CN114404354A - 鼻用原位凝胶制剂及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种鼻用原位凝胶制剂，包括皮质激素、原位凝胶材料、酶响应性底物和辅料，以占所述原位凝胶制剂的质量百分比计，所述皮质激素的含量为0.01‑1％，所述原位凝胶材料的含量为0.04‑40％，所述酶响应性底物的含量为0.01‑1.2％，所述辅料的含量为0.01‑50％，余量为水。所述原位凝胶制剂滴入受试者的鼻腔后原位形成凝胶，可延长药物在鼻黏膜的黏附时间，从而提高生物利用度，通过炎症部位的细胞内过表达的酶响应性释放药物，降低全身生物利用度，提高药物的局部生物利用度，从内在改善炎症反应，减少鼻腔炎症和反复性感染，以治疗受试者的鼻炎或鼻窦症状，实现个体化的精准靶向治疗。本发明还提供了所述鼻用原位凝胶制剂的制备方法。

Description

鼻用原位凝胶制剂及其制备方法
技术领域
本发明涉及药物制剂技术领域，尤其涉及一种鼻用原位凝胶制剂及其制备方法。
背景技术
慢性鼻窦炎(CRS)和鼻息肉的全球患病率为5％-12％，给社会带来了巨大的经济负担。CRS和鼻息肉治疗的问题一直是耳鼻咽喉科医师的临床挑战。
冲洗和灌洗可以缓解充血，抗生素和抗真菌药物可以清除致病菌，抗炎药可以缓和炎症级联反应。然而，这些目前已知的治疗方法都有局限性，当单独使用时，这些方法都不十分有效。盐水冲洗在许多CRS病例中是成功的，但其抗菌作用有限，在较严重的感染病例中几乎没有效果。单用盐水灌溉，包括高强度和低强度配方，对长期减少病原体菌落或防止生物膜形成都没有效果。抗生素和抗真菌药物已在CRS中成功应用，如静脉输液、口服制剂和冲洗添加剂。任何形式的特异性抗生素治疗，由于疾病的慢性特性，需要长期治疗，导致注定会失败。这两个因素导致了传统细菌耐药性的发展。它们还创造了促进生物膜形成的生理条件，进一步限制了它们根除治病有机体的能力。最后，类固醇，特别是“鼻类固醇”是控制类固醇反应性炎症的重要工具，后者使慢性感染复杂化。虽然没有一种单一疗法足以治疗所有这些致病因素，但在许多困难的情况下，即使是目前最知名的联合疗法也是无效的。
因此，通过CRS内在型的探索可能找到特异性个体病情发展的关键性因素即某些特定的分子标志物以这些分子标志物为靶标可实现个体化的精准治疗。
鼻部局部给药是一种传统的用来治疗各种鼻腔和鼻窦疾病的方式，多为滴鼻剂、喷雾剂等液体制剂，这类普通鼻用制剂使用便捷，但由于鼻黏膜纤毛运动，致使有效成分在鼻黏膜表面的滞留时间很短(15～30min)，生物利用度较低。而鼻用软膏剂、鼻用乳膏剂等半固体鼻用制剂虽能延长药物在鼻黏膜滞留时间，但其黏度较高，存在给药剂量不准确、使用不方便的缺点。
公开号为CN1810246的中国专利公开了一种鼻用药物的新型剂型，其具有相转变性质的东莨菪碱鼻用原位凝胶剂。本发明制剂由东莨菪碱的原形药物或其药学上可以接受的盐或其酯类衍生物和亲水凝胶，以及其它药剂学上必要的辅料制成，是一种含环境敏感型高分子的东莨菪碱水溶液，在常态下呈液体状态，以鼻腔给药的方式使用后迅速在鼻粘膜表面形成凝胶，从而延缓药物消除，提高生物利用度。但该专利不能实现靶向性精准治疗，而且存在敷料载药量低，释放难以控制的问题。
因此，有必要提供一种新型的鼻用原位凝胶制剂及其制备方法以解决现有技术中存在的上述问题。
发明内容
本发明的目的在于提供一种鼻用原位凝胶制剂及其制备方法，以实现个体化的精准靶向治疗，且克服了敷料载药量低，释放难以控制的问题。
为实现上述目的，本发明的所述鼻用原位凝胶制剂，包括皮质激素、原位凝胶材料、酶响应性底物和辅料；
以占所述原位凝胶制剂的质量百分比计，所述皮质激素的含量为0.01-1％，所述原位凝胶材料的含量为0.04-40％，所述酶响应性底物的含量为0.01-1.2％，所述辅料的含量为0.01-50％，余量为水。
本发明的所述鼻用原位凝胶制剂的有益效果在于：通过包括皮质激素、原位凝胶材料、酶响应性底物和辅料，以占所述原位凝胶制剂的质量百分比计，所述皮质激素的含量为0.01-1％，所述原位凝胶材料的含量为0.04-40％，所述酶响应性底物的含量为0.01-1.2％，所述辅料的含量为0.01-50％，余量为水，使得原位凝胶制剂中的酶响应性底物可以与原位凝胶材料、皮质激素共价结合，从而利用炎症组织中过表达的酶响应性的释放药物，实现药物的局部精准缓释，从内在改善炎症反应，减少鼻腔炎症和反复性感染，达到个体化的精准靶向治疗的目的，而且原位凝胶材料与酶响应性底物共价结合，克服了敷料载药量低，释放难以控制的问题，使得所述鼻用原位凝胶制剂滴入受试者的鼻腔后原位形成凝胶，可延长药物在鼻黏膜的黏附时间，增加药物在鼻内粘膜的吸收，提高药物的局部生物利用度，降低全身生物利用度，对鼻炎或鼻窦症状具有良好的治疗效果。
优选的，所述酶响应性底物为含有二硫键的双功能交联剂，所述含有二硫键的双功能交联剂的结构式为：
Figure BDA0003352036660000031
所述X和所述Y为N-琥珀酰亚胺基、3-磺酸钠-N-琥珀酰亚胺基和对硝基苯甲酰基中的任意一种。其有益效果在于：含有二硫键的双功能交联剂具有酶响应性，在过氧化物酶或谷胱甘肽的作用下，可以靶向释放药物，将酶响应性释放应用到慢性鼻炎/鼻窦炎的治疗中，实现了药物的可控精准释放，具有长期持久、毒性小的药理作用。
优选的，所述原位凝胶材料包括温度敏感型凝胶材料、离子敏感型凝胶材料和pH敏感型凝胶材料中的至少一种。其有益效果在于：使得原位凝胶制剂具有长期持久、毒性小的药理作用，同时减少了皮质激素药物混悬液的沉淀，使得能得到更均匀的药物制剂，有效地治疗CRS。
进一步优选的，包含有所述pH敏感型凝胶材料的所述原位凝胶制剂的pH值为3.5-5.0，未包含有所述pH敏感型凝胶材料的所述原位凝胶制剂的pH值为5.0-8.0。其有益效果在于：有利于使所述原位凝胶制剂滴入受试者的鼻腔后原位形成凝胶，以延长药物在鼻黏膜的黏附时间，从而提高生物利用度。
优选的，所述皮质激素包括皮质激素本体和皮质激素本体的衍生物中的至少一种，所述皮质激素本体包括地塞米松、倍他米松、氟米龙、泼尼松、泼尼松龙、甲泼尼龙、氢化可的松、氟轻松、氟替卡松、莫米松、依碳氯替泼诺、瑞美松龙、氟替卡松、倍氯米松、环索奈德、布地奈德、甲泼尼龙、曲安奈德、泼尼卡酯、布替可特、替泼尼旦、替可的松，所述皮质激素本体的衍生物包括盐类皮质激素、酯类皮质激素和皮质激素水合物。
进一步优选的，所述皮质激素为丙酸氟替卡松、糠酸莫米松、糠酸莫米松一水合物、糠酸氟替卡松、二丙酸倍氯米松、环索奈德、布地奈德、醋丙甲泼尼龙、醋酸曲安奈德和地塞米松磷酸钠中的至少一种。
优选的，所述温度敏感型凝胶材料包括泊洛沙姆407、泊洛沙姆188、聚N－异丙基丙烯酰胺、聚氧乙烯－聚乳酸羟基乙酸共聚物、壳聚糖、甲基纤维素和木聚糖中的至少一种。其有益效果在于：温敏型凝胶具有临界相转变温度，能随环境温度的改变而发生相变，室温下为自由流动的溶液，鼻腔温度下胶凝成半固体的凝胶状态。
进一步优选的，以占所述原位凝胶制剂的质量百分比计，所述泊洛沙姆407的含量为10-40％，所述泊洛沙姆188的含量为5-30％，所述聚N－异丙基丙烯酰胺的含量为20-40％，所述聚氧乙烯－聚乳酸羟基乙酸共聚物的含量为15-40％，所述壳聚糖的含量为0.1-5％，所述甲基纤维素的含量为1-10％，所述木聚糖的含量为0.1-3％。
优选的，所述离子敏感型凝胶材料为去乙酰化结冷胶、海藻酸钠、黄原胶、文莱胶和卡拉胶中的至少一种。其有益效果在于：所述离子敏感型凝胶材料在室温下为自由流动的溶液，其会与体液中的K+、Na+、Ca2+等阳离子络合，从而发生构象改变形成凝胶。
进一步优选的，以占所述原位凝胶制剂的质量百分比计，所述去乙酰化结冷胶的含量为0.04-3％，所述卡拉胶的含量为0.2-9％，所述文莱胶的含量为0.1-8％，所述黄原胶的含量为0.1-8％，所述海藻酸钠的含量为0.2-10％。
优选的，所述pH敏感型凝胶材料为醋酸纤维素酞酸酯、卡波姆和壳聚糖中的至少一种。其有益效果在于：pH敏感型原位凝胶是由于体内外pH的不同而发生相转变形成的凝胶，鼻黏液的pH一般在5.5-7.0之间，此类体系的聚合物分子骨架中均含有大量的可解离基团，其胶凝行为是电荷间的排斥作用导致分子链伸展与相互缠结的结果。所述醋酸纤维素酞酸酯、卡波姆和壳聚糖依据鼻腔内的生理pH环境而设计，pH为3.5-5.0时为自由流动的溶液，pH升高到5.5-6.5时聚合物链上的酸性基团被中和，电荷相互排斥导致分子链延展缠结形成凝胶。
进一步优选的，以占所述原位凝胶制剂的质量百分比计，所述醋酸纤维素酞酸酯的含量为10-40％，所述卡波姆的含量为0.1-2.0％，所述壳聚糖的含量为1-10％。
优选的，所述原位凝胶材料为混合型凝胶材料，所述混合型凝胶材料为泊洛沙姆407、泊洛沙姆188与去乙酰化结冷胶的组合、壳聚糖与海藻酸钠的组合、泊洛沙姆407与壳聚糖的组合、泊洛沙姆407与醋酸纤维素酞酸酯的组合中的任意一种组合。其有益效果在于：自然条件下为自由流动的溶液，生理条件下形成凝胶。
优选的，所述辅料包括渗透压调节剂、凝胶调节剂、防腐剂、pH调节剂和保湿剂中的至少一种。
优选的，所述渗透压调节剂包括甘露醇、山梨醇、甘油、枸橼酸钠、氯化钾、丙二醇和氯化钠中的至少一种，以占所述原位凝胶制剂的质量百分比计，所述渗透压调节剂的含量为0.5-5％。
优选的，所述保湿剂为甘油、丙二醇和聚山梨醇酯类中的至少一种。
进一步优选的，所述甘油的含量为3-30％，所述丙二醇的含量为5-30％，所述聚山梨醇酯类的含量为0.1-8％。
优选的，所述pH调节剂为氢氧化钠、三乙醇胺、氢氧化钾、盐酸、磷酸二氢钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钠和磷酸氢二钾中的至少一种。
优选的，所述防腐剂包括对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯、苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸、三氯叔丁醇、苯氧乙醇、苯扎溴铵、苯扎氯铵、醋酸氯己定、己内酰脲、咪唑烷基脲、甲基异噻唑啉酮和甲基氯异噻唑啉酮中的至少一种。其有益效果在于：不影响制剂的理化性质，在抑菌浓度范围内不产生或仅产生较小的、临床可以接受的鼻粘膜刺激性和纤毛毒性。
优选的，所述鼻用原位凝胶制剂的制备方法，包括：
将所述原位凝胶材料溶于有机溶剂中后，再与所述酶响应性底物在第一预设温度下反应得到原位凝胶复合物；在所述原位凝胶复合物中加入所述皮质激素并在第二预设温度下反应，除去所述有机溶剂后得到固态粉末状的皮质激素-原位凝胶复合物；将所述皮质激素-原位凝胶复合物和所述辅料配制成溶液，调节pH值，加水至全量制得所述原位凝胶制剂；
以占所述原位凝胶制剂的质量百分比计，所述皮质激素的含量为0.01-1％，所述原位凝胶材料的含量为0.04-40％，所述酶响应性底物的含量为0.01-1.2％，所述辅料的含量为0.01-50％。
本发明的所述鼻用原位凝胶制剂的制备方法的有益效果在于：通过将所述原位凝胶材料溶于有机溶剂中后，再与所述酶响应性底物在第一预设温度下反应得到原位凝胶复合物；在所述原位凝胶复合物中加入所述皮质激素并在第二预设温度下反应，除去所述有机溶剂后得到固态粉末状的皮质激素-原位凝胶复合物；将所述皮质激素-原位凝胶复合物和所述辅料配制成溶液，调节pH值，加水至全量制得所述原位凝胶制剂，以占所述原位凝胶制剂的质量百分比计，所述皮质激素的含量为0.01-1％，所述原位凝胶材料的含量为0.04-40％，所述酶响应性底物的含量为0.01-1.2％，所述辅料的含量为0.01-50％，使得所述的原位凝胶材料、皮质激素与酶响应性底物通过共价结合，滴入受试者的鼻腔后原位形成凝胶，可延长药物在鼻黏膜的黏附时间，从而提高生物利用度，通过炎症部位的细胞内过表达的酶响应性释放药物，降低全身生物利用度，提高药物的局部生物利用度，从内在改善炎症反应，减少鼻腔炎症和反复性感染，以治疗受试者的鼻炎或鼻窦症状，实现个体化的精准靶向治疗，而且制备工艺简单方便，安全可靠。
优选的，所述第一预设温度和所述第二预设温度相同或不同，所述第一预设温度和所述第二预设温度均为20-40℃。
优选的，所述有机溶剂为甲醇、乙醇、二氯甲烷、乙腈、四氢呋喃、二甲亚砜和N,N-二甲基甲酰胺中的任意一种。
附图说明
图1为本发明实施例的鼻用原位凝胶制剂的制备方法的流程示意图。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。除非另外定义，此处使用的技术术语或者科学术语应当为本发明所属领域内具有一般技能的人士所理解的通常意义。本文中使用的“包括”等类似的词语意指出现该词前面的元件或者物件涵盖出现在该词后面列举的元件或者物件及其等同，而不排除其他元件或者物件。
目前，CRS疾病的共同特征是微生物感染(如细菌、真菌、生物膜等)、宿主炎症反应导致粘膜水肿，以及药物滞留时间短，疗效差和患者依从性低。目前所面临的挑战仍然是找到一种非手术药物，以实现：(1)消除感染，形成生物膜；(2)减少气道炎症；(3)制成持久的制剂，从而减少给药频率和减少剂量，并最大限度地减少毒性。
以上可以通过抗菌消炎药与缓释原位凝胶释药技术相结合来解决，其是从治病生物体和生物膜两方面解决潜在的感染病理学问题，并能减轻伴随的炎症反应，具有更长的治疗效果。这种从三方面治疗慢性鼻窦疾病的方法解决了所有的致病途径，并通过化学方法降低了导致长期疾病的宿主免疫反应，可以实现精准的个体化治疗的目的。
为克服现有技术中存在的问题，本发明实施例提供了一种鼻用原位凝胶制剂，包括皮质激素、原位凝胶材料、酶响应性底物和辅料；以占所述原位凝胶制剂的质量百分比计，所述皮质激素的含量为0.01-1％，所述原位凝胶材料的含量为0.04-40％，所述酶响应性底物的含量为0.01-1.2％，所述辅料的含量为0.01-50％，余量为水。
具体的，鼻粘膜炎症部位往往由活化的嗜酸性粒细胞通过脱颗粒和胞溶方式向外界释放嗜酸性粒细胞过氧化物酶等毒性介质，可引起周围组织嗜酸性炎症损伤，粘膜的显著变化，基质金属蛋白酶(MMP)也会明显高于正常组织，如基底膜增厚、腺体增生和水肿，就是由于细胞外基质通过上皮缺损突出引起的，而细胞外基质蛋白的降解受基质金属蛋白酶(MMP)的调节，因此会诱发持续性组织损伤。原位凝胶制剂中的酶响应性底物可以与药物共价结合，利用炎症组织中过表达的酶，可以响应性的释放药物，实现药物的局部精准缓释，达到个体化的精准靶向治疗的目的。
研究表明，长期使用鼻用糖皮质激素治疗CRS是有效和安全的。EPOS2020指导委员会建议CRS患者使用鼻用糖皮质激素。
通过采用原位凝胶，使得所述鼻用原位凝胶制剂以溶液的方式进入鼻腔内部，并在原位形成了凝胶，延长了药物在鼻内的停留时间，减少鼻腔粘液纤毛传输系统对药物的运送，从而增加药物在鼻内粘膜的吸收，减少药物被胃肠道吞咽的比例，提高了药物在鼻内粘膜的生物利用度，同时还能减少药物的刺激性，较好的避免鼻纤毛运动快速将药物推向咽后壁，增加患者尤其是儿童患者的顺受性。同时通过这种制剂也可以提高制剂的稳定性。
所述鼻用原位凝胶制剂具有三维网络结构及良好的组织相容性独特的溶液一凝胶转变性质使其兼有制备简单、使用方便、与用药部位特别是黏膜组织亲和力强、滞留时间长等优点，以及良好的控制释药性能。
所述原位凝胶材料包括温度敏感型凝胶材料、离子敏感型凝胶材料和pH敏感型凝胶材料中的至少一种，原位凝胶缓释制剂具有长期持久、毒性小的药理作用，同时减少了皮质激素药物混悬液的沉淀，使得能得到更均匀的药物制剂，有效地治疗CRS，而且使得所述鼻用原位凝胶制剂以溶液的方式进入鼻腔内部，并在原位形成了凝胶，延长了药物在鼻内的停留时间。
所述原位凝胶材料的含量为0.04-40％，相比所述皮质激素和所述酶响应性底物的含量较多，以在鼻腔起到原位缓释，保湿和载药的作用。
本发明的一些实施例中，包含有所述pH敏感型凝胶材料的所述原位凝胶制剂的pH值为3.5-5.0，未包含有所述pH敏感型凝胶材料的所述原位凝胶制剂的pH值为5.0-8.0，有利于使所述原位凝胶制剂滴入受试者的鼻腔后原位形成凝胶，以延长药物在鼻黏膜的黏附时间，从而提高生物利用度。
本发明的一些具体实施例中，未包含有所述pH敏感型凝胶材料的所述原位凝胶制剂的pH值为5.5-6.5。
本发明的一些实施例中，所述皮质激素包括皮质激素本体和皮质激素本体的衍生物中的至少一种，所述皮质激素本体包括地塞米松、倍他米松、氟米龙、泼尼松、泼尼松龙、甲泼尼龙、氢化可的松、氟轻松、氟替卡松、莫米松、依碳氯替泼诺、瑞美松龙、氟替卡松、倍氯米松、环索奈德、布地奈德、甲泼尼龙、曲安奈德、泼尼卡酯、布替可特、替泼尼旦、替可的松，所述皮质激素本体的衍生物包括盐类皮质激素、酯类皮质激素和皮质激素水合物。具体的，所述皮质激素本体的衍生物为所述皮质激素本体的可药用的盐、酯和/或水合物。
本发明的一些具体实施例中，所述皮质激素包括地塞米松、倍他米松、氟米龙、泼尼松、泼尼松龙、甲泼尼龙、氢化可的松、氟轻松、氟替卡松、莫米松、依碳氯替泼诺、瑞美松龙、氟替卡松、倍氯米松、环索奈德、布地奈德、甲泼尼龙、曲安奈德、泼尼卡酯、布替可特、替泼尼旦和替可的松中的至少一种。
本发明的另一些具体实施例中，所述皮质激素包括地塞米松、倍他米松、氟米龙、泼尼松、泼尼松龙、甲泼尼龙、氢化可的松、氟轻松、氟替卡松、莫米松、依碳氯替泼诺、瑞美松龙、氟替卡松、倍氯米松、环索奈德、布地奈德、甲泼尼龙、曲安奈德、泼尼卡酯、布替可特、替泼尼旦和替可的松中的任意一种的可药用的盐、酯和水合物中的至少一种。
本发明的一些可能实施例中，所述皮质激素为丙酸氟替卡松、糠酸莫米松、糠酸莫米松一水合物、糠酸氟替卡松、二丙酸倍氯米松、环索奈德、布地奈德、醋丙甲泼尼龙、醋酸曲安奈德和地塞米松磷酸钠中的至少一种。
本发明的一些实施例中，所述酶响应性底物为含有二硫键的双功能交联剂，所述含有二硫键的双功能交联剂的结构式为：
Figure BDA0003352036660000101
所述X和所述Y为N-琥珀酰亚胺基、3-磺酸钠-N-琥珀酰亚胺基和对硝基苯甲酰基中的任意一种，含有二硫键的双功能交联剂具有酶响应性，在过氧化物酶或谷胱甘肽的作用下，可以靶向释放药物，将酶响应性释放应用到慢性鼻炎/鼻窦炎的治疗中，实现了药物的可控精准释放，具有长期持久、毒性小的药理作用，而且原位凝胶材料通过含有二硫键的双功能交联剂与药物的共价结合，克服了传统敷料载药量低，释放难以控制的问题，从而增加药物在鼻内粘膜的吸收，减少药物被胃肠道吞咽的比例，提高了药物在鼻内粘膜的生物利用度，同时还能减少药物的刺激性，较好的避免鼻纤毛运动快速将药物推向咽后壁，增加患者尤其是儿童患者的顺受性。
本发明的一些实施例中，所述X和所述Y相同或不同。
本发明的一些具体实施例中，所述X和所述Y相同，所述X和所述Y为N-琥珀酰亚胺基、3-磺酸钠-N-琥珀酰亚胺基和对硝基苯甲酰基中的任意一种。
本发明的另一些具体实施例中，所述X和所述Y不同，所述X为N-琥珀酰亚胺基、3-磺酸钠-N-琥珀酰亚胺基和对硝基苯甲酰基中的任意一种，所述Y为N-琥珀酰亚胺基、3-磺酸钠-N-琥珀酰亚胺基和对硝基苯甲酰基中的另一种。
本发明的一些实施例中，所述温度敏感型凝胶材料包括泊洛沙姆407、泊洛沙姆188、聚N－异丙基丙烯酰胺(NiPAAM共聚物)、聚氧乙烯－聚乳酸羟基乙酸共聚物(PEG-PLGA)、壳聚糖、甲基纤维素和木聚糖中的至少一种，温敏型凝胶具有临界相转变温度，能随环境温度的改变而发生相变，室温下为自由流动的溶液，鼻腔温度下胶凝成半固体的凝胶状态。
本发明的一些可能实施例中，以占所述原位凝胶制剂的质量百分比计，所述泊洛沙姆407的含量为10-40％，所述泊洛沙姆188的含量为5-30％，所述聚N－异丙基丙烯酰胺的含量为20-40％，所述聚氧乙烯－聚乳酸羟基乙酸共聚物的含量为15-40％，所述壳聚糖的含量为0.1-5％，所述甲基纤维素的含量为1-10％，所述木聚糖的含量为0.1-3％。
本发明的一些实施例中，所述离子敏感型凝胶材料为去乙酰化结冷胶、海藻酸钠、黄原胶、文莱胶和卡拉胶中的至少一种，所述离子敏感型凝胶材料在室温下为自由流动的溶液，其会与体液中的K+、Na+、Ca2+等阳离子络合，从而发生构象改变形成凝胶。
本发明的一些可能实施例中，以占所述原位凝胶制剂的质量百分比计，所述去乙酰化结冷胶的含量为0.04-3％，所述卡拉胶的含量为0.2-9％，所述文莱胶的含量为0.1-8％，所述黄原胶的含量为0.1-8％，所述海藻酸钠的含量为0.2-10％。
本发明的一些实施例中，所述pH敏感型凝胶材料为醋酸纤维素酞酸酯、卡波姆和壳聚糖中的至少一种，pH敏感型原位凝胶是由于体内外pH的不同而发生相转变形成的凝胶，鼻黏液的pH一般在5.5-7.0之间，此类体系的聚合物分子骨架中均含有大量的可解离基团，其胶凝行为是电荷间的排斥作用导致分子链伸展与相互缠结的结果。所述醋酸纤维素酞酸酯、卡波姆和壳聚糖依据鼻腔内的生理pH环境而设计，pH为3.5-5.0时为自由流动的溶液，pH升高到5.5-6.5时聚合物链上的酸性基团被中和，电荷相互排斥导致分子链延展缠结形成凝胶。
本发明的一些可能实施例中，所述卡波姆包括卡波姆934、卡波姆940和卡波姆U21中的至少一种。
本发明的一些可能实施例中，以占所述原位凝胶制剂的质量百分比计，所述醋酸纤维素酞酸酯的含量为10-40％，所述卡波姆的含量为0.1-2.0％，所述壳聚糖的含量为1-10％。
本发明的一些实施例中，所述原位凝胶材料为混合型凝胶材料，所述混合型凝胶材料为泊洛沙姆407、泊洛沙姆188与去乙酰化结冷胶的组合、壳聚糖与海藻酸钠的组合、泊洛沙姆407与壳聚糖的组合、泊洛沙姆407与醋酸纤维素酞酸酯的组合中的任意一种组合，自然条件下为自由流动的溶液，生理条件下形成凝胶。
本发明的一些实施例中，所述辅料包括渗透压调节剂、凝胶调节剂、防腐剂、pH调节剂和保湿剂中的至少一种。
本发明的一些实施例中，所述渗透压调节剂包括甘露醇、山梨醇、甘油、枸橼酸钠、氯化钾、丙二醇和氯化钠中的至少一种，以占所述原位凝胶制剂的质量百分比计，所述渗透压调节剂的含量为0.5-5％。
本发明的一些实施例中，所述保湿剂为甘油、丙二醇和聚山梨醇酯类中的至少一种。
本发明的一些可能实施例中，以占所述原位凝胶制剂的质量百分比计，所述甘油的含量为3-30％，所述丙二醇的含量为5-30％，所述聚山梨醇酯类的含量为0.1-8％。
本发明的一些具体实施例中，所述聚山梨醇酯类选自Tween-20、Tween-40、Tween-60、Tween-65、Tween-80和Tween-85中的至少一种。
本发明的一些实施例中，所述pH调节剂为氢氧化钠、三乙醇胺、氢氧化钾、盐酸、磷酸二氢钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钠和磷酸氢二钾中的至少一种。
本发明的一些实施例中，所述防腐剂包括对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯、苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸、三氯叔丁醇、苯氧乙醇、苯扎溴铵、苯扎氯铵、醋酸氯己定、己内酰脲、咪唑烷基脲、甲基异噻唑啉酮和甲基氯异噻唑啉酮中的至少一种，不影响制剂的理化性质，在抑菌浓度范围内不产生或仅产生较小的、临床可以接受的鼻粘膜刺激性和纤毛毒性。
本发明的一些可能实施例中，以占所述原位凝胶制剂的质量百分比计，所述防腐剂的含量为0.01-0.1％。
本发明的一些实施例中，所述凝胶调节剂包括果胶、羟丙基纤维素和羧甲基纤维素中的至少一种。
本发明的一些可能实施例中，以占所述原位凝胶制剂的质量百分比计，所述凝胶调节剂的含量为0.05-1％。
图1为本发明实施例的鼻用原位凝胶制剂的制备方法的流程示意图。
本发明一些实施例中，参考图1，所述鼻用原位凝胶制剂的制备方法，包括步骤：
S0：提供皮质激素、原位凝胶材料、酶响应性底物和辅料，且以占所述原位凝胶制剂的质量百分比计，所述皮质激素的含量为0.01-1％，所述原位凝胶材料的含量为0.04-40％，所述酶响应性底物的含量为0.01-1.2％，所述辅料的含量为0.01-50％；
S1：将所述原位凝胶材料溶于有机溶剂中后，再与所述酶响应性底物在第一预设温度下反应得到原位凝胶复合物；
S2：在所述原位凝胶复合物中加入所述皮质激素并在第二预设温度下反应，除去所述有机溶剂后得到固态粉末状的皮质激素-原位凝胶复合物；
S3：将所述皮质激素-原位凝胶复合物和所述辅料配制成溶液，调节pH值，加水至全量制得所述原位凝胶制剂。
本发明一些实施例中，所述第一预设温度和所述第二预设温度相同或不同，所述第一预设温度和所述第二预设温度均为20-40℃。
本发明一些实施例中，所述有机溶剂为甲醇、乙醇、二氯甲烷、乙腈、四氢呋喃、二甲亚砜、N,N-二甲基甲酰胺中的任意一种。
实施例1-8为含温度敏感型凝胶材料的原位凝胶制剂的制备，所述含温度敏感型凝胶材料的原位凝胶制剂的组成如表1所示。实施例1-8的含温度敏感型凝胶材料的原位凝胶制剂的制备方法包括步骤：
将温度敏感型凝胶材料溶于有机溶剂N,N-二甲基甲酰胺中后，与含有二硫键的双功能交联剂的酶响应性底物在20℃下反应24h得到原位凝胶复合物，再在所述原位凝胶复合物中加入皮质激素并在20℃下反应12h后，除去有机溶剂冻干得到粉末固体，即制得皮质激素-原位凝胶复合物；
将一定量的所述皮质激素-原位凝胶复合物加入到低温的磷酸缓冲液中(所述磷酸缓冲液的pH值为5.5-7.5)，搅拌使分散均匀，然后置于4℃冰箱中放置24h以上，直至所述皮质激素-原位凝胶复合物完全溶解得到澄明基质，与其它附加剂混合配制成含药原位凝胶靶向缓释制剂。
表1含温度敏感型凝胶材料的原位凝胶制剂的组成
Figure BDA0003352036660000141
Figure BDA0003352036660000151
表1中，布地奈德0.1表示该实施例含有0.1％的布地奈德，其他组分含量以此类推，在此不再赘述。
相转变温度测定：将实施例1-8的含温度敏感型凝胶材料的原位凝胶制剂进行相转变温度测定，所述相转变温度测定按《中华人民共和国药典》2020年版四部通则0633黏度测定法中的第三法旋转黏度计测定法规定的方法测定。
具体的，从温度20℃开始升温到40℃连续测量黏度，升温速率为0.1℃/min，在黏度急剧升高的温度即为凝胶相转变温度，结果见表2。
表2含温度敏感型凝胶材料的原位凝胶制剂的相转变温度
实施例1 实施例2 实施例3 实施例4 实施例5 实施例6 实施例7 实施例8
相转变温度 37.1℃ 35.1℃ 34.3℃ 36.1℃ 36.3℃ 32.1℃ 31.0℃ 30.4℃
从表2的结果可知，在正常人体温范围内实施例1-8的所述原位凝胶制剂的黏度大幅度提高，均可发生明显的相转变；实施例2-6的原位凝胶制剂在温度34±2℃条件下相转变表现良好，优先实施例3。
细胞毒性实验：取实施例1-8的原位凝胶制剂按照GB/T16886.5规定的浸提液法进行细胞毒性实验，其中，浸提比例为0.1g/mL，浸提介质为含血清的MEM培养基，浸提温度条件为37±1℃，浸提时长为24±2h，且按照GB/T14233.2规定评级，结果见表3所示。从表3的结果可知，实施例1-8的所述原位凝胶制剂的细胞存活率均大于70％，符合要求。
表3含温度敏感型凝胶材料的原位凝胶制剂的细胞毒性试验结果
Figure BDA0003352036660000161
纤毛毒性试验：以纤毛持续运动时间为指标，以生理盐水为对照组，通过离体蟾蜍上颚实验考察了生理盐水对照组给药后的纤毛毒性、所述实施例3给药30min后的纤毛毒性和所述实施例3给药4h后的纤毛毒性，以及以生理盐水为阴性对照组，用试验样品的纤毛持续运动时间除以阴性对照组的时间，得到纤毛持续运动相对百分率，百分率越高表示试验样品对蟾赊鼻勃膜纤毛的毒性影响越小。每组测试10次，结果如表4所示。
表4实施例3的原位凝胶制剂与生理盐水对照组的纤毛毒性试验结果
Figure BDA0003352036660000162
参考表4，结果表明：(1)光学显微镜观察发现:给予生理盐水的阴性对照组蟾蛛上颗勃膜面完整，无纤毛脱落现象且纤毛运动非常活跃。(2)原位凝胶给药30min，纤毛摆动情况与生理盐水对照组无明显差别；原位凝胶给药4h，所测得的纤毛摆动时间低于生理盐水对照组，但持续摆动时间依然大于10小时。且根据表5不同时间内实施例3的原位凝胶制剂与对照组在鼻腔中滞留量结果可知，该发明的鼻用原位凝胶一般给药4小时，基本全部能从鼻腔全部清除。
鼻腔滞留性试验：以所述实施例3进行试验，经大鼠在体单侧鼻孔滴鼻给药，给药一定时间后用4℃生理盐水冲洗鼻腔，测定药物在鼻腔内的滞留量，每组测试3次，对照组采用药物溶液，所述药物溶液采用文适牌的糠酸氟替卡松鼻用喷雾剂，其生产企业为GlaxoOperationsUKLtd(英国葛兰素史克)，规格型号为27.5μg*120喷，结果如表5所示。参考表5，结果表明，所述实施例3的所述原位凝胶制剂在鼻腔的滞留能力明显高于药物溶液的对照组。对照组中药物溶液在鼻腔给药后，因药物溶液的流动性，其会快速从鼻腔清除，给药5分钟，滞留量仅剩35％左右；而所述实施例3的原位凝胶制剂，因其到达给药部位后能快速胶凝而粘附于鼻粘膜，因此给药60分钟后，在鼻腔的滞留量还有近31％。实施例3的所述原位凝胶有利于提高药物在鼻腔的滞留时间，为其充分吸收转运提供机会，并且可以克服人体直立状态给药时的重力作用，预测这种原位凝胶靶向缓释制剂在实际应用中的优势会更加明显。
表5不同时间内实施例3的原位凝胶制剂与对照组在鼻腔中滞留量
时间(min) 实施例3滞留百分比 含药物溶液滞留百分比
0 100％ 100％
5 85.5％ 40.2％
15 73.4％ 28.7％
30 61.9％ 18.4％
60 30.7％ 10.3％
120 17.7％ 7.5％
240 9.3％ -
480 4.5％ -
鼻腔黏膜刺激性试验：选取家兔8只，雌雄各半，每只重量在2.0-3.0kg，随机分为实施例3制剂组、市售鼻喷雾剂组、空白对照组(赋形剂)和正常对照组，每组2只，均分笼常规饲养。所述赋形剂为在药物制剂中除主药以外的附加物，也可称为辅料，所述市售鼻喷雾剂组采用文适牌的糠酸氟替卡松鼻用喷雾剂，其生产企业为GlaxoOperationsUKLtd(英国葛兰素史克)，规格型号为27.5μg*120喷。正常对照组不给药正常饲养，前3组分别在每只家兔的鼻腔中，每次用滴管分别滴入实施例3中的所述原位凝胶制剂、所述糠酸氟替卡松鼻用喷雾剂、所述赋形剂，其中，市售鼻喷雾剂组中每只鼻腔每次用滴管滴入含有21μg的糠酸氟替卡松的药液，家兔按平均体重2.5kg计。末次给药24h后，处死动物取出鼻粘膜，和空白对照组进行比对，观察鼻孔周围分泌物、结痂、鼻粘膜充血、水肿、红斑等情况。刺激程度按照以下标准进行评价：无刺激时，分值小于0.5；轻度刺激性时，分值小于3.0；中度刺激性时，分值小于6.0；强度刺激性时，分值小于8.0。实验结果如下表6所示，其中总平均分值＝(红斑分值+水肿分值)/同组试验动物总数。
表6实施例3的原位凝胶制剂与对照组的鼻腔黏膜刺激性试验结果
组别 动物/只 红斑分值 水肿分值 总平均分值
正常对照组 2 0 0 0
实施例3 2 0 0.1 0.05
市售鼻喷雾剂组 2 0.1 0 0.05
空白对照组 2 0 0 0
参考表6，结果表明，本申请实施例3的制剂的总平均值小于0.5，无刺激性。同空白对照组对比观察，表明实施例3与市售鼻喷雾剂组无明显刺激性。
实施例9-16为含离子敏感型凝胶材料的原位凝胶制剂的制备，所述含离子敏感型凝胶材料的原位凝胶制剂的组成如表7所示。实施例9-16的含离子敏感型凝胶材料的原位凝胶制剂的制备方法包括步骤：
将离子敏感型凝胶材料溶于有机溶剂N,N-二甲基甲酰胺中后，与含有二硫键的双功能交联剂的酶响应性底物在20℃下反应24h得到原位凝胶复合物，再在所述原位凝胶复合物中加入皮质激素并在20℃下反应12h后，除去有机溶剂冻干得到粉末固体，即制得皮质激素-原位凝胶复合物；
将一定量的所述皮质激素-原位凝胶复合物加入到低温的磷酸缓冲液中(所述磷酸缓冲液的pH值为6.5-7.4)，搅拌使分散均匀，然后置于4℃冰箱中放置24h以上，直至所述皮质激素-原位凝胶复合物完全溶解得到澄明基质，与其它附加剂混合配制成含药原位凝胶制剂。
表7含离子敏感型凝胶材料的原位凝胶制剂的组成
Figure BDA0003352036660000181
Figure BDA0003352036660000191
相转变温度测定：将实施例9-16的含离子敏感型凝胶材料的原位凝胶制剂进行相转变温度测定，所述相转变温度测定按《中华人民共和国药典》2020年版四部通则0633黏度测定法中的第三法旋转黏度计测定法规定的方法测定。
具体的，测定实施例9-16凝胶与人工鼻液按1:1(v/v)比例混合前后的黏度，结果如表8所示。其中，所述人工鼻液按以下方式配置：分别称取NaCl1.975g，CaCl20.64g，KCl0.92g，溶于适量纯化水，调节pH至6.4±1，并采用纯化水定容至250mL。参考表8，结果表明，实施例9-16在接触人工鼻液后黏度均增大，发生明显的相转变。其中实施例9、10、13、15相转变后黏度＜5000mPa·s，粘附力稍差；实施例11、12、14、16在相转变后黏度在5000～7000mPa·s之间，具有较好的黏度。
表8含离子敏感型凝胶材料的原位凝胶制剂相转变前后的粘度
Figure BDA0003352036660000192
Figure BDA0003352036660000201
细胞毒性实验：取实施例9-16的原位凝胶制剂按照GB/T16886.5规定的浸提液法进行细胞毒性实验，其中，浸提比例为0.1g/mL，浸提介质为含血清的MEM培养基，浸提温度条件为37±1℃，浸提时长为24±2h，且按照GB/T14233.2规定评级，结果见表9所示。从表9的结果可知，所述实施例9-16的所述原位凝胶制剂的细胞存活率均大于70％，符合要求。
表9含离子敏感型凝胶材料的原位凝胶制剂的细胞毒性试验结果
Figure BDA0003352036660000202
纤毛毒性试验：以纤毛持续运动时间为指标，以生理盐水为对照组，通过离体蟾蜍上颚实验考察了生理盐水对照组给药后的纤毛毒性、所述实施例14给药30min后的纤毛毒性和所述实施例14给药4h后的纤毛毒性，以及以生理盐水为阴性对照组，用试验样品的纤毛持续运动时间除以阴性对照组的时间，得到纤毛持续运动相对百分率，百分率越高表示试验样品对蟾赊鼻勃膜纤毛的毒性影响越小。每组测试10次，结果如表10所示。
表10实施例14的原位凝胶制剂与生理盐水对照组的纤毛毒性试验结果
Figure BDA0003352036660000203
参考表10，结果表明：(1)光学显微镜观察发现:给予生理盐水的阴性对照组蟾蛛上颗勃膜面完整，无纤毛脱落现象且纤毛运动非常活跃。(2)原位凝胶给药30min，纤毛摆动情况与生理盐水对照组无明显差别；原位凝胶给药4h，所测得的纤毛摆动时间低于生理盐水对照组，但持续摆动时间依然大于10小时。且根据表11不同时间内实施例14的原位凝胶制剂与对照组在鼻腔中滞留量结果可知，该发明的鼻用原位凝胶一般给药4小时，基本全部能从鼻腔全部清除。
鼻腔滞留性试验：以所述实施例14进行试验，经大鼠在体单侧鼻孔滴鼻给药，给药一定时间后用4℃生理盐水冲洗鼻腔，测定药物在鼻腔内的滞留量，每组测试3次，对照组采用药物溶液，所述药物溶液采用文适牌的糠酸氟替卡松鼻用喷雾剂，其生产企业为GlaxoOperationsUKLtd(英国葛兰素史克)，规格型号为27.5μg*120喷，结果如表11所示。参考表11，结果表明，所述实施例14的所述原位凝胶制剂在鼻腔的滞留能力明显高于药物溶液的对照组。对照组中药物溶液在鼻腔给药后，因药物溶液的流动性，其会快速从鼻腔清除，给药5分钟，滞留量仅剩40％左右；而所述实施例14的原位凝胶制剂，因其到达给药部位后能快速胶凝而粘附于鼻粘膜，因此给药60分钟后，在鼻腔的滞留量还有近30％。实施例14的所述原位凝胶有利于提高药物在鼻腔的滞留时间，为其充分吸收转运提供机会，并且可以克服人体直立状态给药时的重力作用，预测这种原位凝胶靶向缓释制剂在实际应用中的优势会更加明显。
表11不同时间内实施例14的原位凝胶制剂与对照组在鼻腔中滞留量
时间(min) 实施例14滞留百分比 含药物溶液滞留百分比
0 100％ 100％
5 79.9％ 35.2％
15 68.4％ 28.4％
30 51.9％ 15.3％
60 29.2％ 8.8％
120 15.7％ 6.4％
240 8.1％ -
480 3.6％ -
鼻腔黏膜刺激性试验：选取家兔8只，雌雄各半，每只重量在2.0-3.0kg，随机分为实施例14制剂组、市售鼻喷雾剂组、空白对照组(赋形剂)和正常对照组，每组2只，均分笼常规饲养。所述赋形剂为在药物制剂中除主药以外的附加物，也可称为辅料，所述市售鼻喷雾剂组采用文适牌的糠酸氟替卡松鼻用喷雾剂，其生产企业为GlaxoOperationsUKLtd(英国葛兰素史克)，规格型号为27.5μg*120喷。正常对照组不给药正常饲养，前3组分别在每只家兔的鼻腔中，每次用滴管分别滴入实施例14中的所述原位凝胶制剂、所述糠酸氟替卡松鼻用喷雾剂、所述赋形剂，其中，市售鼻喷雾剂组中每只鼻腔每次用滴管滴入含有21μg的糠酸氟替卡松的药液，家兔按平均体重2.5kg计。末次给药24h后，处死动物取出鼻粘膜，和空白对照组进行比对，观察鼻孔周围分泌物、结痂、鼻粘膜充血、水肿、红斑等情况。刺激程度按照以下标准进行评价：无刺激时，分值小于0.5；轻度刺激性时，分值小于3.0；中度刺激性时，分值小于6.0；强度刺激性时，分值小于8.0。实验结果如下表12所示，其中总平均分值＝(红斑分值+水肿分值)/同组试验动物总数。
表12实施例14的原位凝胶制剂与对照组的鼻腔黏膜刺激性试验结果
组别 动物/只 红斑分值 水肿分值 总平均分值
正常对照组 2 0 0 0
实施例14 2 0 0.1 0.05
市售鼻喷雾剂组 2 0.1 0 0.05
空白对照组 2 0 0 0
参考表12，结果表明，本申请实施例14的制剂的总平均值小于0.5，无刺激性。同空白对照组对比观察，表明实施例14与市售鼻喷雾剂组无明显刺激性。
实施例17-24为含pH敏感型凝胶材料的原位凝胶制剂的制备，所述含pH敏感型凝胶材料的原位凝胶制剂的组成如表13所示。实施例17-24的含pH敏感型凝胶材料的原位凝胶制剂的制备方法包括步骤：
将pH敏感型凝胶材料溶于有机溶剂N,N-二甲基甲酰胺中后，与含有二硫键的双功能交联剂的酶响应性底物在20℃下反应24h得到原位凝胶复合物，再在原位凝胶复合物中加入皮质激素并在20℃下反应12h后，除去有机溶剂冻干得到粉末固体，即制得皮质激素-原位凝胶复合物；
将一定量的所述皮质激素-原位凝胶复合物加入到低温的磷酸缓冲液中(所述磷酸缓冲液的pH值为6.5-7.4)，搅拌使分散均匀，然后置于4℃冰箱中放置24h以上，直至所述皮质激素-原位凝胶复合物完全溶解得到澄明基质，与其它附加剂混合配制成含药原位凝胶制剂，调节pH至实施例量。
表13含pH敏感型凝胶材料的原位凝胶制剂的组成
Figure BDA0003352036660000231
相转变温度测定：将实施例17-24的含pH敏感型凝胶材料的原位凝胶制剂进行相转变温度测定，按《中华人民共和国药典》2015年版四部通则0633黏度测定法中的第三法旋转黏度计测定法规定的方法测定。
具体的，测定实施例17-24凝胶与pH为6.4±1的人工鼻液按1:1(v/v)比例混合后的黏度，结果如表14所示。其中，所述人工鼻液按以下方式配置：分别称取NaCl1.975g，CaCl20.64g，KCl0.92g，溶于适量纯化水，调节pH至6.4±1，并采用纯化水定容至250mL。参考表14，结果表明，实施例19、24黏度≤5000mPa·s；实施例18与实施例23黏度≥7000mPa·s；实施例17、20、21和22的黏度在5000～7000mPa·s之间，具有适中的黏度与优良的相转变性能。
表14含pH敏感型凝胶材料的原位凝胶制剂相转变后的粘度
Figure BDA0003352036660000241
细胞毒性实验：取实施例17-24的原位凝胶制剂按照GB/T16886.5规定的浸提液法进行细胞毒性实验，其中，浸提比例为0.1g/mL，浸提介质为含血清的MEM培养基，浸提温度条件37±1℃，浸提时长为24±2h，且按照GB/T14233.2规定评级，结果见表15所示。从表15的结果可知，所述实施例17-24的所述原位凝胶制剂的细胞存活率均大于70％，符合要求。
表15含pH敏感型凝胶材料的原位凝胶制剂的细胞毒性试验结果
Figure BDA0003352036660000242
纤毛毒性试验：以纤毛持续运动时间为指标，以生理盐水为对照组，通过离体蟾蜍上颚实验考察了生理盐水对照组给药后的纤毛毒性、所述实施例21给药30min后的纤毛毒性和所述实施例14给药4h后的纤毛毒性，以及以生理盐水为阴性对照组，用试验样品的纤毛持续运动时间除以阴性对照组的时间，得到纤毛持续运动相对百分率，百分率越高表示试验样品对蟾赊鼻勃膜纤毛的毒性影响越小。每组测试10次，结果如表16所示。
表16实施例21的原位凝胶制剂与生理盐水对照组的纤毛毒性试验结果
Figure BDA0003352036660000251
参考表16，结果表明：(1)光学显微镜观察发现:给予生理盐水的阴性对照组蟾蛛上颗勃膜面完整，无纤毛脱落现象且纤毛运动非常活跃。(2)原位凝胶给药30min，纤毛摆动情况与生理盐水对照组无明显差别；原位凝胶给药4h，所测得的纤毛摆动时间低于生理盐水对照组，但持续摆动时间依然大于10小时。且根据表17不同时间内实施例21的原位凝胶制剂与对照组在鼻腔中滞留量结果可知，该发明的鼻用原位凝胶一般给药4小时，基本全部能从鼻腔全部清除。
鼻腔滞留性试验：以所述实施例21进行试验，经大鼠在体单侧鼻孔滴鼻给药，给药一定时间后用4℃生理盐水冲洗鼻腔，测定药物在鼻腔内的滞留量，每组测试3次，对照组采用药物溶液，所述药物溶液采用文适牌的糠酸氟替卡松鼻用喷雾剂，其生产企业为GlaxoOperationsUKLtd(英国葛兰素史克)，规格型号为27.5μg*120喷，结果如表17所示。参考表17，结果表明，所述实施例21的所述原位凝胶制剂在鼻腔的滞留能力明显高于药物溶液对照组。对照组中药物溶液在鼻腔给药后，因药物溶液的流动性，其会快速从鼻腔清除，给药5分钟，滞留量仅剩35％左右；而所述实施例21的原位凝胶制剂，因其到达给药部位后能快速胶凝而粘附于鼻粘膜，因此给药60分钟后，在鼻腔的滞留量还有近35％。所述实施例21的所述原位凝胶有利于提高药物在鼻腔的滞留时间，为其充分吸收转运提供机，并且可以克服人体直立状态给药时的重力作用，预测这种原位凝胶靶向缓释制剂在实际应用中的优势会更加明显。
表17不同时间内实施例21的原位凝胶制剂与对照组在鼻腔中滞留量
时间(min) 实施例21滞留百分比 含药物溶液滞留百分比
0 100％ 100％
5 89.4％ 45.2％
15 72.8％ 28.3％
30 59.9％ 17.6％
60 34.7％ 11.8％
120 15.9％ 6.5％
240 8.4％ -
480 3.8％ -
鼻腔黏膜刺激性试验：选取家兔8只，雌雄各半，每只重量在2.0-3.0kg，随机分为实施例3制剂组、市售鼻喷雾剂组、空白对照组(赋形剂)和正常对照组，每组2只，均分笼常规饲养。所述赋形剂为在药物制剂中除主药以外的附加物，也可称为辅料，所述市售鼻喷雾剂组采用文适牌的糠酸氟替卡松鼻用喷雾剂，其生产企业为GlaxoOperationsUKLtd(英国葛兰素史克)，规格型号为27.5μg*120喷。正常对照组不给药正常饲养，前3组分别在每只家兔的鼻腔中，每次用滴管分别滴入实施例21、所述糠酸氟替卡松鼻用喷雾剂、所述赋形剂，其中，市售鼻喷雾剂组中每只鼻腔每次用滴管滴入含有21μg的糠酸氟替卡松的药液，家兔按平均体重2.5kg计。末次给药24h后，处死动物取出鼻粘膜，和空白对照组进行比对，观察鼻孔周围分泌物、结痂、鼻粘膜充血、水肿、红斑等情况。刺激程度按照以下标准进行评价：无刺激时，分值小于0.5；轻度刺激性时，分值小于3.0；中度刺激性时，分值小于6.0；强度刺激性时，分值小于8.0。实验结果如下表18所示，其中总平均分值＝(红斑分值+水肿分值)/同组试验动物总数。
表18实施例21的原位凝胶制剂与对照组的鼻腔黏膜刺激性试验结果
组别 动物/只 红斑分值 水肿分值 总平均分值
正常对照组 2 0 0 0
实施例21 2 0 0.1 0.05
市售鼻喷雾剂组 2 0.1 0 0.05
空白对照组 2 0 0 0
参考表18，结果表明，本申请实施例21制剂的总平均值小于0.5，无刺激性。同空白对照组对比观察，表明实施例21与市售鼻喷雾剂组无明显刺激性。
虽然在上文中详细说明了本发明的实施方式，但是对于本领域的技术人员来说显而易见的是，能够对这些实施方式进行各种修改和变化。但是，应理解，这种修改和变化都属于权利要求书中所述的本发明的范围和精神之内。而且，在此说明的本发明可有其它的实施方式，并且可通过多种方式实施或实现。

Claims (20)

1.一种鼻用原位凝胶制剂，其特征在于，包括皮质激素、原位凝胶材料、酶响应性底物和辅料；
以占所述原位凝胶制剂的质量百分比计，所述皮质激素的含量为0.01-1％，所述原位凝胶材料的含量为0.04-40％，所述酶响应性底物的含量为0.01-1.2％，所述辅料的含量为0.01-50％，余量为水。
2.根据权利要求1所述的鼻用原位凝胶制剂，其特征在于，所述酶响应性底物为含有二硫键的双功能交联剂，所述含有二硫键的双功能交联剂的结构式为：
Figure FDA0003352036650000011
所述X和所述Y为N-琥珀酰亚胺基、3-磺酸钠-N-琥珀酰亚胺基和对硝基苯甲酰基中的任意一种。
3.根据权利要求1所述的鼻用原位凝胶制剂，其特征在于，所述原位凝胶材料包括温度敏感型凝胶材料、离子敏感型凝胶材料和pH敏感型凝胶材料中的至少一种。
4.根据权利要求3所述的鼻用原位凝胶制剂，其特征在于，包含有所述pH敏感型凝胶材料的所述原位凝胶制剂的pH值为3.5-5.0，未包含有所述pH敏感型凝胶材料的所述原位凝胶制剂的pH值为5.0-8.0。
5.根据权利要求1所述的鼻用原位凝胶制剂，其特征在于，所述皮质激素包括皮质激素本体和皮质激素本体的衍生物中的至少一种，所述皮质激素本体包括地塞米松、倍他米松、氟米龙、泼尼松、泼尼松龙、甲泼尼龙、氢化可的松、氟轻松、氟替卡松、莫米松、依碳氯替泼诺、瑞美松龙、氟替卡松、倍氯米松、环索奈德、布地奈德、甲泼尼龙、曲安奈德、泼尼卡酯、布替可特、替泼尼旦、替可的松，所述皮质激素本体的衍生物包括盐类皮质激素、酯类皮质激素和皮质激素水合物。
6.根据权利要求5所述的鼻用原位凝胶制剂，其特征在于，所述皮质激素为丙酸氟替卡松、糠酸莫米松、糠酸莫米松一水合物、糠酸氟替卡松、二丙酸倍氯米松、环索奈德、布地奈德、醋丙甲泼尼龙、醋酸曲安奈德和地塞米松磷酸钠中的至少一种。
7.根据权利要求3所述的鼻用原位凝胶制剂，其特征在于，所述温度敏感型凝胶材料包括泊洛沙姆407、泊洛沙姆188、聚N－异丙基丙烯酰胺、聚氧乙烯－聚乳酸羟基乙酸共聚物、壳聚糖、甲基纤维素和木聚糖中的至少一种。
8.根据权利要求7所述的鼻用原位凝胶制剂，其特征在于，以占所述原位凝胶制剂的质量百分比计，所述泊洛沙姆407的含量为10-40％，所述泊洛沙姆188的含量为5-30％，所述聚N－异丙基丙烯酰胺的含量为20-40％，所述聚氧乙烯-聚乳酸羟基乙酸共聚物的含量为15-40％，所述壳聚糖的含量为0.1-5％，所述甲基纤维素的含量为1-10％，所述木聚糖的含量为0.1-3％。
9.根据权利要求3所述的鼻用原位凝胶制剂，其特征在于，所述离子敏感型凝胶材料为去乙酰化结冷胶、海藻酸钠、黄原胶、文莱胶和卡拉胶中的至少一种。
10.根据权利要求9所述的鼻用原位凝胶制剂，其特征在于，以占所述原位凝胶制剂的质量百分比计，所述去乙酰化结冷胶的含量为0.04-3％，所述卡拉胶的含量为0.2-9％，所述文莱胶的含量为0.1-8％，所述黄原胶的含量为0.1-8％，所述海藻酸钠的含量为0.2-10％。
11.根据权利要求3所述的鼻用原位凝胶制剂，其特征在于，所述pH敏感型凝胶材料为醋酸纤维素酞酸酯、卡波姆和壳聚糖中的至少一种。
12.根据权利要求11所述的鼻用原位凝胶制剂，其特征在于，以占所述原位凝胶制剂的质量百分比计，所述醋酸纤维素酞酸酯的含量为10-40％，所述卡波姆的含量为0.1-2.0％，所述壳聚糖的含量为1-10％。
13.根据权利要求3所述的鼻用原位凝胶制剂，其特征在于，所述原位凝胶材料为混合型凝胶材料，所述混合型凝胶材料为泊洛沙姆407、泊洛沙姆188与去乙酰化结冷胶的组合、壳聚糖与海藻酸钠的组合、泊洛沙姆407与壳聚糖的组合、泊洛沙姆407与醋酸纤维素酞酸酯的组合中的任意一种组合。
14.根据权利要求1所述的鼻用原位凝胶制剂，其特征在于，所述辅料包括渗透压调节剂、凝胶调节剂、防腐剂、pH调节剂和保湿剂中的至少一种。
15.根据权利要求14所述的鼻用原位凝胶制剂，其特征在于，所述渗透压调节剂包括甘露醇、山梨醇、甘油、枸橼酸钠、氯化钾、丙二醇和氯化钠中的至少一种，以占所述原位凝胶制剂的质量百分比计，所述渗透压调节剂的含量为0.5-5％。
16.根据权利要求14所述的鼻用原位凝胶制剂，其特征在于，所述保湿剂为甘油、丙二醇和聚山梨醇酯类中的至少一种。
17.根据权利要求16所述的鼻用原位凝胶制剂，其特征在于，以占所述原位凝胶制剂的质量百分比计，所述甘油的含量为3-30％，所述丙二醇的含量为5-30％，所述聚山梨醇酯类的含量为0.1-8％。
18.根据权利要求14所述的鼻用原位凝胶制剂，其特征在于，所述pH调节剂为氢氧化钠、三乙醇胺、氢氧化钾、盐酸、磷酸二氢钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钠和磷酸氢二钾中的至少一种。
19.根据权利要求14所述的鼻用原位凝胶制剂，其特征在于，所述防腐剂包括对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯、苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸、三氯叔丁醇、苯氧乙醇、苯扎溴铵、苯扎氯铵、醋酸氯己定、己内酰脲、咪唑烷基脲、甲基异噻唑啉酮和甲基氯异噻唑啉酮中的至少一种。
20.根据权利要求1至19中任意一项所述的鼻用原位凝胶制剂的制备方法，其特征在于，包括：
将所述原位凝胶材料溶于有机溶剂中后，再与所述酶响应性底物在第一预设温度下反应得到原位凝胶复合物；在所述原位凝胶复合物中加入所述皮质激素并在第二预设温度下反应，除去所述有机溶剂后得到固态粉末状的皮质激素-原位凝胶复合物；将所述皮质激素-原位凝胶复合物和所述辅料配制成溶液，调节pH值，加水至全量制得所述原位凝胶制剂；
以占所述原位凝胶制剂的质量百分比计，所述皮质激素的含量为0.01-1％，所述原位凝胶材料的含量为0.04-40％，所述酶响应性底物的含量为0.01-1.2％，所述辅料的含量为0.01-50％。
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