CN114231535A

CN114231535A - 木薯MeRSZ21b基因在提高植物抗干旱胁迫中的应用

Info

Publication number: CN114231535A
Application number: CN202111421806.4A
Authority: CN
Inventors: 王振宇; 陈衍行; 李聪; 顾进宝; 李阳
Original assignee: Nanfan Seed Industry Research Institute Guangdong Academy Of Sciences
Current assignee: Nanfan Seed Industry Research Institute Guangdong Academy Of Sciences
Priority date: 2021-11-26
Filing date: 2021-11-26
Publication date: 2022-03-25
Anticipated expiration: 2041-11-26
Also published as: CN114231535B

Abstract

本发明公开了一种木薯MeRSZ21b基因在提高植物抗干旱胁迫中的应用，所述木薯MeRSZ21b基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；或为与SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列完全互补配对的核苷酸序列；或为编码氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。MeRSZ21b基因通过减少超氧自由基和维持渗透压在干旱反应的调节中发挥积极作用，在植物抗干旱胁迫领域将有着广阔的应用前景和巨大的经济效益潜力。

Description

木薯MeRSZ21b基因在提高植物抗干旱胁迫中的应用

技术领域

本发明属于作物遗传育种技术领域，更具体地，本发明涉及一种木薯MeRSZ21b基因在提高植物抗干旱胁迫中的应用。

背景技术

近年来，随着全球气候变暖和人类活动的加剧，干旱、洪涝、高温和霜冻等极端天气发生的频率和数量逐渐增加，其对农业生产的威胁日趋严峻。目前干旱、高温被认为是导致农作物减产和绝产的两大主要非生物胁迫因子。外界空气过干或土壤含水量过低均可导致植物因缺水而形成干旱胁迫，其对植物的生长和发育具有严重的抑制作用。

最新数据显示，由于气候变化导致的温度升高和水资源匮乏已经成为一个亟待解决的全球性难题，全球每年有近50％的陆地受到干旱的影响，其中大部分都是农业区，主要分布于非洲、亚洲、北美西部、南美西部和澳大利亚部分地区。近10年来由于干旱造成的农作物减产损失已达到300亿美元，人口的不断增产，农业用水需求的增加以及可利用淡水量的降低，进一步加剧了干旱对农业生产的影响。

干旱作为植物生长过程中的主要制约因素之一，会阻碍植物的呼吸作用、光合作用和气孔运动，进而影响植物的生长发育和生理代谢。植物为应对水分亏缺会启动自身的干旱响应机制，如通过形态结构的改变、抗旱基因的表达、激素与渗透调节物质的合成等来缓解干旱逆境。缺水条件下，植物会表达抗旱调控基因和功能基因，进而编码功能性蛋白和有机分子合成酶，调节干旱信号转导并参与激素、渗透物质等的合成与积累，来帮助植物响应缺水逆境。

木薯作为热带地区第三大粮食作物，也是全球第六大粮食作物，被称为淀粉之王。木薯在世界范围主要分布热带和亚热带地区，如非洲、亚洲和美洲。木薯原产于巴西，目前国内主要分布在广西、广东和海南等地。其具有高产，耐旱耐盐，易栽培，病虫害少，品种多等优点。木薯既可以作为食品食用，也可以作为饲料、淀粉工业、燃料工业的原料。作为热带作物，食用木薯需要种植于无霜期8个月左右、年平均温度18℃及以上地区。除了食用和工业价值外，木薯还具有一定的保健功能，如治疗疮疡、抗癌、抗糖尿病高血压和抗氧化等。

从木薯中发掘和克隆抗旱基因，有助于为植物的抗旱选育、品种改良提供指导。

发明内容

基于此，本发明的目的之一在于提供木薯MeRSZ21b基因的应用，该木薯MeRSZ21b基因可以提高植物对干旱的抗性。

实现上述发明目的的具体技术方案包括如下：

木薯MeRSZ21b基因在提高植物抗干旱胁迫中的应用，所述木薯MeRSZ21b基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；或为与SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列完全互补配对的核苷酸序列；或为编码氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。

本发明还提供了上述木薯MeRSZ21b基因编码的剪接因子在提高植物抗干旱胁迫中的应用。

木薯MeRSZ21b基因编码的剪接因子在提高植物抗干旱胁迫中的应用，所述剪接因子的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

本发明还提供了插入有木薯MeRSZ21b基因的重组表达载体，所述木薯MeRSZ21b基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；或为与SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列完全互补配对的核苷酸序列；或为编码氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。

本发明还提供了插入有上述重组表达载体的重组菌。

本发明还提供了插入有上述重组表达载体的转基因细胞系。

本发明还提供了上述重组表达载体、重组菌、或转基因细胞系在提高植物抗干旱胁迫中的应用。

本发明还提供了上述重组表达载体、重组菌、或转基因细胞系在改良植物抗干旱胁迫的遗传育种中的应用。

在其中一些实施例中，所述植物为单子叶植物或双子叶植物。

在其中一些实施例中，所述植物为烟草、水稻、小麦、玉米、黄瓜、番茄、杨树、草坪草或苜宿。

本发明还提供了一种提高植物抗干旱胁迫的方法，该方法包括提高木薯MeRSZ21b基因的表达，所述木薯MeRSZ21b基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；或为与SEQ IDNO.1所示的核苷酸序列完全互补配对的核苷酸序列；或为编码氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

在本发明中，发明人利用同源克隆的方法成功克隆到了MeRSZ21b基因，并对其功能进行研究，通过转基因的方法将MeRSZ21b基因转入至重组载体中进行过表达，再转化拟南芥获得转基因植株，对转基因植株进行干旱处理后发现，转基因植株具有干旱胁迫应答的基本功能，且推测MeRSZ21b基因通过减少超氧自由基和维持渗透压在干旱反应的调节中发挥积极作用，MeRSZ21b基因在植物抗干旱胁迫领域将有着广阔的应用前景和巨大的经济效益潜力。

附图说明

图1为本发明实施例4中用山梨糖醇和脱落酸(ABA)处理的MeRSZ21基因过表达品系中的种子发芽情况。

图2为本发明实施例4中用山梨糖醇和脱落酸(ABA)处理的MeRSZ21基因过表达品系中的种子发芽率。

图3为本发明实施例5中拟南芥中土壤生长的野生型(Col-0)和MeRSZ21b基因过表达品系(MeRSZ21b-OX-1、MeRSZ21b-OX-2)的耐旱表型的代表性图像。

图4为本发明实施例5中野生型(Col-0)和MeRSZ21b基因过表达品系(MeRSZ21b-OX-1、MeRSZ21b-OX-2)脱水处理后的存活率。

图5为实施例5中野生型(Col-0)和MeRSZ21b基因过表达(MeRSZ21b-OX-1、MeRSZ21b-OX-2)植物的叶绿素含量和过氧化物酶同工酶(POD)活性。

图6为本发明实施例5中野生型(Col-0)和MeRSZ21b基因过表达(MeRSZ21b-OX-1、MeRSZ21b-OX-2)植物的超氧化物歧化酶(SOD)的活性和H₂O₂的含量。

具体实施方式

为了便于理解本发明，下面将对本发明进行更全面的描述。本发明可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施例。相反地，提供这些实施例的目的是使对本发明公开内容的理解更加透彻全面。

下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，例如Sambrook等人，分子克隆：实验室手册(NewYork:Cold Spring Harbor Laboratory Press,1989)中所述的条件，或按照制造厂商所建议的条件。实施例中所用到的各种常用化学试剂，均为市售产品。

除非另有定义，本发明所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不用于限制本发明。本发明所使用的术语“和/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。

本发明所述的木薯MeRSZ21b基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，其编码的剪接因子的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

SEQ ID NO.1

ATGGCTCGGGTTTACGTGGGGAATTTGGATCCGAGAGTCTCGGAGAGGGATCTCGAAGATGAATTCAGAATGTATGGTGTTCTTAGAAGTGTGTGGGTTGCACGAAGGCCGCCAGGATATGCGTTCGTTGAGTTTGATGATCGCAGGGATGCTATGGATGCAATTCGTGCATTGGATGGAAAGAATGGATGGCGAGTGGAACTTTCTCATAATTCCAAAGGTGGTGGAGGCCGTGGAGGTGGTGGTGGTGGGCGTGGACGGGGTGGTGAGGACTTGAAATGTTATGAATGTGGTGAACCTGGTCATTTTGCTAGAGAGTGCCGCCTGCGCATTGGGTCAAGAGGTTTGGGAAGTGGTCGTCGCCGAAGCCCCAGTCCACGACGCCGTAGAAGTCCAAGTTATGGGTATGGGCGCAGTAGGAGTCCAAGTTATGGGTATGGGCGCAGGAGTTACAGCCCTCGTGGTAGAAGATCTCCAAGACGTCGCAGTATATCACCTCGCCGAGGTCGCAGCATCAGCAGATCCCCTCCATACCGTCACGCCCGTCGTGATTCACCTTATGCTAATGGAGATTGA

SEQ ID NO.2

MARVYVGNLDPRVSERDLEDEFRMYGVLRSVWVARRPPGYAFVEFDDRRDAMDAIRALDGKNGWRVELSHNSKGGGGRGGGGGGRGRGGEDLKCYECGEPGHFARECRLRIGSRGLGSGRRRSPSPRRRRSPSYGYGRSRSPSYGYGRRSYSPRGRRSPRRRSISPRRGRSISRSPPYRHARRDSPYANGD

应理解，考虑到密码子的简并性及不同物种密码子的偏爱性，在不改变氨基酸序列的前提下，对本发明的编码基因的核苷酸序列进行修改，也属于本发明的保护范围内。

在本发明中，提供了木薯MeRSZ21b基因在提高植物对干旱的抗逆性中的应用。所述木薯MeRSZ21b基因的核苷酸序列如上述SEQ ID NO.1所示；或为与SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列完全互补配对的核苷酸序列(即在高严谨条件下可与SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列杂交的核苷酸序列)；或为如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列经末端修饰、或经取代、缺失和/或添加一个或多个核苷酸，且能编码相同功能蛋白质的核苷酸序列(即与SEQ IDNO.1所示的核苷酸序列具有70％以上、或80％以上、或90％以上、或95％以上的同源性，但能编码相同功能蛋白质的核苷酸序列)；或为编码氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。

在本发明中，还提供了上述木薯MeRSZ21b基因编码的剪接因子、插入有上述木薯MeRSZ21b基因的重组表达载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌等基因工程产品在提高植物对干旱的抗逆性中的应用。

本发明的MeRSZ21b基因在构建到植物表达载体中时，在其转录起始核苷酸前可加上任何一种增强子。为了便于对转基因植物细胞或植物进行鉴定及筛选，可对所使用的载体进行加工，如加入植物可选择性标记(GUS基因、荧光素酶基因等)或具有抗性的抗生素标记物(庆大霉素，卡那霉素等)。被转化的植物宿主既可以是单子叶植物，也可以是双子叶植物，如：烟草、水稻、小麦、玉米、黄瓜、番茄、杨树、草坪草或苜宿等。

以下结合具体实施例和附图对本发明作进一步详细的说明。

实施例1木薯MeRSZ21b基因的克隆

本实施例克隆了木薯MeRSZ21b基因，具体包括以下步骤：

(1)、合成木薯叶片cDNA

提取木薯叶片总RNA，反转录得到第一链cDNA；

(2)、PCR扩增MeRSZ21b基因

以木薯叶片cDNA为模板，根据MeRSZ21b基因序列设计引物，进行PCR扩增，得到PCR扩增产物。

引物如下：

正向引物：5'-ATGGCTCGGGTTTACGTGGGGA-3'(SEQ ID No.3)

反向引物：5'-ATCTCCATTAGCATAAGGTGAA-3'(SEQ ID No.4)

PCR反应体系和扩增条件如表1所示。

表1 PCR反应体系与扩增条件

(3)、将扩增获得的PCR产物在0.8％的琼脂糖凝胶电泳。电泳结束后，采用Qiagen公司PCR产物纯化试剂盒，按照产品说明回收纯化所述的PCR产物，并送Invitrogen测序，MeRSZ21b基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

实施例2木薯MeRSZ21b基因过表达载体的构建

包括以下步骤：

(1)、以实施例1中克隆得到的MeRSZ21b基因全长片段为模板，用含有Gateway接头序列的引物(SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6)进行PCR扩增；PCR反应体系与条件与实施例1相同。

Gateway反应引物序列如下：

MeRSZ21b_attB1_F：5'-CAAAAAAGCAGGCTTCATGGCTCGGGTTTACGTG-3'(SEQ IDNO.5)

MeRSZ21b_attB1_R：5'-CAAGAAAGCTGGGTCATCTCCATTAGCATAAGG-3'(SEQ ID NO.6)

(2)、PCR扩增产物经纯化后，经过BP反应插入到Invitrogen公司pDONR207载体中，得到构建好的BP反应载体，即pDONR207质粒；

所述BP反应，包括以下步骤：

(a)、在200μL离心管中准备5μL的反应体系，包括：3.5μL PCR扩增产物(浓度≥10ng/μL)、1μL pDONR-207载体(150ng/μL)、0.5μL BP Clonase^TM II酶混合物(Invitrogen公司)，在室温下混匀；

(b)、将反应体系放在25℃温浴4-8h；

(c)、向反应体系中加入1μL蛋白酶K溶液(Invitrogen公司)，轻轻震荡，然后将样品放在37℃温浴10min，终止BP反应；

(d)、将BP反应后的混合液转化大肠杆菌，取转化菌液涂在含壮观霉素SPC抗性的LB平板上，挑取菌落至含壮观霉素的LB培养基中摇菌培养，确认后提取阳性克隆的质粒备用。

(3)、将构建好的BP反应载体通过LR反应将MeRSZ21b基因片段置换到pGWB514载体中，即为插入有MeRSZ21b基因的重组表达载体。

所述LR反应，包括以下步骤：

(a)、在200μL离心管中准备8μL反应物，包括：3.5μL获得的pDONR207质粒(50-150ng)、1μLpGWB514(150ng/μl)和0.5μL的LR Clonase^TM II酶混合物(Invitrogen公司)，在室温下混匀；

(b)、将反应体系放在25℃温浴反应4-8h；

(c)、向反应体系中加入1μL的蛋白酶K溶液(Invitrogen公司)，轻轻震荡后，将样品放在37℃静置10min，终止LR反应；

(d)、将LR反应后的混合液转化大肠杆菌，取转化菌液涂在含壮观霉素的LB平板上，挑取菌落至含壮观霉素的LB培养基中摇菌培养，确认后提取阳性克隆的质粒备用。

实施例3农杆菌介导的拟南芥转化及转基因植株的鉴定

包括以下步骤：

(1)、冻融法转化农杆菌

将1μg(200ng/μL)MeRSZ21b:pGWB514(即实施例2构建得到的插入有MeRSZ21b基因的重组表达载体)加入到100μL感受态农杆菌GV3101中，混匀后在冰上静置5min，放入液氮中冷冻5min，然后从液氮中取出，放入37℃水浴锅中水浴5min，再在冰上静置5min后，加入500μL LB液体培养基，在28℃、充分震荡条件下恢复培养4h，最后将菌液均匀涂抹于含壮观霉素和利福平的LB培养基上，28℃下培养48h，挑取菌落进行菌落PCR鉴定，将阳性菌落接种至含壮观霉素和利福平的LB液体培养基中过夜摇菌培养；

(2)、将摇菌培养后的农杆菌菌液在5000rpm下离心，弃去上清后，用100ml 5％蔗糖和0.5％L-77混合溶液重悬沉淀，得到农杆菌转化溶液；

(3)、将拟南芥开花的花序浸入农杆菌转化溶液中，静置30sec，用黑色塑料袋包裹处理过的植株，避光24h，然后除去塑料袋，在正常条件下培养至成熟，收获种子。

(4)、提取野生型植株和8株转MeRSZ21b基因T0代植株的总RNA，进行Real time-PCR分析(引物为SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.8)，内参基因为Ubiquitin(引物为SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.10)，分析不同株系的表达情况。

MeRSZ21b qRT引物

MeRSZ21b_qRT_F：5'-GCGTTCGTTGAGTTTGATGA-3'(SEQ ID NO.7)；

MeRSZ21b_qRT_R：5'-AGAAAGTTCCACTCGCCATC-3'(SEQ ID NO.8)。

内参基因引物

Ubiquitin_F：5'-GCCTCCCAAGGTAGCTTTCA-3'(SEQ ID NO.9)；

Ubiquitin_R：5'-GGTTAATGCAGGGCTCCACT-3'(SEQ ID NO.10)。

(5)、选取表达量最高的两株OX-1及OX-2。单株收取种子分别播种，用潮霉素抗生素筛选Tl代植株的分离情况，如此重复直至T3代获得遗传稳定的转基因株系MeRSZ21b-OX-1和MeRSZ21b-OX-2。

实施例4转基因拟南芥抗渗透胁迫鉴定

将野生型拟南芥植株(Col-0)和2个转基因系MeRSZ21b-OX-1和MeRSZ21b-OX-2(MeRSZ21b基因过表达)拟南芥种子分别均匀点到浓度为300mM山梨糖醇的1/2MS培养基和1μM脱落酸的1/2MS培养基上，在23℃、60％相对湿度、LD光周期(16小时光照/8小时黑暗)的生长室中连续培养1至7天观察发芽率。第7天的发芽情况观察结果如图1所示，发芽率如图2所示。

从图1可以看出：种植7天后，MeRSZ21b基因过表达品系MeRSZ21b-OX-1和MeRSZ21b-OX-2和对照培养基上的野生型Col-0之间没有明显差异。

从图2可以看出：在300mM山梨糖醇处理下，MeRSZ21b基因过表达株系MeRSZ21b-OX-1和MeRSZ21b-OX-2的萌发率显著高于野生型Col-0，表明MeRSZ21b基因过表达提高了干旱胁迫下转基因植物的基础耐旱水平。相比之下，MeRSZ21b基因过表达株系在种子萌发过程中对ABA敏感，推测MeRSZ21b基因可能通过ABA依赖性机制参与干旱胁迫下种子萌发的调节。

实施例5转基因拟南芥抗旱表型鉴定

将野生型拟南芥植株和2个过表达转基因系MeRSZ21b-OX-1和MeRSZ21b-OX-2拟南芥种子的幼苗LD光周期(16小时光照/8小时黑暗)条件下生活2周，并通过停水承受干旱胁迫处理两周，再恢复供应水，分别于断水处理前(对照)、断水20d后(干旱28d)和恢复水3d后(Rewater)，观察过表达植株与野生型的性状、存活率。结果如图3和图4所示。结果表明：与仅18％的植物存活的野生型Col-0相比，两个过表达植株MeRSZ21b-OX-1和MeRSZ21b-OX-2中超过90％的植物存活。

叶绿素含量被认为是与干旱相关的重要生理特征。经过两周的干旱处理后，检测株系的叶绿素含量，结果如图5所示，过表达株系MeRSZ21b-OX-1和MeRSZ21b-OX-2叶片的叶绿素含量远高于野生型Col-0，表明MeRSZ21b基因过表达株系比野生型表现出更耐旱。

干旱胁迫会干扰活性氧(ROS)的稳态，从而导致ROS积累。为探讨MeRSZ21b基因提高耐旱性的机制，检测H₂O₂含量和超氧化物歧化酶(SOD)、POD(过氧化物酶同工酶)的活性。结果如图5～6所示。正常条件下MeRSZ21b基因过表达株系与野生型株系H₂O₂含量及SOD、POD活性无显著差异。在干旱条件下，MeRSZ21b基因过表达株系H₂O₂含量较少，SOD和POD活性显著高于野生型株系Col-0(图5和图6)，表明MeRSZ21b基因过表达可以通过氧化膜脂减轻膜完整性的损害。

实施例5的结果共同表明，MeRSZ21b基因通过减少超氧自由基和维持渗透压在干旱反应的调节中发挥积极作用。

综上所述，本发明所述MeRSZ21b基因在植物抗旱领域将有着广阔的应用前景。

以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。

以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

序列表

<110> 广东省科学院南繁种业研究所

<120> 木薯MeRSZ21b基因在提高植物抗干旱胁迫中的应用

<130> 1

<160> 10

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 576

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 1

atggctcggg tttacgtggg gaatttggat ccgagagtct cggagaggga tctcgaagat 60

gaattcagaa tgtatggtgt tcttagaagt gtgtgggttg cacgaaggcc gccaggatat 120

gcgttcgttg agtttgatga tcgcagggat gctatggatg caattcgtgc attggatgga 180

aagaatggat ggcgagtgga actttctcat aattccaaag gtggtggagg ccgtggaggt 240

ggtggtggtg ggcgtggacg gggtggtgag gacttgaaat gttatgaatg tggtgaacct 300

ggtcattttg ctagagagtg ccgcctgcgc attgggtcaa gaggtttggg aagtggtcgt 360

cgccgaagcc ccagtccacg acgccgtaga agtccaagtt atgggtatgg gcgcagtagg 420

agtccaagtt atgggtatgg gcgcaggagt tacagccctc gtggtagaag atctccaaga 480

cgtcgcagta tatcacctcg ccgaggtcgc agcatcagca gatcccctcc ataccgtcac 540

gcccgtcgtg attcacctta tgctaatgga gattga 576

<210> 2

<211> 191

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 2

Met Ala Arg Val Tyr Val Gly Asn Leu Asp Pro Arg Val Ser Glu Arg

1 5 10 15

Asp Leu Glu Asp Glu Phe Arg Met Tyr Gly Val Leu Arg Ser Val Trp

20 25 30

Val Ala Arg Arg Pro Pro Gly Tyr Ala Phe Val Glu Phe Asp Asp Arg

35 40 45

Arg Asp Ala Met Asp Ala Ile Arg Ala Leu Asp Gly Lys Asn Gly Trp

50 55 60

Arg Val Glu Leu Ser His Asn Ser Lys Gly Gly Gly Gly Arg Gly Gly

65 70 75 80

Gly Gly Gly Gly Arg Gly Arg Gly Gly Glu Asp Leu Lys Cys Tyr Glu

85 90 95

Cys Gly Glu Pro Gly His Phe Ala Arg Glu Cys Arg Leu Arg Ile Gly

100 105 110

Ser Arg Gly Leu Gly Ser Gly Arg Arg Arg Ser Pro Ser Pro Arg Arg

115 120 125

Arg Arg Ser Pro Ser Tyr Gly Tyr Gly Arg Ser Arg Ser Pro Ser Tyr

130 135 140

Gly Tyr Gly Arg Arg Ser Tyr Ser Pro Arg Gly Arg Arg Ser Pro Arg

145 150 155 160

Arg Arg Ser Ile Ser Pro Arg Arg Gly Arg Ser Ile Ser Arg Ser Pro

165 170 175

Pro Tyr Arg His Ala Arg Arg Asp Ser Pro Tyr Ala Asn Gly Asp

180 185 190

<210> 3

<211> 22

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 3

atggctcggg tttacgtggg ga 22

<210> 4

<211> 22

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 4

atctccatta gcataaggtg aa 22

<210> 5

<211> 34

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 5

caaaaaagca ggcttcatgg ctcgggttta cgtg 34

<210> 6

<211> 33

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 6

caagaaagct gggtcatctc cattagcata agg 33

<210> 7

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 7

gcgttcgttg agtttgatga 20

<210> 8

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 8

agaaagttcc actcgccatc 20

<210> 9

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 9

gcctcccaag gtagctttca 20

<210> 10

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 10

ggttaatgca gggctccact 20

Claims

1.木薯MeRSZ21b基因在提高植物抗干旱胁迫中的应用，所述木薯MeRSZ21b基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；或为与SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列完全互补配对的核苷酸序列；或为编码氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。

2.木薯MeRSZ21b基因编码的剪接因子在提高植物抗干旱胁迫中的应用，所述剪接因子的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

3.插入有木薯MeRSZ21b基因的重组表达载体，所述木薯MeRSZ21b基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；或为与SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列完全互补配对的核苷酸序列；或为编码氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。

4.插入有权利要求3所述重组表达载体的重组菌。

5.插入有权利要求3所述重组表达载体的转基因细胞系。

6.权利要求3所述重组表达载体、权利要求4所述重组菌、或权利要求5所述转基因细胞系在提高植物抗干旱胁迫中的应用。

7.权利要求3所述重组表达载体、权利要求4所述重组菌、或权利要求5所述转基因细胞系在改良植物抗干旱胁迫的遗传育种中的应用。

8.权利要求1、2、6或7任一项所述的应用，其特征在于，所述植物为单子叶植物或双子叶植物。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述植物为烟草、水稻、小麦、玉米、黄瓜、番茄、杨树、草坪草或苜宿。

10.一种提高植物抗干旱胁迫的方法，其特征在于，所述方法包括提高木薯MeRSZ21b基因的表达，所述木薯MeRSZ21b基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；或为与SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列完全互补配对的核苷酸序列；或为编码氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。