氧胆酸和鹅胆酸混合物时，由总含量混合物所得的效果与单独使用相同含量的每种有效成分所得的效果相似。
实验2
通过以下方法来测试和比较本发明的用于增进口腔卫生的组合物中的有效成分对牙斑形成的影响，其中有效成分包括乌索脱氧胆酸、鹅胆酸和三氯生。
1)被测物质
乌索脱氧胆酸、鹅胆酸、三氯生。
2)测试方法
①在脑-心浸液琼脂培养基中培养被测的Strep-tococcusmutans 10449，C型菌株，然后将所培养的菌株接种在THB(Todd Hewit肉汤)上，并在37℃下培养15小时。
②将小玻璃棒灭菌并称重。
③将玻璃棒插入被测试管中，试管中的基质中含有蔗糖。在试管中加入给定浓度的被测物质，然后加入测试用微生物菌株。将该试管在37℃下培养24小时。
④培养结束后，将玻璃棒小心地从试管中取出，并在37℃下干燥一天。测定玻璃棒的最终重量。除其中不加被测物质外，按照与测试组相同的方法处理对比组。
⑤由测定结果，根据以下等式计算牙斑形成的百分比：
3)结果
表6
 乌索脱氧胆酸   鹅胆酸     三氯生    牙斑形成(％)     pH
  1     0.100     -     -     100.0     4.2
  2     -     0.100     -     100.0     4.2
  3     -     -     0.0010     100.0     4.3
  4     -     -     0.0050     100.0     4.3
  5     -     -     0.0100     100.0     4.3
  6     -     -     0.0300     50.0     4.5
  7     -     -     0.0500     0.0     7.5
  8     0.002     -     0.0001     100.0     4.5
  9     0.010     -     0.0001     80.0     5.2
  10     0.020     -     0.0001     0.0     6.8
  11     -     0.002     0.0001     100.0     4.5
  12     -     0.010     0.001     80.0     5.1
  13     -     0.020     0.0001     0.0     6.8
  14     0.010     0.010     0.0001     0.0     6.8
由上表6所示的结果可以看出，乌索脱氧胆酸和/或鹅胆酸按一定比例与三氯生混合时，该混合物对牙斑形成具有更强的抑制作用。
实验3
按照以下方法采用表1中的实施例1-6和对比实施例1-4的牙膏组合物测定对牙斑形成和牙龈炎的抑制作用。结果见下表7和8。
1)测试方法
①按口腔医学检测的说明来选择出测试对象。
②将测试对象分组，实施例和对比实施例的每种组合物组包括10名测试对象，然后教授正确的刷牙方法。被测对象经口腔医学检测测定出牙斑指数(由Turesky改进的Quigley-Hein指数)和牙龈炎指数(Gingival Blecding指数，Loe-Silness指数)。
③测试前，所有测试对象均经刮牙处理。
④使用两周安慰牙膏(磷酸氢钙40％、甘油25％、十二烷基硫酸钠1.5％、糖精钠0.1％、对羟基苯甲酸酯0.1％、羧甲基纤维素钠1％、纯水加至100％)，然后再经口腔医学检测测出牙斑指数和牙龈炎指数作为初始值。
⑤测试对象按日常方法每日三次使用实施例和对比实施例的牙膏刷牙4周。在第2周和第4周对经口腔医学检测测出牙斑指数和牙龈炎指数。
⑥将4周后得到的值与初始值比较，并采用T检验法检验统计学的显著性。
表7  牙斑数值
测试牙膏   初始指数   2周后指数   4周后指数   改进指数
实施例1  1.50±0.32  1.30±0.27  1.07±0.34  0.43±0.28
实施例2  1.54±0.21  1.30±0.25  1.12±0.20  0.42±0.22
实施例3  1.54±0.19  1.27±0.31  1.08±0.28  0.46±0.28
实施例4  1.47±0.32  1.24±0.32  0.98±0.30  0.49±0.29
实施例5  1.54±0.35  1.17±0.32  1.10±0.26  0.44±0.32
实施例6  1.52±0.26  1.08±0.19  0.75±0.10  0.77±0.13
对比实施例1  1.53±0.28  1.23±0.26  1.13±0.32  0.40±0.32
对比实施例2  1.52±0.31  1.19±0.32  0.96±0.17  0.48±0.32
对比实施例3  1.53±0.26  1.10±0.19  0.81±0.10  0.72±0.13
对比实施例4  1.53±0.32  1.37±0.32  1.29±0.28  0.24±0.35
表8  牙龈炎指数评分
测试牙膏   初始指数   2周后指数   4周后指数   改进指数
实施例1  1.21±0.32  1.05±0.38  0.86±0.35  0.35±0.18
实施例2  1.23±0.24  0.95±0.27  0.76±0.24  0.47±0.17
实施例3  1.23±0.27  0.89±0.19  0.63±0.18  0.60±0.17
实施例4  1.22±0.23  0.84±0.16  0.57±0.12  0.65±0.12
实施例5  1.24±0.18  0.96±0.30  0.78±0.25  0.42±0.23
实施例6  1.19±0.21  0.60±0.20  0.34±0.12  0.85±0.09
对比实施例1  1.23±0.23  1.15±0.19  1.01±0.15  0.22±0.32
对比实施例2  1.18±0.33  0.83±0.21  0.55±0.18  0.63±0.32
对比实施例3  1.20±0.18  0.84±0.19  0.48±0.10  0.72±0.13
对比实施例4  1.19±0.31  1.12±0.32  1.08±0.48  0.11±0.32
由上表7可以看出，使用实施例1-6和对比实施例1-4的牙膏4周后的牙斑指数显著性检验结果表明：使用实施例1-6和对比实施例1-3的组合物与使用前相比，具有显著的抑制牙斑形成的作用。但实施例1-5和对比实施例1-2的组合物的作用彼此间并无显著差别，而实施例6和对比实施例3与实施例1-5和对比实施例1-2的组合物的作用相比表现出显著差别。另外，实施例6的组合物与对比实施例3的组合物相比，在作用方面未表现出显著差别。因此认为乌索脱氧胆酸和/或鹅胆酸对牙斑形成没有显著作用。因此说明乌索脱氧胆酸和/或鹅胆酸与其它草药提取物结合使用未表现出任何协同作用和拮抗作用。
同时，由上表8说明，使用实施例1-6和对比实施例1-4的牙膏4周后的牙斑指数显著性检验结果表明使用实施例1-6和对比实施例2-3的组合物与使用前相比，具有减轻牙龈炎的显著作用，而且实施例6的组合物与对比实施例3的组合物相比具有更好的减轻牙龄炎的作用。另外，还表明：与不含乌索脱氧胆酸的对比实施例4的组合物相比，乌索脱氧胆酸在浓度为0.01％(重量)时开始表现出减轻牙龈炎的作用；在浓度为0.02％(重量)或更高时，表现出显著作用；当浓度超过1.0％(重量)(对比实施例2)，作用的增强不再与浓度增高成正比关系。因此认为乌索脱氧胆酸和/或鹅胆酸具有减轻牙龈炎的良好效果。为此，发现当乌索脱氧胆酸和/或鹅胆酸与蓄盐、草药提取物结合使用时，其使用浓度为0.02-1.00％(重量)、优选0.02-0.6％(重量)时，表现出减轻牙龈炎的协同作用。
实验4
按照与实施例3相同的方法测试采用表2中所述的实施例7-12和对比实施例5-8的漱口剂组合物对牙斑形成的抑制作用。结果见下表9和10。
表9  牙斑指数评分
测试漱口剂组合物   初始指数   2周后指数   4周后指数  改进指数
实施例7  1.30±0.25  1.12±0.23  0.95±0.24  0.35±0.24
实施例8  1.31±0.21  1.08±0.26  0.89±0.20  0.42±0.22
实施例9  1.30±0.19  1.07±0.21  0.85±0.28  0.45±0.18
实施例10  1.30±0.22  1.05±0.22  0.82±0.30  0.48±0.29
实施例11  1.32±0.25  1.10±0.22  0.92±0.26  0.40±0.25
实施例12  1.30±0.16  0.95±0.15  0.59±0.10  0.71±0.13
对比实施例5  1.29±0.28  1.13±0.26  0.99±0.22  0.30±0.22
对比实施例6  1.32±0.11  1.19±0.12  0.84±0.12  0.48±0.12
对比实施例7  1.31±0.21  1.00±0.19  0.73±0.18  0.58±0.13
对比实施例8  1.33±0.27  1.25±0.22  1.17±0.21  0.16±0.20
表10  牙龈炎指数评分
测试漱口剂组合物   初始指数   2周后指数   4周后指数   改进指数
实施例7  1.05±0.32  0.87±0.25  0.72±0.22  0.33±0.23
实施例8  1.13±0.28  0.91±0.23  0.69±0.20  0.44±0.19
实施例9  1.10±0.20  0.82±0.16  0.50±0.28  0.60±0.23
实施例10  1.02±0.23  0.76±0.16  0.37±0.12  0.65±0.18
实施例11  1.24±0.26  0.96±0.22  0.79±0.29  0.45±0.23
实施例12  1.19±0.18  0.65±0.15  0.41±0.10  0.78±0.19
对比实施例5  1.20±0.21  1.11±0.19  0.99±0.15  0.21±0.23
对比实施例6  1.02±0.31  0.63±0.31  0.34±0.19  0.68±0.22
对比实施例7  1.00±0.27  0.74±0.19  0.37±0.14  0.6 3±0.23
对比实施例8  1.10±0.21  1.05±0.22  0.99±0.38  0.11±0.31
从上表9和10可以看出，使用实施例7-12和对比实施例5-8的漱口剂组合物4周后的牙斑指数显著性检验结果与使用牙膏组合物所得的结果相同。因此仍认为漱口剂组合物中的乌索脱氧胆酸和/或鹅胆酸对牙斑形成没有显著作用，但表现出减轻牙龈炎的良好效果。为此乌索脱氧胆酸和/或鹅胆酸的使用浓度为0.02-1.00％(重量)，优选为0.02-0.6％(重量)。另外，发现当乌索脱氧胆酸和/或鹅胆酸与蓄盐、草药提取物等结合使用时，表现出减轻牙龈炎的协同作用。
实验5
按照与实验3相同的方法测试采用表3中所述的实施例13-19和对比实施例9-11的牙膏组合物对牙斑形成和牙龈炎的抑制作用。结果见下表11和12。
表11  牙斑指数评分
测试牙膏   初始指数   2周后指数   4周后指数   改进指数
实施例13  1.72±0.22  1.55±0.27  1.39±0.24  0.3 3±0.28
实施例14  1.73±0.19  1.47±0.15  1.26±0.20  0.47±0.17
实施例15  1.72±0.19  1.40±0.18  1.21±0.18  0.51±0.28
实施例16  1.72±0.26  1.35±0.25  1.11±0.20  0.61±0.29
实施例17  1.73±0.15  1.21±0.12  0.91±0.11  0.82±0.14
实施例18  1.74±0.26  1.50±0.19  1.30±0.15  0.44±0.13
实施例19  1.72±0.18  1.18±0.16  0.85±0.15  0.87±0.15
对比实施例9  1.72±0.18  1.60±0.17  1.51±0.17  0.21±0.22
对比实施例10  1.73±0.26  1.30±0.19  1.09±0.19  0.64±0.13
对比实施例11  1.74±0.22  1.18±0.12  0.85±0.21  0.89±0.15
表12  牙龈炎指数评分
测试牙膏   初始指数   2周后指数   4周后指数   改进指数
实施例13  1.32±0.22  1.13±0.28  0.95±0.25  0.37±0.24
实施例14  1.32±0.24  1.02±0.25  0.79±0.24  0.53±0.17
实施例15  1.33±0.30  0.96±0.29  0.70±0.18  0.63±0.19
实施例16  1.31±0.25  0.95±0.26  0.62±0.22  0.69±0.17
实施例17  1.32±0.25  0.96±0.30  0.52±0.25  0.80±0.21
实施例18  1.31±0.24  1.00±0.26  0.81±0.23  0.50±0.19
实施例19  1.33±0.21  0.86±0.19  0.47±0.25  0.86±0.22
对比实施例9  1.31±0.33  1.23±0.21  1.14±0.28  0.19±0.23
对比实施例10  1.31±0.28  0.99±0.29  0.67±0.23  0.64±0.21
对比实施例11  1.31±0.30  0.86±0.25  0.43±0.28  0.88±0.22
由上表11可以看出，使用实施例13-19和对比实施例9-11的牙膏4周后的牙斑指数显著性检验结果表明：使用实施例13-19和对比实施例9-11的组合物与使用前相比，具有显著的抑制牙斑形成的作用。另外，含有0.01-1.00％(重量)乌索脱氧胆酸和/或鹅胆酸以及0.0001-1.000％(重量)三氯生混合物的牙膏表现出更好的抑制牙斑形成的作用。特别是由实施例17和对比实施例10可以看出，含有按一定比例混合的三氯生和乌索脱氧胆酸混合物的牙膏比只含三氯生的牙膏表现出更好的抑制牙斑形成的作用。
同时，由上表12中所述的使用实施例13-19和对比实施例9-11的牙膏4周后的牙龈炎指数显著性检测结果表明：使用实施例13-19和对比实施例9-11的组合物与使用前相比，具有显著的减轻牙龈炎的使用。另外，含有0.01-1.00％(重量)乌索脱氧胆酸和/或鹅胆酸以及0.0001-1.000％(重量)三氯生的牙膏表现出更好的减轻牙龈炎的作用。特别是由实施例17和对比实施例10可以看出，含有按一定比例混合的三氯生和乌索脱氧胆酸混合物的牙膏比只含三氯生的牙膏表现出更好的抑制牙斑形成的作用。
可以认为，在本发明中作为有效成分的乌索脱氧胆酸和鹅胆酸对胶原酶灭活具有良好活性，胶原酶是牙龈炎的诱发物。因此，当牙膏、漱口剂、香口胶、口腔按摩霜等中含有这些成分时，这些组合物会表现出对牙龈炎的良好缓解作用。另外，组合物中还包含已知的杀菌剂三氯生时，该组合物会表现出更强的抑制牙斑形成的作用和增进的缓解牙龈炎的作用。
另外，由于上述本发明的、具有良好效果的、用于增进口腔卫生的组合物不含取自药用动物的天然药物fel Lauri和fel ursi，该组合物具有某些优点，即在贮存期间基本不会出现原料变质，贮存稳定性好，对人类患者的安全性高，因此本发明的组合物使用方便。

Claims (7)

1.一种用于增进口腔卫生的组合物，它含有一种或多种选自乌索脱氧胆酸和鹅胆酸的有效成分以及用于牙膏、漱口剂、香口胶、口腔按摩霜或口腔按摩膏的可接受的载体，其中选自乌索脱氧胆酸和鹅胆酸的一种或多种成分的含量占组合物总重量的0.02一1.0wt％。
2.权利要求1的组合物，其中选自乌索脱氧胆酸和鹅胆酸的一种或多种成分的含量占组合物总重量的0.02-0.6wt％。
3.权利要求1的组合物，其中的有效成分是乌索脱氧胆酸和鹅胆酸的混合物，其重量混合比是100∶1至1∶100。
4.权利要求1的组合物，它还含有占组合物总重量的0.0001-1.0wt％的三氯生。
5.权利要求4的组合物，其中含有占组合物总重量的0.02-0.6wt％的一种或多种选自乌索脱氧胆酸和鹅胆酸的成分，以及0.001-0.300wt％的三氯生。
6.权利要求1的组合物，其中还含有一种或多种辅助有效成分，它们选自氟化钠、氟磷酸钠、氟化胺、氟化锡、洗必泰、扁蓄盐、凝血酸、尿囊素、己酸、酶以及黄檗皮、桔梗根、荆芥全草、枙子果实、甘草根和地榆根提取物。
7.权利要求6的组合物，其中含有占组合物总重量1.0-5.0wt％的扁蓄盐、总量为0.01-5.0wt％的黄檗皮、桔梗根和荆芥全草提取物和0.1-1.0wt％的氟化物。
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