CN114276472A - 芦笋多糖的制备工艺 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了芦笋多糖的制备工艺，包括以下步骤：步骤1：将新鲜或干燥的芦笋切成小块；步骤2：将剪切好的芦笋进行水提；步骤3：对提取液进行减压浓缩；步骤4：将浓缩后的多糖粗提液加萃取剂，搅拌，离心分层得上中下三层液体；步骤5：得芦笋多糖A；步骤6：离心取上清，浓缩，静置，离心，收集沉淀，即得芦笋多糖B；步骤7：得到芦笋多糖。本发明采用水提醇沉法，乙醇浓度由低到高进行分级醇沉，对芦笋多糖进行初步分离，同时高浓度乙醇能将极性大、水溶性好的多糖与极性小、水溶性差的多糖分离，且制备工艺简单，操作方便，且可以大规模生产，同时筛选出了含量高、活性强的芦笋多糖组分，为芦笋多糖在医药等领域的应用提供依据。
Description
技术领域
本发明涉及医药技术领域，尤其涉及芦笋多糖的制备工艺。
背景技术
芦笋为百合科天门冬属多年生宿根草本植物。芦笋是一种集药用和食用于一体的名贵蔬菜，是世界十大名菜之一，以嫩茎供食用，质地鲜嫩，风味鲜美，柔嫩可口，在国际上有“蔬菜之王”的美称，在欧洲其消费量仅次于番茄、刀豆和蘑菇。被世界卫生组织列为世界十大最具有营养价值的蔬菜之首，是国际上公认的防癌保健蔬菜，芦笋消费量也在逐年快速增长。
芦笋含有多种活性成分(如活性酶、芦笋多糖、皂苷、脂肪酸、氨基酸、微量元素等)具有抗肿瘤、抗衰老、抗疲劳、降血脂、保肝解毒、免疫调节等特殊的生物学功能。除此之外，芦笋中含有丰富的多糖，方幼兰报道了芦笋多糖纯品由两种相对分子质量不同的多糖组成，平均相对分子质量为85000和14500，构成多糖的糖基主要有木糖、岩藻糖和果糖，摩尔比为1.0：5.07：8.97；季宇彬报道了芦笋粗多糖主要单糖组成为木糖、果糖、鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖，其质量分数分别为3.144％、7.92％、10.52％、17.15％、41.85％(中草药，2006，37(8)：1159-1161)。张志远(郑州牧业工程高等专科学校学报，2003，23(2)：83-84)、和苗明三(中国医药学报，2003，18(1)：52-53)采用腹腔巨噬细胞吞噬法、溶血素及溶血空斑形成法和淋巴细胞转化法观察芦笋多糖对正常小鼠免疫作用的影响。发现芦笋多糖可提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能，促进溶血素、溶血空斑的形成，促进淋巴细胞的转化率。汲晨锋也报道了芦笋多糖通过提高S180小鼠红细胞免疫调控功能，增强淋巴细胞免疫反应能力(上海中医药大学学报，2010，24(2)：68-71)。苗明三观察芦笋多糖对D-半乳糖致衰老小鼠的影响，发现芦笋多糖可显著提高衰老小鼠血CAT，SOD，GSH-PX活力，降低血浆、脑、肝匀浆LPO水平以及拮抗衰老所致胸腺、脾脏和脑组织的萎缩(中国中药杂志，2004，29(7)：673-675)。申梅淑用以芦笋多糖水煎剂治疗D-半乳糖致衰小鼠，发现芦笋多糖能拮抗衰老小鼠胸腺指数的降低，增加Bcl-2蛋白表达，降低衰老小鼠胸腺组织中Fas蛋白表达水平，具有一定的抗衰老作用(中国食物与营养，2010，3：74-76)。
但是现有芦笋多糖的制备工艺较为简单，制备工艺无法快速充分的对芦笋多糖进行提取制备，同时芦笋多糖的制备纯度较低，从而影响芦笋多糖的制备效率。
发明内容
1.要解决的技术问题
本发明的目的是为了解决现有技术中芦笋多糖的制备工艺较为简单，制备工艺无法快速充分的对芦笋多糖进行提取制备，同时芦笋多糖的制备纯度较低的问题，而提出的芦笋多糖的制备工艺。
2.技术方案
为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：
芦笋多糖的制备工艺，包括以下步骤：
步骤1：将新鲜或干燥的芦笋洗净，切成小块；
步骤2：将剪切好的芦笋进行水提，分别收集提取液和残渣；
步骤3：对提取液进行减压浓缩；
步骤4：将浓缩后的多糖粗提液加萃取剂，搅拌，离心分层得上中下三层液体，上层为多糖溶液，中间层为蛋白溶液，下层为萃取剂；
步骤5：除去中间层蛋白溶液，将上层多糖溶液与下层萃取剂混合搅拌，离心分层，得芦笋多糖A；
步骤6：将水提后残渣浸泡于0.1-1M NaOH溶液中，静置1-4h，上清液用HCl进行中和，使上清液的pH为6-8，离心取上清，浓缩，静置，离心，收集沉淀，即得芦笋多糖B；
步骤7：对上述芦笋多糖A和B加水溶解，配制成水溶液，再进行层析分离，收集后进行浓缩、醇沉、干燥，得到芦笋多糖。
优选地，所述步骤3中将提取液减压浓缩至原提取液体积的1/4-1/6。
优选地，所述步骤4中离心分层中离心机转速为5000-7000rpm，离心时间5-10min。
优选地，所述步骤5中混合搅拌的时间为3-5h。
优选地，所述步骤6中向上清液中加入乙醇调浓度至60％-80％。
优选地，所述步骤7中水溶液的浓度为1％-3％。
优选地，所述步骤7中溶液在DEAE纤维素离子交换柱上进行层析分离。
3.有益效果
相比于现有技术，本发明的优点在于：
本发明中，采用水提醇沉法，乙醇浓度由低到高进行分级醇沉，对芦笋多糖进行初步分离，同时高浓度乙醇能将极性大、水溶性好的多糖与极性小、水溶性差的多糖分离，且制备工艺简单，操作方便，且可以大规模生产，同时筛选出了含量高、活性强的芦笋多糖组分，为芦笋多糖在医药等领域的应用提供依据。
具体实施方式
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。
实施例1：
芦笋多糖的制备工艺，包括以下步骤：
步骤1：将新鲜或干燥的芦笋洗净，切成小块；
步骤2：将剪切好的芦笋进行水提，分别收集提取液和残渣；
步骤3：对提取液进行减压浓缩，将提取液减压浓缩至原提取液体积的1/4-1/6；
步骤4：将浓缩后的多糖粗提液加萃取剂，搅拌，离心分层得上中下三层液体，上层为多糖溶液，中间层为蛋白溶液，下层为萃取剂；
步骤5：除去中间层蛋白溶液，将上层多糖溶液与下层萃取剂混合搅拌，离心分层，得芦笋多糖A；
步骤6：将水提后残渣浸泡于0.1-1M NaOH溶液中，静置1-4h，上清液用HCl进行中和，使上清液的pH为6-8，离心取上清，浓缩，静置，离心，收集沉淀，即得芦笋多糖B；
步骤7：对上述芦笋多糖A和B加水溶解，配制成水溶液，再进行层析分离，收集后进行浓缩、醇沉、干燥，得到芦笋多糖。
本发明中，采用水提醇沉法，乙醇浓度由低到高进行分级醇沉，对芦笋多糖进行初步分离，同时高浓度乙醇能将极性大、水溶性好的多糖与极性小、水溶性差的多糖分离，且制备工艺简单，操作方便，且可以大规模生产，同时筛选出了含量高、活性强的芦笋多糖组分，为芦笋多糖在医药等领域的应用提供依据。
实施例2：
芦笋多糖的制备工艺，包括以下步骤：
步骤1：将新鲜或干燥的芦笋洗净，切成小块；
步骤2：将剪切好的芦笋进行水提，分别收集提取液和残渣；
步骤3：对提取液进行减压浓缩，将提取液减压浓缩至原提取液体积的1/4-1/6；
步骤4：将浓缩后的多糖粗提液加萃取剂，搅拌，离心分层得上中下三层液体，上层为多糖溶液，中间层为蛋白溶液，下层为萃取剂，离心分层中离心机转速为5000-7000rpm，离心时间5-10min；
步骤5：除去中间层蛋白溶液，将上层多糖溶液与下层萃取剂混合搅拌，离心分层，得芦笋多糖A；
步骤6：将水提后残渣浸泡于0.1-1M NaOH溶液中，静置1-4h，上清液用HCl进行中和，使上清液的pH为6-8，离心取上清，浓缩，静置，离心，收集沉淀，即得芦笋多糖B；
步骤7：对上述芦笋多糖A和B加水溶解，配制成水溶液，再进行层析分离，收集后进行浓缩、醇沉、干燥，得到芦笋多糖。
本发明中，采用水提醇沉法，乙醇浓度由低到高进行分级醇沉，对芦笋多糖进行初步分离，同时高浓度乙醇能将极性大、水溶性好的多糖与极性小、水溶性差的多糖分离，且制备工艺简单，操作方便，且可以大规模生产，同时筛选出了含量高、活性强的芦笋多糖组分，为芦笋多糖在医药等领域的应用提供依据。
实施例3：
芦笋多糖的制备工艺，包括以下步骤：
步骤1：将新鲜或干燥的芦笋洗净，切成小块；
步骤2：将剪切好的芦笋进行水提，分别收集提取液和残渣；
步骤3：对提取液进行减压浓缩，将提取液减压浓缩至原提取液体积的1/4-1/6；
步骤4：将浓缩后的多糖粗提液加萃取剂，搅拌，离心分层得上中下三层液体，上层为多糖溶液，中间层为蛋白溶液，下层为萃取剂，离心分层中离心机转速为5000-7000rpm，离心时间5-10min；
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步骤6：将水提后残渣浸泡于0.1-1M NaOH溶液中，静置1-4h，上清液用HCl进行中和，使上清液的pH为6-8，离心取上清，浓缩，静置，离心，收集沉淀，即得芦笋多糖B；
步骤7：对上述芦笋多糖A和B加水溶解，配制成水溶液，再进行层析分离，收集后进行浓缩、醇沉、干燥，得到芦笋多糖。
本发明中，采用水提醇沉法，乙醇浓度由低到高进行分级醇沉，对芦笋多糖进行初步分离，同时高浓度乙醇能将极性大、水溶性好的多糖与极性小、水溶性差的多糖分离，且制备工艺简单，操作方便，且可以大规模生产，同时筛选出了含量高、活性强的芦笋多糖组分，为芦笋多糖在医药等领域的应用提供依据。
实施例4：
芦笋多糖的制备工艺，包括以下步骤：
步骤1：将新鲜或干燥的芦笋洗净，切成小块；
步骤2：将剪切好的芦笋进行水提，分别收集提取液和残渣；
步骤3：对提取液进行减压浓缩，将提取液减压浓缩至原提取液体积的1/4-1/6；
步骤4：将浓缩后的多糖粗提液加萃取剂，搅拌，离心分层得上中下三层液体，上层为多糖溶液，中间层为蛋白溶液，下层为萃取剂，离心分层中离心机转速为5000-7000rpm，离心时间5-10min；
步骤5：除去中间层蛋白溶液，将上层多糖溶液与下层萃取剂混合搅拌，混合搅拌的时间为3-5h，向上清液中加入乙醇调浓度至60％-80％，离心分层，得芦笋多糖A；
步骤6：将水提后残渣浸泡于0.1-1M NaOH溶液中，静置1-4h，上清液用HCl进行中和，使上清液的pH为6-8，离心取上清，浓缩，静置，离心，收集沉淀，即得芦笋多糖B；
步骤7：对上述芦笋多糖A和B加水溶解，配制成水溶液，水溶液的浓度为1％-3％，溶液在DEAE纤维素离子交换柱上进行层析分离，收集后进行浓缩、醇沉、干燥，得到芦笋多糖。
本发明中，采用水提醇沉法，乙醇浓度由低到高进行分级醇沉，对芦笋多糖进行初步分离，同时高浓度乙醇能将极性大、水溶性好的多糖与极性小、水溶性差的多糖分离，且制备工艺简单，操作方便，且可以大规模生产，同时筛选出了含量高、活性强的芦笋多糖组分，为芦笋多糖在医药等领域的应用提供依据。
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
Claims (7)
1.芦笋多糖的制备工艺，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1：将新鲜或干燥的芦笋洗净，切成小块；
步骤2：将剪切好的芦笋进行水提，分别收集提取液和残渣；
步骤3：对提取液进行减压浓缩；
步骤4：将浓缩后的多糖粗提液加萃取剂，搅拌，离心分层得上中下三层液体，上层为多糖溶液，中间层为蛋白溶液，下层为萃取剂；
步骤5：除去中间层蛋白溶液，将上层多糖溶液与下层萃取剂混合搅拌，离心分层，得芦笋多糖A；
步骤6：将水提后残渣浸泡于0.1-1M NaOH溶液中，静置1-4h，上清液用HCl进行中和，使上清液的pH为6-8，离心取上清，浓缩，静置，离心，收集沉淀，即得芦笋多糖B；
步骤7：对上述芦笋多糖A和B加水溶解，配制成水溶液，再进行层析分离，收集后进行浓缩、醇沉、干燥，得到芦笋多糖。
2.根据权利要求1所述的芦笋多糖的制备工艺，其特征在于，所述步骤3中将提取液减压浓缩至原提取液体积的1/4-1/6。
3.根据权利要求1所述的芦笋多糖的制备工艺，其特征在于，所述步骤4中离心分层中离心机转速为5000-7000rpm，离心时间5-10min。
4.根据权利要求1所述的芦笋多糖的制备工艺，其特征在于，所述步骤5中混合搅拌的时间为3-5h。
5.根据权利要求1所述的芦笋多糖的制备工艺，其特征在于，所述步骤6中向上清液中加入乙醇调浓度至60％-80％。
6.根据权利要求1所述的芦笋多糖的制备工艺，其特征在于，所述步骤7中水溶液的浓度为1％-3％。
7.根据权利要求1所述的芦笋多糖的制备工艺，其特征在于，所述步骤7中溶液在DEAE纤维素离子交换柱上进行层析分离。
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|---|---|---|---|---|
| CN102048655A (zh) * | 2010-12-27 | 2011-05-11 | 中国科学院过程工程研究所 | 利用芦笋下脚料提取芦笋多糖的方法及芦笋多糖的应用 |
| CN105920028A (zh) * | 2016-04-26 | 2016-09-07 | 广东药学院 | 一种多糖类成分及其制备方法及应用 |
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2022
- 2022-01-13 CN CN202210037915.4A patent/CN114276472A/zh active Pending
Patent Citations (2)
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