CN114452309B - 杨叶肖槿内生真菌发酵提取物及其制备方法与用途 - Google Patents

杨叶肖槿内生真菌发酵提取物及其制备方法与用途 Download PDF

Info

Publication number
CN114452309B
CN114452309B CN202210050599.4A CN202210050599A CN114452309B CN 114452309 B CN114452309 B CN 114452309B CN 202210050599 A CN202210050599 A CN 202210050599A CN 114452309 B CN114452309 B CN 114452309B
Authority
CN
China
Prior art keywords
shrubalthea
endophytic fungus
poplar leaf
penicillium
fungus penicillium
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202210050599.4A
Other languages
English (en)
Other versions
CN114452309A (zh
Inventor
刘亚月
薛欣怡
张翼
廖清楠
冯昀铠
杨志友
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Guangdong Ocean University
Original Assignee
Guangdong Ocean University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Guangdong Ocean University filed Critical Guangdong Ocean University
Priority to CN202210050599.4A priority Critical patent/CN114452309B/zh
Publication of CN114452309A publication Critical patent/CN114452309A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN114452309B publication Critical patent/CN114452309B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/06—Fungi, e.g. yeasts
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P1/00—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes
    • C12P1/02—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes by using fungi
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/10—Preparation or pretreatment of starting material
    • A61K2236/19—Preparation or pretreatment of starting material involving fermentation using yeast, bacteria or both; enzymatic treatment
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/33—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/35—Extraction with lipophilic solvents, e.g. Hexane or petrol ether
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/39—Complex extraction schemes, e.g. fractionation or repeated extraction steps
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/50—Methods involving additional extraction steps
    • A61K2236/55—Liquid-liquid separation; Phase separation

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)

Abstract

本发明公开了一种杨叶肖槿内生真菌Penicillium sp.YX‑002发酵提取物以及其作为活性成分在抗炎药物中的用途。本发明提供的杨叶肖槿内生真菌Penicillium sp.YX‑002发酵提取物对细胞中NO的产生具有抑制作用，具有良好的抗炎活性，在制备新型抗炎药物方面具有广泛的应用前景。

Description

杨叶肖槿内生真菌发酵提取物及其制备方法与用途
技术领域
本发明涉及医药技术领域，尤其涉及一种杨叶肖槿内生真菌发酵提取物及其制备方法与用途。
背景技术
炎症是医学中一个十分重要的病理过程，是机体对受伤或受伤后感染及其他刺激的一种防御反应，研究发现许多疾病，如肿瘤、心脑血管疾病、老年痴呆等发生和发展都与其相关。目前大部分专家学者认为其发病机制与脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)和Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)介导的信号通路有关。其主要致病机理是由于LPS(内毒素)激活并诱导与炎症发生相关的细胞产生致炎因子及介质NO等，最终导致炎症的发生。
目前治疗炎症疾病应用最广泛的是非甾体类抗炎药物(Nonsteroidalantiinflammatory Drugs，NSAIDs)，然而临床发现该药物具有较多的副作用，如过敏、胃肠道反应、肝功能异常、头晕、头痛、嗜睡、凝血障碍等。因此，研制出高效、副作用小、适合患者长期服用的抗炎药物具有重大意义。
另一方面，杨叶肖槿隶属于锦葵科肖槿属，是一种传统的民间半红树药用植物，主要分布在海南和广东沿海一带，研究发现该植物全株能清热解毒，消肿止痛；其提取物可以降胆固醇、增强记忆力并有良好的生物活性。目前针对杨叶肖槿内生真菌次生代谢产物活性组分的快速制备及抗炎活性的应用目前未见任何报道。
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于，提供一种具有药用价值的杨叶肖槿内生真菌发酵提取物及其制备方法与用途。
具体的，本发明提供了杨叶肖槿内生真菌Penicillium sp.YX-002发酵提取物作为活性成分在制备抗炎药物中的用途。发明人通过研究发现，杨叶肖槿内生真菌Penicillium sp.YX-002发酵提取物对细胞中NO的产生具有明显的抑制作用，具有良好的抗炎活性。即其在制备新型抗炎方面具有广泛的应用前景。该菌种已于2022年1月4日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，地址为广东省广州市，保藏号为 GDMCC NO:62179。
具体的，该Penicillium sp.YX-002发酵提取物的制备方法包括以下步骤：
(1)将杨叶肖槿内生真菌Penicillium sp.YX-002接种至培养基中，发酵得到发酵产物；
具体的，步骤(1)包括：
(1.1)将杨叶肖槿内生真菌Penicillium sp.YX-002活化；
具体的，将杨叶肖槿内生真菌Penicillium sp.YX-002置于温度为20～30℃、湿度为60～90％(RH)的培养箱中活化。
(1.2)将活化后的杨叶肖槿内生真菌Penicillium sp.YX-002接种至海水马铃薯培养基，培养得到孢子液；
具体的，海水马铃薯培养基的组成为：马铃薯汁100～800mL/L，葡萄糖 10～50g/L，蛋白胨0.5～10g/L，海盐5～50g/L。接种前在0.5105～3×105Pa下灭菌 10～40min。优选的，在本发明的一个实施例中，海水马铃薯培养基的组成为：马铃薯汁500mL/L，葡萄糖20g/L，蛋白胨5g/L，海盐20g/L。
其中，马铃薯汁的制备方法为：马铃薯去皮，洗净切块，加入去离子水，加热煮沸10～30min，过滤即得，每100g土豆煮100mL土豆汁。
具体的，接种量为10～20g菌落平板/400mL培养基。接种后在摇床培养3～4 天，得到孢子液。
(1.3)将所述孢子液接种至大米培养基，在20～35℃发酵10～50天，即得到发酵产物。
具体的，大米培养基的组成为：大米20～100g/60mL海水，1～3wt％海盐。接种前在0.5×105～3×105Pa下灭菌10～40min。优选的，在本发明的一个实施例中，大米培养基的组成为：大米50g，海水60mL，海水中海盐的浓度为26g/L。
具体的，孢子液的接种量为1～8vol％，优选的为4vol％。
具体的，发酵温度为20～35℃，发酵时间为10～50天；优选的，发酵温度为 25～30℃，发酵时间为30天。
(2)将所述发酵产物经提取溶剂提取、萃取溶剂萃取、分离溶剂分离后得到发酵提取物；
具体的，步骤(2)包括：
(2.1)将发酵产物采用提取溶剂提取1～3次，合并提取液后干燥，得到粗提物；
具体的，提取溶剂选用甲醇和/或二氯甲烷，但不限于此。优选的，提取溶剂选用甲醇和二氯甲烷；进一步优选的，提取溶剂选用甲醇和二氯甲烷，两者的体积比为1:1。
(2.2)将粗提物采用萃取溶剂萃取，干燥得到中间产物；
具体的，萃取溶剂选用乙酸乙酯，但不限于此。萃取后蒸干，即得到中间产物。
(2.3)将所述中间产物采用分离溶剂进行柱层析分离，即得到发酵提取物；
具体的，分离溶剂可选用乙酸乙酯、正己烷、二氯甲烷、甲醇、氯仿中的一种或多种，但不限于此。优选的，所述分离溶剂依次为正己烷、体积比为1:9 的正己烷乙酸乙酯混合溶剂、体积比为3:7的正己烷乙酸乙酯混合溶剂、体积比为1:1的正己烷乙酸乙酯混合溶剂、体积比为7:3的正己烷乙酸乙酯混合溶剂、体积比为1:1的氯仿甲醇混合溶剂。需要说明的是，本发明中的分离操作是通过柱层析进行的，所述的分离溶剂是指洗脱液。
具体的，先将中间产物采用正相硅胶色谱进行柱层析，依次正己烷、体积比为1:9的正己烷乙酸乙酯混合溶剂、体积比为3:7的正己烷乙酸乙酯混合溶剂、体积比为1:1的正己烷乙酸乙酯混合溶剂、体积比为7:3的正己烷乙酸乙酯混合溶剂进行洗脱，收集体积比为7:3的正己烷乙酸乙酯混合溶剂的洗脱液进行凝胶柱层析，采用体积比为1:1的氯仿甲醇混合溶剂进行洗脱，收集洗脱液，即得。
相应的，本发明还提供了一种杨叶肖槿内生真菌Penicillium sp.YX-002发酵提取物，其由上述的制备方法制备而得。
实施本发明，具有如下有益效果：
本发明提供的杨叶肖槿内生真菌Penicillium sp.YX-002发酵提取物对细胞中NO的产生具有抑制作用，具有良好的抗炎活性，在制备新型抗炎药物方面具有广泛的应用前景。此外，本发明的制备方法制备过程操作简单、适合大规模生产。
附图说明
图1是本发明实施例1中杨叶肖槿内生真菌Penicillium sp.YX-002发酵提取物的薄层色谱(TLC)图；
图2是本发明实施例1中杨叶肖槿内生真菌Penicillium sp.YX-002发酵提取物的HPLC图；
图3是本发明实施例2中杨叶肖槿内生真菌Penicillium sp.YX-002发酵提取物对NO抑制作用图；其中，control为空白组，LPS为给药组，1％DMSO为阳性对照组，1μg/ml c-2-3、10μg/ml c-2-3、20μg/ml c-2-3、50μg/ml c-2-3、100μg/ml c-2-3分别为浓度不同的实验组；
图4是本发明实施例2中杨叶肖槿内生真菌Penicillium sp.YX-002发酵提取物对细胞毒性的试验结果图；其中，control为空白组，LPS为给药组，1％DMSO 为阳性对照组，1μg/ml c-2-3、10μg/ml c-2-3、20μg/ml c-2-3、50μg/ml c-2-3、 100μg/ml c-2-3分别为浓度不同的实验组。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合附图及具体实施方式对本发明作进一步地详细描述。
实施例1Penicillium sp.YX-002发酵提取物的制备
(1)将菌株YX-002(已于2022年1月4日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏号为GDMCC NO:62179)冻存管置于温度28℃、湿度80％的霉菌培养箱活化过夜；将菌种接种到预先灭菌的海水马铃薯液体培养基(马铃薯汁 500mL，葡萄糖20g，蛋白胨5g，海盐20g，加入纯水至1L，于1×105Pa灭菌 30min)中摇床培养4d，得到种子液。
(2)将种子液接种于大米培养基(大米50g/瓶，海水60mL/瓶，1×105Pa 灭菌30min)的锥形瓶中(1L)，共接种50瓶，于室温下培养30天，待菌丝体完全充满于培养基中发酵结束。
(3)发酵所得菌饼用甲醇：二氯甲烷＝1:1(体积比)进行浸泡，重复提取三次，合并蒸干后用乙酸乙酯进行萃取，萃取液经浓缩蒸干后得到中间产物。
(4)中间产物利用正相硅胶色谱进行柱层析；具体的，将中间产物与空白硅胶(200-300目)按重量比＝1:2充分拌样后获得样品硅胶，采用干法装柱首先加入200-300目空白硅胶，而后在上层平铺样品硅胶(样品硅胶：空白硅胶体积比为1:7)，柱子上端铺一层棉花防止平面被溶剂冲垮。依次采用以正己烷、正己烷-乙酸乙酯体积比1:9、3:7、1:1、7:3进行洗脱，收集正己烷/乙酸乙酯体积比7:3组分C2，再经凝胶柱层析，采用氯仿:甲醇体积比1:1进行洗脱。而后再进行正相硅胶色谱柱层析进行分离，采用乙酸乙酯洗脱后得到成品。
将所得成品采用TLC、HPLC进行分析。其中，TLC采用正己烷:乙酸乙酯＝10:1为展开剂；HPLC为Agilent 1200D，色谱柱尺寸为4.6mm×100mm，色谱柱填料为PhenomenexKinetex C18
Figure BDA0003473932760000051
检测器为DAD，检测波长254.4nm。流动相为甲醇-水，其洗脱程序为：0-3min 60％甲醇等度洗脱，3-18min 60％-100％甲醇梯度洗脱，18-23min 100％甲醇等度洗脱，23-25min 100％-60％甲醇梯度洗脱，25-30min 60％甲醇等度洗脱，流速为0.6mL/min。具体结果如图1、图2所示。
实施例2杨叶肖槿内生真菌Penicillium sp.YX-002发酵提取物在抗炎方面的应用
1.实验方法：
把处于对数生长期(70-80％)的细胞制成细胞悬液，将细胞以2×104个/孔的密度(用细胞计数器计数)和100μL/孔的体积接种到96孔板中，分为多组培养(1组为空白组，1组为给药组(1uL/mL)，1组为阳性对照组)，其余组为实验组(发酵提取物的浓度分别为1ug/mL、10ug/mL、20ug/mL、50ug/mL)，空白组：100uLDMEM培养基，给药组：100uLDMEM培养基(含1ug/mL LPS)；阳性对照组：100uLDMEM培养基(含LPS和1％DMSO)；实验组：100uLDMEM 培养基(含LPS和样品)，每组设5复孔，放入培养箱培养24h。
稀释0.1M(mol/L)亚硝酸标准品：取0.150g分析纯亚硝酸钠溶于水中，定容至100mL，再取1m L此溶液稀释定容至10m L即得标准品。选择96孔板的3列用以测定亚硝酸盐标准曲线，取稀释好的标准品各30μL于96孔板，先加入30μL磺胺溶液反应，然后再加入30μL盐酸-萘胺溶液进行后续反应，用酶标仪测定OD540 nm值。
而后进行实验组NO测定；分别吸取空白组、给药组、阳性对照组和实验组中培养基30μL于另一96孔板，每孔加入30μL磺胺溶液反应5min后再加入30μL盐酸-萘胺溶液继续反应5min，使用酶标仪测定OD490nm值。
最后进行细胞活力实验计算细胞相对活力，每孔去除培养基，加入100uL 的MTT溶液(1mg/mL)，置于37℃、5％CO2的培养箱中继续培养4h，弃去 MTT溶液，每孔再加入二甲基亚砜(DMSO)溶液100uL，振荡混匀后用酶标仪检测波长540nm处的吸光度(λ)值。
2、实验结果
实验结果如下表1、表2以及图3、图4所示。实验结果表明：杨叶肖槿内生真菌Penicillium sp.YX-002发酵提取物在1ug/mL、10ug/mLl、20ug/mL、 50ug/mL、100ug/mL浓度下对NO的产生均有抑制作用且细胞无影响，表明该组分安全无毒、具有良好的抗炎活性。
表1NO测定实验结果
Figure BDA0003473932760000061
Figure BDA0003473932760000071
注：“-”代表对NO的产生无影响或有促进作用；“+”代表对NO的产生有抑制作用
表2细胞毒性测定实验结果
Figure BDA0003473932760000072
注：“-”代表有细胞毒性；“+”代表有细胞活性；
Figure BDA0003473932760000073
代表对细胞无影响
以上所述是发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也视为本发明的保护范围。

Claims (5)

1.杨叶肖槿内生真菌Penicilliumsp. YX-002发酵提取物作为活性成分在制备抗炎药物中的用途，其中，杨叶肖槿内生真菌Penicilliumsp. YX-002于2022年1月4日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏号为GDMCC NO：62179；所述杨叶肖槿内生真菌Penicilliumsp. YX-002发酵提取物对细胞中NO的产生具有抑制作用，具有抗炎活性；
其中，所述杨叶肖槿内生真菌Penicilliumsp. YX-002发酵提取物的制备方法为：
（1）将杨叶肖槿内生真菌Penicilliumsp. YX-002活化，将活化后的杨叶肖槿内生真菌Penicilliumsp. YX-002接种至海水马铃薯培养基，培养得到孢子液；
（2）将所述孢子液接种至大米培养基，在20~35℃发酵10~50天，即得到发酵产物；
（3）将发酵产物采用提取溶剂提取1~3次，合并提取液后干燥，然后采用萃取溶剂萃取，干燥得到中间产物；
（4）将所述中间产物采用分离溶剂进行柱层析分离，即得到发酵提取物；
所述提取溶剂选用甲醇和二氯甲烷，其体积比为1:1；
所述分离溶剂依次为正己烷、体积比为1:9的正己烷乙酸乙酯混合溶剂、体积比为3:7的正己烷乙酸乙酯混合溶剂、体积比为1:1的正己烷乙酸乙酯混合溶剂、体积比为7:3的正己烷-乙酸乙酯混合溶剂、体积比为1:1的氯仿甲醇混合溶剂。
2.如权利要求1所述的用途 ，其特征在于，所述海水马铃薯培养基的组成为：马铃薯汁100~800mL/L，葡萄糖10~50g/L，蛋白胨0.5~10g/L，海盐5~50g/L；
所述大米培养基的组成为：大米20~100g/60mL，1~3wt%海盐。
3.一种杨叶肖槿内生真菌Penicilliumsp. YX-002发酵提取物的制备方法，其特征在于，包括：
（1）将杨叶肖槿内生真菌Penicilliumsp. YX-002活化，将活化后的杨叶肖槿内生真菌Penicilliumsp. YX-002接种至海水马铃薯培养基，培养得到孢子液；其中，杨叶肖槿内生真菌Penicilliumsp. YX-002于2022年1月4日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏号为GDMCC NO：62179；
（2）将所述孢子液接种至大米培养基，在20~35℃发酵10~50天，即得到发酵产物；
（3）将发酵产物采用提取溶剂提取1~3次，合并提取液后干燥，然后采用萃取溶剂萃取，干燥得到中间产物；
（4）将所述中间产物采用分离溶剂进行柱层析分离，即得到发酵提取物；
所述提取溶剂选用甲醇和二氯甲烷，其体积比为1:1；
所述分离溶剂依次为正己烷、体积比为1:9的正己烷乙酸乙酯混合溶剂、体积比为3:7的正己烷乙酸乙酯混合溶剂、体积比为1:1的正己烷乙酸乙酯混合溶剂、体积比为7:3的正己烷-乙酸乙酯混合溶剂、体积比为1:1的氯仿甲醇混合溶剂。
4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述海水马铃薯培养基的组成为：马铃薯汁100~800mL/L，葡萄糖10~50g/L，蛋白胨0.5~10g/L，海盐5~50g/L；
所述大米培养基的组成为：大米20~100g/60mL，1~3wt%海盐。
5.一种杨叶肖槿内生真菌Penicilliumsp. YX-002发酵提取物，其特征在于，其由如权利要求3或4所述的制备方法制备而得。
CN202210050599.4A 2022-01-17 2022-01-17 杨叶肖槿内生真菌发酵提取物及其制备方法与用途 Active CN114452309B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210050599.4A CN114452309B (zh) 2022-01-17 2022-01-17 杨叶肖槿内生真菌发酵提取物及其制备方法与用途

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210050599.4A CN114452309B (zh) 2022-01-17 2022-01-17 杨叶肖槿内生真菌发酵提取物及其制备方法与用途

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN114452309A CN114452309A (zh) 2022-05-10
CN114452309B true CN114452309B (zh) 2022-12-02

Family

ID=81410355

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202210050599.4A Active CN114452309B (zh) 2022-01-17 2022-01-17 杨叶肖槿内生真菌发酵提取物及其制备方法与用途

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN114452309B (zh)

Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6403349B1 (en) * 1998-09-02 2002-06-11 Abbott Laboratories Elongase gene and uses thereof
CN101967134A (zh) * 2010-09-09 2011-02-09 中国海洋大学 一种由海洋Penicillium sp.QY013分离提取的化合物及其应用
WO2015066960A1 (zh) * 2013-11-06 2015-05-14 中国科学院南海海洋研究所 一种新的链霉倍半萜三醇a及其制备方法和应用
CN105602994A (zh) * 2016-04-08 2016-05-25 广东海洋大学 一种海洋真菌哈茨木霉dlen2008005的发酵提取物及其制备方法和应用
CN108165500A (zh) * 2018-02-26 2018-06-15 广东海洋大学深圳研究院 一株海洋真菌土曲霉c23-3、发酵液活性提取物及其制备方法和应用
CN108660083A (zh) * 2018-08-09 2018-10-16 云南大学 一株青霉菌株及其应用
CN109400527A (zh) * 2018-04-20 2019-03-01 中国科学院成都生物研究所 一种具有抗炎活性的红色食用真菌色素及其制备方法
CN110278823A (zh) * 2019-07-30 2019-09-27 厦门大学 一种退塘还林还湿方法
CN111909858A (zh) * 2018-12-04 2020-11-10 海南师范大学 一种红树内生真菌tgm112次级代谢产物及其应用

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2015127761A (ru) * 2008-04-30 2015-10-20 Ксилеко, Инк. Переработка биомассы

Patent Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6403349B1 (en) * 1998-09-02 2002-06-11 Abbott Laboratories Elongase gene and uses thereof
CN101967134A (zh) * 2010-09-09 2011-02-09 中国海洋大学 一种由海洋Penicillium sp.QY013分离提取的化合物及其应用
WO2015066960A1 (zh) * 2013-11-06 2015-05-14 中国科学院南海海洋研究所 一种新的链霉倍半萜三醇a及其制备方法和应用
CN105602994A (zh) * 2016-04-08 2016-05-25 广东海洋大学 一种海洋真菌哈茨木霉dlen2008005的发酵提取物及其制备方法和应用
CN108165500A (zh) * 2018-02-26 2018-06-15 广东海洋大学深圳研究院 一株海洋真菌土曲霉c23-3、发酵液活性提取物及其制备方法和应用
CN109400527A (zh) * 2018-04-20 2019-03-01 中国科学院成都生物研究所 一种具有抗炎活性的红色食用真菌色素及其制备方法
CN108660083A (zh) * 2018-08-09 2018-10-16 云南大学 一株青霉菌株及其应用
CN111909858A (zh) * 2018-12-04 2020-11-10 海南师范大学 一种红树内生真菌tgm112次级代谢产物及其应用
CN110278823A (zh) * 2019-07-30 2019-09-27 厦门大学 一种退塘还林还湿方法

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
1株红树内生真菌Penicillium sp. JY246次级代谢产物及其活性研究;白猛,等;《中国海洋药物》;20200415;第39卷(第02期);第11-18页 *
2株大白鲨鳃部来源青霉生物碱及其生物活性研究;冯妍,等;《中国海洋药物》;20160815;第35卷(第04期);第16-22页 *
New cyclopiane diterpenes with anti-inflammatory activity from the sea sediment-derived fungus Penicillium sp.TJ403-2;Fengli Li,等;《Chinese Chemical Letters》;20200115;第31卷(第01期);第197-201页 *
Penicillospirone from a marine isolate of Penicillium sp (SF-5292) with anti-inflammatory activity;Kim,Dong-Cheol,Sohn,等;《Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters》;20171231;第27卷(第15期);第3516-3520页 *
基于OSMAC策略的3株海洋真菌发酵条件筛选与优化;刘亚月,等;《广东海洋大学学报》;20200531;第40卷(第03期);第65-72页 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN114452309A (zh) 2022-05-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN114409660B (zh) 一种cpa型吲哚生物碱类化合物及其制备方法与用途
CN108329280A (zh) 一种天然Rakicidins类化合物Rakicidin I及其提取方法
CN108315264A (zh) 一种海漆内生真菌来源的聚酮化合物及其在制备抗炎药物中的应用
CN114452309B (zh) 杨叶肖槿内生真菌发酵提取物及其制备方法与用途
CN103880826B (zh) 一种异苯并呋喃酮化合物及其制备方法和应用
CN115093455B (zh) 一种甘草酸衍生物及其制备方法和在制备抗炎药物方面的应用
CN114409661B (zh) 一种吲哚生物碱类化合物及其制备方法与应用
CN105274152B (zh) 姜黄素的生物转化方法、产物及应用
CN110229131B (zh) 角果木内生真菌来源的苯并吡喃酮衍生物及其制备方法与应用
CN114478685A (zh) 一种吲哚二萜类化合物及其制备方法和应用
CN112961783A (zh) 一株植物内生真菌及其在制备螺环内酯衍生物中的应用
CN114149445A (zh) 一种氧杂蒽酮类化合物的制备方法及其在抗耐药细菌方面的应用
CN110002996B (zh) 一种二苯醚类化合物及其制备方法和用途
CN107226801A (zh) 一种xanthone类化合物及其单晶的制备方法与作为α-葡萄糖苷酶抑制剂的应用
CN112760235A (zh) 一株老鼠簕内生真菌Diaporthe goulteri及其代谢产物的应用
CN114404460B (zh) 杨叶肖槿内生真菌发酵提取物及其制备方法与应用
CN114805276B (zh) 一种异色烯类化合物及其制备方法与应用
CN115287236B (zh) 一类昆虫共生放线菌来源的生物碱化合物的制备方法和用途
CN115947876B (zh) β-D-半乳葡聚糖及其制备和用途
CN115466268B (zh) 一种具有抗菌抗炎活性的氧杂蒽醌类化合物及其制备方法和应用、药物组合物
CN114456053B (zh) 海洋真菌产的苯甲醛类化合物及其制备方法和抗炎用途
AU2021104334A4 (en) Phenanthroindolizidine alkaloid and preparation method thereof
CN102584806B (zh) 天然植物中一个黄酮的制备方法
CN111812252B (zh) 一种对植物中降糖功能化合物的筛选及分离方法
CN109265397B (zh) 一种窿缘桉内生真菌次生代谢产物的快速分离方法及用途

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant