CN114262275A - 一种高效低毒性dna及rna脂质递送载体 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种高效低毒性DNA及RNA脂质递送载体。为了丰富核酸药物递送载体的种类以及提高核酸药物体内递送和表达效果，降低毒副作用，本发明提供一种新的特殊结构的可离子化脂质化合物，其与带负电荷的核酸的结合效果好，有效防止核酸在细胞内过早的被核酸酶降解，有利于装载核酸的脂质体穿越细胞膜，能够实现有效降解、体内快速清除，降低了核酸药物的毒副作用，可形成真正兼顾高转染效率、高表达效果以及低毒性的核酸药物递送载体。
Description
技术领域
本发明属于核酸药物递送载体技术领域，具体涉及一种高效低毒性DNA及RNA脂质递送载体。
背景技术
目前，脂质递送载体已被广泛用于药物递送，尤其是随着核酸药物的发展，脂质递送载体的应用迅速扩大。由于核酸分子自身带有负电荷，不利于细胞膜作用，细胞渗透能力差，而进入组织或细胞中的处于裸露状态的核酸又极易被核酸酶降解，核酸转染不仅要求将具有生物功能的核酸成功转运至细胞内，还需保证核酸在细胞内能够维持其生物功能。研究和临床应用中常用的载体包括病毒载体和非病毒载体，脂质载体属于非病毒载体，相比病毒载体具有更高的核酸转染效率，更低的细胞毒性，更便捷的制备工艺，实用性更高，因此受到越来越多的关注。
随着研究的深入，相关研究人员积极开发了多种脂质体载体，不断提升安全性和高效性。早期最常见的阳离子脂质化合物形成的载体，其过程是：通过带正电荷的阳离子脂质化合物与带有负电荷的核酸形成脂质体-核酸药物复合物，阳离子脂质体-核酸药物复合物表面的整体带有正电荷，通过静电相互作用吸附到带负电荷的细胞表面，通过细胞内吞作用进入细胞，形成内涵体。阳离子脂质体中的阳离子脂质与内涵体中带负电荷的脂质发生静电相互作用，带负电荷的脂质由内涵体的腔外翻转到腔内，与正电荷脂质形成中性离子对，核酸类药物脱离阳离子脂。2018年，FDA批准了第一种siRNA药物(patisiran[Onpattro])，该核酸药物采用的递送载体为Dlin-MC3-DMA脂质体。最近，随着研究发现可离子化脂质因其能够响应环境中的pH，更改其所带的电性，因而备受关注。
尽管可离子化脂质用于药物输送取得了最新的进展，在包封效率、核酸表达、细胞毒性等方面相比病毒载体和其他类型的非病毒载体表现出明显的优势，但是目前可以供应用的可离子化脂质分子依然很少，而且其中多数存在容易分布到肝脏器官中而增加肝脏的代谢负担因而产生毒副作用等问题。因此，仍然需要探索更多的适合于核酸药物应用的脂质化合物，开发真正兼顾高转染效率、高表达效果以及低毒性的核酸药物递送载体。
发明内容
本发明的目的是提供一种制备方法简单、易与核酸结合且易降解的可离子化脂质化合物，其丰富了可离子化脂质化合物的种类，为核酸药物递送提供了更多的选择。
本发明的另一目的是提供一种递送载体，该递送载体为高效且低毒性的用于递送DNA及RNA的脂质递送载体。该递送载体以及包封在所述的递送载体中的核酸分子组成药物组合物，保证了核酸药物的活性而且核酸分子的表达效率高，同时显著降低药物在肝脏中的分布。
为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案：
通式(I)、通式(Ⅱ)所示的可离子化脂质化合物，
其中，
通式(I)中，G1为C1-C10直链亚烷基，G2为-OC(＝O)R、-C(＝O)OR或-C(＝O)NHR，R为C5-C20直链烷基或
R1为氢、甲基、乙基或异丙基，m为1～10之间的整数，n为1～5之间的整数，f为1～5之间的整数；
通式(Ⅱ)中，G3为C1-C10直链亚烷基，G4为-OC(＝O)R’、-C(＝O)OR’或-C(＝O)NHR’，R’为
R2和R3独立地为氢、甲基、乙基或异丙基，q为1～3之间的整数。
优选地，所述的G1为C2-C8直链亚烷基。
优选地，所述的G3为C5-C10直链亚烷基。
优选地，所述的R1为氢。
优选地，所述的m为3～8之间的整数，进一步优选为4～6之间的整数。
优选地，所述的f为1～4之间的整数，进一步优选为2或3。
优选地，所述的R为C5-C15直链烷基或
优选地，所述的G2为-C(＝O)OR。
优选地，所述的G4为-C(＝O)OR’。
优选地，所述的R2和所述的R3中一个为氢，另一个为甲基、乙基或异丙基。
进一步优选地，所述的R2和所述的R3中一个为氢，另一个为甲基。
再进一步优选地，所述的R2为甲基，所述的R3为氢。
根据一些具体且优选地实施方式，所述的可离子化脂质化合物为以下化合物中的一种或多种：
本发明还提供一种递送载体，所述的递送载体包括所述的通式(I)和通式(Ⅱ)所示的可离子化脂质化合物中的一种或多种。
优选地，所述的递送载体还包括辅助性分子。
进一步优选地，所述的可离子化脂质化合物和所述的辅助性分子的投料摩尔比为(0.1～1)：(0.1～1)，进一步优选为(0.5～1)：(0.5～1)。
所述的辅助性分子可以是本领域中常用的辅助性分子。
优选地，所述的辅助性分子包括人工合成的或自然来源的辅助脂质或类脂分子、任何种属的动物来源以及任何种类的细胞或囊泡(包含外泌体)或其组成部分、多肽分子、聚合物分子、糖类分子或无机物中的一种或多种。
进一步优选地，所述的辅助性分子包括胆固醇、卡泊三醇、豆甾醇、β-谷甾醇、羽扇豆醇、白桦脂醇、熊果酸、齐墩果酸、二油酰基磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰胆碱、1-硬脂酰基-2-油酰基卵磷脂、二油酰磷脂酰乙醇胺、(1,2-二油氧基丙基)三甲基氯化铵、双十烷基二甲基溴化铵、1,2-二肉豆蔻酰基-sn-甘油-3-乙基磷酸胆碱、二棕榈酰磷脂酰乙醇胺-甲氧基聚乙二醇5000、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000、活性炭、二氧化硅以及磷酸钙中的一种或多种。
优选地，所述的可离子化脂质化合物和/或所述的辅助性分子可选择性地带有靶向物质修饰。
再进一步优选地，所述的靶向物质包括叶酸、单链抗体或靶向多肽中的一种或多种。
本发明中，可使用本领域中常规的方法进行靶向物质修饰可离子化脂质化合物或辅助性分子。
根据一些实施方式，可将Mal-PEG2000-DSPE与多肽溶于超纯水中，搅拌反应48h，透析浓缩得到多肽-PEG2000-DSPE，即可得到具有靶向性的辅助性分子。
进一步地，将可电离脂质分子：胆固醇：DOPE：多肽-PEG2000-DSPE溶解于无水乙醇中，与DNA或RNA混合形成多肽修饰的脂质体。
优选地，所述的递送载体为纳米脂质颗粒。
进一步优选地，所述的纳米颗粒制剂的平均尺寸为50nm～200nm。
再进一步优选地，所述的纳米颗粒制剂的平均尺寸为50nm～150nm。
进一步地，所述的纳米颗粒制剂的多分散指数≤0.4。
再进一步地，所述的纳米颗粒制剂的多分散指数≤0.3。
本发明所述的递送载体以及包封在所述的递送载体中的核酸分子一起组成核酸药物组合物。
优选地，所述的核酸分子为pDNA、siRNA、ASO或mRNA中的一种或多种。
优选地，所述的核酸分子和所述的递送载体的质量比为1:(5～50)；进一步为1:(5～40)，再进一步优选为1:(5～30)。
优选地，所述的核酸药物组合物包括药物可用的添加剂，所述的添加剂包括赋形剂、稳定剂或稀释剂中的一种或多种。
进一步地，所述的添加剂包括但不限于蔗糖、海藻糖或其他稳定剂。
具体地，所述的添加剂的添加量为所述的药物组合物的总质量的1％～20％。
优选地，所述的核酸药物组合物可以为冻干粉或为注射剂，所述的注射剂通过肌肉、皮下、内皮、瘤内以微针、注射或灌注方式局部给药，或通过静脉注射方式给药。
本发明与现有技术相比具有如下优势：
本发明提供了一种新的可离子化脂质化合物，丰富了可离子化脂质化合物种类，其形成的递送载体具有包封效率高且毒性低的优点，能够将核酸药物在体内高效递送并高效表达，从而为核酸药物递送提供了更多选择，对核酸药物的发展和应用具有重要的意义。
附图说明
图1为化合物a的氢谱图；
图2为化合物b的氢谱图；
图3为化合物1-1的氢谱图；
图4为化合物2-1的氢谱图；
图5为化合物3-1的氢谱图；
图6为化合物1的氢谱图；
图7为化合物1的高分辨质谱图；
图8为化合物2的氢谱图；
图9为化合物2的高分辨质谱图；
图10为化合物3的氢谱图；
图11为化合物3的高分辨质谱图；
图12为实施例4中制备的纳米脂质颗粒的粒径分布图；
图13为实施例5中Lipid-01脂质体小鼠体内递送效果；
图14为实施例5中Lipid-02脂质体小鼠体内递送效果；
图15为实施例5中Lipid-03脂质体小鼠体内递送效果。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步描述。但本发明并不限于以下实施例。实施例中采用的实施条件可以根据具体使用的不同要求做进一步调整，未注明的实施条件为本行业中的常规条件。本发明各个实施方式中所涉及到的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互组合。
为了降低药物成分在累积在肝脏器官中表达而产生的毒副作用、降低核酸药物递送载体的生产成本以及提高核酸药物体内递送和表达效果，发明人进行了大量研究和实验验证，开发了一种新的可离子化脂质化合物，其能够形成真正兼顾高转染效率、高表达效果以及低毒性的核酸药物递送载体。
具体地，在本发明中，所述的可离子化脂质化合物为通式(I)、通式(Ⅱ)所示的化合物：
其中，
通式(I)中，G1为C1-C10直链亚烷基，G2为-OC(＝O)R、-C(＝O)OR或-C(＝O)NHR，R为C5-C20直链烷基或
R1为氢、甲基、乙基或异丙基，m为1～10之间的整数，n为1～5之间的整数，f为1～5之间的整数；
通式(Ⅱ)中，G3为C1-C10直链亚烷基，G4为-OC(＝O)R’、-C(＝O)OR’或-C(＝O)NHR’，R’为
R2和R3独立地为氢、甲基、乙基或异丙基，q为1～3之间的整数。
通过特殊结构的可离子化脂质化合物，能够提高其与带负电荷的核酸的结合能力，可以防止核酸在细胞内过早的被核酸酶降解，有利于装载核酸的脂质体穿越细胞膜，能够实现有效降解、体内快速清除，降低了核酸药物的毒副作用。
根据本发明，递送载体包括所述的通式(I)和通式(Ⅱ)所示的可离子化脂质化合物中的一种或多种，以及选择性地包括辅助性分子。
根据本发明，递送载体为粒径为50nm～200nm的脂质纳米颗粒。
根据本发明，所述的递送载体可用于pDNA、siRNA、ASO或mRNA中的一种或多种的递送。
根据本发明，递送载体以及包封在所述的递送载体中的核酸分子组成核酸药物组合物，所述的核酸分子为pDNA、siRNA、ASO或mRNA中的一种或多种。
根据本发明，所述的核酸药物组合物可以为冻干粉或为注射剂，所述的注射剂通过肌肉、皮下、内皮、瘤内以微针、注射或灌注方式局部给药，或通过静脉注射方式给药。
下面结合具体实施例进一步阐述本发明的技术方案和技术效果。
以下实施例中，如无特殊说明，均为常规方法；所用的实验材料，如无特殊说明，均为常规生化试剂厂商购买得到的。
实施例1
化合物1的合成路线：
步骤1：化合物1-1的合成
将8-溴辛酸(1.139g，5.13mmol)和香茅醇(1.599g，10.25mmol)溶于二氯甲烷(60mL)，充分溶解后，加入EDC盐酸盐(0.98g，5.13mmol)和DMAP(0.125g，1.03mmol)。混合物在常温条件下搅拌18小时。反应结束后，用DCM(200mL)稀释，并用饱和的NaHCO3(100mL)和盐水(100mL)洗涤。合并有机层用无水Na2SO4干燥，真空除去溶剂，得到粗产品，将粗产品通过色谱法(硅胶柱，洗脱剂为含有0.5％EA(体积百分比)的石油醚)纯化，并将纯产物蒸发，得到浅黄色油状化合物(0.648g，35％)，化合物1-1的氢谱见图3。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:5.09(s,1H),4.18-4.01(m,2H),3.40(t,J＝6.8Hz,2H),2.29(t,J＝7.4Hz,2H),1.98(s,2H),1.84(dd,J＝14.3,7.0Hz,2H),1.70-1.60(m,9H),1.38(d,J＝37.7Hz,9H),0.89(t,J＝12.9Hz,4H).
步骤2：化合物1的合成
将2-(双(2-氨基乙基)氨基)乙-1-醇)(化合物a，0.044g，0.30mmol，氢谱见图1)和6-溴己酸3,7-二甲基辛-6-烯酯(0.398g，1.2mmol)加入反应瓶中溶于THF/CH3CN(1:1，6mL)，之后再加入DIPEA(0.155g，1.20mmol)。反应物在63℃条件下搅拌72h，反应冷却至室温后，真空除去溶剂。粗产品用乙酸乙酯和饱和的NaHCO3萃取，合并有机层用无水Na2SO4干燥，真空除去溶剂，得到粗产品，将粗产品通过色谱法(硅胶柱，洗脱剂为含有2％甲醇(体积百分比)二氯甲烷)纯化，并将纯产物蒸发，得到黄色油状化合1(25.7mg，收3.6％)。化合物1的氢谱见图6，质谱见图7。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ5.09(s,4H),4.10(dd,J＝12.6,6.5Hz,8H),3.61(d,J＝21.6Hz,2H),3.19(s,1H),3.03(s,1H),2.98-2.92(m,1H),2.82(s,4H),2.67(s,4H),2.28(t,J＝7.5Hz,8H),2.03-1.93(m,8H),1.74-1.50(m,49H),1.36(ddd,J＝44.4,23.9,10.0Hz,39H),1.23-1.13(m,4H),0.91(d,J＝6.5Hz,12H).
实施例2
化合物2的合成路线
步骤1：化合物2-1的合成
将亚麻醇(0.267g，1mmol)和三乙胺(0.133g，1.3mmol)加入反应瓶中冰水浴，加入二氯甲烷(6mL)，将丙烯酰氯(0.11g，1.2mmol)溶于二氯甲烷(2.2mL)，缓慢滴加入反应瓶中，反应持续10分钟，该反应保持在10℃以下，最后冰浴移除，反应液在室温条件下反应2小时。用饱和食盐水洗涤，得到粗产物，将粗产品通过色谱法(硅胶柱，洗脱剂为含有0.5％EA(体积百分比)的石油醚)纯化，并将纯产物蒸发，得到浅黄色油状化合物2-1(0.173g，收率：50％)，化合物2-1的氢谱见图4。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:6.41(dd,J＝17.3,1.5Hz,1H),6.13(dd,J＝17.3,10.4Hz,1H),5.82(dd,J＝10.4,1.5Hz,1H),5.47-5.26(m,4H),4.16(t,J＝6.7Hz,2H),2.78(t,J＝6.5Hz,2H),2.06(dd,J＝13.6,6.7Hz,4H),1.75-1.60(m,2H),1.39–1.17(m,16H),0.88(dt,J＝10.4,5.3Hz,3H).
步骤2：化合物2的合成
将1,3-二氨基-2-丙醇(化合物b，0.04504g，0.50mmol，氢谱见图2)和2-烯丙酸(9Z，12Z)-十八碳二烯酯(0.64g，2mmol)加入反应瓶中，在80℃下反应48小时。反应冷却至室温后，真空除去溶剂，得到粗产品，将粗产品通过色谱法，将粗产品通过色谱法(硅胶柱，洗脱剂为含有0.3％甲醇(体积百分比)二氯甲烷)纯化，并将纯产物蒸发，得到浅黄色油状化合2(20.58mg，收率3％)。化合物2的氢谱见图8，质谱见图9。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ5.45-5.32(m,16H),4.09(t,J＝6.8Hz,8H),3.78(d,J＝20.7Hz,1H),3.51(d,J＝27.2Hz,1H),2.81(t,J＝6.4Hz,16H),2.49(s,10H),2.09(q,J＝6.8Hz,16H),1.69-1.60(m,8H),1.41-1.30(m,66H),0.93(t,J＝6.8Hz,12H).
实施例3
化合物3的合成路线
步骤1：化合物3-1的合成
将6-溴己酸(1.0g，5.13mmol)和十一醇(1.77g，10.25mmol)溶于二氯甲烷中(60mL)，加入EDC盐酸盐(0.98g，5.13mmol)和DMAP(0.125g，1.03mmol)。混合物在常温条件下搅拌18小时。反应结束后，用DCM(200mL)稀释，并用饱和的NaHCO3(100mL)和盐水(100mL)洗涤。合并有机层用无水Na2SO4干燥，真空除去溶剂，得到粗产品，将粗产品通过色谱法(硅胶柱，洗脱剂为含有0.5％EA(体积百分比)的石油醚)纯化，并将纯产物蒸发，得到浅黄色油状化合物3-1(0.69g，收率38.6％)。化合物3-1的氢谱见图5。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ:4.10(t,J＝6.6Hz,2H),3.45(t,J＝6.7Hz,2H),2.36(t,J＝7.3Hz,2H),1.97-1.88(m,2H),1.68(tt,J＝14.5,7.3Hz,4H),1.53(dd,J＝15.1,7.9Hz,2H),1.33(d,J＝16.9Hz,16H),0.92(t,J＝6.5Hz,3H).
步骤2：化合物3的合成
将1,3-二氨基-2-丙醇(0.027g，0.30mmol)和6-溴己酸十一酯(0.417g，1.20mmol)溶于THF/CH3CN(1:1，6mL)，之后再加入DIPEA(0.155g，1.20mmol)。反应物在63℃条件下搅拌72h，反应冷却至室温后，真空除去溶剂。粗产品用乙酸乙酯和饱和的NaHCO3萃取，合并有机层用无水Na2SO4干燥，真空除去溶剂，得到粗产品，将粗产品通过色谱法，将粗产品通过色谱法将粗产品通过色谱法(硅胶柱，洗脱剂为含有1％甲醇(体积百分比)二氯甲烷)纯化，并将纯产物蒸发，得到浅黄色油状化合3(47.72mg，收率4.1％)。化合物3的氢谱见图10，质谱见图11。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ5.30(s,1H),4.05(t,J＝6.8Hz,8H),3.68(s,1H),2.47(s,8H),2.30(t,J＝7.5Hz,8H),1.62(dd,J＝15.1,7.7Hz,16H),1.47(s,6H),1.28(d,J＝16.8Hz,78H),0.88(t,J＝6.8Hz,12H).
实施例4：
制备纳米脂质颗粒并测试其粒径和电位。
纳米脂质颗粒的制备方法：
(1)按照可离子化化合物：DSPC：DMG-PEG2000：胆固醇为50:10:1.5:38.5(摩尔比)，以无水乙醇作为溶剂，配制脂质体溶液，控制各组分浓度之和为50mM，溶解混匀后放置-20℃保存、备用。
(2)使用pH为5.2左右的25mM的醋酸钠缓冲液溶解mRNA，配制终浓度约为0.1mg/mL的核酸制剂。
(3)将脂质体溶液和核酸制剂以两相体积比约为4:1，两相溶液总速率为12mL/min条件下，通过手工涡旋的方式将两相溶液混匀形成纳米脂质体颗粒溶液后，立即用pH为7.2的PBS缓冲液或pH为7.4的醋酸钠缓冲液将其稀释20倍体积后，利用10KD的超滤管进行浓缩，离心机的转速不要超过超滤管的最高转速限制，经过2～3次换液之后，纳米脂质体颗粒的溶液环境由pH为5.2转变成7.2，最后将纳米脂质体颗粒溶液浓缩至终浓度为200mM左右，保存于4℃环境下备用。
将纳米脂质体颗粒溶液用1×PBS稀释50倍之后，利用Zetasizer Nano ZS(Malvern,Worcestershire,UK)检测纳米脂质体颗粒的粒径，PDI。
将纳米脂质体颗粒稀释到15mM的PBS中测定Zeta电位。
利用Quant-It RiboGreenRNA定量检测试剂盒在Modulus微孔型多功能检测仪上进行包封率的测定。
粒径、PDI、包封率及电位的检测结果如表1和图12所示。
表1
实施例5：脂质体动物体内转染实验：
使用表达Luciferase荧光蛋白的mRNA，按照实施例4的制备方法制备纳米脂质颗粒，其中mRNA的用量为120μg，可电离化脂质体化合物、DSPC、DMG-PEG2000及胆固醇的总量为1200μg，采用400μL的中性PBS缓冲液快速转换脂质体环境。
将上述制备的纳米脂质颗粒迅速通过肌肉注射(IM)到6-8周雌性Babl/c小鼠的后肢内侧肌肉中，左右后肢分别注射30μg的mRNA。注射后不同时间段，分别通过小动物成像仪观察注射后小鼠体内荧光素酶的表达情况。
将上述制备的纳米脂质颗粒迅速通过尾静脉注射(IV)到6-8周雌性Babl/c小鼠的体内，mRNA注射量为60μg。注射后不同时间段，分别通过小动物成像仪观察注射后小鼠体内荧光素酶的表达情况。
在4h后，将小鼠的心、肝、脾、肺、肾分别进行荧光成像。
Lipid-01脂质体小鼠体内递送效果见图13，结果显示：肌肉注射4小时后荧光表达能够达到7×107，小鼠的各个器官成像可以看出，肌肉注射后在器官中的荧光表达主要集中在脾脏(80％)部位，静脉注射之后，荧光分布在肝脏(63％)、脾脏(31％)和肺部(6％)，表明Lipid-01肌肉注射具有较好的脾脏靶向性。
Lipid-02脂质体小鼠体内递送效果见图14，结果显示：肌肉注射6小时后荧光表达约为107，通过小鼠的各个器官成像可以看出，静脉注射之后在器官中的荧光主要分布在肝脏部位，而肌肉注射之后小鼠的肝脏荧光表达量明显较低，表明，Lipid-02更适合用于肌肉注射。
Lipid-03脂质体小鼠体内递送效果见图15，结果显示：肌肉注射4小时后荧光表达约为107，通过小鼠的各个器官成像可以看出，肌肉注射和静脉注射之后在器官中的荧光都集中在脾脏部位，表明Lipid-03肌肉注射和静脉注射都具有较好的脾脏靶向性。
以上对本发明做了详尽的描述，其目的在于让熟悉此领域技术的人士能够了解本发明的内容并加以实施，并不能以此限制本发明的保护范围，凡根据本发明的精神实质所作的等效变化或修饰，都应涵盖在本发明的保护范围内。
Claims (11)
1.通式(I)、通式(Ⅱ)所示的可离子化脂质化合物，
其中，
通式(I)中，G1为C1-C10直链亚烷基，G2为-OC(＝O)R、-C(＝O)OR或-C(＝O)NHR，R为C5-C20直链烷基或
R1为氢、甲基、乙基或异丙基，m为1～10之间的整数，n为1～5之间的整数，f为1～5之间的整数；
通式(Ⅱ)中，G3为C1-C10直链亚烷基，G4为-OC(＝O)R’、-C(＝O)OR’或-C(＝O)NHR’，R’为
R2和R3独立地为氢、甲基、乙基或异丙基，q为1～3之间的整数。
2.根据权利要求1所述的可离子化脂质化合物，其特征在于，所述的G1为C2-C8直链亚烷基；
和/或，所述的G3为C5-C10直链亚烷基；
和/或，所述的R1为氢；
和/或，所述的m为3～8之间的整数，
和/或，所述的f为1～4之间的整数；
和/或，所述的R为C5-C15直链烷基或
3.根据权利要求1所述的可离子化脂质化合物，其特征在于，所述的G2为-C(＝O)OR；
和/或，所述的G4为-C(＝O)OR’；
和/或，所述的R2为甲基，所述的R3为氢。
4.根据权利要求1所述的可离子化脂质化合物，其特征在于，所述的可离子化脂质化合物为以下化合物中的一种或多种：
5.一种递送载体，其特征在于，所述的递送载体包括权利要求1至4中任一项所述的通式(I)和通式(Ⅱ)所示的可离子化脂质化合物中的一种或多种。
6.根据权利要求5所述的递送载体，其特征在于，所述的递送载体还包括辅助性分子，所述的可离子化脂质化合物和所述的辅助性分子的投料摩尔比为(0.1～1)：(0.1～1)；所述的辅助性分子包括人工合成的或自然来源的辅助脂质/类脂分子、任何种属的动物来源以及任何种类的细胞或囊泡(包含外泌体)或其组成部分、多肽分子、聚合物分子、糖类分子或无机物中的一种或多种。
7.根据权利要求6所述的递送载体，其特征在于，所述的辅助性分子包括胆固醇、卡泊三醇、豆甾醇、羽扇豆醇、β-谷甾醇、白桦脂醇、熊果酸、齐墩果酸、二油酰基磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰胆碱、1-硬脂酰基-2-油酰基卵磷脂、二油酰磷脂酰乙醇胺、(1,2-二油氧基丙基)三甲基氯化铵、双十烷基二甲基溴化铵、1,2-二肉豆蔻酰基-sn-甘油-3-乙基磷酸胆碱、二棕榈酰磷脂酰乙醇胺-甲氧基聚乙二醇5000、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000、活性炭、二氧化硅以及磷酸钙中的一种或多种。
8.根据权利要求5所述的递送载体，其特征在于，所述的递送载体为纳米脂质颗粒，所述的纳米脂质颗粒的粒径为50nm～200nm。
9.根据权利要求8所述的递送载体，其特征在于，所述的递送载体能够递送核酸分子，所述的核酸分子包括但不限于质粒DNA(pDNA)、siRNA、ASO或mRNA中的一种或多种；和/或，所述的核酸分子和所述的递送载体的质量比为1:(5～50)。
10.根据权利要求9所述的递送载体，其特征在于，所述的递送载体和所述的核酸分子组成核酸药物组合物，所述的核酸药物组合物包括药物可用的添加剂，所述的添加剂包括赋形剂、稳定剂或稀释剂中的一种或多种。
11.根据权利要求1或9所述的递送载体，其特征在于，所述的递送载体或所述的核酸药物组合物为冻干粉剂或注射剂，通过肌肉、皮下、内皮、瘤内以微针、注射或灌注方式局部给药，或通过静脉注射方式给药。
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