CN114272267A - 鹿血浆的用途 - Google Patents

Abstract

本发明涉及药材应用技术领域，尤其涉及鹿血浆的用途。本发明提供了鹿血浆在制备促进创面皮肤再生的产品中的应用。本发明将鹿血浆冻干粉用于疤痕形成伤口的治疗，可以显著抑制疤痕形成，包括促进毛囊再生、皮脂腺再生、真皮再生以及胶原合成与成熟。

Description

鹿血浆的用途

技术领域

本发明涉及药材应用技术领域，尤其涉及鹿血浆的用途。

背景技术

疤痕是皮肤创伤修复和愈合过程的产物。除表浅的伤口可以通过该简单的上皮形成修复外，任何深达真皮和皮下组织的损伤，都会通过疤痕形成来修复。形成的疤痕组织典型特征是缺乏毛囊、皮脂腺等皮肤附属器形成、真皮胶原呈平行状排列。全世界每年有至少2％的人因外伤或手术而留下疤痕，从手术后形成的细小疤痕到过度纤维化形成的增生性疤痕，都严重影响着患者的生活质量，不仅有损容貌外观，影响局部组织功能，严重的会导致器官衰竭。皮肤疤痕的治疗，目前多采用手术切除，皮质类固醇。抗代谢药、免疫抑制剂，放射、激光治疗以及冷冻、加压疗法、硅胶凝胶膜外贴等综合治疗，但效果不够理想。因此，在上述背景情况下，再生医学越来越受到关注，现如今急需开发能够诱导创伤后无疤痕形成并促进皮肤再生的药物或策略。

鹿是我国传统典籍上记载的重要动物药材资源，鹿茸、鹿血皆可入药，鹿血在中医临床上有重要地位，中医记载鹿血性热，味甘咸，归肝、肾二经，具有养血益精，消肿疗伤的功效，而且在俄罗斯、韩国、日本和东南亚民间医学中也亦广泛流传，用于治疗风湿和类风湿症。现代医学通过动物试验及临床研究发现，鹿血能治疗心悸、失眠、健忘、跌伤、抗疲劳、抗衰老等，鹿血中的有效成分主要包含在鹿血浆中，鹿血浆活性因子即鹿全血经抗凝处理，利用离心分离后得到的液体，因此鹿血浆具有很好的药用价值和巨大的开发潜力，但现有技术中尚未见关于鹿血用于抑制疤痕形成或促进毛囊、皮脂腺再生方面的用途。

发明内容

有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供鹿血浆用于抑制疤痕形成或者促进毛囊、皮脂腺再生方面的用途。

本发明提供了鹿血浆在制备促进创面皮肤再生的产品中的应用。

本发明提供了鹿血浆的新用途，研究表明，鹿血浆可以有效用于皮肤伤口的治疗，可以显著抑制疤痕的形成并促进皮肤再生，包括有效促进毛囊再生、皮脂腺再生、真皮再生以及胶原合成与成熟。

本发明中，所述皮肤再生包括皮脂腺再生、毛囊再生、真皮组织再生和/或表皮组织再生。

本发明中，所述真皮组织再生包括促进胶原合成与成熟。伤口愈合过程中，真皮厚度降低、胶原纤维呈纤细的平行状排列会导致疤痕组织的形成。本发明研究表明，鹿血浆治疗后的创面部分新生真皮可见粗壮成熟的胶原组织，呈编织状排列，与正常真皮组织一致，真皮内不可见明显的疤痕组织，

本发明中，所述创面为全皮层缺损的创面。本发明所述的创面包括机械性皮肤刮伤、非机械性皮肤刮伤、皮肤烧伤、手术形成的伤口、截肢形成的伤口中至少一种。

本发明中，所述鹿血浆为梅花鹿血浆。一些实施例中，所述鹿血浆为梅花鹿的颈静脉血浆。

本发明还提供了一种促进创面皮肤再生的产品，其原料包括鹿血浆。

本发明所述的产品中包括鹿血浆冻干粉和生理盐水。

本发明所述鹿血浆冻干粉的制备方法包括：将鹿静脉血经离心取上清液，经过滤、冷冻后，干燥获得鹿血浆冻干粉。

所述鹿静脉血经抗凝处理，所述抗凝处理的抗凝剂为枸缘酸钠溶液。所述枸缘酸钠溶液中，枸缘酸钠的浓度为0.109mol/L。所述抗凝剂与鹿静脉血的体积比为1:9。

所述离心的条件包括4℃，3000rmp离心20min。

所述过滤采用0.22微米滤膜过滤。

所述冷冻包括-80℃冷冻过夜。即-80℃冷冻8～12h。

所述干燥采用真空冷冻干燥，所述冷冻机预冷温度为-45℃。

所述干燥结束后，冻干产物进行低温粉碎，获得鹿血浆冻干粉。

所述鹿血浆冻干粉密封后于湿度不超过50％的干燥处室温保存。

本发明所述产品中，鹿血浆冻干粉和生理盐水的质量-体积比为1g：(10～20)mL。

本发明所述的产品的剂型为溶液剂、洗剂、乳剂、粉剂、软膏剂或糊剂。

本发明还提供了一种促进创面皮肤再生的方法，其为给予本发明所述的产品。

本发明提供了鹿血浆在制备促进创面皮肤再生的产品中的应用。本发明将鹿血浆冻干粉用于疤痕形成伤口的治疗，可以显著抑制疤痕形成，包括促进毛囊再生、皮脂腺再生、真皮再生以及胶原合成与成熟。

附图说明

图1示生理盐水组、牛血浆组、鹿血浆组于第0天、第3天、第14天、第21天时对SD大鼠创面愈合的治疗结果观察；

图2示生理盐水组、牛血浆组、鹿血浆组治疗效果第21天Masson’s Trichrome检测对比；

图3示生理盐水组、牛血浆组、鹿血浆组对皮肤腺体再生(A-C)与真皮再生(D-F)的治疗效果检测对比；

图4示生理盐水组、牛血浆组、鹿血浆组治疗后再生毛囊数量的比较，***示p<0.001；

图5示生理盐水组、牛血浆组、鹿血浆组治疗后再生皮脂腺数量的比较,***示p<0.001；

图6示生理盐水组、牛血浆组、鹿血浆组治疗后表皮厚度的比较,**示p<0.01；

图7示生理盐水组、牛血浆组、鹿血浆组治疗后真皮厚度的比较,*示p<0.05,***示p<0.001。

具体实施方式

本发明提供了鹿血浆的用途，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。

本发明采用的试材皆为普通市售品，皆可于市场购得。下面结合实施例，进一步阐述本发明：

实施例1鹿血浆与牛血浆冻干粉的制备

条件：制备鹿血浆与牛血浆过程中所用到的均为无菌器皿。

1.采血：选取健康状态优良的梅花鹿与牛，于脖颈处碘酒消毒后采集新鲜鹿颈静脉血，鹿血直接采集至含有抗凝剂(枸缘酸钠)的无菌采血袋中，立即轻轻混匀，抗凝剂与采集血量的比例为：1:9。采集好的鹿血与牛血置于冰盒中运回实验室，于6小时内处理。

2.离心过滤：采集的新鲜鹿血与牛血转移至干净无菌的离心管中，低温离心机4℃下3000rmp离心20min，小心收集上清液，0.22微米滤膜过滤去除杂质与细菌，获得无菌鹿血与牛血浆。

3.冷冻：将过滤的血浆置于干净无菌的浅口硅化玻璃皿中，封口膜封口后水平置于-80℃超低温冰箱，冷冻过夜。

4.干燥：提前打开真空冷冻干燥机预冷至-45℃，将冷冻的鹿血浆放入真空冷冻干燥机进行干燥，干燥结束后进行低温粉碎，获得鹿血浆冻干粉，密封后于湿度不超过50％的干燥处室温保存。

实施例2鹿血浆治疗大鼠背部皮肤全皮层缺损

1.复水化：取上述鹿/牛血浆冻干粉样品，按照质量体积比1g：10～20mL的比例加入0.9％氯化钠注射液，混匀直至血浆溶解，制成血浆水化液。

2.选取健康雄性SD大鼠30只，体重180g-200g，分为三组，每组10只：组1生理盐水组；组2牛血浆治疗组；组3鹿血浆治疗组(所述鹿//牛血浆来自于实施例1)。

3.水合氯醛腹腔注射麻醉SD大鼠，背部脱毛后使用一次性无菌皮肤活检器制作1.2cm×1.2cm的圆形全皮层缺损。所有大鼠背部伤口制作位置基本一致，均沿背中线制作伤口。

4.组1背部伤口给予生理盐水治疗，组2背部伤口给予牛血浆水化液治疗，组3背部伤口给予鹿血浆水化液治疗，治疗方式为伤口处局部涂抹，每隔一天给药一次，给药量为500微升/次。观察拍照。

5.如图1所示，第3天可见组1、组2组3伤口表面均覆盖血痂；第14天可见三组伤口创面明显缩小，组1组2沿背中线向中心收缩明显，创面呈条状，组3伤口周围组织无明显收缩痕迹，创面呈圆形，由此推测鹿血浆能够抑制伤口周围组织收缩，从而防止疤痕形成，促进伤口组织再生。第21天肉眼可见三组伤口创面均修复完成，表皮覆盖伤口表面，结痂脱落，采集伤口及周围组织样品进行组织学检测。

6.组织学检测结果(图2～3)：组1组2伤口皮肤表皮无腺体再生，真皮组织由典型的疤痕组织代替，即胶原纤维呈纤细的平行状排列，真皮厚度降低，并缺乏毛囊皮脂腺等附属器官。而组3鹿血浆治疗组组织学检测可见伤口组织处无疤痕形成，表现为皮肤再生，再生了大量皮肤腺体，包括毛囊、皮脂腺，新生真皮可见粗壮成熟的胶原组织，呈编织状排列，与正常真皮组织一致，真皮内不可见明显的疤痕组织，真皮再生，鹿血浆能够显著促进胶原合成与成熟；

7.对各组治疗后再生毛囊数量、治疗后再生皮脂腺数量、治疗后表皮厚度和治疗后真皮厚度，进行统计分析。结果表明(图4～7)，鹿血浆与生理盐水、牛血浆相比，具有明显的优势，能够显著抑制瘢痕形成，再生皮肤组织，各组数据经统计学分析，差异存在显著性。

以上仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.鹿血浆在制备促进创面皮肤再生的产品中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述皮肤再生包括皮脂腺再生、毛囊再生、真皮组织再生和/或表皮组织再生。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述真皮组织再生包括促进胶原合成与成熟。

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述创面为全皮层缺损的创面。

5.根据权利要求1～4任一项所述的应用，其特征在于，所述鹿血浆为梅花鹿血浆。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述鹿血浆为梅花鹿的颈静脉血浆。

7.一种促进创面皮肤再生的产品，其特征在于，其原料包括鹿血浆。

8.根据权利要求7所述的产品，其特征在于，其包括鹿血浆冻干粉和生理盐水。

9.根据权利要求8所述的产品，其特征在于，所述鹿血浆冻干粉的制备方法包括：将鹿静脉血经离心取上清液，经过滤、冷冻后，干燥获得鹿血浆冻干粉。

10.根据权利要求8所述的产品，其特征在于，鹿血浆冻干粉和生理盐水的质量-体积比为1g：(10～20)mL。

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